KR102427457B1 - Apparatus and Method for cell culture in a continuous manner - Google Patents

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Abstract

본 발명의 연속 세포 배양 증식장치 및 방법은 내부에 밀폐된 공간을 갖고 반복적으로 움직이는 배양용기와, 상기 공간 내부에 배양액 주입, 배양액에 세포 접종, 세포의 배양, 탈리, 수득 및 세포의 배양과정에서 발생하는 세포 부유물을 추출하되 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 수득하는 통로부와,상기 공간에 설치되어 반복적으로 움직이는 배양용기에 의해 이동하여 세포를 탈리 및 집합시키는 스크레퍼를 포함한다.The continuous cell culture propagation apparatus and method of the present invention include a culture vessel that has a closed space therein and moves repeatedly, and in the process of injecting a culture solution into the space, inoculating cells into the culture medium, culturing, detaching, harvesting and culturing cells. It includes a passage for extracting the generated cell suspension but obtaining the remaining cells except for a portion of the entire cultured cells, and a scraper for detaching and collecting cells by moving by a culture vessel installed in the space and moving repeatedly.

Description

연속 세포 배양 증식장치 및 방법{Apparatus and Method for cell culture in a continuous manner}Apparatus and Method for cell culture in a continuous manner

본 발명은 연속 세포 배양 증식장치 및 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 밀폐성을 유지한 상태로 세포 및 배양액을 주입, 배양, 탈리, 및 수득이 가능하도록 하는 연속으로 세포를 배양하는 장치 및 방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a continuous cell culture propagation apparatus and method, and more particularly, to an apparatus and method for continuously culturing cells to enable injection, culturing, detachment, and obtaining of cells and culture medium while maintaining airtightness. it's about

세포배양에는 세포가 배양기에 부착하여 증식하는 단층배양(부착배양)과 세포가 부유 상태로 증식하는 현탁배양이 있다.Cell culture includes monolayer culture (adherent culture), in which cells attach to and proliferate in an incubator, and suspension culture, in which cells proliferate in a suspended state.

대부분의 동물세포는 표면에 부착하여 생장하며 생장속도가 미생물에 비하여 매우 느리기 때문에 생산성이 낮고 배양 도중 미생물에 의해 오염되기 쉽다.Most animal cells grow by attaching to the surface, and because the growth rate is very slow compared to microorganisms, productivity is low and they are easy to be contaminated by microorganisms during culture.

그러나, 세포 평면 부착 배양에서 기존의 방법들은 밀폐성 유지가 힘들고 따라서 일정기간의 세포 수득 과정 후에는 오염되기가 쉬운 문제점을 가지고 있다.However, conventional methods in cell-plane adherent culture have a problem in that it is difficult to maintain airtightness, and thus, it is easy to be contaminated after a cell harvesting process for a certain period of time.

또한 배양 세포를 실험실 외부로 이동시에는 별개의 밀폐 수단을 구비해야 하나, 아직 완전 밀폐가 성공적인 경우가 없고 대부분 용기를 옮겨서 이동하는 방법을 사용한다.In addition, a separate sealing means must be provided when the cultured cells are moved to the outside of the laboratory, but complete sealing has not been successful yet, and the method of moving the container is mostly used.

하지만 용기를 옮길 경우 또 한번의 계대(passage)가 되므로 배양세포의 균일성을 유지하기 어렵다.However, when the container is moved, it is difficult to maintain the uniformity of the cultured cells because another passage is performed.

한편, 용기내에 부착 배양된 세포를 탈리하기 위해서는 트립신과 같은 단백질 분해 효소를 사용한다.Meanwhile, a proteolytic enzyme such as trypsin is used to detach cells adhered and cultured in the vessel.

이들 효소는 부착면과의 연결면을 녹여 세포의 부착을 와해시키는 방법으로서 효소처리에 시간이 소요되고 효소의 독성으로 인한 세포 특성의 변화, 사멸 등 다양한 문제를 일으키고 있다.These enzymes are a method of dissolving the cell adhesion by dissolving the connection surface with the adhesion surface, and the enzyme treatment takes time and causes various problems such as change of cell characteristics and death due to the toxicity of the enzyme.

세포의 특성은 트립신 처리 횟수로 그 특성의 변화 정도를 분류하는데, 이는 트립신의 사용이 세포 특성을 변화시키는 문제가 있다는 증거가 된다.The characteristics of cells classify the degree of change in the characteristics by the number of trypsin treatments, which is evidence that the use of trypsin has a problem in changing the characteristics of cells.

또한 트립신을 사용하면 배양용기의 모든 면에서 부착세포를 떼어내는 결과를 초래하여 항시 이 과정 후에는 일부 세포를 다시 부착시키기 위한 공정을 필요로 하고 재부착 확률은 10% 이하로 낮다.In addition, the use of trypsin results in detachment of adherent cells from all sides of the culture vessel, so a process for reattaching some cells is always required after this process, and the probability of reattachment is as low as 10% or less.

트립신을 사용하지 않기 위한 방법으로는 강한 물의 전단력을 이용하는 방법, 평판이나 완만한 곡면에 적용가능한 스크레이퍼로 긁어내는 방법, 온도 반응 액화/경화 형 고체-액체, 액체-고체 소재를 부착 소재로 이용하는 법, 트립신이 아닌 콜라겐 용해효소(collagenase)를 사용하는 방법 등 다양하게 활용되고 있으나 세포의 회수율이 낮거나 불균일한 단점이 있거나 세포 부착면적의 제한이 문제가 되고 있다.Methods for not using trypsin include using strong water shear force, scraping with a scraper applicable to flat surfaces or gently curved surfaces, temperature-responsive liquid/curing solid-liquid, liquid-solid material as an attachment material , a method using collagenase instead of trypsin, etc., but there are disadvantages such as a low recovery rate of cells or non-uniformity, or a limitation in the cell adhesion area.

예를 들어, 세포 부착 비드(bead)에서 물의 전단력만을 이용하여 탈리시키는 경우 강한 와류를 이용하여야 하므로 물의 방향이 균일하지 않아 회수율이 일정치 않고 비드끼리 충돌하면서 사이에 끼는 세포가 손상을 입는 문제가 있다.For example, in the case of detachment using only the shear force of water from cell adhesion beads, a strong vortex must be used, so the direction of water is not uniform, so the recovery rate is not constant. have.

또한, 콜라겐 부착소재와 콜라겐 용해효소를 이용할 경우는 세포가 두겹 이상 적층되었을때 안쪽에서는 효소의 영향을 받지 않아 아예 용해되지 않는 세포가 있거나 콜라겐이 모두 녹을 때까지 소요되는 시간 동안 콜라겐 용해 효소가 가진 트립신 유사 기능으로 인해 세포를 녹일 수도 있는 위험성이 있으므로 활용이 쉽지 않다.
In addition, when using a collagen adhesion material and collagen lysing enzyme, when cells are stacked in two or more layers, there are cells that are not lysed at all because they are not affected by the enzyme inside, or the collagen lytic enzyme has Due to its trypsin-like function, there is a risk that it may dissolve cells, so it is not easy to use.

대한민국 공개특허 제10-2009-0050060호(2009.05.19)Republic of Korea Patent Publication No. 10-2009-0050060 (2009.05.19) 대한민국 공개특허 제10-2012-0117452호(2012.10.24)Republic of Korea Patent Publication No. 10-2012-0117452 (2012.10.24)

상기의 문제점을 해소하기 위한 본 발명의 연속 게포 배양 증식장치 및 방법은 배양용기의 밀폐성을 유지하면서 세포 및 배양액을 선택적이고 반복적으로 주입, 배양, 탈리, 및 수득이 가능하도록 하여 수득 과정에서 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 세포를 수득하여 배양용기 내부에 잔존되어 있는 세포의 반복 배양을 가능하도록 하도록 하는 데 있다.The continuous cell culture propagation apparatus and method of the present invention for solving the above problems enables selective and repetitive injection, culture, detachment, and harvesting of cells and culture medium while maintaining the airtightness of the culture vessel, so that the whole culture in the process of obtaining The purpose is to obtain cells except for a part of the cells to enable repeated culture of the cells remaining inside the culture vessel.

또한, 본 발명의 목적은 복수개로 마련된 배양용기를 통해 세포, 배양액의 주입 세포, 세포 부유물을 추출을 위한 기능을 수행하여 세포 배양의 배가를 향상시키도록 하는 데 있다.In addition, an object of the present invention is to improve the doubling of cell culture by performing a function for extracting cells, cells injected in a culture medium, and cell suspension through a culture vessel provided in plurality.

그리고, 본 발명의 목적은 밀폐된 상태에서 배양용기를 시소 동작 또는 진동 동작 또는 시소동작과 진동동작을 병행시켜 스크레퍼의 이동을 가능하게 하여 공간 바닥면에서의 세포 탈리의 효율성을 향상시키도록 하는 데 있다.And, an object of the present invention is to improve the efficiency of cell detachment from the space floor by enabling the movement of the scraper by paralleling the seesaw operation or the vibration operation or the seesaw operation and the vibration operation of the culture vessel in a closed state. have.

또한, 본 발명의 목적은 밀폐형의 배양용기를 통해 이동과 보관 및 관리가 손쉽도록 하는 데 있다.
In addition, an object of the present invention is to facilitate movement, storage and management through a closed-type culture vessel.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치는 내부에 밀폐된 공간을 갖고 반복적으로 움직이는 배양용기와, 상기 공간 내부에 배양액 주입, 배양액에 세포 접종, 세포의 배양, 탈리, 수득 및 세포의 배양과정에서 발생하는 세포 부유물을 추출하되 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 수득하는 통로부와, 상기 공간에 설치되어 반복적으로 움직이는 배양용기에 의해 이동하여 세포를 탈리 및 집합시키는 스크레퍼를 포함한다.The continuous cell culture propagation apparatus of the present invention for achieving the above object includes a culture vessel that has a closed space therein and moves repeatedly, and the culture medium is injected into the space, the cells are inoculated into the culture medium, and the cells are cultured, detached, and obtained. and a passage for extracting the cell suspension generated in the process of culturing the cells, but obtaining the remaining cells except for a part of the entire cultured cells, and a culture vessel installed in the space to move by the repeatedly moving culture vessel to detach and collect the cells Includes scraper.

본 발명에 따르면, 상기 통로부는 상기 공간과 연결되어 배양액과 세포를 주입하는 제1관과, 상기 공간과 연결되어 배양된 세포와 세포 부유물을 추출하는 제2관과, 상기 제1관과 제2관 사이에 설치되어 추출된 세포와 세포 부유물을 구분하여 제1관으로 세포를 주입하고 세포 부유물을 정화하는 필터와, 상기 제1관과 제2관에 설치되어 압력을 발생시키는 펌프로 이루어진다.According to the present invention, the passage part includes a first tube connected to the space for injecting a culture solution and cells, a second tube connected to the space for extracting cultured cells and cell suspension, and the first tube and the second tube. A filter installed between the tubes to separate the extracted cells and the cell suspension, injecting the cells into the first tube and purifying the cell suspension, and a pump installed in the first tube and the second tube to generate pressure.

본 발명에 따르면, 상기 배양용기는 복수개로 구비되어 제1관과 제2관이 각각 연결시킨 다음 필터와 펌프를 통해 복수의 배양용기에서 배양된 세포와 세포 부유물을 추출하는 동시에 배양액을 주입하도록 한다.According to the present invention, the culture vessel is provided in plurality, the first tube and the second tube are respectively connected, and then the cells and the cell suspension cultured in the plurality of culture vessels are extracted through a filter and a pump and the culture medium is injected at the same time. .

본 발명에 따르면, 상기 배양용기는 운동수단을 통해 반복적으로 움직일 수 있도록 한다.According to the present invention, the culture vessel is allowed to move repeatedly through the exercise means.

본 발명에 따르면, 상기 공간에는 배양액에 잠기도록 배양필름을 설치하여 접종된 세포가 공간 바닥면과 배양필름 하부면에서 배양되도록 하고, 상기 스크레퍼는 배양필름과 공간 바닥면 사이에 설치된다.According to the present invention, a culture film is installed in the space to be immersed in the culture solution so that the inoculated cells are cultured on the space bottom surface and the culture film lower surface, and the scraper is installed between the culture film and the space floor surface.

본 발명에 따르면, 상기 배양용기는 복수개로 구비되어 각각의 배양용기에 설치된 스크레퍼 중 선택된 스크레퍼만 이동되고 제외된 스크레퍼는 이동하지 않도록 한다.According to the present invention, the culture vessel is provided in plurality, so that only a selected scraper from among the scrapers installed in each culture vessel is moved and the excluded scrapers are not moved.

본 발명에 따르면, 상기 스크레퍼는 자력수단을 더 포함하여 배양용기 외부에 설치된 자성체의 이동과 연동되도록 한다.According to the present invention, the scraper further includes a magnetic force means to interlock with the movement of the magnetic body installed outside the culture vessel.

본 발명에 따르면, 배양이 완료된 배양용기는 이동 또는 보관시 외부 온도를 전도받아 세포 생존력 유지를 위한 환경을 갖도록 한다.According to the present invention, the culture vessel in which the culture is completed has an environment for maintaining cell viability by receiving external temperature during movement or storage.

본 발명에 따르면, 상기 운동수단은 배양용기가 시소 동작을 가능하도록 하여 배양용기의 기울기에 따라 스크레퍼가 이동하도록 한다.According to the present invention, the exercise means enables the culture vessel to perform a seesaw operation so that the scraper moves according to the inclination of the culture vessel.

본 발명에 따르면, 상기 운동수단은 배양용기가 진동 동작을 가능하도록 스크레퍼가 이동하도록 한다.According to the present invention, the exercise means allows the scraper to move so that the culture vessel can vibrate.

본 발명에 따르면, 상기 운동수단은 배양용기가 시소동작과 진동 동작을 병행하도록 하여 스크레퍼가 이동하도록 한다.According to the present invention, the exercise means allows the culture vessel to perform a seesaw operation and a vibration operation in parallel to move the scraper.

본 발명에 따르면, 상기 공간에는 배양액에 잠기도록 배양필름을 하나 이상을 적층시켜 접종된 세포가 공간 바닥면과 배양필름들 하부면에서 배양되도록 한다.According to the present invention, one or more culture films are laminated in the space to be immersed in the culture solution so that the inoculated cells are cultured on the bottom surface of the space and the lower surface of the culture films.

본 발명에 따르면, 상기 배양필름과 공간 바닥면 사이에 스크레퍼가 설치된다.According to the present invention, a scraper is installed between the culture film and the bottom surface of the space.

본 발명에 따르면, 상기 배양필름들 사이와 공간 바닥면 사이에 스크레퍼가 설치된다.According to the present invention, a scraper is installed between the culture films and the space bottom surface.

본 발명에 따르면, 상기 외부 온도는 배양용기를 포유류 이상의 온도를 갖는 체표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 한다.According to the present invention, the external temperature enables temperature transfer by bringing the culture vessel into close contact with the body surface having a temperature higher than that of mammals.

본 발명에 따르면, 상기 온도는 배양용기를 휴대용 온도 발생수단 표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 한다.According to the present invention, the temperature enables temperature transfer by bringing the culture vessel into close contact with the surface of the portable temperature generating means.

본 발명에 따르면, 상기 배양용기를 휴대용 전자제품 표면에 밀착시켜 전자제품에서 발열되는 온도 전이를 가능하도록 한다.According to the present invention, the culture vessel is brought into close contact with the surface of the portable electronic product to enable temperature transition generated by the electronic product.

본 발명에 따르면, 상기 배양용기는 표면에 견착수단을 형성시켜 밴드를 통해 온도 전도 대상물에 고정시킬 수 있도록 한다.According to the present invention, the culture vessel can be fixed to the temperature conductive object through a band by forming a shoulder attachment means on the surface.

본 발명에 따르면, 상기 배양필름은 표면에 미세 기공이 형성된다.According to the present invention, micropores are formed on the surface of the culture film.

본 발명의 연속 세포 배양 증식방법은 배양액이 담겨진 공간을 갖는 배양용기에 세포를 접종하여 배양하는 단계와, 배양용기에 세포 배양이 완료되면 배양용기를 움직이도록 하여 공간 내부에 설치된 스크레퍼가 이동하면서 공간 바닥에 배양된 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계와, 집합된 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 추출하는 단계로 이루어진다.The continuous cell culture proliferation method of the present invention comprises the steps of inoculating and culturing cells in a culture vessel having a space containing a culture solution, and when the cell culture in the culture vessel is completed, the culture vessel is moved to move the scraper installed in the space while moving. It consists of a step of dissociating and collecting the cells cultured on the bottom at the same time, and a step of extracting the remaining cells except for a part of the aggregated cells.

본 발명에 따르면, 세포 추출단계에서 수득된 세포를 배양액이 담겨진 다른 개소의 복수 배양용기에 접종시켜 배양을 배가시키는 단계를 더 포함한다.According to the present invention, the method further comprises the step of doubling the culture by inoculating the cells obtained in the cell extraction step into a plurality of culture vessels at different locations containing the culture solution.

본 발명에 따르면, 세포 추출단계에서 세포 배양과정 중 발생하는 세포부유물을 추출하도록 한다.According to the present invention, in the cell extraction step, the cell suspension generated during the cell culture process is extracted.

본 발명에 따르면, 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계에서 배양용기를 시소 방식으로 동작시켜 스크레퍼와 배양액을 이동시키도록 한다.According to the present invention, the culture vessel is operated in a seesaw manner in the step of simultaneously dissociating and collecting cells to move the scraper and the culture medium.

본 발명에 따르면, 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계에서 배양용기를 진동시켜 스크레퍼를 이동시키도록 한다.According to the present invention, the scraper is moved by vibrating the culture vessel in the step of dissociating and collecting the cells at the same time.

본 발명에 따르면, 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계에서 배양용기를 시소 동작 및 진동 동작을 병행시켜 스크레퍼와 배양액을 이동시키도록 한다.According to the present invention, the scraper and the culture medium are moved by paralleling the seesaw operation and the vibration operation of the culture vessel in the step of dissociating and collecting the cells at the same time.

본 발명에 따르면, 세포 배양이 완료된 배양용기는 포유류 이상의 온도를 갖는 체표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 하여 이동 및 보관을 가능하도록 한다.According to the present invention, the culture vessel in which the cell culture is completed is in close contact with the body surface having a temperature higher than that of a mammal to enable temperature transfer, thereby enabling movement and storage.

본 발명에 따르면, 세포 배양이 완료된 배양용기는 온도 발생수단 표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 한다.According to the present invention, the culture vessel in which the cell culture is completed is in close contact with the surface of the temperature generating means to enable temperature transfer.

본 발명에 따르면, 상기 배양용기에는 이산화탄소를 별도로 주입할 수 있도록 한다.According to the present invention, carbon dioxide can be separately injected into the culture vessel.

본 발명에 따르면, 상기 복수 배양용기는 필터와 관로로 연결되어 펌프의 압력을 통해 배양된 세포, 배양액 및 세포 배양과정에서 발생하는 세포 부유물이 필터를 거쳐 복수의 배양용기에 선택적으로 주입되거나 추출되도록 하는 동시에 세포와 세포부유물을 구분시키도록 한다.According to the present invention, the plurality of culture vessels are connected to a filter and a pipe so that the cells cultured through the pressure of the pump, the culture medium, and the cell suspension generated in the cell culture process are selectively injected or extracted into the plurality of culture vessels through the filter. At the same time, distinguish between cells and cell suspensions.

본 발명에 따르면, 복수 배양용기에 세포가 접종되어 배양되면 배양액이 충진된 다른 개소의 복수의 배양용기에 반복하여 접종, 배양, 탈리 및 추출하는 과정을 반복하도록 한다.According to the present invention, when cells are inoculated and cultured in a plurality of culture vessels, the process of inoculating, culturing, detaching and extracting is repeated in a plurality of culture vessels at different locations filled with the culture solution.

본 발명에 따르면, 상기 세포부유물이 추출 된 배양용기에 배양액을 충진하는 단계가 더 포함된다.
According to the present invention, the step of filling the culture medium in the culture vessel from which the cell suspension is extracted is further included.

상기의 문제점을 해소하기 위한 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치 및 방법은 내부에 밀폐된 공간을 갖고 반복적으로 움직이는 배양용기와, 상기 공간 내부에 배양액 주입, 배양액에 세포 접종, 세포의 배양, 탈리, 수득 및 세포의 배양과정에서 발생하는 세포 부유물을 추출하되 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 수득하는 통로부와, 상기 공간에 설치되어 반복적으로 움직이는 배양용기에 의해 이동하여 세포를 탈리 및 집합시키는 스크레퍼를 포함하여 배양용기의 밀폐성을 유지하면서 세포 및 배양액을 선택적이고 반복적으로 주입, 배양, 탈리, 및 수득이 가능하도록 하여 수득 과정에서 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 세포를 수득하여 배양용기 내부에 잔존되어 있는 세포의 반복 배양을 가능하도록 하도록 하는 데 있다.The continuous cell culture propagation apparatus and method of the present invention for solving the above problems include a culture vessel that has a closed space therein and moves repeatedly, culture medium injection into the space, cell inoculation into the culture medium, cell culture, detachment, The cell suspension generated in the process of harvesting and culturing cells is extracted, but the passage section for obtaining the remaining cells except for a part of the entire cultured cells, and the culture vessel installed in the space and moving repeatedly to detach and collect the cells Cells and culture medium can be selectively and repeatedly injected, cultured, detached, and harvested while maintaining the airtightness of the culture vessel, including a scraper to remove the cells. The purpose is to enable the repeated culture of cells remaining in the

또한, 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치 및 방법은 복수개로 마련된 배양용기를 통해 세포, 배양액의 주입 세포, 세포 부유물을 추출을 위한 기능을 수행하여 세포 배양의 배가를 향상시키도록 하는 효과가 있다.In addition, the continuous cell culture propagation apparatus and method of the present invention have the effect of improving the doubling of cell culture by performing a function for extracting cells, cells injected into the culture medium, and cell suspension through a culture vessel provided in plurality.

그리고, 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치 및 방법은 밀폐된 상태에서 배양용기를 시소 동작 또는 진동 동작 또는 시소동작과 진동동작을 병행시켜 스크레퍼의 이동을 가능하게 하여 공간 바닥면에서의 세포 탈리의 효율성을 향상시키도록 하는 효과가 있다.In addition, the continuous cell culture propagation apparatus and method of the present invention enable the movement of the scraper by performing a seesaw operation or a vibration operation or a seesaw operation and a vibration operation in a culture vessel in a closed state, thereby increasing the efficiency of cell detachment from the space floor. has the effect of improving

또한, 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치 및 방법은 밀폐형의 배양용기를 통해 이동과 보관 및 관리가 손쉽도록 하는 효과가 있다.
In addition, the continuous cell culture propagation apparatus and method of the present invention has the effect of making it easy to move, store and manage through a closed-type culture vessel.

도 1은 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치를 나타낸 정단면도.
도 2a,b,c는 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치의 운동 상태를 나타낸 정단면도.
도 3은 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치의 다른 실시예를 나타낸 상태도.
도 4a,b는 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치에 배양필름을 적용한 상태를 나타낸 정단면도.1 is a front cross-sectional view showing a continuous cell culture propagation apparatus of the present invention.
Figure 2a,b,c is a front cross-sectional view showing the state of motion of the continuous cell culture propagation apparatus of the present invention.
Figure 3 is a state diagram showing another embodiment of the continuous cell culture propagation apparatus of the present invention.
Figure 4a,b is a front cross-sectional view showing a state in which the culture film is applied to the continuous cell culture propagation apparatus of the present invention.

이하, 본 발명에 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 일실시예를 상세히 설명하기로 한다.Hereinafter, a preferred embodiment of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

우선, 도면들 중, 동일한 구성요소 또는 부품들은 가능한 동일한 참조부호로 나타내고 있음에 유의하여야 한다. 본 발명을 설명함에 있어, 관련된 공지기능 혹은 구성에 대한 구체적인 설명은 본 발명의 요지를 모호하지 않기 위하여 생략한다.First, it should be noted that in the drawings, the same components or parts are denoted by the same reference numerals whenever possible. In describing the present invention, detailed descriptions of related known functions or configurations are omitted so as not to obscure the gist of the present invention.

도 1은 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치를 나타낸 정단면도이고, 도 2a,b,c는 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치의 운동 상태를 나타낸 정단면도이며, 도 3은 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치의 다른 실시예를 나타낸 상태도이고, 도 4a,b는 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치에 배양필름을 적용한 상태를 나타낸 정단면도이다.1 is a front cross-sectional view showing the continuous cell culture growth apparatus of the present invention, FIGS. 2a, b, and c are front cross-sectional views showing the motion state of the continuous cell culture growth apparatus of the present invention, and FIG. 3 is the continuous cell culture of the present invention It is a state diagram showing another embodiment of the growth apparatus, and FIGS. 4A and 4B are front cross-sectional views showing a state in which a culture film is applied to the continuous cell culture growth apparatus of the present invention.

먼저, 도 1 내지 도 4a,b,c에서 도시한 바와 같이, 본 발명의 연속 세포 배양 증식장치는 배양용기 100, 통로부 120 및 스크레퍼 110로 구성한다.First, as shown in FIGS. 1 to 4a, b, and c, the continuous cell culture growth apparatus of the present invention includes a culture vessel 100, a passage unit 120, and a scraper 110.

상기 배양용기 100는 내부가 밀폐된 공간 101이 형성된다.The culture vessel 100 is formed with a sealed space 101 inside.

상기 배양용기 100는 연질의 플라스틱 재질로 이루어져, 외부의 압력 또는 힘에에 의해 공간 101의 크기가 가변 될 수 있다.The culture vessel 100 is made of a soft plastic material, and the size of the space 101 may be changed by external pressure or force.

상기 배양용기 100는 선택적으로 밀폐상태를 결정할 수 있는 공간 101을 갖되, 상기 공간 101이 밀폐된 상태에서 상기 공간 101 내부로 배양액 주입, 세포 접종, 탈리, 및 수득이 가능하도록 하고, 상기 공간 101이 개방된 상태에서 세포의 배양을 가능하도록 한다.The culture vessel 100 has a space 101 capable of selectively determining a closed state, and allows culture medium injection, cell inoculation, detachment, and harvesting into the space 101 in a closed state of the space 101, and the space 101 is Allows cell culture in an open state.

그리고, 상기 통로부 120는 상기 공간 101 내부에 배양액 주입, 배양액에 세포 접종, 세포의 배양, 탈리, 수득 및 세포의 배양과정에서 발생하는 세포 부유물을 추출하되 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 수득한다.In addition, the passage part 120 extracts the cell suspension generated in the process of injecting the culture medium into the space 101, inoculating the cells into the culture medium, culturing, detaching, harvesting, and culturing the cells, except for a part of the entire cultured cells. to obtain

여기서, 상기 통로부 120는 상기 공간 101과 연결되어 배양액과 세포를 주입하는 제1관 121과, 상기 공간 101과 연결되어 배양된 세포와 세포 부유물을 추출하는 제2관 122과, 상기 제1관 121과 제2관 122 사이에 설치되어 추출된 세포와 세포 부유물을 구분하여 제1관 121으로 세포를 주입하고 세포 부유물을 정화하는 필터 123와, 상기 제1관 121과 제2관 122에 설치되어 압력을 발생시키는 펌프 124로 이루어진다.Here, the passage part 120 includes a first tube 121 connected to the space 101 to inject a culture solution and cells, a second tube 122 connected to the space 101 to extract cultured cells and cell suspension, and the first tube A filter 123 installed between the first tube 121 and the second tube 122 to separate the extracted cells and the cell suspension, injecting the cells into the first tube 121 and purifying the cell suspension, and installed in the first tube 121 and the second tube 122 It consists of a pump 124 that generates pressure.

즉, 상기 배양용기 100는 복수개로 구비되어 제1관 121과 제2관 122이 각각 연결시킨 다음 필터 123와 펌프 124를 통해 복수의 배양용기 100에서 배양된 세포와 세포 부유물을 추출하는 동시에 배양액을 주입하도록 한다.That is, the culture vessel 100 is provided in plurality, and the first tube 121 and the second tube 122 are connected to each other, and then the cells and the cell suspension cultured in the plurality of culture vessels 100 are extracted through the filter 123 and the pump 124, and the culture medium is extracted at the same time. to inject.

구체적으로 상기 통로부 120는 공간 101에 배양액의 주입, 배양액에 세포 접종, 세포의 수득 과정을 가능하도록 하고, 상기와 같은 과정의 진행 상황에서도 배양용기 100의 공간 101은 밀폐된 상태가 유지된다.Specifically, the passage part 120 enables the process of injecting the culture solution into the space 101, inoculating the cells into the culture solution, and obtaining the cells, and the space 101 of the culture vessel 100 is maintained in a closed state even in the progress of the above processes.

즉, 상기 제1관 121과 제2관 122에 별도의 밸브를 설치하여 외부에서 유체 또는 기체 및 세포를 공간 101 내부로 반입 및 반출과정에서 밸브를 온/오프시켜 공간 101이 항상 밀폐된 상태를 유지하도록 하여 세포 배양 환경을 갖도록 한다.That is, a separate valve is installed in the first tube 121 and the second tube 122 to turn on/off the valve in the process of bringing in and taking out fluid or gas and cells from the outside into the space 101 to ensure that the space 101 is always sealed. to maintain a cell culture environment.

여기서, 세포 11의 주입 및 외부로 세포 11의 수득과정은 주사기를 이용할 수 있다.Here, the injection of the cell 11 and the procedure of obtaining the cell 11 to the outside may use a syringe.

다시 말해, 주사기의 바늘을 통해 제1관 121으로 침투시킨 다음 주사기 내부 충진된 배양액을 공간 101으로 주입하거나, 상기 공간 101에서 배양 후 탈리된 세포를 제1관 121으로 침투시켜 주사기 음압을 이용하여 주사기로 빨아들여 외부로 수득 가능하게 한다.In other words, after penetrating into the first tube 121 through the needle of the syringe, the culture solution filled in the syringe is injected into the space 101, or the cells detached after culturing in the space 101 are infiltrated into the first tube 121 using the negative pressure of the syringe. Suck with a syringe to make it externally obtainable.

그리고, 배양액의 주입 또는 세포의 수득 후 제1관 121에서 바늘을 빼내면 자체 탄성에 의해 제1관 121과 제2관 122이 자체 밀폐되어 공간 101의 밀폐성을 유지시킬 수 있다.In addition, when the needle is removed from the first tube 121 after the culture medium is injected or the cells are obtained, the first tube 121 and the second tube 122 are self-sealed by their own elasticity to maintain the airtightness of the space 101.

아울러, 제2관 122은 세포의 배양과정에서 발생하는 세포 부유물을 필터 123로 이동시키거나, 세포 부유물과 함께 세포를 필터 123로 이동시킬 수 있다.In addition, the second tube 122 may move the cell suspension generated during the cell culture process to the filter 123, or may move the cells together with the cell suspension to the filter 123.

결국, 상기 통로부 120의 펌프 124와 연결된 제1관 121을 통해 배양용기 100에 배양액을 주입하거나 세포를 주입할 수 있다.As a result, the culture medium or cells may be injected into the culture vessel 100 through the first tube 121 connected to the pump 124 of the passage unit 120 .

특히, 상기 배양용기 100는 복수개로 구비되어 각각의 배양용기 100에 설치된 스크레퍼 110 중 선택된 스크레퍼 110만 이동되고 제외된 스크레퍼 110는 이동하지 않도록 한다.In particular, the culture vessel 100 is provided in plurality so that only the selected scraper 110 from among the scrapers 110 installed in each culture vessel 100 is moved and the excluded scraper 110 is not moved.

또한, 펌프 124와 연결된 상기 제2관 122을 통해 배양이 완료된 세포와 세포 배양 과정에서 발생하는 세포 부유물을 필터 123로 추출한다.In addition, through the second tube 122 connected to the pump 124, the cells that have been cultured and the cell suspension generated in the cell culture process are extracted with the filter 123.

상기 필터 123는 세포와 세포 부유물을 분리하여 세포의 오염도를 방지한 다음 세포의 재 배양을 위해 다른 개소의 배양용기 100로 세포를 접종시킬 수 있다.The filter 123 may separate cells and cell suspension to prevent contamination of cells, and then inoculate cells into the culture vessel 100 at another location for re-cultivation of cells.

여기서, 상기의 배양용기 100의 공간 101에 세포의 완전 배양이 완료되면 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 세포를 수득하여 다른 개소의 배양용기 100에 세포를 분배하여 접종시키면서 최초 배양용기 100 내부에 잔존되어 있는 세포의 반복 배양을 가능하도록 한다.Here, when the complete culture of the cells in the space 101 of the culture vessel 100 is completed, the cells are obtained except for a part of the entire cultured cells, and the cells are distributed and inoculated in the culture vessel 100 at another location while remaining inside the first culture vessel 100 It enables repeated culture of the cells.

아울러, 상기 스크레퍼 110는 공간 101에 설치되어 반복적으로 움직이는 배양용기 100에 의해 이동하여 세포를 탈리 및 집합시키는 기능을 한다.In addition, the scraper 110 is installed in the space 101 and moves by the repeatedly moving culture vessel 100 to detach and aggregate cells.

상기 스크레퍼 110는 공간 101의 바닥면에서 배양되는 세포가 세포막과 세포 외 기질에 의해 불완전하게 바닥에 붙어 있는 상태이므로, 배양된 세포가 공간 101 바닥에서 보다 쉽게 탈리되도록 하는 기능을 갖는다.Since the cells cultured on the bottom surface of the space 101 are incompletely attached to the floor by the cell membrane and the extracellular matrix, the scraper 110 has a function of allowing the cultured cells to be more easily detached from the floor of the space 101.

상기 스크레퍼 110는 세포 탈리의 기능을 보다 원활하게 수행하도록 배양용기 100의 움직임을 부여하여 스크레퍼 110의 위치를 변화시켜 공간 101 바닥과의 마찰을 통해 세포 탈리를 진행한다.The scraper 110 changes the position of the scraper 110 by imparting movement of the culture vessel 100 to perform the function of cell detachment more smoothly, thereby performing cell detachment through friction with the floor of the space 101.

상기 배양용기 100는 운동수단 130을 통해 반복적으로 움직일 수 있도록 한다.The culture vessel 100 is allowed to move repeatedly through the exercise means 130.

즉, 상기 스크레퍼 110는 자력수단 111을 더 포함하여 배양용기 100 외부에 설치된 자성체 150의 이동과 연동되도록 하여 외부의 자성체 150를 통해 스크레퍼 110를 이동시킬 수 있도록 한다.That is, the scraper 110 further includes a magnetic force means 111 to interlock with the movement of the magnetic material 150 installed outside the culture vessel 100 to move the scraper 110 through the external magnetic material 150 .

즉, 별도로 마련된 자성체 150를 상기 배양용기 100 외부 하부면에 근접시키되, 상기 스크레퍼 110 내부에 설치된 자력수단 111과 자력으로 연결되도록 하여 자성체 150의 이동에 의해 스크레퍼 110를 공간 101 내부에서 이동시켜 스크레퍼 110가 공간 101 바닥면과 마찰되면서 세포 를 긁어내어 탈리시킨다.That is, the separately provided magnetic material 150 is brought close to the outer lower surface of the culture vessel 100, and is connected to the magnetic means 111 installed inside the scraper 110 by magnetic force. The cells are scraped off and detached as they rub against the bottom surface of space 101.

또는, 상기 운동수단 130은 배양용기 100가 시소 동작을 가능하도록 하여 배양용기 100의 기울기에 따라 스크레퍼 110가 이동하도록 한다.Alternatively, the exercise means 130 enables the culture vessel 100 to perform a seesaw operation so that the scraper 110 moves according to the inclination of the culture vessel 100.

즉, 배양용기 100를 기울여 자중을 갖는 스크레퍼 110가 공간 101 바닥면에서 마찰되면서 미끄러지면서 세포를 긁어내어 탈리시킨다That is, the scraper 110 having its own weight by tilting the culture vessel 100 slides while rubbing on the bottom surface of the space 101 to scrape off the cells.

또는, 상기 운동수단 130은 배양용기 100가 진동 동작을 가능하도록 스크레퍼 110가 이동하도록 한다.Alternatively, the exercise means 130 allows the scraper 110 to move so that the culture vessel 100 can vibrate.

또는, 상기 운동수단 130은 배양용기 100가 시소동작과 진동 동작을 병행하도록 하여 스크레퍼 110가 이동하도록 한다.Alternatively, the exercise means 130 causes the culture vessel 100 to perform a seesaw operation and a vibration operation in parallel to move the scraper 110.

상기와 같은 스크레퍼 110는 공간 101의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드를 형성할 수도 있다.In the scraper 110 as described above, a lower surface in contact with the bottom surface of the space 101 may form a plurality of blades.

여기서, 상기 스크레퍼 110는 공간 101의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드를 형성하되, 상기 블레이드는 모서리각을 갖도록 형성되어 공간 101의 바닥면과 마찰에 의해 세포를 바닥면에서 탈리시키도록 한다.Here, the scraper 110 has a lower surface in contact with the bottom surface of the space 101 to form a plurality of blades, and the blades are formed to have a corner angle to detach the cells from the bottom surface by friction with the bottom surface of the space 101 .

또는, 상기 스크레퍼 110는 공간 101의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드를 형성하되, 상기 블레이드는 모서리각이 연속으로 형성되도록 형성되어 공간 101의 바닥면과 접촉 또는 비접촉되도록 한다.Alternatively, the scraper 110 has a lower surface in contact with the bottom surface of the space 101 to form a plurality of blades, and the blades are formed to have continuous corner angles so as to be in contact or non-contact with the bottom surface of the space 101.

상기와 같은 스크레퍼 110는 또한, 상기 스크레이퍼는 폴리에틸렌(PE), 폴리프로필렌(PP), 폴리아미드(PA), 폴리아세텔(POM), 폴리염화비닐(PVC), 폴리에스테르(PET), 폴리메틸펜텐(PMP), 아이오노머(IO), 에틸렌비닐알코올(EVOH), 폴리염화비닐(PVA), 폴리스틸렌(PS), 메타크릴수지(PMMA), 폴리카보네이트(PC), 초산비닐아세테이트(PVAc), 폴리비닐알코올(PVA), 페놀수지(PF), 우레아수지(UF), 멜라민수지(MF), 에폭시수지(EP), 폴리우레탄(PUR), 불포화폴리에스테르수지(UP) 및 금속에서 선택된 재질을 적용한다.The scraper 110 as described above is also, the scraper is polyethylene (PE), polypropylene (PP), polyamide (PA), polyacetel (POM), polyvinyl chloride (PVC), polyester (PET), polymethylpentene (PMP), ionomer (IO), ethylene vinyl alcohol (EVOH), polyvinyl chloride (PVA), polystyrene (PS), methacrylic resin (PMMA), polycarbonate (PC), vinyl acetate (PVAc), poly Vinyl alcohol (PVA), phenolic resin (PF), urea resin (UF), melamine resin (MF), epoxy resin (EP), polyurethane (PUR), unsaturated polyester resin (UP) and metal do.

아울러, 상기 공간 101에는 배양액에 잠기도록 배양필름 140을 설치하여 접종된 세포가 공간 101 바닥면과 배양필름 140 하부면에서 배양되도록 하고, 상기 스크레퍼 110는 배양필름 140과 공간 101 바닥면 사이에 설치된다.In addition, the culture film 140 is installed in the space 101 to be immersed in the culture solution so that the inoculated cells are cultured on the bottom surface of the space 101 and the lower surface of the culture film 140, and the scraper 110 is installed between the culture film 140 and the bottom surface of the space 101 do.

즉, 상기 배양필름 140은 세포의 접종 및 배양 면적을 향상시켜 배양의 배가 효과를 갖는다.That is, the culture film 140 has a doubling effect of culture by improving the inoculation and culture area of cells.

또한, 상기 배양필름 140은 표면에 미세 기공이 형성되어 세포 접종 및 배양의 효과를 배가시킨다.In addition, the culture film 140 has micropores formed on the surface to double the effect of cell inoculation and culture.

상기 공간 101에는 배양액에 잠기도록 배양필름 140을 하나 이상을 적층시켜 접종된 세포가 공간 101 바닥면과 배양필름 140들 하부면에서 배양되도록 한다.In the space 101, one or more culture films 140 are laminated to be immersed in the culture solution, so that the inoculated cells are cultured on the bottom surface of the space 101 and the lower surfaces of the culture films 140.

여기서, 상기 배양필름 140과 공간 101 바닥면 사이에 스크레퍼 110가 설치되거나, 상기 배양필름 140들 사이와 공간 101 바닥면 사이에 스크레퍼 110가 설치될 수 있다.Here, the scraper 110 may be installed between the culture film 140 and the bottom surface of the space 101, or the scraper 110 may be installed between the culture films 140 and the bottom surface of the space 101.

본 발명의 연속 세포 배양 증식장치는 배양이 완료된 배양용기 100를 통로부 120와 분리하여 별도로 이동 또는 보관을 할 수 있도록 한다.The continuous cell culture propagation apparatus of the present invention separates the culture vessel 100 in which the culture is completed from the passage part 120 so that it can be moved or stored separately.

이를 위해 배양용기 100에 외부 온도를 전도받아 세포 생존력 유지를 위한 환경을 갖도록 한다.To this end, the external temperature is conducted to the culture vessel 100 to have an environment for maintaining cell viability.

여기서, 상기 외부 온도는 배양용기 100를 포유류 이상의 온도를 갖는 체표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 한다.Here, the external temperature enables the temperature transfer by bringing the culture vessel 100 into close contact with the body surface having a temperature higher than that of mammals.

또는, 상기 온도는 배양용기 100를 휴대용 온도 발생수단 표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 한다.Alternatively, the temperature enables temperature transfer by bringing the culture vessel 100 into close contact with the surface of the portable temperature generating means.

또는, 상기 배양용기 100를 휴대용 전자제품 표면에 밀착시켜 전자제품에서 발열되는 온도 전이를 가능하도록 한다.Alternatively, the culture vessel 100 is brought into close contact with the surface of the portable electronic product to enable temperature transfer generated by the electronic product.

상기와 같이, 이동 및 보관이 가능한 배양용기 100에는 견착수단을 형성시켜 밴드를 통해 온도 전도 대상물에 고정시킬 수 있도록 하여 이동의 편의성을 제공한다.As described above, a shoulder attachment means is formed in the culture vessel 100 that can be moved and stored, so that it can be fixed to a temperature conductive object through a band, thereby providing convenience of movement.

또한, 본 발명의 연속 세포 배양 증식방법은 배양액이 담겨진 공간 101을 갖는 배양용기 100에 세포를 접종하여 배양하는 단계와, 배양용기 100에 세포 배양이 완료되면 배양용기 100를 움직이도록 하여 공간 101 내부에 설치된 스크레퍼 110가 이동하면서 공간 101 바닥에 배양된 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계와, 집합된 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 추출하는 단계로 이루어진다.In addition, the continuous cell culture proliferation method of the present invention comprises the steps of inoculating and culturing cells in a culture vessel 100 having a space 101 containing a culture solution, and moving the culture vessel 100 when the cell culture is completed in the culture vessel 100 inside the space 101 It consists of a step of detaching and collecting the cells cultured on the floor of the space 101 while moving the scraper 110 installed in the space, and a step of extracting the remaining cells except for a part of the collected cells.

여기서, 세포 추출단계에서 수득된 세포를 배양액이 담겨진 다른 개소의 복수 배양용기 100에 접종시켜 배양을 배가시키는 단계를 더 포함한다.Here, the step of inoculating the cells obtained in the cell extraction step into the multiple culture vessel 100 at another location containing the culture solution, further comprising the step of doubling the culture.

또한, 세포 추출단계에서 세포 배양과정 중 발생하는 세포부유물을 추출하도록 한다.In addition, in the cell extraction step, the cell suspension generated during the cell culture process is extracted.

특히, 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계에서 배양용기 100를 시소 방식으로 동작시켜 스크레퍼 110와 배양액을 이동시키도록 한다.In particular, the culture vessel 100 is operated in a seesaw manner in the step of dissociating and collecting the cells at the same time to move the scraper 110 and the culture medium.

또는, 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계에서 배양용기 100를 진동시켜 스크레퍼 110를 이동시키도록 한다.Alternatively, the scraper 110 is moved by vibrating the culture vessel 100 in the step of dissociating and collecting the cells at the same time.

더욱이, 세포를 탈리시키는 동시에 집합시키는 단계에서 배양용기 100를 시소 동작 및 진동 동작을 병행시켜 스크레퍼 110와 배양액을 이동시키도록 한다.Moreover, in the step of dissociating and collecting cells at the same time, the culture vessel 100 performs a seesaw operation and a vibration operation in parallel to move the scraper 110 and the culture medium.

아울러, 상기 배양용기 100에는 이산화탄소를 별도로 주입할 수 있도록 하여 세포 배양의 환경을 갖도록 한다.
In addition, carbon dioxide can be separately injected into the culture vessel 100 to have an environment for cell culture.

즉, 상기 배양용기 100의 공간 101 내부로 세포 배양에 필요한 기체를 주입하는 관로가 별도로 설치되거나, 제1관 121을 통해 기체를 공급할 수 있다.That is, a pipe for injecting a gas necessary for cell culture into the space 101 of the culture vessel 100 may be separately installed, or the gas may be supplied through the first pipe 121 .

즉, 상기 배양용기 100는 세포 배양시 적정 온도로 유지되는 기체를 제공한다.That is, the culture vessel 100 provides a gas maintained at an appropriate temperature during cell culture.

이때, 기체는 이산화탄소, 산소 중 어느 하나 이상을 포함한다.In this case, the gas includes at least one of carbon dioxide and oxygen.

상기의 방법을 통한 배양용기 100는 복수로 마련되고, 각각의 배양용기 100가 필터 123와 관로로 연결되어 펌프 124의 압력을 통해 배양된 세포, 배양액 및 세포 배양과정에서 발생하는 세포 부유물이 필터 123를 거쳐 복수의 배양용기 100에 선택적으로 주입되거나 추출되도록 하는 동시에 세포와 세포부유물을 구분시키도록 한다.The culture vessel 100 through the above method is provided in plurality, and each culture vessel 100 is connected to the filter 123 by a pipe so that the cells cultured through the pressure of the pump 124, the culture medium, and the cell suspension generated in the cell culture process are filtered through the filter 123 Through the process, it is selectively injected or extracted into a plurality of culture vessels 100, and at the same time, cells and cell suspensions are distinguished.

여기서, 복수 배양용기 100에 세포가 접종되어 배양되면 배양액이 충진된 다른 개소의 복수의 배양용기 100에 반복하여 접종, 배양, 탈리 및 추출하는 과정을 반복하도록 할 수 있다.Here, when the cells are inoculated and cultured in the ascites culture vessel 100, the process of inoculation, culture, detachment and extraction may be repeated in the plurality of culture vessels 100 at other locations filled with the culture solution.

그리고, 상기 세포부유물이 추출 된 배양용기 100에 배양액을 충진하는 단계가 더 포함된다.And, the step of filling the culture medium in the culture vessel 100 from which the cell suspension is extracted is further included.

이상에서 설명한 본 발명은 전술한 실시예 및 첨부된 도면에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 여러 가지 치환, 변형 및 변경이 가능함은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 명백할 것이다.
The present invention described above is not limited by the above-described embodiments and the accompanying drawings, and it is common in the technical field to which the present invention pertains that various substitutions, modifications and changes are possible without departing from the technical spirit of the present invention. It will be clear to those who have the knowledge of

100 : 배양용기 101 : 공간
110 : 스크레퍼 111 : 자력수단
120 : 통로부 121 : 제1관
122 : 제2관 123 : 필터
124 : 펌프 130 : 운동수단
140 : 배양필름 150 : 자성체100: culture vessel 101: space
110: scraper 111: magnetic means
120: passage 121: tube 1
122: sub-section 2 123: filter
124: pump 130: exercise means
140: culture film 150: magnetic material

Claims (31)

내부에 밀폐된 공간을 갖고 시소동작과 진동 동작을 병행하는 운동수단을 통해 반복적으로 움직이는 배양용기와,
상기 공간 내부에 배양액 주입, 배양액에 세포 접종, 세포의 배양, 탈리, 수득 및 세포의 배양과정에서 발생하는 세포 부유물을 추출하되 전체 배양 세포 중 일부분을 제외하고 나머지 세포를 수득할 수 있도록 상기 공간과 연결되어 배양액과 세포를 주입하는 제1관과, 배양된 세포와 세포 부유물을 추출하는 제2관과, 상기 제1관과 제2관 사이에 설치되어 추출된 세포와 세포 부유물을 구분하여 제1관으로 세포를 주입하고 세포 부유물을 정화하는 필터 및 상기 제1관과 제2관에 설치되어 압력을 발생시키는 펌프로 이루어진 통로부와,
상기 공간에 설치되어 반복적으로 움직이는 배양용기에 의해 이동하여 공간 의 바닥면에서 배양되는 세포가 세포막과 세포 외 기질에 의해 불완전하게 바닥에 붙어 있는 상태이므로, 배양된 세포가 보다 쉽게 탈리 및 집합시키도록 자성체를 상기 배양용기 외부 하부면에 근접시키되, 스크레퍼 내부에 설치된 자력수단과 자력으로 연결되도록 하여 자성체의 이동에 의해 스크레퍼를 공간 내부에서 이동시켜 스크레퍼가 공간 바닥면과 마찰되면서 세포를 긁어내어 탈리시키는 스크레퍼로 이루어지는 연속 세포 배양 증식장치를 구성하되,
상기 배양용기는 필터와 펌프를 통해 복수의 배양용기에서 배양된 세포와 세포 부유물을 추출하는 동시에 배양액을 주입하도록 하는 동시에
상기 공간에는 배양액에 잠기도록 미세 기공이 형성된 배양필름을 설치하여 접종된 세포가 공간 바닥면과 배양필름 하부면에서 배양되도록 하고, 상기 스크레퍼는 배양필름과 공간 바닥면 사이에 설치되고,
상기 스크레퍼는 공간의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드를 형성하면서 상기 블레이드는 모서리각을 갖도록 형성되어 공간의 바닥면과 마찰에 의해 세포를 바닥면에서 탈리시키도록 한 것을 특징으로 하는 연속 세포 배양 증식장치.A culture vessel that has a closed space inside and moves repeatedly through an exercise means that combines seesaw and vibration movements;
The space and the space to obtain the remaining cells except for a part of the entire cultured cells except for a part of the entire cultured cells while extracting the cell suspension generated in the process of injecting the culture medium into the space, inoculating the cells into the culture medium, culturing, detaching, harvesting, and culturing the cells. A first tube connected to inject the culture solution and cells, a second tube for extracting cultured cells and cell suspension, and a first tube installed between the first tube and the second tube to separate the extracted cells and the cell suspension. A passage portion comprising a filter for injecting cells into the tube and purifying the cell suspension, and a pump installed in the first and second tubes to generate pressure;
Since the cells that are installed in the space and moved by the repeatedly moving culture vessel and cultured on the bottom surface of the space are incompletely attached to the floor by the cell membrane and the extracellular matrix, the cultured cells can be detached and assembled more easily. The magnetic material is brought close to the outer lower surface of the culture vessel, and is connected to the magnetic means installed inside the scraper by magnetic force to move the scraper in the space by the movement of the magnetic material, thereby scraping the cells while the scraper rubs against the floor surface of the space to be detached. Construct a continuous cell culture propagation device consisting of a scraper,
The culture vessel extracts the cells and the cell suspension cultured in a plurality of culture vessels through a filter and a pump and simultaneously injects the culture solution
A culture film having micropores is installed in the space so that the inoculated cells are cultured on the bottom surface of the space and the lower surface of the culture film, and the scraper is installed between the culture film and the bottom of the space,
The scraper is continuous cell, characterized in that the lower surface in contact with the bottom surface of the space forms a plurality of blades while the blades are formed to have a corner angle to detach the cells from the floor surface by friction with the floor surface of the space culture propagation device. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서,
배양이 완료된 배양용기는 이동 또는 보관시 외부 온도를 전도받아 세포 생존력 유지를 위한 환경을 갖도록 하는 것을 특징으로 하는 연속 세포 배양 증식장치.According to claim 1,
A continuous cell culture propagation apparatus, characterized in that the culture vessel in which the culture is completed has an environment for maintaining cell viability by conducting external temperature during movement or storage. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 제8항에 있어서,
상기 외부 온도는 배양용기를 포유류 이상의 온도를 갖는 체표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 하는 것을 특징으로 하는 연속 세포 배양 증식장치.9. The method of claim 8,
The external temperature is a continuous cell culture proliferation apparatus, characterized in that the culture vessel is in close contact with the body surface having a temperature higher than that of mammals to enable temperature transfer. 제8항에 있어서,
상기 온도는 배양용기를 휴대용 온도 발생수단 표면에 밀착시켜 온도 전이를 가능하도록 하는 것을 특징으로 하는 연속 세포 배양 증식장치.9. The method of claim 8,
The temperature is a continuous cell culture propagation apparatus, characterized in that the culture vessel is in close contact with the surface of the portable temperature generating means to enable temperature transfer. 제8항에 있어서,
상기 배양용기를 휴대용 전자제품 표면에 밀착시켜 전자제품에서 발열되는 온도 전이를 가능하도록 하는 것을 특징으로 하는 연속 세포 배양 증식장치.9. The method of claim 8,
A continuous cell culture propagation apparatus, characterized in that the culture vessel is closely attached to the surface of a portable electronic product to enable temperature transition generated by the electronic product. 제8항에 있어서,
상기 배양용기는 표면에 견착수단을 형성시켜 밴드를 통해 온도 전도 대상물에 고정시킬 수 있도록 하는 것을 특징으로 하는 연속 세포 배양 증식장치.









9. The method of claim 8,
The culture vessel is a continuous cell culture proliferation apparatus, characterized in that by forming a shoulder attachment means on the surface to be fixed to the temperature conduction object through a band.









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