KR20010016420A - Sticker for dna isolation and isolation method thereby - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 DNA 채취용 스티커 및 이를 이용한 DNA 채취방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 혈액이나 모발의 필요없이 인체 피부로부터 떨어져나가 부착된 각질만을 용이하게 분리할 수 있음으로서 인체로부터 간편하게 유전자를 채취하고 이를 PCR 기술을 이용하여 증폭함으로서 친자확인, 범죄수사 등에 간편하게 이용할 수 있는 DNA 채취용 스티커 및 이를 이용한 DNA 채취방법에 관한 것이다.The present invention relates to a DNA collection sticker and a DNA collection method using the same, and more specifically, it is possible to easily separate only the keratin attached to the peel off from the human skin without the need for blood or hair, so that the gene can be easily collected from the human body. By amplifying this by using a PCR technique relates to a DNA sampling sticker that can be easily used for paternity identification, criminal investigation, etc. and a DNA collection method using the same.
일반적으로 DNA(deoxyribonucleic acid)는 인체내의 유전정보를 담고 있는 분자로서 인간의 23쌍 염색체내에 저장되어 있으며 유전정보의 측면에서 살펴보면 단백질을 코드하고 있는 엑손(exon)과 단백질 비코드 영역인 인트론(intron)으로 구성되어 있다. 특히, 상기 인트론 중 Alu 서열은 그 유전적 계보의 영향으로 개인마다 특이한 반복 패턴을 나타내므로 이 부위를 예를 들어 게놈 상에 흩어져 있는 유사 내지 동일한 짧은 서열(예컨데, 마이크로세털라이트(microsatellite) 또는 VNTR(Variable Number of Tandem Array)) 등을 검색하는 방법으로 조사하여 유전지문(finger print)으로 활용하고 있다.In general, DNA (deoxyribonucleic acid) is a molecule that contains genetic information in the human body and is stored in 23 human chromosomes. In terms of genetic information, exon and protein non-coding regions, introns, are encoded. ) In particular, the Alu sequence in the intron shows a repeating pattern that is unique to each individual under the influence of its genetic lineage, so that this region can be, for example, similar to identical short sequences scattered across the genome (eg, microsatellite or VNTR). (Variable Number of Tandem Array) is used to search and use it as a finger print.
상기한 인체로부터 DNA를 채취하는 기술로는 혈액이나 모발을 이용하는 방법이 종래에 알려져 왔다. 그러나 상기한 방법은 일반적으로 거부감을 줄 뿐만 아니라 그 절차가 복잡한 문제점이 있었다.As a technique for collecting DNA from the human body, a method using blood or hair has been known in the past. However, the above-mentioned method generally gives a sense of rejection and the procedure has a complicated problem.
한편, 인체로부터 각질이 수시로 용이하게 떨어진다는 점을 이용하여 스티커를 이용하여 DNA를 얻고자 할 경우 종래의 스티커는 그 접착성분으로부터 인체의 각질 즉, 인체의 DNA만이 분리되지 않는다는 문제점이 있었다. 이는 일반적으로 접착성분은 중합체이고 DNA 또한 중합체이므로 DNA를 분리해내는 조건에서 접착성분이 DNA와 함께 응고하여 서로 분리할 수 없었기 때문이다.On the other hand, when trying to obtain DNA by using a sticker using the fact that the keratin from the human body easily drops from time to time, the conventional sticker had a problem that only the human keratin, that is, the DNA of the human body is not separated from the adhesive component. This is because, in general, the adhesive component is a polymer and the DNA is also a polymer, and thus the adhesive component coagulates with the DNA and cannot separate from each other under the condition of separating the DNA.
본 발명은 상기한 문제점을 해결하고자 안출된 것으로서, 본 발명의 주요한 목적은 상기한 DNA 채취용 스티커로부터 DNA를 분리하는 방법 을 위한 DNA 채취용 스티커를 제공하는 데에 있다.The present invention has been made to solve the above problems, the main object of the present invention to provide a DNA collection sticker for the method of separating DNA from the DNA collection sticker.
본 발명의 부차적인 목적은 혈액이나 모발의 필요없이 인체 피부로부터 떨어져나가 부착된 각질만을 용이하게 분리할 수 있음으로서 인체로부터 간편하게 유전자를 채취하고 이를 일반적인 PCR 기술을 이용하여 증폭함으로서 친자확인, 범죄수사 등에 간편하게 이용할 수 있는 DNA 채취용 스티커로부터 DNA를 분리하는 방법을 제공하는 데에 있다.The secondary object of the present invention is to be able to easily separate only the attached keratin detached from the human skin without the need for blood or hair, so that genes can be easily collected from the human body and amplified using general PCR techniques to identify paternity and criminal investigation. The present invention provides a method for separating DNA from a DNA collection sticker that can be easily used.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 인체 성분으로부터 유전자를 채취·분석하는 방법에 있어서, 그 전단계로 EDTA(Ethylene Diamine Tetra Acetate), Tris, SDS(Sodium Dodecyl Sulphate)로 이루어진 도포액이 도포된 스티커를 인체 피부에 부착 및 탈착시키고 상기 도포액에 상기 탈착된 스티커를 30-45℃, 40-80분 동안 인큐베이션(incubation)한 후, 프로티나제 K(proteinase K)를 가하여 40-68℃에서 30-100분 동안 작용시킴을 특징으로 한다.In order to achieve the above object, the present invention is a method for collecting and analyzing genes from human components, the first step is a coating liquid consisting of EDTA (Ethylene Diamine Tetra Acetate), Tris, SDS (Sodium Dodecyl Sulphate) is applied The sticker is attached to and detached from the human skin and the desorbed sticker is incubated at 30-45 ° C. for 40-80 minutes, and then proteinase K is added to the coating solution at 40-68 ° C. It is characterized by acting for 30-100 minutes.
도 1 은 스티커로부터 DNA 를 분리하는 과정을 개략적으로 나타낸 도면이다.1 is a diagram schematically illustrating a process of separating DNA from a sticker.
이하, 단계별로 나누어 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by dividing step by step.
본 발명은 DNA 채취용 스티커를 제작하고 이를 이용하여 DNA를 채취하고 그것을 이용하여 유전자를 확인한다는 차원에서 대체로 다음 단계로 구성되어 있다.The present invention is generally composed of the following steps in terms of making a DNA collection sticker, using it to collect DNA and identifying genes using the same.
(1) 일반적으로 알려진 인체용 스티커의 일면에 EDTA(Ethylene Diamine Tetra Acetate), Tris, SDS(Sodium Dodecyl Sulphate)로 이루어진 도포액을 도포하여 본 발명의 DNA 채취용 스티커를 제조하는 단계.(1) a step of preparing a DNA collection sticker of the present invention by applying a coating solution consisting of EDTA (Ethylene Diamine Tetra Acetate), Tris, and SDS (Sodium Dodecyl Sulphate) on one surface of a generally known human sticker.
(2) 상기한 스티커를 인체 피부에 부착하였다가 분리함으로써 인체의 각질을 수득하는 단계.(2) obtaining the keratin of the human body by attaching and detaching the sticker on the human skin.
(3) 상기에서 수득한 인체의 각질을 처리하여 DNA 성분만을 채취하는 단계.(3) collecting only the DNA component by treating the keratin of the human body obtained above.
(4) 상기에서 수득한 DNA를 일반적인 공지기술인 PCR(Polymerase Chain Reaction)을 이용하여 증폭시키는 단계.(4) amplifying the DNA obtained above using polymerase chain reaction (PCR).
(5) 상기에서 수득한 DNA를 시료로 한 각종 유전자 및 개인의 유전적 구성의 확인방법의 적용 단계.(5) Application step of confirming the genetic constitution of various genes and individuals using DNA obtained above as a sample.
제 1단계: DNA 채취용 스티커의 제조 단계First step: manufacturing a sticker for DNA collection
본 발명에서 사용되는 스티커는 인체에 무해한 접착성분이 함유된 인체용 스티커로서 일반적으로 알려진 스티커를 사용한다. 상기 일반적인 인체용 스티커의 접착성분이 묻혀진 일면 위에 EDTA(Ethylene Diamine Tetra Acetate), Tris, SDS(Sodium Dodecyl Sulphate)로 이루어지는 액이 도포됨으로서 본 발명의 DNA 채취용 스티커가 제조된다.The sticker used in the present invention uses a sticker generally known as a sticker for a human body containing an adhesive that is harmless to the human body. The DNA collection sticker of the present invention is prepared by applying a liquid consisting of EDTA (Ethylene Diamine Tetra Acetate), Tris, and SDS (Sodium Dodecyl Sulphate) on one surface of the adhesive component of the general human sticker.
도포량은 상기 DNA 채취용 스티커가 인체에 접착되지 않을 정도로 과도하여서는 아니되며 반대로 접착성분과 인체 각질 성분이 서로 분리되지 않을 정도로 과소하여서도 아니된다. 즉, 접착표면의 70%-85% 범위가 상기 도포액으로 도포되어야 하며, 바람직하게는 75%로 하는 것이 좋다. 도포의 두께는 접착성분과 인체가 서로 닿지 않을 정도로 두꺼워서는 아니되는 바, 3mm 이하의 두께로 하여야 한다.The coating amount should not be excessive to the extent that the DNA collecting sticker is not adhered to the human body, and on the contrary, it should not be so small that the adhesive component and the human keratinous component are not separated from each other. That is, the 70% -85% range of the adhesive surface should be applied with the coating liquid, preferably 75%. The thickness of the coating should not be so thick that the adhesive and the human body do not touch each other. The thickness should be 3mm or less.
상기 도포액에서 EDTA는 세포막의 전체 구조를 유지하는데 필수적인 마그네슘이온을 제거하여 세포막을 약화시키고 DNA를 분해하는 세포 내 효소를 저해함으로써 DNA가 온전히 채취될 수 있도록 돕는 역할을 한다. 또한, Tris는 비독성이며 저렴하여 많이 사용하는 완충시스템이며, SDS 는 일종의 세제(detergent)로서 지질 분자를 제거함으로써 세포 용해(lysis)의 과정을 돕고 이에 의해 세포막의 해체를 유발하는 작용을 한다. 상기한 도포액의 각각의 조성물이 제 역할을 하려면 스티커에 도포되는 상기 도포액의 조성은 EDTA 0.05-0.1 mol, Tris 5-15 mmol 에 SDS 30-40 부피%가 되도록 SDS를 첨가하고 증류수를 가하여 전체 7000-8000ml가 되도록 하여야 하며, 바람직하게는 EDTA 0.1 mol, Tris 10 mmol 에 SDS 37.5 부피%가 되도록 SDS를 첨가하고 증류수를 가하여 전체 7500 ml가 되도록 함이 좋다.In the coating solution, EDTA serves to help the DNA to be collected completely by removing magnesium ions necessary to maintain the entire structure of the cell membrane, thereby inhibiting the cell membrane and inhibiting intracellular enzymes that break down DNA. In addition, Tris is a non-toxic, inexpensive, and widely used buffer system, and SDS is a kind of detergent that removes lipid molecules to help the cell lysis process, thereby inducing the dissolution of cell membranes. In order for each composition of the coating liquid to function, the composition of the coating liquid applied to the sticker is added to SDS in an amount of 30-40% by volume to 0.05-0.1 mol of EDTA and 5-15 mmol of Tris, followed by distilled water. The total amount of SDS should be 7000-8000 ml. Preferably, SDS is added to 0.1 mol of EDTA and 10 mmol of Tris to add 37.5% by volume of SDS, and distilled water is added to make 7500 ml.
제 2단계: 인체의 각질을 수득하는 단계Second step: obtaining keratin of human body
본 발명의 스티커는 인체의 어느 부위에든 접착하여도 무관하지만 바람직하게는 팔꿈치, 겨드랑이, 팔뚝, 복숭아 뼈나 얼굴 등 각질이 많이 생기는 부분에 적용하는 것이 바람직하다. 본 발명의 스티커는 접착시간에도 크게 구애되지 않으므로 접착 후 바로 떼어내도 적정량의 시료를 채취할 수 있다.The sticker of the present invention may be adhered to any part of the human body, but is preferably applied to a part where keratin is generated, such as elbow, armpit, forearm, peach bone or face. Since the sticker of the present invention is not particularly attached to the adhesion time, an appropriate amount of sample can be collected even if it is removed immediately after adhesion.
제 3단계: DNA 성분만을 채취하는 단계Step 3: extract only DNA components
DNA 성분만을 상기한 스티커로부터 수득한 인체의 각질을 처리하여 채취하는 방법은 본 발명의 핵심으로서 다음과 같은 순서로 이루어진다.The method for collecting and collecting the keratin of the human body obtained from the sticker described above with only the DNA component is performed in the following order as the core of the present invention.
i) 우선 스티커로부터 접착부위를 적절한 크기(약 4 cm x 6 cm)로 오려낸 후 상기 도포액과 같은 조성 및 성분비의 DNA 추출용액에 담근다. 이와 같이 같은 조성 및 성분비로 함은 스티커의 접착성분과 수득된 인체 각질 사이의 도포액이 DNA 추출용액에 용해됨으로서 스티커의 접착성분과 수득된 인체 각질 사이가 용이하게 분리되도록 하기 위함이다.i) First, the adhesive portion is cut out of the sticker into an appropriate size (about 4 cm x 6 cm) and then immersed in the DNA extraction solution of the same composition and composition ratio as the coating solution. The composition and the component ratio as described above are intended to facilitate separation between the adhesive component of the sticker and the obtained human keratin by dissolving the coating solution between the adhesive component of the sticker and the obtained human keratin in a DNA extraction solution.
상기한 도포 용액에 담겨진 상태로 30 ℃ 내지 45 ℃, 바람직하게는 37 ℃에서 40분 내지 80분, 더욱 바람직하게는 60분동안 인큐베이션(incubation)한다. 이는 30 ℃ 미만에서 인큐베이션할 경우 상기한 도포액, DNA 추출용액의 활성(activity)이 떨어져 그 만큼 상기한 스티커의 접착성분과 수득된 인체 각질 사이의 도포액이 DNA 추출용액에 용해되는 비율이 낮아지게 되므로서 결과적으로 인체 각질의 DNA 회수율이 60% 이하로 떨어지게 되어 분석하기 어려워지기 때문이다. 반대로 45℃를 초과하는 경우에는 중합체인 스티커의 접착성분까지 스티커로부터 DNA 추출용액으로 방출되고 도포액, DNA 추출용액의 활성(activity)도 떨어져 결과적으로 인체 각질의 DNA 회수량에 비해 접착성분의 회수량이 크게 증가하여 후술하는 PCR 증폭은 물론 DNA 분석도 할 수 없게 되기 때문이다.Incubate at 30 ° C. to 45 ° C., preferably at 37 ° C., for 40 minutes to 80 minutes, more preferably 60 minutes, in the application solution. This means that when incubated at less than 30 ° C., the activity of the coating solution and DNA extracting solution is lowered, so that the rate at which the coating solution between the adhesive component of the sticker and the obtained human keratin is dissolved in the DNA extracting solution is low. As a result, the DNA recovery rate of human keratin drops to less than 60%, making it difficult to analyze. On the contrary, when the temperature exceeds 45 ° C, the adhesive component of the sticker, which is a polymer, is released from the sticker to the DNA extraction solution, and the activity of the coating solution and the DNA extraction solution is also lowered. This is because the yield increased so much that PCR amplification described later and DNA analysis were not possible.
한편, 상기 40분 미만으로 인큐베이션할 경우 용해되는 시간이 짧아 스티커의 접착성분과 각질의 분리가 최종적으로 PCR 증폭 및 DNA 분석할 수 있을 정도까지 이르지 못하게 되며, 80분을 초과하게 될 경우 DNA추출과정에서 마지막 단계인 알콜처리에서 접착성분이 추출되기 때문에 PCR을 할 수 없게된다. 따라서, 이러한 인큐베이션 조건을 만족하는 것이 매우 중요하다.On the other hand, when incubating for less than 40 minutes, the dissolution time is so short that the separation of the adhesive component and the keratin of the sticker does not reach the point that can finally be PCR amplification and DNA analysis, and if it exceeds 80 minutes DNA extraction process In the last step of alcohol treatment, the adhesive component is extracted and PCR cannot be performed. Therefore, it is very important to satisfy these incubation conditions.
ii) 상기한 인큐베이션 후 단백질 분해 효소인 프로티나제 K(proteinase K)를 가하여 단백질을 제거한다. 이 때에 40-68℃에서 30-100분 동안 프로티나제 K를 작용시킨다. 바람직하게는 65℃, 90분이 좋다. 이는 100분을 초과하여 작용시킬 경우 피부로부터 함께 분리된 디에나제(Dnase)의 작용으로 채취하고자 하는 DNA의 양이 감소하기 때문이며, 30분 미만으로 할 경우 충분한 단백질 제거가 이루어지지 않기 때문이다. 한편, 40℃ 미만으로 하거나 68℃를 초과할 경우 온도에 민감한 단백질 제거효소인 상기 프로티나제 K의 활동이 감소되어 인체로부터 수득된 각질 등이 덩어리 상태로 머물러 있어 결과적으로 DNA 회수율이 떨어지게 되고 특히 68℃를 초과할 경우에는 분석하려는 DNA에 변성을 일으키게 된다.ii) After the incubation, proteinase K, a proteolytic enzyme, is added to remove the protein. At this time proteinase K is acted at 40-68 ° C. for 30-100 minutes. Preferably 65 degreeC and 90 minutes are good. This is because the amount of DNA to be collected decreases due to the action of DNAase which is separated from the skin when it is operated for more than 100 minutes, and when it is less than 30 minutes, sufficient protein is not removed. On the other hand, when the temperature is less than 40 ° C or higher than 68 ° C, the activity of the proteinase K, a temperature-sensitive protein scavenger, is reduced, resulting in a lump of keratin and the like obtained from the human body, resulting in a low DNA recovery rate. If it exceeds 68 ℃, it will cause denaturation of the DNA to be analyzed.
iii) 이하의 과정은 일반적으로 공지된 혈액 등을 이용해 DNA를 분석하기 위한 과정과 동일하다. 이하, 구체적으로 서술하면 다음과 같다.iii) The following process is generally the same as the process for analyzing DNA using a known blood or the like. Hereinafter, it is as follows if it describes concretely.
상기 용액에 페놀을 시료와 같은 부피로 가한후 원심분리시키면 층분리가 일어난다(1차 페놀 추출). 상층에 위치한 수층을 파이펫만으로 분리해 낸 후 이 분리액에 페놀:클로로포름(1:1) 용액을 같은 부피로 가하여 다시 원심분리시킨다(2차 페놀 추출). 상층을 다시 분리해낸 후 이 분리액에 클로로포름-이소아밀알코올(chloroform-isoamylalcohol)을 같은 부피로 가하고 다시 원심분리하여 3차 추출을 행한다. 여기서 얻어낸 시료에 나트륨이온과 같은 염 존재하에 99% 에탄올을 시료와 같은 부피로 가하여 - 20℃에서 원심분리하면 DNA가 침전을 형성한다(DNA 농축).To the solution, phenol was added to the same volume as the sample, followed by centrifugation to separate the layers (primary phenol extraction). The upper water layer is separated with a pipette only, and the resulting solution is centrifuged again by adding the same phenol: chloroform (1: 1) solution in the same volume (secondary phenol extraction). After the upper layer was separated again, chloroform-isoamylalcohol was added in the same volume and centrifuged again to carry out tertiary extraction. To the sample obtained, 99% ethanol was added in the same volume as the sample in the presence of a salt such as sodium ion, and centrifuged at −20 ° C. to precipitate DNA (DNA concentration).
제 4단계: PCR(Polymerase Chain Reaction)을 이용한 DNA 증폭 단계Fourth step: DNA amplification step using PCR (Polymerase Chain Reaction)
PCR 은 증폭시키고자 하는 DNA 시료에 대해 가닥분리 (denaturation), 프라이머와 결합 (annealing) 및 DNA 중합효소에 의한 신장 (extention) 을 반복하면서 106배 이상으로 표적 DNA 를 단시간 내에 증폭시키는 일반적인 공지기술이다.PCR is a general known technique that amplifies target DNA in a short time by 10 to 6 times or more while repeating denaturation, annealing with primers and extension by DNA polymerase to DNA samples to be amplified. to be.
따라서, 상기에서 수득한 DNA를 70% 에탄올로 세척한 후 건조시키고 TE 완충액에 용해시키고 이를 PCR(Polymerase Chain Reaction)을 이용하여 단시간 내에 상기 DNA를 증폭시킬 수 있다. 본 발명의 스티커로 채취한 DNA도 상기 PCR 기술에 의해 증폭할 수 있다. 본 발명에 따른 적용시 PCR 의 2 내지 3 사이클로도 효과적인 DNA 양을 수득할 수 있다.Therefore, the DNA obtained above can be washed with 70% ethanol, dried, dissolved in TE buffer and amplified in a short time using polymerase chain reaction (PCR). DNA extracted with the sticker of the present invention can also be amplified by the PCR technique. An effective amount of DNA can also be obtained with two to three cycles of PCR in the application according to the invention.
제 5단계: 각종 유전자 및 개인의 유전적 구성의 확인 단계The fifth step: identifying the genetic makeup of various genes and individuals
상기에서 수득한 DNA를 시료로 하여 여러가지 유전자 및 개인의 유전적 구성의 확인방법(genetic screening)을 적용시킬 수 있다. 이러한 유전적 구성의 특성을 이용하여 응용면에서 있어서 친자확인이나 범죄현장에서의 용의자 색출에 활용될 수 있다. 본 발명에 의해 채취한 DNA 는 이러한 유전 지문 검색시의 활용 외에도 유전질환의 검색에 사용될 수 있다. 여러가지 유전자 및 개인의 유전적 구성의 확인방법으로는 DNA 간의 혼성화 (hybridization) 원리를 이용한 서던 블롯팅(southern blotting) 이나 DNA 칩 등을 들 수 있다.Using the DNA obtained above as a sample, genetic screening of various genes and individuals can be applied. This genetic construct can be used to identify paternity or find suspects in crime scenes. The DNA collected by the present invention can be used for the detection of genetic diseases in addition to the use of such genetic fingerprint search. Methods of confirming the genetic makeup of various genes and individuals include Southern blotting or DNA chips using the hybridization principle between DNAs.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 다만, 본 발명은 이하의 실시예에 의하여 한정되어 해석되어서는 아니되며, 본 발명의 사상의 범위내에서 당업자에게 통상의 변화가 가능함은 물론이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, the present invention is not limited to the following examples and should not be interpreted, and it is obvious that ordinary changes are possible to those skilled in the art within the scope of the spirit of the present invention.
실시예 1Example 1
스티커의 제조예 및 인체 각질의 수득Production of stickers and obtaining human keratin
EDTA 0.1 mol, Tris 10 mmol 에 SDS 37.5 부피%가 되도록 SDS를 첨가하고 증류수를 가하여 전체 7500 ml가 되도록 한 도포액을 인체에 무해한 접착성분이 함유된 인체용 스티커의 일면 면적의 75%에 걸쳐 2mm의 두께로 도포하였다.0.1 mol of EDTA, 10 mmol of Tris, add SDS to 37.5% by volume, and add distilled water to make 7500 ml. 2mm over 75% of the surface area of the human sticker containing the adhesive. The thickness was applied.
상기 도포한 스티커를 손바닥에 접착하고 난 후 10분 후 다시 탈착하였다.The applied sticker was attached to the palm and then detached after 10 minutes.
실시예 2Example 2
스티커에 부착된 인체의 각질부분으로부터 DNA 의 분리과정Separation process of DNA from keratinous part of human body attached to sticker
상기 실시예 1의 스티커를 4 cm x 6 cm의 사각형으로 오려낸 후 상기 실시예 1의 도포액과 같은 조성 및 성분비의 도포 용액에 담가 37 ℃에서 60분동안 인큐베이션(incubation)하였다. 인큐베이션 후 단백질 분해 효소인 프로티나제 K(proteinase K) 를 가하여 65℃에서 90분 동안 프로티나제 K를 작용시켰다.The sticker of Example 1 was cut out into a square of 4 cm x 6 cm and then immersed in a coating solution having the same composition and composition as the coating solution of Example 1 and incubated at 37 ° C. for 60 minutes. After incubation, proteinase K, a proteolytic enzyme, was added to react proteinase K for 90 minutes at 65 ° C.
실시예 3Example 3
상기한 실시예 1, 2의 실험을 스티커의 접착성분 조성 및 인큐베이션 온도, 시간, 프로티나제 K (proteinase K) 의 작용 시간, 온도를 달리하여 실험하였으며, 그 결과를 이하의 표로 나타내었다.The experiments of Examples 1 and 2 described above were carried out by varying the adhesive composition composition, incubation temperature, time, action time and temperature of proteinase K (proteinase K) of the sticker, and the results are shown in the following table.
* DNA 의 채취량은 자외선 흡광의 정도로 결정하였다. 260nm 에서의 흡광도가 1인 경우 ds DNA 가 ml 당 50 μg 에 해당하는 것을 기준으로 하였다.* The amount of DNA collected was determined to the extent of ultraviolet absorption. The absorbance at 260 nm was based on the equivalent of 50 μg of ds DNA per ml.
* DNA 의 채취량은 자외선 흡광의 정도로 결정하였다. 260nm 에서의 흡광도가 1인 경우 ds DNA 가 ml 당 50 μg 에 해당하는 것을 기준으로 하였다.* The amount of DNA collected was determined to the extent of ultraviolet absorption. The absorbance at 260 nm was based on the equivalent of 50 μg of ds DNA per ml.
* DNA 의 채취량은 자외선 흡광의 정도로 결정하였다. 260nm 에서의 흡광도가 1인 경우 ds DNA 가 ml 당 50 μg 에 해당하는 것을 기준으로 하였다.* The amount of DNA collected was determined to the extent of ultraviolet absorption. The absorbance at 260 nm was based on the equivalent of 50 μg of ds DNA per ml.
* DNA 의 채취량은 자외선 흡광의 정도로 결정하였다. 260nm 에서의 흡광도가 1인 경우 ds DNA 가 ml 당 50 μg 에 해당하는 것을 기준으로 하였다.* The amount of DNA collected was determined to the extent of ultraviolet absorption. The absorbance at 260 nm was based on the equivalent of 50 μg of ds DNA per ml.
* DNA 의 채취량은 자외선 흡광의 정도로 결정하였다. 260nm 에서의 흡광도가 1인 경우 ds DNA 가 ml 당 50 μg 에 해당하는 것을 기준으로 하였다.* The amount of DNA collected was determined to the extent of ultraviolet absorption. The absorbance at 260 nm was based on the equivalent of 50 μg of ds DNA per ml.
상기한 바와 같이 본 발명의 DNA 채취용 스티커 및 이를 이용한 DNA 채취방법은 혈액이나 모발의 필요없이 인체 피부로부터 떨어져나가 부착된 각질만을 용이하게 분리할 수 있음으로서 인체로부터 간편하게 유전자를 채취하고 이를 PCR 기술을 이용하여 증폭함으로서 친자확인, 범죄수사 등에 간편하게 이용할 수 있는 효과를 갖는다.As described above, the DNA collecting sticker of the present invention and the DNA collecting method using the same can easily separate only the keratin attached to the human skin without the need for blood or hair, thereby easily collecting the gene from the human body and PCR technology. By amplifying using has the effect that can be easily used for paternity identification, criminal investigation, and the like.
즉, 본 발명에 의한 특수한 스티커를 피부에 부착하였다가 분리하고, 이로부터 효과적으로 DNA 를 추출함으로써 간편하게 개인의 유전자를 조사할 수 있다.In other words, by attaching and detaching a special sticker according to the present invention on the skin, and extracting DNA from it effectively, individual genes can be easily examined.
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