KR102427536B1 - Pipet for separation of nucleic acid and method of separating nucleic acid by using the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 압력 변화에 따라 액상 물질을 배출 또는 흡수할 수 있는 피펫으로서, 상기 피펫의 내부 영역을 정의하는 하우징; 상기 하우징의 내벽을 따라 형성되고, 상기 내부 영역을 상부 영역과 하부 영역으로 구획하는 분리판; 상기 하부영역으로부터 연장되어 관로를 형성하는 피펫관; 상기 피펫관의 내부에 형성되어 상기 분리판까지 연결되는 내부관; 및 상기 하부 영역에 배치된 필터막을 포함한다. 본 발명에 따른 피펫은 종래의 원심분리 수단을 대체하여 핵산 등의 바이오물질을 분리하는 공정에서 효과적으로 기능할 수 있다. The present invention provides a pipette capable of discharging or absorbing a liquid substance according to a change in pressure, comprising: a housing defining an inner region of the pipette; a separation plate formed along an inner wall of the housing and dividing the inner region into an upper region and a lower region; a pipette tube extending from the lower region to form a conduit; an inner tube formed inside the pipette tube and connected to the separation plate; and a filter film disposed in the lower region. The pipette according to the present invention can effectively function in the process of separating biomaterials such as nucleic acids by replacing the conventional centrifugation means.

Description

핵산분리용 피펫 및 이를 이용한 핵산의 분리방법{PIPET FOR SEPARATION OF NUCLEIC ACID AND METHOD OF SEPARATING NUCLEIC ACID BY USING THE SAME}A pipette for nucleic acid separation and a nucleic acid separation method using the same

본 기술은 바이오 장비 분야의 기술로서, 특히 각종 바이오 시료 용액의 처리 공정에서 활용될 수 있는 바이오물질의 분리 기술에 관한 것이다. The present technology is a technology in the field of bio equipment, and in particular, relates to a separation technology of a biomaterial that can be utilized in a process of processing various bio sample solutions.

중합효소 반응(polymerase chain reaction, PCR) 기술은 지속적으로 발전을 거듭하고 있으며, 단일한 PCR 장비에 의하여 열사이클링 공정 및 형광 검출 등 일련의 공정을 간편하게 처리할 수 있는 장비 등, PCR의 요소 기술들의 집약화가 가속화되고 있다. 나아가, 대량의 시료에 대한 연속 공정 및 자동화 공정이 가능한 다양한 바이오 진단 기술들이 개발되고 있다. Polymerase chain reaction (PCR) technology is continuously developing, and it is a device that can easily process a series of processes such as thermal cycling process and fluorescence detection by a single PCR equipment. Intensification is accelerating. Furthermore, various biodiagnostic technologies capable of continuous and automated processes for a large amount of samples are being developed.

최근에는 실시간 PCR, 디지털 PCR(d-PCR)을 뛰어 어넘는 차세대 PCR 방식인 dd-PCR(digital droplet PCR) 이 차세대 PCR 기술로 대두되고 있다. dd-PCR은 20㎕의 PCR 반응을 2만개의 미세방울(droplet)로 쪼개어 증폭시키는 시스템이다. Recently, dd-PCR (digital droplet PCR), a next-generation PCR method that goes beyond real-time PCR and digital PCR (d-PCR), is emerging as a next-generation PCR technology. dd-PCR is a system for amplifying 20 μl of a PCR reaction by splitting it into 20,000 microdroplets.

이렇듯 첨단화되는 PCR의 발전 방향에 비추어 PCR 공정 자체나 장치 기술뿐만 아니라, 이에 발맞춘 PCR 대상 시료의 전처리 공정, 즉 환자의 검체로부터 PCR 대상 시료를 분리 또는 추출해 내는 공정의 첨단화 필요성이 커지고 있다. PCR 대상 시료(PCR 용액)의 준비 과정까지 검체로부터 핵산 등을 분리하는 과정은 전체 PCR 공정의 자동화 및 연속 공정을 저해하는 요소로 작용할 수 있기 때문이다. In light of the development of advanced PCR, the need for advanced not only the PCR process itself and device technology, but also the pretreatment process of the PCR target sample, that is, the process of separating or extracting the PCR target sample from the patient's sample, is increasing. This is because the process of separating nucleic acids from the sample up to the preparation process of the PCR target sample (PCR solution) may act as a factor hindering the automation and continuous process of the entire PCR process.

종래의 원심분리 방식에 의한 분리 공정은 이러한 자동화 및 연속공정의 트랜드에 부합하지 못하는 측면이 있고, 대량화된 샘플의 처리에 적합하지 않은 측면이 있다. 따라서, 기존의 원심분리 방식에 의하여 바이오 물질을 분리해내는 기술을 대체할 다양한 신규의 용액처리기술들의 개발이 절실한 시점이다.
선행기술문헌: 국내공개특허 10-2020-0019594호
The separation process by the conventional centrifugation method has an aspect that does not conform to the trend of such automated and continuous processes, and has an aspect that is not suitable for processing large-scale samples. Therefore, it is urgent to develop various new solution treatment technologies to replace the technology for separating biomaterials by the conventional centrifugation method.
Prior art literature: Korean Patent Publication No. 10-2020-0019594

본 발명은 이러한 PCR 기술의 발전과 더불어 PCR 대상 물질의 사전 처리 기술의 긴급성을 고려하여 도출된 발명으로서, 대량 처리 및 자동화 처리에 유리한 신규의 핵산 분리용 피펫을 제공하고 나아가 이를 이용한 핵산의 분리방법을 제공하는 것을 목적으로 한다. The present invention is an invention derived in consideration of the urgency of the PCR target material pre-processing technology along with the development of PCR technology, and provides a novel nucleic acid separation pipette advantageous for mass processing and automated processing, and furthermore, separation of nucleic acids using the same The purpose is to provide a method.

본 발명의 일 실시예에 따른 핵산분리용 피펫은 압력 변화에 따라 액상 물질을 배출 또는 흡수할 수 있는 피펫으로서, 상기 피펫의 내부 영역을 정의하는 하우징; 상기 하우징의 내벽을 따라 형성되고, 상기 내부 영역을 상부 영역과 하부 영역으로 구획하는 분리판; 상기 하부영역으로부터 연장되어 관로를 형성하는 피펫관; 상기 피펫관의 내부에 형성되어 상기 분리판까지 연결되는 내부관; 및 상기 하부 영역에 배치된 필터막을 포함한다. A nucleic acid separation pipette according to an embodiment of the present invention is a pipette capable of discharging or absorbing a liquid substance according to a change in pressure, comprising: a housing defining an inner region of the pipette; a separation plate formed along an inner wall of the housing and dividing the inner region into an upper region and a lower region; a pipette tube extending from the lower region to form a conduit; an inner tube formed inside the pipette tube and connected to the separation plate; and a filter film disposed in the lower region.

상기 분리판에는 적어도 하나의 제1 개구부를 포함하고, 상기 제1 개구부를 개폐할 수 있는 제1 개폐부를 포함한다. The separation plate includes at least one first opening and a first opening and closing part capable of opening and closing the first opening.

한편, 상기 내부관에 연결된 상기 분리판에는 상기 내부관에 대응한 제2 개구부를 포함하고, 상기 제2 개구부를 개폐할 수 있는 제2 개폐부를 포함한다. Meanwhile, the separation plate connected to the inner tube includes a second opening corresponding to the inner tube, and includes a second opening/closing part capable of opening and closing the second opening.

본 발명의 일 실시예에 따른 핵산의 분리방법은 전술한 피펫을 이용하여 검체용액으로부터 핵산을 분리하는 방법으로서, 상기 피펫을 감압하여 검체용액을, 상기 제2 개폐부를 열고 상기 내부관을 통하여 상기 상부 영역으로 흡수하는 단계; 상기 제2 개폐부를 닫고, 상기 제1 개폐부를 열은 상태에서 상기 피펫을 가압하여 상기 검체용액을 하부영역으로 밀어내는 단계; 및 하부영역으로 밀어낸 검체용액이 필터막을 경유하도록 피펫을 지속적으로 가압함으로써, 상기 피펫관을 통하여 상기 필터막을 경유한 검체용액이 외부로 배출되도록 하는 단계를 포함한다. The method for separating nucleic acids according to an embodiment of the present invention is a method of separating nucleic acids from a sample solution using the aforementioned pipette. absorbing into the upper region; closing the second opening/closing unit and pressing the pipette while the first opening/closing unit is opened to push the sample solution into the lower region; and continuously pressurizing the pipette so that the sample solution pushed into the lower region passes through the filter membrane, so that the sample solution passing through the filter membrane is discharged to the outside through the pipette tube.

상기 검체용액은 환자로부터 채취한 검체 및 세포벽을 용해할 수 있는 용해 완충액(lysis buffer)을 포함할 수 있다. The sample solution may include a lysis buffer capable of dissolving the sample collected from the patient and the cell wall.

본 발명의 핵산분리용 피펫은 피펫의 가압 또는 감압만으로 검체 용액으로부터 분리대상 물질을 효율적으로 분리할 수 있을 뿐만 아니라, 분리된 물질을 다음 공정에 사용하기 위하여, 피펫으로부터 원하는 용기 등에 배출하여 보관하기 용이하다. The pipette for nucleic acid separation of the present invention can efficiently separate the material to be separated from the sample solution only by pressurizing or depressurizing the pipette, and the separated material is discharged from the pipette and stored in a desired container for use in the next process. Easy.

본 발명의 피펫은 복수의 피펫을 어레이 형태로 배치하여 대량의 검체에 대한 분리작업에 사용됨으로써 대량의 검체에 대한 동시 검출 및 진단이 가능하게 할 수 있다. The pipette of the present invention can enable simultaneous detection and diagnosis of a large number of specimens by disposing a plurality of pipettes in an array form and used for separation of a large amount of specimen.

나아가, 공지된 다양한 연속공정 시스템을 도입함으로써 연속공정에 적용할 수 있도록 다양한 변형 설계가 가능하여, 궁극적으로 대량의 검체에 대한 동시 용액처리 공정을 가능하게 하고 연속적인 PCR 공정에 적용할 경우 대량 및 신속 진단 시스템 구축이 가능할 것으로 기대하고 있다. Furthermore, by introducing a variety of known continuous process systems, it is possible to design various modifications so that they can be applied to a continuous process, ultimately enabling a simultaneous solution treatment process for a large amount of samples and applying it to a continuous PCR process. It is expected that it will be possible to establish a rapid diagnosis system.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 핵산분리용 피펫을 설명하기 위하여 개념적으로 도시한 단면도이다.
도 2 내지 도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 핵산의 분리방법을 설명하기 위하여 각 단 계별로 도 1의 피펫의 상태를 개념적으로 도시한 단면도들이다.
1 is a cross-sectional view conceptually illustrating a pipette for nucleic acid separation according to an embodiment of the present invention.
2 to 4 are cross-sectional views conceptually illustrating the state of the pipette of FIG. 1 for each step in order to explain a method for isolating a nucleic acid according to an embodiment of the present invention.

이하 첨부된 도면을 참조하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 핵산분리용 피펫 및 이를 이용한 핵산의 분리방법을 자세하게 설명하도록 한다. 그러나 하기 설명들은 본 발명의 기술사상을 구체화하여 설명하기 위한 예시적인 설명들이며, 본 발명은 아래 설명들로부터 유추될 수 있는 다양한 변형실시예들을 포함할 수 있음은 자명하다. 아울러, 본 발명의 기술사상은 오직 후술하는 청구범위에 의하여 해석되고 제한될 수 있을 뿐, 하기 설명들에 의하여 본 발명의 기술사상이 제한되는 것은 아니다. Hereinafter, a nucleic acid separation pipette and a nucleic acid separation method using the same according to an embodiment of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. However, the following descriptions are exemplary descriptions for concretely explaining the technical idea of the present invention, and it is obvious that the present invention may include various modified embodiments that can be inferred from the descriptions below. In addition, the technical spirit of the present invention can only be interpreted and limited by the following claims, and the technical spirit of the present invention is not limited by the following description.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 핵산분리용 피펫을 설명하기 위하여 개념적으로 도시한 단면도이다. 1 is a cross-sectional view conceptually illustrating a pipette for nucleic acid separation according to an embodiment of the present invention.

도 1을 참조하면, 핵산분리용 피펫(100)은 하우징(110), 분리판(120), 내부관(130) 및 필터막(140)을 포함한다. 한편, 상기 핵산분리용 피펫(100)은 본 발명에서 '핵산분리용' 목적으로 사용되는 것으로 설명되나 필터막(140)의 다양한 변형 설계, 구조 변경 등을 통하여 핵산 외에 다양한 바이오물질의 분리에 사용될 수 있을 것이다. Referring to FIG. 1 , the pipette 100 for separating nucleic acids includes a housing 110 , a separator 120 , an inner tube 130 , and a filter membrane 140 . On the other hand, the pipette 100 for nucleic acid separation is described as being used for the purpose of 'nucleic acid separation' in the present invention. will be able

본 실시예에서, 상기 하우징(110)은 기본적으로 원기둥 형상으로 이루어져 있고 내부영역을 구획한다. 상기 분리판(120)은 상기 하우징(110) 내벽을 따라 형성됨으로써 하우징(110)에 의하여 구획되는 내부영역을, 하부영역(102)과 상부영역(104)로 구분한다. 상기 하우징(110)은 하부영역(102)에서 깔대기 형상으로 좁아지면서 관로 형상을 갖는 피펫관(112)을 포함한다. 상기 하우징(110)의 상부영역(104)의 최 상부에는 피펫(100) 내부의 압력을 감압하거나 가압하기 위한 공기통로(114)가 형성되어 있다. In this embodiment, the housing 110 is basically formed in a cylindrical shape and partitions an inner region. The separation plate 120 is formed along the inner wall of the housing 110 to divide the inner region divided by the housing 110 into a lower region 102 and an upper region 104 . The housing 110 includes a pipette tube 112 having a tube shape while narrowing in a funnel shape in the lower region 102 . An air passage 114 for depressurizing or pressurizing the pressure inside the pipette 100 is formed in the uppermost portion of the upper region 104 of the housing 110 .

상기 필터막(140)은 핵산을 여과할 수 있는 공지된 필터막이 사용될 수 있으며, 상기 필터막(140)은 하부영역(102)의 일 영역에 형성되며 하우징(110)의 내벽을 따라 형성됨으로써 하부영역(102)을 상부와 하부로 구획한다. A known filter membrane capable of filtering nucleic acids may be used as the filter membrane 140 , and the filter membrane 140 is formed in one region of the lower region 102 and is formed along the inner wall of the housing 110 to form a lower portion of the filter membrane 140 . The region 102 is divided into an upper portion and a lower portion.

한편, 상기 피펫관(112) 내부에는 내부관(130)이 형성되어 있다. 상기 내부관(130)은 상기 피펫관(112)을 따라 삽입된 형상을 갖는 관으로서, 상기 내부관(112)의 유로는 상기 피펫(100)의 하부영역(102)과 공간적으로 연결되지 않고 상기 분리판(120)에 연결되어 있다. Meanwhile, an inner tube 130 is formed inside the pipette tube 112 . The inner tube 130 is a tube having a shape inserted along the pipette tube 112 , and the flow path of the inner tube 112 is not spatially connected to the lower region 102 of the pipette 100 and is It is connected to the separation plate 120 .

상기 분리판(120)에는 적어도 하나의 제1 개구부(121)가 형성되어 있다. 상기 제1 개구부(121)의 형상은 특별히 제한되지 않으며 상부영역(104)의 유체가 하부영역(102)로 원할하게 이동될 수 있을 정도의 형상이면 된다. 상기 분리판(120)은 또한 상기 제1 개구부(121)를 개폐할 수 있는 제1 개폐부(125)를 포함한다. At least one first opening 121 is formed in the separation plate 120 . The shape of the first opening 121 is not particularly limited and may be of a shape sufficient to allow the fluid in the upper region 104 to move smoothly to the lower region 102 . The separation plate 120 also includes a first opening and closing part 125 capable of opening and closing the first opening 121 .

상기 분리판(120)은 또한 상기 내부관(130)과 연결되는 부위에, 상기 내부관(130)의 유로에 대응한 제2 개구부(122)를 포함하고, 상기 제2 개구부를(122)를 개폐할 수 있는 제2 개폐부(126)를 포함한다. The separation plate 120 also includes a second opening 122 corresponding to the flow path of the inner tube 130 in a portion connected to the inner tube 130, and the second opening 122 and a second opening/closing part 126 that can be opened and closed.

상기 제1 개폐부(125) 및 제2 개폐부(126)는 피펫(100) 내부의 감압 또는 가압 압력에 의하여 작동될 수 있도록 탄성부재를 포함할 수도 있으며, 이와 다르게 다양한 개폐 수단이 채용될 수 있다. The first opening/closing unit 125 and the second opening/closing unit 126 may include an elastic member so as to be operated by a reduced or pressurized pressure inside the pipette 100 . Alternatively, various opening/closing means may be employed.

도 2 내지 도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 핵산의 분리방법을 설명하기 위하여 각 단 계별로 도 1의 피펫의 상태를 개념적으로 도시한 단면도들이다. 2 to 4 are cross-sectional views conceptually illustrating the state of the pipette of FIG. 1 for each step in order to explain a method for isolating a nucleic acid according to an embodiment of the present invention.

도 2 내지 도 4를 설명하면서, 피펫(100)의 구조에 대한 중복된 설명은 생략하도록 한다. While describing FIGS. 2 to 4 , a redundant description of the structure of the pipette 100 will be omitted.

도 2를 참조하면, 외부용기(300)에는 검체용액(30)이 준비되어 있다. 상기 검체용액은 환자로부터 채취한 검체 및 용해 완충액(lysis buffer)을 포함한다. 또한, 분리 효율성을 위하여 상기 검체용액(30)은 공지된 다양한 첨가제를 포함할 수도 있다. Referring to FIG. 2 , the sample solution 30 is prepared in the outer container 300 . The sample solution includes a sample collected from a patient and a lysis buffer. In addition, for separation efficiency, the sample solution 30 may include various known additives.

외부용기(300)에 수용된 검체용액(300)에 피펫이 삽입되면, 1차적으로 피펫(100)의 압력을 감압하여 상기 검체용액(300)을 흡수한다. 이때, 분리판(120)의 제1 개폐부(125)는 닫힌 상태이며, 제2 개폐부(126)만을 개방함으로써, 검체용액(30)이 내부관(130)을 통하여 상부영역(104)로 이동된다.When the pipette is inserted into the sample solution 300 accommodated in the outer container 300 , the pressure of the pipette 100 is first reduced to absorb the sample solution 300 . At this time, the first opening/closing part 125 of the separating plate 120 is in a closed state, and by opening only the second opening/closing part 126 , the sample solution 30 is moved to the upper region 104 through the inner tube 130 . .

도 3을 참조하면, 검체용액(30)이 모두 상부영역(104)로 이동되면, 제1 개폐부(126)을 닫고, 상기 검체용액(30)을 상부영역(104)에 저장하면서, 가능하면 외부용기(300)을 교체하고 다음 과정을 계속한다.Referring to FIG. 3 , when all of the sample solution 30 is moved to the upper region 104 , the first opening/closing unit 126 is closed, the sample solution 30 is stored in the upper region 104 , and, if possible, external Replace the container 300 and continue with the next process.

도 4를 참조하면, 상부영역(104)에 저장되었던 검체용액(30)은 분리판(120)의 제1 개폐부(125)를 개방하고 피펫(100) 내부를 가압함으로써, 제1 개구부(121)를 통하여 하부영역(102)으로 이동된다. Referring to FIG. 4 , the sample solution 30 stored in the upper region 104 opens the first opening/closing part 125 of the separator 120 and pressurizes the inside of the pipette 100, thereby forming the first opening 121 . is moved to the lower region 102 through

아울러, 피펫(100) 내부의 가압상태가 유지되는 동안, 상기 검체용액(30)은 필터막(140)을 경유하게 된다. 필터막(140)을 경유하면서 검체용액(30) 내부의 고분자량의 단백질은 필터막에 의하여 걸러지게 된다. 따라서 필터막(140)을 경유한 검체용액(30)은 고분자량의 단백질을 제외한 핵산 및 일부 저분자량의 단백질을 포함한 제1 처리용액(50)으로 변화되어 피펫관(112)을 통하여 외부용기(300)로 배출된다. In addition, while the pressure inside the pipette 100 is maintained, the sample solution 30 passes through the filter membrane 140 . While passing through the filter membrane 140, the high molecular weight protein in the sample solution 30 is filtered by the filter membrane. Therefore, the sample solution 30 passed through the filter membrane 140 is changed to the first treatment solution 50 containing nucleic acids excluding high molecular weight proteins and some low molecular weight proteins, and is passed through the pipette tube 112 into an external container ( 300) is released.

본 발명의 핵산분리용 피펫(100)은 다른 구조를 갖는 별도의 피펫들과 조합되어 최종적으로 완벽히 핵산을 분리해 내는 중간 단계에서의 피펫으로 기능할 수 있다. 다만, 단순한 피펫 구조에 필터막을 도입한 기술사상은 다른 피펫들의 설계에 있어서도 여전히 유효하게 유지되어야 한다. The pipette 100 for nucleic acid separation of the present invention can be combined with separate pipettes having different structures to function as a pipette in the intermediate stage to finally completely separate nucleic acids. However, the technical idea of introducing a filter membrane into a simple pipette structure should still be maintained in the design of other pipettes.

Claims (5)

압력 변화에 따라 액상 물질을 배출 또는 흡수할 수 있는 피펫으로서,
상기 피펫의 내부 영역을 정의하는 하우징;
상기 하우징의 내벽을 따라 형성되고, 상기 내부 영역을 상부 영역과 하부 영역으로 구획하는 분리판;
상기 하부영역으로부터 연장되어 관로를 형성하는 피펫관;
상기 피펫관의 내부에 형성되어 상기 분리판까지 연결되는 내부관; 및
상기 하부 영역에 배치된 필터막을 포함하는 핵산분리용 피펫.
A pipette capable of discharging or absorbing a liquid substance in response to a change in pressure, the pipette comprising:
a housing defining an interior area of the pipette;
a separation plate formed along an inner wall of the housing and dividing the inner region into an upper region and a lower region;
a pipette tube extending from the lower region to form a conduit;
an inner tube formed inside the pipette tube and connected to the separation plate; and
A pipette for nucleic acid separation comprising a filter membrane disposed in the lower region.
제1항에 있어서,
상기 분리판에는 적어도 하나의 제1 개구부를 포함하고, 상기 제1 개구부를 개폐할 수 있는 제1 개폐부를 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산분리용 피펫.
The method of claim 1,
The separation plate includes at least one first opening, and a first opening and closing part capable of opening and closing the first opening.
제2항에 있어서,
상기 내부관에 연결된 상기 분리판에는 상기 내부관에 대응한 제2 개구부를 포함하고, 상기 제2 개구부를 개폐할 수 있는 제2 개폐부를 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산분리용 피펫.
3. The method of claim 2,
The separation plate connected to the inner tube includes a second opening corresponding to the inner tube, and a second opening/closing part capable of opening and closing the second opening.
제3항의 핵산분리용 피펫을 이용하여 검체용액으로부터 핵산을 분리하는 방법으로서,
상기 피펫을 감압하여 검체용액을, 상기 제2 개폐부를 열고 상기 내부관을 통하여 상기 상부 영역으로 흡수하는 단계;
상기 제2 개폐부를 닫고, 상기 제1 개폐부를 열은 상태에서 상기 피펫을 가압하여 상기 검체용액을 하부영역으로 밀어내는 단계; 및
하부영역으로 밀어낸 검체용액이 필터막을 경유하도록 피펫을 지속적으로 가압함으로써, 상기 피펫관을 통하여 상기 필터막을 경유한 검체용액이 외부로 배출되도록 하는 단계를 포함하는 핵산의 분리방법.
A method for separating nucleic acids from a sample solution using the nucleic acid separation pipette of claim 3,
absorbing the sample solution into the upper region through the inner tube by opening the second opening/closing part by depressurizing the pipette;
closing the second opening/closing unit and pressing the pipette while the first opening/closing unit is open to push the sample solution into the lower region; and
A method for isolating nucleic acids, comprising the step of continuously pressurizing a pipette so that the sample solution pushed into the lower region passes through the filter membrane, so that the sample solution passing through the filter membrane is discharged to the outside through the pipette tube.
제4항에 있어서,
상기 검체용액은 환자로부터 채취한 검체 및 세포벽을 용해할 수 있는 용해 완충액(lysis buffer)을 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산의 분리방법.




5. The method of claim 4,
The method for isolating nucleic acids, characterized in that the sample solution includes a lysis buffer capable of dissolving a sample collected from a patient and a cell wall.




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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2018158293A (en) 2017-03-23 2018-10-11 株式会社イントロテック Pipette for powder, pipette device for powder and method
US20200131503A1 (en) 2017-06-30 2020-04-30 Catchgene Co., Ltd. Fixed tube of nucleic acid extraction component, and nucleic acid extraction component

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6820865B2 (en) * 2015-04-29 2021-01-27 ペルキネルマー ヘルス サイエンシーズ, インコーポレイテッド Sample collection and delivery device
KR102040376B1 (en) * 2017-11-28 2019-11-05 중앙대학교 산학협력단 Immunoassay kit and immunoassay method using the same

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2018158293A (en) 2017-03-23 2018-10-11 株式会社イントロテック Pipette for powder, pipette device for powder and method
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