KR20040060497A - Granule tea of Sorbus commixta and manufacturing method thereof - Google Patents

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권혜정
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Abstract

PURPOSE: A method of making granular tea containing a Sorbus commixta Hedlund extract as an effective ingredient is provided. It permits a consumer to easily take a useful component contained in Sorbus commixta Hedlund in tea form. CONSTITUTION: Sorbus commixta Hedlund is washed with water, ground and concentrated. The extract containing 3.22 to 9.22% by weight of a Sorbus commixta Hedlund concentrate with a Brix from 40 to 45 is mixed with an optional ingredient and granulated. The optional ingredient contains 17.23% by weight of lactose, 61.75 to 67,75% by weight of purified glucose, 8.7% by weight of sorbitol, 2.26% by weight of a jujube concentrate and 0.84% by weight of flavoring materials.

Description

마가목 과립차 및 이의 제조방법{Granule tea of Sorbus commixta and manufacturing method thereof}Granule tea of Sorbus commixta and manufacturing method

본 발명은 마가목 과립차 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to rowan granule tea and a preparation method thereof.

마가목(Sorbus commixta)은 장미과에 속하는 낙엽소교목(落葉小喬木)으로서 높이는 4∼6m에 이르며 우리나라 각지에 표고(標高) 500∼1,200m 사이에서 자생 분포한다. 마가목은 비교적 높은 산지의 활엽수림에서 자라며 여름철에는 그 분포를 인식할 수가 없지만 10∼11월의 홍엽기(紅葉期)에는 선적색의 과실과 등황금색(橙黃金色)의 단풍이 든다.Sorbus commixta is a deciduous arborescent belonging to the Rosaceae family, reaching 4 to 6 m in height and distributed natively between 500 and 1,200 m above sea level in various parts of Korea. Rowan grows in relatively high deciduous forests, and its distribution is not recognized in summer, but during the red leaf period of October-November, there are fruits of shipping color and yellow-yellow foliage.

마가목의 잎은 어긋나고 우상복엽(羽狀複葉)으로 작은잎(小葉)은 13∼15개이고 피침형(披針形)을 이루며 톱니가 있다. 마가목의 겨울눈은 끈적끈적한 점액을 지니고 있다. 마가목의 꽃은 6월경에 흰색으로 피고, 열매는 지름은 8∼10mm 이며 10월경에 빨갛게 익는다.The leaves of the rowan are alternate, the upper right lobes are 13-15 small leaves, lanceolate, and sawtoothed. Rowan's winter snow has sticky mucus. The flowers of rowan are white in June, the fruits are 8-10mm in diameter, and ripen red in October.

마가목에 함유되어 있는 성분은 아래의 종류에 따라 다양하다.The components in rowan tree vary according to the following types.

(1)열매 : 신선한 생약에서는 비타민 C, 플라보노이드, 카테콜, 카로틴, β-카로틴에폭사이드, 시트릭산, 사과산, 숙신산 등이 함유되어 있고, 당류로서는 글루코스, 프럭토스, 수크로스, 솔비톨 등이 함유되어 있고, 트리터페노이드 (triterpenoid)로서 ursolic acid가 함유되어 있다. 아미노산, 카페인, 클로제닉산, 네오클로제닉산, 이소클로제닉산, 쿠마린 등이 함유되어 있다(1) Fruits: Fresh herbs contain vitamin C, flavonoids, catechol, carotene, β-carotene epoxide, citric acid, malic acid, succinic acid, etc., and sugars include glucose, fructose, sucrose, and sorbitol. It is contained in ursolic acid as a triterpenoid. Contains amino acids, caffeine, clogenic acid, neoclogenic acid, isocclogenic acid, coumarin, etc.

(2)잎 : 비타민 C, 플라본 유도체, 이소퀘르세린-3-소포로시드 (isoguercetin-3-sophoroside), 아스트라갈린(astragalin), 캄페롤, 퀘르세린-3-소포로시드 등이 함유되어 있다.(2) Leaves: contains vitamin C, flavone derivatives, isoquecetin-3-sophoroside, istragalin, aspartalin, camphorol, quercerine-3-phosphoside, etc. .

(3)백목질(白木質) : Lignan-xiloside, β-sitosterol, methoxyaucuparin, aucuparin이 함유되어 있다.(3) White matter (白 木質): Lignan-xiloside, β-sitosterol, methoxyaucuparin, aucuparin is contained.

(4)꽃 : L-로이신, L-바린, 이소부틸아민 등이 함유되어 있다. 또한 과실이 성숙할 때는 알리파틱산의 함량은 낮아지나 반면에 방향산(aromatic acids)의 함량은 상승한다. 과실의 클로로포름 추출분획에서 ursolic acid가 백색, 무정형의 결정으로 석출된다. 한편 수용성 펙틴은 과실이 익을 때에 많이 함유되고 녹색일 때는 프로토펙틴(protopectin) 등으로 존재한다.(4) Flowers: contains L-leucine, L-varin, isobutylamine, etc. In addition, when the fruit matures, the content of aliphatic acid decreases, while the content of aromatic acids rises. In the chloroform extract fraction of fruit, ursolic acid precipitates as white, amorphous crystals. On the other hand, water-soluble pectin is contained when the fruit ripens, and when it is green, it exists as protopectin.

한편 마가목의 잎, 줄기 및 열매에 대하여 수분, 단백질, 탄수화물, 회분과 같은 일반성분 및 미네랄 성분은 아래의 표 1, 2와 같이 함유되어 있다고 알려져 있다.On the other hand, the leaves, stems and berries of rowan are known to contain the general and mineral components such as moisture, protein, carbohydrates, ash as shown in Tables 1 and 2 below.

표 1. 마가목의 잎, 줄기 및 열매의 일반성분 측정(단위 : %)Table 1. Measurement of general components of leaves, stems and berries of rowan (unit:%)

구 분division 수 분moisture 단백질protein 지질Geology 탄수화물carbohydrate 회분Ash 당질Sugar 섬유소fibrin 마가목rowan leaf 10.410.4 10.910.9 5.75.7 51.851.8 13.613.6 7.67.6 줄기stem 9.09.0 3.63.6 0.30.3 43.143.1 42.042.0 2.02.0 열매Fruit 24.724.7 5.85.8 4.24.2 47.447.4 14.614.6 3.33.3

표 2. 마가목의 잎, 줄기 및 열매의 미네랄 측정(단위 : mg/100g)Table 2. Mineral Measurements of Leaves, Stems and Berries of Rowan (unit: mg / 100g)

구 분division PP KK CaCa FeFe NaNa 마가목rowan leaf 127.9127.9 1798.41798.4 1093.81093.8 -- -- 줄기stem 104.9104.9 383.6383.6 502.8502.8 -- -- 열매Fruit 375.3375.3 1103.91103.9 435.1435.1 8.58.5 5.35.3

위와 같이 마과목은 각각의 부위에 유용한 성분을 가지고 있다. 특히 마과목의 과실 엑기스는 인체의 간지질(肝脂質)을 낮춰주며 혈청 콜레스테롤 값도 낮춰준다. 또한 마과목에는 비타민 C의 함량이 높아 괴혈증에 유효하고, 마과목에 함유되어 있는 플라보노이드는 혈관벽의 취약화를 막으며, 솔비톨은 삼투성 이뇨작용이 강해서 이뇨제로서 이용할 수 있다.As above, the subject tree has a useful ingredient in each area. In particular, the fruit extract of Asters lowers the body's liver lipid and lowers the serum cholesterol level. In addition, it is effective in scurvy due to its high content of vitamin C, and flavonoids contained in Asters prevent the weakening of blood vessel walls, and sorbitol can be used as a diuretic because of its strong osmotic diuretic effect.

상기와 같이 유용한 성분을 함유한 마과목은 여러 분야에 이용될 수 있으나 아직까지 이를 산업에 이용한 예가 거의 전무하다. 이는 마과목이 흔히 볼 수 있는 식물이 아니며 또한 높은 지역에서 자라서 이의 입수가 용이하지 않은 것도 하나의 원인이 될 수 있다.Although the acanthus containing the useful components as described above can be used in various fields, there are almost no examples of using them in industry. This may be due to the fact that aquifoliaceae is not a common plant, and also because it grows in high places and is not readily available.

한편 본원발명과 관련하여 종래 마과목을 이용한 선행기술로서는 한국공개특허 제 2001-0055831호에 마과목 열매를 이용한 차의 제조방법이 있으나 본원발명과는 그 기술적 구성을 달리한다.Meanwhile, as related art of the present invention, there is a manufacturing method of a tea using the fruit of the Japanese Laid-Open Patent No. 2001-0055831 as a prior art using an apple, but its technical configuration is different from the present invention.

본 발명은 마가목 추출물을 유효성분으로 포함하는 마가목 과립차 및 이의 제조방법을 제공함으로써 마가목에 함유되어 있는 유용한 성분을 차의 형태로 쉽게 음용할 수 있도록 하는 것을 발명의 목적으로 한다.It is an object of the present invention to provide a rowan granule tea comprising the mountain ash extract as an active ingredient and a method for preparing the same, so that useful components contained in rowan tree can be easily consumed in the form of tea.

본 발명은 마가목 추출물을 유효성분으로 함유하는 마가목 과립차 및 이의 제조방법을 포함한다.The present invention includes a rowan granule tea containing the mountain ash extract as an active ingredient and a preparation method thereof.

본 발명의 마가목 과립차에 있어서, 마가목 추출물은 바람직하기로는 3.22∼9.22 중량% 첨가한다. 만일 3.22 중량% 미만으로 첨가시 마가목이 지니는 기능성을 발휘하기에 충분하지 아니하며, 9.22 중량%를 초과하는 경우에는 마가목 특유의 맛이 강하여 기호성 측면에서 바람직하지 않을 수 있기 때문이다. 하지만 상기 범위를 다소 벗어나더라도 본 발명의 실시가 불가능한 것으로 되는 것은 아니므로 본 발명은 이들 범위의 균등영역도 포함한다.In the rowan granule tea of the present invention, the rowan extract is preferably added 3.22 to 9.22% by weight. If added to less than 3.22% by weight is not enough to exhibit the functionality of the rowan, when it exceeds 9.22% by weight because the characteristic of rowan is strong and may not be desirable in terms of palatability. However, since the invention is not impossible even if somewhat out of the above range, the present invention includes equivalent areas within these ranges.

본 발명의 바람직한 실시예에서는 마가목 추출물은 44 Brix 정도의 농축액 형태로 제공되어진다. 이러한 농축액은 마가목을 열수추출하는 경우 마가목 중량에 대해 물을 대략 5∼10배 정도 첨가하고 70℃∼90℃ 정도로 5∼12시간 동안 수회 반복 추출하고, 추출된 마가목을 압착하여 잔사는 제거한 상태의 추출물을 대략 40∼45Brix 정도로 농축시켜 얻을 수 있다. 본 발명은 마가목 추출물을 44 Brix 정도로 농축한 것을 실시하고 있지만 이는 어디까지나 본 발명의 바람직한 일실시예에 불과할 뿐 이를 다소 벗어나는 수준의 마가목 농축액의 실시가 불가능함을 의미하지는 아니한다.In a preferred embodiment of the present invention, the rowan extract is provided in the form of a concentrate of about 44 Brix. When the concentrated liquid is extracted from the rowan, hot water is added about 5 to 10 times the weight of the rowan and extracted several times for 5 to 12 hours at about 70 ° C to 90 ° C, and the extracted rowan is compressed to remove the residue. The extract can be obtained by concentrating approximately 40-45 Brix. The present invention is carried out to concentrate the rowan extract to about 44 Brix, but this is only a preferred embodiment of the present invention to the extent that does not mean that the implementation of the mountain ash concentration slightly beyond this.

본 발명의 마과목 과립차의 제조방법은The method for producing granules granule tea of the present invention

마가목을 세척하고 물기를 제거한 후 분쇄하는 단계와,Washing and drying the rowan, and then grinding

분쇄한 마가목을 추출하고 농축하는 단계와,Extracting and concentrating the ground rowan,

농축된 마가목 추출물과 부재료를 혼합하는 단계와,Mixing the concentrated rowan extract and subsidiary material,

농축된 마가목 추출물과 부재료의 혼합물을 과립화하는 단계를 포함한다.Granulating the mixture of concentrated rowan extract and submaterial.

본 발명의 마가목 과립차에 있어서, 주재료인 마가목 추출물은 잎, 줄기, 뿌리 중에서 선택된 어느 하나로부터 추출하거나 또는 둘 이상이 균일하게 혼합된 혼합물로부터 추출할 수 있다.In the rowan granule tea of the present invention, the rowan extract as the main material can be extracted from any one selected from the leaves, stems, roots or from a mixture of two or more uniformly mixed.

본 발명의 마가목 추출물은 공지의 추출방법을 이용해 추출하는 것으로 충분하며 특별한 한정을 요하지는 아니한다. 따라서 공지의 열수추출 또는 유기용매 예를 들면 알콜류 등을 이용한 추출 등이 모두 이에 해당될 수 있다. 한편 마가목에 함유되어 있는 유용한 성분의 추출 효과를 향상시키기 위해 열수추출 및 알콜류 등을 이용한 유기용매 추출을 병행하여 실시할 수 있다.Rowan extract of the present invention is sufficient to extract using a known extraction method and does not require a special limitation. Therefore, known hot water extraction or extraction using an organic solvent, for example, alcohols and the like may all correspond to this. On the other hand, in order to improve the extraction effect of useful components contained in rowan may be carried out in parallel with the extraction of organic solvent using hot water extraction and alcohols.

본 발명에서 마가목 추출물은 40∼45Brix 정도로 농축하고 이 농축액 3.22∼9.22 중량%를 주재료로 하고 부재료로 각종 당류 예를 들면, 유당, 정제포도당, 솔비톨 등과 함께 각종 추출물 및 농축물 예를 들면 대추농축물 등을 포함할 수 있다. 또한 차의 관능성을 향상시키기 위해 향료를 첨가할 수 있다. 이러한 향료는 일반적으로 차의 관능성을 향상시킬 수 있는 공지의 향료 성분을 사용할 수있다.In the present invention, rowan extract is concentrated to about 40 to 45 Brix, and the concentrate is 3.22 to 9.22% by weight. And the like. Also, flavoring may be added to improve tea functionality. Such fragrances can generally use known fragrance ingredients which can improve tea functionality.

상기 부재료의 첨가량은 당업자에 의해 적의 선택가능한 사항으로 특별한 한정을 요하지는 않는다. 예를 들면 본 발명에서 부재료로서 유당 17.23 중량%, 정제포도당 61.75∼67.75 중량%, 솔비톨 8.7 중량%, 대추농축물 2.26 중량%, 향료 0.84 중량%를 첨가할 수 있다.The addition amount of the submaterial is a matter that can be appropriately selected by those skilled in the art and does not require any particular limitation. For example, in the present invention, 17.23 wt% of lactose, 61.75 to 67.75 wt% of refined glucose, 8.7 wt% of sorbitol, 2.26 wt% of jujube concentrate, and 0.84 wt% of fragrance may be added.

이하 본 발명은 다음의 실험예, 실시예 및 시험예에 의하여 설명하고자 한다. 그러나 이들은 본 발명의 일예로서 이들에 의해 본 발명의 권리범위가 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described by the following experimental examples, examples and test examples. However, these are only examples of the present invention, and the scope of the present invention is not limited thereto.

<실험예 1> 마가목의 정상세포독성 및 돌연변이유발 측정Experimental Example 1 Measurement of Cytotoxicity and Mutagenesis of Rowan

마가목의 잎, 줄기, 열매에 대하여 정상세포독성은 세포 단백질을 염색하여 세포의 증식이나 독성을 측정하는 SRB-assay으로 측정하고, 돌연변이유발은 Rec-assay으로 측정하여 그 결과를 아래의 표 3에 정리하여 나타내었다.Normal cytotoxicity against leaves, stems and fruits of rowan was measured by SRB-assay, which measured cell proliferation and toxicity by staining cellular proteins, and mutagenesis was measured by Rec-assay. In summary.

상기에서 정상세포에 대한 세포독성 측정에서는 인간 정상 간 세포(WRL-68)를 이용하였다. 세포 배양에 사용된 기본배지는 RPMI 1640 (GIBCO, USA)에서 10%를 첨가하여 배양하였다. 세포의 초기 농도는 4×10⁴cells/ml의 농도로 조절하여 96 well tissue culture microplate에 100 ㎕/well씩 접종하여 사용하였다.Human normal liver cells (WRL-68) were used in the cytotoxicity measurement for normal cells. The basal medium used for cell culture was cultured by adding 10% in RPMI 1640 (GIBCO, USA). The initial concentration of the cells was adjusted to a concentration of 4 × 10⁴ cells / ml was used to inoculate 100 ㎕ / well in 96 well tissue culture microplate.

실험 대상 세포를 2-3×10⁴cell/ml의 농도로 조절 후 96 well tissue culture micrqplate의 각 well에 100㎕의 세포를 포함하는 배지를 분주하여 37℃,5% CO₂배양기(incubator)에서 24시간 배양한 후 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 각각 1%의 농도로 100㎕씩 첨가한 후 48시간 배양하였다. 배양 후 염색처리(SRB)를 한 다음 540nm에서 microplate reader를 이용하여 각 웰(well)의 흡광도를 측정하고 그 평균치를 아래의 표 3에 나타내었다.After adjusting the cells to a concentration of 2-3 × 10 μs cells / ml, incubate the medium containing 100 μl of cells into each well of the 96 well tissue culture micrqplate and incubate in 37 ° C. and 5% CO₂ incubator for 24 hours. Then, the leaves, stems and berries of rowan were added in 100% each of the extract of the hot water extract in a conventional manner and incubated for 48 hours. After incubation and staining (SRB), the absorbance of each well was measured using a microplate reader at 540 nm, and the average is shown in Table 3 below.

돌연변이유발 측정은 다음과 같이 실험하였다.Mutagenesis measurements were performed as follows.

Rec-assay법에 의하여 균주를 프랑카 자니(Franca Zani, Italy)로부터 분양받은 바실러스 서브틸리스 PB 1652 rec+(repair proficient)와 PB 1791 rec-(repair deficient)이며 동결건조된 이 균주를 클린벤치에서 메스를 이용하여 영양아가(nutrient agar)를 고화 시킨 페트리디쉬에 접종시킨 후 24∼48시간 배양을 하였다. 배양이 완료되면 멸균된 TSB 액체 배지에 1백금이 취하여 37℃에서 24시간 배양하여 실험에 사용하였다.Bacillus subtilis PB 1652 rec + (repair proficient) and PB 1791 rec- (repair deficient), which were distributed from Franca Zani, Italy by the Rec-assay method, were scrubbed in cleanbenches. Inoculated in a Petri dish solidified nutrient agar (nutrient agar) was incubated for 24 to 48 hours. When the incubation was completed, platinum was added to sterile TSB liquid medium and incubated at 37 ° C. for 24 hours to use in the experiment.

배양이 완료된 0.1㎖ spore 액이 첨가된 soft broth agar 10㎖를 페트리디시에 분주하여 고화시킨 후 페이퍼디스크를 올려놓고 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 각각 1%의 농도로 20㎕씩 첨가하고, 대조구인 MNNG는 10㎕ 접종하고 37℃에서 12∼24시간 배양한 후 돌연변이원성 및 항돌연변이원성을 측정하였다.10 ml of soft broth agar added with 0.1 ml spore solution was added to the petri dish and solidified. Then, the paper disk was placed and the extracts of rowan leaves, stems and fruits were extracted in the usual manner. 20 μl each was added, and 10 μl of the control MNNG was inoculated and incubated at 37 ° C. for 12 to 24 hours to measure mutagenicity and antimutagenicity.

돌연변이원성은 무균 상태인 clean-bench하에서 여러 돌연변이원성 물질 중 강한 돌연변이원 물질인 MNNG(2㎍/㎕)를 돌연변이원성(DNA-damaging activity) 대조구로 하여 20㎍/paper disc의 양으로 멸균 처리된 paper disc에 첨가하였고 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 각각 1%의 농도로 4∼100㎕/paper disc가 되도록 첨가하고 rec(+)균과 rec(-)균에 의해 형성된 억제영역(㎝)의 차이로 돌연 변이원성을 측정하였다.The mutagenicity was sterilized in 20 µg / paper disc using a strong mutagenic substance MNNG (2 µg / µl) as a DNA-damaging activity control under sterile clean-bench. To the disc, add the leaves, stems and fruits of rowan, and extract the hot water extract in the usual manner to 4-100 μl / paper disc at a concentration of 1%, respectively, by rec (+) and rec (-) bacteria. Mutagenicity was measured by the difference in the suppressed area (cm) formed.

항돌연변이원성은 돌연변이원성을 확인한 후에 MNNG(10㎍/p.disc)와 마가목 추출물(50, 100㎍/p.disc)을 1 : 1 (10㎕:10㎕)로 혼합하여 돌연변이원성 측정과 같은 방법으로 배양한 후 각기 형성된 억제영역을 비교하여 각 추출물이 돌연변이원 물질인 MNNG의 돌연변이원성을 어느 정도 억제하는가를 rec(+)균과 rec(-)균의 차이영역(㎝)과 차이율(sample+MNNG / MNNG)로 나타내었다. 대조구는 MNNG만 처리한 것으로 하였다. 그 결과를 다음의 표 3에 나타냈다.Antimutagenicity was determined by mutagenicity and then mixed with MNNG (10µg / p.disc) and Rowan extract (50, 100µg / p.disc) in 1: 1 (10µl: 10µl). After cultivation by means of the comparison of the inhibitory regions formed by each of the extract to determine the degree of mutagenicity of MNNG mutagenic material, the difference between the rec (+) and rec (-) bacteria (cm) and the difference rate ( sample + MNNG / MNNG). The control was treated only with MNNG. The results are shown in Table 3 below.

표 3. 마가목에 대한 정상세포독성 및 돌연변이유발 측정(%/mg/㎖)Table 3. Normal cytotoxicity and mutagenesis measurements for rowan (% / mg / mL)

구 분division 농 도(%)Concentration (%) 정상세포독성Normal cytotoxicity 돌연변이유발Mutagenesis 마가목rowan leaf 1.01.0 1818 1 이하1 or less 줄기stem 1.01.0 2222 1 이하1 or less 열매Fruit 1.01.0 2020 1 이하1 or less 효과 기준Effect criteria 50% 이상50% or more 1 이상1 or more 검정방법Test method SRB-assaySRB-assay Rec-assayRec-assay

상기 표 3에서처럼 마가목은 특히 잎 부위가 정상세포에 대한 독성이 미약하여 정상세포독성 관련 특성이 우수하고, 돌연변이 유발에 대해서는 마가목의 잎, 줄기 및 열매에 대해서 유의적인 차이가 없음을 알 수 있다.As shown in Table 3, the rowan leaves are particularly poor in toxicity to normal cells and excellent in normal cytotoxicity-related properties, it can be seen that there is no significant difference in the leaves, stems and berries of the rowan for mutagenesis.

<실험예 2> 마가목에 대한 암세포 억제 측정Experimental Example 2 Measurement of Cancer Cell Inhibition on Rowan

마가목의 잎, 줄기, 열매에 대하여 암세포 억제율을 SRB-assay으로 측정하고 그 결과를 아래의 표 4에 정리하여 나타내었다.Cancer leaf inhibition rate of the leaves, stems and berries of the rowan was measured by SRB-assay and the results are summarized in Table 4 below.

암세포 억제율 실험에 있어서 암세포는 유방암 세포 MCF-7, 폐암 세포 A549, 간암 세포 Hep3B를 사용하였다.In the cancer cell inhibition rate experiment, the cancer cells used were breast cancer cells MCF-7, lung cancer cells A549, and liver cancer cells Hep3B.

각각의 암세포 초기 농도는 4×10⁴cells/ml의 농도로 조절하여 96 well tissue culture microplate에 100 ㎕/well씩 접종하여 사용하였다.The initial concentration of each cancer cell was adjusted to a concentration of 4 × 10 μs cells / ml and used to inoculate 100 μl / well in 96 well tissue culture microplate.

실험 대상 세포를 2-3×10⁴cell/ml의 농도로 조절 후 96 well tissue culture micrqplate의 각 well에 100㎕의 세포를 포함하는 배지를 분주하여 37.5℃, 5% CO₂배양기(incubator)에서 24시간 배양한 후 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 각각 1%의 농도로 100㎕씩 첨가한 후 48시간 배양하였다. 배양 후 염색처리(SRB)를 한 다음 540nm에서 microplate reader를 이용하여 각 well 흡광도를 측정하고 그 평균치를 아래의 표 4에 나타내었다.After adjusting the cells to a concentration of 2-3 × 10 μs cells / ml, the medium containing 100 μl of cells was dispensed into each well of the 96 well tissue culture micrqplate and incubated for 24 hours in a 37.5 ° C., 5% CO₂ incubator. Then, the leaves, stems and berries of rowan were added to the extract of hot water in a conventional manner, each 100 μl of a concentration of 1% and incubated for 48 hours. After incubation and staining treatment (SRB) and then measured the absorbance of each well using a microplate reader at 540nm and the average is shown in Table 4 below.

표 4. 마가목에 대한 암세포 억제율(%/mg/㎖)Table 4. Cancer cell inhibition rate (% / mg / ml) for rowan

구 분division 농 도(%)Concentration (%) 유방암(MCF-7)Breast Cancer (MCF-7) 폐 암(A549)Lung Cancer (A549) 간 암(Hep3B)Liver Cancer (Hep3B) 마가목rowan leaf 1.01.0 7676 8181 6565 줄기stem 1.01.0 8080 8383 7676 열매Fruit 1.01.0 8484 8080 8686 효과기준Effect criteria 50% 이상50% or more 50% 이상50% or more 50% 이상50% or more 검정방법Test method SRB-assaySRB-assay SRB-assaySRB-assay SRB-assaySRB-assay

상기 표 4에서처럼 유방암세포 및 폐암세포의 억제율에 대해서는 마가목의 잎, 줄기 및 열매에 대해서 유의적인 차이가 없으나 간암세포의 억제율에서는 마가목 열매가 제일 우수한 특성을 나타내고 있음을 알 수 있다.As shown in Table 4, the inhibition rate of breast cancer cells and lung cancer cells has no significant difference in the leaves, stems and fruits of rowan, but the rowan fruit shows the best characteristics in the inhibition rate of liver cancer cells.

<실험예 3> 마가목에 대한 성인병 관련 특성 측정Experimental Example 3 Measurement of Adult Disease-Related Characteristics of Rowan

마가목의 잎, 줄기, 열매의 첨가에 따른 혈당강하, 고혈압저해능, 간기능개선, 면역활성 및 항산화활성과 같은 성인병 관련 특성을 측정하고 그 결과를 아래의 표 5에 나타내었다.The characteristics of geriatric diseases such as hypoglycemia, hypertension inhibition, hepatic function improvement, immune activity and antioxidant activity according to the addition of leaves, stems and fruits of rowan were measured and the results are shown in Table 5 below.

(1)혈당강하 측정(1) Blood sugar drop measurement

혈당강하 측정은 생체내에서 혈당상승의 결정적인 역할을 하는 α-글루코시다제(α-glucosidase)를 이용하여 실험을 수행하였다. 먼저 효소를 10mM PIPES 버퍼에 용해시켜 효소액을 제조하고 이 효소액 10㎕, 20mM 말토오즈 40㎕와 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 1%의 농도로 각각 10㎕를 혼합하여 최종 부피를 60㎕로 혼합한 후 37℃에서 20분간 배양하였다. 반응액 60㎕에 1㎖ DNS 시약을 첨가하고 100℃ 물에서 열탕처리(10분)하여 반응을 정지시킨 후에 540nm에서 흡광도를 측정하여 효소 반응으로 생성된 환원당을 정량하여 효소활성 저해율을 계산하였다.The hypoglycemic measurement was performed using α-glucosidase, which plays a decisive role in blood glucose elevation in vivo. First, enzyme was prepared by dissolving the enzyme in 10 mM PIPES buffer, and 10 µl of this enzyme solution, 40 µl of 20 mM maltose and 10 µl of the extract of hot water extracted from rowan leaves, stems, and berries in the usual manner at 1% concentration. The final volume was mixed with 60 μl and incubated at 37 ° C. for 20 minutes. 1 ml DNS reagent was added to 60 µl of the reaction solution, and the reaction was stopped by boiling water treatment (10 minutes) at 100 ° C. water, and then absorbance was measured at 540 nm to quantify the reducing sugar produced by the enzymatic reaction to calculate the enzyme activity inhibition rate.

(2)고혈압 저해능(2) hypertension inhibitory ability

ACE(angiotensin converting enzyme)는 고혈압을 유도하는 효소이므로 이 효소의 억제 활성을 측정하기 위해 ACE 시약을 사용하였다. 실험 전에 모든 반응물을 37℃로 유지시켜 놓은 후 37℃ 증류수 10㎖에 ACE 시약 1바이알을 용해시키고 1㎖씩 취하여 튜브에 넣었다. 각 튜브에 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 1% 농도의 추출물과 ACE 캘리브레이터를 100㎕씩 첨가한 후 37℃에서 5분간 반응시켜 340nm에서 흡광도를 측정하여 이것을 초기 A 값으로 정하고 다시 5분이 지난 후 측정한 흡광도를 최종 A라 정하였다.Since ACE (angiotensin converting enzyme) is an enzyme that induces hypertension, ACE reagent was used to measure the inhibitory activity of this enzyme. Before the experiment, all the reactants were maintained at 37 ° C., 1 vial of ACE reagent was dissolved in 10 ml of 37 ° C. distilled water, and 1 ml each was taken into a tube. 100 μl of 1% extract and ACE Calibrator, extracted with rowan leaves, stems and fruits, were added to each tube in the usual manner, and then reacted at 37 ° C. for 5 minutes to measure absorbance at 340 nm. After another 5 minutes, the absorbance was determined as final A.

대조구로는 추출물 대신 증류수 100㎕를 첨가한 것으로 하였다. Control의 ACE(U/L) 값은 아무 것도 첨가하지 않았을 때의 흡광도 변화를 측정한 것으로 하였으며 ACE의 활성 계산은 다음 공식에 준하여 산출하여 그 결과를 아래의 표 5에 나타냈다.As a control, 100 μl of distilled water was added instead of the extract. The ACE (U / L) value of the control was measured by the change in absorbance when nothing was added. The activity calculation of the ACE was calculated according to the following formula and the results are shown in Table 5 below.

ACE (U/L) = (Initial A - Final A)test/ (Initial A - Final A)control×ACE (U / L) = (Initial A-Final A) test / (Initial A-Final A) control ×

active of ACE reagent (50U/L)active of ACE reagent (50U / L)

(3)간기능 개선(3) liver function improvement

해독작용 정도를 측정하기 위하여 간의 중요 해독기전 중의 하나인 GST(gultathion-S-transferase)의 활성을 측정하였다. 조제된 반응시약에 아무것도 첨가하지 않은 반응액을 대조구로 하였으며, 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 각각 1%의 농도로 첨가하여 37℃에서 5분간 반응시킨 다음 기질로서 1-chloro-2,4-dinitro benzene을 첨가한 후 다시 37℃에서 2분간 반응시켰다. 반응후 20% TCA를 가하여 반응을 종결시키고 원심분리한 후 상등액을 340nm에서 흡광도를 측정한 뒤 다음과 같이 GST의 specific activity와 활성율을 계산하여 다음의 표 5에 나타내었다.In order to measure the degree of detoxification, the activity of GST (gultathion-S-transferase), one of the liver's important detoxification mechanisms, was measured. A reaction solution was added to the prepared reaction reagent as a control, and the extract of rowan leaves, stems and berries in the usual manner was added at a concentration of 1% and reacted at 37 ° C. for 5 minutes, followed by 1 as a substrate. After the addition of -chloro-2,4-dinitro benzene it was reacted again at 37 ℃ for 2 minutes. After the reaction, 20% TCA was added to terminate the reaction, and centrifuged. The supernatant was measured for absorbance at 340 nm, and the specific activity and activity ratio of GST were calculated as shown in Table 5 below.

Total activity (units) = (A340/ 9.6) × 희석배수 × (3ml / 0.1) ×Total activity (units) = (A 340 / 9.6) × Dilution factor × (3ml / 0.1) ×

crude extract(㎖)crude extract (ml)

Specific activity ( units/㎖ protein ) = total activity / total proteinSpecific activity (units / ml protein) = total activity / total protein

활성율 (%) = specific activitytest/ specific activitycontrol× 100% Activity = specific activity test / specific activity control × 100

(4)면역활성(4) immune activity

실험 면역 세포주 Raji(RPM1-1640 medium)을 접종하여 세포 정상 생육기에 도달(7일 정도 소요)시킨 후 96-well Plate(5×104Cell/㎖로 농도 조절한 배지 100㎕/well)를 37℃에서 5% CO2상태로 24시간 배양하였다. 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물을 각각 1%의 농도로 100㎕ 시료를 투여한 후 37℃에서 5% CO2상태로 48시간 배양한 후 상등액을 제거하고 차가운 10%(w/v) TCA(trichloroacetic acid) 100㎕를 가하였다. 4℃에서 1시간 동안 방치한 후 증류수로 4∼5회 세척하여 TCA를 제거하고 실온에서 플레이트(plate)를 건조한 뒤 각 웰에 1%(v/v) 초산에 녹인 0.4%(w/v) SRB용액을 100㎕씩 첨가하고 상온에서 30분 동안 염색시켰다.After inoculating the experimental immune cell line Raji (RPM1-1640 medium) to reach the normal cell growth period (takes about 7 days), 96-well plate (100 μl / well of medium adjusted to 5 × 10 4 Cells / ml) was 37 Incubated for 24 hours at 5 ℃ CO 2 state. 100 µl samples of 1% concentrations of the extracts of rowan leaves, stems, and fruits were extracted in the usual manner, and then cultured for 48 hours at 37 ° C. with 5% CO 2 , and then the supernatant was removed and cold 10% ( w / v) 100 μl of trichloroacetic acid (TCA) was added. After standing at 4 ° C. for 1 hour, washing with distilled water 4-5 times to remove TCA and drying the plate at room temperature, 0.4% (w / v) dissolved in 1% (v / v) acetic acid in each well. 100 μl of SRB solution was added and stained at room temperature for 30 minutes.

결합되지 않은 SRB 염색액은 1% 초산으로 4∼5회 정도 세척, 건조시킨 후에 10mM Tris buffer 100㎕를 첨가하여 염색액을 녹여낸 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 암세포 생육도(%) = test/control × 100는 면역세포인 Raji의 생육을 증가시키는 정도를 측정하는 것이므로 세포생육이 증가함에 따라 면역력을 증가시킬 수 있음을 시사한다. 면역 기능 증강 효과는 인간 면역 세포인 B cell(Raji)을 이용하여 검증하였다. 세포의 생육은 10% FBS를 함유하는 RPMI 1640 배지에서 5% CO2, 37℃에서 배양하였으며, 면역 기능 증강 효과는 SRB assay를 사용하여 측정하여 그 결과를 표 5에 나타냈다.Unbound SRB dye solution was washed 4-5 times with 1% acetic acid and dried, and then 100 μl of 10mM Tris buffer was added to dissolve the dye solution and absorbance was measured at 540 nm. Cancer cell growth (%) = test / control × 100 is to measure the extent to increase the growth of immune cells Raji suggests that immunity can be increased as cell growth increases. Immune function enhancement effect was verified using B cell (Raji), a human immune cell. The growth of the cells was cultured at 5% CO 2 , 37 ℃ in RPMI 1640 medium containing 10% FBS, the immune function enhancement effect was measured using the SRB assay and the results are shown in Table 5.

(5)항산화활성(5) antioxidant activity

산화 억제 물질에 대한 검색으로 4.5×10-3리놀레인산 수용액 5㎖에 마가목 잎, 줄기 및 열매를 통상의 방법으로 열수추출한 추출물 1% 농도의 시료 0.5㎖를 각각 넣어서 50℃에서 배양시키면서 마개 달린 시험관에 1.1㎖씩 4일마다 채취하여 TCA 1㎖, TBA 2㎖, BHT 0.1㎖, SDS 1㎖를 각각 혼합하였다. 그런 다음 N2개스를 취입하고 밀봉한 후 비등 수욕조에서 15분간 배양하고 방냉시킨 후 1㎖ 초산과 2㎖ 클로로포름을 혼합 진탕후 2,500rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 532nm에서 흡광도를 측정하였다. 리놀레인산은 필수 지방산이며 다가 불포화 지방산으로 산화되기 쉽다. 그러한 리놀레인산에 대한 항산화성을 나타내는 해당식품은 노화 방지 및 성인병 예방에 효과적임을 시사한다. 산화억제물질에 대한 검색은 TBA법으로 측정하여 다음의 표 5에 나타냈다.In search of antioxidants, 5 ml of 4.5 × 10 -3 linoleic acid aqueous solution was added with 0.5 ml of 1% concentration of the extract of hot water extracted from rowan leaves, stems, and berries in the usual manner, and then incubated at 50 ° C. 1.1 ml of the test tube was collected every four days, and 1 ml of TCA, 2 ml of TBA, 0.1 ml of BHT, and 1 ml of SDS were mixed. Then, the mixture was blown with N 2 , sealed, incubated in a boiling water bath for 15 minutes, allowed to cool, mixed with 1 ml of acetic acid and 2 ml of chloroform, followed by centrifugation at 2,500 rpm for 10 minutes, and the supernatant was measured for absorbance at 532 nm. Linoleic acid is an essential fatty acid and easily oxidized to polyunsaturated fatty acids. These foods, which exhibit antioxidant properties against linoleic acid, are effective in preventing aging and preventing adult diseases. The search for the antioxidant inhibitor was measured by TBA method and shown in Table 5 below.

표 5. 마가목에 대한 성인병 관련 특성(%/mg/㎖)Table 5. Gender-Related Characteristics (% / mg / mL) for Rowan

구 분division 농 도(%)Concentration (%) 혈 당강 하Hypoglycemic 고혈압저해능Hypertension 간기능개 선Liver function improvement 면 역활 성Immunity 항산화활 성Antioxidant activity 마가목rowan leaf 1.01.0 5757 5757 210210 170170 5252 줄기stem 1.01.0 6565 6060 135135 200200 5959 열매Fruit 1.01.0 5757 4949 112112 140140 6060 효과기준Effect criteria 50% 이상50% or more 50% 이상50% or more 100% 이상More than 100% 100% 이상More than 100% 50% 이상50% or more 검정방법Test method α-glucosidaseα-glucosidase ACE systemACE system GST효소법GST enzyme method SRB-assaySRB-assay TBATBA

<실시예 1><Example 1>

세척하고 물기를 제거한 마가목 잎 1kg을 세절하고 0.5cm 이하의 크기로 분쇄하였다. 분쇄한 마가목 중량에 대해 물을 5배 첨가하고 70℃∼90℃ 정도로 5∼12시간 동안 수회 반복 추출하고, 추출된 마가목을 압착하여 잔사는 제거한 상태의 추출물을 44Brix 정도로 농축시킨 마가목 추출물을 얻었다.After washing and draining the dried leaves 1kg was crushed to a size of 0.5cm or less. Water was added 5 times to the weight of the crushed mountain ash, and extracted repeatedly for 5 to 12 hours at about 70 ℃ ~ 90 ℃, and the extracted mountain ash was compressed to obtain a rowan extract concentrated to 44Brix of the residue removed.

주재료로서 44Brix로 농축시킨 마가목 추출물 9.22 중량%와 부재료로서 유당 17.23 중량%, 정제포도당 61.75 중량%, 솔비톨 8.7 중량%, 대추농축물 2.26 중량%, 향료 0.84 중량%를 혼합하여 공지의 방법으로 마가목 과립차를 제조하였다.Rowan granule tea with 9.22% by weight of rowan extract concentrated as 44Brix as main ingredient, 17.23% by weight lactose, 61.75% by weight refined glucose, 8.7% by weight sorbitol, 2.26% by weight jujube concentrate, 0.84% by weight flavor. Was prepared.

<실시예 2><Example 2>

주재료로서 44Brix로 농축시킨 마가목 추출물 6.22 중량%와 부재료중 정제포도당 64.75 중량%를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 마가목 과립차를 제조하였다.A rowan granule tea was prepared in the same manner as in Example 1, except that 6.22% by weight of rowan extract concentrated as 44Brix and 64.75% by weight of refined glucose in the submaterial were used as main ingredients.

<실시예 3><Example 3>

주재료로서 44Brix로 농축시킨 마가목 추출물 3.22 중량%와 부재료중 정제포도당 67.75 중량%를 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 마가목 과립차를 제조하였다.A rowan granule tea was prepared in the same manner as in Example 1, except that 3.22% by weight of rowan extract concentrated as 44Brix and 67.75% by weight of refined glucose in subsidiary materials were used as main ingredients.

<시험예><Test Example>

상기 실시예 1 내지 실시예 3의 방법으로 제조한 마가목 과립차의 품질특성으로서 브릭스(Brix), 색도, 용해도, 과립형성도, 제품수율 및 관능검사를 측정하고 그 결과를 아래의 표 6에 나타내었다.Brix, color, solubility, granularity, product yield and sensory test were measured as quality characteristics of the rowan granule tea prepared by the method of Examples 1 to 3 and the results are shown in Table 6 below. .

관능검사는 잘 훈련된 관능검사 요원 30인으로 하여금 색, 향, 맛 및 종합적인 기호도를 5점 척도법으로 측정하고 그 평균치를 나타내었다.The sensory test was performed by 30 well-trained sensory testers who measured color, aroma, taste, and overall acceptability on a five-point scale.

표 6. 마가목 과립차의 특성Table 6. Characteristics of rowan granule tea

처 리process BrixBrix 색도*Chromaticity * 용해도(sec)Solubility (sec) 과 립형성도Granulation degree 제품수율(%)Product yield (%) 관능검사**(1∼5)Sensory test ** (1 ~ 5) LL aa bb color incense flavor 종합Synthesis 실시예 1Example 1 10.810.8 53.8753.87 14.7114.71 52.0852.08 44 양호Good 8484 44 44 44 44 실시예 2Example 2 10.910.9 52.6052.60 15.7715.77 53.5353.53 44 양호Good 8585 55 44 55 55 실시예3Example 3 10.810.8 65.9465.94 9.489.48 46.0946.09 44 양호Good 8585 33 33 33 33

* L :(+)white, (-)black, a :(+)Red, (-)Green, b :(+)Yellow, (-)Blue* L: (+) white, (-) black, a: (+) Red, (-) Green, b: (+) Yellow, (-) Blue

** 1:아주 나쁘다, 2:나쁘다, 3:보통이다, 4:좋다, 5:아주 좋다** 1: Very bad, 2: Bad, 3: Normal, 4: Good, 5: Very good

본 발명은 마가목 추출물을 유효성분으로 포함하는 과립차를 제공하여 이를 쉽게 음용할 수 있도록 함으로써 마가목에 함유된 유용한 성분을 용이하게 섭취할 수 있다.The present invention can be easily ingested useful components contained in rowan by providing a granular tea containing the mountain ash extract as an active ingredient to make it easy to drink.

Claims (5)

마가목 추출물을 유효성분으로 포함하는 마가목 과립차.Rowan granules tea comprising rowan extract as an active ingredient. 제 1항에 있어서, 마가목 추출물은 40∼45Brix 정도의 농축액 3.22∼9.22 중량% 포함함을 특징으로 하는 마가목 과립차.The rowan granule tea according to claim 1, wherein the rowan extract comprises 3.22 to 9.22% by weight of a concentrate of about 40 to 45 Brix. 마가목을 세척하고 물기를 제거한 후 분쇄하는 단계와,Washing and drying the rowan, and then grinding 분쇄한 마가목을 추출하고 농축하는 단계와,Extracting and concentrating the ground rowan, 농축된 마가목 추출물과 부재료를 혼합하는 단계와,Mixing the concentrated rowan extract and subsidiary material, 농축된 마가목 추출물과 부재료의 혼합물을 과립화하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 마가목 과립차의 제조방법.A method for producing rowan granules, characterized in that it comprises the step of granulating a mixture of concentrated mountain ash extract and subsidiary material. 제 3항에 있어서, 마가목 추출물은 잎, 줄기, 뿌리 중에서 선택된 어느 하나로부터 추출하거나 또는 둘 이상의 혼합물로부터 추출하는 것을 특징으로 하는 마가목 과립차의 제조방법.The method for preparing rowan granule tea according to claim 3, wherein the rowan extract is extracted from one selected from leaves, stems, and roots or from a mixture of two or more. 제 3항에 있어서, 마가목 추출물은 40∼45Brix 정도의 농축액 3.22∼9.22 중량%를 주재료로 하고 부재료로서 유당 17.23 중량%, 정제포도당 61.75∼67.75 중량%, 솔비톨 8.7 중량%, 대추농축물 2.26 중량%, 향료 0.84 중량%를 포함함을 특징으로 하는 마가목 과립차의 제조방법.The ash extract according to claim 3, wherein the extract is about 40-45 Brix, 3.22-9.22% by weight of the main ingredient, 17.23% by weight lactose, 61.75-67.75% by weight of refined glucose, 8.7% by weight sorbitol, 2.26% by weight of jujube , Flavoring method of producing rowan granules tea comprising 0.84% by weight.
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