KR20040077648A - Lipase inhibitor and functional food preventing from an obesity containing the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 리파아제 억제제 및 이를 함유하는 비만 방지용 기능성 식품에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 지질의 분해를 억제하는 리파아제 억제제 및 상기 리파아제 억제제를 함유함으로써, 지방의 체내 흡수를 저해하여 비만의 예방, 치료용으로 이용될 수 있는 비만 방지용 기능성 식품에 관한 것이다.The present invention relates to a lipase inhibitor and an anti-obesity functional food containing the same, and more particularly, by containing a lipase inhibitor that inhibits degradation of lipids and the lipase inhibitor, thereby inhibiting absorption of fat into the body to prevent and treat obesity. It relates to a functional food for preventing obesity that can be used as.
지방은 에너지 밀도가 높고, 체내에 쉽게 축적되어 비만의 주된 원인이 된다. 지방은 주로 피하조직에 축적되며, 심장의 주위에 축적되어 심장기능에 장해를 주기도 한다. 과다한 체지방으로 특징되는 상태인 비만은 당뇨병, 동맥경화증, 심장병, 고혈압증, 간장병, 담석증, 통풍, 신장병, 유방암과 같은 질병의 위험 인자로 알려져 있다. 이와 같이, 비만은 생명과 직결되는 건강상의 문제일 뿐만 아니라, 특히 여성의 경우 미용상으로도 중요한 문제로서 매년 체중감소를 위해 지출되는 비용이 사회적으로 문제가 되고 있는 실정이다.Fats are high in energy density and easily accumulated in the body, which is a major cause of obesity. Fat accumulates mainly in the subcutaneous tissue, and it can accumulate around the heart and interfere with heart function. Obesity, a condition characterized by excess body fat, is known as a risk factor for diseases such as diabetes, arteriosclerosis, heart disease, hypertension, liver disease, gallstones, gout, kidney disease, and breast cancer. As described above, obesity is not only a health problem directly related to life, but especially for women, the cost of losing weight every year is a social problem.
비만을 억제하기 위해서는 음식물의 섭취를 줄이고, 에너지 소비를 늘리며,지방의 체내 축적을 억제하는 것이 필요하다. 억제된 식이요법이 체중감량을 유도할 수 있다는 것은 잘 알려져 있지만, 화학적 식욕 감퇴제의 섭취를 동반하지 않는 한 음식 섭취욕구를 효과적으로 감소시키지 못하므로, 많은 경우에 장기적인 체중감소를 촉진하지는 못한다. 따라서, 음식물 섭취의 감소보다는 에너지 소모를 증가시키는 것이 비만증 억제에 효과적이다. 그러나, 지속적으로 운동을 하기 어려운 현대 사회의 특성으로 인해, 비만 억제를 위한 주된 노력은 비만 억제 효과를 갖는 약물과 보조식품의 섭취에 초점이 맞춰져 있는 실정이다.To control obesity, it is necessary to reduce food intake, increase energy consumption, and suppress fat accumulation in the body. While it is well known that suppressed diets can induce weight loss, they do not effectively reduce food intake unless accompanied by the intake of chemical appetite reducers, and in many cases do not promote long term weight loss. Therefore, increasing energy consumption rather than reducing food intake is effective in suppressing obesity. However, due to the characteristics of modern society, which is difficult to continuously exercise, the main efforts for suppressing obesity are focused on the intake of drugs and supplements having an anti-obesity effect.
비만 치료제로 사용되는 약물에는, 노르아드레날린 수용체, 세로토닌 수용체, 도파민 수용체, 히스타민 수용체 등의 중추 신경계에 작용하는 약물들이 있다. 이러한 약물들은 식욕 억제를 유발함으로써 약효를 나타내나, 두통, 불면 등의 부작용을 동반한다. 그래서, 실제로 서구에서는 지방의 소화를 억제하는 비만치료제들이 개발되어 있으며, 주로 췌장 리파아제를 저해하는 약물들이 주종을 이루고 있다(Tsuji M.et al.,Nippon Yakurigaku Zasshi, 118(5):340-346(2001)).Drugs used as therapeutic agents for obesity include drugs that act on the central nervous system such as noradrenaline receptors, serotonin receptors, dopamine receptors, histamine receptors and the like. These drugs are effective by inducing appetite suppression, but are accompanied by side effects such as headache and insomnia. Thus, in the West, anti-obesity drugs have been developed to suppress the digestion of fats, and pancreatic lipase-inhibiting drugs are mainly used (Tsuji M.et al.,Nippon Yakurigaku Zasshi, 118 (5): 340-346 (2001).
리파아제는 인체의 췌장에서 분비되는 효소로서 지방의 소화에 관여한다. 즉, 중성지방을 분해하여 흡수되기 쉬운 모노글리세라이드와 유리지방산으로 전환시키는 것에 관여하는데, 이를 저해할 경우 혈중 중성지방농도 상승억제 효과가 있는 것으로 알려져 있다.Lipase is an enzyme secreted by the pancreas of the human body and is involved in the digestion of fat. In other words, it is involved in converting triglycerides into monoglycerides and free fatty acids which are easily absorbed, and inhibiting them is known to have an effect of inhibiting the concentration of triglycerides in the blood.
올리스타트(상품명:제니칼)와 같은 췌장 리파아제를 저해하는 약물은 음식물 중 지방의 흡수를 저해하는 약물이다. 이러한 약물은 위장관 내에만 머물다가 배설되고, 체내로 흡수가 전혀 안되며, 투여량의 97%가 대변으로 배설되므로, 중추신경계 약물과 같은 부작용이 나타나지 않는다. 또한, 비만으로 인한 당뇨, 고혈압, 콜레스테롤의 침착까지 예방할 수 있고, 혈중 중성지방의 농도도 감소시킨다. 뿐만 아니라, 식이 억제 요법에서 나타나는 체중 감소 이후, 투약 중지시 나타나는 체중 재증가 현상(요요현상)이 나타나지 않는다. 그러나, 비타민의 흡수를 방해하거나, 배변 장애와 같은 부작용이 역시 문제가 되고 있다.Drugs that inhibit pancreatic lipases, such as orlistat (Generic), are drugs that inhibit the absorption of fat in food. These drugs remain only in the gastrointestinal tract and are excreted, are not absorbed into the body at all, and 97% of the dose is excreted in the stool, so there are no side effects like central nervous system drugs. In addition, it can prevent diabetes, hypertension and cholesterol deposition due to obesity, and also reduces the concentration of triglycerides in the blood. In addition, after weight loss in dietary suppression regimens, there is no weight re-expansion (yo-yo) phenomenon that appears when discontinuation. However, side effects such as disturbing the absorption of vitamins or bowel movements are also a problem.
식물소재로부터 비만억제 활성이 보고된 예로서는 해조류에 함유된 알긴산(최진호 등, 한국수산학회지, 19:303-311(1986)), 오갈피추출물(손규목 등, 한국식품영양과학회지, 21:9(1992)), 도라지추출물(Han L. K.et al ., J. Nutr ., 130:2760-4(2000)) 등이 있다.Examples of reported obesity-inhibiting activity from plant materials include alginic acid in seaweeds (Jin, Jin-ho et al., Journal of the Korean Fisheries Society, 19: 303-311 (1986)), and extracts of ogal skin (Son Kyu-mok, et al., Korean Journal of Food and Nutrition Science, 21: 9 (1992). ) ,, Bellflower Extract (Han LK)et al ., J. Nutr ., 130: 2760-4 (2000)).
그러나, 부작용을 나타내지 않으면서, 비만 방지 효과를 나타낼 수 있는 신규 식물 소재 및 물질에 대한 개발이 계속해서 요구되어 왔다.However, there has been a continuing need for development of new plant materials and materials that can exhibit an anti-obesity effect without exhibiting side effects.
한편, 마과 식물은 다년생 초본으로 덩굴성이며, 전분이 풍부한 저장근을 가지고 있다. 가는 줄기에 잎은 호생 또는 대생으로 붙어 있으며, 대개 심장형 또는 장상(掌狀)으로 분열하고, 망상맥을 가지고 있다. 꽃은 이삭 모양이고, 과실은 삭과 또는 장과이다. 약효성분으로는 사포닌(saponin)을 많이 함유하고 있으며, 스테로이드 사포닌(steroid saponin)으로 디오신(dioscin), 디오스제닌(diosgenin) 등을 함유한다. 우리나라에는 12종이 자라는 것으로 알려져 있다(약품식물학연구회,신약품식물학, 학창사, 228-229(1991)).On the other hand, the perennial plant is a perennial herb, vine-like, and has starch-rich storage roots. The leaves are attached to the stems as a symbiosis or symbiosis, usually divided into heart-shaped or intestine, and have reticular veins. The flowers are ear-shaped, and the fruits are grains or berries. The active ingredient contains a lot of saponin (saponin), steroid saponin (steroid saponin) contains diosin (dioscin), diosgenin (diosgenin) and the like. It is known that 12 species grow in Korea (Korea Society of Pharmaceutical Botanicals, New Drug Botany, Hakchangsa, 228-229 (1991)).
마과 식물인 마와 부채마의 약효는 "동의보감"에 '허로와 신을 보하고 오장을 튼튼히 하여 기력을 돋우고 근육과 뼈를 강하게 하며, 위장을 잘 다스려 설사를 멎게 하고 정신을 편안하게 한다'고 기재되어 있으며, 일반적으로 보양약으로서 피로권태감, 만성기침, 식욕부진 등에 사용된다.The medicinal effect of the plant, Ma and Pan-ma, is written in "Agreement Gagam", saying, "Har and gods are strengthened, and the five intestines are strengthened to strengthen energy, strengthen muscles and bones, and control the stomach to relieve diarrhea and relax the mind." It is generally used as a rejuvenating medicine and used for fatigue fatigue, chronic cough, and loss of appetite.
본 발명자들은 제니칼과 같이, 지방의 소화를 억제하는 물질을 찾아 리파아제 억제 정도를 평가하여 연구한 결과, 마과 식물에 함유되어 있는 디오신이 그 효과가 뛰어난 것을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.The present inventors completed the present invention by finding that the dioxins contained in the apple plants are excellent in the results, as a result of searching for a substance that inhibits the digestion of fats and evaluating the degree of lipase inhibition, like Zenical.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 지질 대사를 조절함으로써, 혈중 중성 지방 농도의 상승을 조절할 수 있는 리파아제 억제제를 제공하는 것이다.The present invention has been made in view of the above demands, and an object of the present invention is to provide a lipase inhibitor capable of controlling the rise of triglyceride concentration in the blood by regulating lipid metabolism.
본 발명의 다른 목적은 상기 리파아제 억제제를 포함하는 것을 특징으로 하는 비만 방지용 기능성 식품을 제공하는 것이다.Another object of the present invention to provide a functional food for preventing obesity, characterized in that it comprises the lipase inhibitor.
도 1은 농도에 따른 디오신 투여후, 마우스에서 시간에 따른 혈장 지질 농도(㎎/㎗)의 변화를 나타낸 그래프이다.1 is a graph showing the change in plasma lipid concentration (mg / d) with time in mice after administration of diosin according to the concentration.
◆ : 대조군 ■ : 디오신 (50㎎/㎏)◆: Control ■: Diosin (50mg / ㎏)
▲ : 디오신 (100㎎/㎏) ● : 제니칼 (5㎎/㎏)▲: Diosin (100mg / kg) ●: Zenical (5mg / kg)
도 2는 농도에 따른 디오스제닌 투여후, 마우스에서 시간에 따른 혈장 지질 농도(㎎/㎗)의 변화를 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the change in plasma lipid concentration (mg / d) over time in mice after administration of diosgenin according to the concentration.
◆ : 대조군 ■ : 디오스제닌 (50㎎/㎏)◆: Control ■: Diosgenin (50mg / kg)
▲ : 디오스제닌 (100㎎/㎏) ● : 제니칼 (5㎎/㎏)▲: Diosgenin (100mg / kg) ●: Zenical (5mg / kg)
도 3은 디오신이 함유된 부채마 분말 2중량%와 5중량%를 함유한 식이에 대해 마우스의 기간별 섭취량(g)을 주 단위로 측정한 것이다.Figure 3 is a weekly intake (g) of the mice's intake (g) for the diet containing 2% by weight and 5% by weight of diocin-containing fan fan powder.
◆ : 대조군 ■ : 부채마 2중량%◆: Control ■: Fan Hemp 2% by weight
▲ : 부채마 5중량%▲: 5% by weight fan
도 4는 디오신이 함유된 부채마 분말을 마우스에 투여한 후, 주 단위로 마우스의 체중증가율(%)을 측정한 것이다.Figure 4 shows the weight increase rate (%) of the mice on a weekly basis after administering the fan-containing powder containing diocin to the mouse.
◆ : 대조군 ■ : 부채마 2중량%◆: Control ■: Fan Hemp 2% by weight
▲ : 부채마 5중량%▲: 5% by weight fan
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 디오신 또는 그의 유도체를 유효 성분으로 함유하는 리파아제 억제제를 제공한다. 또한, 본 발명은 부채마 추출물을 유효 성분으로 함유하는 리파아제 억제제를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a lipase inhibitor containing diocin or a derivative thereof as an active ingredient. The present invention also provides a lipase inhibitor containing fanza extract as an active ingredient.
본 발명에 따른 리파아제 억제제에 있어서, 상기 디오신 또는 그의 유도체는 마과 식물에서 추출된 것을 이용하는 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 부채마에서 추출된 것을 이용하는 것이 바람직하다.In the lipase inhibitor according to the present invention, it is preferable to use the dioxins or derivatives thereof, which are extracted from an asteraceae, and more preferably, those extracted from fan horses.
본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 상기 리파아제 억제제를 포함하는 비만 방지용 기능성 식품을 제공한다.In order to achieve another object of the present invention, the present invention provides a functional food for preventing obesity comprising the lipase inhibitor.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 디오신 또는 이의 유도체를 유효성분으로 함유하는 리파아제 억제제를 제공하는 것을 특징으로 한다.The present invention is characterized by providing a lipase inhibitor containing a dioxin represented by the following formula (1) or a derivative thereof as an active ingredient.
구체적으로, 상기 디오신은 마(Dioscrea Batatas), 참마(Dioscrea Japonica), 둥근마(Dioscrea Bulbifera), 부채마(Dioscrea Nipponica), 큰마(Dioscrea Tokoro), 각시마(Dioscrea Tenuipes), 국화마(Dioscrea Septembloba),단풍마(Dioscrea Quinqueoloba) 등과 같은 마과 식물에서 추출되는 것이 바람직하고, 마 또는 부채마에서 추출되는 것이 보다 바람직하다.Specifically, the diosin is hemp (Dioscrea Batatas), yam (Dioscrea Japonica), round horse (Dioscrea Bulbifera), fan fan (Dioscrea Nipponica), big horse (Dioscrea Tokoro), kelp (Dioscrea Tenuipes), chrysanthemum (Dioscrea Septembloba) ), It is preferably extracted from an aster, such as Dioscrea Quinqueoloba, more preferably from a hemp or fan.
상기 디오신 뿐만 아니라, 하기 화학식 2로 표시되는 디오신의 기본 골격에서,In addition to the diosin, in the basic skeleton of the diosin represented by the following formula (2),
R이 H인 디오스제닌(diosgenin),Diosgenin, wherein R is H,
인 그라실린(gracillin), Gracillin,
인 프로사포제닌 A(prosapogenin A) 및 Phosphorus prosapogenin A and
인 프로사포제닌 C(prosapogenin C) 등과 같은 디오신의 유도체도 사용될 수 있으며, 이러한 유도체들은 디오신을 가수분해하여 얻거나, 또는 마과 식물로부터 직접 추출하여 분리할 수 있다. Derivatives of diosin, such as phosphorus prosapogenin C, may also be used, and these derivatives may be obtained by hydrolysis of diosin or may be extracted directly from an asteraceae and isolated.
또한, 본 발명은 부채마 추출물을 유효성분으로 함유하는 리파아제 억제제를 제공하는 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is characterized by providing a lipase inhibitor containing a fan fan extract as an active ingredient.
본 발명의 일실시예에서는 디오신 또는 그의 유도체를 얻기 위하여, 부채마로부터 디오신을 추출하였다. 추출방법은 마과 식물의 껍질, 뿌리, 줄기, 잎으로부터 당업계에 공지된 통상적인 방법을 이용하여, 물 또는 유기용매로 추출할 수 있으며, 구체적으로 본 발명에서는 부채마로부터 메탄올을 사용하여 추출하였다. 이렇게 얻어진 추출물을 여과한 후, 감압, 농축하고, 크로마토그래피를 실시하여 물질을 분리하고, 재결정하여 디오신 또는 그의 유도체를 얻는다. 구체적으로 본 발명에서는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 이용하였으며, 재결정 용매로는 메탄올을 사용하였다.In one embodiment of the present invention, to obtain diocin or its derivatives, diocin was extracted from the fan. Extraction method can be extracted with water or an organic solvent from the skin, root, stem, leaf of the plant, using a conventional method known in the art, specifically in the present invention extracted with methanol from fan . The extract thus obtained is filtered, concentrated under reduced pressure, chromatographed, the substance is separated and recrystallized to obtain diosine or a derivative thereof. Specifically, silica gel column chromatography was used, and methanol was used as a recrystallization solvent.
본 발명의 다른 실시예에서는 디오신 또는 그의 유도체와 부채마 추출물의 리파아제 저해 활성을 농도의 변화에 따라 측정하였다. 기질은 리파아제가 작용하여 지질을 모노글리세라이드와 지방산으로 분해할 수 있는 물질이면 제한없이 사용될 수 있으며, 본 발명에서는 구체적으로 4-메틸엄벨리페릴 올레이트(4-methylumbelliferyl oleate)가 사용되었다.In another embodiment of the present invention, the lipase inhibitory activity of dioxin or its derivatives and fanica extract was measured according to the change in concentration. The substrate may be used without limitation as long as the lipase acts as a substance capable of breaking down lipids into monoglycerides and fatty acids. Specifically, 4-methylumbelliferyl oleate was used in the present invention.
본 발명에 따른 리파아제 억제제는, 상기와 같이 추출된 디오신 또는 그의 유도체를 유효성분으로 함유할 수 있고, 또는 부채마 추출물을 함유할 수도 있으며, 당업계에 공지된 의약품 제조 방법에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체가 첨가되어 약학적 조성물로 제조될 수도 있다.The lipase inhibitor according to the present invention may contain the dioxins or derivatives thereof extracted as an active ingredient, or may contain fanza extract, and according to the pharmaceutical preparation methods known in the art, Acceptable carriers may also be added to prepare the pharmaceutical compositions.
상기에서 담체의 예로는, 락토오스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 또한, 상기 리파아제 억제제에는 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 또는 방부제 등이 추가로 포함될 수 있다.Examples of the carrier in the above, lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, poly Vinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. In addition, the lipase inhibitor may further include fillers, anti-coagulants, lubricants, wetting agents, fragrances, emulsifiers or preservatives.
본 발명의 리파아제 억제제를 함유하는 조성물은 비만의 예방·치료, 혈중중성 지방의 조절, 콜레스테롤 수치의 저하, 혈압 개선, 고지혈증 및 당뇨병의 치료 등을 위하여 임상적으로 이용될 수 있다.The composition containing the lipase inhibitor of the present invention can be used clinically for the prevention and treatment of obesity, regulation of blood triglycerides, lowering cholesterol levels, improving blood pressure, treating hyperlipidemia and diabetes.
본 발명에 따른 리파아제 억제제에 있어서, 디오신의 유효량은 50mg∼500㎎/㎏이며, 바람직하게는 100∼200㎎/㎏이다. 투여량은 비만의 중증도, 환자의 상태, 연령, 합병증 등의 다양한 요인을 고려하여 전문가에 의해 결정될 수 있다.In the lipase inhibitor according to the present invention, the effective amount of diocin is 50 mg to 500 mg / kg, preferably 100 to 200 mg / kg. Dosage may be determined by the expert taking into account various factors such as the severity of obesity, the condition of the patient, age, complications and the like.
한편, 본 발명은 상기 리파아제 억제제를 포함하는 비만 방지용 기능성 식품을 제공한다. 본 발명에 따른 리파아제 억제제를 단독으로 직접 첨가하여 사용할 수도 있으나, 비만을 예방, 치료하는데 사용되는 공지의 물질 또는 새로운 물질을 첨가하여 상승 작용을 나타낼 수도 있다. 또한, 식용 색소, 식용 향료, 생약초, 과일, 올리고당, 키토산, 구연산 등의 일반적인 첨가제를 사용하여, 좋은 맛과 향을 내도록 할 수도 있다.On the other hand, the present invention provides a functional food for preventing obesity comprising the lipase inhibitor. The lipase inhibitors according to the present invention may be used alone or in addition, but may be synergistic by adding a known substance or a new substance used for preventing or treating obesity. In addition, general additives such as food colorings, food flavorings, herbal medicines, fruits, oligosaccharides, chitosan, citric acid and the like may be used to give good taste and aroma.
본 발명의 리파아제 억제제가 함유된 기능성 식품으로는, 빵, 떡류, 건과류, 캔디류, 초콜릿류, 츄잉껌, 쨈류와 같은 과자류; 아이스크림류, 빙과류, 아이스크림 분말류와 같은 아이스크림 제품류; 우유류, 저지방 우유류, 유당분해우유, 가공우류, 산양유, 발효유류, 버터유류, 농축우류, 유크림류, 버터유, 자연치즈, 가공치즈, 분유류, 유청류와 같은 유가공품류; 식육가공품, 알가공품, 햄버거와 같은 식육제품류; 어묵, 햄, 소세지, 베이컨 등의 어육가공품과 같은 어육제품류; 라면류, 건면류, 생면류, 유탕면류, 호화건면류, 개량숙면류, 냉동면류, 파스타류와 같은 면류; 과실음료, 채소류음료, 탄산음료, 두유류, 요구르트 등의 유산균 음료,혼합음료와 같은 음료; 간장, 된장, 고추장, 춘장, 청국장, 혼합장, 식초, 소스류, 토마토케첩, 카레, 드레싱과 같은 조미식품; 마가린, 쇼트닝 ; 및 피자를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 명세서에서 기능성 식품이란 일반 식품에 상기 디오신 또는 디오신 유도체, 이를 포함하는 부채마추출물 등을 첨가함으로써 일반 식품의 기능성을 향상시킨 것을 말하며, 상기 디오신 또는 디오신 유도체, 이를 포함하는 부채마추출물 등을 캡슐화 등으로 제조한 건강보조식품 등을 포함한다.Functional foods containing the lipase inhibitor of the present invention include, but are not limited to, confectionery such as bread, rice cakes, dried fruits, candy, chocolates, chewing gum, and nuts; Ice cream products such as ice creams, ice creams, and ice cream powders; Dairy products such as milk, low-fat milk, lactose-decomposed milk, processed milk, goat milk, fermented milk, butter milk, concentrated milk, milk cream, butter oil, natural cheese, processed cheese, milk powder, whey; Meat products such as meat products, processed products, and hamburgers; Fish meat products such as fish meat products such as fish paste, ham, sausage and bacon; Noodles such as ramen noodles, dried noodles, raw noodles, fried noodles, deluxe dried noodles, refined noodles, frozen noodles and pasta; Beverages such as fruit drinks, vegetable drinks, carbonated drinks, soymilk, yogurt and the like, lactic acid bacteria drinks, mixed drinks; Seasoning foods such as soy sauce, miso, red pepper paste, chunjang, cheongukjang, mixed soy sauce, vinegar, sauce, tomato ketchup, curry, and dressing; Margarine, shortening; And pizza, but are not limited thereto. Functional food in the present specification is to improve the functionality of the general food by adding the diocin or diosin derivatives, such as fan radish extract containing the same to the general food, the diocin or diocin derivatives, fan fan containing the same And health supplements prepared by encapsulating extracts and the like.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.
단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are merely to illustrate the invention, but the content of the present invention is not limited to the following examples.
<< 실시예Example 1>1> 디오신Diosin 및 그의 유도체의 분리 및 정제And isolation and purification thereof
(1-1)(1-1) 디오신의Diosin 분리 및 정제Separation and Purification
부채마(Dioscorea nipponica)의 근경 3㎏을 세절한 후, 환류냉각장치를 사용하여, 25℃에서 메탄올 5000㎖로 72시간동안 3회 연속 추출하였다. 얻어진 메탄올 추출액을 여과지를 사용한 깔대기로 여과한 후 76cmHg에서 감압, 농축하여 부채마 메탄올 추출물 115.1g을 얻었다. 부채마 메탄올 추출물 25g을 실리카겔 컬럼(90×6cm, Merck 7734 silica gel 900g)에, CHCl3:CH3OH:H2O=7:3:1 (분액 깔대기에 상기 비율로 혼합하여 하층부를 사용함)의 용매를 사용하여 전개시켰다. 전개를 시작한 후, 60분후부터 2000㎖씩 8개의 분획을 수득하였다. 이 중 5번 분획을 물포화 CH3COOCH2CH3:CH3OH=98:2의 용매로부터 물포화 CH3COOCH2CH3:CH3OH=95:5의 용매까지 단계적으로 극성을 높여가며, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 실시하였다(이때, 물포화 CH3COOCH2CH3라 함은 CH3COOCH2CH3와 증류수를 분액 깔대기에서 1 : 1로 혼합하여 6시간 방치한 후의 상층부를 의미한다). 전개를 시작한 후, 30분 후부터 500㎖씩 60개의 분획으로 수득하였다. 수득된 분획 중 35번에서 50번까지의 분획으로부터 디오신을 얻었으며, TLC 및 NMR 분석법을 사용하여, 이 물질이 디오신임을 확인하였다. 디오신은 메탄올로 재결정하여 무색침상 결정을 얻었다. 디오신의 측정치는 다음과 같다.FanDioscorea nipponicaAfter cutting 3 kg of root diameter), the mixture was extracted three times for 72 hours with 5000 ml of methanol at 25 ° C. using a reflux condenser. The obtained methanol extract was filtered with a funnel using filter paper, and then concentrated under reduced pressure at 76 cmHg to obtain 115.1 g of Methanol extract. 25 g of Fanoma methanol extract was added to a silica gel column (90 × 6 cm, Merck 7734 silica gel 900 g), CHCl3: CH3OH: H2Development was carried out using a solvent of O = 7: 3: 1 (mixed in the above ratio in a separatory funnel to use the lower layer). After the start of development, eight fractions of 2000 ml were obtained after 60 minutes. Water fraction 5 of these was saturated with CH3COOCH2CH3: CH3Saturated CH from solvent of OH = 98: 23COOCH2CH3: CH3Step by step to increase the polarity to a solvent of OH = 95: 5, was carried out silica gel column chromatography (at this time, water saturated CH3COOCH2CH3Means CH3COOCH2CH3And the upper layer after distilled water is mixed 1: 1 in a separatory funnel and left for 6 hours). After the start of development, 60 fractions of 500 ml were obtained after 30 minutes. Diosine was obtained from fractions 35 to 50 of the fractions obtained, and TLC and NMR analysis was used to confirm that this material was diosin. Diosin was recrystallized from methanol to obtain colorless needle crystals. Dioxin measurements are as follows.
녹는점 : 290∼292℃Melting Point: 290 ~ 292 ℃
[α]D 25: -112.3° (c, 0.3 in MeOH)[α] D 25 : -112.3 ° (c, 0.3 in MeOH)
IR(KBr, cm-1) 3420, 1640, 1100∼1000, 920, 900, 866, 838(900>920, 25(R)-스피로케탈), 811IR (KBr, cm -1 ) 3420, 1640, 1100-1000, 920, 900, 866, 838 (900> 920, 25 (R) -spiroketal), 811
1H NMR(300 MHz, 피리딘-d5) δ0.81(s), 1.01(s), 1.09(d, J=6.9Hz), 0.69(d, J=5.2Hz), 5.30(brd, J=4.6Hz), 1.52(d, J=6.2Hz), 1.66(d, J=6.1Hz), 4.82(d, J=7.4Hz), 5.62(brs), 6.17(s). 1 H NMR (300 MHz, pyridine-d 5 ) δ 0.81 (s), 1.01 (s), 1.09 (d, J = 6.9 Hz), 0.69 (d, J = 5.2 Hz), 5.30 (brd, J = 4.6 Hz), 1.52 (d, J = 6.2 Hz), 1.66 (d, J = 6.1 Hz), 4.82 (d, J = 7.4 Hz), 5.62 (brs), 6.17 (s).
13C NMR(75.5 MHz, 피리딘-d5) δ37.4, 29.9, 78.0, 38.8, 140.7, 121.5, 32.0, 31.6, 50.6, 37.0, 20.9, 39.8, 40.3, 56.5, 32.2, 80.9, 62.8, 16.2, 19.3, 41.8, 14.8, 109.0, 31.7, 29.1, 30.4, 66.7, 17.1 13 C NMR (75.5 MHz, pyridine-d 5 ) δ 37.4, 29.9, 78.0, 38.8, 140.7, 121.5, 32.0, 31.6, 50.6, 37.0, 20.9, 39.8, 40.3, 56.5, 32.2, 80.9, 62.8, 16.2, 19.3, 41.8, 14.8, 109.0, 31.7, 29.1, 30.4, 66.7, 17.1
(1-2)(1-2) 디오스제닌의Diosgenin 분리 및 정제Separation and Purification
상기 실시예 (1-1)의 8개의 분획 중 1번 분획을 CH3COOCH2CH3의 용매로 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 실시하였다. 전개를 시작한 후, 20분 후부터 500㎖씩 15개의 소분획을 수득하여 그 중 5번에서 14번까지의 소분획으로부터 디오스제닌을 얻었으며, TLC 및 MS 분석법을 사용하여, 이 물질이 디오스제닌임을 확인하였다. 디오스제닌은 메탄올로 재결정하여 무색침상 결정을 얻었다. 디오스제닌의 측정치는 다음과 같다.Part 1 of the eight fractions of Example (1-1) was subjected to silica gel column chromatography with a solvent of CH 3 COOCH 2 CH 3 . After starting the development, 15 small fractions were obtained in 500 ml from 20 minutes afterwards, and dioxenin was obtained from 5 to 14 small fractions of which, using TLC and MS analysis, determined that the substance was diosgenin. Confirmed. Diosgenin was recrystallized from methanol to obtain colorless needle crystals. The measured value of diosgenin is as follows.
녹는점 : 298∼300℃Melting Point: 298 ~ 300 ℃
[α]D 25: -41.7° (c, 0.2 in pyridine)[α] D 25 : -41.7 ° (c, 0.2 in pyridine)
IR(KBr, cm-1) 3420, 1650, 1075, 1025, 835, 800IR (KBr, cm -1 ) 3420, 1650, 1075, 1025, 835, 800
MS(30eV),m/z(rel. int.) 414(13.1), 412(6.7), 397(60.4), 396(100), 396(44.5), 382(28.5), 381(17.1), 329(7.0), 303(10.7), 275(20.8), 273(16.7), 271(10.8), 255(69.8), 229(13.5), 213(38.0)MS (30 eV), m / z (rel. Int.) 414 (13.1), 412 (6.7), 397 (60.4), 396 (100), 396 (44.5), 382 (28.5), 381 (17.1), 329 (7.0), 303 (10.7), 275 (20.8), 273 (16.7), 271 (10.8), 255 (69.8), 229 (13.5), 213 (38.0)
(1-3)(1-3) 그라실린의Gracillin 분리 및 정제Separation and Purification
상기 실시예 (1-1)의 60개의 소분획 중 52번부터 59번 소분획으로부터 그라실린을 얻었으며, TLC 및 NMR 분석법을 사용하여, 이 물질이 그라실린임을 확인하였다. 그라실린은 메탄올로 재결정하여 무색침상 결정을 얻었다. 그라실린의 측정치는 다음과 같다.Gracillin was obtained from subfractions 52 to 59 of the 60 subfractions of Example (1-1), using TLC and NMR analysis, it was confirmed that the substance is gracillin. Gracillin was recrystallized from methanol to obtain colorless needle crystals. The measurement of gracillin is as follows.
녹는점 : 296∼298℃Melting Point: 296 ~ 298 ℃
[α]D 25: -95° (c, 0.4 in pyridine)[α] D 25 : -95 ° (c, 0.4 in pyridine)
IR(KBr, cm-1) 3420, 1640, 1100∼1000, 920, 900, 866, 836(900>920, 25(R)-스피로케탈), 812IR (KBr, cm -1 ) 3420, 1640, 1100-1000, 920, 900, 866, 836 (900> 920, 25 (R) -spiroketal), 812
1H NMR(300 MHz, 피리딘-d5) δ0.82(s), 1.04(s), 1.11(d, J=6.9Hz), 0.71(d, J=5.7Hz), 5.32(brd, J=4.8Hz), 1.66(d, J=6.1Hz), 4.84(d, J=7.3Hz), 4.97(d, J=7.7Hz), 6.18(s). 1 H NMR (300 MHz, pyridine-d 5 ) δ 0.82 (s), 1.04 (s), 1.11 (d, J = 6.9 Hz), 0.71 (d, J = 5.7 Hz), 5.32 (brd, J = 4.8 Hz), 1.66 (d, J = 6.1 Hz), 4.84 (d, J = 7.3 Hz), 4.97 (d, J = 7.7 Hz), 6.18 (s).
13C NMR(75.5 MHz, 피리딘-d5) δ37.5, 30.0, 78.4a, 38.7, 140.8, 121.7, 32.2b, 31.8, 50.3, 37.1, 21.1, 39.9, 40.4, 56.7, 32.3b, 81.0, 62.9, 16.2, 19.3, 41.9, 14.9, 109.2, 31.7, 29.2, 30.5, 66.8, 17.2 13 C NMR (75.5 MHz, pyridine-d 5 ) δ 37.5, 30.0, 78.4 a , 38.7, 140.8, 121.7, 32.2 b , 31.8, 50.3, 37.1, 21.1, 39.9, 40.4, 56.7, 32.3 b , 81.0, 62.9 , 16.2, 19.3, 41.9, 14.9, 109.2, 31.7, 29.2, 30.5, 66.8, 17.2
(1-4)(1-4) 프로사포제닌Prosapogenin A의 분리 및 정제Isolation and Purification of A
상기 실시예 (1-1)의 8개의 분획 중 4번 분획을 CHCl3:CH3OH:H2O=7:3:1의 용매(분액깔대기에 10시간 방치한 후의 하층부를 사용함.)로 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 실시하여, 전개 후 15분부터 500ml씩 유출시킨 15개의 소분획 중 6번에서 12번 소분획으로부터 프로사포제닌 A를 얻었다. 프로사포제닌 A는 메탄올로 재결정하여 무색침상 결정을 얻었다. 프로사포제닌 A의 측정치는 다음과 같다.Fraction 4 of the eight fractions of Example (1-1) was used as a solvent of CHCl 3 : CH 3 OH: H 2 O = 7: 3: 1 (using the lower layer after being left in a separatory funnel for 10 hours). Silica gel column chromatography was carried out, and prosapogenin A was obtained from the small fractions 6 to 12 of the 15 small fractions which were separated by 500 ml from 15 minutes after the development. Prosapogenin A was recrystallized from methanol to obtain colorless needle crystals. Measured values of prosapogenin A are as follows.
녹는점 : 238∼240℃Melting Point: 238 ~ 240 ℃
[α]D 25: -12.5° (c, 0.4 in MeOH)[α] D 25 : -12.5 ° (c, 0.4 in MeOH)
IR(KBr, cm-1) 3410, 1650, 1100∼1000, 920, 900, 865, 837(900>920, 25(R)-스피로케탈), 811IR (KBr, cm -1 ) 3410, 1650, 1100-1000, 920, 900, 865, 837 (900> 920, 25 (R) -spiroketal), 811
1H NMR(300 MHz, 피리딘-d5) δ0.80(s), 1.01(s), 1.09(d, J=6.9Hz), 0.68(d, J=5.7Hz), 5.28(brd, J=4.8Hz), 1.67(d, J=6.3Hz), 4.92(d, J=7.2Hz), 6.20(s). 1 H NMR (300 MHz, pyridine-d 5 ) δ0.80 (s), 1.01 (s), 1.09 (d, J = 6.9Hz), 0.68 (d, J = 5.7Hz), 5.28 (brd, J = 4.8 Hz), 1.67 (d, J = 6.3 Hz), 4.92 (d, J = 7.2 Hz), 6.20 (s).
13C NMR(75.5 MHz, 피리딘-d5) δ37.4, 30.0, 77.9, 38.8, 140.8, 121.5, 32.0, 31.6, 50.2, 37.0, 20.9, 39.8, 40.3, 56.5, 32.2, 80.9, 62.8, 16.1, 19.2, 41.8, 14.8, 109.0, 31.7, 29.1, 30.4, 66.7, 17.1 13 C NMR (75.5 MHz, pyridine-d 5 ) δ 37.4, 30.0, 77.9, 38.8, 140.8, 121.5, 32.0, 31.6, 50.2, 37.0, 20.9, 39.8, 40.3, 56.5, 32.2, 80.9, 62.8, 16.1, 19.2, 41.8, 14.8, 109.0, 31.7, 29.1, 30.4, 66.7, 17.1
(1-5)(1-5) 프로사포제닌Prosapogenin C의 분리 및 정제Separation and Purification of C
상기 실시예 (1-1)의 8개의 분획 중 2번 분획을 CHCl3:CH3OH:H2O=8:2:0.5의용매(분액 깔대기에 10시간 방치한 후의 하층부를 사용함.)로 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 실시하여, 전개 후 30분부터 500㎖씩 유출시킨 24개의 소분획 중 7번에서 16번까지의 소분획으로부터 프로사포제닌 C를 얻었다. 프로사포제닌 C는 메탄올로 재결정하여 무색침상 결정을 얻었다. 프로사포제닌 C의 측정치는 다음과 같다.A solvent of CHCl 3 : CH 3 OH: H 2 O = 8: 2: 0.5 of the eight fractions of the above Example (1-1) (with a lower layer after being left for 10 hours in a separatory funnel) was used. Silica gel column chromatography was performed, and prosapogenin C was obtained from the small fractions 7 to 16 of the 24 small fractions which were separated from 30 minutes to 500 ml after development. Prosapogenin C was recrystallized from methanol to obtain colorless needle crystals. Measured values of prosapogenin C are as follows.
녹는점 : 247∼249℃Melting Point: 247 ~ 249 ℃
IR(KBr, cm-1) 3450, 1650, 1070, 1045, 1025, 920, 900, 865, 835(900>920, 25(R)-스피로케탈), 810IR (KBr, cm -1 ) 3450, 1650, 1070, 1045, 1025, 920, 900, 865, 835 (900> 920, 25 (R) -spiroketal), 810
1H NMR(300 MHz, 피리딘-d5) δ0.70(3H, d, J=5.2Hz, 27-CH3), 0.83(3H, s, 18-CH3), 0.92(3H, s, 19-CH3), 1.13(3H, d, J=6.9Hz, 21-CH3), 5.01(1H, d, J=7.7Hz, anomeric H), 5.31(1H, brd, J=4.4Hz, H-6) 1 H NMR (300 MHz, pyridine-d 5 ) δ0.70 (3H, d, J = 5.2 Hz, 27-CH 3 ), 0.83 (3H, s, 18-CH 3 ), 0.92 (3H, s, 19 -CH 3 ), 1.13 (3H, d, J = 6.9 Hz, 21-CH 3 ), 5.01 (1H, d, J = 7.7 Hz, anomeric H), 5.31 (1H, brd, J = 4.4 Hz, H- 6)
13C NMR(75.5 MHz, 피리딘-d5) δ37.3, 30.0, 78.3*, 39.1, 140.7, 121.5, 32.0, 31.5, 50.1, 36.9, 20.9, 39.7, 40.3, 56.5, 32.1, 80.9, 62.7, 16.2, 19.2, 41.8, 14.8, 109.1, 31.6, 29.1, 30.4, 66.7, 17.1, 102.4, 75.1, 78.0*, 71.5, 78.2*, 62.7 13 C NMR (75.5 MHz, pyridine-d 5 ) δ 37.3, 30.0, 78.3 * , 39.1, 140.7, 121.5, 32.0, 31.5, 50.1, 36.9, 20.9, 39.7, 40.3, 56.5, 32.1, 80.9, 62.7, 16.2 , 19.2, 41.8, 14.8, 109.1, 31.6, 29.1, 30.4, 66.7, 17.1, 102.4, 75.1, 78.0 * , 71.5, 78.2 * , 62.7
<< 실시예Example 2> 췌장 리파아제 저해 활성 측정2> Measurement of Pancreatic Lipase Inhibitory Activity
(2-1)(2-1) 부채마Fan 추출물의 췌장 리파아제 저해 활성 측정Measurement of Pancreatic Lipase Inhibitory Activity of Extracts
본 실험에 사용한 돼지 췌장 리파아제는 시그마사(St Louis, MO, USA)에서 구입하였으며, 기질로서 4-메틸엄벨리페릴 올레이트(4-methylumbelliferyl oleate)를 사용하였다. 한편, 양성대조구로는 지질분해 효소 저해제로 임상적으로 사용되고 있는 제니칼(Xenical®, Roche, Switzerland)을 사용하였다.Porcine pancreatic lipase used in this experiment was purchased from Sigma (St Louis, MO, USA), and 4-methylumbelliferyl oleate was used as a substrate. Meanwhile, as a positive control, Xenical (Xenical ® , Roche, Switzerland), which is clinically used as a lipase inhibitor, was used.
상기 실시예 1에서 얻은 부채마 추출물을 디메틸설폭사이드(DMSO)에 0.05mg/mL, 0.5mg/mL, 5mg/mL 및 50mg/mL농도로 용해시켜 용액을 제조하고, 이를 췌장 리파아제와 기질을 함유한 효소반응액에 넣고, 가와구치 등의 방법(Kawaguchi K.et al .,Biosci . Biotechnol . Biochem ., Jan. 61(1):102-104(1997))에 따라 리파아제의 저해정도를 조사하였다. 측정은 3회 반복하였으며, 결과는 평균값 ±표준편차로 하기 표 1에 나타내었다.The Fanza extract obtained in Example 1 was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) at a concentration of 0.05 mg / mL, 0.5 mg / mL, 5 mg / mL and 50 mg / mL to prepare a solution, which contained pancreatic lipase and a substrate. In an enzyme reaction solution, Kawaguchi et al.et al .,Biosci . Biotechnol . Biochem ., Jan. 61 (1): 102-104 (1997)) to investigate the degree of inhibition of lipase. The measurement was repeated three times, and the results are shown in Table 1 below as the average value ± standard deviation.
(2-2)(2-2) 디오신의Diosin 췌장 리파아제 저해 활성 측정Measurement of Pancreatic Lipase Inhibitory Activity
본 실험에 사용한 돼지 췌장 리파아제와 기질, 양성대조구는 상기 실시예 2-1과 동일한 것을 사용하였다.Porcine pancreatic lipase, substrate, and positive control were used in this experiment the same as in Example 2-1.
상기 실시예 1-1에서 얻은 디오신을 디메틸설폭사이드에 0.05mg/mL, 0.5mg/mL, 5mg/mL 및 50mg/mL농도로 용해시켜 용액을 제조하고, 이를 췌장 리파아제와 기질을 함유한 효소반응액에 넣고, 가와구치 등의 방법에 따라 리파아제의 저해정도를 조사하였다. 측정은 3회 반복하였으며, 결과는 평균값 ±표준편차로 하기표 1에 나타내었다.The diocin obtained in Example 1-1 was dissolved in dimethyl sulfoxide at 0.05 mg / mL, 0.5 mg / mL, 5 mg / mL and 50 mg / mL concentrations to prepare a solution, and this was an enzyme containing pancreatic lipase and a substrate. Into the reaction solution, the inhibition of lipase was examined according to methods such as Kawaguchi. The measurement was repeated three times, and the results are shown in Table 1 below as the mean value ± standard deviation.
상기 표 1에서 보는 바와 같이, 5 ㎍/㎖ 농도에서 부채마 메탄올 추출물은 60%, 디오신은 83%, 제니칼은 86% 저해활성을 나타내었다. 또한 0.5 ug/ml에서도 디오신이나 부채마 추출물이 지방분해효소를 저해하는 능력이 있는 것으로 나타나, 제니칼보다는 활성측면에서 약간 낮은 수준이지만, 천연물로서 상당한 지방소화를 저해하는 활성이 있는 것으로 평가된다.As shown in Table 1, 60 mg, dioxin, 83%, and Zenical 86% inhibitory activity was shown in Methanol extract of 5% at 5 ㎍ / ㎖ concentration. In addition, diosin or fanza extract was found to have the ability to inhibit lipolytic enzymes even at 0.5 ug / ml, which is slightly lower in terms of activity than jenical, but is considered to have a significant inhibition of fat digestion as a natural product.
(2-3)(2-3) 디오신Diosin 유도체의 췌장 리파아제 저해 활성 측정Measurement of Pancreatic Lipase Inhibitory Activity of Derivatives
본 실험에 사용한 돼지 췌장 리파아제와 기질, 양성대조구는 상기 실시예 2-1과 동일한 것을 사용하였다.Porcine pancreatic lipase, substrate, and positive control were used in this experiment the same as in Example 2-1.
상기 실시예 1-2와 같은 방법으로 얻은 디오신 유도체인 디오스제닌(diosgenin), 그라실린(gracillin), 프로사포제닌 A(prosapogenin A) 및 프로사포제닌 C(prosapogenin C)를 각각 디메틸설폭사이드에 5.00㎍/㎖, 12.50㎍/㎖, 25.00㎍/㎖, 50.00㎍/㎖ 및 125㎍/㎖의 농도로 용해시켜 용액을 제조하고, 이를 췌장 리파아제와 기질을 함유한 효소반응액에 넣고, 가와구치 등의 방법에 따라 리파아제의 저해정도를 조사하였다. 결과는 하기 표 2에 나타내었다.Diosgenin, gracillin, prosapogenin A and prosapogenin C, which are diosine derivatives obtained in the same manner as in Example 1-2, were added to dimethyl sulfoxide, respectively. A solution was prepared by dissolving at a concentration of 5.00 µg / ml, 12.50 µg / ml, 25.00 µg / ml, 50.00 µg / ml, and 125 µg / ml, and then, it was added to an enzyme reaction solution containing pancreatic lipase and a substrate. The inhibition of lipase was investigated according to the method of. The results are shown in Table 2 below.
상기 표 2에서 보는 바와 같이, 사포닌계열의 디오신 유도체인 디오스제닌, 그라실린, 프로사포제닌 A 및 프로사포제닌 C는 투여 농도에 따라 11% 내지 87%의 리파아제 저해 효과를 나타냈다. 특히, 프로사포제닌 A는 5㎍/㎖에서도 강한 저해활성을 보였다. 이러한 결과로부터 디오신 유도체가 리파아제 저해 활성을 가지고 있음을 알 수 있었다.As shown in Table 2, the saponin-based diosin derivatives of diosgenin, gracillin, prosapogenin A and prosapogenin C showed lipase inhibitory effects of 11% to 87% depending on the concentration of administration. In particular, prosapogenin A showed strong inhibitory activity even at 5 µg / ml. From these results, it was found that the diosin derivative has lipase inhibitory activity.
<< 실시예Example 3> 마우스에서의3> on mouse 혈중Blood 중성 지방 농도 강하 효과Triglyceride concentration drop effect
(3-1) 마우스에서의(3-1) in mouse 부채마Fan 추출물에 의한By extract 혈중Blood 중성 지방 농도 강하 효과Triglyceride concentration drop effect
스프레그-도올리(Sprague-Dawley)계 흰쥐(230-240g)를 대조구와 2중량% 부채마군, 5중량% 부채마군으로 나누어 각 군당 7마리씩을 8주간 사육한 다음, 혈액을 채취하였다. 혈액은 심장에서 채혈하였으며 총중성지방, 총콜레스테롤, HDL(고밀도 지단백), VLDL(초저밀도 지단백), 저밀도 지단백(LDL), AI, GOT, GPT 등을 시그마 키트(St Louis, USA)를 사용하여 측정하였다.Sprague-Dawley rats (230-240 g) were divided into a control group, 2% by weight fan group, and 5% by weight fan group, and 7 animals of each group were raised for 8 weeks, and blood was collected. Blood was drawn from the heart, and total triglycerides, total cholesterol, HDL (high density lipoprotein), VLDL (ultra low density lipoprotein), low density lipoprotein (LDL), AI, GOT, GPT, and the like were obtained using a sigma kit (St Louis, USA). Measured.
그 결과, 하기 표 3에 나타낸 바와 같이, 부채마 추출물이 포함되지 않은 대조군에서는 59mg/㎗의 중성지방농도를 보인 반면, 2중량%와 5중량% 부채마 섭취군에서는 각각 35mg/㎗, 41mg/㎗의 혈중 중성지방농도를 보여 부채마 섭취가 유의적으로 혈중의 총 중성지방농도를 낮추는 것을 확인하였다.As a result, as shown in Table 3, the control group without the fan fan extract showed a triglyceride concentration of 59 mg / 반면 while 35 mg / ㎗, 41 mg / respectively in the 2% and 5% fan fan intake group, respectively 중 showed triglyceride concentration in blood, and it was confirmed that fan intake significantly lowered total triglyceride concentration in blood.
*같은 칸에서 동일한 첨자가 있는 값들끼리는 5% 수준에서 유의적인 차이가 없음 * Values with the same subscript in the same column do not differ significantly at 5%
**AI (atherogenic index, 동맥경화지수) = (총콜레스테롤-HDL 콜레스테롤)/HDL 콜레스테롤 ** AI (atherogenic index) = (Total Cholesterol-HDL Cholesterol) / HDL Cholesterol
(3-2) 마우스에서의(3-2) in the mouse 디오신에Diosin 의한by 혈중Blood 중성 지방 농도 강하 효과Triglyceride concentration drop effect
하룻밤동안 절식시킨 마우스(ICR mouse, 40±5g)에 지방-디오신 현탁액을 마우스 체중 40g 기준으로 200㎕씩 경구투여하였다. 상기 지방-디오신 현탁액은 콜린산(cholic acid) 15mg, 디메틸설폭사이드 100㎕, 옥수수기름 1000㎕, 생리식염수 1000㎕, 그리고 각기 다른 농도의 디오신(50㎎/㎏, 100㎎/㎏) 또는 제니칼(5㎎/㎏)을 넣고, 5분간 초음파 처리하여 제조하였다. 혈중 중성지방농도는 상기 현탁액을 경구투여하기 전(0분), 투여 후 30분, 1시간, 2시간, 3시간 및 4시간마다 각각 쥐의 꼬리부분에서 채혈하여 중성지방측정용 키트(Sigma 336-10, St Louis, USA)를 사용하여 측정하였다.Overnight fasted mice (ICR mouse, 40 ± 5g) was administered orally with a 200-dilution of fat-diocin suspension based on 40g body weight of the mouse. The fat-diocin suspension may contain 15 mg of cholic acid, 100 μl of dimethylsulfoxide, 1000 μl of corn oil, 1000 μl of saline, and different concentrations of diosin (50 mg / kg, 100 mg / kg) or Xenical (5 mg / kg) was added and prepared by sonication for 5 minutes. The serum triglyceride concentration was collected from the tail of rats every 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 3 hours and 4 hours before oral administration of the suspension (0 min), and the kit for triglyceride measurement (Sigma 336). -10, St Louis, USA).
그 결과, 도 1에 도시된 바와 같이, 디오신이 포함되지 않은 대조군에서는 지질현탁액 경구 투여 1시간 후 급격한 혈중 중성지방농도의 상승을 보인 반면, 디오신을 지질 현탁액에 혼합하여 체중 1kg당 100mg으로 경구 투여한 마우스의 경우는 지질현탁액 투여에 의한 혈중 중성지질농도 상승이 대조군에 비하여 완만하게 진행되는 것으로 나타났다.As a result, as shown in FIG. 1, the control group without diocin showed a rapid increase in blood triglyceride concentration after 1 hour of oral administration of lipid suspension, while dioxin was mixed with lipid suspension orally at 100 mg / kg body weight. In the case of the mice administered, the lipid triglyceride concentration increased by the administration of the lipid suspension was shown to be slower than the control group.
(3-3) 마우스에서의(3-3) in the mouse 디오신Diosin 유도체에 의한By derivative 혈중Blood 중성 지방 농도 강하 효과Triglyceride concentration drop effect
하룻밤동안 절식시킨 마우스(ICR mouse, 40±5g)에 지방-디오스제닌 현탁액을 마우스 체중 1㎏ 기준으로 100㎎씩 경구투여 하였다. 상기 지방-디오스제닌의 현탁액은 콜린산(cholic acid) 15mg, 디메틸설폭사이드 100㎕, 옥수수기름 1000㎕, 생리식염수 1000㎕, 그리고 각기 다른 농도의 디오스제닌 (50㎎/㎏, 100㎎/㎏) 또는 제니칼(5㎎/㎏)을 넣고, 5분간 초음파 처리하여 측정하였다. 혈중 중성지방농도는 상기 현탁액을 경구투여하기 전(0분), 투여 후 1시간, 2시간, 3시간 및 4시간마다 각각 쥐의 꼬리부분에서 채혈하여 중성지방측정용 키트(Sigma 336-10, StLouis, USA)를 사용하여 측정하였다.Overnight overnight fasted mice (ICR mouse, 40 ± 5g) was administered orally 100 mg of fat-diosgenin suspension based on 1kg of the mouse body weight. The suspension of fat-diogeninine is 15 mg of cholic acid (cholic acid), 100 μl of dimethyl sulfoxide, 1000 μl of corn oil, 1000 μl of physiological saline, and different concentrations of diosgenin (50 mg / kg, 100 mg / kg). Alternatively, Zenical (5 mg / kg) was added and sonicated for 5 minutes. The serum triglyceride concentration was collected from the tail of the rat every 1 hour, 2 hours, 3 hours, and 4 hours before oral administration of the suspension (0 min). StLouis, USA).
그 결과, 도 2에 도시된 바와 같이, 디오신이 포함되지 않은 대조군에서는 지질현탁액 경구 투여 1시간 후 급격한 혈중 중성지방농도의 상승을 보인 반면, 디오신을 지질 현탁액에 혼합하여 체중 1kg당 50mg으로 경구 투여한 마우스의 경우는 지질현탁액 투여에 의한 혈중 중성지질농도 상승이 대조군에 비하여 완만하게 진행되는 것으로 나타났다.As a result, as shown in Figure 2, the control group containing no diocin showed a sharp increase in blood triglyceride concentration 1 hour after oral administration of lipid suspension, while diosin oral at 50 mg / kg body weight mixed with lipid suspension In the case of the mice administered, the lipid triglyceride concentration increased by the administration of the lipid suspension was shown to be slower than the control group.
이러한 실험 결과들로부터, 디오신, 디오신 유도체 및 부채마 추출물이 리파아제를 억제함으로 인하여, 효과적으로 중성지방분해가 억제되어 혈중 중성지방의 함량 및 체내로 흡수된 중성지방 함량이 적었다는 사실을 알 수 있다. 특히, 디오신 농도가 50㎎/㎏에서 100㎎/㎏으로 증가함에 따라 혈중 중성지질농도 상승 억제효과가 현저하게 나타남을 알 수 있었다. 본 실험데이터는 한 처리구당 7마리의 마우스를 사용하여 얻은 결과의 평균값이다.These results indicate that diosin, diosin derivatives, and panaxima extract inhibit lipase, which effectively inhibited triglycerides, resulting in less triglycerides and less triglycerides absorbed into the body. have. In particular, as the dioxin concentration increased from 50 mg / kg to 100 mg / kg it was found that the inhibitory effect of the increase in the blood lipid concentration. The experimental data is the average of the results obtained using 7 mice per treatment.
본 실시예는 디오신 및 부채마 추출물이 시험관(in vitro) 실험에서 뿐만 아니라 생체실험(in vivo)에서도 지방분해억제 효과를 발휘한다는 것을 보여주는 것이다.This example shows that diosin and fanica extracts exert lipolysis inhibitory effects not only in vitro but also in vivo.
<< 실시예Example 4>4> 부채마Fan 추출물의 체중 감소 측정Weight loss measurement of extracts
본 실험에서는 한 실험조당 7마리의 스프레그-도올리 (Sprague-Dawley)계 흰쥐(230 ±10g)를 사용하였으며, 이때, 부채마 분말 함유조는 AIN-76 사료(ICN,Costa Mesa, CA, U.S.A)에 지방이 총 칼로리의 64%가 되도록 우지를 첨가한 고지방 식이에, 부채마 분말이 2중량% 또는 5중량%가 되도록 혼합한 것을 공급하였다. 부채마가 함유되지 않은 대조군, 2중량% 및 5중량% 부채마 분말 처리군 등 3개군으로 나누어 실험하였다. 실험식이를 급여하면서 2-3일 간격으로 식이섭취량 및 체중을 측정하였다. 식이 섭취량은 실험시작 초기에는 부채마 섭취가 대조군에 비해 적었으나, 2 주째부터 세 군 모두 거의 비슷한 양을 섭취하는 것으로 나타났다(도 3 참조). 그 결과, 실험식이 급여 후 1주 후부터 체중증가율에서 큰 차이가 나타났으며, 4주까지의 체중증가율이 대조군에 비하여 낮은 것으로 나타났다(도 4 참조). 모든 실험데이터는 7마리 쥐에 대한 평균값과 표준편차이다.In this experiment, 7 Sprague-Dawley rats (230 ± 10 g) were used in each experiment. ) Was fed a high fat diet in which tallow was added 64% of the total calories so that the mixture was made to be 2% or 5% by weight. The experiment was divided into three groups, the control group containing no fan, 2% by weight and 5% by weight fan fan powder treatment group. Dietary intake and body weight were measured at intervals of 2-3 days while feeding the experimental diet. The dietary intake was less than the control group at the beginning of the experiment compared to the control group, but from the second week all three groups were found to consume almost the same amount (see Figure 3). As a result, there was a big difference in the weight gain rate from 1 week after the experimental diet, and the weight increase rate up to 4 weeks was lower than that of the control group (see FIG. 4). All experimental data are mean and standard deviation for seven rats.
한편, 4주까지 섭취실험에서 체중 증가율이 감소하는 것 이외에 치사, 털색깔 변화, 행동의 이상 등의 외관적인 독성증상이 관찰되지 않았다.On the other hand, in addition to the decrease in weight gain rate in the intake experiment up to 4 weeks, no apparent toxic symptoms such as fatality, hair color change and behavioral abnormalities were observed.
이하, 본 발명에 따른 디오신 또는 부채마 추출물을 함유하는 기능성 식품의 제조예를 설명한다.Hereinafter, a production example of a functional food containing a diosin or fan horse extract according to the present invention.
하기의 제조예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명에 따른 디오신, 디오신 유도체 또는 부채마 추출물을 통상적인 식품의 제조 과정에 첨가하여 제조할 수 있다.The following preparation examples merely exemplify the present invention, and may be prepared by adding dioxins, dioxins derivatives, or fanza extracts according to the present invention in the preparation of conventional foods.
<< 제조예Production Example 1> 아이스크림의 제조1> Manufacture of Ice Cream
유지방 10.0 %Milkfat 10.0%
무지유고형분 10.8 %Non-fat solids 10.8%
설탕 12.0 %Sugar 12.0%
물엿 3.0 %Starch syrup 3.0%
유화안정제(스팬,span) 0.5 %Emulsifying stabilizer (span) 0.5%
향료(스트로베리) 0.15 %Spices (Strawberries) 0.15%
물 63.45 ∼ 63.54 %Water 63.45∼ 63.54%
디오신 0.01 ∼ 0.1 %Diosin 0.01 to 0.1%
상기 조성 및 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 아이스크림을 제조하였다.Ice cream was prepared using conventional methods with the above composition and content.
<< 제조예Production Example 2> 음료의 제조2> Manufacture of beverage
꿀 522 ㎎522 mg of honey
치옥토산아미드 5 ㎎Chioctosanamide 5 mg
니코틴산아미드 10 ㎎Nicotinamide 10 mg
염산리보플라빈나트륨 3 ㎎Riboflavin Sodium Hydrochloride 3 mg
염산피리독신 2 ㎎Pyridoxine hydrochloride 2 mg
이노시톨 30 ㎎Inositol 30 mg
오르트산 50 ㎎Orthoic acid 50 mg
디오신 5 ∼ 50 ㎎Diosin 5-50 mg
물 200 ㎖200 ml of water
상기 조성 및 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.The beverage was prepared by the conventional method with the said composition and content.
<< 제조예Production Example 3>3> 소세지의Sausage 제조Produce
돈육 63.6 %Pork 63.6%
계육 27.5 %Chicken 27.5%
전분 3.5 %Starch 3.5%
대두단백 1.7 %Soy Protein 1.7%
식염 1.62 %Saline 1.62%
포도당 0.5 %Glucose 0.5%
기타첨가물(글리세린) 1.08 ∼ 1.48 %Other additives (glycerine) 1.08 ~ 1.48%
부채마 추출물 0.1 ∼ 0.5 %Fancha Extract 0.1-0.5%
* 상기 조성 및 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 소세지를 제조하였다.Sausages were prepared using conventional methods with the above composition and content.
이와같이 본 발명은 부채마 추출물을 배합한 각종 음식물(예컨대 아이스크림, 음료, 소세지 등)을 제조함으로써 비만을 예방하는 효과가 있는 기능성 식품을 제공할 수 있다.As such, the present invention can provide a functional food having an effect of preventing obesity by preparing various foods (eg, ice cream, beverages, sausages, etc.) containing the fan extract.
마과 식물에서 추출한 디오신 또는 그의 유도체는 지방을 분해하는 효소인리파아제를 억제함으로써 지방이 분해되어 체내에 흡수되는 것을 막는다. 따라서, 비만의 예방, 치료, 혈중 중성 지방의 급격한 상승의 완화, 콜레스테롤의 침착 방지와 고지혈증, 고혈압, 당뇨, 심혈관계 질환 등의 성인병에도 효과가 있다. 또한, 화학적으로 합성되어 판매되는 약물에 비하여 중독성이 없으며, 투여를 중지한 이후에도 감소된 체중이 다시 증가하는 현상이 없다. 게다가 많은 양을 투여하여도 전혀 급성 독성을 나타내지 않아, 특별한 식이 요법 없이 정상적인 식사를 하면서도 비만을 예방, 치료할 수 있고, 각종 성인병 치료의 보조제로서 사용할 수 있다.Diosin or its derivatives, extracted from cabbage plants, inhibit lipase, an enzyme that breaks down fat to prevent fat from being broken down and absorbed into the body. Therefore, it is also effective in preventing and treating obesity, alleviating the rapid rise of triglycerides in blood, preventing the deposition of cholesterol and adult diseases such as hyperlipidemia, hypertension, diabetes, and cardiovascular diseases. In addition, it is not addictive compared to a drug that is chemically synthesized and sold, and there is no phenomenon of losing weight again even after discontinuation. Moreover, even when a large amount is administered, it does not show any acute toxicity at all, and can be used as an adjuvant to treat various adult diseases while preventing normal obesity while eating a normal meal without a special diet.
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