KR102602542B1 - 대마와 피부유래 유산균의 발효 기술에 의한 스포츠용 화장품 개발 - Google Patents

대마와 피부유래 유산균의 발효 기술에 의한 스포츠용 화장품 개발 Download PDF

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강원대학교산학협력단
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Abstract

본 발명은 대마 유산균 발효 추출물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 대마 유산균 발효 추출물과 상기 대마 유산균 발효 추출물을 이용한 항산화 또는 항염 용도를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

대마와 피부유래 유산균의 발효 기술에 의한 스포츠용 화장품 개발{Development of sports cosmetics by fermentation technology of hemp and skin-derived lactic acid bacteria}
본 발명은 대마 분쇄물에 물을 첨가한 후 추출하여 대마 추출물을 제조하는 단계; 상기 제조한 대마 추출물에 유산균을 접종하는 단계; 및 상기 유산균을 접종한 대마 추출물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 대마 발효 추출물의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 대마 발효 추출물과 상기 대마 발효 추출물을 이용한 화장료 조성물에 관한 것이다.
현대 의료기술의 발전은 평균 수명을 연장시키고 생활수준 향상으로 이어져 많은 사람들이 건강한 삶에 대한 관심을 높게 두고 있다. 또한, 환경 변화와 미용에 대한 관심도 함께 증대되어 화장품과 의약품이 연계된 코스메슈티컬(cosmeceutical) 시장과 함께 먹는 화장품 시장인 코스메틱푸드(cosmetic food)의 급격한 성장을 보이고 있다. 이와 같이 건강과 미용에 대한 관심이 증대되면서 천연물을 이용한 화장품 연구도 활발하게 진행되고 있다. 천연물 가운데 최근 대마의 효용성이 밝혀지면서 다양한 화장품이 개발되어 판매되고 있다.
대마(Cannabis)의 학명은 Cannabis sativa L. 이며 삼과에 속하는 일년생 초본으로서 우리나라와 중국에서는 섬유작물로서 재배되어 왔으며, 서양에서는 테르페노이드(terpenoid) 계통의 성분 물질인 카나비노이드(cannabinoids)의 이용을 위한 약용 식물로서 이용되어 온 식물이다.
현재 대마의 환각 성분으로 인한 제약으로 화장품 시장에서 점유율은 미미한 상황이나, 대마는 항산화, 면역력 강화, 동맥경화 예방, 고혈압 개선, 피부 미용 및 항암 작용 등의 효능이 있어 앞으로 고부가가치 제품의 원료로 각광받을 것이 예상된다.
특히 대마의 효능 가운데 미백효과와 주름 생성억제 효과에 대하여 실험연구를 통해 입증되어 다양한 화장품이 제작되어 소비자들이 사용하고 있지만, 대마 줄기에 피부유래 유산균을 활용한 발효공정으로 소재화하고 스포츠 화장품에 대한 개발한 연구는 전무한 실정이다.
한국등록특허 제2520221호에는 대마 추출물을 함유하는 피부 미백 및 주름 개선용 화장료 조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1198017호에는 대마 섬유를 포함하는 자외선 차단 및 지성 피부 조절용 조성물이 개시되어 있으나, 본 발명의 대마와 피부유래 유산균의 발효 기술에 의한 스포츠용 화장품 개발과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 대마와 피부 유래 유산균의 발효 기술을 이용한 대마 발효 추출물과 이를 이용한 스포츠용 화장품을 제조하기 위해, 추출, 유산균 선정, 발효 등의 제조조건을 최적화하여, 항산화 및 항염 활성이 증진되고, 스포츠용 화장품 제조에 적합한 대마 발효 추출물의 제조방법을 제공하는 데 있다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (1) 대마 분쇄물에 물을 첨가한 후 추출하여 대마 추출물을 제조하는 단계; (2) 상기 (1)단계의 제조한 대마 추출물에 유산균을 접종하는 단계; 및 (3) 상기 (2)단계의 균주를 접종한 대마 추출물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 대마 발효 추출물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 대마 발효 추출물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 대마 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 대마 발효 추출물은 항산화 및 항염 활성이 높고, 자극적이지 않으면서 화장품 제조에 적합한 제형을 지녀 다양한 기능성 화장품 개발에 유용하게 사용할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명의 대마 발효 추출물의 사진이다.
도 2는 대마 스포츠젤 사용 전과 후 피부 보습 효과를 비교한 그래프이다.
도 3은 대마 스포츠젤 사용 전과 후 피부 온도 변화를 비교한 그래프이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(1) 대마 분쇄물에 물을 첨가한 후 추출하여 대마 추출물을 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계의 제조한 대마 추출물에 유산균을 접종하는 단계; 및
(3) 상기 (2)단계의 유산균을 접종한 대마 추출물을 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 대마 발효 추출물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 대마 발효 추출물의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 대마는 대마잎, 대마 뿌리, 대마 줄기, 대마 꽃 및 대마 열매로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 부위를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 대마 줄기를 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 대마 발효 추출물의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 추출은 바람직하게는 대마 분쇄물에 물을 8~12배(v/w) 첨가한 후 90~110℃에서 50~70분 동안 추출할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 대마 분쇄물에 물을 10배(v/w) 첨가한 후 100℃에서 60분 동안 추출할 수 있다.
또한, 본 발명의 대마 발효 추출물의 제조방법에서, 상기 (2)단계의 유산균은 락토바실러스 플란타룸 균주 및 락토바실러스 파라플란타룸 균주일 수 있으며, 바람직하게는 상기 유산균은 주식회사 세바바이오텍에서 제공받았으며, 기탁번호가 KCTC14087BP인 락토바실러스 플란타룸 아종 세바-202(Lactobacillus plantarum subsp. shebah-202) 균주 및 기탁번호가 KCTC14088BP인 락토바실러스 파라플란타룸 아종 세바-401(Lactobacillus paraplantarum subsp. shebah-401) 균주로, 한국생명공학연구원에 2019년 12월 26일자로 국제기탁번호를 부여받았다.
상기 유산균은 세바바이오텍(주)에서 인간의 피부 유래 신규 유산균인 락토바실러스 플란타룸 아종 세바-202(기탁번호: KCTC14087BP) 균주 및 락토바실러스 파라플란타룸 아종 세바-401(기탁번호: KCTC14088BP) 균주를 분리 및 동정하였고, 상기 특정 유산균을 모두 사용하는 것이 대마 발효 추출물의 피부에 대한 기능성 효과를 향상시키는 것을 확인하였다.
또한, 본 발명의 대마 발효 추출물의 제조방법에서, 상기 (3)단계의 발효는 바람직하게는 35~40℃에서 44~52시간 동안 발효할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 37℃에서 48시간 동안 발효할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 대마 발효 추출물을 제공한다.
본 발명은 또한, 상기 대마 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 대마 발효 추출물은 항산화 및 항염 효과를 가지므로, 항산화 및 항염 용도를 갖는 화장료 조성물의 제조에 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 스킨 소프트너, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징워터, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누, 스포츠젤, 선크림 및 파우더 중에서 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형으로 이루어진 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 담체와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
상기 스포츠젤 제형은 보습 개선 효과를 나타내며, 대마 발효 추출물 4~6 중량% , 비타민 복합물 0.5~1.5 중량%, 글리세린 2~4 중량%, 1,3-부틸렌글라이콜 2~4 중량%, 에칠헥실글리세린 0.04~0.06 중량% , 알란토인 0.08~0.12 중량%, 수산화나트륨 0.3~0.5 중량%, 카보머 0.1~0.2 중량%, 점증제 0.05~0.09 중량%, 폴리솔베이트80 1.5~2.5 중량%, 헴프씨드 오일 2~4 중량%, 알코올 6~8 중량%, 멘톨 1.5~2.5 중량%, 살리실산메틸 0.05~0.15 중량% 및 정제수 70~76 중량%로 이루어질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 선크림 제형은 대마 발효 추출물 0.5~1.5 중량%, 에칠헥실글리세린 0.05~0.09 중량%, 1,3-부틸렌글라이콜 4~6 중량%, 1,2-헥산다이올 1~3 중량%, 나이아신아마이드 1~3 중량%, 아데노신 0.03~0.05 중량%, 알란토인 0.08~0.12 중량%, 수산화나트륨 0.2~0.3 중량%, 아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머 0.08~0.12 중량%, 잔탄검 0.04~0.06 중량%, 헴프씨드 오일 0.4~0.6 중량%, 디메치콘 0.5~1.5 중량%,, 이소아밀라우레이트 1.5~2.5 중량%, 부틸렌 글라이콜 1.0~1.4 중량%, 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 3.5~4.5 중량%, 베헤닐 알코올 0.1~0.3 중량%, 칸델릴라 왁스 0.5~0.7 중량%, 글리세릴스테아레이트/피이지-100스테아레이트 0.6~1.0 중량%, 폴리글리세릴-3 메칠글루코오스 디스테아레이트 0.6~1.0 중량%, 가용화제 0.6~1.0 중량%, 폴리글리세릴-10 다이스테아레이트 0.3~0.5 중량%, 글리세릴 스테아레이트 0.3~0.5 중량%, 폴리솔베이트60 0.6~1.0 중량%, 몬타왁스 L 유화제 1.6~1.8 중량%, 비타민 E 0.08~0.12 중량%, 비스-에칠헥실옥시페놀 메톡시페닐 트리아진 5~6 중량%, 에칠헥실메톡시신나메이트 7~8 중량%, 디에칠아미노 하이드록시벤조일 헥실벤조에이트 3~4 중량%, 티타늄디옥사이드 4~6 중량%, 메틸 메타크릴레이트 크로스폴리머(Methyl methacrylate crosspolymer) 0.2~0.4 중량%, 향료 0.4~0.55 중량% 및 물 51~53 중량%로 이루어질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당 유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
비교예 1. 대마 열수 추출물
세척한 대마 줄기를 쵸핑(chopping)한 후 믹서기로 분쇄하였다. 상기 분쇄한 대마 분쇄물 100 g에 증류수 1 L를 첨가하여 100℃에서 1시간 동안 추출한 후 여과지로 여과하였다.
비교예 2. 대마 에탄올 추출물
세척한 대마 줄기를 쵸핑(chopping)한 후 믹서기로 분쇄하였다. 상기 분쇄한 대마 분쇄물 100 g에 60% 에탄올(EtOH) 1 L를 첨가하여 상온에서 3일 동안 추출한 후 여과지로 여과하였다.
제조예 1. 대마 발효 추출물
(1) 세척한 대마 줄기를 쵸핑(chopping)한 후 믹서기로 분쇄하였다. 상기 분쇄한 대마 분쇄물 100 g에 증류수 1 L를 첨가하여 100℃에서 1시간 동안 추출하여 대마 추출물을 제조하였다. 상기 대마(Cannabis sativa L.)는 서울지방식품의약품안전청으로 허가받은 시설(제1770호)인 강원대학교 정문온실 내 분무경 수경재배 시스템에서 재배한 것이다.
(2) 2 L 플라스크에 1 L의 증류수, 55%의 MRS broth 파우더와 0.5% L-시스테인 염산염(L-cysteine hydrochloride)을 첨가하여 제조한 배지를 121℃에서 15분 동안 멸균하였다.
(3) 상기 (1)단계의 제조한 대마 추출물 및 상기 (2)단계의 멸균한 배지를 혼합한 후 기탁번호가 KCTC14087BP인 락토바실러스 플란타룸 아종 세바-202(Lactobacillus plantarum subsp. shebah-202) 균주 및 기탁번호가 KCTC14088BP인 락토바실러스 파라플란타룸 아종 세바-401(Lactobacillus paraplantarum subsp. shebah-401) 균주를 접종한 후 37℃에서 48시간 동안 배양하고 121℃에서 15분 동안 멸균한 후 여과지로 여과하였다.
1. 실험 방법
1) 항산화 및 항염 활성
실험 전 각각의 대마 추출물은 농축한 후 동결건조하여 실험에 사용하였다. 대마 추출물의 항산화 활성을 확인하기 위해 자유 라디칼의 소거능, 즉 항라디칼 활성(antiradical activity)을 측정하였다. 항라디칼 활성 측정에는 DPPH 라디칼 소거능 측정 방법과 ABTS 라디칼 소거능 측정 방법이 사용되었다.
그리고 대마 추출물의 항염 효능을 검증하기 위해 NO의 지표가 되는 아질산 이온(nitrite ion)이 항염증 활성 보유 물질과 반응하여 제거되는 소거능을 측정하는 방법을 활용하였다.
2) 대마 스포츠젤 제형 개발
아웃도어 스포츠젤에 적합한 제형 4개를 설계하였으며, 발림성, 보습감, 끈적임, 점도, 쿨링감, 통각감소, 향취 7가지 사항을 중심으로 패널 테스트를 통한 관능평가를 수행하였다.
3) 인체 적용 시험
대마 스포츠젤의 피부 유효성 평가와 피부 온도 감소 효과를 검증하기 위한 시험은 ㈜OATC 피부임상 시험센터에 의뢰하였으며, 사용 전과 후의 피부 수분량 평균 차이를 분석하기 위해 윌콕슨 부호 순위 검정(Wilcoxon signed rank test)을 수행하였고, 대마 스포츠젤 도포 부위와 무도포 부위 각각 사용 전과 후에 대한 피부 온도 평균 차이를 분석하기 위해 대응표본 T 검정(Paired t-test), 만-위트니 유 검정(Mann-Whitney U test)을 수행하였다.
실시예 1. 대마 추출물의 항산화 활성
대마 추출물의 시료 농도는 10, 40, 70, 100%로 희석하였고, 양성 대조군(비타민 C) 농도는 0.05 mg/mL로 처리하고, 항산화 활성은 ABTS 라디칼 소거능 및 DPPH 라디칼 소거능을 측정하였다.
대마 추출물의 ABTS 라디칼 소거능(%)
추출물 종류 시료 처리 농도(%)
10 40 70 100
제조예 1 25.36a 60.12a 84.29a 97.35a
비교예 1 19.13b 53.34b 77.54b 93.12b
비교예 2 18.37b 41.19c 65.72c 78.85c
Positive control 시료 처리 농도(0.05 mg/mL)
Ascorbic acid 79.82
대마 추출물의 DPPH 라디칼 소거능(%)
추출물 종류 시료 처리 농도(%)
10 40 70 100
제조예 1 21.58a 42.84a 61.27a 71.48a
비교예 1 17.74b 37.56b 53.83b 67.16b
비교예 2 18.48b 32.73c 57.19b 62.57c
Positive control 시료 처리 농도(0.05 mg/mL)
Ascorbic acid 78.25
그 결과, 농도 의존적으로 높은 소거능을 보였으며, 추출물 중에서는 제조예 1의 대마 발효 추출물이 비교예들의 대마 추출물들에 비해 가장 높은 소거능을 나타내었다(표 1 및 2).
실시예 2. 대마 추출물의 항염증 활성
대마 추출물의 시료 농도별로 희석하고, 양성 대조군(비타민 C) 농도는 0.05 mg/mL로 처리하고, 항염증 활성은 생체 내 염증 형성 반응의 주요한 매개물질로 알려지는 산화질소(nitric oxide, NO) 생성 억제능으로 측정하였다.
대마 추출물의 NO 생성 억제능(%)
추출물 종류 시료 처리 농도(%)
6.25 12.5 25.0
제조예 1 17.35a 32.3a 35.8a
비교예 1 15.50a 27.8b 31.2b
비교예 2 3.70b 17.8c 23.1c
Positive control 시료 처리 농도(0.05 mg/mL)
Ascorbic acid 38.1
그 결과, 추출물의 농도 의존적으로 NO 생성 억제 효과가 높아졌고, 제조예 1의 대마 발효 추출물은 처리 농도 25%에서 양성 대조군과 유사한 NO 생성 억제 효과를 나타내었다(표 3).
실시예 3. 스포츠젤 제형 실험
실시예 1 및 2를 통해 항산화능 및 항염증 활성이 가장 높았던 제조예 1의 대마 발효 추출물을 이용하여 화장품(스포츠젤)을 개발하기 위해, 화장품 기본 제형 실험을 먼저 실시하였다.
스포츠젤 제형 배합비(중량%)
원료 제형 1 제형 2 제형 3 제형 4
대마 발효 추출물 5 5 5 5
비타민 복합물(비타민 C, E) 1 1 1 1
글리세린(glycerin) 3 3 3 3
1,3-부틸렌글라이콜
(1,3-Butylene Glycol)
2 2 2 3
에칠헥실글리세린
(Ethylhexylglycerin)
0.05 0.05 0.05 0.05
알란토인(Allantoin) 0.1 0.1 0.1 0.1
수산화나트륨(NaOH, 10%) 0.4 0.4 0.4 0.4
카보머(Carbomer) 0.15 0.15 0.15 0.15
점증제(Sclerotium Gum) 0.03 0.03 0.07 0.07
폴리솔베이트80(Polysorbate80) 2 2 2 2
헴프씨드 오일 5 5 5 3
알코올 1 4 7 7
멘톨(menthol) 0.1 0.25 0.5 2
살리실산메틸(methyl salicylate) 0.1 0.1 0.1 0.1
정제수 80.07 76.92 73.63 73.13
합계 100 100 100 100
평가요원 10명을 대상으로 각각의 스포츠젤 제형을 사용하게 한 후, 7가지 각 평가지표에 대한 기호도가 좋을 경우 높은 점수로 체크하게 하여 평가하도록 하였다.
스포츠젤 제형에 따른 사용감 평가
평가 항목 제형 1 제형 2 제형 3 제형 4
발림성 6 8 8 8
보습감 8 7 8 8
끈적임 3 8 9 6
점도 7 7 8 7
쿨링감 4 6 7 9
통각감소 효과 5 7 6 9
향취 7 7 7 9
합계 40 50 53 56
그 결과, 제형 4가 사용감 평가에서 총 합계가 56점의 점수를 나타내어 다른 제형에 비해 기호도가 가장 우수함을 확인하였다.
실시예 4. 대마 스포츠젤의 인체 적용 시험
실시예 3을 통해 평가가 좋았던 제형 4의 대마 스포츠젤의 즉각적인 보습 개선에 대한 효능을 시험하였다. 이 시험은 ㈜OATC 피부 임상센터에 의뢰하여 수행하였으며, 연구대상은 만 20~60세의 한국 성인 여성 20명으로 선정하였다. 평균 연령은 46.25세였으며, 연구대상들은 세정 후 대마 스포츠젤 적당량을 취해 도포 부위(좌측 전박부)에 문지른 후 펴서 발라주었다. Epsilon E100을 이용한 즉각적인 보습 개선 평가 결과, 제품 사용 전 평균 5.79였으며 1회 사용 후 평균 12.05로 나타났다. 윌콕슨 부호 순위 검정(Wilcoxon signed rank test)으로 통계적 차이를 검증한 결과 p-value가 0.001 수준보다 작았고, 피부 수분량이 1회 사용 후 107.96% 증가하였으며, 통계적으로 유의하게 즉각적인 보습 개선을 나타내었다(도 2).
또한, FLIR T530을 이용한 스포츠젤 사용으로 인한 피부 온도 감소 효과를 평가한 결과는 도 3과 같다. 도포 부위에 대해 사용 전(가온 후) 평균 온도는 34.94℃였으며, 1회 사용 후 평균 온도는 27.54℃였다. 이에 대한 변화율은 21.13%로 나타났다. 무도포 부위에 대하여 사용 전(가온 후) 평균 온도는 34.95℃였으며, 1회 사용 후 평균 온도는 32.95℃로 나타났다. 온도 변화율은 5.70%였다. 온도의 평균 차이 검정은 대응표본 t 검정으로 수행하였으며, 모두 p-value가 0.001 수준보다 낮아 대마 스포츠젤의 온도 감소 효과는 통계적으로 유의하였다. 그리고 도포 부위와 무도포 부위의 변화율에 대한 집단간 비교를 만-위트니 유 검증(Mann-Whitney U test)으로 검증한 결과, p-value가 0.001 수준보다 낮아 도포 부위가 통계적으로 유의하게 더 효과가 있음을 확인하였다.
실시예 5. 선크림 제형 실험
제조예 1의 대마 발효 추출물을 이용하여 선크림을 개발하기 위해, 선크림 기본 제형 실험을 먼저 실시하였다.
선크림 제형 배합비(중량%)
원료 제형 1 제형 2 제형 3 제형 4 제형 5
대마 발효 추출물 1 1 1 1 1
에칠헥실글리세린
(Ethylhexylglycerin)
0.07 0.07 0.07 0.07 0.07
1,3-부틸렌글라이콜(1,3-Butylene Glycol) 5 5 5 5 10
1,2-헥산다이올(1,2-Hexanediol) 2 2 2 2 2
나이아신아마이드(niacinamide) 2 2 2 2 2
아데노신(adenosine) 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04
알란토인(Allantoin) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
수산화나트륨(NaOH, 10%) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
아크릴레이트/C10-30 알킬아크릴레이트크로스폴리머(Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer) 0.05 0.05 0.1 0.05 0.05
잔탄검(Xanthan Gum) 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
헴프씨드 오일 0.5 0.5 0.5 0.5 5
디메치콘(Dimethicone, SF1000N-100CST,DC 200F/100CS) 2 1 1 2 2
이소아밀라우레이트
(isoamyl laurate)
2 2 2 2 2
부틸렌 글라이콜 디카프릴레이트(Butylene Glycol Dicaprylate) 2 1.2 1.2 5 5
카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 (Caprylic/Capric Triglyceride) 2 4 4 4 3
베헤닐 알코올(Behenyl alcohol) 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
칸델릴라 왁스(Candelilla wax) 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6
유화제(글리세릴스테아레이트, 피이지-100스테아레이트) 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
폴리글리세릴-3 메칠글루코오스디스테아레이트(Polyglyceryl-3 Methylglucose Distearate) 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
가용화제(Polyglyceryl-6 Caprylate; Polyglyceryl-3 Cocoate; Polyglyceryl-4 Caprate; Polyglyceryl-6 Ricinoleate) 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
폴리글리세릴-10다이스테아레이트
(Polyglyceryl 10-Distearate)
0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
글리세릴 스테아레이트
(Glyceryl stearate)
0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
폴리솔베이트60(Polysorbate60) 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
유화제(몬타왁스 L) 2 1.7 1.7 2 2
비타민 E(VitE Acetate) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
비스-에칠헥실옥시페놀메톡시페닐트리아진(Bis-Ethylhexyloxyphenol Methoxyphenyl Triazine) 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5
에칠헥실메톡시신나메이트(Ethylhexyl Methoxycinnamate) 7.4 7.4 7.4 7.4 7.4
디에칠아미노 하이드록시벤조일 헥실벤조에이트(Diethylamino hydroxybenzoyl hexyl benzoate) 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
티타늄디옥사이드(Titanium dioxide, Aluminium hydroxide, stearic acid) 5 5 5 5 5
메틸 메타크릴레이트 크로스폴리머(Methyl methacrylate crosspolymer) 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
향료 0.2 0.3 0.5 0.6 0.45
정제수 52.14 52.14 51.89 46.74 38.39
합계 100 100 100 100 100
평가요원 10명을 대상으로 각각의 표 6의 선크림 제형을 사용하게 한 후, 7가지 각 평가지표에 대한 기호도가 좋을 경우 높은 점수로 체크하게 하여 평가하도록 하였다.
선크림 제형에 따른 사용감 평가
평가 항목 제형 1 제형 2 제형 3 제형 4 제형 5
발림성 7 8 8 7 7
보습감 3 7 8 8 8
끈적임 3 8 9 6 5
점도 7 7 8 7 6
지속력 4 8 9 8 8
향취 5 8 8 6 6
퍼짐성 7 7 9 8 7
합계 36 53 59 50 47
그 결과, 제형 3이 사용감 평가에서 총 합계가 59점의 점수를 나타내어 다른 제형에 비해 기호도가 가장 우수함을 확인하였다. 상기 선정된 제형 3의 선크림의 피부 첩포에 의한 자극 테스트 검사를 실시한 결과, 비자극으로 평가되었다.
한국생명공학연구원 KCTC14087BP 20191226 한국생명공학연구원 KCTC14088BP 20191226

Claims (11)

  1. (1) 대마 줄기 분쇄물에 물을 8~12배(v/w) 첨가한 후 90~110℃에서 50~70분 동안 추출하여 대마 추출물을 제조하는 단계;
    (2) 상기 (1)단계의 제조한 대마 추출물에 기탁번호가 KCTC14087BP인 락토바실러스 플란타룸 아종 세바-202(Lactobacillus plantarum subsp. shebah-202) 균주 및 기탁번호가 KCTC14088BP인 락토바실러스 파라플란타룸 아종 세바-401(Lactobacillus paraplantarum subsp. shebah-401) 균주를 접종하는 단계; 및
    (3) 상기 (2)단계의 균주를 접종한 대마 추출물을 35~40℃에서 44~52시간 동안 발효하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화 활성이 증진된 대마 발효 추출물의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 제1항의 방법으로 제조된 항산화 활성이 증진된 대마 발효 추출물.
  7. 제6항의 대마 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물.
  8. 삭제
  9. 제7항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨 소프트너, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징워터, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누, 스포츠젤, 선크림 및 파우더 중에서 선택된 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 항산화용 화장료 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 상기 스포츠젤 제형은 보습 개선 효과를 나타내며, 대마 발효 추출물 4~6 중량% , 비타민 복합물 0.5~1.5 중량%, 글리세린 2~4 중량%, 1,3-부틸렌글라이콜 2~4 중량%, 에칠헥실글리세린 0.04~0.06 중량% , 알란토인 0.08~0.12 중량%, 수산화나트륨 0.3~0.5 중량%, 카보머 0.1~0.2 중량%, 점증제 0.05~0.09 중량%, 폴리솔베이트80 1.5~2.5 중량%, 헴프씨드 오일 2~4 중량%, 알코올 6~8 중량%, 멘톨 1.5~2.5 중량%, 살리실산메틸 0.05~0.15 중량% 및 정제수 70~76 중량%로 이루어진 것을 특징으로 하는 항산화용 화장료 조성물.
  11. 제9항에 있어서, 상기 선크림 제형은 대마 발효 추출물 0.5~1.5 중량%, 에칠헥실글리세린 0.05~0.09 중량%, 1,3-부틸렌글라이콜 4~6 중량%, 1,2-헥산다이올 1~3 중량%, 나이아신아마이드 1~3 중량%, 아데노신 0.03~0.05 중량%, 알란토인 0.08~0.12 중량%, 수산화나트륨 0.2~0.3 중량%, 아크릴레이트/C10-30 알킬 아크릴레이트 크로스폴리머 0.08~0.12 중량%, 잔탄검 0.04~0.06 중량%, 헴프씨드 오일 0.4~0.6 중량%, 디메치콘 0.5~1.5 중량%,, 이소아밀라우레이트 1.5~2.5 중량%, 부틸렌 글라이콜 1.0~1.4 중량%, 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 3.5~4.5 중량%, 베헤닐 알코올 0.1~0.3 중량%, 칸델릴라 왁스 0.5~0.7 중량%, 글리세릴스테아레이트/피이지-100스테아레이트 0.6~1.0 중량%, 폴리글리세릴-3 메칠글루코오스 디스테아레이트 0.6~1.0 중량%, 가용화제 0.6~1.0 중량%, 폴리글리세릴-10 다이스테아레이트 0.3~0.5 중량%, 글리세릴 스테아레이트 0.3~0.5 중량%, 폴리솔베이트60 0.6~1.0 중량%, 몬타왁스 L 유화제 1.6~1.8 중량%, 비타민 E 0.08~0.12 중량%, 비스-에칠헥실옥시페놀 메톡시페닐 트리아진 5~6 중량%, 에칠헥실메톡시신나메이트 7~8 중량%, 디에칠아미노 하이드록시벤조일 헥실벤조에이트 3~4 중량%, 티타늄디옥사이드 4~6 중량%, 메틸 메타크릴레이트 크로스폴리머(Methyl methacrylate crosspolymer) 0.2~0.4 중량%, 향료 0.4~0.55 중량% 및 물 51~53 중량%로 이루어진 것을 특징으로 하는 항산화용 화장료 조성물.
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