KR102463531B1 - Pillar coating method for cell culture - Google Patents

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KR102463531B1
KR102463531B1 KR1020220079472A KR20220079472A KR102463531B1 KR 102463531 B1 KR102463531 B1 KR 102463531B1 KR 1020220079472 A KR1020220079472 A KR 1020220079472A KR 20220079472 A KR20220079472 A KR 20220079472A KR 102463531 B1 KR102463531 B1 KR 102463531B1
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coating
filler
cell culture
coated
container
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KR1020220079472A
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김정은
박경현
구보성
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엠비디 주식회사
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    • C12N2533/90—Substrates of biological origin, e.g. extracellular matrix, decellularised tissue

Abstract

The present invention relates to a filler coating method for cell culture. The method includes the steps of: (S100) in which an ejector (10) is moved to a container mounting unit (100) and a container (20) accommodating a coating solution to be discharged is mounted on the ejector (10); (S200) in which the ejector (10) equipped with the container (20) is moved to a coating operation unit (200) where a filler (P) is disposed; (S300) in which in the coating operation unit (200), the ejector (10) discharges the coating solution to the coating surface (P1) of each filler (P); (S400) in which after completion of the discharge, the ejector (10) is moved to a container detachable unit (300) and the container (20) is detached and discharged. The present invention is to prevent filler side coating caused by a conventional dipping method.

Description

세포 배양용 필러 코팅방법{PILLAR COATING METHOD FOR CELL CULTURE}Filler coating method for cell culture {PILLAR COATING METHOD FOR CELL CULTURE}

본 발명은 필러 코팅 방법에 관한 것이다. 구체적으로는, 세포 배양시 세포 떨어짐 방지 및 세포 배양 균일도 향상을 위한 드롭(drop) 토출 방식의 필러 코팅 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a filler coating method. Specifically, it relates to a drop-discharge type filler coating method for preventing cell dropping during cell culture and improving cell culture uniformity.

생체와 유사한 환경의 시험관내에서 세포와 조직의 증식 및 적절한 세포 성장을 제공하는 생체 모사형 3차원 조직 배양계는 약물의 선별이나, 생물학적 활성 분자를 제조하는 연구에 좋은 모델로 평가 받고 있다. A biomimetic three-dimensional tissue culture system that provides proper cell growth and proliferation of cells and tissues in vitro in an environment similar to a living body is evaluated as a good model for drug selection and research for manufacturing biologically active molecules.

이러한 생체 모사형 3차원 조직 배양계는 다양한 조직 병리학적인 연구 목적에 따라 활용되어 왔다. Such a biomimetic three-dimensional tissue culture system has been utilized for various histopathological research purposes.

종래 기술로서 도 1에 도시된 바와 같이, 코팅 용액에 필러(Pillar)를 담그는 딥잉(dipping) 방법을 통해 필러에서 코팅을 하고자 하는 면에 코팅을 수행하였다. As shown in FIG. 1 as a prior art, coating was performed on the surface to be coated from the filler through a dipping method of dipping the filler in a coating solution.

하지만, 종래 기술인 딥잉(dipping) 방법은 필러의 코팅면 뿐 아니라, 담그는 과정에서 필러의 측면에도 코팅 용액이 도포될 수 있다(도 1c 참조). However, in the prior art dipping method, the coating solution may be applied not only to the coating surface of the filler, but also to the side of the filler in the immersion process (see FIG. 1C ).

도 2는 도 1에 따른 딥잉(dipping) 방법으로 필러의 코팅면이 코팅되는 것을 나타낸다. 최초에는 도 2a와 같이 필러(P)의 코팅면(P1)에 도포가 되지 않은 상태인데, 딥잉(dipping) 방법으로 도 2b와 같이 필러(P)의 코팅면(P1)에만 코팅 용액(S)이 코팅되는 것이 가장 바람직하다.FIG. 2 shows that the coating surface of the filler is coated by the dipping method according to FIG. 1 . Initially, as shown in FIG. 2a, the coating solution (S) is not applied to the coating surface (P1) of the filler (P), but only on the coating surface (P1) of the filler (P) as shown in FIG. 2b by a dipping method (S) This coating is most preferred.

하지만, 도 1b의 딥잉(dipping) 동작을 수행하면서, 도 2c와 같이 필러(P)의 코팅면(P1) 뿐만 아니라, 측면(P2)에도 코팅 용액(S)이 도포될 수 있다.However, while performing the dipping operation of Figure 1b, the coating solution (S) may be applied to the side surface (P2) as well as the coating surface (P1) of the filler (P) as shown in Figure 2c (P2).

도 3a는 도 2a와 같이 필러의 코팅면(P1)에만 코팅된 경우의 세포 배양 상태를 나타내고, 도 3b는 도 2c와 같이 필러의 코팅면(P1)뿐 아니라, 측면(P2) 일부에도 코팅된 경우의 세포 배양 상태를 나타낸다.Figure 3a shows the cell culture state when only the coating surface (P1) of the filler is coated as shown in Figure 2a, Figure 3b is not only the coating surface (P1) of the filler as shown in Figure 2c, but also the side surface (P2) is partially coated The cell culture state of the case is shown.

도 1 내지 도 3에 도시된 바와 같이, 종래 기술인 딥잉(dipping) 방법은 세포들이 필러의 의도된 코팅면 뿐 아니라, 필러 측면에 붙는 현상이 발생되는 문제점이 있었다. 이러한 문제점으로 인하여, 실험 결과 분석시 실험 결과의 정확도를 낮추는 원인이 되었다.As shown in Figures 1 to 3, the prior art dipping (dipping) method had a problem in that the cells are attached to the filler side as well as the intended coating surface of the filler occurs. Due to this problem, it became a cause of lowering the accuracy of the experimental results when analyzing the experimental results.

(문헌 1) 한국등록특허공보 제10-2048138호 (2019.11.18)(Document 1) Korean Patent Publication No. 10-2048138 (2019.11.18)

본 발명에 따른 세포 배양용 필러 코팅방법은 다음과 같은 해결과제를 가진다.The filler coating method for cell culture according to the present invention has the following problems.

첫째, 종래의 딥잉(dipping) 방법으로 인하여 발생되는 필러 측면 코팅을 방지하고자 한다.First, it is intended to prevent the filler side coating caused by the conventional dipping method.

둘째, 세포 배양시 고착력(fixing force) 향상 및 균일한 배양성이 확보된 필러 코팅면의 바람직한 코팅 면적을 제시하고자 한다.Second, it is intended to present a preferred coating area of the filler coating surface, which has improved fixing force and secured uniform culturing during cell culture.

본 발명의 해결과제는 이상에서 언급한 것들에 한정되지 않으며, 언급되지 아니한 다른 해결과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다. The problems to be solved of the present invention are not limited to those mentioned above, and other problems not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

본 발명은 세포 배양용 필러 코팅방법으로서, 토출기가 용기 장착부로 이동되고, 토출될 코팅 용액(S)이 수용된 용기가 토출기에 장착되는 S100 단계; 상기 용기가 장착된 토출기가 필러(P)가 배치된 코팅 작업부로 이동되는 S200 단계; 상기 코팅 작업부에서, 상기 토출기가 각 필러(P)의 코팅면(P1)에 코팅 용액을 토출하는 S300 단계; 및 토출 완료후, 토출기는 용기 탈착부로 이동되고, 용기가 탈착되어 배출되는 S400 단계를 포함할 수 있다.The present invention is a cell culture filler coating method, the ejector is moved to the container mounting portion, the container containing the coating solution (S) to be ejected is mounted on the ejector; S200 step of moving the ejector to which the container is mounted to the coating work unit in which the filler (P) is disposed; S300 step of discharging the coating solution to the coating surface (P1) of each filler (P) by the ejector in the coating operation unit; and after the discharging is completed, the dispensing machine is moved to the container detachment unit, and the container is detached and discharged, in step S400 .

본 발명에 따른 S100 단계에서, 상기 토출 용액은 친수성 물질로 구비된 친수성 토출 용액인 것이 가능하다.In step S100 according to the present invention, the discharging solution may be a hydrophilic discharging solution provided with a hydrophilic material.

본 발명에 따른 S100 단계에서, 상기 친수성 토출 용액은 poly-L-lysine, fibronectin, PEG 또는 Lamini 중 어느 하나인 것이 가능하다.In step S100 according to the present invention, the hydrophilic discharging solution may be any one of poly-L-lysine, fibronectin, PEG, or Lamini.

본 발명에 따른 S200 단계에서, 각 필러(P)의 코팅면(P1)은 코팅 전에 소수성인 것이 가능하다.In step S200 according to the present invention, it is possible that the coating surface (P1) of each filler (P) is hydrophobic before coating.

본 발명에 있어서, 상기 필러(P)의 코팅면(P1)은 평편면, 오목면 또는 볼록면 중 어느 한 면인 것이 가능하다.In the present invention, the coating surface (P1) of the filler (P) may be any one of a flat surface, a concave surface, or a convex surface.

본 발명에 있어서, 상기 필러(P)의 코팅면(P1)에는 사전에 플라즈마 표면처리가 수행될 수 있다.In the present invention, plasma surface treatment may be performed in advance on the coated surface P1 of the filler P.

본 발명에 따른 S300 단계에서, 상기 토출기는 압축공기의 토출압력을 제어하여, 장착된 용기에서 기 설정된 양의 코팅 용액(S)이 토출되도록 할 수 있다.In step S300 according to the present invention, the ejector may control the ejection pressure of compressed air so that a predetermined amount of the coating solution (S) is ejected from the mounted container.

본 발명에 따른 S300 단계에서, 상기 토출 방식은 드롭(drop) 방식인 것이 가능하다.In step S300 according to the present invention, the discharge method may be a drop method.

본 발명에 따른 S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1)에 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 100%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In the step S300 according to the present invention, the seal area where the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) may be coated to occupy 100% of the total coating surface area.

본 발명에 따른 S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1)에 코팅되는 실 면적은 필러(P)의 코팅면(P1)의 중심을 포함하고, 테두리를 불포함하면서, 전체 코팅면 영역의 70% ~ 98%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300 according to the present invention, the seal area in which the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) includes the center of the coating surface (P1) of the filler (P) and does not include the edge, and the entire coating surface It can be coated to occupy 70% to 98% of the area.

본 발명에 따른 S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1) 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 75% ~ 85%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300 according to the present invention, the coating solution (S) the coating surface (P1) the coated seal area may be coated so as to occupy 75% to 85% of the total coating surface area.

본 발명에 따른 S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1) 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 80%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300 according to the present invention, the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) the seal area may be coated so as to occupy 80% of the total coating surface area.

본 발명은 필러 발명으로서, 본 발명에 따른 세포 배양용 필러 코팅방법에 의해 제조되는 필러로 구현될 수 있다.The present invention is a filler invention, and may be implemented as a filler produced by the filler coating method for cell culture according to the present invention.

본 발명에 따른 세포 배양용 필러 코팅방법은 다음과 같은 효과를 가진다.The filler coating method for cell culture according to the present invention has the following effects.

첫째, 드롭(drop) 토출 방식을 도입하여, 종래의 딥잉(dipping) 방법으로 인하여 발생되는 필러 측면 코팅을 방지하는 효과가 있다.First, by introducing a drop discharge method, there is an effect of preventing the filler side coating caused by the conventional dipping method.

둘째, 세포 배양시 고착력(fixing force) 향상 및 균일한 배양성이 확보된 필러 코팅면의 바람직한 코팅 면적을 다양하게 제시하는 효과가 있다.Second, there is an effect of presenting various preferred coating areas of the filler coating surface, which has improved fixing force and secured uniform culturing during cell culture.

본 발명의 효과는 이상에서 언급된 것들에 한정되지 않으며, 언급되지 아니한 다른 효과들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.Effects of the present invention are not limited to those mentioned above, and other effects not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

도 1은 종래 기술인 딥잉(dipping) 방법을 나타내는 개요도이다.
도 2는 도 1에 따른 딥잉(dipping) 방법으로 필러의 코팅면이 코팅되는 것을 나타낸다.
도 3a는 도 2a와 같이 필러의 코팅면(P1)에만 코팅된 경우의 세포 배양 상태를 나타내고, 도 3b는 도 2c와 같이 필러의 코팅면(P1)뿐 아니라, 측면(P2) 일부에도 코팅된 경우의 세포 배양 상태를 나타낸다.
도 4는 본 발명에 따른 드롭 토출 방식의 필러 코팅 방법의 주요 구성도이다.
도 5는 본 발명에 따른 드롭 토출 방식의 필러 코팅 방법의 공정 순서도이다.
도 6은 직경 2mm 필러에 대한 본 발명의 여러 실시예를 나타낸다.
도 7 및 도 8은 직경 2mm 필러에 대한 종래 기술의 실시예 결과를 나타낸다.
도 9 및 도 10은 도 6e의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 토출부피 1000nL의 토출 결과를 나타낸다.
도 11 및 도 12는 도 6d의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 토출부피 850nL의 토출 결과를 나타낸다.
도 13 및 도 14는 도 6b의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 토출부피 750nL의 토출 결과를 나타낸다.
도 15는 직경 1mm 필러에 대한 본 발명의 실시예로서, 도 15a는 토출부피 100nL 실시예를 나타내며, 도 15b는 토출부피 200nL 실시예를 나타내며, 도 15c는 토출부피 250nL 실시예를 나타낸다.
도 16은 직경 1mm 필러에 대한 종래 기술의 실시예 결과를 나타낸다.
도 17은 도 15a의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 토출부피 100nL의 토출 결과를 나타낸다.
도 18은 도 15b의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 토출부피 200nL의 토출 결과를 나타낸다.
도 19는 도 15c의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 토출부피 250nL의 토출 결과를 나타낸다.1 is a schematic diagram illustrating a prior art dipping method.
FIG. 2 shows that the coating surface of the filler is coated by the dipping method according to FIG. 1 .
Figure 3a shows the cell culture state when only the coating surface (P1) of the filler is coated as shown in Figure 2a, Figure 3b is not only the coating surface (P1) of the filler as shown in Figure 2c, but also the side surface (P2) is partially coated The cell culture state of the case is shown.
4 is a main configuration diagram of a drop-discharging method filler coating method according to the present invention.
5 is a process flow chart of a drop-discharging filler coating method according to the present invention.
6 shows several embodiments of the present invention for a 2 mm diameter filler.
7 and 8 show the results of a prior art example for a 2 mm diameter filler.
9 and 10 show the discharge result of 1000nL of discharge volume by the drop discharging method according to the present invention as an embodiment of FIG. 6e.
11 and 12 are an embodiment of FIG. 6d , and show a discharge result of a discharge volume of 850 nL by the drop discharge method according to the present invention.
13 and 14 are an embodiment of FIG. 6B, and show the discharge result of a discharge volume of 750 nL by the drop discharge method according to the present invention.
15 is an embodiment of the present invention for a 1mm diameter filler, FIG. 15a shows an example with a discharge volume of 100nL, FIG. 15b shows an example with a discharge volume of 200nL, and FIG. 15c shows an example with a discharge volume of 250nL.
16 shows the results of a prior art example for a 1 mm diameter filler.
FIG. 17 is an embodiment of FIG. 15A , and shows a discharge result of a discharge volume of 100 nL by the drop discharge method according to the present invention.
FIG. 18 is an example of FIG. 15b , and shows a result of discharging a discharging volume of 200 nL by a drop discharging method according to the present invention.
FIG. 19 is an embodiment of FIG. 15c , and shows a discharge result of a discharge volume of 250 nL by the drop discharge method according to the present invention.

이하, 첨부한 도면을 참조하여, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예를 설명한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 이해할 수 있는 바와 같이, 후술하는 실시예는 본 발명의 개념과 범위를 벗어나지 않는 한도 내에서 다양한 형태로 변형될 수 있다. 가능한 한 동일하거나 유사한 부분은 도면에서 동일한 도면부호를 사용하여 나타낸다.Hereinafter, with reference to the accompanying drawings, embodiments of the present invention will be described so that those of ordinary skill in the art can easily carry out the present invention. As can be easily understood by those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains, the embodiments described below may be modified in various forms without departing from the concept and scope of the present invention. Wherever possible, identical or similar parts are denoted by the same reference numerals in the drawings.

본 명세서에서 사용되는 전문용어는 단지 특정 실시예를 언급하기 위한 것이며, 본 발명을 한정하는 것을 의도하지는 않는다. 여기서 사용되는 단수 형태들은 문구들이 이와 명백히 반대의 의미를 나타내지 않는 한 복수 형태들도 포함한다.The terminology used herein is for the purpose of referring to specific embodiments only, and is not intended to limit the invention. As used herein, the singular forms also include the plural forms unless the phrases clearly indicate the opposite.

본 명세서에서 사용되는 "포함하는"의 의미는 특정 특성, 영역, 정수, 단계, 동작, 요소 및/또는 성분을 구체화하며, 다른 특정 특성, 영역, 정수, 단계, 동작, 요소, 성분 및/또는 군의 존재나 부가를 제외시키는 것은 아니다.The meaning of “comprising,” as used herein, specifies a particular characteristic, region, integer, step, operation, element and/or component, and other specific characteristic, region, integer, step, operation, element, component and/or It does not exclude the presence or addition of groups.

본 명세서에서 사용되는 기술용어 및 과학용어를 포함하는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 일반적으로 이해하는 의미와 동일한 의미를 가진다. 사전에 정의된 용어들은 관련기술문헌과 현재 개시된 내용에 부합하는 의미를 가지는 것으로 추가 해석되고, 정의되지 않는 한 이상적이거나 매우 공식적인 의미로 해석되지 않는다.All terms including technical and scientific terms used in this specification have the same meaning as commonly understood by a person of ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Terms defined in the dictionary are further interpreted as having a meaning consistent with the related art literature and the presently disclosed content, and unless defined, are not interpreted in an ideal or very formal meaning.

본 명세서에서 사용되는 방향에 관한 표현, 예를 들어 전/후/좌/우의 표현, 상/하의 표현, 종방향/횡방향의 표현은 도면에 개시된 방향을 참고하여 해석될 수 있다.Directional expressions used in this specification, for example, front/back/left/right expressions, up/down expressions, and longitudinal/horizontal directions may be interpreted with reference to the directions disclosed in the drawings.

본 발명은 필러에서 코팅을 하고자 하는 면에 코팅 용액을 원하는 양만큼 올리는 방식으로 하여, 필러의 코팅면 옆으로 용액이 유출되지 않도록 하여, 필러 측면에 코팅이 수행되지 않도록 하는 기술 구성이다.The present invention is a technical configuration in which coating is not performed on the side of the filler by raising the coating solution by a desired amount on the surface to be coated in the filler, so that the solution does not flow out to the side of the coating surface of the filler.

본 발명에서는 필러 표면(코팅면) 대비 실제 코팅면적을 여러 범위로 수행된 실시예를 통해, ECM과 섞인 세포(Cell)를 포함한 세포외 기질(ECM:ExtraCellular Matrix )을 분주하여, CV값을 정량적으로 측정하였다. 또한, 기존의 딥잉(dipping) 방법의 실시예의 CV값도 측정하여, 상호 비교하였다.In the present invention, the CV value is quantitatively determined by dispensing the extracellular matrix (ECM: ExtraCellular Matrix) including the cells (Cell) mixed with the ECM through the examples in which the actual coating area compared to the filler surface (coated surface) was performed in various ranges. was measured. In addition, the CV values of Examples of the conventional dipping method were also measured and compared with each other.

여기서, CV(Coefficient of Variation)는 변동계수를 의미하며, 표준편차를 산술평균으로 나눈 것이다. 이는 측정단위가 서로 다른 자료를 비교하고자 할 때 쓰인다. 즉, 범위나 분산과 같은 산포도를 계산하는 것만으로는 충분하지 않아 상대적인 산포도를 비교해야 한다. 변동 계수(CV)의 값이 클수록 상대적인 차이가 크다는 것을 의미한다.Here, CV (Coefficient of Variation) means a coefficient of variation, and is obtained by dividing the standard deviation by the arithmetic mean. This is used when you want to compare data with different units of measure. In other words, it is not enough to calculate a spread such as range or variance, so you have to compare the relative spread. A larger value of the coefficient of variation (CV) means a larger relative difference.

본 발명에서, 토출되는 부피와 토출된 코팅 용액이 차지하는 실제 코팅 면적은 서로 관련되어 있다. 그런데, 전체 코팅 면적에서 '실제 코팅 면적'이 차지하는 비율이 동일하여도, 필러의 직경에 따라 '토출 부피'는 달라 질 수 있다. In the present invention, the discharged volume and the actual coating area occupied by the discharged coating solution are related to each other. However, even if the ratio of the 'actual coating area' to the total coating area is the same, the 'discharge volume' may vary depending on the diameter of the filler.

이에, 본 발명에서는 전체 코팅 면적에서 '실제 코팅 면적'이 차지하는 비율을 중심으로 본 발명을 설명하고자 한다.Therefore, in the present invention, the present invention will be described with a focus on the ratio of the 'actual coating area' to the total coating area.

본 발명은 3D 세포 배양시, 전체 코팅 면적에서 '실제 코팅 면적'이 차지하는 적절한 비율을 제시하여, In vitro 실험 진행 시 더욱 정확한 결과를 도출해 낼 수 있으며, 이를 통해 신뢰도가 높은 양질의 데이터를 얻을 수 있다.The present invention suggests an appropriate ratio of the 'actual coating area' to the total coating area during 3D cell culture, so that more accurate results can be derived during in vitro experiments, and high-quality data with high reliability can be obtained through this. have.

이하에서는 도면을 참고하여 본 발명을 설명하고자 한다. 참고로, 도면은 본 발명의 특징을 설명하기 위하여, 일부 과장되게 표현될 수도 있다. 이 경우, 본 명세서의 전 취지에 비추어 해석되는 것이 바람직하다.Hereinafter, the present invention will be described with reference to the drawings. For reference, the drawings may be partially exaggerated in order to explain the features of the present invention. In this case, it is preferable to be interpreted in light of the whole meaning of this specification.

도 4는 본 발명에 따른 드롭 토출 방식의 필러 코팅 방법의 주요 구성도이다. 도 5는 본 발명에 따른 드롭 토출 방식의 필러 코팅 방법의 공정 순서도이다.4 is a main configuration diagram of a drop-discharging method filler coating method according to the present invention. 5 is a process flow chart of a drop-discharging filler coating method according to the present invention.

본 발명은 세포 배양시 세포 떨어짐 방지 및 세포 배양 균일도 향상을 위한 필러 코팅 방법으로서, 토출기(10)가 용기 장착부(100)로 이동되고, 토출될 코팅 용액(S)이 수용된 용기(20)가 토출기(10)에 장착되는 S100 단계; 상기 용기(20)가 장착된 토출기(10)가 필러(P)가 배치된 코팅 작업부(200)로 이동되는 S200 단계; 상기 코팅 작업부(200)에서, 상기 토출기(10)가 각 필러(P)의 코팅면(P1)에 코팅 용액을 토출하는 S300 단계; 및 토출 완료후, 토출기(10)는 용기 탈착부(300)로 이동되고, 용기(20)가 탈착되어 배출되는 S400 단계를 포함한다.The present invention is a filler coating method for preventing cell dropping during cell culture and improving cell culture uniformity, wherein the ejector 10 is moved to the container mounting unit 100, and the container 20 containing the coating solution (S) to be ejected is Step S100 to be mounted on the ejector 10; Step S200 in which the container 20 is mounted, the ejector 10 is moved to the coating operation unit 200 where the filler (P) is disposed; S300 step of discharging the coating solution to the coating surface (P1) of each filler (P) by the ejector (10) in the coating operation unit (200); and a step S400 in which the ejector 10 is moved to the container detachment unit 300 after the discharge is completed, and the container 20 is detached and discharged.

본 발명에 따른 S100 단계는 토출기(10)가 용기 장착부(100)로 이동되고, 토출될 코팅 용액(S)이 수용된 용기(20)가 토출기(10)에 장착되는 단계이다.Step S100 according to the present invention is a step in which the ejector 10 is moved to the container mounting unit 100 , and the container 20 containing the coating solution S to be discharged is mounted on the ejector 10 .

S100 단계에서, 상기 토출 용액은 친수성 물질로 구비된 친수성 토출 용액인 것이 바람직하다.In step S100, the discharging solution is preferably a hydrophilic discharging solution provided with a hydrophilic material.

S100 단계에서, 본 발명에는 친수성 용액 모두가 사용가능하다. 일 실시예로서, 상기 친수성 토출 용액은 poly-L-lysine, fibronectin, PEG 또는 Lamini 중 어느 하나인 것이 적용될 수 있다. 본 명세서에서는 설명의 편의를 위해 poly-L-lysine를 위주로 설명하고자 한다. In step S100, all of the hydrophilic solutions can be used in the present invention. As an embodiment, the hydrophilic discharging solution may be any one of poly-L-lysine, fibronectin, PEG, and Lamini. In the present specification, for convenience of description, poly-L-lysine will be mainly described.

소수성(hydrophobic) 필러 표면(pillar　surface)에　L-lysine　coating을　통해　양전하를　띄게　하여,　세포외　기질인　하이드로젤(hydrogel)에　포함된　음전하의　폴리머(polymer)들과　결합하여　3차원　구조체의　필러 표면과의　결합력을　높일 수 있다. Through L-lysine coating on the hydrophobic filler surface, the positive charge is conspicuously applied to the surface of the hydrogel, which is an extracellular matrix, to combine with the surface of the polymer with a 3D negative charge. It is possible to increase the bonding power with 　.

본 발명에 따른 S200 단계는 상기 용기(20)가 장착된 토출기(10)가 필러(P)가 배치된 코팅 작업부(200)로 이동되는 단계이다.Step S200 according to the present invention is a step in which the ejector 10 in which the container 20 is mounted is moved to the coating operation unit 200 in which the filler P is disposed.

S200 단계에서, 각 필러(P)의 코팅면(P1)은 코팅 전에 소수성인 것이 바람직하다. In step S200, the coating surface (P1) of each filler (P) is preferably hydrophobic before coating.

본 발명에 따른 필러(P)의 코팅면(P1)은 평편면, 오목면 또는 볼록면 중 어느 한 면인 것이 가능하다. 본 명세서의 도면은 설명의 용이를 위하여, 평편면인 실시예를 사용하였다.The coating surface (P1) of the filler (P) according to the present invention may be any one of a flat surface, a concave surface or a convex surface. The drawings in the present specification used an embodiment that is a flat surface for ease of explanation.

또한, 본 발명에 있어서, 상기 필러(P)의 코팅면(P1)에는 사전에 플라즈마 표면처리가 수행될 수 있다. 이는 코팅 전에 플라즈마 표면처리를 통해 친수성 있는 코팅액이 잘 스며들도록 하기 위한 것이다.In addition, in the present invention, the plasma surface treatment may be performed in advance on the coated surface P1 of the filler P. This is to allow the hydrophilic coating solution to permeate well through plasma surface treatment before coating.

본 발명에 따른 S300 단계는 상기 코팅 작업부(200)에서, 상기 토출기(10)가 각 필러(P)의 코팅면(P1)에 코팅 용액을 토출하는 단계이다.Step S300 according to the present invention is a step in which the ejector 10 discharges the coating solution to the coating surface P1 of each filler P in the coating operation unit 200 .

S300 단계에서, 상기 토출기(10)는 압축공기의 토출압력을 제어하여, 장착된 용기(20)에서 기 설정된 양의 코팅 용액(S)이 토출될 수 있다.In step S300 , the ejector 10 may control the ejection pressure of compressed air, so that a predetermined amount of the coating solution S may be ejected from the mounted container 20 .

상기 토출 방식은 드롭(drop) 방식이 바람직하다. 드롭 방식은 토출기에서 압축공기의 토출압력을 제어하여 코팅 용액이 수용된 용기 상단 내부를 가압하면, 용기 하단을 통해 기 설정된 양의 코팅 용액이 방울(drop)지게 토출되는 것을 의미한다.The discharge method is preferably a drop method. The drop method means that when the discharge pressure of compressed air is controlled by the discharger to pressurize the inside of the container containing the coating solution, a predetermined amount of the coating solution is discharged through the bottom of the container dropwise.

S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1)에 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 100%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300 , the real area in which the coating solution S is coated on the coating surface P1 may be coated to occupy 100% of the total coating surface area.

종래의 딥잉(dipping) 방식은 코팅면 영역의 100%를 코팅하기 위해 필러 표면이 아래로 향하도록 배치하여 용액에 담그면(dipping), 필러 표면 뿐아니라 필러의 측면에도 코팅이 되는 문제점이 있었다. 하지만, 본 발명에 따른 드롭(drop) 방식은 필러 표면이 위로 향하도록 배치하여 용액을 드롭(drop)하는 방식이므로, 필러 표면의 전체 코팅면 영역의 100%를 점유하되 필러 측면에는코팅이 되지 않도록 할 수 있다.In the conventional dipping method, if the filler surface is disposed so that 100% of the coating surface area is coated and the filler surface is immersed in a solution, there is a problem in that not only the filler surface but also the side of the filler is coated. However, since the drop method according to the present invention is a method of dropping the solution by disposing the filler surface upward, it occupies 100% of the total coating surface area of the filler surface, but does not coat the filler side. can do.

S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1)에 코팅되는 실 면적은 필러(P)의 코팅면(P1)의 중심을 포함하고, 테두리를 불포함하면서, 전체 코팅면 영역의 70% ~ 98%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300, the seal area in which the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) includes the center of the coating surface (P1) of the filler (P), does not include the edge, and 70% of the total coating surface area It can be coated to occupy ~ 98%.

전술한 바와 같이, 본 발명은 필러 표면인 전체 코팅면 영역의 100%를 점유하도록 코팅할 수도 있다. 하지만 세포외 기질과의 결합력을 높이기 위해 필라 표면 전체를 코팅하게 될 경우, 상대적으로 가장자리 부분에 세포들이 결집하게 되어 3차원 배양이 아닌 필라 표면에 붙어 자라는 가능성이 있을 수 있다. 따라서, 필러 측면과의 간격을 두고 코팅하여, 필러 측면에 용액이 코팅될 가능성을 낮추는 것도 바람직하다. 이에, 본 발명에서, 전체 코팅면 영역의 최대 98%를 코팅하고 나머지 2%를 필러 측면과의 간격으로 유지하는 것도 가능하다. As described above, the present invention may be coated so as to occupy 100% of the total coating surface area, which is the filler surface. However, if the entire surface of the pillar is coated in order to increase the binding force with the extracellular matrix, cells are relatively aggregated at the edge, so there is a possibility that they will grow attached to the surface of the pillar rather than in 3D culture. Therefore, it is also desirable to coat the filler side at a distance to reduce the possibility of the solution being coated on the filler side surface. Accordingly, in the present invention, it is also possible to coat up to 98% of the total coating surface area and maintain the remaining 2% as a gap with the filler side.

또한, 필러 표면을 코팅하는 것은 세포외 기질과 세포 표면과의 결합력을 강화하여 장기간 배양시에도 3차원 구조체를 유지하는 것이 목적이다. 그런데, 세포 표면의 면적이 작아지면 당연히 세포외 기질과의 결합력도 작아질 수 밖에 없을 것이다. 이에, 본 발명에서는 전체 코팅면 영역의 최소 70%를 코팅하는 것이 바람직하다.In addition, the purpose of coating the filler surface is to maintain the three-dimensional structure even during long-term culture by strengthening the binding force between the extracellular matrix and the cell surface. However, as the area of the cell surface decreases, the binding force with the extracellular matrix will naturally decrease as well. Therefore, in the present invention, it is preferable to coat at least 70% of the total coating surface area.

S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1) 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 75% ~ 85%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300, the coating solution (S) the coating surface (P1) the coated seal area may be coated to occupy 75% to 85% of the total coating surface area.

본 발명에 있어서, 전체 코팅면 영역의 75% 이상이면 필러 표면과 결합되는 세포 표면의 면적이 충분히 확보될 수 있다. 전체 코팅면 영역이 85% 이하를 충족하여도 필러 표면에서 3차원 구조체가 장기간 배양시에도 충분히 유지될 수 있다.In the present invention, if it is 75% or more of the total coating surface area, the area of the cell surface combined with the filler surface can be sufficiently secured. Even if the total coating surface area meets 85% or less, the three-dimensional structure on the filler surface can be sufficiently maintained even during long-term culture.

S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1) 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 80%를 점유하도록 코팅될 수 있다.In step S300, the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) the real area may be coated so as to occupy 80% of the total coating surface area.

본 발명에 있어서, 전체 코팅면 영역의 80%이면, 필러 표면과 결합되는 세포 표면 면적의 확보의 관점과, 3차원 구조체의 장기간 유지 관점에서 더욱 바람직하다.In the present invention, if it is 80% of the total coating surface area, it is more preferable from the viewpoint of securing the cell surface area combined with the filler surface, and from the viewpoint of long-term maintenance of the three-dimensional structure.

본 발명에 따른 S400 단계는 토출 완료후, 토출기(10)는 용기 탈착부(300)로 이동되고, 용기(20)가 탈착되어 배출되는 단계이다.Step S400 according to the present invention is a step in which the ejector 10 is moved to the container detachment unit 300 after the discharge is completed, and the container 20 is detached and discharged.

토출기(10)는 토출이 완료된 용기를 탈착한 후, 다시 용기 장착부(100)로 이동하여, S100 단계 내지 S400 단계를 반복 수행할 수 있다.After the ejector 10 detaches the container from which the ejection has been completed, the ejector 10 may move back to the container mounting unit 100 and repeat steps S100 to S400.

한편, 본 발명은 필러 구조체로 구현될 수도 있다. 구체적으로, 청구항 1에 따른 세포 배양용 필러 코팅방법에 의해 제조되는 필러로 구현될 수 있다.Meanwhile, the present invention may be implemented as a filler structure. Specifically, it may be implemented as a filler produced by the cell culture filler coating method according to claim 1.

이하에서는, 본 발명에 따른 실시예를 통해, 본 발명의 구성을 더욱 구체적으로 설명하고자 한다.Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in more detail through embodiments according to the present invention.

먼저, 직경 2mm 필러에 대한 본 발명의 실시예를 설명한다.First, an embodiment of the present invention for a 2 mm diameter filler will be described.

도 6은 직경 2mm 필러에 대한 본 발명의 실시예로서, 도 6a는 토출부피 700nL 및 실제 코팅면적 79.5%의 실시예를 나타내며, 도 6b는 토출부피 750nL 및 실제 코팅면적 80%의 실시예를 나타내며, 도 6c는 토출부피 800nL 및 실제 코팅면적 95%의 실시예를 나타내며, 도 6d는 토출부피 850nL 및 실제 코팅면적 98%의 실시예를 나타내며, 도 6e는 토출부피 1000nL 및 실제 코팅면적 100%의 실시예를 나타낸다.6 is an embodiment of the present invention for a diameter of 2mm filler, FIG. 6a shows an example of a discharge volume of 700nL and an actual coating area of 79.5%, and FIG. 6b shows an example of a discharge volume of 750nL and an actual coating area of 80% , FIG. 6c shows an example of a discharge volume of 800 nL and an actual coating area of 95%, FIG. 6d shows an example of a discharge volume of 850 nL and an actual coating area of 98%, and FIG. 6e shows an example of a discharge volume of 1000 nL and an actual coating area of 100% Examples are shown.

도 7 및 도 8은 직경 2mm 필러에 대한 종래 기술의 실시예로서, 딥잉(dipping) 방법으로 필러 칩을 코팅하여, CV값이 64.36%가 산출된 결과를 나타낸다.7 and 8 show a result of calculating a CV value of 64.36% by coating a filler chip by a dipping method as an example of the prior art for a filler having a diameter of 2 mm.

구체적으로, 도 7은 2mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 담궈서(dipping) 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, FIG. 7 is an image of a 2 mm 384 filler plate dipping in a coating solution to coat the filler, and then staining live cells using calcein AM staining reagent after three-dimensional cell culture. indicates

도 9 및 도 10은 도 6e의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭(drop) 토출 방법으로 토출부피 1000nL를 토출하여, 필러 코팅면(P1)의 100%를 코팅하여 CV값이 16.91%가 산출된 결과를 나타낸다.9 and 10 are an example of FIG. 6e, and by discharging a discharge volume of 1000 nL by a drop discharge method according to the present invention, 100% of the filler coating surface P1 is coated, so that the CV value is 16.91% calculated. shows the results.

구체적으로, 도 9는 2mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 토출부피 1000nl(면적대비 100%)를 토출하여 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, Figure 9 shows a 2mm 384 filler plate by discharging a discharge volume of 1000nl (100% of the area) to the coating solution to coat the filler, followed by 3D cell culture using calcein AM staining reagent This shows an image stained with live cells.

이러한 대비를 통해, 본 발명에 따른 드롭(drop) 토출 방법으로 필러 코팅면의 100%를 실제 코팅 면적으로 하여도, 종래 기술인 딥잉 방법의 CV값인 64.36% 보다 매우 적은 16.91%가 되어, 47.45%가 감소됨을 알 수 있다. Through this contrast, even if 100% of the filler coating surface is the actual coating area by the drop discharging method according to the present invention, it is 16.91%, which is much less than the CV value of 64.36% of the prior art dipping method, 47.45% can be seen to decrease.

즉, 본 발명은 실제 코팅 면적을 100%로 하여도 종래의 딥잉(dipping) 방법보다는 보다 우수한 것을 알 수 있다.That is, it can be seen that the present invention is superior to the conventional dipping method even when the actual coating area is 100%.

도 11 및 도 12는 도 6d의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 850nL를 토출하여, 그 결과 필러 코팅면(P1) 98%가 실제 코팅된 CV값이 10.91%가 산출된 결과를 나타낸다.11 and 12 are an example of FIG. 6d, and 850 nL is discharged by the drop discharge method according to the present invention. indicates.

필러 코팅면의 테두리에 속하는 2% 영역을 제외한 나머지 98%를 코팅한 실시예의 CV값이 10.91%이므로, 테두리 2% 영역을 포함하여 100% 코팅한 실시예의 CV값인 16.91% 보다 6%P가 더 감소되었다.Since the CV value of the example coated with the remaining 98% except for the 2% area belonging to the edge of the filler coated surface is 10.91%, 6%P is more than the CV value of the example coated with 100% including the 2% area of the edge of 16.91% decreased.

구체적으로, 도 11은 2mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 토출부피 850nl(면적대비 95%) 토출하여 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, FIG. 11 shows a 2mm 384 filler plate in a coating solution with a discharge volume of 850 nl (95% of the area) discharged to coat the filler, followed by 3D cell culture using calcein AM staining reagent. An image of living cells is shown.

도 13 및 도 14는 도 6b의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭(drop) 토출 방법으로 토출부피 750nL를 토출하여, 필러 코팅면(P1)의 80%를 실제 코팅하여 CV값이 7.08%가 산출된 결과를 나타낸다. 필러 코팅면의 80%를 코팅한 실시예의 CV값이 7.08%이므로, 필러 코팅면의 98% 코팅한 실시예의 CV값인 10.91% 보다 3.83%P가 더 감소되었다.13 and 14 are an embodiment of FIG. 6b, and by discharging a discharge volume of 750 nL by a drop discharge method according to the present invention, 80% of the filler coating surface P1 is actually coated so that the CV value is 7.08% The calculated result is shown. Since the CV value of the example in which 80% of the filler-coated surface was coated was 7.08%, the CV value of the example in which 98% of the filler-coated surface was coated was reduced by 3.83%P compared to 10.91%.

구체적으로, 도 13은 2mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 토출부피 750nl(면적대비 80%)를 토출하여 필러(pillar)를 코팅한 다음, 세포를 3차원 배양하여 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, Figure 13 shows a 2 mm 384 filler plate (pillar plate) with a discharge volume of 750 nl (80% of the area) discharged into the coating solution to coat the filler, and then three-dimensionally culturing the cells to obtain calcein AM staining reagent. Shows images stained with live cells.

다음으로, 직경 1mm 필러에 대한 본 발명의 실시예를 설명한다.Next, an embodiment of the present invention for a 1 mm diameter filler will be described.

도 15는 직경 1mm 필러에 대한 본 발명의 실시예로서, 도 15a는 토출부피 100nL 및 실제 코팅면적 65%의 실시예를 나타내며, 도 15b는 토출부피 200nL 및 실제 코팅면적 65%의 실시예를 나타내며, 도 15c는 토출부피 250nL 및 실제 코팅면적 80%의 실시예를 나타낸다.15 is an embodiment of the present invention for a 1 mm diameter filler, FIG. 15a shows an example of a discharge volume of 100 nL and an actual coating area of 65%, and FIG. 15b shows an example of a discharge volume of 200 nL and an actual coating area of 65% , Figure 15c shows an example of a discharge volume of 250 nL and an actual coating area of 80%.

도 16은 직경 1mm 필러에 대한 종래 기술의 실시예로서, 딥잉(dipping) 방법으로 필러 칩을 코팅하여, CV값이 25.47%가 산출된 결과를 나타낸다.FIG. 16 is a prior art example for a 1 mm diameter filler, and shows the result of calculating a CV value of 25.47% by coating the filler chip by a dipping method.

구체적으로, 도 16은 1mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 담궈서(dipping) 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, FIG. 16 is an image of living cells stained using calcein AM staining reagent after 3D cell culture after dipping a 1 mm 384 pillar plate in a coating solution to coat the pillar. indicates

도 17은 도 15a의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭(drop) 토출 방법으로 100nL를 토출하여, 필러 코팅면(P1)의 65%를 코팅하여 CV값이 36.64%가 산출된 결과를 나타낸다. 이 CV값은 종래 기술인 딥잉 방법의 CV값인 25.47% 보다 큰 36.64%가 되어, 11.17%P가 증가됨을 알 수 있다. 이를 통해, 실제 코팅 면적이 65% 이하가 되면 종래의 딥잉(dipping) 방법과 대비하여 더 좋지 않음을 알 수 있다.FIG. 17 is an example of FIG. 15a , and shows the result of calculating a CV value of 36.64% by discharging 100 nL by the drop discharging method according to the present invention, and coating 65% of the filler coating surface P1. This CV value becomes 36.64%, which is larger than the CV value of 25.47% of the prior art dipping method, and it can be seen that 11.17%P is increased. Through this, it can be seen that when the actual coating area is 65% or less, it is not better compared to the conventional dipping method.

구체적으로, 도 17은 1mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 토출부피 100nl(면적대비 65%)를 토출하여 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, Figure 17 shows a 1 mm 384 filler plate (pillar plate) with a discharge volume of 100 nl (65% of the area) discharged into the coating solution to coat the pillar, and then three-dimensional cell culture using calcein AM staining reagent This shows an image stained with live cells.

도 18은 도 15b의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭(drop) 토출 방법으로 200nL를 토출하여, 필러 코팅면(P1)의 70%를 코팅하여 CV값이 24.46%가 산출된 결과를 나타낸다. 이 CV값은 종래 기술인 딥잉(dipping) 방법의 CV값인 25.47% 보다 1.01%P가 감소하여 실질적으로는 유사함을 알 수 있다. FIG. 18 is an example of FIG. 15b, and by discharging 200 nL by the drop discharging method according to the present invention, 70% of the filler coated surface P1 is coated, and the CV value is 24.46% It shows the calculated result. It can be seen that this CV value is substantially similar by decreasing 1.01%P than the CV value of 25.47% of the dipping method according to the prior art.

구체적으로, 도 18은 1mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 토출부피 200nl(면적대비 70%)를 토출하여 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, FIG. 18 shows a 1 mm 384 filler plate in a coating solution with a discharge volume of 200 nl (70% of the area) to be coated, followed by 3D cell culture using calcein AM staining reagent. This shows an image stained with live cells.

도 19는 도 15c의 실시예로서, 본 발명에 따른 드롭 토출 방법으로 250nL를 토출하여, 필러 코팅면(P1)의 80%를 코팅하여 CV값이 15.53%가 산출된 결과를 나타낸다. 이 CV값은 종래 기술인 딥잉 방법의 CV값인 25.47% 보다 9.94%P가 감소하여 유의미한 차이가 발생함을 알 수 있다.FIG. 19 is an example of FIG. 15c , and shows the result of calculating the CV value of 15.53% by discharging 250 nL by the drop discharging method according to the present invention, and coating 80% of the filler coating surface P1. It can be seen that this CV value is reduced by 9.94%P from 25.47%, which is the CV value of the prior art dipping method, resulting in a significant difference.

구체적으로, 도 19는 1mm 384 필러 플레이트(pillar plate)를 코팅 용액에 토출부피 250nl(면적대비 80%)를 토출하여 필러(pillar)를 코팅한 다음, 3차원 세포 배양 후 calcein AM 염색 시약을 이용하여 살아 있는 세포를 염색한 이미지를 나타낸다.Specifically, FIG. 19 shows a 1 mm 384 filler plate (pillar plate) with a discharge volume of 250 nl (80% of the area) discharged into the coating solution to coat the pillar, and then 3D cell culture using calcein AM staining reagent This shows an image stained with live cells.

P : 필러
P1 : 필러 코팅면
P2 : 필러 측면
S : 코팅 용액
10 : 토출기
20 : 용기
100 : 용기 장착부
200 : 코팅 작업부
300 : 용기 탈착부P: filler
P1: Filler coated side
P2: filler side
S: coating solution
10: ejector
20: courage
100: container mounting part
200: coating work unit
300: container detachable part

Claims (13)

토출기가 용기 장착부로 이동되고, 토출될 코팅 용액(S)이 수용된 용기가 토출기에 장착되는 S100 단계; 상기 용기가 장착된 토출기가 필러(P)가 배치된 코팅 작업부로 이동되는 S200 단계; 상기 코팅 작업부에서, 상기 토출기가 각 필러(P)의 코팅면(P1)에 코팅 용액을 토출하는 S300 단계; 및 토출 완료후, 토출기는 용기 탈착부로 이동되고, 용기가 탈착되어 배출되는 S400 단계를 포함하며,
S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1)에 코팅되는 실 면적은 필러(P)의 코팅면(P1)의 중심을 포함하고, 테두리를 불포함하면서, 전체 코팅면 영역의 70% ~ 98%를 점유하도록 코팅되는 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.Step S100 in which the ejector is moved to the container mounting unit, and the container in which the coating solution (S) to be ejected is accommodated is mounted on the ejector; S200 step of moving the ejector to which the container is mounted to the coating work unit in which the filler (P) is disposed; S300 step of discharging the coating solution to the coating surface (P1) of each filler (P) by the ejector in the coating operation unit; And after the discharging is completed, the dispensing machine is moved to the container detachment unit, and the container is detached and discharged, comprising a step S400 of discharging,
In step S300, the seal area in which the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) includes the center of the coating surface (P1) of the filler (P), does not include the edge, and 70% of the total coating surface area Filler coating method for cell culture, characterized in that it is coated to occupy ~ 98%. 청구항 1에 있어서,
S100 단계에서, 상기 토출 용액은 친수성 물질로 구비된 친수성 토출 용액인 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.The method according to claim 1,
In step S100, the discharge solution is a cell culture filler coating method, characterized in that the hydrophilic discharge solution provided with a hydrophilic material. 청구항 2에 있어서,
S100 단계에서, 상기 친수성 토출 용액은 poly-L-lysine, fibronectin, PEG 또는 Lamini 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.3. The method according to claim 2,
In step S100, the hydrophilic discharge solution is a cell culture filler coating method, characterized in that any one of poly-L-lysine, fibronectin, PEG or Lamini. 청구항 1에 있어서,
S200 단계에서, 각 필러(P)의 코팅면(P1)은 코팅 전에 소수성인 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.The method according to claim 1,
In step S200, the coating surface (P1) of each filler (P) is a filler coating method for cell culture, characterized in that the hydrophobic before coating. 청구항 4에 있어서,
상기 필러(P)의 코팅면(P1)은 평편면, 오목면 또는 볼록면 중 어느 한 면인 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.5. The method according to claim 4,
The coating surface (P1) of the filler (P) is a filler coating method for cell culture, characterized in that any one of a flat surface, a concave surface or a convex surface. 청구항 1에 있어서,
상기 필러(P)의 코팅면(P1)에는 사전에 플라즈마 표면처리가 수행되는 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.The method according to claim 1,
The filler coating method for cell culture, characterized in that the plasma surface treatment is performed in advance on the coating surface (P1) of the filler (P). 청구항 1에 있어서,
S300 단계에서, 상기 토출기는 압축공기의 토출압력을 제어하여, 장착된 용기에서 기 설정된 양의 코팅 용액(S)이 토출되도록 하는 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.The method according to claim 1,
In step S300, the discharger controls the discharge pressure of the compressed air, the filler coating method for cell culture, characterized in that the coating solution (S) is discharged in a predetermined amount from the mounted container. 청구항 7에 있어서,
S300 단계에서, 상기 토출 방식은 드롭(drop) 방식인 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.8. The method of claim 7,
In step S300, the discharge method is a filler coating method for cell culture, characterized in that the drop method. 삭제delete 삭제delete 청구항 1에 있어서,
S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1) 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 75% ~ 85%를 점유하도록 코팅되는 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.The method according to claim 1,
In step S300, the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) the real area is coated so as to occupy 75% to 85% of the total coating surface area Filler coating method for cell culture. 청구항 11에 있어서,
S300 단계에서, 상기 코팅 용액(S)이 코팅면(P1) 코팅되는 실 면적은 전체 코팅면 영역의 80%를 점유하도록 코팅되는 것을 특징으로 하는 세포 배양용 필러 코팅방법.12. The method of claim 11,
In step S300, the coating solution (S) is coated on the coating surface (P1) real area is coated so as to occupy 80% of the total coating surface area Filler coating method for cell culture. 청구항 1에 따른 세포 배양용 필러 코팅방법에 의해 제조되는 필러.
A filler produced by the cell culture filler coating method according to claim 1.
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Ahn 등.A Pillar-Based High-Throughput Myogenic Differentiation Assay to Assess Drug Safety. Molecules. 2021.9.25., 26, 5805 1부.* *

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