KR102185987B1 - A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof - Google Patents

A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof Download PDF

Info

Publication number
KR102185987B1
KR102185987B1 KR1020190001075A KR20190001075A KR102185987B1 KR 102185987 B1 KR102185987 B1 KR 102185987B1 KR 1020190001075 A KR1020190001075 A KR 1020190001075A KR 20190001075 A KR20190001075 A KR 20190001075A KR 102185987 B1 KR102185987 B1 KR 102185987B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
diabetic nephropathy
protein
expression level
ripk3
gene
Prior art date
Application number
KR1020190001075A
Other languages
Korean (ko)
Other versions
KR20200085390A (en
Inventor
이은영
문종석
Original Assignee
순천향대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 순천향대학교 산학협력단 filed Critical 순천향대학교 산학협력단
Priority to KR1020190001075A priority Critical patent/KR102185987B1/en
Publication of KR20200085390A publication Critical patent/KR20200085390A/en
Application granted granted Critical
Publication of KR102185987B1 publication Critical patent/KR102185987B1/en

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/136—Screening for pharmacological compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/34—Genitourinary disorders
    • G01N2800/347—Renal failures; Glomerular diseases; Tubulointerstitial diseases, e.g. nephritic syndrome, glomerulonephritis; Renovascular diseases, e.g. renal artery occlusion, nephropathy

Abstract

본 발명은 RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA의 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 조성물, 및 상기 조성물을 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 키트, 상기 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법, 당뇨병성 신증 치료제의 스크리닝 방법을 제공한다.
본 발명은, 당뇨병성 신증 진단용 조성물을 제공함으로서, 당뇨병성 신증 환자에게서 발현이 변화하는 RIPK3의 단백질 또는 그 유전자의 발현 수준을 측정 및 비교함으로서, 당뇨병성 신증의 조기진단 및 질병 정도를 유의적으로 예측 또는 파악할 수 있다. The present invention provides a composition for diabetic nephropathy diagnosis, comprising an agent for measuring the level of the protein of RIPK3 or mRNA of a gene thereof, and a kit for diabetic nephropathy, comprising the composition, and information for diabetic nephropathy diagnosis A method and a method for screening a therapeutic agent for diabetic nephropathy are provided.
The present invention provides a composition for diagnosing diabetic nephropathy, by measuring and comparing the expression level of the protein of RIPK3 or its gene whose expression is changed in diabetic nephropathy patients, to significantly detect early diagnosis of diabetic nephropathy and the degree of disease Can predict or grasp.

Description

RIPK3을 포함하는 당뇨병성 신증 진단용 바이오마커 및 이의 용도{A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof}A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof

본 발명은 당뇨병성 신증 진단용 조성물, 상기 조성물을 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 키트, 상기 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법을 제공한다. The present invention provides a diabetic nephropathy diagnosis composition, a diabetic nephropathy diagnosis kit comprising the composition, and a method of providing information for diabetic nephropathy diagnosis.

당뇨병은 높은 혈당 수치가 오랜기간 동안 지속되는 대사 질환으로, 통상적으로 제1형 당뇨병, 제2형 당뇨병, 임신 당뇨병 등으로 분류된다. 제1형 당뇨병은 췌장이 충분한 인슐린을 만들어 내지 못하는 것에 의해 발병하며, ‘인슐린 의존당뇨병’ 또는 ‘연소성 당뇨병”이라고도 한다. 제2형 당뇨병은 세포가 인슐린에 적절하게 반응하기 못하는 인슐린 저항이 있는 것이 특징이다. 이외의 임신 중에 처음 발생하거나 진단되는 모든 형태의 내당능 장애를 임신 당뇨병이라 한다.Diabetes is a metabolic disease in which high blood sugar levels persist for a long period of time, and is generally classified into type 1 diabetes, type 2 diabetes, and gestational diabetes. Type 1 diabetes is caused by the pancreas not making enough insulin, and it is also called “insulin dependent diabetes” or “juvenile diabetes”. Type 2 diabetes is characterized by insulin resistance, which prevents cells from responding properly to insulin. Any other form of impaired glucose tolerance that first occurs or is diagnosed during pregnancy is called gestational diabetes.

당뇨병은 노인인구의 증가와 생활습관의 변화로 유병률이 크게 증가하고 있으며, 2025년에는 전세계 당뇨병 환자가 약 3억명에 이를 것으로 추정되고 있다. The prevalence of diabetes is greatly increasing due to an increase in the elderly population and changes in lifestyle, and it is estimated that the number of diabetic patients worldwide will reach about 300 million by 2025.

당뇨병성 신증은 당뇨병에 의해 나타나는 합병증으로, 고혈압 등에 의해 지속적으로 신장 내부의 사구체가 손상되어 신장 기능이 저하되는 질환이다. 이는 말기 신부전증의 가장 흔한 원인으로, 당뇨병 환자의 20~40%에서 발생하는 것으로 알려져 있다. Diabetic nephropathy is a complication caused by diabetes, and is a disease in which renal function is degraded due to continuous damage to the glomeruli inside the kidney due to high blood pressure or the like. This is the most common cause of end-stage renal failure and is known to occur in 20-40% of diabetic patients.

당뇨병성 신증의 병인은 아직 정확하게 밝혀져 있지 않으며, 신장 내의 혈역학적 변화, 사구체 단백의 포도당화, 솔비톨의 축적 등의 복합적 요인들이 관련되어 있는 것으로 여겨진다.The etiology of diabetic nephropathy is not yet clearly identified, and it is believed that a combination of factors such as hemodynamic changes in the kidney, glomerular protein glucose, and sorbitol accumulation are involved.

대한 신장학회의 2011년 말 기준으로 통계에 의하면 전체 투석 환자의 원인 질환 중 47.1%를 차지하고 있다. 전 세계적으로도 이와 비슷한 빈도를 보이고 있다. 당뇨병 치료제의 전세계 시장 규모는 2015년에 약 708억 달러에 달하며, 당뇨병성 신증 치료제 시장은 2014년 22억 달러 규모로 연평균 5.6%로 성장하여 2020년 31억 달러에 달할 것으로 예상되고 있다. 당뇨병 환자의 급격한 증가에 따라 당뇨병성 신증 환자 역시 현저히 증가하는 추세이다. According to statistics as of the end of 2011 by the Korean Society of Nephrology, it accounts for 47.1% of all dialysis patients. The frequency is similar worldwide. The global market for diabetes treatments reached about $ 70.8 billion in 2015, and the market for diabetic nephropathy treatments reached $ 2.2 billion in 2014, growing at an annual average of 5.6% and is expected to reach $ 3.1 billion in 2020. As the number of diabetic patients increases rapidly, diabetic nephropathy patients are also on the rise.

대한 신장학회의 ‘2004년 우리나라 신 대체 요법의 현황'에 대한 보고에 따르면 만성 신부전의 원인질환으로 당뇨병성 신증이 43.4%를 차지하고 그 뒤로 고혈압성 사구체경화증 16.2%, 만성 사구체 신염이 12.5%를 각각 차지함으로써 우리나라에서도 인구 고령화로 인한 당뇨병과 같은 만성질환에 따른 신장질환 환자 증가 추세가 고착화되고 있음을 알 수 있다. 그러나 현재 당뇨병성 신증에 대한 선택적인 치료방법은 아직 없는 실정이다.According to the report of the Korean Nephrological Association's 2004 current status of renal replacement therapy in Korea, diabetic nephropathy accounted for 43.4% of chronic renal failure, followed by hypertensive glomerulosclerosis 16.2% and chronic glomerulonephritis 12.5%, respectively. As a result, it can be seen that the trend of increasing kidney disease patients due to chronic diseases such as diabetes due to the aging population is being fixed in Korea. However, there is currently no alternative treatment method for diabetic nephropathy.

당뇨병성 신증은 초기에는 대부분 증상이 없다. 당뇨병성 신증이 진행될수록 소변 검사에서 단백뇨가 나타나고, 단백뇨의 양이 많아지면, 소변에 거품이 나며, 하지 부종 등이 나타날 수 있다. Diabetic nephropathy is initially asymptomatic. As diabetic nephropathy progresses, proteinuria appears in the urine test, and if the amount of proteinuria increases, the urine may foam and swelling of the lower extremities may appear.

당뇨병성 신증의 진행과정에서 미세알부민뇨가 출현하는 초기단계에서는 엄격한 혈당조절과 저단백 식사요법으로 미세알부민뇨를 경감 혹은 다음 단계로의 진행을 억제-지연시킬 수 있는 것으로 보고되고 있다. 그러므로 당뇨병성 신증이 말기 신장병으로 진행되는 것을 막을 수 있도록 초기에 진단하는 것이 중요하다. 그러나 종래의 진단에 사용되는 단백뇨는 당뇨병성 신증 이외의 고혈압 및 심혈관 질환의 지표이기도 하는 등 다른 질병과 연관성이 높아 직접적으로 당뇨병성 신증의 진행 정도를 판정하기 어려운 상태이다.In the early stages of the appearance of microalbuminuria in the process of diabetic nephropathy, it has been reported that strict blood sugar control and low protein diet can alleviate microalbuminuria or inhibit-delay progression to the next stage. Therefore, it is important to diagnose early to prevent diabetic nephropathy from progressing to end-stage kidney disease. However, proteinuria used in conventional diagnosis is highly related to other diseases such as high blood pressure and cardiovascular disease other than diabetic nephropathy, and it is difficult to directly determine the progression of diabetic nephropathy.

이에, 당뇨병성 신증을 조기에 진단할 수 있는 신규한 바이오 마커의 발굴이 시급한 실정이다. Accordingly, it is urgent to discover a novel biomarker capable of early diagnosis of diabetic nephropathy.

대한민국 등록특허 제10-1240208호Korean Patent Registration No. 10-1240208

본 발명의 하나의 목적은, RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA의 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 조성물을 제공하는 것이다.One object of the present invention is to provide a composition for diagnosing diabetic nephropathy, comprising an agent for measuring the level of mRNA of the protein of RIPK3 or its gene.

본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 키트를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a diabetic nephropathy diagnostic kit comprising the composition.

본 발명의 또 다른 목적은, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a method of providing information for diabetic nephropathy diagnosis.

본 발명의 또 다른 목적은, 당뇨병성 신증 치료제의 스크리닝 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a screening method for a therapeutic agent for diabetic nephropathy.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로서, RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA의 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides, as an aspect, a composition for diabetic nephropathy diagnosis, comprising an agent for measuring the level of mRNA of the protein of RIPK3 or its gene.

본 발명에서, 상기 당뇨병성 신증 진단용 조성물은 RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA의 수준을 측정하는 제제를 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 조성물일 수 있다.In the present invention, the composition for diabetic nephropathy diagnosis may be a composition for diabetic nephropathy diagnosis, including an agent for measuring the level of mRNA of the protein of RIPK3 or its gene.

본 발명에서 용어, “당뇨병성 신증”은 당뇨병에 의해 유발된 신장병을 의미하며, 사구체경화증(glomerulosclerosis), 혈관병소(vascular lesion) 및 세뇨관 간질성 질환(tubulointerstitial disease)을 모두 포함하나 특히 당뇨병성 사구체경화증을 의미한다. In the present invention, the term “diabetic nephropathy” refers to kidney disease caused by diabetes, and includes all of glomerulosclerosis, vascular lesions, and tubulointerstitial disease, but especially diabetic glomeruli Means sclerosis.

본 발명에서 사용된 용어 “진단”은 병리 상태의 존재 또는 특징을 확인하는 것을 의미한다. 본 발명의 목적상, 진단은 당뇨병성 신증 발병 여부를 확인하는 것으로서, 당뇨병성 신증 발병 여부를 조기에 확인 할 수 있다. As used herein, the term "diagnosis" means to confirm the presence or characteristics of a pathological condition. For the purpose of the present invention, the diagnosis is to determine whether diabetic nephropathy has occurred, and whether diabetic nephropathy has occurred can be confirmed early.

본 발명에서 사용된 용어 “RIPK3”은 Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3, RIP3 또는 RIPK3로 표기될 수 있으며, 상기 RIPK3을 코딩하는 유전자의 구체적인 염기서열 및 단백질 정보는 NCBI에 공지되어 있다(NCBI: NP_006862.2)The term “RIPK3” used in the present invention may be expressed as Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3, RIP3 or RIPK3, and specific nucleotide sequence and protein information of the gene encoding RIPK3 are known from NCBI ( NCBI: NP_006862.2)

본 발명의 일실시예에서, 정상환자와 당뇨병 환자의 혈장 및 소변에서 RIPK3의 단백질의 발현 수준을 비교하였으며, 당뇨병 환자에서 정상환자에 비해 RIPK3의 단백질 농도가 높음을 확인하였다. 또한, 당뇨병성 신증을 진단하는데 이용되는 알부민뇨 수준에 따라 제2형 당뇨병 환자를 정상 알부민뇨군(normoalbuminuria group), 미세알부민뇨군(microalbuminuria group), 단백뇨군(macroalbuminuria group)로 분류하여 RIPK3의 단백질의 발현 수준을 분석한 결과, 알부민뇨의 수준이 높을수록, 즉 당뇨병성 신증이 심화될수록 RIPK3의 단백질의 농도가 높게 측정됨을 확인하였다. In one embodiment of the present invention, the expression level of RIPK3 protein in plasma and urine of normal patients and diabetic patients was compared, and it was confirmed that the protein concentration of RIPK3 was higher in diabetic patients than in normal patients. In addition, according to the level of albuminuria used to diagnose diabetic nephropathy, type 2 diabetic patients were classified into normal albuminuria group, microalbuminuria group, and macroalbuminuria group, and the expression of protein of RIPK3. As a result of analyzing the level, it was confirmed that the higher the level of albuminuria, that is, the worse the diabetic nephropathy was, the higher the protein concentration of RIPK3 was measured.

또한, 상기 환자들을 대상으로 장기적으로 추가 관찰한 결과, RIPK3의 농도가 증가되어 있던 당뇨환자들이 매년 알부민뇨의 증가 비율이 더 빠른 것을 확인하였다. 또한, RIPK3의 농도가 증가되어 있던 당뇨환자에서 신기능 저하가 진행될 가능성 역시 더 높음을 확인하였다. In addition, as a result of a long-term additional observation of the patients, it was confirmed that diabetic patients with increased concentrations of RIPK3 had a faster increase in albuminuria every year. In addition, it was confirmed that the possibility of progression of renal decline in diabetic patients with increased concentration of RIPK3 was also higher.

따라서, RIPK3의 발현이 증가하는 경우, 당뇨병성 신증으로 진단할 수 있음을 확인하였다. Therefore, it was confirmed that when the expression of RIPK3 is increased, diabetic nephropathy can be diagnosed.

본 발명에서 용어 “마커(marker)”란 정상군 개체와 당뇨병성 신증을 가진 개체를 구분하여 진단할 수 있는 물질로, 본 발명의 당뇨병성 신증을 가지는 개체에서 증가 또는 감소를 보이는 폴리펩티드, 단백질 또는 핵산, 유전자, 지질, 당지질, 당단백질 또는 당 등과 같은 유기 생체 분자들을 모두 포함한다. 특히 본 발명에서는 본 발명의 당뇨병성 신증을 가지는 개체에서 변화되는 단백질일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the present invention, the term "marker" is a substance capable of distinguishing and diagnosing an individual with diabetic nephropathy from a normal group, and a polypeptide, protein or a protein that shows an increase or decrease in an individual with diabetic nephropathy of the present invention It includes all organic biomolecules such as nucleic acids, genes, lipids, glycolipids, glycoproteins or sugars. Particularly, in the present invention, the protein may be changed in an individual having diabetic nephropathy of the present invention, but is not limited thereto.

본 발명에 사용된 용어 “mRNA 수준 측정”이란 당뇨병성 신증을 진단하기 위하여 생물학적 시료에서 당뇨병성 신증 진단용 유전자들의 mRNA 존재 여부와 발현 정도를 확인하는 과정으로 mRNA의 양을 측정한다. 이를 위한 분석 방법으로는 역전사 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사 중합효소반응(Competitive RT-PCR), 실시간 역전사 중합효소반응(Real-time RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블랏팅(Northern blotting), DNA 칩 등이 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.The term “measurement of mRNA level” used in the present invention is a process of determining the presence and expression of mRNA of genes for diabetic nephropathy in a biological sample to diagnose diabetic nephropathy, and measures the amount of mRNA. Analysis methods for this include reverse transcription polymerase reaction (RT-PCR), competitive reverse transcription polymerase reaction (Competitive RT-PCR), real-time reverse transcription polymerase reaction (Real-time RT-PCR), and RNase protection assay (RPA; RNase protection). assay), Northern blotting, and DNA chips, but are not limited thereto.

상기 유전자의 mRNA 수준을 측정하는 제제는 바람직하게는 프라이머 쌍 또는 프로브이며, 상기 유전자들의 핵산 정보가 GeneBank 등에 알려져 있으므로 당업자는 상기 서열을 바탕으로 이들 유전자의 특정 영역을 특이적으로 증폭하는 프라이머 또는 프로브를 디자인할 수 있다.The agent for measuring the mRNA level of the gene is preferably a primer pair or a probe, and since the nucleic acid information of the genes is known to GeneBank, etc., those skilled in the art are primers or probes that specifically amplify specific regions of these genes based on the sequence. Can design.

상기 유전자의 mRNA 수준을 측정하는 제제는 상기 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머 쌍, 프로브 또는 안티센스 뉴클레오티드를 포함할 수 있다.The agent for measuring the mRNA level of the gene may include a primer pair, a probe or antisense nucleotide that specifically binds to the gene.

바람직하게 당뇨병성 신증 진단을 위하여, 상기 mRNA 수준을 측정하는 제제는 RIPK3의 단백질의 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머 쌍, 프로브 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다.Preferably, for diabetic nephropathy diagnosis, the agent for measuring the mRNA level may include a primer pair, a probe, or an antisense oligonucleotide that specifically binds to the gene of the RIPK3 protein.

본 발명에서 사용된 용어 “프라이머 쌍”은 표적 유전자 서열을 인지하는 정방향 및 역방향의 프라이머로 이루어진 모든 조합의 프라이머쌍을 포함하나, 바람직하게는, 특이성 및 민감성을 가지는 분석 결과를 제공하는 프라이머 쌍이다. 프라이머의 핵산 서열이 시료내 존재하는 비-표적 서열과 불일치하는 서열이어서, 상보적인 프라이머 결합 부위를 함유하는 표적 유전자 서열만 증폭하고 비특이적 증폭을 유발하지 않는 프라이머일 때, 높은 특이성을 부여할 수 있다.The term "primer pair" used in the present invention includes all combinations of primer pairs consisting of forward and reverse primers that recognize a target gene sequence, but is preferably a primer pair that provides an analysis result having specificity and sensitivity. . Since the nucleic acid sequence of the primer is a sequence that is inconsistent with the non-target sequence present in the sample, a primer that amplifies only the target gene sequence containing the complementary primer binding site and does not induce non-specific amplification can impart high specificity. .

본 발명에서 사용된 용어 “프로브”란 시료 내의 검출하고자 하는 표적 물질과 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 의미하며, 상기 결합을 통하여 특이적으로 시료 내의 표적 물질의 존재를 확인할 수 있는 물질을 의미한다. 프로브 분자의 종류는 당업계에서 통상적으로 사용되는 물질로서 제한은 없으나, 바람직하게는 PNA(peptide nucleic acid), LNA(locked nucleic acid), 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, RNA 또는 DNA 일 수 있으며, 가장 바람직하게는 PNA이다. 보다 구체적으로, 상기 프로브는 바이오 물질로서 생물에서 유래되거나 이와 유사한 것 또는 생체외에서 제조된 것을 포함하는 것으로 예를 들어, 효소, 단백질, 항체, 미생물, 동식물 세포 및 기관, 신경세포, DNA, 및 RNA일 수 있으며, DNA는 cDNA, 게놈 DNA, 올리고뉴클레오타이드를 포함하며, RNA는 게놈 RNA, mRNA, 올리고뉴클레오타이드를 포함하며, 단백질의 예로는 항체, 항원, 효소, 펩타이드 등을 포함할 수 있다. The term "probe" used in the present invention means a substance capable of specifically binding to a target substance to be detected in a sample, and means a substance capable of specifically confirming the presence of a target substance in a sample through the binding. do. The type of probe molecule is a material commonly used in the art and is not limited, but preferably PNA (peptide nucleic acid), LNA (locked nucleic acid), peptide, polypeptide, protein, RNA, or DNA. It is preferably PNA. More specifically, the probe is a biomaterial that includes an organism-derived or similar thing or a thing produced in vitro, for example, enzymes, proteins, antibodies, microorganisms, animal and plant cells and organs, neurons, DNA, and RNA. DNA may include cDNA, genomic DNA, and oligonucleotide, RNA includes genomic RNA, mRNA, oligonucleotide, and examples of proteins may include antibodies, antigens, enzymes, peptides, and the like.

본 발명에서 용어, “안티센스 올리고뉴클레오티드”는 특정 mRNA의 서열에 상보적인 핵산 서열을 함유하고 있는 DNA 또는 RNA 또는 이들의 유도체로서, mRNA 내의 상보적인 서열에 결합하여 mRNA의 단백질로의 번역을 저해하는 작용을 한다. 안티센스 올리고뉴클레오티드 서열은 상기 유전자들의 mRNA에 상보적이고 상기 mRNA에 결합할 수 있는 DNA 또는 RNA 서열을 의미한다. 이는 상기 유전자 mRNA의 번역, 세포질 내로의 전위(translocation), 성숙(maturation) 또는 다른 모든 전체적인 생물학적 기능에 대한 필수적인 활성을 저해할 수 있다. 안티센스 올리고뉴클레오티드의 길이는 6 내지 100 염기, 바람직하게는 8 내지 60 염기, 보다 바람직하게는 10 내지 40 염기일 수 있다. 상기 안티센스 올리고뉴클레오티드는 통상의 방법으로 시험관 내에서 합성되어 생체 내로 투여하거나 생체 내에서 안티센스 올리고뉴클레오티드가 합성되도록 할 수 있다. 시험관 내에서 안티센스 올리고뉴클레오티드를 합성하는 한가지 예는 RNA 중합효소 I를 이용하는 것이다. 생체 내에서 안티센스 RNA가 합성되도록 하는 한 가지 예는 다중클로닝부위(MCS)의 기원이 반대 방향에 있는 벡터를 사용하여 안티센스 RNA가 전사되도록 하는 것이다. 상기 안티센스 RNA는 서열 내에 번역 중지 코돈이 존재하도록 하여 펩타이드 서열로 번역되지 않도록 하는 것이 바람직하다. In the present invention, the term "antisense oligonucleotide" is a DNA or RNA or a derivative thereof containing a nucleic acid sequence that is complementary to a specific mRNA sequence, and inhibits translation of the mRNA into a protein by binding to a complementary sequence in the mRNA. It works. The antisense oligonucleotide sequence refers to a DNA or RNA sequence that is complementary to the mRNA of the genes and can bind to the mRNA. This can inhibit the translation of the gene mRNA, translocation into the cytoplasm, maturation or any other essential activity for overall biological function. The length of the antisense oligonucleotide may be 6 to 100 bases, preferably 8 to 60 bases, more preferably 10 to 40 bases. The antisense oligonucleotide may be synthesized in vitro by a conventional method and administered in vivo, or the antisense oligonucleotide may be synthesized in vivo. One example of synthesizing antisense oligonucleotides in vitro is the use of RNA polymerase I. One example of allowing antisense RNA to be synthesized in vivo is to allow antisense RNA to be transcribed using a vector whose origin is in the opposite direction of the multicloning site (MCS). It is preferable that the antisense RNA has a translation stop codon in the sequence so that it is not translated into a peptide sequence.

본 발명에 사용된 용어 “단백질 수준 측정”이란 당뇨병성 신증 진단을 위하여 생물학적 시료에서 당뇨병성 신증 진단용 마커 단백질의 존재 여부와 발현 정도를 확인하는 과정이다. 상기 마커 단백질에 대하여 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 단백질의 양을 확인할 수 있으며, 바람직하게는 항체를 이용하지 않고 단백질 발현 수준 자체를 측정한다.The term "protein level measurement" used in the present invention is a process of determining the presence and expression of a diabetic nephropathy diagnostic marker protein in a biological sample for diabetic nephropathy diagnosis. The amount of protein can be determined using an antibody that specifically binds to the marker protein, and preferably, the protein expression level itself is measured without using an antibody.

상기 단백질 수준 측정 또는 비교 분석 방법으로는 단백질 칩 분석, 면역측정법, 리간드 바인딩 어세이, MALDI-TOF(Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, SELDI-TOF(Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, 방사선 면역분석, 방사 면역 확산법, 오우크테로니 면역 확산법, 로케트 면역전기영동, 면역조직화학(immunohistochemistry) 분석, 면역세포화학(immunocytochemistry) 분석, 보체 고정 분석법, 2차원 전기영동 분석, 액상 크로마토그래피-질량분석(liquid chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS), LC-MS/MS(liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏, 및 ELISA(enzyme linked immunosorbentassay) 등이 있으나 이로 제한되는 것은 아니다.The protein level measurement or comparative analysis methods include protein chip analysis, immunoassay, ligand binding assay, MALDI-TOF (Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, SELDI-TOF (Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, radioimmunoassay, radioactive immunity diffusion method, octeroni immune diffusion method, rocket immunoelectrophoresis, immunohistochemistry analysis, immunocytochemistry analysis, complement fixation analysis method, two-dimensional electrophoresis Analysis, liquid chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS), LC-MS/MS (liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), Western Blot, and ELISA (enzyme linked immunosorbentassay), etc. It is not limited.

당뇨병성 신증 진단을 위하여 바람직하게 상기 단백질 수준을 측정하는 제제는 RIPK3의 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 포함할 수 있다.For diagnosing diabetic nephropathy, the preparation for measuring the protein level may include an antibody that specifically binds to the protein of RIPK3.

본 발명에 사용된 용어 “항체”는 항원성 부위에 대해서 지시되는 특이적인 단백질 분자를 의미한다. 본 발명의 목적상, 항체는 상기 RIPK3의 단백질에 대해 특이적으로 결합하는 항체를 의미하며, 다클론 항체, 단클론 항체 및 재조합 항체를 모두 포함한다. 항체를 생성하는 것은 당업계에 널리 공지된 기술을 이용하여 용이하게 제조할 수 있다.The term "antibody" as used herein refers to a specific protein molecule directed against an antigenic site. For the purposes of the present invention, an antibody refers to an antibody that specifically binds to the protein of RIPK3, and includes all of polyclonal antibodies, monoclonal antibodies, and recombinant antibodies. Producing antibodies can be readily prepared using techniques well known in the art.

또한 본 발명의 항체는 2개의 전체 길이의 경쇄 및 2개의 전체 길이의 중쇄를 가지는 완전한 형태뿐만 아니라, 항체 분자의 기능적인 단편을 포함한다. 항체분자의 기능적인 단편이란 적어도 항원 결합 기능을 보유하고 있는 단편을 뜻하며, Fab, F(ab'), F(ab') 2 및 Fv 등이 있다.In addition, the antibody of the present invention includes a complete form having two full-length light chains and two full-length heavy chains, as well as functional fragments of antibody molecules. The functional fragment of an antibody molecule refers to a fragment that has at least an antigen-binding function, and includes Fab, F(ab'), F(ab') 2 and Fv.

본 발명은 다른 양태로서, 상기 당뇨병성 신증 진단용 조성물을 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 키트를 제공한다. In another aspect, the present invention provides a diabetic nephropathy diagnosis kit comprising the diabetic nephropathy diagnosis composition.

바람직하게, 상기 키트는 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction) 키트, DNA 칩 키트, ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) 키트, 단백질 칩 키트 또는 래피드(rapid) 키트 일 수 있다.Preferably, the kit may be a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) kit, a DNA chip kit, an ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) kit, a protein chip kit, or a rapid kit.

또한, 바람직하게, 상기 당뇨병성 신증 진단용 키트는 분석 방법에 적합한 한 종류 또는 그 이상의 다른 구성 성분 조성물, 용액 또는 장치를 더 포함하여 구성될 수 있다.In addition, preferably, the diabetic nephropathy diagnostic kit may further include one or more other component compositions, solutions, or devices suitable for the analysis method.

바람직하게, 상기 진단용 키트는 역전사 중합효소반응을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 것을 특징으로 하는 진단용 키트일 수 있다. RT-PCR(역전사 중합효소반응) 키트는 마커 유전자에 대한 특이적인 각각의 프라이머 쌍을 포함한다. 프라이머는 상기 각 유전자의 핵산서열에 특이적인 서열을 가지는 뉴클레오타이드로서, 약 7 bp 내지 50 bp의 길이, 보다 바람직하게는 약 10 bp 내지 30 bp 의 길이이다. 또한 대조군 유전자의 핵산 서열에 특이적인 프라이머를 포함할 수 있다. 그 외 역전사 중합효소반응 키트는 테스트 튜브 또는 다른 적절한 컨테이너, 반응 완충액(pH 및 마그네슘 농도는 다양), 데옥시뉴클레오타이드(dNTPs), Taq-폴리머라아제 및 역전사효소와 같은 효소, DNAse, RNAse 억제제 DEPC-수(DEPC-water), 멸균수 등을 포함할 수 있다.Preferably, the diagnostic kit may be a diagnostic kit comprising essential elements necessary for performing a reverse transcription polymerase reaction. The RT-PCR (reverse transcription polymerase reaction) kit contains each primer pair specific for a marker gene. The primer is a nucleotide having a sequence specific to the nucleic acid sequence of each gene, and is about 7 bp to 50 bp in length, more preferably about 10 bp to 30 bp in length. In addition, a primer specific to the nucleic acid sequence of the control gene may be included. Other reverse transcription polymerase reaction kits include test tubes or other suitable containers, reaction buffers (various pH and magnesium concentrations), deoxynucleotides (dNTPs), enzymes such as Taq-polymerase and reverse transcriptase, DNAse, RNAse inhibitors DEPC. -May include DEPC-water, sterilized water, etc.

바람직하게 DNA 칩을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 것을 특징으로 하는 진단용 키트일 수 있다. DNA 칩 키트는 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA 또는 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)가 부착되어 있는 기판, 및 형광표식 프로브를 제작하기 위한 시약, 제제, 효소 등을 포함할 수 있다. 또한 기판은 대조군 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA 또는 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다.Preferably, it may be a diagnostic kit characterized in that it contains the essential elements necessary to perform the DNA chip. The DNA chip kit may include a substrate to which cDNA or oligonucleotide corresponding to a gene or fragment thereof is attached, and reagents, agents, enzymes, etc. for preparing a fluorescently labeled probe. In addition, the substrate may include a cDNA or oligonucleotide corresponding to a control gene or a fragment thereof.

또한 바람직하게는, ELISA를 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 것을 특징으로 하는 진단 키트일 수 있다. ELISA 키트는 상기 단백질에 대한 특이적인 항체를 포함한다. 항체는 각 마커 단백질에 대한 특이성 및 친화성이 높고 다른 단백질에 대한 교차 반응성이 거의 없는 항체로, 단클론 항체, 다클론 항체 또는 재조합 항체이다. 또한 ELISA 키트는 대조군 단백질에 특이적인 항체를 포함할 수 있다. 그 외 ELISA 키트는 결합된 항체를 검출할 수 있는 시약, 예를 들면, 표지된 2차 항체, 발색단(chromophores), 효소(예: 항체와 컨주게이트됨) 및 그의 기질 또는 항체와 결합할 수 있는 다른 물질 등을 포함할 수 있다.In addition, preferably, it may be a diagnostic kit characterized in that it contains the essential elements necessary to perform ELISA. ELISA kits contain antibodies specific for the protein. Antibodies are antibodies with high specificity and affinity for each marker protein and little cross-reactivity with other proteins, and are monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, or recombinant antibodies. In addition, the ELISA kit may contain an antibody specific for a control protein. Other ELISA kits include reagents capable of detecting bound antibodies, such as labeled secondary antibodies, chromophores, enzymes (e.g., conjugated with antibodies) and their substrates or antibodies capable of binding. Other materials may be included.

또한, 바람직하게는, 5분내 분석결과를 알 수 있는 신속한 테스트를 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 것을 특징으로 하는 래피드(rapid) 키트 일 수 있다. 래피드 키트는 단백질에 대한 특이적인 항체를 포함한다. 항체는 각 마커 단백질에 대한 특이성 및 친화성이 높고 다른 단백질에 대한 교차 반응성이 거의 없는 항체로, 단클론 항체, 다클론 항체 또는 재조합 항체이다. 또한 래피드 키트는 대조군 단백질에 특이적인 항체를 포함할 수 있다. 그 외 래피드 키트는 결합된 항체를 검출할 수 있는 시약, 예를 들면, 특이항체와 2차 항체가 고정된 나이트로 셀룰로오스 멤브레인, 항체가 결합된 비드에 결합된 멤브레인, 흡수패드와 샘플 패드 등 다른 물질 등을 포함할 수 있다.In addition, preferably, it may be a rapid kit, characterized in that it contains the essential elements necessary to perform a rapid test that can know the analysis result within 5 minutes. The rapid kit contains antibodies specific for the protein. Antibodies are antibodies with high specificity and affinity for each marker protein and little cross-reactivity with other proteins, and are monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, or recombinant antibodies. In addition, the rapid kit may include an antibody specific for a control protein. Other rapid kits include reagents that can detect bound antibodies, for example, nitrocellulose membranes with immobilized specific antibodies and secondary antibodies, membranes bound to beads bound to antibodies, absorption pads and sample pads, etc. It may contain substances and the like.

본 발명은 다른 양태로서, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a method of providing information for diabetic nephropathy.

본 발명의 정보의 제공 방법은 생물학적 시료로부터 RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계 및 상기 단계에서 측정된 단백질의 발현 수준 또는 유전자의 발현 수준을 정상 대조군 시료와 비교하는 단계를 포함한다.The method of providing information of the present invention includes measuring the expression level of the protein or gene thereof of RIPK3 from the biological sample, and comparing the expression level of the protein or the gene expression level measured in the above step with a normal control sample. .

본 발명에서 사용된 용어 "생물학적 시료"란 당뇨병성 신증 발병에 의해 유전자 발현 수준 또는 단백질 발현 수준이 차이가 나는 조직, 세포, 전혈, 혈청, 혈장, 타액, 뇌척수액 또는 뇨와 같은 시료 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.The term "biological sample" as used herein includes samples such as tissues, cells, whole blood, serum, plasma, saliva, cerebrospinal fluid or urine whose gene expression level or protein expression level differs due to the onset of diabetic nephropathy. , Is not limited thereto.

상기 RIPK3은 모두 정상 대조군과 비교하여, 당뇨병성 신증이 있는 개체에서 유전자 발현 수준 또는 해당 단백질의 발현 수준이 변화하는 특징을 가지므로, 상기 수준이 변화하면 당뇨병성 신증으로 진단할 수 있다.Compared with the normal control group, all of the RIPK3 have a characteristic that the gene expression level or the expression level of the corresponding protein changes in an individual with diabetic nephropathy, and thus diabetic nephropathy can be diagnosed if the level changes.

구체적으로, 당뇨병성 신증 의심 개체의 분리된 시료의 상기 단백질의 발현 수준 또는 유전자의 발현 수준이 정상 대조군 시료의 단백질의 발현 수준 또는 유전자의 발현 수준보다 높을 경우 당뇨병성 신증으로 판단할 수 있다.Specifically, if the expression level of the protein or the gene expression level of the isolated sample of the suspected diabetic nephropathy is higher than the expression level of the protein or the gene of the normal control sample, it may be determined as diabetic nephropathy.

바람직하게, 본 발명의 상기 유전자의 발현 수준은 mRNA 발현 수준을 측정하거나 비교할 수 있다.Preferably, the expression level of the gene of the present invention can measure or compare the mRNA expression level.

상기 mRNA 발현 수준 측정 또는 비교는 역전사 중합효소반응, 경쟁적 역전사 중합효소반응, 실시간 역전사 중합효소반응, RNase 보호 분석법, 노던 블랏팅 또는 DNA 칩 등을 사용할 수 있으나, 본 발명은 이들에 제한되는 것이 아니다. 상기 측정 방법들을 통하여 정상 대조군에서의 mRNA 발현량과 당뇨병성 신증 환자의 mRNA 발현량을 확인할 수 있고, 이들 발현량 정도를 비교함으로써 당뇨병성 신증 발병 여부를 진단 또는 예측할 수 있다.Measurement or comparison of the mRNA expression level may be performed using reverse transcription polymerase reaction, competitive reverse transcription polymerase reaction, real-time reverse transcription polymerase reaction, RNase protection assay, Northern blotting or DNA chip, but the present invention is not limited thereto. . Through the above measurement methods, the mRNA expression level in the normal control group and the mRNA expression level in diabetic nephropathy patients can be confirmed, and the onset of diabetic nephropathy can be diagnosed or predicted by comparing the level of these expression levels.

바람직하게 본 발명의 상기 단백질 발현 수준은 해당 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 측정 및 비교할 수 있다. 상기 항체와 생물학적 시료 내의 해당 단백질이 항원-항체 복합체를 형성하도록 하고, 이를 검출하는 방법을 이용한다.Preferably, the protein expression level of the present invention can be measured and compared using an antibody that specifically binds to the corresponding protein. The antibody and the corresponding protein in the biological sample are allowed to form an antigen-antibody complex, and a method of detecting this is used.

본 발명에서 사용된 용어 "항원-항체 복합체"는 생물학적 시료 중의 해당 단백질 항원과 이를 인지하는 항체의 결합물을 의미한다. 상기 항원-항체 복합체의 검출은 당업계에 공지된 바와 같은 방법, 예를 들어 분광학적, 광화학적, 생물화학적, 면역화학적, 전기적, 흡광적, 화학적 및 기타 방법을 이용하여 검출할 수 있다.The term "antigen-antibody complex" as used herein refers to a combination of a corresponding protein antigen in a biological sample and an antibody that recognizes it. The detection of the antigen-antibody complex can be detected using methods as known in the art, for example, spectroscopic, photochemical, biochemical, immunochemical, electrical, absorptive, chemical and other methods.

본 발명의 목적상, 상기 단백질 발현 수준 측정 또는 비교 분석 방법으로는 단백질 칩 분석, 면역측정법, 리간드 바인딩 어세이, MALDI-TOF(Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, SELDI-TOF(Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, 방사선 면역분석, 방사 면역 확산법, 오우크테로니 면역 확산법, 로케트 면역전기영동, 면역조직화학(immunohistochemistry) 분석, 면역세포화학(immunocytochemistry) 분석, 보체 고정 분석법, 2차원 전기영동 분석, 액상 크로마토그래피-질량분석(liquid chromatography-Mass Spectrometry, LCMS), LC-MS/MS(liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏, 및 ELISA(enzyme linked immunosorbentassay) 등이 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.For the purpose of the present invention, the protein expression level measurement or comparison analysis method includes protein chip analysis, immunoassay, ligand binding assay, MALDI-TOF (Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, SELDI-TOF (Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, radiation immunoassay, radioimmune diffusion method, octeroni immune diffusion method, rocket immunoelectrophoresis, immunohistochemistry analysis, immunocytochemistry analysis, complement Fixed method, two-dimensional electrophoresis analysis, liquid chromatography-Mass Spectrometry (LCMS), liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry (LC-MS/MS), Western blot, and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) ), but are not limited thereto.

본 발명은 다른 양태로서, 당뇨병성 신증 치료제의 스크리닝 방법을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a method for screening a therapeutic agent for diabetic nephropathy.

본 발명의 당뇨병성 신증 치료제의 스크리닝 방법은 분리된 세포, 분리된 조직 또는 인간을 제외한 동물에 당뇨병성 신증 치료제 후보물질을 처리하는 단계, 상기 후보물질 처리군에서 RIPK3의 단백질의 발현수준을 측정하는 단계 및 상기 측정된 RIPK3의 단백질의 발현수준이 후보물질을 처리하지 않은 대조군보다 감소하면 상기 후보물질을 당뇨병성 신증 치료제로 선택하는 단계를 포함한다. The screening method of the therapeutic agent for diabetic nephropathy of the present invention comprises the steps of treating a candidate substance for treating diabetic nephropathy in isolated cells, isolated tissues or animals other than humans, measuring the expression level of the protein of RIPK3 in the candidate substance-treated group. And selecting the candidate substance as a therapeutic agent for diabetic nephropathy when the measured expression level of the protein of RIPK3 decreases compared to the control group not treated with the candidate substance.

본 발명의 용어, “후보물질”은 통상적인 선정방식에 따라 당뇨병성 신증 치료의 가능성을 지닌 것으로 추정되거나 또는 무작위적으로 선정된 개별적인 핵산, 단백질, 기타 추출물 또는 천연물, 또는 화합물 등이 될 수 있다.The term "candidate" of the present invention may be an individual nucleic acid, protein, other extract or natural product, or a compound that is estimated to have the potential to treat diabetic nephropathy according to a conventional selection method or randomly selected. .

본 발명에서 발현 수준 측정은 RIPK3의 단백질의 발현수준을 측정하는 것일 수 있다. In the present invention, the expression level measurement may be the measurement of the expression level of the RIPK3 protein.

본 발명의 용어 "대조군"이란 당뇨병성 신증 치료제 후보물질을 처리하지 않은 분리된 세포, 분리된 조직 또는 인간을 제외한 동물로 상기 후보물질을 처리한 군과 병렬 관계에 속하는 분리된 세포, 분리된 조직 또는 인간을 제외한 동물을 의미한다.The term "control" of the present invention refers to isolated cells, isolated tissues that are not treated with a candidate substance for diabetic nephropathy, or isolated cells or tissues belonging to a parallel relationship with the group treated with the candidate substance except for humans. Or it means animals other than humans.

본 발명의 “당뇨병성 신증 치료제의 스크리닝 방법”은, 당뇨병성 신증에 RIPK3의 발현이 관련됨을 확인함으로써, RIPK3의 발현을 치료제 후보물질을 처리하지 않은 대조군 세포와 비교하는 방식으로 고안되었다. The "screening method for a therapeutic agent for diabetic nephropathy" of the present invention was devised in a way to compare the expression of RIPK3 with a control cell not treated with a therapeutic agent candidate by confirming that the expression of RIPK3 is related to diabetic nephropathy.

당뇨병성 신증을 예방 또는 치료할 수 있는 후보물질의 부재 하에 분리된 세포, 분리된 조직 또는 인간을 제외한 동물에서의 RIPK3의 단백질의 수준을 측정하고, 또한, 상기 후보물질의 존재 하에서 RIPK3 단백질의 수준을 측정하여 양자를 비교한 후, 상기 후보물질이 존재할 때의 RIPK3의 단백질의 수준이 상기 후보물질의 부존재 하에서의 수준보다 감소시키는 물질을 당뇨병성 신증 예방 또는 치료용 제제로 예측할 수 있다. In the absence of a candidate capable of preventing or treating diabetic nephropathy, the level of RIPK3 protein in isolated cells, isolated tissues, or animals other than humans is measured, and the level of RIPK3 protein in the presence of the candidate material is also measured. After measuring and comparing both, a substance whose protein level of RIPK3 in the presence of the candidate substance decreases compared to the level in the absence of the candidate substance can be predicted as an agent for preventing or treating diabetic nephropathy.

상기 분리된 세포로는 인체에서 분리된 primary 세포일 수 있으며, 구체적으로 신장 근위세관 세포(Kidney proximal tubule cells), 신장 원위세관 세포(Kidney distal tubule cells), 신장 집합관 세포(Kidney collecting duct cells), 신장 사구체족 세포(Kidney glomerulus podocytes), 신사구체 간질세포(Kidney glomerulus mesangial cells), 신장 사구체 내피세포(Kidney glomerulus endothelial cells), 또는 신장 벽 상피 세포(Kidney parietal epithelial cells)를 사용할 수 있다. 또한, HK-2(ATCC® CRL-2190™, Human kidney tubular epithelial cells) 또는 인간 신장 족세포주(Human kidney podocyte cells)와 같이 기존에 확립된 세포주를 사용할 수도 있다.The separated cells may be primary cells isolated from the human body, specifically Kidney proximal tubule cells, Kidney distal tubule cells, Kidney collecting duct cells, Kidney glomerulus podocytes, Kidney glomerulus mesangial cells, Kidney glomerulus endothelial cells, or Kidney parietal epithelial cells can be used. In addition, previously established cell lines such as HK-2 (ATCC® CRL-2190™, Human kidney tubular epithelial cells) or human kidney podocyte cells may be used.

상기에서 기술한 바와 같이, 본 발명은, 당뇨병성 신증 진단용 조성물을 제공함으로서, 당뇨병성 신증 환자에게서 발현이 변화하는 RIPK3의 단백질 또는 그 유전자의 발현 수준을 측정 및 비교하여 당뇨병성 신증의 조기진단 및 질병 정도를 유의적으로 예측 또는 파악할 수 있다.As described above, the present invention provides a composition for diabetic nephropathy diagnosis, by measuring and comparing the expression level of the protein of RIPK3 or its gene whose expression is changed in diabetic nephropathy patients, and early diagnosis of diabetic nephropathy and The degree of disease can be significantly predicted or identified.

도 1은 정상 대조군과 제2형 당뇨병 환자군(정상 알부민뇨군(normoalbuminuria group), 미세알부민뇨군(microalbuminuria group), 단백뇨군(macroalbuminuria group))의 혈청(plasma)에서 RIPK3의 단백질 농도를 비교한 것이다.
도 2는 정상 대조군과 제2형 당뇨병 환자군(정상 알부민뇨군(normoalbuminuria group), 미세알부민뇨군(microalbuminuria group), 단백뇨군(macroalbuminuria group))의 소변(urine)에서 RIPK3의 단백질 농도를 비교한 것이다.
도 3은 전체 제2형 당뇨병 환자에서 RIPK3의 단백질 농도와 연간 소변내의 알부민-크레아틴 비율 변화의 상관관계를 분석한 결과이다.
도 4는 정상 알부민뇨군의 제2형 당뇨병 환자에서 RIPK3의 단백질 농도와 연간 소변내의 알부민-크레아틴 비율 변화의 상관관계를 분석한 결과이다.
도 5는 당뇨환자에서 기저 RIPK3 농도에 따른 신장 기능 저하를 카플란-마이어 곡선으로 분석한 결과이다. 1 is a comparison of the protein concentration of RIPK3 in the serum of a normal control group and a type 2 diabetes patient group (normal albuminuria group, microalbuminuria group, and macroalbuminuria group).
Figure 2 is a comparison of the protein concentration of RIPK3 in the urine of a normal control group and a type 2 diabetes patient group (normal albuminuria group, microalbuminuria group, and macroalbuminuria group).
3 is a result of analyzing the correlation between the protein concentration of RIPK3 and the annual urine albumin-creatine ratio change in all type 2 diabetic patients.
4 is a result of analyzing the correlation between the protein concentration of RIPK3 and the annual urine albumin-creatine ratio change in type 2 diabetes patients in the normal albuminuria group.
5 is a Kaplan-Meier curve analysis of kidney function decline according to baseline RIPK3 concentration in diabetic patients.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 첨부한 도면을 참고로 하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings so that those of ordinary skill in the art can easily implement the present invention. However, the present invention may be implemented in various different forms and is not limited to the embodiments described herein.

<실험예 1> 제 2형 당뇨병 환자의 혈장 및 소변에서 RIPK3 단백질의 발현 <Experimental Example 1> Expression of RIPK3 protein in plasma and urine of type 2 diabetes patients

당뇨병성 신증이 심화될수록 알부민뇨의 수치가 증가하는 것으로 알려져 있다. 따라서 당뇨병성 신증에 따른 RIPK3의 단백질의 수준변화를 확인하기 위해, 상기 당뇨병 환자는 알부민뇨의 기준으로 나누어 각 군의 환자의 혈장(Plasma)에서 RIPK3의 단백질 수준을 분석하였다(도 1). It is known that the level of albuminuria increases as diabetic nephropathy worsens. Therefore, in order to confirm the change in the protein level of RIPK3 according to diabetic nephropathy, the diabetic patients were divided by the criteria of albuminuria and analyzed the protein level of RIPK3 in the plasma of each group of patients (FIG. 1).

정상 대조군(non-diabetic control)의 수는 19명이며, 제2형 당뇨병 환자의 수는 140명이었다. 이중 당뇨병 환자는 알부민뇨의 수준에 따라 정상 알부민뇨군(normoalbuminuria group) 76명, 미세알부민뇨군(microalbuminuria group) 41명, 단백뇨군(macroalbuminuria group) 23명으로 분류하였다. The number of non-diabetic controls was 19, and the number of type 2 diabetic patients was 140. Diabetes patients were classified into 76 normal albuminuria group, 41 microalbuminuria group, and 23 macroalbuminuria group according to the level of albuminuria.

각 환자의 혈장(plasma)에서 RIPK3의 단백질 농도를 분석한 결과, 정상 대조군과 비교하여 당뇨병 환자의 혈장에서 RIPK3의 단백질 농도가 높게 측정되는 것을 확인하였다. As a result of analyzing the protein concentration of RIPK3 in the plasma of each patient, it was confirmed that the protein concentration of RIPK3 was high in the plasma of diabetic patients compared to the normal control.

다음으로 상기의 혈장 분석 환자를 대상으로 소변에서 RIPK3 의 단백질 수준을 분석하였다. 채취된 소변 샘플 중 변성 또는 샘플의 양이 부족한 환자는 분석에서 제외하여, 당뇨병이 없는 정상 대조군 21명과 제2형 당뇨병 환자 116명 소변에서 RIPK3의 단백질 수준을 분석하였다(도 2).Next, the protein level of RIPK3 in urine was analyzed for the above plasma analysis patients. Among the collected urine samples, denatured or insufficiently sampled patients were excluded from the analysis, and protein levels of RIPK3 were analyzed in the urine of 21 normal controls without diabetes and 116 patients with type 2 diabetes (FIG. 2).

당뇨병성 신증에 따른 소변에서의 RIPK3의 단백질의 수준 변화를 확인하기 위해, 상기 당뇨병 환자를 알부민뇨의 수준에 따라 정상 알부민뇨군(normoalbuminuria group) 62명, 미세알부민뇨군(microalbuminuria group) 36명, 단백뇨군(macroalbuminuria group) 18명으로 분류하였다. 소변 내의 RIPK3 단백질 수준은 소변 내의 크래아틴(creatinine) 수준에 맞춰 조정하였다.In order to confirm the change in the protein level of RIPK3 in urine according to diabetic nephropathy, the diabetic patients were treated with 62 normal albuminuria group, 36 microalbuminuria group, and proteinuria group according to the level of albuminuria. (macroalbuminuria group) It was classified into 18 people. The level of RIPK3 protein in urine was adjusted to match the level of creatinine in urine.

분석결과, 혈장 실험과 유사하게 당뇨병 환자의 소변에서 RIPK3 단백질의 발현 수준이 증가하는 것을 확인하였으며, 알부민뇨의 수준이 증가할수록 RIPK3의 단백질 수준 역시 증가함을 확인하였다. As a result of the analysis, it was confirmed that the expression level of RIPK3 protein in the urine of diabetic patients increased, similar to the plasma experiment, and the protein level of RIPK3 was also increased as the level of albuminuria increased.

당뇨병성 신증이 심화될수록 알부민뇨가 증가하는데, 이와 맞추어 RIPK3의 단백질 수준 역시 점차 증가되는 양상을 보임을 확인하였다. As diabetic nephropathy worsened, albuminuria increased, and accordingly, the protein level of RIPK3 also gradually increased.

따라서 당뇨병성 신증이 심화될수록 RIPK3의 단백질의 수준이 증가하는 바, RIPK3의 단백질 수준을 측정하여 당뇨병성 신증의 진단에 활용할 수 있다.Therefore, as diabetic nephropathy worsens, the protein level of RIPK3 increases, and the protein level of RIPK3 can be measured and used for diabetic nephropathy diagnosis.

<실험예 2> 당뇨병 환자에서 혈장 내의 RIPK 단백질 농도에 따른 알부민뇨의 변화 또는 신기능의 저하 <Experimental Example 2> Change in albuminuria or decrease in renal function according to the concentration of RIPK protein in plasma in diabetic patients

다음으로 RIPK3의 단백질과 당뇨병성 신증의 관계를 확인하고자, 상기 환자들을 대상으로 알부민뇨와 신기능을 장기적으로 추가 관찰하였다. Next, in order to confirm the relationship between the protein of RIPK3 and diabetic nephropathy, albuminuria and renal function were additionally observed in the patients.

도 3 내지 4은 혈장 내의 RIPK3의 농도와 연간 소변내의 알부민-크레아틴 비율 변화(urine albumin-to-creatinine-ratio, UACR)의 상관관계를 분석한 결과이다. 3 to 4 are results of analyzing the correlation between the concentration of RIPK3 in plasma and the annual urine albumin-creatin ratio change (urine albumin-to-creatinine-ratio, UACR).

도 3은 전체 제2형 당뇨병 환자에서 RIPK3 농도에 따른 알부민-크레아틴 비율 변화를 분석한 결과이다. 분석결과, 전체 제2형 당뇨병 환자의 혈장에서 RIPK3 농도가 높을수록 알부민-크레아틴 비율의 증가 속도가 높음을 확인하였으며, 추가적으로 도 4에서 정상 알부민뇨인 당뇨환자, 즉 기존에 당뇨병성 신증이 명확하지 않았던 당뇨환자에서 역시 혈장의 RIPK3의 단백질 농도가 높을수록 소변내의 알부민-크레아틴 비율의 증가가 빠름을 확인하였다. 3 is a result of analyzing the change in albumin-creatine ratio according to the RIPK3 concentration in all type 2 diabetic patients. As a result of the analysis, it was confirmed that the higher the RIPK3 concentration in the plasma of all type 2 diabetic patients, the higher the rate of increase in the albumin-creatine ratio, and in addition, in FIG. 4, diabetic patients with normal albuminuria, i.e. In diabetic patients, the higher the plasma RIPK3 protein concentration, the faster the urine albumin-creatine ratio increased.

도 5에서는 기저 RIPK3 농도에 따른 신기능 저하를 확인하고자, 기저 RIPK3의 농도에 따라 삼분위수로 나누어 신장병 진행(renal progression)을 분석하였다. 도 5은 신장병 진행(renal progression)을 사건(event)으로 지정하여 생존분석(survival analysis)을 시행한 후, 생존 곡선을 표시한 것이다. 신장병 진행(renal progression) 사건은 만성신장 질환 단계 변화에 따라 추정된 사구체 여과속도(estimated glomerular filtration rate, eGFR)가 지속적으로 25% 감소되는 경우로 정의하였다. Y축의 숫자는 해당 시점에 사건(신장병 진행)이 발생하지 않을 확률을 의미한다. 다시 말해, 신장병 진행이 전혀 발생하지 않은 경우가 1.00에 해당하고 사건이 하나하나 발생함에 따라 점차 0.00에 가까워지게 된다.In FIG. 5, in order to confirm the decrease in renal function according to the basal RIPK3 concentration, renal progression was analyzed by dividing it into a third quartile according to the basal RIPK3 concentration. FIG. 5 shows a survival curve after a survival analysis was performed by designating a renal progression as an event. Renal progression events were defined as cases in which the estimated glomerular filtration rate (eGFR) was continuously decreased by 25% according to the stage change of chronic kidney disease. The number on the Y-axis means the probability that an event (kidney disease progression) will not occur at that time. In other words, 1.00 is the case where no progression of kidney disease has occurred, and gradually approaches 0.00 as each event occurs.

분석결과, 기저 RIPK3 단백질의 수준이 높을수록 신장병 진행이 발생할 가능성이 높음을 확인하였다. 즉, 신장 기능이 나빠지기 이전의 기저 RIPK3 농도를 이용하여 앞으로의 신장 기능의 악화를 예상할 수 있었다. 따라서 당뇨병성 신증의 조기 정밀 진단 지표로 RIPK3을 활용할 수 있다.As a result of the analysis, it was confirmed that the higher the level of the basal RIPK3 protein, the higher the likelihood of developing kidney disease. That is, by using the baseline RIPK3 concentration before the renal function worsened, it was possible to predict the deterioration of renal function in the future. Therefore, RIPK3 can be used as an early and precise diagnostic index for diabetic nephropathy.

Claims (12)

RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA 수준을 측정하는 제제를 포함하는 당뇨병성 신증 진단용 조성물.A composition for diabetic nephropathy diagnosis comprising an agent for measuring the mRNA level of a protein of RIPK3 or a gene thereof. 제1항에 있어서,
상기 유전자의 mRNA 수준을 측정하는 제제는 상기 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머 쌍, 프로브 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드인 것인, 당뇨병성 신증 진단용 조성물.The method of claim 1,
The agent for measuring the mRNA level of the gene is a primer pair, a probe or an antisense oligonucleotide that specifically binds to the gene, diabetic nephropathy diagnostic composition. 제1항에 있어서,
상기 단백질 수준을 측정하는 제제는 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 것인, 당뇨병성 신증 진단용 조성물.The method of claim 1,
The formulation for measuring the protein level will comprise an antibody that specifically binds to the protein, diabetic nephropathy diagnostic composition. 제1항에 따른 조성물을 포함하는, 당뇨병성 신증 진단용 키트.A kit for diabetic nephropathy diagnosis comprising the composition according to claim 1. 제4항에 있어서,
상기 키트는 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction) 키트, DNA 칩 키트, ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) 키트, 단백질 칩 키트 또는 래피드(rapid) 키트인 것인, 당뇨병성 신증 진단용 키트.The method of claim 4,
The kit is a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) kit, a DNA chip kit, an ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) kit, a protein chip kit, or a rapid kit, which is a kit for diabetic nephropathy diagnosis. 생물학적 시료로부터 RIPK3의 단백질 또는 이의 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
상기 단계에서 측정된 단백질의 발현 수준 또는 유전자의 발현 수준을 정상 대조구 시료와 비교하는 단계를 포함하는, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법.Measuring the expression level of the protein of RIPK3 or its gene from the biological sample; And
Comprising the step of comparing the expression level of the protein or the expression level of the gene measured in the step with a normal control sample, a method of providing information for diabetic nephropathy diagnosis. 제6항에 있어서,
당뇨병성 신증 의심 개체의 분리된 시료의 상기 단백질의 발현 수준 또는 유전자의 발현 수준이, 정상 대조군 시료의 단백질의 발현 수준 또는 유전자의 발현 수준보다 높은 경우 당뇨병성 신증으로 판단하는 것을 특징으로 하는, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법.The method of claim 6,
Diabetic nephropathy, characterized in that it is determined as diabetic nephropathy when the protein expression level or the gene expression level in the isolated sample of the suspected diabetic nephropathy is higher than the protein expression level or the gene expression level of the normal control sample. How to provide information for diagnosing sex nephropathy. 제6항에 있어서,
상기 유전자의 발현 수준은 상기 유전자의 mRNA 발현 수준인, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법.The method of claim 6,
The expression level of the gene is the mRNA expression level of the gene, a method of providing information for diabetic nephropathy. 제8항에 있어서,
상기 mRNA 발현 수준 측정은 역전사 중합효소반응, 경쟁적 역전사 중합효소반응, 실시간 역전사 중합효소반응, RNase 보호 분석법, 노던 블랏팅 또는 DNA 칩에 의한 것인, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법.The method of claim 8,
The mRNA expression level measurement is by reverse transcription polymerase reaction, competitive reverse transcription polymerase reaction, real-time reverse transcription polymerase reaction, RNase protection assay, Northern blotting or DNA chip, the method of providing information for diabetic nephropathy diagnosis. 제6항에 있어서,
상기 단백질 발현 수준 측정은 해당 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하는 것인, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법.The method of claim 6,
The measurement of the protein expression level is to use an antibody that specifically binds to the corresponding protein, a method of providing information for diabetic nephropathy. 제6항에 있어서,
상기 단백질 발현 수준 측정은 단백질 칩 분석, 면역측정법, 리간드 바인딩 어세이, MALDI-TOF(Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, SELDI-TOF(Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, 방사선 면역분석, 방사 면역 확산법, 오우크테로니 면역 확산법, 로케트 면역전기영동, 면역조직화학(immunohistochemistry) 분석, 면역세포화학(immunocytochemistry) 분석, 보체 고정 분석법, 2차원 전기영동 분석, 액상 크로마토그래피-질량분석(liquid chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS), LC-MS/MS(liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏, 및 ELISA(enzyme linked immunosorbentassay)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는, 당뇨병성 신증 진단을 위한 정보의 제공 방법.The method of claim 6,
The protein expression level measurement is protein chip analysis, immunoassay, ligand binding assay, MALDI-TOF (Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, SELDI-TOF (Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry). Analysis, radioimmunoassay, radioactive immunodiffusion method, octeroni immunodiffusion method, rocket immunoelectrophoresis, immunohistochemistry analysis, immunocytochemistry analysis, complement fixation analysis, two-dimensional electrophoresis analysis, liquid chromatography Using one selected from the group consisting of liquid chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS), liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry (LC-MS/MS), Western blot, and enzyme linked immunosorbentassay (ELISA) A method of providing information for diabetic nephropathy diagnosis, characterized in that it is carried out by doing this. 분리된 세포, 분리된 조직 또는 인간을 제외한 동물에 당뇨병성 신증 치료제 후보물질을 처리하는 단계;
상기 후보물질 처리군에서 RIPK3의 단백질의 발현수준을 측정하는 단계; 및
상기 측정된 RIPK3의 단백질의 발현수준이 후보물질을 처리하지 않은 대조군보다 감소하면 상기 후보물질을 당뇨병성 신증 치료제로 선택하는 단계를 포함하는, 당뇨병성 신증 치료제의 스크리닝 방법.Treating the isolated cells, isolated tissues, or animals other than humans with a candidate substance for treating diabetic nephropathy;
Measuring the expression level of the protein of RIPK3 in the candidate substance-treated group; And
A method for screening a therapeutic agent for diabetic nephropathy comprising the step of selecting the candidate substance as a therapeutic agent for diabetic nephropathy when the measured expression level of the protein of RIPK3 decreases compared to a control group not treated with the candidate substance.
KR1020190001075A 2019-01-04 2019-01-04 A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof KR102185987B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190001075A KR102185987B1 (en) 2019-01-04 2019-01-04 A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190001075A KR102185987B1 (en) 2019-01-04 2019-01-04 A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20200085390A KR20200085390A (en) 2020-07-15
KR102185987B1 true KR102185987B1 (en) 2020-12-04

Family

ID=71603536

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020190001075A KR102185987B1 (en) 2019-01-04 2019-01-04 A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102185987B1 (en)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112083055A (en) * 2020-08-25 2020-12-15 中南大学湘雅二医院 Protein mass spectrum detection method for differential expression in diabetic nephropathy serum specimen

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010040571A2 (en) 2008-10-10 2010-04-15 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Method for a genome wide identification of expression regulatory sequences and use of genes and molecules derived thereof for the diagnosis and therapy of metabolic and/or tumorous diseases
WO2017100700A2 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Peptides for renal therapy

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101240208B1 (en) * 2010-06-09 2013-03-06 고려대학교 산학협력단 Proteinic markers for diagnosing type I diabetic nephropathy
WO2017022962A1 (en) * 2015-07-07 2017-02-09 가톨릭대학교 산학협력단 Composition for preventing or treating immune disease, comprising ripk inhibitor as active ingredient

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010040571A2 (en) 2008-10-10 2010-04-15 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Method for a genome wide identification of expression regulatory sequences and use of genes and molecules derived thereof for the diagnosis and therapy of metabolic and/or tumorous diseases
WO2017100700A2 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Peptides for renal therapy

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Laboratory Investigation, 2018, Vol. 98, pp 63-78.
Mitsuru Imamura et al., 'RIPK3 promotes kidney fibrosis via AKT-dependent ATP citrate lyase', JCI Insight, 2018, Vol. 3, pp 1-14. 1부.*

Also Published As

Publication number Publication date
KR20200085390A (en) 2020-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20180106817A1 (en) Protein biomarkers and therapeutic targets for renal disorders
EP2582840B1 (en) Biomarkers for determination of temporal phase of acute kidney injury
KR101782768B1 (en) Biomarker SBP1 for early diagnosis of Renal disorders and their use
KR101391506B1 (en) Marker For Diagnosing Diabetic Retinopathy and Use Thereof
KR102185987B1 (en) A biomarker for diagnosing diabetic nephropathy comprising RIPK3 and the uses thereof
KR101343286B1 (en) Markers for Early Diagnosing of Diabetic Retinopathy and Use Thereof
KR102355835B1 (en) Test method enabling specific diagnosis of early conditions of diabetic nephropathy
KR20130009204A (en) Marker for diagnosing diabetic retinopathy and use thereof
KR101334123B1 (en) Composition for diagnosis of small cell lung cancer and diagnosis kit of small cell lung cancer
KR102232200B1 (en) Alzheimer’s disease diagnostic biomarker
KR101343285B1 (en) Markers for Early Diagnosing of Diabetic Retinopathy and Use Thereof
US9945874B2 (en) Marker for diagnosing diabetic retinopathy and use thereof
KR102009519B1 (en) Marker for diagnosing diabetic retinopathy and use thereof
KR101343137B1 (en) Markers for Early Diagnosing of Diabetic Retinopathy and Use Thereof
KR102346864B1 (en) Biomarker composition for diagnosing or prognostic analysis of bladder cancer, kit comprising the same and method for diagnosing bladder cancer using the same
KR102131860B1 (en) Biomarker Composition for Diagnosing Colorectal Cancer Specifically Binding to Arginine-methylated Gamma-glutamyl Transferase 1
US8394639B2 (en) Biomarkers for renal disease
KR101903230B1 (en) A composition for diagnosing vascular endothelial cell dysfunction using KCa2.3 channel protein and use thereof
US20230045066A1 (en) Biomarkers for diagnosing breast cancer and uses thereof
KR101927349B1 (en) Method for screening nasolacrimal duct obstruction agents by measuring the level of estrogen receper and aromatase
KR101927346B1 (en) Method for screening epiphora agents by measuring the level of estrogen receptor and aromatase
KR101927348B1 (en) Estrogen receptor and aromatase marker for diagnosing nasolacrimal duct obstruction and the uses thereof
KR101927347B1 (en) Kit for diagnosing epiphora by measuring the level of estrogen receptor and aromatase
KR101927353B1 (en) Kit for diagnosing epiphora
KR101927351B1 (en) Estrogen receptor and aromatase marker for diagnosing nasolacrimal duct obstruction and the uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
G170 Publication of correction