KR102220323B1

KR102220323B1 - 신규 다중 기능성 펩타이드 및 그의 용도

Info

Publication number: KR102220323B1
Application number: KR1020200058467A
Authority: KR
Inventors: 이태훈; 김재왕; 이현주
Original assignee: (주)노바셀테크놀로지
Priority date: 2020-05-15
Filing date: 2020-05-15
Publication date: 2021-02-26
Also published as: KR20200112754A

Abstract

본 발명은 면역세포의 활성을 효과적으로 조절하는 한편, 그람 음성균 및 그람 양성균 등의 각종 박테리아에 대하여 우수한 항균활성도 나타내는 신규 다중 기능성 펩타이드를 제공한다.

Description

신규 다중 기능성 펩타이드 및 그의 용도{A novel multi-functional peptides and use thereof}

본 발명은 신규 다중 기능성 펩타이드 및 그의 용도에 관한 것으로서, 더 상세하게는 항균 효과와 면역 세포의 활성 조절 기능을 함께 갖는 신규 다중 기능성 펩타이드 및 그의 용도에 관한 것이다.

항균 펩타이드(antimicrobial peptides)는 자연계에서 발견되기도 하고 합성 펩타이드로부터 그 활성이 보이기도 한다. 이러한 항균 펩타이드들은 일반적인 단백질에 비해 비교적 짧은 아미노산 서열(10 여개 내지 100 여개)로 이루어져 있고, 주로 세포막에 결합하면 1) 세포막에 이온채널을 형성하여 미생물의 에너지 생성을 저해하거나, 2) 세포막에 큰 구멍을 만들게 되어 결과적으로 세포가 죽게 된다. 이렇게 물리적으로 미생물을 파괴하므로, 미생물의 세포벽이나 세포 내 고분자 합성을 저해하는 기존의 항생제들과는 달리 미생물들이 항균 펩타이드에 대한 내성을 갖게 되기는 매우 어려우며, 현재까지도 내성이 생기지 않는 것으로 보고되고 왔다. 현재까지 알려진 많은 항균 펩타이드들 사이에서 서열상의 유사성은 거의 나타나지 않지만, 구조나 활성의 측면에서는 몇 가지 일반적인 경향성을 보인다. 대표적으로 항균 펩타이드는 라이신, 아르기닌, 히스티딘과 같은 양전하를 띠는 부분과 소수성을 지닌 부분이 존재한다는 점이다. 현재 항균 펩타이드의 작용기작에 관련된 가설 중 가장 타당성 있게 제시되고 있는 Shai-Matsuzaki-Huang(SMH) 모델에서는 항균 펩타이드의 서열상의 특징과 작용기전을 하기와 같이 설명한다: 양전하를 띤 친수성 부분이 음전하를 띤 박테리아의 세포막과 결합하고 난 뒤, 세포막과 결합된 펩타이드의 소수성 부분이 세포막 인지질(phospholipid)의 소수성 부분과 상호작용하여, 세포막 상에 구멍을 형성하게 되어 세포막의 투과도를 변화시키게 됨으로써 세포를 파쇄하게 된다. 호중구(neutrophil) 및 모노사이트와 같은 식세포(phagocytic cell)에서 발현되는 포르밀 펩타이드 수용체 족(formyl peptide receptor 1(FPR1) 및 formyl peptide receptor 2(FPR2))은 병원균 감염에 대한 숙주의 대항(defense)과 염증반응해소(resolution of inflammation)에서 중요한 역할을 한다(Mangmool, S. et al., Toxins, 3: 884-899, 2011; Corminoboeuf, O. et al., J.Med.Chem., 58: 537-559, 2015). 상기 수용체는 백일해 톡신-민감성(pertussis toxin-sensitive) Gi 단백질과 결합하는 것으로 알려져 있다(Nakashima, K., et al., J. Biol. Chem, 290(22): 13678-91, 2015). 그 중에서도 FPR2는 염증성 질환에서 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. FPR2의 활성화는 Gαi 서브유닛에서 Gβγ 서브유닛의 분리를 유도하고, βγ-서브유닛은 포스포리파제 Cβ 또는 포스포이노시타이드 3-카이나제의 활성화를 유도한다(Duru, E.A., et al., J. Surg. Res., 195(2): 396-405, 2015). 이러한 분자들의 활성화는 복잡한 하류(downstream) 신호전달을 유도하여 주화성 이동(chemotactic migration), 탈과립화(degranulation), 및 수퍼옥사이드 생성(superoxide generation)와 같은 세포 반응을 다양화하여 생체 내의 면역반응을 조절하여, 숙주의 대항(defense)과 염증반응해소(resolution of inflammation) 반응을 매개한다.

그러나 본 발명은 상기와 같은 문제점을 포함하여 여러 문제점들을 해결하기 위한 것으로서, 면역세포의 활성을 조절하고 다양한 세균에 대하여 우수한 항균 활성을 나타내는 신규 다중 기능성 펩타이드를 제공하는 것을 목적으로 한다. 그러나 이러한 과제는 예시적인 것으로, 이에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 일 관점에 따르면, 하기로 구성되는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 6 내지 12개의 아미노산으로 구성되는 항균 및 면역조절 활성을 갖는 펩타이드가 제공된다:

i) BOBWX₁OU; 및

ii) X₁RWWUX₁X₂m

(이때 상기 B는 각각 독립적으로 라이신(K) 및 아르기닌(R)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 염기성 아미노산이고, O는 각각 독립적으로 페닐알라닌(F), 타이로신(Y) 및 트립토판(W)로 구성되는 군으로부터 선택되는 방향성 아미노산이며, X₁은 각각 독립적으로, 아르기닌(R), 노르류신(Nle) 또는 2-naphthyl-L-alanine(Z)이고, U는 없거나 m, X₂WW, RX₂WW 또는 MVm이며, 상기 X₂는 노르류신(Nle), 트립토판(W) 또는 발린(V)이고, m은 D-형 메티오닌으로, 상기 i에서 KFKWRYm은 제외된다).

본 발명의 다른 일 관점에 따르면, 상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항균제가 제공된다.

본 발명의 다른 일 관점에 따르면, 상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 면역질환 치료제가 제공된다.

본 발명의 다른 일 관점에 따르면, 상기 펩타이드를 포함하는 아토피 피부염, 루푸스 및 건선으로 구성되는 군으로부터 선택되는 피부면역질환 개선용 화장료 조성물이 제공된다.

상기한 바와 같이 본 발명의 일 실시예에 따르면, 그람 음성균 및 그람 양성균 등의 각종 박테리아에 대하여 높은 항균활성을 나타낼 뿐만 아니라 면역 세포의 활성 조절 기능을 동시에 갖는 신규 다중 기능성 펩타이드의 생산효과를 구현할 수 있다. 물론 이러한 효과에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.

도 1은 본 발명의 신규 다중 기능성 펩타이드의 FPR2 의존적 세포내 칼슘이온 증가 활성으로 FPR2 활성화 효력을 분석한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 신규 다중 기능성 펩타이드의 녹농균(P.aeruginosa)에 대한 항균활성을 분석한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 신규 다중 기능성 펩타이드의 황색포도상구균(S. aureus)에 대한 항균활성을 분석한 그래프이다.

용어의 정의:

본 문서에서 사용되는 용어 "면역 조절 펩타이드"는 직접 또는 간접적으로 항균 및 항바이러스 작용, 면역세포의 염증반응 조절, 면역세포 이동, 표피 또는 내피 세포의 염증 반응 조절 등과 같은 면역조절 작용을 하는 펩타이드를 의미한다. 다른 의미로는 상기 펩타이드는 호중구(neutrophil) 및 모노사이트와 같은 식세포(phagocytic cell), 표피세포 등에서 발현되는 포르밀 펩타이드 수용체 족(formyl peptide receptor 1 (FPR1) 및 formyl peptide receptor 2 (FPR2))을 통해 병원균 감염에 대한 숙주의 대항(defense)에서 중요한 역할을 한다. 상기 수용체는 백일해 톡신-민감성(pertussis toxin-sensitive) Gi 단백질과 결합하는 것으로 알려져 있다. FPR1과 FPR2의 활성화는 Gαi 서브유닛에서 Gβγ 서브유닛의 분리를 유도하고, βγ-서브유닛은 포스포리파제 Cβ 또는 포스포이노시타이드 3-카이나제의 활성화를 유도한다. 이러한 분자들의 활성화는 복잡한 하부(downstream) 시그널링을 유도하여 주화성 이동(chemotactic migration), 탈과립화(degranulation), 및 수퍼옥사이드 생성(superoxide generation)와 같은 세포 반응을 다양화한다.

본 문서에서 사용되는 용어 "항균 펩타이드"는 일반적으로 비교적 단순한 구조로 이루어진 양이온성 펩타이드(cationic peptide) 화합물로서 그람 양성균(gram-positive bacteria), 그람 음성균(gram-negative bacteria), 진균, 바이러스 등에 대한 광범위한 항균 스펙트럼을 지니고 있으며, 그 기전이 완전히 밝혀져 있지는 않지만 일반적으로 미생물의 세포막을 파괴하는 작용 기전을 통하여 항균력 을 나타내는 것으로 알려져 있다.

발명의 상세한 설명:

i) BOBWX₁OU; 및

ii) X₁RWWUX₁X₂m

상기 펩타이드에 있어서, 상기 i)는 BOBW-Nle-Om, BOBWBO, BOBWZO 및 BOBWZOm 및 BOBWBOMVm으로 구성되는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는, 펩타이드일 수 있다. 또한, 상기 ii)는 ZRWWX₁X₂m, RRWWX₁X₂m 및 ZRWWRX₂WWRWm으로 구성되는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는, 펩타이드일 수 있다.

상기 펩타이드는 N-말단 또는 C-말단에 옥타노일기 또는 아세틸기가 부가될 수 있고 C-말단이 아마이드화될 수 있다.

상기 펩타이드는 서열번호 1 내지 17로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 구성될 수 있다.

상기 항균제에 있어서, 상기 항균제는 녹농균(P. aeruginosa) 또는 황색포도상구균(S. aureus)에 대해 항균활성을 가질 수 있다.

상기 면역질환 치료제에 있어서, 상기 면역질환은 아토피 피부염(atopic dermatitis), 건선(psoriasis), 결막염(conjunctivitis), 각막염(keratitis), 안구 건조증(dry eye syndrome), 폐렴(pneumonia), 천식(asthma), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 궤양성 대장염(ulcerative colitis) 또는 크론병(crohn＇s disease)일 수 있다.

본 발명의 다른 일 관점에 따르면, 상기 펩타이드를 펩타이드를 포함하는 아토피 피부염, 루푸스 및 건선으로 구성되는 군으로부터 선택되는 피부면역질환 개선용 화장료 조성물이 제공된다.

상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 염수, 완충 염수, 덱스트로스, 물, 글리세롤 및 에탄올에서 선택되는 약학적 희석제중 1종 이상 포함할 수 있으며, 희석제는 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 약학 조성물은 투여목적 및 질병에 따라 상이하게 적용될 수 있다. 실질적으로 투여되는 활성 성분의 양은 다양한 관련 요소, 즉 치료하고자 하는 질병, 환자상태의 정도, 다른 약제(예를 들어 주화성 약제)와 공동투여여부, 환자의 나이 성별``, 체중, 음식, 투여시간, 투여경로, 및 조성물의 투여비율(ratio)을 고려하여 결정하여야 한다. 상기 조성물은 투여량 및 투여경로가 질병의 형태 및 심각성에 따라 조절될 수 있기는 하지만 하루에 한번 또는 1-3번 나누어 투여될 수 있다.

상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며(예: 문헌 [Remington's Pharmaceutical Science, 최신판; Mack Publishing Company, Easton PA), 제제의 형태는 특별히 한정되는 것은 아니나, 바람직하게는 외용제일 수 있다. 본 발명의 외용제에는 시트제, 액상도포제, 분무제, 로션제, 크림제, 파프제, 분제, 침투 패드제, 분무제, 수화겔을 포함한 겔제, 파스타제, 리니멘트제, 연고제, 에어로졸, 분말제, 현탁액제, 경피흡수제 등의 통상적인 외용제의 형태가 포함될 수 있다. 이들 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌[Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042(Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기술되어 있다.

본 발명의 펩타이드 또는 물질을 포함하는 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다. 비경구 투여는 경구 이외의 투여경로, 즉 직장, 정맥, 복막 및 근육, 동맥, 경피, 비강(nasal), 흡입, 안구, 및 피하를 통한 약제투여를 의미한다. 상기 펩타이드 또는 물질을 포함하는 약학 조성물은 경구 투여 형태, 주입 가능한 용액 또는 국소제제와 같은 어떠한 형태로도 제제화될 수 있다. 제제화는 경구 및 주입 가능한 투여(진용액(true solution), 현탁액 또는 에멀젼)에 적합하도록 제조되는 것이 바람직하며, 정제, 캡슐, 연질캡슐, 수성 약제, 환제, 과립 등과 같은 경구 형태로 제조되는 것이 가장 바람직하다. 상기 제제화에서 본 발명의 펩타이드는 부형제(excipient)없이 연질 캡슐에 충전되며, 담지체와 혼합되거나 희석된 후에 적당한 제제로 만들어진다. 적합한 담지체의 예로는 전분, 물, 염수, 링거액, 덱스트로스 등이 있다.

본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 화장료 조성물의 제형에 사용되는 하나 이상의 첨가제를 포함할 수 있다. 예컨대, 그러한 첨가제에는 1, 3-부칠렌 글리콜, 대두 인지질 콜린, 스핑고신, 콜레스테롤, 트윈 80, 피토스핑고신, 살리실산, 피부보습제(습윤제), 유연제, 천연 오일, 천연 추출물, 케라틴, 리포이드, 흡수 수용성 물질, 각질층 세라마이드, 표피 지질 산성막 지방산, 콜레스테릴 에스테르, 에탄올, 증류수 등이 포함될 수 있다.

본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 경구투여 또는 비경구투여를 통해 투여되는 것이 가능하며, 경구투여가 더욱 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비경구로 투여되는 경우, 정맥내 주사, 비강내 흡입, 근육내 투여, 복강내 투여, 경피흡수 등 다양한 경로를 통해 투여하는 것이 가능하다.

아울러, 본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 0.1 mg/kg 내지 1 g/kg의 용량으로 투여될 수 있으며, 더 바람직하게는 1 mg/kg 내지 600 mg/kg의 투여량으로 투여된다. 한편, 상기 투여량은 환자의 나이, 성별 및 상태에 따라 적절히 조절될 수 있다.

이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예 및 실험예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있는 것으로, 이하의 실시예 및 실험예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이다.

실시예 1: 항균 펩타이드의 제조

본 발명자들은 종래 기초 스크리닝 탐색을 통해 항균활성을 갖는 펩타이드(KFKWRYm)를 개발하여, 이에 대하여 특허를 확보하였다(대한민국 특허 제10-1855170호). 이어, 상기 펩타이드 보다 더 항균 및 면역기능 조절 능력이 우수한 개량 펩타이드를 개발하기 위해, 상기 특허펩타이드의 아미노산 서열에서 다양한 변이체들을 고안하여 이를 통상의 아미노산 합성법(Umbarger, H. E., Ann. Rev. Biochem., 47: 533-606, 1978)을 이용하여 합성하였으며, 이를 항균 후보 펩타이드로 사용하였다. 상기 펩타이드를 기반으로 변이를 주어 약 100개의 항균 펩타이드 후보를 합성하였다.

아울러, 본 발명자들은 상기에서 합성된 펩타이드들의 N-말단에 옥타노일기 또는 아세틸기 등을 부가하고/거나 C-말단의 카르복시기 대신 아민기를 치환한 형태의 변형을 가하였다.

실험예 1: 신규 펩타이드의 FPR2 활성화 효력 분석

본 발명자들은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조한 항균 펩타이드 후보를 대상으로 생체의 면역기능을 활성화시키는지 여부를 확인하기 위해 칼슘 이온 투과성의 변화를 관찰하였다. 구체적으로 상기 펩타이드가 FPR2를 활성화시키는지 확인하기 위하여 세포 내 칼슘이온의 농도를 측정하였다. 이를 위해 FPR2를 발현하지 않은 RBL세포와 RBL세포에서 FPR1을 과발현시킨 세포(FPR1-RBL)와 FPR2를 과발현시킨 세포(FPR2-RBL)를 사용하였고, 세포내 칼슘 이온의 유리를 예민하게 측정할 수 있는 방법으로 칼슘에 결합력이 강한 염색물질인 Fura-2/AM을 이용하였다. 즉, 세포를 10% 우태아 혈청이 함유된 RPMI 배지에 배양하고 대수기 상태일 때(mid-log phase, 1-3×10⁷ 세포/ml) 원심분리하여 수확한 다음 우태아 혈청이 함유되지 않은 RPMI 배지로 수회 세척하고 이를 1×10⁷세포/ml이 되도록 RPMI 배지에 재현탁하였다. 이어서 최종 3 μM 농도의 Fura-2/AM 을 첨가하고 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 45분 동안 계속 교반하면서 배양하였다. 적정 시간이 경과한 다음 세포를 수확하여 다시 RPMI 배지로 수회 세척한 다음 이를 250 μM 농도의 설핀피라존(Sulfinpyrazone)이 첨가된 적정량의 RPMI 배지에 현탁하여 세포 내로 들어간 Fura-2가 세포 외부로 유실되는 것을 방지하였다. 약 2×10⁶ 개의 세포를 매번 취하여 급속 원심분리로 수확하고 이를 칼슘 이온이 첨가되지 않고 EGTA가 첨가된 로크(Locke) 용액 1 ml에 재현탁하여 분광광도계 상에서 340 nm 및 380 nm의 두 파장에서의 흡광도 비를 모니터링하였는데, 약 1분 간격으로 본 발명의 일 실시예에 따른 펩타이드를 농도를 달리하여(1 μM, 0.1 μM 및 0.01 μM) 처리한 후 두 파장에서의 흡광도 차이를 조사하였고, 이를 나중에 그린키에윅즈(Grynkiewicz)의 방법에 따라 세포 내로 유리된 칼슘 이온의 농도로 환산하였다.

그 결과, 대부분의 펩타이드에서 FPR2 활성화 효력을 나타내었고 이는, 본 발명의 일 실시예에 따른 펩타이드가 FPR2에의 결합 및 활성화를 통해 개체의 면역기능을 조절할 수 있다는 점을 시사하는 것이다(도 1). 상기 펩타이드의 FPR2 활성화 효력을 분석한 결과를 하기 표 1에 요약하였다.

펩타이드의 FPR2 활성화 효력 분석

펩타이드	FPR2 활성(EC₅₀,nM)	서열번호
V3	106.9	1
V4	64.0	2
V5	41.5	3
V6	4.2	4
V7	3.2	5
V8	6.4	6
V9	4.7	7
V16	-	8
V16_0	-	9
V18	62.8	10
V18_0	10.0	11
V19_Ac	69.4	12
V20_Ac	45.3	13
V21_Ac	92.3	14
V22_Ac	16.2	15
V23_Ac	61.3	16
V24_Ac	58.6	17

실험예 2: 신규 펩타이드의 항균활성 실험

본 발명자들은 상기 실시예 1에서 합성된 다양한 펩타이드들 중 우수한 성능을 나타내는 펩타이드들을 선발하기 위해서, FPR2 활성화 능력을 평가하였다. 구체적으로, 상기 펩타이드의 항균활성을 측정하기 위하여 그람 양성균인 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)과 그람 음성균인 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)을 준비한 후, 한천 평판배지에 4차 도말하여 36℃ 배양기에서 밤새 배양하였다. 다음 날 한천 평판배지 상에 생성된 균주 콜로니를 3 ml 영양배지에 접종하여 36℃, 220 rpm 조건으로 교반 배양기에서 밤새 배양하였다. 다음날 상기 균들을 희석하여 600 nm에서 흡광도를 측정하였고 0.5가 되도록 조정하였으며 영양배지에 1:100 비율로 희석하였다. 그런 다음 상기 실시예에서 제조한 펩타이드를 영양배지에 0, 1.25, 2.5, 5, 10, 및 20 μM 의 농도로 순차희석하여 1 ml씩 제조한 후, 상기 희석된 균 1 ml을 접종하였다. 이어서, 36℃, 220 rpm의 조건으로 교반하였고 18시간 동안 배양한 후, 600 nm에서의 흡광도를 측정하였다.

그 결과, 녹농균(P.aeruginosa) 및 황색포도상구균(S. aureus)에 대하여 높은 항균활성을 나타내는 20개의 펩타이드를 선정하였다(도 2 및 3). 상기 펩타이드에 대한 서열정보 및 항균활성 여부를 하기 표 2에 요약하였다.

본 발명의 항균 펩타이드의 아미노산 서열 정보 및 항균활성

펩타이드	아미노산 서열	분자량	항균활성(IC₅₀, μg/ml)
펩타이드	아미노산 서열	분자량	P.aeruginosa	S. aureus
V3	Oct-KFKW-Nle-Ym-NH₂	1,140.5	-	15.2
V4	Oct-KWKW-Nle-Ym-NH₂	1,179.5	-	5.1
V5	Oct-RWRW-Nle-Ym-NH₂	1,235.6	> 50	2.0
V6	Oct-KFKWRYMVm-NH₂	1,413.8	-	>50
V7	Oct-RWRWRYMVm-NH₂	1,452.9	> 50	16.3
V8	Oct-RWRWRYMVm-NH₂	1,508.9	24.4	13.0
V9	Oct-RWRWRWMVm-NH₂	1,532.0	-	12.7
V16	Oct-RWRWZW-NH₂	1,211.4	7.3	2.7
V16_0	RWRWZW-NH₂	1,085.2	4.3	30.2
V18	Oct-RWRWZWm-NH₂	1,342.6	16.2	2.3
V18_0	RWRWZWm-NH₂	1,216.4	21.1	6.8
V19_Ac	Ac-ZRWWRWm-NH₂	1,258.5	> 50	5.4
V20_Ac	Ac-ZRWW-Nle-Wm-NH₂	1,215.4	> 50	> 50
V21_Ac	Ac-ZRWWRVm-NH₂	1,171.4	> 50	9.4
V22_Ac	Ac-ZRWWRVWWRWm-NH₂	1,886.2	> 50	13.6
V23_Ac	Ac-ZRWWR-Nle-WWRWm-NH₂	1,900.2	> 50	13.3
V24_Ac	Ac-RRWWRWm-NH₂	1,217.5	47.8	24.0

본 발명은 상술한 실시예 및 실험예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 다른 실시예 및 실험예가 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의하여 정해져야 할 것이다.

<110> NOVACELL TECHNOLOGY INC. <120> A novel multi-functional peptides and use thereof <130> PD18-5653-D1 <160> 17 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V3 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is Nle <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 1 Lys Phe Lys Trp Xaa Tyr Xaa 1 5 <210> 2 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V4 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is Nle <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 2 Lys Trp Lys Trp Xaa Tyr Xaa 1 5 <210> 3 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V5 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is Nle <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 3 Arg Trp Arg Trp Xaa Tyr Xaa 1 5 <210> 4 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V6 <220> <221> VARIANT <222> (9) <223> Xaa is D-type methionine <400> 4 Lys Phe Lys Trp Arg Tyr Met Val Xaa 1 5 <210> 5 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V7 <220> <221> VARIANT <222> (9) <223> Xaa is D-type methionine <400> 5 Arg Trp Arg Trp Arg Tyr Met Val Xaa 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V8 <220> <221> VARIANT <222> (9) <223> Xaa is D-type methionine <400> 6 Arg Trp Arg Trp Arg Tyr Met Val Xaa 1 5 <210> 7 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V9 <220> <221> VARIANT <222> (9) <223> Xaa is D-type methionine <400> 7 Arg Trp Arg Trp Arg Trp Met Val Xaa 1 5 <210> 8 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V16 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <400> 8 Arg Trp Arg Trp Xaa Trp 1 5 <210> 9 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V16_0 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <400> 9 Arg Trp Arg Trp Xaa Trp 1 5 <210> 10 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V18 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 10 Arg Trp Arg Trp Xaa Trp Xaa 1 5 <210> 11 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V18_0 <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 11 Arg Trp Arg Trp Xaa Trp Xaa 1 5 <210> 12 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V19_Ac <220> <221> VARIANT <222> (1) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 12 Xaa Arg Trp Trp Arg Trp Xaa 1 5 <210> 13 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V20_Ac <220> <221> VARIANT <222> (1) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (5) <223> Xaa is Nle <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 13 Xaa Arg Trp Trp Xaa Trp Xaa 1 5 <210> 14 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V21_Ac <220> <221> VARIANT <222> (1) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 14 Xaa Arg Trp Trp Arg Val Xaa 1 5 <210> 15 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V22_Ac <220> <221> VARIANT <222> (1) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (11) <223> Xaa is D-type methionine <400> 15 Xaa Arg Trp Trp Arg Val Trp Trp Arg Trp Xaa 1 5 10 <210> 16 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V23_Ac <220> <221> VARIANT <222> (1) <223> Xaa is 2-naphthyl-L-alanine <220> <221> VARIANT <222> (6) <223> Xaa is Nle <220> <221> VARIANT <222> (11) <223> Xaa is D-type methionine <400> 16 Xaa Arg Trp Trp Arg Xaa Trp Trp Arg Trp Xaa 1 5 10 <210> 17 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> V24_Ac <220> <221> VARIANT <222> (7) <223> Xaa is D-type methionine <400> 17 Arg Arg Trp Trp Arg Trp Xaa 1 5

Claims

하기로 구성되는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 7 내지 11개의 아미노산으로 구성되는 항균 및 FPR2 활성화 기능에 의한 면역조절 활성을 갖는 펩타이드:
i) RWRWZWm(서열번호 10);
ii) RRWWRWm(서열번호 17); 및
iii) X₁RWWUX₁X₂m
(이때 상기 iii에서 X₁은 각각 독립적으로, 아르기닌(R), 노르류신(Nle) 또는 2-naphthyl-L-alanine(Z)이고, U는 없거나 m, X₂WW, RX₂WW 또는 MVm이며, 상기 X₂는 노르류신(Nle), 트립토판(W) 또는 발린(V)이고, m은 D-형 메티오닌이다).
제1항에 있어서,
상기 iii)는 ZRWWX₁X₂m, RRWWX₁X₂m 및 ZRWWRX₂WWRWm으로 구성되는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열로 구성되는, 펩타이드.
제1항 또는 제2항에 있어서,
N-말단 또는 C-말단에 옥타노일기 또는 아세틸기가 부가된, 펩타이드.
제1항 또는 제2항에 있어서,
C-말단이 아마이드화된, 펩타이드.
제1항에 있어서,
서열번호 10 내지 17로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 구성되는, 펩타이드.
제1항 또는 제2항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항균제.
제6항에 있어서,
녹농균(P. aeruginosa) 또는 황색포도상구균(S. aureus)에 대해 항균활성을 갖는, 항균제.
제1항 또는 제2항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 아토피 피부염(atopic dermatitis), 건선(psoriasis), 결막염(conjunctivitis), 각막염(keratitis), 안구 건조증(dry eye syndrome), 천식(asthma), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 궤양성 대장염(ulcerative colitis) 및 크론병(crohn＇s disease)으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 면역질환 치료제.
삭제
제1항 또는 제2항의 펩타이드를 포함하는 아토피 피부염, 루푸스 및 건선으로 구성되는 군으로부터 선택되는 피부면역질환 개선용 화장료 조성물.