KR102201993B1 - Manufacturing apparatus of electron microscopy grids sample - Google Patents

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Abstract

본 발명은, 복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서, 내부공간이 형성된 프레임; 상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부; 상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부; 상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부; 상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및 상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치를 제공한다.The present invention provides a grid sample production apparatus for an electron microscope for producing a grid sample in which a protein liquid is disposed in an appropriate amount in a hole of a grid in which a plurality of holes is formed, comprising: a frame having an internal space; A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end; A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit; A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit; A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And it provides a grid sample production apparatus for an electron microscope including a liquid amount analysis unit for determining whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount by analyzing the roughness of the diffraction image appearing on the screen.

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Figure 112019033323648-pat00002

Description

전자현미경용 그리드 샘플 제작장치{Manufacturing apparatus of electron microscopy grids sample}Manufacturing apparatus for electron microscopy grids sample

본 발명은 그리드 샘플 제작장치에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 전자현미경용 그리드에 형성된 복수개의 홀에 배치되는 단백질 액체양을 실시간으로 측정하여 적정량의 단백질 액체를 배치시킨 그리드 샘플을 제작할 수 있는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 관한 것이다. The present invention relates to a grid sample manufacturing apparatus, and more particularly, an electron microscope capable of producing a grid sample in which an appropriate amount of protein liquid is placed by measuring the amount of protein liquid disposed in a plurality of holes formed in a grid for an electron microscope in real time. It relates to an apparatus for producing a grid sample for use.

일반적으로 전자현미경용 그리드(grid)는, 전자현미경을 이용하여 단백질 액체에 대한 이미지를 획득하기 위한 것으로, 홀리그리드(Holey grid)라는 매우 얇은 카본막 위에 수 마이크로미터(um) 단위의 직경을 가지는 홀이 수 마이크로미터(um)의 간격으로 형성되며, 주로 저온 전자현미경에서 이용되고 있다. 즉 전자현미경용 그리드는, 규칙적인 배열로 형성된 홀에 단백질 용액을 가하여 전자현미경을 이용하여 단백질 시료에 대한 이미지를 획득할 수 있다.In general, a grid for an electron microscope is used to obtain an image of a protein liquid using an electron microscope, and has a diameter of several micrometers (um) on a very thin carbon film called a Holey grid. Holes are formed at intervals of several micrometers (um), and are mainly used in low-temperature electron microscopes. That is, in the electron microscope grid, an image of a protein sample may be obtained using an electron microscope by applying a protein solution to holes formed in a regular arrangement.

부연하면 그리드에 가해진 단백질 용액은, 필터종이를 이용하여 선택적으로 제거함으로써, 그리드의 홀 내에 적정한 양의 단백질 용액이 잔존하도록 형성시킨다. 그리드의 홀 내에 적정한 양의 단백질 용액이 잔존하게 되면 저온의 액체에탄으로 급속 냉동시킴으로써 비트러스 아이스(Vitrous ice)를 형성하게 되며, 비트러스 아이스가 형성된 그리드 샘플을 전자현미경으로 관찰하여 단백질 용액에 대한 이미지 획득이 가능하다. 즉 상기한 바와 같은 저온 전자현미경을 이용하여 관찰하는 그리드의 좋은 이미지를 얻기 위해서는 그리드 홀 내에 잔존하는 단백질 용액이 적절한 양으로 배치되는 것이 중요하며, 적절한 양의 단백질 용액이 배치되어야 급속냉동시켰을 때 적절한 두께의 얼음을 얻을 수 있다.In other words, the protein solution applied to the grid is selectively removed using filter paper, so that an appropriate amount of the protein solution remains in the holes of the grid. When an appropriate amount of protein solution remains in the hole of the grid, vitreous ice is formed by rapid freezing with low-temperature liquid ethane, and the grid sample with vitreous ice is observed with an electron microscope. Image acquisition is possible. That is, in order to obtain a good image of the grid observed using a low-temperature electron microscope as described above, it is important that the protein solution remaining in the grid hole is disposed in an appropriate amount. You can get thick ice.

하지만 종래의 전자현미경용 그리드 샘플에 적절한 두께의 얼음이 형성되었는지 확인하기 위해서는 해당 그리드를 전자현미경을 통해서 확인하여 판단해야 하며, 최적 이미지를 획득하기까지 단백질 용액을 홀 내에 배치시키고 급속냉동시키는 그리드 샘플의 제작과, 이를 전자현미경을 통하여 확인하는 과정을 반복적으로 수행하게 되어 시간과 비용이 많이 소요된다는 단점이 있다. 따라서, 그리드의 홀 내의 단백질 용액의 양을 전자현미경으로 관찰하기 전에 측정하는 것이 요구되지만, 그리드의 홀의 크기가 2(um) 내외이며, 복수개의 홀 간의 간격이 3(um) 내외로 너무 작게 형성되어 있어서 , 광학현미경 등으로 쉽게 볼 수 없으며 그리드 홀을 관찰할 수 있더라도 홀 내에 배치된 단백질 용액이 적정한 양으로 배치되었는지 확인하는 것은 어렵다는 한계가 있다. However, in order to check whether ice of an appropriate thickness is formed in the grid sample for a conventional electron microscope, the grid should be checked and judged through an electron microscope, and a grid sample that places a protein solution in the hole and rapidly freezes it until an optimal image is obtained. There is a disadvantage in that it takes a lot of time and cost because the process of manufacturing and confirming it through an electron microscope is repeatedly performed. Therefore, it is required to measure the amount of protein solution in the hole of the grid before observing it with an electron microscope, but the size of the hole in the grid is around 2(um), and the spacing between the plurality of holes is too small, about 3(um). Therefore, it is difficult to see with an optical microscope, etc., and even if the grid hole can be observed, it is difficult to confirm whether the protein solution disposed in the hole is disposed in an appropriate amount.

종래의 저온 전자현미경의 그리드 제작장치에 관한 기술로는, 대한민국 공개특허 10-2016-0016399호가 개시되어 있다. As a technology related to a grid manufacturing apparatus for a conventional low-temperature electron microscope, Korean Patent Application Publication No. 10-2016-0016399 is disclosed.

본 발명은 상기한 바와 같은 문제점을 해결하기 위하여 창출된 것으로, 그리드 홀 내에 액체의 양이 적절하게 배치되었는지 빠르게 확인 가능하여, 고해상도의 이미지를 제공하는 그리드 샘플을 저비용으로 신속하게 얻을 수 있어 제작효율을 향상시킨 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치를 제공하는 것에 그 목적이 있다.The present invention was created to solve the above-described problems, and it is possible to quickly check whether the amount of liquid is properly disposed in the grid hole, so that a grid sample that provides a high-resolution image can be quickly obtained at low cost, resulting in manufacturing efficiency. It is an object of the present invention to provide an apparatus for producing a grid sample for an electron microscope with improved efficiency.

상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는, 복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서, 내부공간이 형성된 프레임; 상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부; 상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부; 상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부; 상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및 상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하고, 상기 그리드부는, 상기 프레임의 상부에 수직하게 구비되어 신축에 의하여 상하방향으로 슬라이딩 이동하는 제 1실린더와, 상기 제 1실린더의 하단에 구비되며 일면에 자석이 구비되는 트위저고정부와, 일면에 철제판이 구비되어 상기 트위저고정부의 일면에 맞닿아 결합되고, 하단에 트위저수용홈이 형성되는 트위저어댑터와, 일단이 상기 트위저수용홈에 삽입결합되며, 타단에 그리드가 파지되는 트위저부를 포함할 수 있다.The apparatus for producing a grid sample for an electron microscope according to the present invention for achieving the above object is to produce a grid sample for an electron microscope to prepare a grid sample in which a protein liquid is placed in an appropriate amount in a hole of a grid having a plurality of holes. An apparatus, comprising: a frame having an internal space; A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end; A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit; A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit; A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And a liquid amount analyzer configured to determine whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount by analyzing the roughness of the diffraction image appearing on the screen part, wherein the grid part is vertically provided on the upper part of the frame, A first cylinder that slides, a tweezer fixing part provided at the lower end of the first cylinder and having a magnet on one side, and an iron plate provided on one side to contact one side of the tweezer fixing part and coupled to the tweezer receiving part at the bottom. A tweezer adapter having a groove formed therein, and a tweezer portion having one end inserted into the tweezer receiving groove and gripping a grid at the other end thereof.

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또한 상기 트위저고정부는, 일면에 결합홈이 더 형성되고, 상기 트위저어댑터는, 일면에 상기 결합홈에 대응하는 돌출부가 더 구비되어, 상기 결합홈에 상기 돌출부가 삽입배치되는 것이 바람직하다.In addition, it is preferable that the tweezer fixing portion further includes a coupling groove on one surface, and the tweezer adapter further includes a projection corresponding to the coupling groove on one surface, and the projection is inserted into the coupling groove.

또한 상기 트위저부는, 타단이 서로 이격되어 이격된 사이로 그리드를 파지하는 트위저와, “ㄷ”자로 형성되며, 개방된 측으로 상기 트위저를 삽입시켜 그리드를 파지한 상태를 유지시키는 트위저홀더를 포함하는 것이 바람직하다.In addition, it is preferable that the tweezers include a tweezer for gripping the grid with the other ends spaced apart from each other, and a tweezer holder formed in a “c” shape, and inserting the tweezer to an open side to maintain the grid gripping state. Do.

또한, 본 발명에 따른 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는, 복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서, 내부공간이 형성된 프레임; 상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부; 상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부; 상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부; 상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및 상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하고, 상기 필터부는, 상기 프레임의 내부일면에서 신축에 의하여 수평방향으로 슬라이딩 이동하는 제 2실린더와, 상기 제 2실린더에 결합되어 이동하는 이동프레임과, 상기 이동프레임에 돌출구비되며 철제로 형성되는 필터고정대와, 자석으로 형성되어 상기 필터고정대의 일면에 결합되는 필터자석체와, 일면이 상기 필터자석체에 접착되어 상기 필터고정대에 배치되고, 그리드홀이 형성되며, 상기 제2실린더의 이동에 의하여 일면이 그리드와 맞닿아 그리드의 액체를 흡수하는 필터종이를 포함할 수 있다.In addition, in the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope according to the present invention, in the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope in which a protein liquid is disposed in an appropriate amount in a hole of a grid having a plurality of holes, the internal space is Formed frame; A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end; A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit; A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit; A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And a liquid amount analyzer configured to determine whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount by analyzing the diffraction roughness appearing on the screen, wherein the filter unit slides in a horizontal direction by stretching and contracting on an inner surface of the frame. A second cylinder, a moving frame coupled to the second cylinder to move, a filter holder protruding from the moving frame and formed of iron, a filter magnet body formed of a magnet and coupled to one surface of the filter holder, One surface is adhered to the filter magnet body and disposed on the filter holder, a grid hole is formed, and a filter paper that one surface contacts the grid by the movement of the second cylinder to absorb liquid from the grid may be included.

또한 상기 레이저부는, 상기 이동프레임에 구비되어 상기 제 2실린더에 의하여 이동하며, 상기 그리드홀을 관통하여 상기 그리드에 레이저를 조사할 수 있다.In addition, the laser unit may be provided in the moving frame and moved by the second cylinder, and may penetrate the grid hole to irradiate a laser onto the grid.

또한 상기 스크린부는, 상기 프레임의 내부타면에 구비되는 알루미늄판과, 상기 알루미늄판의 일면에 구비되며 상기 회절상이 나타나는 스크린페이퍼를 포함할 수 있다. Further, the screen unit may include an aluminum plate provided on the other surface of the frame, and a screen paper provided on one surface of the aluminum plate and showing the diffraction image.

또한, 본 발명에 따른 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는, 복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서, 내부공간이 형성된 프레임; 상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부; 상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부; 상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부; 상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및 상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하고, 상기 액체량분석부는, 상기 스크린부에 구비되어 상기 스크린부에 나타나는 회절상에 대한 조도를 측정하는 조도센서부와, 상기 조도센서부와 연결되어 상기 조도센서부에서 측정된 조도값을 전달받아 저장하는 데이터저장부와, 상기 데이터저장부에 저장된 조도값을 실시간으로 분석하여, 기설정된 조도값과 비교함으로써 그리드에 배치된 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량판단부를 포함할 수 있다.In addition, in the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope according to the present invention, in the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope in which a protein liquid is disposed in an appropriate amount in a hole of a grid having a plurality of holes, the internal space is Formed frame; A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end; A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit; A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit; A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And a liquid amount analysis unit that analyzes the roughness of the diffraction image appearing on the screen to determine whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount, wherein the liquid amount analysis unit is provided in the screen unit and An illuminance sensor unit that measures the illuminance of each other, a data storage unit connected to the illuminance sensor unit to receive and store the illuminance value measured by the illuminance sensor unit, and an illuminance value stored in the data storage unit are analyzed in real time, It may include a liquid amount determination unit for determining whether the protein liquid disposed in the grid is disposed in an appropriate amount by comparing it with a preset illuminance value.

또한, 상기 액체량분석부는, 상기 프레임의 내부일면에 구비되어 상기 스크린부에 나타나는 회절상을 촬영하는 제 1카메라를 더 포함하고, 상기 데이터저장부는, 상기 제 1카메라와 연결되어 상기 제 1카메라를 통하여 촬영된 회절상을 디스플레이하는 영상부를 더 포함하는 것이 바람직하다.In addition, the liquid amount analysis unit further includes a first camera provided on an inner surface of the frame to photograph a diffraction image appearing on the screen, and the data storage unit is connected to the first camera to provide the first camera. It is preferable to further include an image unit for displaying the diffraction image taken through.

또한 상기 조도센서부는, 상기 프레임의 내부타면에 구비되고, 일면에 자성체가 구비되는 조도센서와, 상기 스크린부의 타면에 구비되며 상기 조도센서의 자성체에 대응하는 자석으로 형성되어 상기 조도센서의 위치를 제어하는 센서이동체를 포함할 수 있다.In addition, the illuminance sensor unit is formed of an illuminance sensor provided on the other surface of the frame and having a magnetic substance on one surface thereof, and a magnet provided on the other surface of the screen unit and corresponding to the magnetic substance of the illuminance sensor to determine the position of the illuminance sensor. It may include a sensor moving body to control.

한편 상기 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는 상기 프레임의 하측에 구비되며, 내부가 상기 프레임의 내부와 연통되도록 연통홀이 형성되고, 상기 그리드부로부터 그리드를 전달받아 급속냉동시키는 급속냉동부를 더 포함할 수 있다.On the other hand, the electron microscope grid sample production device is provided at the lower side of the frame, the communication hole is formed so that the inside communicates with the inside of the frame, and further includes a quick freezing unit for receiving a grid from the grid unit for quick freezing. I can.

여기서 상기 급속냉동부는, 상기 프레임의 하측에 구비되어 내부가 상기 프레임의 내부와 연통되도록 연통홀이 형성되는 냉동프레임과, 상기 냉동프레임의 내부에 배치되는 외측용기와, 상기 외측용기의 내측에 중앙에 구비되고, 내부에 액체에탄이 수용되어, 그리드를 전달받아 급속냉동시키는 냉동컵과, 상기 외측용기와 상기 냉동컵 사이에 구비되며, 상기 냉동컵의 외측둘레를 따라 공간이 형성된 내측용기와, 상기 내측용기의 공간에 배치되어 급속냉동된 복수개의 그리드를 전달받아 저장하는 그리드저장용기를 포함할 수 있다.Here, the quick freezing unit includes a freezing frame provided at a lower side of the frame and having a communication hole formed therein so that the inside communicates with the inside of the frame, an outer container disposed inside the freezing frame, and a center inside the outer container A freezing cup provided between the outer container and the freezing cup and provided between the outer container and the freezing cup, and an inner container having a space formed along the outer circumference of the freezing cup, and It may include a grid storage container that is disposed in the space of the inner container to receive and store a plurality of grids that are rapidly frozen.

또한 상기 액체량분석부, 상기 필터부 및 상기 그리드부와 연결되어 상기 액체량분석부에서 분석된 그리드 홀의 단백질 액체가 적정량으로 배치되었다고 판단하면, 상기 필터부를 수평이동시켜 상기 필터종이와 그리드가 멀어지도록 제어하고, 상기 그리드부를 하측으로 이동시켜 그리드를 상기 급속냉동부에 자동적으로 전달하도록 제어하는 제어부를 더 포함하는 것이 바람직하다.In addition, when it is determined that the protein liquid in the grid hole analyzed by the liquid amount analysis unit connected to the liquid amount analysis unit, the filter unit and the grid unit is disposed in an appropriate amount, the filter unit is horizontally moved to move the filter paper and the grid away. It is preferable to further include a control unit for controlling to be controlled and moving the grid unit downward to automatically transfer the grid to the rapid freezing unit.

한편 상기 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는 상기 프레임의 후측에 구비되고, 상기 프레임의 내부와 연통되어 상기 프레임 내부의 습도를 제어하는 습도조절장치를 더 포함하는 것이 바람직하다.Meanwhile, the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope is preferably provided at a rear side of the frame, and further includes a humidity control device that communicates with the inside of the frame to control the humidity inside the frame.

여기서 상기 습도조절장치는, 상기 프레임의 내부에 구비되는 습도센서와, 상기 프레임의 후측에 구비되며 물이 수용되는 가습프레임과, 상기 가습프레임의 일측에 구비되는 냉각핀과, 일측이 상기 가습프레임에 구비되고 상기 냉각핀을 따라 배열되며, 타측이 상기 프레임의 내부에 배치되는 습도조절종이와, 상기 냉각핀의 일측에 구비되고, 상기 습도센서의 습도측정값에 대응하여 회전하여 상기 냉각핀에 배치되는 습도조절종이의 물을 증발시켜 상기 프레임 내의 습도를 제어하는 냉각팬을 포함하는 것이 바람직하다.Here, the humidity control device includes a humidity sensor provided inside the frame, a humidifying frame provided at a rear side of the frame and receiving water, a cooling fin provided on one side of the humidifying frame, and one side of the humidifying frame A humidity control paper provided in and arranged along the cooling fins, the other side is provided on one side of the cooling fins, and rotated in response to the humidity measurement value of the humidity sensor to the cooling fins It is preferable to include a cooling fan for controlling the humidity in the frame by evaporating the water of the humidity control paper disposed.

본 발명에 따른 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는, 필터부가 이동하여 그리드 홀 내의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하고, 액체가 흡수되는 과정에서 레이저를 조사함으로써, 그리드 홀 내의 단백질 액체양에 따라 나타나는 레이저의 회절상의 조도를 실시간으로 분석하여 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치되었는지 판단할 수 있어 그리드 제작 효율이 향상될 수 있다.In the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope according to the present invention, the filter unit moves to selectively absorb the protein liquid in the grid hole, and by irradiating the laser in the process of absorbing the liquid, the laser appears according to the amount of protein liquid in the grid hole. By analyzing the roughness of the diffraction image in real time, it is possible to determine whether the protein liquid is disposed in an appropriate amount in the hole of the grid, so that the grid fabrication efficiency can be improved.

또한 제어부를 통하여 액체량분석부에서 분석된 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되었다고 판단하면, 그리드를 상기 급속냉동부에 자동적으로 전달하여 냉동시킴으로써, 일정두께의 얼음을 빠르고 정확하게 형성시킬 수 있어 고해상도의 이미지를 제공하는 그리드 샘플을 저비용으로 신속하게 얻을 수 있어 제작효율이 향상될 수 있다.In addition, if it is determined through the control unit that the protein liquid of the grid analyzed by the liquid amount analysis unit is disposed in an appropriate amount, the grid is automatically transferred to the quick freezing unit and frozen, so that ice of a certain thickness can be quickly and accurately formed. It is possible to quickly obtain a grid sample providing an image at low cost, thereby improving manufacturing efficiency.

도 1은 전자현미경용 그리드를 개략적으로 도시한 단면도,
도 2는 본 발명의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치를 개략적으로 도시한 사시도,
도 3은, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 측면도,
도 4는, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 그리드부를 분리하여 도시한 측면도,
도 5는, 도 4의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 트위저부를 도시한 사시도,
도 6는, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 필터부와 레이저부를 도시한 사시도,
도 7는, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 필터부의 일부를 도시한 사시도,
도 8는, 도 7의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 필터부를 일부에 대한 정면도,
도 9는, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 필터부와 레이저부의 구동상태를 도시한 측면도,
도 10는, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에서 레이저가 조사된 상태를 도시한 사시도,
도 11은, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 조도센서부의 측면도,
도 12는, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 급속냉동부를 도시한 사시도,
도 13은, 도 2의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 습도조절장치를 도시한 정면도,
도 14는, 본 발명의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치의 액체량분석부를 이용하여 그리드의 홀 내에 배치되는 단백질 액체양의 변화에 따라 나타나는 조도값의 변화를 실시간으로 분석하여 나타낸 실험그래프,
도 15는 도 14의 실험그래프의 1,2,3,4,5의 각 지점에서 그리드의 홀 내에 배치되는 단백질 액체의 양을 예측하여 나타낸 도면,
도 16 내지 도 18는, 도 14의 실험을 반복 실험하여 조도값을 실시간으로 분석하여 나타낸 실험그래프 및 그리드 샘플을 전자현미경을 이용하여 관찰한 관찰이미지,
도 19는 도 2에 도시한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치를 이용하여 제작된 그리드 샘플을 전자현미경을 이용하여 관찰한 관찰이미지이다.1 is a cross-sectional view schematically showing a grid for an electron microscope,
2 is a perspective view schematically showing an apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of the present invention;
3 is a side view of the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of FIG. 2;
Figure 4 is a side view showing a separate grid portion of the grid sample production apparatus for the electron microscope of Figure 2;
5 is a perspective view showing a tweezer part of the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of FIG. 4;
6 is a perspective view showing a filter unit and a laser unit of the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of Fig. 2;
7 is a perspective view showing a part of a filter part of the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of FIG. 2;
FIG. 8 is a front view of a part of a filter part of the grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope of FIG. 7;
9 is a side view showing a driving state of a filter unit and a laser unit of the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of Fig. 2;
10 is a perspective view showing a state in which a laser is irradiated in the grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope of FIG. 2;
11 is a side view of an illuminance sensor part of the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope of FIG. 2;
12 is a perspective view showing a quick freezing part of the grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope of FIG. 2;
13 is a front view showing a humidity control device of the grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope of FIG. 2;
14 is an experimental graph showing in real time analysis of changes in illuminance values appearing according to changes in the amount of protein liquid disposed in the holes of the grid using the liquid amount analysis unit of the grid sample preparation apparatus for an electron microscope of the present invention;
15 is a view showing predicting the amount of protein liquid disposed in the hole of the grid at each point 1,2, 3, 4, and 5 of the experimental graph of FIG. 14;
16 to 18 are observation images obtained by observing an experiment graph and a grid sample shown by analyzing the illuminance value in real time by repeating the experiment of FIG. 14 using an electron microscope,
FIG. 19 is an observation image obtained by observing a grid sample produced by using the grid sample production apparatus for an electron microscope shown in FIG. 2 using an electron microscope.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여, 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. Prior to this, terms or words used in the specification and claims should not be construed as being limited to their usual or dictionary meanings, and the inventors appropriately explain the concept of terms in order to explain their own invention in the best way. Based on the principle that it can be defined, it should be interpreted as a meaning and concept consistent with the technical idea of the present invention.

따라서 본 명세서에 기재된 실시 예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 실시예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들은 대체할 수 있는 균등한 변형 예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.Therefore, the embodiments described in the present specification and the configurations shown in the drawings are only the most preferred embodiments of the present invention, and do not represent all the technical ideas of the present invention, so at the time of application, they are equivalent to It should be understood that there may be variations.

본 발명의 일실시예에 따른 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치(10)는 전자현미경용 그리드(G)의 복수개의 홀(H) 내에 단백질 액체(P)를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플(1)을 제작하기 위한 것으로, 상기 전자현미경은 저온전자현미경인 것이 바람직하며, 단백질 액체(P)은 그리드(G)의 홀(H)에 마이크로 피펫을 이용하여 마이크로리터를 로딩하여 제공할 수 있다. 상기 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치(10)는, 프레임(100), 그리드부(200), 필터부(300), 레이저부(400), 스크린부(500), 액체량분석부(600), 급속냉동부(700), 습도조절장치(800), 제어부(900)를 포함할 수 있다.The apparatus 10 for producing a grid sample for an electron microscope according to an embodiment of the present invention comprises a grid sample 1 in which a protein liquid P is disposed in an appropriate amount in a plurality of holes H of an electron microscope grid G. For manufacturing, the electron microscope is preferably a low-temperature electron microscope, and the protein liquid P may be provided by loading microliters into the holes H of the grid G using a micropipette. The electron microscope grid sample manufacturing apparatus 10 includes a frame 100, a grid part 200, a filter part 300, a laser part 400, a screen part 500, a liquid amount analysis part 600, A quick freezing unit 700, a humidity control device 800, and a control unit 900 may be included.

상기 프레임(100)은 내부공간(101)이 형성된다. 또한 상기 프레임(100)의 전면(102)은 개폐가 가능하도록 구비된다. 즉 상기 프레임(100)의 전면(102)을 개방하여 상기 내부공간(101)에 그리드(G)를 배치시킬 수 있으며, 상기 프레임(100)의 전면(102)을 폐쇄하여 프레임(100)을 암실로 형성시킬 수 있다.The frame 100 has an inner space 101 formed therein. In addition, the front side 102 of the frame 100 is provided so as to be able to open and close. That is, the front side 102 of the frame 100 may be opened to place the grid G in the inner space 101, and the front side 102 of the frame 100 may be closed to close the frame 100 It can be formed with.

상기 그리드부(200)는 그리드(G)를 적정위치에 배치시키기 위한 것으로, 상기 프레임(100)의 상측에 수직하게 배치되어 상하이동가능하도록 구비된다. 상기 그리드부(200)는 하단에서 그리드(G)를 파지하여, 상하이동함으로써 그리드(G)를 적정위치에 배치시킬 수 있다. 이때 상기 그리드(G)는 플라즈마 클리닝 처리된 그리드(G)인 것이 바람직하며, 구리소재로, 대략 3(mm) 직경을 가지는 원판형인 것이 바람직하다. 또한 상기 그리드(G)는 내부는, 그물망 구조로 형성되며, 1-3(um)의 직경을 가지는 홀(H)이 규칙적으로 형성된 탄소소재의 막이 구비된다. 상기 그리드부(200)는 제 1실린더(210), 트위저고정부(220), 트위저어댑터(230), 트위저부(240)를 포함할 수 있다. The grid portion 200 is for arranging the grid G at an appropriate position, and is disposed vertically on the upper side of the frame 100 so as to move upwardly. The grid portion 200 may grasp the grid G at the lower end and move upward, thereby disposing the grid G at an appropriate position. At this time, the grid G is preferably a plasma-cleaned grid G, and is preferably a copper material and a disk shape having a diameter of approximately 3 (mm). In addition, the inside of the grid G is formed in a mesh structure, and a carbon material film in which holes H having a diameter of 1-3 (um) are regularly formed is provided. The grid part 200 may include a first cylinder 210, a tweezer fixing part 220, a tweezer adapter 230, and a tweezer part 240.

상기 제 1실린더(210)는 상기 그리드(G)를 상하이동시키기 위한 것으로, 상기 프레임(100)의 상부에 수직하게 구비된다. 즉, 상기 제 1실린더(210)는 신축에 의하여 상하방향으로 슬라이딩 이동할 수 있으며, 상기 제 1실린더(210)의 하단이 상기 프레임(100)의 상측에서 하측으로 이동하여 그리드(G)가 이동가능하다. 부연하면 상기 제 1실린더(210)는 대략 20(CM)정도 신장되는 것이 바람직하다. 상기 제 1실린더(210)의 구동을 위하여 솔레노이드밸브 및 에어컴프레서 등이 더 구비되어 상기 제 1실린더(210)가 일정 공압을 유지하도록 구성되는 것이 바람직하나, 이는 공지된 기술로서 자세한 설명은 생략한다. The first cylinder 210 is for vertically moving the grid G, and is provided perpendicularly to the upper portion of the frame 100. That is, the first cylinder 210 can be slid up and down due to the expansion and contraction, and the lower end of the first cylinder 210 moves from the upper side to the lower side of the frame 100 so that the grid G is movable. Do. In addition, it is preferable that the first cylinder 210 is elongated by approximately 20 (CM). It is preferable that a solenoid valve and an air compressor are further provided to drive the first cylinder 210 so that the first cylinder 210 is configured to maintain a constant pneumatic pressure, but this is a known technique and a detailed description thereof will be omitted. .

상기 트위저고정부(220)는 상기 그리드(G)를 파지하는 트위저(241)를 상기 제 1실린더(210)와 연결시키기 위한 것으로, 상기 제1실린더(210)의 하단에 구비된다. 상기 트위저고정부(220)는 일면에 자석(221)이 구비되며, 결합홈(222)이 형성되는 것이 바람직하다. 부연하면, 상기 트위저고정부(220)는 일면은 알루미늄 판으로 형성되며, 상기 알루미늄판의 내측으로 상기 자석(221)이 배치되는 것이 바람직하다. The tweezer fixing part 220 is for connecting the tweezer 241 holding the grid G to the first cylinder 210, and is provided at the lower end of the first cylinder 210. The tweezer fixing part 220 is provided with a magnet 221 on one surface, and it is preferable that the coupling groove 222 is formed. In addition, it is preferable that the tweezer fixing part 220 is formed of an aluminum plate on one side, and the magnet 221 is disposed inside the aluminum plate.

상기 트위저어댑터(230)는 일면에 철제판(231)이 구비되어 상기 트위저고정부(220)의 일면에 맞닿아 결합된다. 즉, 상기 트위저어댑터(230)는 일면에 구비되는 철제판(231)이 상기 트위저고정부(220)의 자석(221)에 의하여 상기 트위저고정부(220)에 결합될 수 있다. 상기 트위저어댑터(230)와 상기 트위저고정부(220)가 자석(221)에 의하여 결합됨으로써 간단하게 탈부착가능하다. 상기 트위저어댑터(230)는 하단에 트위저수용홈(232)이 형성된다. 상기 트위저수용홈(232)은 트위저(241)가 삽입되기 위한 것으로, 일측이 개방되도록 형성된다. 또한 상기 트위저어댑터(230)는, 일면에 돌출형성된 돌출부(233)가 더 구비된다.The tweezer adapter 230 is provided with an iron plate 231 on one surface thereof and is coupled to the one surface of the tweezer fixing portion 220. That is, the iron plate 231 provided on one surface of the tweezer adapter 230 may be coupled to the tweezer fixing part 220 by the magnet 221 of the tweezer fixing part 220. Since the tweezer adapter 230 and the tweezer fixing part 220 are coupled by a magnet 221, it is easily detachable. The tweezer adapter 230 has a tweezer receiving groove 232 formed at the lower end of the tweezer adapter 230. The tweezers receiving groove 232 is for inserting the tweezers 241, and is formed to open one side. In addition, the tweezer adapter 230 further includes a protrusion 233 protruding on one surface.

상기 돌출부(233)는 상기 결합홈(222)에 대응하도록 형성된다. 즉 상기 트위저어댑터(230)의 철제판(231)과 상기 트위저고정부(220)의 일면이 맞닿아 결합될 때 상기 결합홈(222)에 상기 돌출부(233)가 삽입배치되는 것이 바람직하다. 상기 결합홈(222)에 상기 돌출부(233)가 삽입배치됨으로써, 상기 트위저어댑터(230)가 상기 트위저고정부(220)에 결합된 후, 수직방향으로 이탈하는 것을 방지할 수 있다.The protrusion 233 is formed to correspond to the coupling groove 222. That is, when the iron plate 231 of the tweezer adapter 230 and one surface of the tweezer fixing part 220 are in contact with each other, the protrusion 233 is preferably inserted and disposed in the coupling groove 222. Since the protrusion 233 is inserted and disposed in the coupling groove 222, it is possible to prevent the tweezer adapter 230 from being separated from the tweezer fixing part 220 in the vertical direction after being coupled to the tweezer fixing part 220.

상기 트위저부(240)는 그리드(G)를 파지하기 위한 것으로, 일단이 상기 트위저어댑터(230)에 결합되고, 타단에 그리드(G)가 파지된다. 상기 트위저부(240)는 트위저(241)와 트위저홀더(242)를 포함할 수 있다. The tweezer part 240 is for gripping the grid G, one end is coupled to the tweezer adapter 230, and the grid G is gripped at the other end. The tweezer part 240 may include a tweezer 241 and a tweezer holder 242.

상기 트위저(241)는 그리드(G)를 파지하기 위한 것으로, 일단이 상기 트위저수용홈(232)에 삽입결합되며 타단이 서로 이격되도록 형성된다. 상기 트위저(241)는 탄성소재로 형성되는 것이 바람직하며, 타단의 이격된 사이간격이 좁아지고 넓어짐으로써 상기 그리드(G)를 파지하고 분리시킬 수 있다. 한편, 상기 트위저(241)의 일단은 상기 트위저수용홈(232)에 삽입되어, 나사(2321)에 의하여 고정될 수 있다. The tweezers 241 are for gripping the grid G, and one end is insertedly coupled to the tweezers receiving groove 232 and the other ends are formed to be spaced apart from each other. The tweezers 241 are preferably formed of an elastic material, and the grid G can be gripped and separated by narrowing and widening the spaced between the other ends. Meanwhile, one end of the tweezer 241 may be inserted into the tweezer receiving groove 232 and fixed by a screw 2321.

상기 트위저홀더(242)는 상기 트위저(241)가 그리드(G)를 파지한 상태를 유지시키기 위한 것으로, “ㄷ”자로 형성된다. 상기 트위저홀더(242)는 “ㄷ”자 형상의 개방된 측으로 상기 트위저(241)를 삽입시켜 상기 트위저(241)의 타단 사이의 간격이 좁아진 상태를 유지하도록 함으로써 그리드(G)를 파지한 상태를 유지시킬 수있다. 즉, 상기 트위저홀더(242)의 너비는 상기 트위저(241)가 그리드(G)를 파지한 상태의 너비와 대응하도록 형성되는 것이 바람직하며, 상기 트위저(241)의 타단에 그리드(G)를 파지시킨 후, 상기 트위저홀더(242)를 상기 트위저(241)에 외삽시킴으로써 상기 트위저(241)가 상기 그리드(G)를 파지한 상태를 유지할 수 있다. 상기 트위저홀더(242)는 “ㄷ”자로 형성됨으로써, 상기 트위저(241)를 그리드(G)를 파지한 상태에서 고정시킨 후 해제시키기에 용이하다.The tweezer holder 242 is for maintaining the state in which the tweezers 241 grip the grid G, and is formed in a “c” letter. The tweezer holder 242 holds the grid G by inserting the tweezer 241 into the open side of the "c" shape so that the gap between the other ends of the tweezer 241 is narrowed. Can be maintained That is, the width of the tweezer holder 242 is preferably formed to correspond to the width of the state in which the tweezer 241 grips the grid G, and grips the grid G at the other end of the tweezer 241 After that, by extrapolating the tweezer holder 242 to the tweezer 241, the tweezer 241 may maintain a state in which the grid G is held. Since the tweezer holder 242 is formed in a “c” shape, it is easy to release the tweezer 241 after fixing it while holding the grid G.

상기 제 2카메라(250)는 상기 그리드부(200)를 촬영하여 그리드(G)의 위치를 확인하기 위한 것으로, 상기 제 2카메라(250)는 상기 프레임(100)의 내부에 구비되며 상기 그리드부(200)에 파지되는 그리드(G)를 촬영한다. 부연하면 상기 제 2카메라(250)는 상기 프레임(100)의 전면(102) 내측에 구비되는 것이 바람직하며, 상기 전면(102)으로 상기 프레임(100)의 내부를 폐쇄시킨 후, 상기 제 2카메라(250)를 이용하여 그리드(G)를 촬영함으로써 그리드(G)의 위치를 실시간으로 파악가능하다.The second camera 250 photographs the grid part 200 to check the position of the grid G, and the second camera 250 is provided inside the frame 100 and the grid part The grid G held by 200 is photographed. In other words, the second camera 250 is preferably provided inside the front side 102 of the frame 100, and after closing the inside of the frame 100 with the front side 102, the second camera By photographing the grid G using 250, it is possible to grasp the position of the grid G in real time.

상기 필터부(300)는 그리드(G) 홀(H) 내의 단백질 액체(P)를 선택적으로 흡수하기 위한 것으로, 상기 프레임(100)의 내부일면에 이동가능가능하도록 구비된다. 즉 상기 필터부(300)는 상기 그리드부(200)의 일단에 파지되는 그리드(G)의 단백질 액체(P)를 흡수할 수 있다. 상기 필터부(300)는 제 2실린더(310), 이동프레임(320), 필터고정대(330), 필터자석체(340), 필터종이(350)를 포함 할 수 있다.The filter unit 300 is for selectively absorbing the protein liquid P in the grid G and the hole H, and is provided to be movable on one inner surface of the frame 100. That is, the filter unit 300 may absorb the protein liquid P of the grid G held at one end of the grid unit 200. The filter unit 300 may include a second cylinder 310, a moving frame 320, a filter holder 330, a filter magnet 340, and a filter paper 350.

상기 제 2실린더(310)는 상기 프레임(100)의 내부에서 신축에 의하여 수평방향으로 슬라이딩 이동한다. 즉, 상기 제 2실린더(310)는 신축에 의하여 수평방향으로 슬라이딩 이동하여 상기 프레임(100)의 내측면에서 중심부측으로 이동할 수 있으며, 상기 제 2실린더(310)는 대략 5(CM)정도 신장되는 것이 바람직하다. 상기 제 2실린더(310)의 구동을 위하여 솔레노이드밸브 및 에어컴프레서 등이 더 구비되어 상기 제 2실린더(310)의 일정 공압을 유지하도록 구성되는 것이 바람직하나, 이는 공지된 기술로서 자세한 설명은 생략한다. The second cylinder 310 slides in a horizontal direction by expansion and contraction within the frame 100. That is, the second cylinder 310 may slide in a horizontal direction due to expansion and contraction, and may move from the inner side of the frame 100 toward the center side, and the second cylinder 310 is extended by approximately 5 (CM). It is desirable. It is preferable that a solenoid valve and an air compressor are further provided to drive the second cylinder 310 to maintain a constant pneumatic pressure of the second cylinder 310, but this is a known technique and a detailed description thereof will be omitted. .

상기 이동프레임(320)은 상기 제 2실린더(310)에 결합되어 상기 제 2실린더(310)의 신축에 의하여 이동한다. The moving frame 320 is coupled to the second cylinder 310 and moves by the expansion and contraction of the second cylinder 310.

상기 필터고정대(330)는 상기 이동프레임(320)에 돌출구비되며 철제로 형성된다. 즉, 상기 필터고정대(330)는 상기 이동프레임(320)에 구비되어 상기 제 2실린더(310)의 신축에 의하여 이동할 수 있으며, 상기 프레임(100)의 내측면에서 중심측으로 이동가능하다. 상기 필터고정대(330)는 원통형상인 것이 바람직하며, 상기 이동프레임(320)에 회전가능하도록 구비될 수 있으며, 철제 소형 마이크로미터 헤드를 이용하여 제작되는 것이 바람직하다. The filter holder 330 is protruding from the moving frame 320 and is formed of iron. That is, the filter holder 330 is provided on the moving frame 320 and can be moved by the expansion and contraction of the second cylinder 310, and can be moved from the inner side of the frame 100 toward the center. The filter holder 330 is preferably in a cylindrical shape, and may be provided to be rotatable on the moving frame 320, and is preferably manufactured using a small iron micrometer head.

상기 필터자석체(340)는 자석으로 형성되어 상기 필터고정대(330)의 일면에 결합된다. 즉 상기 필터자석체(340)는 일면이 자석으로 형성되어, 상기 필터자석체(340)의 일면과 상기 필터고정대(330)가 결합될 수 있다. 부연하면 상기 필터자석체(340)의 타단은 구형의 손잡이(341)가 구비되어 파지하기 용이하도록 형성된다. The filter magnet body 340 is formed of a magnet and is coupled to one surface of the filter holder 330. That is, the filter magnet body 340 has one surface formed of a magnet, so that one surface of the filter magnet body 340 and the filter holder 330 may be coupled. In addition, the other end of the filter magnet body 340 is provided with a spherical handle 341 and is formed to facilitate gripping.

상기 필터종이(350)는 그리드(G) 홀(H) 내의 단백질 액체(P)를 흡수하기 위한 것으로, 원판형상으로 형성되는 것이 바람직하다. 또한 상기 필터종이(350)에는 그리드홀(351)이 형성되며, 대략 2(mm)정도의 직경을 가지도록 형성된다. 상기 필터종이(350)는 일면이 상기 필터자석체(340)에 접착되어 고정되며, 상기 필터자석체(340)에 의하여 필터고정대(330)에 배치될 수 있다. 상기 필터자석체(240)는 상기 필터종이(350)의 중앙에 접착되어 결합한다. 따라서 상기 그리드홀(351)은 상기 필터자석체(340)의 외측으로 형성되는 것이 바람직하다. 상기 필터종이(350)는 상기 필터고정대(330)와 상기 필터자석체(340) 사이에 구비되어 상기 제2실린더(310)의 이동에 의하여 그리드(G)측으로 이동되어, 일면이 그리드(G)와 맞닿아 그리드(G) 홀(H) 내의 단백질 액체(P)를 흡수할 수 있다. 부연하면 상기 필터종이(350)의 그리드홀(351)과 상기 그리드(G)가 맞닿는 것이 바람직하다. The filter paper 350 is for absorbing the protein liquid (P) in the grid (G) hole (H), and is preferably formed in a disk shape. In addition, a grid hole 351 is formed in the filter paper 350 and is formed to have a diameter of approximately 2 (mm). One surface of the filter paper 350 is adhered to and fixed to the filter magnet body 340, and may be disposed on the filter holder 330 by the filter magnet body 340. The filter magnet body 240 is bonded to and bonded to the center of the filter paper 350. Therefore, the grid hole 351 is preferably formed outside the filter magnet body 340. The filter paper 350 is provided between the filter holder 330 and the filter magnet 340 and is moved toward the grid G by the movement of the second cylinder 310, so that one surface thereof is the grid G In contact with the grid (G), the protein liquid (P) in the hole (H) can be absorbed. In addition, it is preferable that the grid hole 351 of the filter paper 350 and the grid G come into contact with each other.

상기 레이저부(400)는 그리드(G)에 대한 회절상을 얻기 위하여 그리드(G)에 레이저(L)를 조사하기 위한 것으로, 상기 필터부(300)의 일측에 구비된다. 상기 레이저부(400)는 상기 이동프레임(320)에 구비되어 상기 제 2실린더(310)에 의하여 상기 필터부(300)와 함께 이동하는 것이 바람직하며, 상기 레이저부(400)의 레이저(L)는 상기 그리드홀(351)을 관통한 후, 상기 그리드부(200)의 일단에 파지된 그리드(G)에 조사된다. 부연하면 상기 레이저부(400)가 조사하는 레이저(L)의 경로에 상기 필터종이(350)의 상기 그리드홀(351)을 배치시켜, 상기 레이저부(400)의 레이저(L)는 상기 그리드홀(351)을 관통하여 그리드(G)에 레이저(R)를 조사할 수 있다. 따라서 상기 레이저부(400)는 그리드(G)와 상기 필터종이(350)가 맞닿아 그리드(G) 홀(H) 내의 액체(P)가 상기 필터종이(350)에 선택적으로 흡수되고 있는 순간에도 상기 그리드(G)에 레이저(L)를 조사할 수 있다. The laser part 400 is for irradiating the laser L to the grid G to obtain a diffraction image for the grid G, and is provided on one side of the filter part 300. The laser unit 400 is provided in the moving frame 320 and is preferably moved together with the filter unit 300 by the second cylinder 310, and the laser (L) of the laser unit 400 After passing through the grid hole 351, is irradiated to the grid G gripped at one end of the grid part 200. In other words, by arranging the grid hole 351 of the filter paper 350 in the path of the laser L irradiated by the laser unit 400, the laser L of the laser unit 400 is the grid hole The laser R can be irradiated to the grid G through 351. Therefore, the laser unit 400 is even at the moment when the grid (G) and the filter paper (350) are in contact with the liquid (P) in the grid (G) hole (H) is selectively absorbed by the filter paper (350). A laser (L) may be irradiated to the grid (G).

한편, 상기 필터종이(350)는 필터고정대(330)에 배치된 상태에서 상기 필터자석체(340)를 이동시킴으로서, 상기 레이저부(400)가 조사하는 레이저(L)의 중심이 지나가는 경로에 상기 필터종이(350)의 상기 그리드홀(351)이 배치되도록 미세조정할 수 있다. 또한 또한 상기 제 2실린더(310)를 통하여 상기 필터종이(350)와 그리드(G)가 맞닿도록 배치시킨 후, 상기 필터고정대(330)를 회전시킴으로써 상기 그리드홀(351)에 그리드(G)의 중심이 오도록 미세조정 할 수 있다. Meanwhile, the filter paper 350 moves the filter magnet body 340 in a state disposed on the filter holder 330, so that the center of the laser L irradiated by the laser unit 400 passes through the path. Fine adjustment may be made so that the grid hole 351 of the filter paper 350 is disposed. In addition, after placing the filter paper 350 and the grid G through the second cylinder 310 so as to come into contact with each other, the filter holder 330 is rotated to form the grid G in the grid hole 351. It can be fine-tuned so that it is centered.

상기 스크린부(500)는 상기 레이저부(400)에서 조사된 레이저(L)가 그리드(G)에 의하여 회절되어 나타나는 회절상을 확인하기 위한 것으로, 상기 프레임(100)의 내측면에 배치된다. 상기 스크린부(500)는 알루미늄판(510)과 스크린페이퍼(520)를 포함할 수 있다. The screen unit 500 is for confirming a diffraction image that appears when the laser L irradiated by the laser unit 400 is diffracted by the grid G, and is disposed on the inner side of the frame 100. The screen unit 500 may include an aluminum plate 510 and a screen paper 520.

상기 알루미늄판(510)은 상기 레이저부(400)와 마주보는 상기 프레임(100)의 내측면에 구비된다. The aluminum plate 510 is provided on an inner surface of the frame 100 facing the laser unit 400.

상기 스크린페이퍼(520)는 상기 알루미늄판(510)의 일면에 구비되며, 상기 스크린페이퍼(520)에는 상기 레이저부(400)에서 조사된 레이저(L)가 그리드(G)에 의하여 회절되어 회절상이 나타날 수 있다. 부연하면 상기 회절상은, 상기 레이저( L)가 조사된 방향과 일직선 상인 중앙부에 그리드(G)를 통과한 가장 진한 빛이 나타나고, 그리드(G)의 그물망을 지나며 회절하여 나타나는 빛은 상기 중앙부에 나타난 가장 진한 빛에서 “X”자 혹은 “+”자 형태로 연결되어 나타난다. 또한 레이저(L)가 그리드(G)의 홀(H)을 지나며 회절하는 빛은 일정한 간격을 유지하며 격자배열의 회절점(D)으로 나타나게 된다.The screen paper 520 is provided on one surface of the aluminum plate 510, and in the screen paper 520, the laser L irradiated by the laser unit 400 is diffracted by a grid G, so that a diffraction image is obtained. Can appear. In addition, in the diffraction image, the darkest light passing through the grid G appears in the center, which is in line with the direction in which the laser L was irradiated, and the light diffracted while passing through the mesh of the grid G appears in the center. In the darkest light, it appears connected in the form of an "X" or "+". In addition, the light diffracted by the laser (L) passing through the hole (H) of the grid (G) maintains a constant interval and appears as a diffraction point (D) of the grid arrangement.

상기 액체량분석부(600)는 상기 스크린부(500)에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드(G) 홀(H)의 단백질 액체(P)가 적정량으로 배치되는지를 판단하기 위한 것으로, 상기 액체량분석부(600)는 조도센서부(610), 데이터저장부(620), 액체량판단부(630), 제 1카메라(640), 영상부(650)를 포함할 수 있다.The liquid amount analysis unit 600 is for determining whether the protein liquid P in the grid (G) hole (H) is disposed in an appropriate amount by analyzing the diffraction illuminance appearing on the screen unit 500, and the liquid The amount analysis unit 600 may include an illuminance sensor unit 610, a data storage unit 620, a liquid amount determination unit 630, a first camera 640, and an image unit 650.

상기 조도센서부(610)는 상기 스크린부(500)에 구비되어 상기 스크린부(500)에 나타나는 회절상에 대한 조도를 측정한다. 상기 조도센서부(610)는 조도센서(611), 센서이동체(612)를 포함할 수 있다.The illuminance sensor unit 610 is provided in the screen unit 500 to measure the illuminance of the diffraction image appearing on the screen unit 500. The illuminance sensor unit 610 may include an illuminance sensor 611 and a sensor moving body 612.

상기 조도센서(611)는 상기 스크린부(500)에 구비되어 상기 스크린부(500)에 나타나는 회절상에 대한 조도를 측정할 수 있다. 즉 상기 조도센서(611)는 상기 스크린부(500)의 일측면에 구비되며, 일면에 자성체가 구비된다. 상기 조도센서(611)는 상기 스크린부(500)에서 회절상이 나타나는 위치에 배치되어 회절상의 조도를 측정가능하다. 부연하면 상기 조도센서(611)를 이동시켜 레이저(L)가 그리드(G)의 홀(H)을 지나며 회절하는 빛으로 인하여 나타나는 회절점(D)에 상기 조도센서(611)의 중심이 오도록 배치시킬 수 있으며, 상기 조도센서(611)는 상기 필터종이(350)에 의하여 그리드(G) 홀(H)의 액체(P)의 양이 변화하며 나타나는 회절점(D)에 대한 조도를 실시간으로 검출가능하다.The illuminance sensor 611 may be provided in the screen unit 500 to measure the illuminance of a diffraction image appearing on the screen unit 500. That is, the illuminance sensor 611 is provided on one side of the screen unit 500, and a magnetic material is provided on one side. The illuminance sensor 611 is disposed at a position where the diffraction image appears in the screen unit 500 to measure the illuminance of the diffraction image. In addition, by moving the illuminance sensor 611, the laser (L) passes through the hole (H) of the grid (G) and is arranged so that the center of the illuminance sensor 611 is at the diffraction point (D) appearing due to the diffracted light. The illuminance sensor 611 detects in real time the illuminance of the diffraction point (D) that appears when the amount of liquid (P) in the grid (G) hole (H) is changed by the filter paper (350). It is possible.

상기 센서이동체(612)는 상기 조도센서(611)를 이동시키기 위한 것으로, 상기 스크린부(500)의 타면에 구비되며, 상기 조도센서(611)의 자성체에 대응하는 자석으로 형성된다. 부연하면 상기 프레임(100)의 타측은 일부 개방되어, 상기 센서이동체(612)가 상기 알루미늄판(510)의 타면에 구비될 수 있으며, 상기 프레임(100)의 외측에서 상기 센서이동체(612)를 이동시킬 수 있다. 상기 센서이동체(612)를 이동시킴으로써, 상기 센서이동체(612)와 결합되어 있는 자성체가 움직여 상기 조도센서(611)의 위치를 제어할 수 있다.The sensor moving body 612 is for moving the illuminance sensor 611, is provided on the other surface of the screen unit 500, and is formed of a magnet corresponding to the magnetic body of the illuminance sensor 611. In addition, the other side of the frame 100 is partially opened, and the sensor moving body 612 may be provided on the other surface of the aluminum plate 510, and the sensor moving body 612 is placed outside the frame 100. Can be moved. By moving the sensor moving body 612, the magnetic body coupled with the sensor moving body 612 moves to control the position of the illuminance sensor 611.

상기 데이터저장부(620)는 상기 조도센서부(610)와 연결되어 상기 조도센서부(610)에서 측정된 회절상의 조도값을 전달받아 저장한다. 부연하면 상기 데이터저장부(620)는 상기 조도센서(611)에서 측정된 회절상에 대한 조도값을 실시간으로 저장하며, 조도값에 대한 데이터를 그래프로 출력할 수 있다.The data storage unit 620 is connected to the illuminance sensor unit 610 to receive and store the diffractive illuminance value measured by the illuminance sensor unit 610. In other words, the data storage unit 620 stores the illuminance value for the diffraction image measured by the illuminance sensor 611 in real time, and may output data on the illuminance value as a graph.

상기 액체량판단부(630)는 그리드(G)에 배치된 단백질 액체(P)가 적정량으로 배치되는지를 판단하기 위한 것으로, 상기 데이터저장부(620)에 저장된 조도값을 실시간으로 분석하여, 기설정된 조도값과 비교함으로써 그리드(G)에 배치된 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단할 수 있다. 즉 상기 액체량판단부(630)는 그리드(G) 홀(H)의 단백질 액체(P)의 양이 상기 필터종이(350)에 의하여 변화하며 나타나는 조도값의 변화를 실시간으로 분석하여, 기설정된 조도값에 도달하는 지를 판단할 수 있으며, 기설정된 조도값에 도달하면 그리드(G)의 홀(H)에 단백질 액체(P)가 적정량으로 배치되었다고 판단할 수 있다. 상기 액체량판단부(630)에서 그리드(G)에 배치된 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단함으로써, 실시간으로 액체량을 판단할 수 있어 그리드 샘플(1)을 제작하는 효율이 증대될 수 있다.The liquid amount determination unit 630 is for determining whether the protein liquid P disposed on the grid G is disposed in an appropriate amount, and by analyzing the illuminance value stored in the data storage unit 620 in real time, By comparing with the set illuminance value, it can be determined whether the protein liquid disposed on the grid G is disposed in an appropriate amount. That is, the liquid amount determination unit 630 analyzes in real time the change in the illuminance value that appears when the amount of protein liquid P in the grid (G) hole (H) is changed by the filter paper 350, and It can be determined whether the illuminance value is reached, and when the predetermined illuminance value is reached, it can be determined that the protein liquid P is disposed in an appropriate amount in the hole H of the grid G. The liquid amount determination unit 630 determines whether the protein liquid disposed on the grid G is disposed in an appropriate amount, so that the amount of liquid can be determined in real time, thereby increasing the efficiency of producing the grid sample 1. .

한편 상기 제 1카메라(640)는 상기 스크린부(500)에 나타나는 회절상을 촬영하기 위한 것으로, 상기 프레임부(100)의 내측면에 구비된다. 즉 상기 제 1카메라(640)는 상기 제 1카메라(640)의 전방에 배치된 상기 스크린부(500)에 나타나는 회절상을 촬영하여 회절상을 실시간으로 확인가능하다.Meanwhile, the first camera 640 is for photographing a diffraction image appearing on the screen unit 500 and is provided on the inner side of the frame unit 100. That is, the first camera 640 photographs a diffraction image appearing on the screen unit 500 disposed in front of the first camera 640 to check the diffraction image in real time.

상기 영상부(650)는 상기 제 1카메라(640)와 연결되어 상기 제 1카메라(640)를 통하여 촬영된 회절상을 디스플레이한다. 또한 상기 영상부(650)는 상기 데이터저장부(620)와 연결되어, 상기 데이터저장부(620)에 저장된 상기 조도센서(611)에서 측정된 회절상에 대한 조도값을 실시간으로 디스플레이할 수 있으며, 조도값에 대한 데이터를 그래프로 출력하여 영상으로 나타낼 수 있다. The imaging unit 650 is connected to the first camera 640 to display a diffraction image photographed through the first camera 640. In addition, the image unit 650 may be connected to the data storage unit 620 to display an illuminance value for a diffraction image measured by the illuminance sensor 611 stored in the data storage unit 620 in real time, Data about the illuminance value can be output as a graph and displayed as an image.

상기 급속냉동부(700)는 상기 액체량판단부(630)에서 그리드(G)의 홀(H) 내에 단백질 액체(P)가 적정량이 배치되었다고 판단하면, 그리드(G)를 급속냉동하여 그리드 샘플(1)을 제작하기 위한 것으로, 상기 프레임(100)의 하측에 구비된다. 상기 급속냉동부(700)는 내부가 상기 프레임(100)의 내부와 연통되도록 연통홀(701)이 형성되고, 상기 그리드부(200)로부터 그리드(G)를 전달받아 급속냉동시킬 수 있다. 상기 급속냉동부(700)는 냉동프레임(710), 외측용기(720), 냉동컵(730), 내측용기(740)와, 그리드저장용기(750)를 포함할 수 있다.When the rapid freezing unit 700 determines that an appropriate amount of protein liquid P is disposed in the hole H of the grid G in the liquid amount determination unit 630, the grid G is rapidly frozen to obtain a grid sample. It is for manufacturing (1), and is provided under the frame 100. A communication hole 701 is formed so that the inside of the quick freezing unit 700 communicates with the inside of the frame 100, and a grid G is received from the grid unit 200 to allow rapid freezing. The quick freezing unit 700 may include a freezing frame 710, an outer container 720, a freezing cup 730, an inner container 740, and a grid storage container 750.

상기 냉동프레임(710)은 상기 프레임(100)의 하측에 구비되어 내부가 상기 프레임(100)의 내부와 연통되도록 연통홀(701)이 형성된다. 즉, 상기 연통홀(701)을 통하여 상기 프레임(100)에 배치되어있던 그리드(G)를 전달받을 수 있다. The freezing frame 710 is provided under the frame 100 and a communication hole 701 is formed so that the inside communicates with the inside of the frame 100. That is, the grid G disposed on the frame 100 may be transmitted through the communication hole 701.

상기 외측용기(720)는 상기 냉동프레임(710)의 내부에 배치된다. 상기 외측용기(720)는 원통형상으로 형성되어, 내부에 공간이 형성되며 상기 외측용기(720)의 내부에는 질소가 수용되어 있는 것이 바람직하다.The outer container 720 is disposed inside the freezing frame 710. It is preferable that the outer container 720 is formed in a cylindrical shape, so that a space is formed therein, and nitrogen is accommodated in the outer container 720.

상기 냉동컵(730)은 그리드(G)를 전달받아 급속냉동시키기 위한 것으로, 상기 외측용기(720)의 내측 중앙에 구비되고, 내부에 액체에탄이 수용된다. 즉, 상기 냉동컵(730)의 내부에 수용된 액체에탄으로 그리드(G)를 전달받아 그리드(G)를 급속냉동시킬 수 있다. 상기 냉동컵(730)은 상기 액체량판단부(630)에서 그리드(G) 홀(H)내의 단백질 액체(P)가 적정량으로 배치되었다고 판단된 그리드(G)를 전달받아 급속냉동시킴으로써 비트러스 아이스(Vitrous ice)가 적절하게 형성되어 고해상도의 이미지를 제공하는 그리드 샘플(1)을 제작가능하다. 한편 그리드(G)는 상기 제 1실린더(210)가 더 신장함으로써 상기 트위저(241)에 파지된 상태에서 연통홀(701)을 통과하여 상기 냉동컵(730)에 전달 될 수 있다.The freezing cup 730 is for quick freezing by receiving the grid G, and is provided at the inner center of the outer container 720, and liquid ethane is accommodated therein. That is, the grid G may be rapidly frozen by receiving the grid G through liquid ethane contained in the freezing cup 730. The freezing cup 730 receives the grid G determined that the protein liquid P in the grid G hole H is disposed in an appropriate amount from the liquid amount determination unit 630 and rapidly freezes vitreous ice. (Vitrous ice) is formed appropriately so that it is possible to produce a grid sample 1 that provides a high-resolution image. Meanwhile, the grid G may be transmitted to the freezing cup 730 by passing through the communication hole 701 while being held by the tweezer 241 by further extending the first cylinder 210.

상기 내측용기(740)는, 상기 외측용기(720)와 상기 냉동컵(730) 사이에 구비되며, 상기 냉동컵(730)의 외측둘레를 따라 공간이 형성된다. 상기 내측용기(740)는 경성 우레탄으로 제작되는 것이 바람직하다.The inner container 740 is provided between the outer container 720 and the freezing cup 730, and a space is formed along the outer circumference of the freezing cup 730. It is preferable that the inner container 740 is made of hard urethane.

상기 그리드저장용기(750)는 상기 냉동컵(730)으로부터 급속냉동된 복수개의 그리드 샘플(1)을 전달받아 저장한다. 상기 그리드저장용기(750)는 상기 내측용기(740)의 공간에 배치되며 원통형상으로 형성된다. 상기 그리드 저장용기(750)는 하나 이상이 구비되는 것이 바람직하며, 복수개의 그리드저장용기(750)의 높이는 각각 상이하도록 형성되는 것이 바람직하다. 부연하면 그리드 샘플(1)을 상기 그리드저장용기(750)에 수용시키기 위하여 상기 트위저어댑터(230)를 상기 트위저고정부(220)로부터 분리시킨 후, 상기 트위저(241)에 외삽된 상기 트위저홀더(242)를 분리시킨 후 그리드 샘플(1)을 상기 그리드저장용기(750)에 배치시킬 수 있다.The grid storage container 750 receives and stores a plurality of quick-frozen grid samples 1 from the freezing cup 730. The grid storage container 750 is disposed in the space of the inner container 740 and has a cylindrical shape. It is preferable that at least one of the grid storage containers 750 is provided, and the height of the plurality of grid storage containers 750 is preferably formed to be different from each other. In other words, after separating the tweezer adapter 230 from the tweezer fixing part 220 to accommodate the grid sample 1 in the grid storage container 750, the tweezer holder extrapolated to the tweezer 241 ( After separating the 242, the grid sample 1 may be placed in the grid storage container 750.

한편 상기 냉동프레임(710)의 하면은 슬라이딩 이동하도록 구비되어, 상기 냉동프레임(710)에 구비된 외측용기(720)가 하면의 슬라이딩 이동에 의하여 이동가능하며, 이를 통하여 상기 그리드저장용기(750)에 구비된 그리드(G)를 외부로 꺼내기에 용이하다. 또한 상기 냉동프레임(710)의 내부에는 조명이 구비되어, 상기 트위저(241)로부터 그리드 샘플(1)을 분리시키는 경우에 시야를 확보할 수 있다.Meanwhile, the lower surface of the freezing frame 710 is provided to slide, so that the outer container 720 provided in the freezing frame 710 is movable by the sliding movement of the lower surface, through which the grid storage container 750 It is easy to take out the grid G provided on the outside. In addition, the inside of the freezing frame 710 is provided with lighting, so that a view can be secured when the grid sample 1 is separated from the tweezer 241.

상기 제어부(900)는 상기 액체량분석부(600), 상기 필터부(300) 및 상기 그리드부(200)와 연결되어 상기 액체량분석부(600)에서 분석된 그리드(G) 홀(H)의 단백질 액체(P)가 적정량으로 배치되었다고 판단하면, 상기 필터부(300)를 수평이동시켜 상기 필터종이(350)와 그리드(G)가 멀어지도록 제어하고, 상기 그리드부(200)를 하측으로 이동시켜 그리드(G)를 상기 급속냉동부(700)에 자동적으로 전달하도록 제어한다. 즉, 상기 제어부(900)는 상기 그리드부(200) 및 상기 필터부(200)의 이동을 제어할 수 있으며, 상기 액체량분석부(600)와 연결되어, 상기 액체량판단부(630)에서 그리드(G) 홀(H)내의 단백질 액체가 적정량으로 배치되었다고 판단하는 신호를 전달받아, 상기 필터부(200)의 제 2실린더(310)를 자동적으로 구동시킴으로써 상기 필터종이(350)와 그리드(G)가 멀어지도록 제어하고, 상기 필터종이(350)와 그리드(G)가 멀어지도록 이동된 후엔, 그리드부(200)의 상기 제 1실린더(210)가 자동적으로 신장하여, 그리드(G)를 상기 냉동컵(730) 내부로 전달하도록 제어될 수 있다. 따라서, 그리드(G)를 신속하게 급속냉동시켜 그리드 샘플(1)이 제작효율이 증대될 수 있다.The control unit 900 is connected to the liquid amount analysis unit 600, the filter unit 300, and the grid unit 200, and the grid (G) hole (H) analyzed by the liquid amount analysis unit 600 When it is determined that the protein liquid (P) of is disposed in an appropriate amount, the filter unit 300 is horizontally moved to control the filter paper 350 and the grid G to move away, and the grid unit 200 is moved downward. By moving the grid (G) is controlled to automatically transfer to the rapid freezing unit (700). That is, the control unit 900 may control the movement of the grid unit 200 and the filter unit 200, is connected to the liquid amount analysis unit 600, and the liquid amount determination unit 630 By receiving a signal determining that the protein liquid in the grid (G) hole (H) is disposed in an appropriate amount, and automatically driving the second cylinder 310 of the filter unit 200, the filter paper 350 and the grid ( G) is controlled to move away, and after the filter paper 350 and the grid G are moved to move away, the first cylinder 210 of the grid unit 200 automatically extends, thereby increasing the grid G. It may be controlled to be delivered to the inside of the freezing cup 730. Accordingly, the grid sample 1 may be rapidly cooled to increase the manufacturing efficiency of the grid sample 1.

상기 습도조절장치(800)는 상기 프레임(100) 내부의 습도를 제어하기 위한 것으로, 상기 프레임(100)의 후측에 구비된다. 상기 습도조절장치(800)는, 습도센서(810), 가습프레임(820), 냉각핀(830), 습도조절종이(840), 냉각팬(850)를 포함할 수 있다.The humidity control device 800 is for controlling the humidity inside the frame 100 and is provided on the rear side of the frame 100. The humidity control device 800 may include a humidity sensor 810, a humidification frame 820, a cooling fin 830, a humidity control paper 840, and a cooling fan 850.

상기 습도센서(810)는 상기 프레임(100)의 내부에 구비되어 상기 프레임(100) 내부의 습도를 측정할 수 있다.The humidity sensor 810 may be provided inside the frame 100 to measure the humidity inside the frame 100.

상기 가습프레임(820)는 상기 프레임(100)의 후측에 구비되며 물이 수용된다. The humidification frame 820 is provided on the rear side of the frame 100 and accommodates water.

상기 냉각핀(830)은 상기 가습프레임(820)의 일측에 구비된다. 즉, 상기 냉각핀(830)는 일부가 상기 가습프레임(820)의 물에 잠겨지도록 배치되는 것이 바람직하다.The cooling fins 830 are provided on one side of the humidification frame 820. That is, it is preferable that the cooling fins 830 are partially disposed so as to be submerged in the water of the humidification frame 820.

상기 습도조절종이(840)는 일측이 상기 가습프레임(820)의 물 내에 구비되고 상기 냉각핀(830)을 따라 배열되며, 타측이 상기 프레임(100)의 내부에 배치된다. 상기 습도조절종이(840)는 물을 잘 흡수하지만 쉽게 끊어지지 않는 재질의 종이 인 것으로, 상기 냉각핀(830)을 따라 지그재그로 배열될 수 있다. 상기 습도조절종이(840)는 상기 가습프레임(820)에 수용된 물을 흡수하여 상기 프레임(100)의 습도를 조절가능하다.One side of the humidity control paper 840 is provided in the water of the humidification frame 820 and is arranged along the cooling fins 830, and the other side is disposed inside the frame 100. The humidity control paper 840 is made of a material that absorbs water well but does not break easily, and may be arranged in zigzag along the cooling fins 830. The humidity control paper 840 absorbs water contained in the humidification frame 820 to adjust the humidity of the frame 100.

상기 냉각팬(850)은 상기 냉각핀(830)의 일측에 구비되어 회전함으로써, 상기 프레임(100)의 습도를 조절한다. 상기 냉각팬(850)은 상기 습도센서(810)의 습도측정값에 대응하여 회전하며, 회전함으로써 상기 냉각핀(830)에 배치되는 습도조절종이(840)의 물을 증발시켜 상기 프레임(100) 내의 습도를 제어할 수 있다.부연하면 상기 냉각팬(850)은 회전하여 상기 프레임(100) 내의 습도가 90%선으로 유지되도록 조절할 수 있다. The cooling fan 850 is provided on one side of the cooling fin 830 and rotates to adjust the humidity of the frame 100. The cooling fan 850 rotates in response to the humidity measurement value of the humidity sensor 810 and rotates to evaporate water from the humidity control paper 840 disposed on the cooling fin 830 to evaporate the frame 100. In addition, the humidity in the frame 100 can be controlled so that the humidity in the frame 100 is maintained at a level of 90% by rotating the cooling fan 850.

한편, 본 발명의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치(10)는 상기 프레임(10)의 온도 및 습도를 표시하여 나타내는 계기판(920)이 더 구비될 수 있으며, 상기 제 1실린더(210), 상기 제 2실린더(310), 상기 조도센서(611)등의 구동을 제어하기 위한 스위치들(910)이 구비될 수 있을 것이다. 이는 공지된 기술로서 자세한 설명은생략하도록 한다. Meanwhile, the apparatus 10 for producing a grid sample for an electron microscope of the present invention may further include an instrument panel 920 that displays and displays the temperature and humidity of the frame 10, and the first cylinder 210 and the first cylinder 210 Two cylinders 310 and switches 910 for controlling driving of the illuminance sensor 611 may be provided. This is a known technique and a detailed description thereof will be omitted.

한편 도 14는, 본 발명의 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치(10)의 액체량분석부(600)를 이용하여, 그리드(G)의 홀(H) 내에 배치되는 단백질 액체(P)양의 변화에 따라 나타나는 조도값의 변화를 실시간으로 분석하여 나타낸 실험그래프이며, 도 15는 도 14의 실험그래프의 1,2,3,4,5의 각 지점에서 그리드(G)의 홀(H) 내에 배치되는 단백질 액체(P)의 양을 예측하여 나타낸 도면이다. Meanwhile, FIG. 14 shows a change in the amount of protein liquid P disposed in the hole H of the grid G using the liquid amount analysis unit 600 of the grid sample preparation device 10 for an electron microscope of the present invention. It is an experiment graph showing the change of the illuminance value that appears according to the real-time analysis, and FIG. 15 is an arrangement in the hole (H) of the grid (G) at each point 1, 2, 3, 4, 5 of the experiment graph of FIG. 14 It is a figure which predicted and showed the amount of the protein liquid P to become.

도 14 및 도 15의 (1)로 표시된 부분은, 그리드(G)의 홀(H) 내에 단백질 액체(P) 시료를 로딩한 직후 상태를 나타내며, (2)로 표시된 부분은, 상기 필터종이(350)에 의해 그리드(G)의 홀(H)에 있는 단백질 액체(P) 시료가 흡수되면서, 그리드(G)의 홀(H)들의 표면장력에 의하여 단백질 액체(P)가 중심부가 볼록한 형태로 존재하는 상태를 나타낸다. 이때 조도값은 최저로 나타난다. 또한 (3) 및 (4)로 표시된 부분은, 중심부가 볼록한 상태에서 그리드(G)의 홀(H) 내에 맺혀있던 단백질 액체(P)가 상기 필터종이(350)에 의해 더 흡수되어서 편편해진 후, 오목해지는 상태를 나타낸다. 이때 조도값은 지속적으로 증가하는 것을 확인할 수 있다. 마지막으로 (5)로 표시된 부분은, 그리드(G)의 홀(H) 내에 흡수될 수 있는 단백질 액체(P)가 더 이상 남아있지 않은 상태를 나타낸다.The portion indicated by (1) in FIGS. 14 and 15 represents the state immediately after loading the protein liquid (P) sample into the hole (H) of the grid (G), and the portion indicated by (2) is the filter paper ( 350) absorbs the protein liquid (P) sample in the hole (H) of the grid (G), and the protein liquid (P) is convex at the center by the surface tension of the holes (H) of the grid (G). It represents an existing state. At this time, the illuminance value appears at the lowest. In addition, the portions marked with (3) and (4) are, after the protein liquid (P), which was formed in the hole (H) of the grid (G), is further absorbed by the filter paper (350) while the center is convex. , Indicates a concave state. At this time, it can be seen that the illuminance value continuously increases. Finally, the portion marked with (5) represents a state in which the protein liquid P that can be absorbed in the hole H of the grid G no longer remains.

상기 도 14 및 도 15의 실험을 통하여 조도값 측정을 분석한 결과, (3) 및 (4)로 표시된 상태에서 그리드(G)의 홀(H) 내에 적정한 양의 단백질 액체(P)가 배치되며, 급속냉동시킬 경우 비트러스 아이스가 형성되어 고해상도의 이미지를 제공하는 그리드 샘플(1)이 제작가능하다는 확인할 수 있다. As a result of analyzing the illuminance value measurement through the experiments of FIGS. 14 and 15, an appropriate amount of protein liquid P is disposed in the hole H of the grid G in the states indicated by (3) and (4). In the case of rapid freezing, it can be confirmed that vitrus ice is formed to produce a grid sample 1 providing a high-resolution image.

한편 도 16 내지 도 18는, 상기 도 14 및 도 15의 실험을 반복실험한 것으로, 그리드(G)의 홀(H) 내에 단백질 액체(P)양에 따라 나타나는 조도센서(611)의 조도값의 변화를 실시간으로 분석하여 나타낸 실험그래프 및 도 16 내지 도 18의 실험에서, 도 14 실험의 (3) 및 (4)로 표시된 상태에 해당하는 그리드 샘플(1)을 전자현미경을 이용하여 관찰한 관찰이미지이며, 도 19는 도 14 실험의 (3) 및 (4)로 표시된 상태에 해당하는 그리드 샘플(1)을 전자현미경을 이용하여 관찰한 관찰이미지이다.On the other hand, FIGS. 16 to 18 are repeated experiments of the experiments of FIGS. 14 and 15, showing the illuminance values of the illuminance sensor 611 appearing according to the amount of protein liquid P in the hole H of the grid G. In the experiment graph showing the change in real time analysis and the experiments of FIGS. 16 to 18, the grid sample 1 corresponding to the states indicated by (3) and (4) of the experiment of FIG. 14 was observed using an electron microscope. It is an image, and FIG. 19 is an observation image of the grid sample 1 corresponding to the states indicated by (3) and (4) in the experiment of FIG. 14 using an electron microscope.

도 16 내지 18의 실험파라미터는, 단백질 액체(P)는 목스알(MoxR; 0.5 mg/ml), 버퍼조성은 20(mM Tris pH 8.0), 150(mM NaCl), 단백질액체(P)를 그리드(G)에 로딩시킨 양은 3(마이크로미터), 그로우디스차지(glow-discharge)는 진공: 1(분), 플라즈마 처리:1(분)이며, 도 19의 실험 파라미터는 베타 갈락토시데이즈(Beta galactosidase; 0.4 mg/ml), 버퍼조성은 20(mM Tris pH 8.0), 50(mM NaCl), 단백질액체(P)를 그리드(G)에 로딩시킨 양은 3(마이크로미터), 그로우디스차지(glow-discharge)는 진공: 1(분), 플라즈마 처리:1(분)이다. 도 16 내지 도 19에 도시된 바와 같이, (3) 및 (4)의 상태에서 그리드 샘플(1)을 관찰한 결과 비트러스 아이스가 형성되어 전자현미경을 통하여 단백질 샘플이 명확하게 관찰되는 것을 확인할 수 있다. In the experimental parameters of FIGS. 16 to 18, the protein liquid (P) is MoxR (MoxR; 0.5 mg/ml), the buffer composition is 20 (mM Tris pH 8.0), 150 (mM NaCl), and the protein liquid (P) is grid The amount loaded in (G) was 3 (micrometer), the glow-discharge was vacuum: 1 (min), plasma treatment: 1 (min), and the experimental parameters of FIG. 19 were beta galactosidase ( Beta galactosidase; 0.4 mg/ml), the buffer composition is 20 (mM Tris pH 8.0), 50 (mM NaCl), the amount of protein liquid (P) loaded on the grid (G) is 3 (micrometer), and the growth charge ( glow-discharge) is vacuum: 1 (min), plasma treatment: 1 (min). As shown in FIGS. 16 to 19, as a result of observing the grid sample 1 in the states (3) and (4), vitreous ice was formed, so that the protein sample was clearly observed through an electron microscope. have.

본 발명에 따른 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치는, 필터부가 이동하여 그리드 홀 내의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하고, 액체가 흡수되는 과정에서 레이저를 조사함으로써, 그리드 홀 내의 단백질 액체양에 따라 나타나는 레이저의 회절상의 조도를 실시간으로 분석하여 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치되었는지 판단할 수 있어 그리드 제작 효율이 향상될 수 있다.In the apparatus for producing a grid sample for an electron microscope according to the present invention, the filter unit moves to selectively absorb the protein liquid in the grid hole, and by irradiating the laser in the process of absorbing the liquid, the laser appears according to the amount of protein liquid in the grid hole. By analyzing the roughness of the diffraction image in real time, it is possible to determine whether the protein liquid is disposed in an appropriate amount in the hole of the grid, so that the grid fabrication efficiency can be improved.

또한 제어부를 통하여 액체량분석부에서 분석된 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되었다고 판단하면, 그리드를 상기 급속냉동부에 자동적으로 전달하여 냉동시킴으로써, 일정두께의 얼음을 빠르고 정확하게 형성시킬 수 있어 고해상도의 이미지를 제공하는 그리드 샘플을 저비용으로 신속하게 얻을 수 있어 제작효율이 향상될 수 있다.In addition, if it is determined through the control unit that the protein liquid of the grid analyzed by the liquid amount analysis unit is disposed in an appropriate amount, the grid is automatically transferred to the quick freezing unit and frozen, so that ice of a certain thickness can be quickly and accurately formed. It is possible to quickly obtain a grid sample providing an image at low cost, thereby improving manufacturing efficiency.

본 발명은 도면에 도시된 실시예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 본 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 다른 실시예가 가능하다는 점을 이해할 것이다. 따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 특허청구범위의 기술적 사상에 의하여 정해져야 할 것이다. The present invention has been described with reference to the embodiments shown in the drawings, but these are merely exemplary, and those of ordinary skill in the art will appreciate that various modifications and equivalent other embodiments are possible therefrom. Therefore, the true technical protection scope of the present invention should be determined by the technical spirit of the appended claims.

10 : 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치
100 : 프레임 101 : 내부공간
102 : 전면 200 : 그리드부
210 : 제 1실린더 220 : 트위저고정부
221 : 자석 222 : 결합홈
230 : 트위저어댑터 231 : 철제판
232 : 트위저수용홈 2321 : 나사
233 : 돌출부 240 : 트위저부
241 : 트위저 242 : 트위저홀더
250 : 제 2카메라 300 : 필터부
310 : 제 2실린더 320 : 이동프레임
330 : 필터고정대 340 : 필터자석체
350 : 필터종이 351 : 그리드홀
400 : 레이저부 500 : 스크린부
510 : 알루미늄판 520 : 스크린페이퍼
600 : 액체량분석부 610 : 조도센서부
611 : 조도센서 612 : 센서이동체
620 : 데이터저장부 630 : 액체량판단부
640 : 제 1카메라 650 : 영상부
700 : 급속냉동부 701 : 연통홀
710 : 냉동프레임 720 : 외측용기
730 : 냉동컵 740 : 내측용기
750 : 그리드저장용기 800 : 습도조절장치
810 : 습도센서 820 : 가습프레임
830 : 냉각핀 840 : 습도조절종이
850 : 냉각팬 900 : 제어부
910 : 스위치들 920 : 계기판
G : 그리드 L : 레이저
P : 단백질액체10: Grid sample production device for electron microscope
100: frame 101: internal space
102: front 200: grid portion
210: first cylinder 220: tweezer fixing unit
221: magnet 222: coupling groove
230: tweezer adapter 231: steel plate
232: tweezer receiving groove 2321: screw
233: protrusion 240: tweezers
241: tweezer 242: tweezer holder
250: second camera 300: filter unit
310: second cylinder 320: moving frame
330: filter holder 340: filter magnet
350: filter paper 351: grid hole
400: laser unit 500: screen unit
510: aluminum plate 520: screen paper
600: liquid amount analysis unit 610: illuminance sensor unit
611: illuminance sensor 612: sensor moving object
620: data storage unit 630: liquid amount determination unit
640: first camera 650: image unit
700: quick freezing unit 701: communication hole
710: freezing frame 720: outer container
730: freezing cup 740: inner container
750: grid storage container 800: humidity control device
810: humidity sensor 820: humidification frame
830: cooling fin 840: humidity control paper
850: cooling fan 900: control unit
910: switches 920: instrument panel
G: Grid L: Laser
P: protein liquid

Claims (15)

복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서,
내부공간이 형성된 프레임;
상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부;
상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부;
상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부;
상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및
상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하고,
상기 그리드부는,
상기 프레임의 상부에 수직하게 구비되어 신축에 의하여 상하방향으로 슬라이딩 이동하는 제 1실린더와,
상기 제 1실린더의 하단에 구비되며 일면에 자석이 구비되는 트위저고정부와,
일면에 철제판이 구비되어 상기 트위저고정부의 일면에 맞닿아 결합되고, 하단에 트위저수용홈이 형성되는 트위저어댑터와,
일단이 상기 트위저수용홈에 삽입결합되며, 타단에 그리드가 파지되는 트위저부를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.In the grid sample production apparatus for an electron microscope for producing a grid sample in which a protein liquid is disposed in an appropriate amount in a hole of a grid having a plurality of holes,
A frame in which an internal space is formed;
A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end;
A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit;
A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit;
A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And
A liquid amount analysis unit that analyzes the roughness of the diffraction image appearing on the screen and determines whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount,
The grid portion,
A first cylinder vertically provided on the upper portion of the frame and sliding in the vertical direction by expansion and contraction;
A tweezer fixing part provided at the lower end of the first cylinder and provided with a magnet on one side thereof,
A tweezer adapter provided with an iron plate on one side and coupled in contact with one side of the tweezer fixing portion, and having a tweezer receiving groove formed at the bottom thereof,
An electron microscope grid sample production apparatus comprising a tweezer part having one end inserted into the tweezer receiving groove and gripping a grid at the other end. 삭제delete 청구항 1에 있어서,
상기 트위저고정부는, 일면에 결합홈이 더 형성되고,
상기 트위저어댑터는, 일면에 상기 결합홈에 대응하는 돌출부가 더 구비되어, 상기 결합홈에 상기 돌출부가 삽입배치되는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method according to claim 1,
The tweezer fixing portion is further formed with a coupling groove on one surface,
The tweezer adapter is further provided with a protrusion corresponding to the coupling groove on one surface thereof, and the protrusion is inserted and disposed in the coupling groove. 청구항 1에 있어서,
상기 트위저부는,
타단이 서로 이격되어 이격된 사이로 그리드를 파지하는 트위저와,
“ㄷ”자로 형성되며, 개방된 측으로 상기 트위저를 삽입시켜 그리드를 파지한 상태를 유지시키는 트위저홀더를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.
The method according to claim 1,
The tweezer part,
The tweezers holding the grid between the other ends are spaced apart from each other,
A grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope comprising a tweezer holder formed in a “c” letter and holding the grid by inserting the tweezer to the open side.
 복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서,
내부공간이 형성된 프레임;
상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부;
상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부;
상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부;
상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및
상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하고,
상기 필터부는,
상기 프레임의 내부일면에서 신축에 의하여 수평방향으로 슬라이딩 이동하는 제 2실린더와,
상기 제 2실린더에 결합되어 이동하는 이동프레임과,
상기 이동프레임에 돌출구비되며 철제로 형성되는 필터고정대와,
자석으로 형성되어 상기 필터고정대의 일면에 결합되는 필터자석체와,
일면이 상기 필터자석체에 접착되어 상기 필터고정대에 배치되고, 그리드홀이 형성되며, 상기 제2실린더의 이동에 의하여 일면이 그리드와 맞닿아 그리드의 액체를 흡수하는 필터종이를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.In the grid sample production apparatus for an electron microscope for producing a grid sample in which a protein liquid is disposed in an appropriate amount in a hole of a grid having a plurality of holes,
A frame in which an internal space is formed;
A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end;
A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit;
A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit;
A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And
A liquid amount analysis unit that analyzes the roughness of the diffraction image appearing on the screen and determines whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount,
The filter unit,
A second cylinder that slides in a horizontal direction by expansion and contraction on one inner surface of the frame,
A moving frame coupled to the second cylinder and moving,
A filter holder protruding from the moving frame and formed of iron,
A filter magnet body formed of a magnet and coupled to one surface of the filter holder,
One side is adhered to the filter magnet body, is disposed on the filter holder, a grid hole is formed, and one side is in contact with the grid by the movement of the second cylinder to absorb the liquid in the grid for electron microscope Grid sample production device. 청구항 5에 있어서,
상기 레이저부는,
상기 이동프레임에 구비되어 상기 제 2실린더에 의하여 이동하며, 상기 그리드홀을 관통하여 상기 그리드에 레이저를 조사하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 5,
The laser unit,
An electron microscope grid sample manufacturing apparatus provided in the moving frame, moved by the second cylinder, and irradiated with a laser to the grid through the grid hole. 청구항 1 또는 청구항 5에 있어서,
상기 스크린부는,
상기 프레임의 내부타면에 구비되는 알루미늄판과,
상기 알루미늄판의 일면에 구비되며 상기 회절상이 나타나는 스크린페이퍼를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method according to claim 1 or 5,
The screen unit,
An aluminum plate provided on the other inner surface of the frame,
An apparatus for producing a grid sample for an electron microscope comprising a screen paper provided on one surface of the aluminum plate and showing the diffraction image. 복수개의 홀이 형성된 그리드의 홀에 단백질 액체를 적정량으로 배치시킨 그리드 샘플을 제작하기 위한 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치에 있어서,
내부공간이 형성된 프레임;
상기 프레임의 상측에 수직하게 구비되고, 상하이동가능하도록 구비되며, 하단에 그리드가 파지되는 그리드부;
상기 프레임의 내부에 이동가능하도록 구비되며, 상기 그리드부의 일단에 파지되는 그리드의 단백질 액체를 선택적으로 흡수하는 필터부;
상기 필터부의 일측에 구비되어, 상기 그리드부의 일단에 배치된 그리드에 레이저를 조사하는 레이저부;
상기 프레임의 내부에 배치되며, 상기 레이저부에서 조사된 레이저가 그리드에 의하여 회절되어 회절상이 나타나는 스크린부; 및
상기 스크린부에 나타나는 회절상의 조도를 분석하여 그리드의 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량분석부를 포함하고,
상기 액체량분석부는,
상기 스크린부에 구비되어 상기 스크린부에 나타나는 회절상에 대한 조도를 측정하는 조도센서부와,
상기 조도센서부와 연결되어 상기 조도센서부에서 측정된 조도값을 전달받아 저장하는 데이터저장부와,
상기 데이터저장부에 저장된 조도값을 실시간으로 분석하여, 기설정된 조도값과 비교함으로써 그리드에 배치된 단백질 액체가 적정량으로 배치되는지를 판단하는 액체량판단부를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.In the grid sample production apparatus for an electron microscope for producing a grid sample in which a protein liquid is disposed in an appropriate amount in a hole of a grid having a plurality of holes,
A frame in which an internal space is formed;
A grid portion vertically provided on the upper side of the frame, provided to be movable upward, and gripping a grid at a lower end;
A filter unit provided to be movable inside the frame and selectively absorbing a protein liquid of a grid held at one end of the grid unit;
A laser unit provided on one side of the filter unit and irradiating a laser to a grid disposed at one end of the grid unit;
A screen unit disposed inside the frame, wherein the laser irradiated by the laser unit is diffracted by a grid to display a diffraction image; And
A liquid amount analysis unit that analyzes the roughness of the diffraction image appearing on the screen and determines whether the protein liquid of the grid is disposed in an appropriate amount,
The liquid amount analysis unit,
An illuminance sensor unit provided on the screen unit to measure the illuminance of the diffraction image appearing on the screen unit,
A data storage unit connected to the illuminance sensor unit to receive and store the illuminance value measured by the illuminance sensor unit;
A grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope comprising a liquid amount determination unit that analyzes the illuminance value stored in the data storage unit in real time and compares it with a preset illuminance value to determine whether the protein liquid disposed on the grid is disposed in an appropriate amount. 청구항 8에 있어서,
상기 액체량분석부는,
상기 프레임의 내부일면에 구비되어 상기 스크린부에 나타나는 회절상을 촬영하는 제 1카메라를 더 포함하고,
상기 데이터저장부는, 상기 제 1카메라와 연결되어 상기 제 1카메라를 통하여 촬영된 회절상을 디스플레이하는 영상부를 더 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 8,
The liquid amount analysis unit,
Further comprising a first camera provided on the inner surface of the frame to photograph the diffraction image appearing on the screen,
The data storage unit further comprises an image unit connected to the first camera to display a diffraction image photographed through the first camera. 청구항 8에 있어서,
상기 조도센서부는,
상기 프레임의 내부타면에 구비되고, 일면에 자성체가 구비되는 조도센서와,
상기 스크린부의 타면에 구비되며 상기 조도센서의 자성체에 대응하는 자석으로 형성되어 상기 조도센서의 위치를 제어하는 센서이동체를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 8,
The illuminance sensor unit,
An illuminance sensor provided on the other side of the frame and provided with a magnetic material on one side,
An electron microscope grid sample manufacturing apparatus comprising a sensor moving body provided on the other surface of the screen and formed of a magnet corresponding to the magnetic body of the illumination sensor to control the position of the illumination sensor. 청구항 5에 있어서,
상기 프레임의 하측에 구비되며, 내부가 상기 프레임의 내부와 연통되도록 연통홀이 형성되고, 상기 그리드부로부터 그리드를 전달받아 급속냉동시키는 급속냉동부를 더 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 5,
An electron microscope grid sample manufacturing apparatus further comprising a quick freezing part provided below the frame, a communication hole formed so that the inside communicates with the inside of the frame, and receiving a grid from the grid part for rapid freezing. 청구항 11에 있어서,
상기 급속냉동부는,
상기 프레임의 하측에 구비되어 내부가 상기 프레임의 내부와 연통되도록 연통홀이 형성되는 냉동프레임과,
상기 냉동프레임의 내부에 배치되는 외측용기와,
상기 외측용기의 내측에 중앙에 구비되고, 내부에 액체에탄이 수용되어, 그리드를 전달받아 급속냉동시키는 냉동컵과,
상기 외측용기와 상기 냉동컵 사이에 구비되며, 상기 냉동컵의 외측둘레를 따라 공간이 형성된 내측용기와,
상기 내측용기의 공간에 배치되어 급속냉동된 복수개의 그리드를 전달받아 저장하는 그리드저장용기를 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 11,
The quick freezing unit,
A freezing frame provided at a lower side of the frame and having a communication hole formed therein so that the inside communicates with the inside of the frame,
An outer container disposed inside the freezing frame,
A freezing cup provided in the center on the inner side of the outer container and receiving liquid ethane therein to receive a grid for rapid freezing;
An inner container provided between the outer container and the freezing cup and having a space formed along the outer circumference of the freezing cup,
A grid sample production apparatus for an electron microscope comprising a grid storage container disposed in the space of the inner container to receive and store a plurality of quick-frozen grids. 청구항 11에 있어서,
상기 액체량분석부, 상기 필터부 및 상기 그리드부와 연결되어 상기 액체량분석부에서 분석된 그리드 홀의 단백질 액체가 적정량으로 배치되었다고 판단하면,
상기 필터부를 수평이동시켜 상기 필터종이와 그리드가 멀어지도록 제어하고, 상기 그리드부를 하측으로 이동시켜 그리드를 상기 급속냉동부에 자동적으로 전달하도록 제어하는 제어부를 더 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 11,
When it is determined that the protein liquid of the grid hole, which is connected to the liquid amount analysis unit, the filter unit, and the grid unit, analyzed by the liquid amount analysis unit is disposed in an appropriate amount,
A grid sample manufacturing apparatus for an electron microscope further comprising a control unit configured to horizontally move the filter unit to control the filter paper and the grid away, and to move the grid unit downward to automatically transfer the grid to the rapid freezing unit. 청구항 1 또는 청구항 5 또는 청구항 8 중 어느 한 항에 있어서,
상기 프레임의 후측에 구비되고, 상기 프레임의 내부와 연통되어 상기 프레임 내부의 습도를 제어하는 습도조절장치를 더 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method according to any one of claims 1 or 5 or 8,
An electron microscope grid sample production apparatus further comprising a humidity control device provided at the rear side of the frame and communicating with the inside of the frame to control the humidity inside the frame. 청구항 14에 있어서,
상기 습도조절장치는,
상기 프레임의 내부에 구비되는 습도센서와,
상기 프레임의 후측에 구비되며 물이 수용되는 가습프레임과,
상기 가습프레임의 일측에 구비되는 냉각핀과,
일측이 상기 가습프레임에 구비되고 상기 냉각핀을 따라 배열되며, 타측이 상기 프레임의 내부에 배치되는 습도조절종이와,
상기 냉각핀의 일측에 구비되고, 상기 습도센서의 습도측정값에 대응하여 회전하여 상기 냉각핀에 배치되는 습도조절종이의 물을 증발시켜 상기 프레임 내의 습도를 제어하는 냉각팬을 포함하는 전자현미경용 그리드 샘플 제작장치.The method of claim 14,
The humidity control device,
A humidity sensor provided inside the frame,
A humidification frame provided on the rear side of the frame and receiving water,
A cooling fin provided on one side of the humidification frame,
A humidity control paper provided at one side of the humidification frame and arranged along the cooling fins, and the other side disposed inside the frame,
For electron microscopes including a cooling fan provided on one side of the cooling fins and rotating in response to the humidity measurement value of the humidity sensor to evaporate water from the humidity control paper disposed on the cooling fins to control the humidity in the frame Grid sample production device.
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