KR20050011323A

KR20050011323A - 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용약제 조성물

Info

Publication number: KR20050011323A
Application number: KR1020030050351A
Authority: KR
Inventors: 조선행; 이해방; 정상영; 강복기; 서광수; 강길선
Original assignee: 한국화학연구원
Priority date: 2003-07-22
Filing date: 2003-07-22
Publication date: 2005-01-29
Also published as: KR100524700B1

Abstract

본 발명은 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 소수성 및 결정성이 큰 난용성의 고지혈증치료제의 생체 이용률을 향상시키기 위하여 스타틴류의 고지혈증 치료제 활성성분에 소정의 계면활성제와 용해제, 공계면활성제 및 제제의 안정성을 향상시키기 위해 항산화제를 배합 처방하여 나노에멀젼농축액을 제조하여 약물을 인체에 투여하였을 때 소화액 또는 체액에 의해 나노에멀젼을 형성하여 약물의 생체흡수성을 크게 개선시키고 장기보관시 활성성분이 산화되어 산으로 되는 것을 방지하여 안정성을 개선시킨 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물에 관한 것이다.

Description

자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물{Pharmaceutical compositions for Hyperlipidemia treatment using of Self Emulsifying drug delivery system}

고지혈증 치료 약물인 심바스타틴은 진균류인 아스퍼질러스(Aspergillus) 진균의 대사산물로부터 추출하여 메칠기를 도입하여 합성한 것으로서 심바스타틴 락톤링이 간에서 산화되어 심바스타틴 산의 형태로 고지혈증 치료제로서의 활성을 갖게되어 콜레스테롤의 생합성을 억제할 뿐만 아니라 고지혈증 환자들에게 불필요한 저비중지단백질(LDL), 트리글리세라이드를 감소시키며 또한 몸에 필요한 고비중지단백질(HDL)을 증가시켜 동맥경화 및 고지혈증으로 야기되는 많은 합병증 치료에큰 효과를 나타내고 있다.

그러나, 상기와 같은 고지혈증 치료약물은 소수성이 매우 커서 물에 대한 용해도는 400 ng/ml에 지나지 않으며, 에탄올, 메탄올, 아세톤에 대한 용해도 역시 나쁘다. 또한 이 약물은 두통 및 근육통과 신장에 장애를 일으킬 수 있기 때문에 균일한 투여 용량 및 적정한 생체이용률을 제공하여야 한다.

현재 고지혈증 치료제로 시판중인 제제는 정제의 형태를 지닌 것으로서 혈중에서 반감기가 1.1 ∼ 1.7 시간이며 약물의 결정성이 크기 때문에 흡수율이 60 %이나, 실제 생체 이용률은 5 % 밖에 되지 않는 문제점이 있다.

이와 같이 종래의 고지혈증치료제인 심바스타틴은 약물이 갖는 결정성 및 난용성으로 인해 용해가 늦어 생체이용률이 낮은 문제점이 있었다.

이러한 단점을 보완하고자 심바스타틴을 마이크로에멀젼화하여 제형을 나노크기로 만들어 흡수율과 생체이용율을 증가시키고자 하는 기술이 개발되었고, 이와 관련된 종래기술로는 다음과 같은 것들이 있다.

미국특허 제4,592,859호에는 오일/물의 에멀젼 시스템의 안정성을 증진하기 위한 방법으로 양이온 또는 음이온 물질을 콜로이드 파티클로 제공하는 방법을 사용하고 있다. 또 미국특허 제5,965,160호에는 난용성 약물을 함유하는 자가미세유화 오일 조성물로서 오일성분으로 양이온성 지질, 오일, 지용성 지방산 알코올과 계면활성제로 구성되어진 시스템을 언급하고 있으나, 상기 오일 성분으로 중간 체인의 트리글리세라이드, 긴 체인 트리글리세라이드로서 탄소의 개수가 8 ∼ 12인 것을 사용한다. 그러나 이는 본 발명에서 사용하는 약물인 심바스타틴이 트리글리세라이드 성분을 제거하는 성분으로서 이들의 수치를 낮추어주는데 목적이 있는바 본 발명에서 사용할 수 있는 오일 성분으로 위배되며, 본 발명에서의 비이온성 계면활성제와 보조 비이온성의 계면활성를 사용하는 방법과 전혀 다르다. 미국특허 제5,753,264호에는 키토산 마이크로 캅셀과 오일/물의 에멀젼을 포함하는 시스템으로서 활성성분으로 비타민 E와 자외선 차단 물질을 사용하였고 있다. 하지만 이 제제의 목적은 오랜 기간 동안 또는 지속성 물질 전달용으로 사용하였다. 본 발명에서는 활성성분으로 심바스타틴을 지속성의 개념보다는 속효성의 약물 전달을 목적으로 한다. 미국특허 제5,744,155호에는 오일/물의 에멀젼을 이용하여 점막 부착성의 고분자 물질을 점막에 부착시키는 방법을 개시하고 있다. 하지만 본 발명에서는 점막 부착성을 목적으로하지 않고, 또한 고분자 물질을 사용하지 않는 점이 에멀젼을 사용하는 방법은 비슷하지만 전혀 다른 시스템이다. 미국특허 제5,993,858호에는 생체이용률을 높이기 위해 수난용성 약물과 계면활성제, 공계면활성제 및 용매를 포함하는 자가미세유화형 약물 조성물이 개시되어 있다. 하지만 온도에 의해 열가역적인 오일 또는 지질을 사용하므로 상온에서는 고체상으로 존재하여 인체내에서 오일 또는 지질이 붕해되어 약물이 흡수되는 시간이 일반 약물 파우더와 같은 시간에서 최고농도의 값을 가진다. 하지만 본 발명에서의 자가미세유화형 시스템은 액상으로서 인체 투여시 붕해되어 약물이 용해되어지는 시간이 매우 짧아서 일반적인 제형에 비해 빠른 최고혈중농도를 나타내며 생체이용률도 향상되는 효과면에서 전혀 다르다. 또한, 본 발명자들이 발명한 대한민국 특허공개 제02-42218호에서는 스타틴류 활성성분, 계면활성제, 용해제 및공계면활성제를 사용하여 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물을 개발한 바 있으나, 이 경우는 생체이용율에서 개선효과가 있었으나 안정성 면에서 아직도 개선의 여지가 있다.

따라서, 본 발명은 상기와 같은 문제점을 개선하기 위해, 고지혈증 치료제로 쓰이는 스타틴류 활성성분의 생체 흡수성 및 생체 효율성을 향상시키고자 약물을 가용화할 수 있는 특정 계면활성제와 흡수율 향상을 위한 용해제 및 공계면활성제를 사용하고 또한 제제의 안정성을 증가시키고자 항산화제을 효과적으로 배합한 나노에멀젼농축액을 제조하여 자가미세유화형 약물전달시스템의 개념을 이용해 인체에 약물을 전달함으로써 약물의 흡수율 향상을 통해 생체이용률을 크게 개선시킨 약제 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

도 1은 본 발명에 따른 실시예 1에 의해 제조된 심바스타틴 나노에멀젼농축액을 인공장액에 1/10로 희석하여 에멀젼의 크기 분포도를 동적 광산란법에 의해 측정한 그래프이다.

도 2는 본 발명에 따른 실시예 6에 의해 제조된 심바스타틴 나노에멀젼농축액을 인공장액에 1/10로 희석하여 에멀젼의 크기 분포도를 동적 광산란법에 의해 측정한 그래프이다.

도 3은 본 발명에 따른 실시예 1에 의해 제조된 연질캅셀제 10 mg, 20 mg과 대조제제로서 시판되는 심바스타틴 정제 20 mg을 비글견에 경구투여한 후 시간 경과에 따른 심바스타틴 산의 혈중 농도 변화를 나타낸 그래프이다.

도 4은 본 발명에 따른 실시예 1에 의해 제조된 연질캅셀제의 시간에 따른 심바스타틴의 함량 변화를 나타낸 그래프이다.

도 5는 본 발명에 따른 실시예 1에 따른 자가미세유화형 마이크로 에멀젼의 안정성 및 에멀젼이 형성되어지는 지역 및 입자의 크기의 분포를 확인하기 위하여나타낸 그래프이다.

본 발명은 스타틴류의 활성성분을 유효성분으로 함유하는 고지혈증치료용 약제조성물에 있어서, 스타틴류 활성성분 1 ∼ 20 중량%와 계면활성제 5 ∼ 60 중량%, 용해제 20 ∼ 60 중량%, 공계면활성제 10 ∼ 50 중량% 및 항산화제 1 ∼ 5 중량%로 구성된 나노에멀젼농축액을 포함하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물을 그 특징으로 한다.

이와 같은 본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 고지혈증치료제로 사용되고 있는 스타틴류 활성성분의 수난용성을 개선하기 위해 계면활성제와 용해제 및 공계면활성제를 첨가하여 나노에멀젼농축액을 구성하여 자가미세유화형 약물전달시스템을 구성함으로 인해 유효약물의 가용화와 생체이용률을 개선할 수 있도록 구성된 약제 조성물이다. 또한 제제의 안정성을 증가시키기 위해서 항산화제를 첨가하여 안정성을 증진하기 위한 약제 조성물이다.

본 발명에서 활성성분으로는 고지혈증치료용 유효약물인 스타틴류가 사용되며, 예컨대 로바스타틴(Lovastatin) 또는 심바스타틴(Simvastatin)이 바람직하게 사용될 수 있고, 이들의 함량은 나노에멀젼농축액을 구성하는 전체함량 중 1 ∼ 20 중량%가 바람직하다. 만일, 이들의 함량이 1 중량% 미만 사용할 경우 많은 양의 부형제로 인해 제제화가 불가능하며 투여용량이 증가하는 문제가 있으며, 20 중량%를 초과하면 약물의 용해가 어려우며, 입자의 크기가 증가되어 체내에서 흡수율이 감소되는 문제가 있다.

본 발명에서 유효약물의 생체 흡수성 및 생체 효율성을 향상시키기 위해 사용하는 약제학적으로 허용되는 계면활성제는 이온성을 띠면 자극성 및 독성이 크므로 비이온성 계면활성제를 주로 사용한다. 특히, 계면활성제는 난용성인 약물을 녹이는 용해제로도 사용될 수 있으며, 또한 위장관에서의 약물의 재결정을 막고, pH 및 온도에서도 안정하게 분산되어 안정한 에멀젼을 이루게하므로 자가미세유화형 약물전달시스템(Self Microemulsifying Drug Delivery System; SMEDDS)의 사용에 유용하다. 자가미세유화형 약물전달시스템에 이용되는 계면활성제는HLB(Hydrophilic Lipophilic Balance) 값이 7 이상의 수용해성이 있는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 HLB값이 10 ∼ 15 인 것이 바람직하다. 주로 사용되는 비이온성 계면활성제로는 예컨대 케스터 오일류, 치환된 케스터 오일류, 트윈류, 스판류, 라보라솔, 라보라필, 브리지(Brij) 중에서 선택된 것이 바람직하게 사용되며, 더욱 바람직하게는 폴리옥실 35 캐스터 오일이 사용될 수 있다. 폴리옥실 35 캐스터 오일은 HLB값이 약 14로 지용성 비타민 제제 제조에 사용되어질 수도 있고, 안정한 수중유화형 에멀젼을 이루는데 바람직하다. 또한, 폴리옥실 35 캐스터 오일은 소수성이 강한 폴리에틸렌글리콜 리시놀리에이트 83%와 친수성을 가진 폴리에틸렌글리콜의 지방산 부분 17%를 가지고 있어서 물에도 매우 잘 녹을 뿐만 아니라 기타 소수성을 강하게 띄는 클로로포름, 톨루엔, 크실렌 등과 같은 강한 유기용매와도 잘 섞이고, 기타 알콜 용매, 피마자유, 올리브오일 및 지방산, 지방산 알콜과 같은 천연 및 합성 오일에도 매우 우수한 용해도를 가지고 있다. 폴리옥실 35 캐스터 오일의 점도는 650 ∼ 800 mPas, 임계미셀농도는 0.009 %로 매우 작은 양이 들어가도 미셀을 형성할 수 있으며, 산성 및 전해질 용액에도 매우 안정하여 음료 및 화장품 제조에도 이용할 수 있으며, 특히 30 ∼ 50 %의 알콜과 함께 쓰여 향수 제조에 이용할 수도 있다. 또한, 폴리옥실 35 캐스터 오일은 계면활성제의 양에 매우 의존적이며 물에 녹지 않는 약물인 마이크로나졸(Micronazole), 헥세데틴(Hexedetine), 클로트리마졸(Clotrimazole), 벤조카인(Benzocaine) 등에도 이용할 수 있으며, 경구 투여제제로도 사용할 수 있다.

이러한, 계면활성제의 사용량은 나노에멀젼농축액을 구성하는 전체함량 중 5 ∼ 60 중량%가 바람직하다. 만일, 이들의 함량이 5 중량% 미만이면 인체에 약물이 흡수되어 안정한 에멀젼 형성이 되지 않는 문제점이 있고, 60 중량%를 초과하면 위장관의 장애를 일으킬 수 있으며, 형성된 나노에멀젼이 합일되어 침전을 일으키는 현상이 있을 수 있다.

그리고, 상기 유효약물의 흡수율을 향상시키기고, 투여용량을 줄이기 위해 사용되는 용해제로는 지방산에스테르, 식물성오일, 정제어유, 소수성이 강한 약제학적으로 허용 가능한 용해제 등을 사용할 수 있으며, 예컨대 다이에틸렌글리콜모노에틸이써, 지방산에스테르로는 프로필렌글리콜 모노카프릴레이트, 프로필렌글리콜 모노라우레이트 등의 프로필렌 글리콜 모노 또는 디 지방산 에스테르 유도체와 프로필렌글리콜 및 폴리글리세릴 디올레이트 등의 폴리글리세릴 디 지방산 에스테르류 중에서 선택된 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 다이에틸렌글리콜모노에틸이써가 사용될 수 있다. 이들의 사용량은 나노에멀젼농축액을 구성하는 전체함량 중 20 ∼ 60 중량%가 바람직하다. 만일, 이들의 함량이 20 중량% 미만이면 약물이 완전히 녹지 않는 문제점이 있고, 60 중량%를 초과하면 안정한 에멀젼 형성이 불안정한 문제가 발생한다.

본 발명에서 나노에멀젼농축액의 용해 및 안정성를 향상시키기 위해 사용되는 공계면활성제으로는 폴리에칠렌글리콜, 알피코트 케낼 오일, 디메틸이소소르비드, 디에틸렌글리콜모노에틸에테르(트랜스큐톨) 및 테트라글리콜 등의 다가 알코올이 치환된 것이 바람직하며, 이들의 함량은 나노에멀젼농축액을 구성하는 전체함량중 10 ∼ 50 중량%가 바람직하다. 만일, 이들의 함량이 10 중량% 미만이면 용해시키는데 문제가 있고, 50 중량%를 초과하면 나노에멀젼농축액을 수상에 희석하였을 때 결정이 석출되는 문제가 발생한다.

본 발명에서 제제의 안정성을 위해 사용하는 항산화제는 나노에멀젼농축액을 구성하는 전체함량 중 1 ∼ 5 중량% 함유하며, 만일 그 함량이 1 중량% 미만이면 항산화제의 효과를 나타낼 수 없는 문제가 있고, 5 중량%를 초과하면 제조되어진 마이크로 에멀젼의 형성시 입자가 커지는 문제가 있다. 항산화제는 자유 라디칼(Free radical)에 대한반응을 억제하며, 심장 질환이나 암 이나 기타 노화에 대한 여러 가지 반응을 억제한다. 이러한 항산화제 중에서 초산 토코페롤은 지용성 비타민으로 지방조직, 간 근육에는 다량으로, 혈소판, 부신, 뇌하수체, 고환, 난소 등에는 적은 양이 저장되며 주로 생체막 속에 존재한다. 생체막의 산화반응은 막의 내부(지질층)에서 발생한 유리기의 공격에 의해서도 일어난다. 본 발명에서는 상기 항산화제로는 초산 토코페롤을 사용할 수 있으며, 초산 토코페롤은 생체막 안에 있는 유일한 항산화제로서 생체막의 산화를 억제함으로써 폐암, 위암, 방광암 등의 암을 비롯한 여러 성인병 및 적혈구의 생존기간의 연장, 혈관벽의 강화와 혈소판 점착의 억제 신경근 질환에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 1일 권장량은 연령, 성별, 나라에 따라 다양하나 대체로 성인의 경우 1일 15IU,임신부 30IU로 규정하고 있다.

이와같이 본 발명은 스타틴류 활성성분이 산화되어 산으로 되는 것을 방지하기 위하여 항산화제인 초산 토코페롤을 사용하여 약물의 함량이 일정하게 할 수 있어 제제의 안정화를 얻는다.

또한, 본 발명에 따른 조성물의 나노에멀젼의 제조에 사용되는 계면활성제, 용해제, 공계면활성제, 항산화제의 중량비는 25 ∼ 35: 15 ∼ 25 : 25 ∼ 35: 1∼ 5 로 혼합하여 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명은 나노에멀젼농축액을 연질캅셀에 투입하여 인체에 투여시 위장관내에서 스스로 빠른 시간에 에멀젼화하여 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용하여 약물이 체내의 흡수를 수분 내에 일어나게하며 그리고 흡수력의 증진으로 생체이용률을 최대화하는 형태로 제형화 할 수 있다. 즉, 본 발명은 상기 약제 조성물을 유효성분으로 함유하고 통상의 부형제를 포함하는 연질캅셀제를 포함한다.

본 발명에 따른 약제 조성물을 경피흡수제제, 또는 고형화된 에멀젼의 형태로 제형화 할 수 있다.

그리고, 본 발명에 따른 약제 조성물은 통상의 당업자라면 용이하게 선택 취합할 수 있는 레시틴, 점도 조절제, 방향제, 방부제, 색소, 글리세린, 솔비톨, 젤라틴 등의 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 추가적으로 함유시킬 수 있다.

상기 본 발명에 따른 조성물의 유효투입량은 환자의 나이, 신체적 조건, 몸무게 등에 의해 다양화될 수 있지만, 일반적으로 1 내지 100 ㎎/㎏(몸무게)/1일 범위 내에서 투여된다. 그리고, 1일 유효투입량 범위 내에서 하루에 한번 또는 하루에 여러 번 나누어 투입한다.

이와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 유효성분으로서 스타틴류 활성성분을 사용하고, 여기에 약물의 생체 흡수성 및 생체 효율성을 향상시키기 위해 계면활성제, 약물의 흡수율을 향상시키기 위해 용해제 및 공계면활성제와 약물의 안정성을 증진하고자 항산화제를 첨가하여 나노에멀젼농축액을 제조하여 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용하여 약물이 인체에 흡수되게 하는 고지혈증치료용 약제조성물을 얻을 수가 있게 되는 것이다.

이하, 본 발명을 다음의 실시예에 의거하여 더욱 상세하게 설명하겠는바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1 ∼ 4

다음 표 1에 나타낸 바와 같은 조성과 하기의 방법으로 연질캅셀제를 제조하였다. 심바스타틴을 약 40 ℃의 온도로 가온하면서 다이에틸렌글리콜모노에틸이써와 알피코트 케낼 오일에 용해시킨 후, 상온에서 냉각시켜 항산화제와 계면활성제 폴리옥실 35 캐스터 오일(크레모포어EL)을 첨가하고 균일하게 혼합시킨 다음 생성된 나노에멀젼액농축액을 그대로 연질캅셀제 제조기에 부어 통상의 방식으로 제조하였다.

실시예 5 ∼ 10

다음 표 1에 나타낸 바와 같은 조성과 하기의 방법으로 연질캅셀제를 제조하였다. 심바스타틴을 약 40 ℃의 온도로 가온하면서 다이에틸렌글리콜모노에틸이써와 각각 트랜스큐톨, 폴리에틸렌글리콜, 디메틸이소소르비드 공계면활성제로 사용하여 용해시킨 후, 상온에서 냉각시켜 계면활성제 크레모포어EL과 항산화제인 초산토코페롤를 첨가하고 균일하게 혼합시킨 다음 생성된 나노에멀젼액농축액에 연질캅셀제의 제조에 통상적으로 이용되는 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 첨가하여 연질캅셀제 제조기에 부어 통상의 방식으로 제조하였다.

구 분	구성성분(중량%)
	약 물	계면활성제	용해제	공계면활성제	항산화제
	심바스타틴	크레모포어EL	다이에틸렌글리콜모노에틸이써	트랜스큐톨	알피코트케낼오일	디메틸이소소르비드	폴리에틸렌글리콜	초산토코페롤
실시예	1	5.8	34.8	23.1	-	34.8	-	-	1.5
	2	5.8	34.8	23.1	-	33.3	-	-	3
	3	5.8	34.8	23.1	-	31.3	-	-	5
	4	5.8	31.8	23.1	-	34.3	-	-	5
	5	5.8	34.8	23.1	34.8	-	-	-	1.5
	6	5.8	34.8	23.1	33.3	-	-	-	3
	7	5.8	34.8	23.1	-	-	-	34.8	1.5
	8	5.8	34.8	23.1	-	-	-	33.3	3
	9	5.8	34.8	23.1	-	-	34.8	-	1.5
	10	5.8	34.8	23.1	-	-	33.3	-	3

시험예 1

상기 실시예 1 ∼ 10이 수상과 만날 때 형성하는 에멀젼의 크기를 관찰하여 그 결과를 표 2에 나타내었다. 유적의 균일성과 크기 분포는 ELS-8000(오츠카 전자) 기기로 동적 광산란법을 사용하여 레이저 세기에 따른 평균 크기와 분포를 측정하였다. 일반적으로 에멀젼의 크기가 작을수록 안정하며 약물의 흡수가 향상되는 바, 본 발명에 따른 약제 조성물은 표 2의 결과에서 보듯이 마이크로이하의작은 에멀젼을 형성함을 알 수 있었다.

구 분	평균 크기와 분포(nm)
구 분	증류수에 1/10로 희석	인공위액에 1/10로 희석	인공장액에 1/10로 희석
실시예	1	24.1(22.8∼30)	25.9(25.6∼26.9)	25.4(27.8∼29.3)
	2	40.1(39∼41.3)	65.9(63.4∼68.4)	93.4(89.2∼97.6)
	3	100.8(100.1∼105.5)	100.4(100.1∼100.9)	101.8(100.5∼102.5)
	4	150.2(149∼155)	138(131∼146)	190(178∼202)
	5	75.3(72.2∼78.3)	80.3(79.9∼45.7)	51.1(49.8∼52.8)
	6	58.8(40.2∼80.4)	60.8(55.1∼65.4)	68.7(60.1∼85.4)
	7	173(34∼300)	133(50∼250)	206(192∼220)

또한, 상기 시험예 1에 의해 동적 광산란법으로 측정한 것 중에서 실시예 1과 실시예 6에 의해 제조된 나노에멀젼농축액을 인공장액에 1/10로 희석한 것을 각각 도 1과 2에 나타내었다. 도 1과 2를 살펴보면 상기와 같이 에멀젼의 크기가 작으므로 안정하며 약물의 흡수가 향상됨을 또한 알 수 있었다.

시험예 2

상기 실시예 1에 의해 제조된 연질캅셀제와 대조제제(조코 정, 한국엠에스디)인 심바스타틴 정제를 비교하여 비글견에서의 약물 흡수율을 조사하였다.

시험 동물로 체중 10.20 ∼ 12.20 ㎏(10.99 ±0.87 ㎏)의 건강한 성숙 비글견(수컷)을 사용하였으며, 시험전 약 2주일 동안 각각의 우리 안에서 기초 사육하였다. 기본적인 신체검사, 혈액 및 혈청검사, 복부 방사선검사, 복부 초음파검사를 통해 임상적으로 건강하다는 것을 확인한 후, 약제를 투여하기 24시간 전에 절식시켰다. 비글견을 2두씩 그룹으로 나누어 실시예 1에 따른 연질캅셀제와 대조제제인 심바스타틴 정제를 투여하였고, 충분한 휴약기간(3주일간)을 거쳐 교차시험(cross over test)을 실시하였다.

시험방법은 우선 비글견에 실시예 1에 따른 연질캅셀제 10 mg，실시예 1에 따른 연질캅셀제 20 mg과 대조제제인 심바스타틴 정제 20 mg을 투여하였고, 투여 후 0분, 20분, 40분, 1시간, 1시간 20분, 1시간 40분, 2시간, 2시간 20분, 3시간, 4시간, 6시간, 8시간, 10시간에 목 정맥혈관에서 헤파린 처리한 1회용 주사기로 5 ml씩 혈액을 채취하였다. 혈장 1.0 ml에 내부표준 물질 표준용액 100 ㎕를 가한 후 흔들어 섞고 C18 고상추출 컬럼(Sep-pak, waters)에 메탄올과 물을 차례로 흘렸다. 다음 상기 혈장 시료를 컬럼에 충진하고 진공을 건 후 물 3 ml를 2회 흘려 세척한 후 메탄올 0.5 ml을 2회 흘리고 용출액을 모았다. 35 ℃ 질소 기류 하에서 용출액의 용매를 증발시켜 건조하였다.

잔류물에 아세토니트릴:물 40:60 혼합액 0.2 ml을 넣어 1분 동안 완전히 녹인 후 HPLC로 분석하였다(HPLC: 칼럼 플루오픽스, 이동상(ACN: 완충액=55:45), 검출 238 nm, 칼럼온도 50 ℃, 주입용량 100 ㎕).

실시예 1의 연질캅셀제와 대조제제를 투여한 후 시간 경과에 따른 심바스타틴 산(lovastatin acid)의 혈중농도에 관한 결과를 도 3에 나타내었다.

도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 나노에멀젼농축액의 연질 캅셀제는 10 mg 투여했음에도 불구하고 대조제제인 정제 20 mg보다 생체이용률이 높았으며, 대조제제와 같이 20 mg 투여시 생체이용률이 월등이 높음을 확인할 수 있었다.

또한, 실시예 1의 연질캅셀제와 대조제제를 투여한 후 시간 경과에 따른 약물 흡수 결과를 표 3에 나타내었다.

측정항목	대조제제	실시예 1의 제형(자가미세유화형10 mg)	실시예 1의 제형(자가미세유화형20 mg)
¹⁾AUC_0→10hr(ng·hr/㎖)	91.57±17.13	105.30±22.59	173.06±40.32
²⁾C_max(ng/㎖)	18.18±1.61	20.07±3.03	35.35±3.03
³⁾T_max(hr)	3±1.36	1.4±0.09	1.4±0.09
생체이용률 (%)		115%	189%
1)은 혈중농도-시간 곡선하 면적을 나타낸 것이다.2)는 최고 혈중농도를 나타낸 것이다.3)은 최고 혈중농도 도달시간을 나타낸 것이다.

표 3을 살펴보면, 본 발명에 따른 나노에멀젼농축액의 연질 캅셀제가 대조제제보다 생체이용률이 월등히 높음을 알 수 있다.

시험예 1과 2에서 알 수 있듯이 본 발명에 따른 나노에멀젼농축액은 수상과 접했을 때 형성하는 에멀젼의 크기가 작아 안정하며 약물의 흡수가 빠르므로, 생체이용률 또한 높음을 알 수 있었다. 따라서 실시예 1과 유사한 에멀젼크기를 갖는 실시예 2 ∼ 10 역시 투여되어질 때 약물의 생체흡수율 향상을 기대할 수 있다.

시험예 3

제제의 안정성을 확인하기 위하여 상기 실시예 1에 의해 제조되어진 연질 캅셀제 자가미세유화형 약물을 40 ℃, 75% 상대습도의 가속조건에서 두 달 동안 침전의 생성, 혼탁도의 변화, 색의 변화, 상분리 등과 같은 눈으로 보이는 변화를 관찰하였으나, 변화없이 투명한 옅은 노란 빛을 띄는 안정한 상을 유지함을 확인하였다. 또한, 실험 당시 샘플을 하나씩 취하여 아세토니트릴에 녹여 HPLC로 얻은 면적 비를 비교하여 시간에 따른 심바스타틴의 함량변화를 확인하였으며, 그 결과를 도 4에 나타내었다.

도 4에 나타난 바와 같이, 처음 측정 당시 심바스타틴의 함량은 105%이었으며 150일 경과 된 후의 함량은 101.8%을 유지하는 것을 볼 수 있다. 심바스타틴의 분해율을 계산하면 미국 약전 기준의 미달함량인 90%까지는 16개월로 평가되어진다. 이로 볼 때 설계된 약물은 매우 안정성이 우수한 것으로 판단하였다. 두 달 후에 미소한 약물 함량의 감소가 있을 뿐 많은 양의 변화가 없었으므로 설계한 약물의 제형은 약물을 안정하게 유지하는 것을 확인할 수 있었으며 실제로 형성된 에멀젼 역시 처음 형성된 상태에서 18개월 이상 지속되는 것을 육안으로 확인하였다.

시험예 4

자가미세유화형 마이크로 에멀젼의 안정성, 에멀젼 지역의 분포 및 입자의 크기의 분포를 확인하기 위하여 제조되어진 심바스타틴과 용해제, 계면활성제 그리고 공계면활성제에 물을 적가하면서 혼합한다. 혼합된 마이크로 에멀젼 용액이투명해지는 지점까지 물을 적가하여, 그 점을 플로트한 후 혼합액이 투명해지는 지점을 연결하여 마이크로 에멀젼이 형성되는 지역을 도 5에 나타내었다. 도 5에서 보이는 파란색의 에멀젼 지역에서 약물의 안정한 양상을 보이는 것을 확인 할 수 있었고 입자의 사이즈 또한 작은 것을 확인할 수 있었다.

도 5에 나타난 바와 같이, 마이크로 에멀젼의 안정한 영역을 확인할 수 있었다.

상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 고지혈증치료용 약제 조성물은 스타틴류의 고지혈증 치료제 활성성분에 소정의 계면활성제와 용해제 및 공계면활성제와 항산화제를 배합 처방하여 나노에멀젼농축액을 제조하여 자가미세유화형 약물전달시스템의 개념을 이용해 인체에 약물을 전달함으로써, 종래에 비해 난용성 약물의 가용화 및 생체이용률이 향상되어 약물의 투여용량 감소로 인한 비용 절감과 동시에 제제의 안정성을 향상시키는 효과가 있다.

Claims

스타틴류의 활성성분을 유효성분으로 함유하는 고지혈증치료용 약제조성물에 있어서, 스타틴류 활성성분 1 ∼ 20 중량%와 계면활성제 5 ∼ 60 중량%, 용해제 20 ∼ 60 중량%, 공계면활성제 10 ∼ 50 중량% 및 항산화제 1 ∼ 5 중량%로 구성된 나노에멀젼농축액을 포함하는 것을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 스타틴류의 활성성분은 로바스타틴 또는 심바스타틴을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 계면활성제는 케스터 오일류, 치환된 캐스터 오일류, 트윈류, 스판류, 라보라솔, 라보라필 및 브리지로 구성되는 비이온성 계면활성제 중에서 선택된 것임을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 용해제는 다이에틸렌글리콜모노에틸이써, 프로필렌글리콜 모노라우레이트, 폴리글리세릴 디올레이트 중에서 선택된 지방산에스테르; 코코넛오일, 올리브유, 옥수수유, 케스터 오일, 마카도미아 너트오일, 살구유, 코코넛오일 및 불포화지방산을 함유하는 오일 중에서 선택된 식물성오일; 정제어유; 소수성이 강한 약제학적으로 허용 가능한 용해제 중에서 선택된 것임을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 공계면활성제는 폴리에틸렌글리콜, 알피코트 케낼 오일, 디메틸이소소르비드, 디에틸렌글리콜모노에틸에테르 및 테트라글리콜 중에서 선택된 것임을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 약제 조성물에는 계면활성제 : 용해제 : 공계면활성제: 항산화제의 중량비가 25 ∼ 35 : 15 ∼ 25 : 25 ∼ 35 : 1 ∼ 5로 혼합된 것임을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 약제 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제가 추가적으로 함유되어 있는 것임을 특징으로 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 7 항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 레시틴, 점도 조절제, 방향제, 방부제, 색소, 글리세린, 솔비톨 및 젤라틴 중에선 선택된 1 종 이상의 것임을 특징으로 하는 자가미세유화형 약물전달시스템을 이용한 고지혈증치료용 약제 조성물.
제 1 항에 따른 상기 고지혈증치료용 약제 조성물을 유효성분으로 함유하고 통상의 부형제를 포함하는 연질캅셀제.