KR102559527B1 - 면역 조절 및 면역 항상성 기능을 갖는 프로바이오틱스 복합 조성물 - Google Patents

면역 조절 및 면역 항상성 기능을 갖는 프로바이오틱스 복합 조성물 Download PDF

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Abstract

본원은, 면역조절 기능을 갖는 프로바이오틱스 혼합균주 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
본원의 일 구현예에 따른 면역조절기능을 갖는 프로바이오틱스 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 조성물은 NO 생성량을 증가시키거나, 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제함으로써 면역조절 기능을 갖는 바, 상기 균주는 식품 조성물, 건강기능식품 조성물, 약학 조성물 등에 응용될 수 있다.

Description

면역 조절 및 면역 항상성 기능을 갖는 프로바이오틱스 복합 조성물{PROBIOTICS COMPLEX COMPOSITION WITH IMMUNOMODULATORY AND IMMUNE HOMEOSTASIS PROPERTY}
본원은, 면역조절 기능을 갖는 프로바이오틱스 혼합균주 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
우리 몸의 소화관에는 많은 세균들이 서식하고 있다. 우리 몸에는 정상세포가 약 10조 개가 있는 반면, 세균의 수는 그보다 10배쯤 더 많은 100조 개 정도이다. 이러한 세균의 대부분은 장내세균총을 이루고 있으며 장에 존재하는 다양한 면역세포와의 상호작용을 통해 인체의 면역조절에 영향을 미치고 있다. 그리고 이 세균들은 우리 장의 건강에 도움을 주는 유익균과 건강에 해로운 유해균으로 나눌 수 있다. 우리 몸은 유익균이 대장균 (E. coli), 베일로넬라(Veillonella), 웰치균(Clostridium perfringens) 등의 유해균보다 우세균으로 점하면서 다양한 소화관 서식 미생물들이 균형을 유지할 때 건강을 유지할 수 있다.
우리 몸의 면역세포들은 외부에서 침입하는 항원(미생물 포함)과 내적으로 생기는 이상 세포를 제어하여 건강을 유지하도록 해준다. 이 면역세포의 70% 이상이 소화관에 위치하고 있으며, 소화관에 이미 서식하고 있는 미생물 또는 외부에서 침입하는 미생물들을 제어한다. 하지만 이러한 면역세포에 의한 면역반응 활성화가 과도할 경우 알러지, 류마티스, 아토피성 피부염, 천식, 류마티스 관절염, 루프스, 또는 염증성 장염(궤양성 대장염, 크론병, 게실증 등), 당뇨병 등과 같은 질환이 유발될 수 있다. 따라서, 과도하게 활성화된 면역반응을 억제시켜 면역항상성을 유지시키기 위한 면역조절능이 상기 질환들의 발생을 예방하는 면역체계로서 중요한 생리적 기능을 담당한다. 면역세포중 T 세포는 세균이나 바이러스에 감염된 숙주세포를 직접 제거할 수 있으며, 이중 보조 T 세포들은 다른 면역세포들의 분화를 촉진하여 활성화를 유도하게 된다(세포성, 체액성 면역반응). 이러한 활성화된 면역반응은 면역조절 T 세포 (Treg)에 의하여 억제되며, 면역항상성 유지에 핵심 역할을 하는것으로 알려져 있다.
장내미생물은 인체내에 항원으로서 면역반응을 일으키지만, 인체에 공생하기 위하여 이의 면역반응을 저하시키기 위한 면역관용(Immune tolerance) 기전을 가지고 있기도 하며, 이의 일부는 T세포의 분화과정에 관여하여 장내 면역조절 T세포의 분화 및 증식을 유도하는 것으로 알려져 있다. 이러한 미생물을 이용하여 면역조절을 위한 조성물을 개발한 예로서, 면역조절 작용을 가는 사람 소화관 유래 신규 유산균 및 이의 용도 (대한민국 등록특허 제 10-1862051호) 등이 있다. 하지만, 면역조절과 관련하여 우수한 효과를 나타내는 조성물에 대한 심도 있는 개발 및 다양한 연구가 여전히 필요한 실정이다.
이에, 본 발명자들은 면역조절기능이 우수한 조성물을 개발하기 위해 예의 노력한 결과, NO 생성량을 증가시키거나 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제하여 면역을 조절할 수 있는 혼합균주 및 이를 포함하는 조성물을 개발하여, 본 발명을 완성하였다.
한국등록특허공보 10-2224027 호
본원은, 면역조절 기능을 갖는 프로바이오틱스 혼합균주 및 이를 포함하는 조성물을 제공하고자 한다.
그러나, 본원이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본원의 제1측면은, 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 제공한다.
본원의 제2측면은, 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 유효성분으로 포함하는, 면역조절용 식품 조성물을 제공한다.
본원의 제3측면은, 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 유효성분으로 포함하는, 면역조절 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본원의 일 구현예에 따른 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 조성물은 NO 생성량을 증가시키거나, 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제함으로써 면역조절 기능을 갖는 바, 상기 균주는 식품 조성물, 건강기능식품 조성물, 약학 조성물 등에 응용될 수 있다.
도 1은, 본원의 일 구현예에 따른 (a) LM1071 균주와 (b) LM1001 균주 단독처리시 NO 생성량(면역증진능 확인)을 나타낸 도면이다.
도 2는, 본원의 일 구현예에 따른 (a) LM1071 균주와 (b) LM1001 균주 단독처리시 LPS에 의해 유도된 NO 생성의 억제 (항염증능 확인)를 나타낸 도면이다.
도 3은, 본원의 일 구현예에 따른 LM1071 균주와 LM1001 균주의 배합비에 따른 NO 생성량 ((a) 면역증진능 확인), LPS에 의해 유도된 NO 생성의 억제 ((b) 항염증능 확인)를 나타낸 도면이다.
도 4는. 본원의 일 구현예에 따른 5종 균주((a) LM1009, (b) LM1012, (c) LM1017, (d) LM1024, (e) LM1004 사균체)의 NO 생성량(면역증진능 확인)을 나타낸 도면이다.
도 5은, 본원의 일 구현예에 따른 5 종 균주((a) LM1009, (b) LM1012, (c) LM1017, (d) LM1024, (e) LM1004 사균체)의 단독 처리 시 LPS에 의해 유도된 NO 생성의 억제(항염증능 확인)를 나타낸 도면이다.
도 6은, 본원의 일 구현예에 따른 균주 7 종 혼합물, 면역증진 균주 3 종 혼합물(LM1001, LM1012, LM1004 사균체), 면역억제 균주 4 종(LM1071, LM1009, LM1017, LM1024) 혼합물의 NO 생성량((a) 면역증진능 확인) 또는 LPS에 의해 유도된 NO 생성의 억제 ((b) 항염증능 확인)를 나타낸 도면이다.
아래에서는 첨부한 도면을 참조하여 본원이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본원의 실시예를 상세히 설명한다. 그러나 본원은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. 그리고 도면에서 본원을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부재가 다른 부재 “상에” 위치하고 있다고 할 때, 이는 어떤 부재가 다른 부재에 접해 있는 경우뿐 아니라 두 부재 사이에 또 다른 부재가 존재하는 경우도 포함한다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 “포함” 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 “약”, “실질적으로” 등은 언급된 의미에 고유한 제조 및 물질 허용오차가 제시될 때 그 수치에서 또는 그 수치에 근접한 의미로 사용되고, 본원의 이해를 돕기 위해 정확하거나 절대적인 수치가 언급된 개시 내용을 비양심적인 침해자가 부당하게 이용하는 것을 방지하기 위해 사용된다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 “~(하는) 단계” 또는 “~의 단계”는 “~ 를 위한 단계”를 의미하지 않는다.
본원 명세서 전체에서, 마쿠시 형식의 표현에 포함된 “이들의 조합(들)”의 용어는 마쿠시 형식의 표현에 기재된 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 혼합 또는 조합을 의미하는 것으로서, 상기 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것을 의미한다.
본원 명세서 전체에서, “A 및/또는 B”의 기재는 “A 또는 B, 또는 A 및 B”를 의미한다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본원의 구현예 및 실시예를 상세히 설명한다. 그러나, 본원이 이러한 구현예 및 실시예와 도면에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 제 1 측면은, 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 제공한다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 “면역조절기능”은 면역증진능 및 항염증능을 의미한다. 즉, 본원 명세서에서 “면역조절기능을 갖는다”는 것은 “면역증진능”과 “항염증능”을 둘 다 갖는다는 것을 말한다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 혼합균주는 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 혼합균주는 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959) 외에 비피도박테리움 애니멀리스 락티스(Bifidobacterium animalis subsp. lactis) LM1017 균주(KCCM12629P), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) LM1024 균주(KCCM12919P), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) LM1009 균주(KCCM80146), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) LM1012 균주(KFCC11771P) 및 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1004 균주(KCCM43246)를 추가로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 혼합균주는 NO 생성량을 증가시키거나, 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제하여 면역기능을 조절할 수 있으며, 이를 통해 면역항상성을 유지할 수 있다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "NO (nitric oxide)"는 "산화질소" 혹은 "일산화질소"라 불리며 질소가 산화된 형태의 화합물을 말한다. 세포 내에서 아미노산인 아르기닌으로부터 형성되고, 일종의 신호전달 물질로서 면역 작용, 혈관 확장 및 신호 전달 등의 다양한 생리 활성에 관여한다. 또한 TNF-α 및 IL-6와 같은 염증성 사이토카인의 분비를 촉진하여 염증 및 통증을 유발하는 것으로 알려져 있다(Hu 등, 2020).
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 염증생성물질은 LPS, 자이모산(zymosan), Concanavalin A, 박테리아, 바이러스, 기생충, 진균 및 알레르기 유발 항원으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 혼합균주는 면역기능을 조절하는 것일 수 있으며, 구체적으로 상기 균주는 식품 조성물, 건강기능식품 조성물, 약학 조성물 등 다양한 조성물에 포함될 수 있다.
본원의 제2측면은, 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 유효성분으로 포함하는, 면역조절용 식품 조성물을 제공한다. 제1측면과 중복되는 내용은 제2측면의 식품 조성물에도 공히 적용된다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 면역기능을 조절하는 것일 수 있으며, 구체적으로 NO 생성량을 증가시키거나 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제시킴으로써 면역 기능을 조절하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 혼합균주, 이의 생균체, 이의 사균체, 이의 배양물, 이의 파쇄물 및/또는 이의 추출물을 포함하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959) 외에 비피도박테리움 애니멀리스 락티스(Bifidobacterium animalis subsp. lactis) LM1017 균주(KCCM12629P), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) LM1024 균주(KCCM12919P), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) LM1009 균주(KCCM80146), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) LM1012 균주(KFCC11771P) 및 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1004 균주(KCCM43246)를 추가로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "사균체"는 생균의 반대되는 개념으로서 발효를 통해 얻어진 생균과 대사산물들을 열처리 등에 의해 균의 성장이 일어나지 못하도록 한 형태를 의미한다. 사균체는 세포질(cytoplasm), 세포벽(cell wall), 박테리오신(bacteriocin) 등의 항균활성 물질, 다당류(polysaccharide), 유기산 등을 포함할 수 있다. 상기 사균체를 이용한 제품은 생균 제품과 비교하여 높은 안정성을 가지고 있으며, 특히 내열성이 우수하며, 외부 환경에 대한 안정성이 높아 기존 생균 제품보다 보관이 용이하고 유통기간을 늘릴 수 있다는 장점을 가지고 있다. 또한, 항생제 사용에 대한 규제가 강화되고 있기 때문에 대체제로서의 활용성과 아직 사균체 제품 생산에 본격적으로 뛰어든 업체가 손에 꼽을 정도이기 때문에 시장성과 성장가능성이 매우 크다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "배양물"은 본원의 균주를 공지의 액체 배지 또는 고체 배지에서 배양시켜 수득한 사물을 의미하며, "배양액"과 혼용하여 사용될 수 있다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "식품"은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강 기능 식품 및 건강 식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "건강기능식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다.
본원의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고 휴대성이 뛰어나므로, 본 발명의 식품은 장내 환경 개선의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
상기 건강 식품(health food)은 일반식품에 비해 적극적인 건강유지나 증진 효과를 가지는 식품을 의미하고, 건강보조식품(health supplement food)은 건강 보조 목적의 식품을 의미한다. 경우에 따라, 건강 기능 식품, 건강 식품, 건강 보조 식품의 용어는 혼용될 수 있다. 구체적으로, 상기 건강 기능 식품은 본원의 혼합균주를 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용이 없는 장점이 있다.
본원의 식품 조성물은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 우울증 개선에 대하여 높은 효과를 기대할 수 있으므로, 매우 유용하게 사용될 수 있다.
상기 식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있는데, 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신 (niacin), 비오틴 (biotin), 폴레이트 (folate), 판토텐산 (panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 크륨(Cr) 등의 미네랄을 포함할 수 있다. 또한, 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다.
또한, 상기 식품 조성물은 방부제(소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제(표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제(부틸히드록시아니졸(BHA), 부틸히드록시톨류엔(BHT) 등), 착색제(타르색소 등), 발색제(아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제(아황산나트륨), 조미료(MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료(둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료(바닐린, 락톤류 등), 팽창제(명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제(호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물(food additives)을 포함할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.
본원의 혼합균주는 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 식품 조성물은 식품 또는 음료에 대하여 50 중량부 이하, 구체적으로 20 중량부 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 장기간 섭취할 경우에는 상기 범위 이하의 함량을 포함할 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본원의 식품 조성물의 일 예로 건강음료 조성물로 사용될 수 있으며, 이 경우 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강음료 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ∼ 0.04 g, 구체적으로 약 0.02 ∼ 0.03 g이 될 수 있다.
상기 외에 건강음료 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강음료 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본원의 식품 조성물은 장내 환경 개선 효과를 나타낼 수 있다면 본원의 혼합균주를 다양한 중량%로 포함할 수 있으며, 구체적으로 본원의 혼합균주를 식품 조성물의 총 중량 대비 0.00001 내지 100 중량% 또는 0.01 내지 80 중량%로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 식품 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있다.
본원의 제3측면은, 면역조절기능을 갖는 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 면역조절 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 제1측면 및 제2측면과 중복되는 내용은 제3측면의 약학 조성물에도 공히 적용된다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 본원의 혼합균주, 이의 생균체, 이의 사균체, 이의 배양물, 이의 파쇄물 및/또는 이의 추출물을 포함하는 것일 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959) 외에 비피도박테리움 애니멀리스 락티스(Bifidobacterium animalis subsp. lactis) LM1017 균주(KCCM12629P), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum) LM1024 균주(KCCM12919P), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) LM1009 균주(KCCM80146), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) LM1012 균주(KFCC11771P) 및 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1004 균주(KCCM43246)를 추가로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "치료"는 본원의 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 면역 관련 질환이 발병된 개체에 투여하여 면역 관련 질환의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 면역 관련 질환을 예방 또는 치료하는 것일 수 있으며, 구체적으로 NO 생성량을 증가시키거나, 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제시킴으로써 면역 관련 질환을 예방 또는 치료하는 것일 수 있다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "면역 관련 질환"은 면역저하로서 나타날 수 있는 세균 및 바이러스의 감염으로 인한 각종 질환 및 과도한 면역반응에 의해 나타날 수 있는 자가면역질환 및 알레르기 반응 등 면역과 관련된 모든 질환을 말한다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "면역 결핍증"은 면역 계통 구성 요소의 기능 장애에 의해 발생하는 질환을 총칭하는 것이며, 중증복합면역결핍병(SCID), 후천적 면역결핍질환(AIDS) 등이 있다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "과면역 질환"은 면역이 과발현되어 발생하는 질환을 총칭하는 것이며, 류마티스 관절염 등의 자가면역질환, 알레르기, 아토피 등이 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제제화하여 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학 조성물을 제제화할 경우, 일반적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 또는 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있으나", 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 또는 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 균주의 사균체에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose), 락토오스 (lactose), 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 예를 들어, 단순한 부형제 이외에도 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 있어서, 비경구 투여를 위한 제제로는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 비수성용제 또는 현탁제로는, 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 좌제로는, 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.
본원의 일 구현예에 따른 약학 조성물은 의약품 조성물 또는 의약외품 조성물일 수 있다.
본원 명세서 전체에서 사용되는 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
본원의 상기 의약외품 조성물은 바디 클렌저, 소독 청결제, 세정제, 주방용 세정제, 청소용 세정제, 치약, 가글제, 물티슈, 세제, 비누, 핸드 워시, 헤어세정제, 헤어 유연제, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 및 필터 충진제로 이루어진 군에서 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있는데, 본원의 용어 "약제학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료 또는 예방에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 예방하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본원의 약학 조성물은 단독으로 투여하거나 공지된 장 질환에 대한 치료 효과를 나타내는 것으로 알려진 성분과 병용하여 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하다.
본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학 조성물의 투여량은 사용목적, 질환의 중독도, 환자의 연령, 체중, 성별, 기왕력, 또는 유효성분으로서 사용되는 물질의 종류 등을 고려하여 당업자가 결정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학 조성물은 성인 1인당 약 0.1ng 내지 약 1,000 mg/kg, 바람직하게는 1 ng 내지 약 100 mg/kg로 투여할 수 있고, 본원의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다. 상기 투여량 또는 투여횟수는 어떠한 면으로든 본원의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본원의 약학 조성물은 특별히 이에 제한되지 않으나, 목적하는 바에 따라 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경피패치투여, 경구 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여 등의 경로를 통해 투여 될 수 있다. 다만, 경구 투여 시에는 제형화되지 않은 형태로도 투여할 수 있고, 위산에 의하여 상기 락토바실러스 루테리 LM1071 균주가 변성 또는 분해될 수 있기 때문에 경구용 조성물은 활성 약제를 코팅하거나 위에서의 분해로부터 보호되도록 제형화된 형태 또는 경구용 패치형태로 구강내에 투여할 수도 있다. 또한, 상기 조성물은 활성 물질이 표적세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
이하, 본원의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 하나, 하기의 실시예는 본원의 이해를 돕기 위하여 예시하는 것 일뿐, 본원의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1. LM1071 및 LM1001 단독처리시 면역증진능 및 항염증능 확인 실험
(1) 면역증진능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 LM1071 또는 LM1001을 각 균수에 맞게 배지에 묽혀 24시간 동안 처리하였다. 이때 양성 대조군으로 LPS를 처리하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride(NED) solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 1 참조).
실험결과, LM1071 균주와 LM1001 균주 모두 NO 생성량을 증가시킨다는 것을 확인할 수 있었다.
(2) 항염증능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 LM1071 또는 LM1001을 각 균수에 맞게 배지에 묽혀 2시간 동안 처리하였다. Raw 264.7 세포의 염증을 유도하기 위해 LPS를 각 well에 처리한 후 추가적으로 24시간 동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 2 참조).
실험결과, LM1071 균주에서만 염증생성물질인 LPS에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제시킴을 확인할 수 있었다.
실시예 2. LM1071과 LM1001 혼합균주의 면역증진능 및 항염증능 확인 실험
(1) 면역증진능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 LM1071과 LM1001 혼합물(LM1071:LM1001=8:1, 4:1, 1:1, 1:4, 1:8)을 배지에 묽혀 24시간 동안 처리하였다. 이때 양성 대조군으로 Lactobacillus rhamnosus GG (이하 L. rhamnosus GG)를 처리하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 3 (a) 참조).
실험 결과, LM1071 균주와 LM1001 균주 혼합물이 8:1 내지 1:8 범위에서 L. rhamnosus GG에 비해 NO 생성량이 많다는 것을 확인할 수 있었다.
(2) 항염증능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 LM1071과 LM1001 혼합물(LM1071:LM1001=8:1, 4:1, 1:1, 1:4, 1:8)배지에 묽혀 2시간 동안 처리하였다. Raw 264.7 세포의 염증을 유도하기 위해 LPS를 각 well에 처리한 후 추가적으로 24시간 동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 3 (b) 참조).
실험 결과, LM1071 균주와 LM1001 균주 혼합물을 LPS와 병용처리 하였을 때, 8:1 내지 1:4 범위에서 LPS에 의해 유도된 NO 생성을 억제함을 확인하였다.
종합적으로 볼 때, LM1071 균주와 LM1001 균주 혼합물은 LM1071: LM1001의 배합비 8:1 내지 1:8 범위에서 면역증진능이 우수하며, 8:1 내지 1:4 범위에서 항염증능이 우수하므로, LM1071 균주와 LM1001 균주 혼합물이 8:1 내지 1:4 범위에서 면역조절기능(면역증진능 및 항염증능)이 뛰어나다는 것을 알 수 있다.
실시예 3. 5종 균주의 면역증진능 및 항염증능 확인 실험
(1) 면역증진능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 LM1009, LM1012, LM1071, LM1024, LM1004 사균체를 각 균수에 맞게 배지에 묽혀 24시간 동안 처리하였다. 이때 양성 대조군으로 LPS를 처리하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 4 참조).
실험 결과, LM1009, LM1012, LM1017, LM1024, LM1004 사균체 모두 NO 생성량을 증가시킴을 확인하였다.
(2) 항염증능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 LM1009, LM1012, LM1071, LM1024, LM1004 사균체를 각 균수에 맞게 배지에 묽혀서 2시간 동안 처리하였다. Raw 264.7 세포의 염증을 유도하기 위해 LPS를 각 well에 처리한 후 추가적으로 24시간 동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시킨다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 5 참조).
실험 결과, LM1009, LM1017, LM1024 균주에서 LPS에 의해 유도된 NO 생성을 억제시켜 항염증능이 있음을 확인할 수 있었다.
상기 실시예 1 내지 실시예 3의 실험결과를 토대로 면역증진능이 우수한 균주 3종(LM1001, LM1012, LM1004)과 항염증능이 우수한 균주 4종(LM1071, LM1009, LM1017, LM1024)을 선별하였으며, 이를 이용해 실시예 4 실험을 진행하였다.
실시예 4. 혼합균주 7종의 면역증진능 및 항염증능 확인 실험
(1) 면역증진능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 균주 혼합물(균주 7종 혼합물, 면역증진 균주 3종 혼합물, 면역억제 균주 4종 혼합물)을 배지에 묽혀 24시간 동안 처리하였다. 이때 양성 대조군으로 L. rhamnosus GG를 처리하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 6 (a) 참조).
실험결과 본원 균주 7종의 혼합물은 면역억제 균주 4종의 혼합물이나 L. rhamnosus GG에 비해서 NO 생성량이 많다는 것을 확인할 수 있었다.
(2) 항염증능 확인
마우스 유래 대식세포주인 Raw 264.7 세포의 배양을 위해 10% 소태아 혈청 (Welgene, Korea)과 페니실린-스트렙토마이신 (Welgene, Korea)을 넣은 DMEM 배양액(Welgene, Korea)을 사용하였다. Raw 264.7 세포를 96 well plate에 3x104 cells/well 농도로 분주한 후 O/N동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. 각 well의 배지를 제거한 후 균주 혼합물(균주 7종 혼합물, 면역증진 균주 3종 혼합물, 면역억제 균주 4종 혼합물)을 배지에 묽혀 2시간 동안 처리하였다. Raw 264.7 세포의 염증을 유도하기 위해 LPS를 각 well에 처리한 후 추가적으로 24시간 동안 37℃ CO2 incubator에서 배양하였다. NO의 생성량을 측정하기 위해 Promega 사의 Griess Reagent system을 사용하였다. 배양한 배지 50 ㎕를 새로운 96 well plate에 옮겼다. 이때, NO 표준곡선을 위해 NO 표준 용액을 이용하여 1.56~100 μM로 묽혀서 넣어주었다. 각 well에 sulfanilamide solution 50 ㎕를 넣은 후 5분 동안 빛을 차단하여 실온에서 반응시켰다. 각 well에 NED solution 50 ㎕를 추가로 넣고 빛을 차단한 채로 실온에서 5분 동안 반응시킨 후 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고, 이를 NO 표준곡선을 이용하여 NO 생성량을 계산하였다(도 6(b) 참조).
실험결과 본원 균주 7종의 혼합물은 면역증진 균주 3종 혼합물이나 LPS 단독 처리군에 비해서 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 더 많이 억제시킨다는 것을 확인할 수 있었다.
종합적으로 볼 때, 본원의 7종 균주의 혼합물은 NO 생성량을 증가시키거나(면역증진능), 염증생성물질에 의해 유도된 과도한 NO 생성을 억제시킴으로써(항염증능) 면역기능을 조절할 수 있다는 것을 알 수 있다.
전술한 본원의 설명은 예시를 위한 것이며, 본원이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본원의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
한국미생물보존센터(KCCM) KCCM42959 20101112 한국미생물보존센터(KCCM) KCCM43246 20161028 한국미생물보존센터(KCCM) KCCM80146 20170516 한국미생물보존센터(KCCM) KFCC11771P 20180530 한국미생물보존센터(KCCM) KCCM12629P 20191114 한국미생물보존센터(KCCM) KCCM12650P 20191231 한국미생물보존센터(KCCM) KCCM12919P 20201223

Claims (10)

  1. 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P) 및 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959)로 구성된 혼합균주로서,
    상기 혼합균주는 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) LM1071 균주 (KCCM12650P) 및 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) LM1001 균주(KCCM42959)의 비율이 8:1 내지 1:4이며,
    상기 8:1 내지 1:4의 범위에서 면역증진능 및 항염증능을 가지는 것인 혼합균주.
  2. 삭제
  3. 제 1항의 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 면역기능 조절용 식품 조성물.
  4. 제 1항의 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 면역 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물로서,
    상기 면역관련질환은 자가면역질환, 알레르기, 아토피, 중증복합면역결핍병(SCID), 후천적 면역결핍질환(AIDS), 류마티스, 천식, 루푸스, 궤양성 대장염, 크론병, 게실증 및 당뇨병으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것인, 면역 관련 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 제 1항의 혼합균주를 유효성분으로 포함하는 면역기능 조절용 건강기능식품 조성물.
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 삭제
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KR102136522B1 (ko) * 2020-03-04 2020-07-22 주식회사 락토메이슨 안전성 및 장부착능이 우수한 모유유래 락토바실러스 루테리 lm1071 균주, 및 상기 균주 또는 이의 배양물을 포함하는 조성물
KR102224027B1 (ko) 2016-11-01 2021-03-08 삼성에스디아이 주식회사 냉각파이프용 수커넥터 및 연결시스템

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