KR102146467B1 - Micro gravity culture apparatus - Google Patents

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Abstract

본 발명은 미세 중력 배양 장치 및 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 미세 중력 조직 배양 장치에 있어서, 완전한 무중력 상태로 세포를 배양하여, 세포 또는 조직을 배양함에 있어서, 무중력 상태를 더 완벽하게 재현하여 배양하는 방법 및 장치에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 배양 장치는 인위적으로 중력을 발생시켜 무중력 환경을 형성하는 중력 발생 장치, 멤브레인막으로 구성되고 내부에 배양액이 채워지는 배양부, 상기 배양부를 고정하고 상기 중력 발생 장치에 연결하는 연결부 및 상기 배양부 내부에 배양액상에 부유하도록 포함되고, 세포가 부착되어 배양되는 지지체를 포함하는 구성을 개시한다.The present invention relates to a microgravity culture apparatus and method, and more particularly, in a microgravity tissue culture apparatus, by culturing cells in a completely weightless state, in culturing cells or tissues, by more completely reproducing the zero gravity state It relates to a method and apparatus for culturing. The microgravity culture device according to an embodiment of the present invention is a gravity generating device that artificially generates gravity to form a zero-gravity environment, a culture section composed of a membrane membrane and filled with a culture solution, and fixing the culture section and generating the gravity. Disclosed is a configuration including a connection part connected to the device and a support body on which cells are attached and cultured, which are included so as to be suspended in a culture solution inside the culture part.

Description

미세 중력 배양 장치{MICRO GRAVITY CULTURE APPARATUS}Micro-gravity culture device {MICRO GRAVITY CULTURE APPARATUS}

본 발명은 미세 중력 배양 장치 및 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 미세 중력 조직 배양 장치에 있어서, 완전한 무중력 상태로 세포를 배양하여, 세포 또는 조직을 배양함에 있어서, 무중력 상태를 더 완벽하게 재현하여 배양하는 방법 및 장치에 관한 것이다.The present invention relates to a microgravity culture apparatus and method, and more particularly, in a microgravity tissue culture apparatus, by culturing cells in a completely weightless state, in culturing cells or tissues, by more completely reproducing the zero gravity state It relates to a method and apparatus for culturing.

인간은 다양한 자연환경에 노출된다. 더위 또는 추위와 같은 온도의 차이뿐만 아니라 습도, 시차, 고저, 물속 등이 있고 최근에는 공기의 상태도 자연환경의 변인에 포함된다. 이러한 다양한 환경 중에서도 중력은 거의 모든 생물계 시스템에 영향을 미칠 것으로 예상되고 있으며, 이것은 아직 완벽하게 이 기전이 밝혀지지 않은 상태이다. 따라서, 중력이 생물계 시스템에 미치는 영향에 관한 연구는 핵심적인 화두이고, 최근 미세중력을 이용하여 실험을 진행한 논문이 많이 나오고 있으며 다양한 유형의 시스템 들이 지구 표면에서 미세 중력을 모방하기 위해 개발되어왔다. 그 중에서도 3차원 클리노스텟은 생명과학관련 분야의 실험에서 흔하게 사용되어 오고 있다. 이 클리노스텟 장비는 2가지 축을 가지고 있으며 일정한 RPM을 적용시켜 여러 가지 조건의 환경을 설정할 수 있으며 한가지 조건이 아닌 여러 가지의 조건의 환경을 설정할 수가 있다. Humans are exposed to various natural environments. There are not only differences in temperature such as hot or cold, but also humidity, jet lag, elevation, and underwater, and recently, air conditions are also included in the variables of the natural environment. Among these diverse environments, gravity is expected to affect almost all biological systems, and this mechanism has not yet been fully elucidated. Therefore, research on the effect of gravity on biological systems is a key topic, and many papers have been experimented using microgravity recently, and various types of systems have been developed to mimic microgravity on the Earth's surface. . Among them, 3D clinostat has been commonly used in experiments in the field of life science. This Clinostat equipment has two axes, and it is possible to set the environment of various conditions by applying a constant RPM, and it can set the environment of various conditions rather than one condition.

암의 치료에 있어서 가장 큰 문제는 초기종양에 의한 사망이 아니라 암세포의 전이에 의한 문제가 더 중요하다. 따라서 암 치료를 위한 새로운 전략의 고안과 효과적인 전이 억제를 위해 암세포의 분아 증식(Proliferation)과 이주(migration)의 변화에 대해 많은 연구가 진행 되어 왔다. 암세포의 침습(invasion)과 이주(migration)에서 중요한 부분은 암세포가 정상적으로 통과할 수 없는 세포외기질(ECM)과 기저막(basement membrane)의 단백질의 분해이다. 암세포는 이러한 단백질막을 분해하기 위해 많은 종류의 단백질분해효소를 분비하는데, 특히 세포외기질과 기저막의 주성분을 분해하는데 중요한 기질 금속단백질분해효소(matrix metalloproteinase, MMP)가 있다. 따라서 MMP 저해제는 암의 분아 증식과 이주를 효과적으로 막을 수 있는 새로운 표적으로 많은 연구자들이 연구를 집중하고 있다. 최근 연구는 배양백(Culture bag)과 클리노스텟 장비를 사용하여 미세중력 상황에서 암의 전이에 중요한 MMP의 발현과 활성화 및 MMP의 저해제인 TIMP(tissue inhibitor of metalloproteinase)의 변화를 인간 폐 암세포에서 확인해 미세중력이 암세포 전이에 어떤 영향을 주는지를 연구한다.The biggest problem in the treatment of cancer is not death by early tumors, but more important by metastasis of cancer cells. Therefore, many studies have been conducted on changes in proliferation and migration of cancer cells in order to devise new strategies for cancer treatment and to effectively inhibit metastasis. An important part of cancer cell invasion and migration is the degradation of proteins in the extracellular matrix (ECM) and basement membrane, which cancer cells cannot normally pass through. Cancer cells secrete many types of proteolytic enzymes to degrade these protein membranes. In particular, there is a matrix metalloproteinase (MMP), which is important for decomposing the main components of the extracellular matrix and the basement membrane. Therefore, MMP inhibitors are focusing their research as a new target that can effectively prevent the proliferation and migration of cancer. In a recent study, the expression and activation of MMP, which is important for cancer metastasis, and the change of tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP), an inhibitor of MMP, were investigated in human lung cancer cells using culture bag and clinostet equipment. Check and study how microgravity affects cancer cell metastasis.

그러나 기존의 미세 중력 세포 배양 장치(DCC plate)는 멤프레인 막에 세포를 부착 및 성장시켜 세포를 배양하는 바 완벽한 무중력 상태를 만들어 낼 수 없어 중력이 미치는 정확한 효과를 알 수 없다는 단점을 가지고 있다(Biological Sciences in Space, Vol.28, 1-5, 2014).However, the conventional microgravity cell culture apparatus (DCC plate) has the disadvantage of not knowing the exact effect of gravity because it cannot create a perfect weightless state because cells are cultivated by attaching and growing cells to the membrane membrane ( Biological Sciences in Space, Vol. 28, 1-5, 2014).

따라서, 중력이 세포에 미치는 영향을 알기 위해 완벽한 무중력 상태를 만들어 주는 것이 필요한 실정이다.Therefore, it is necessary to create a perfect zero-gravity state in order to know the effect of gravity on cells.

따라서, 본 발명의 목적은 보다 더 완전한 무중력 환경을 제공할 수 있는 미세 중력 배양 장치를 제공하는데 있다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a microgravity culture apparatus capable of providing a more complete zero gravity environment.

상기한 문제를 해결하기 위한 본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 세포 배양 장치는 인공 중력을 발생시켜 무중력 환경을 형성하는 중력 발생 장치, 멤브레인막으로 구성되고 내부에 배양액이 채워지는 배양부, 상기 배양부를 고정하고 상기 중력 발생 장치에 연결하는 연결부 및 상기 배양부 내부에 배양액상에 부유하도록 포함되고, 세포가 부착되어 배양되는 지지체를 포함할 수 있다.The microgravity cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention for solving the above problem is a gravity generating device that generates artificial gravity to form a zero-gravity environment, a culture unit composed of a membrane membrane and filled with a culture solution, the It may include a connection part for fixing the culture part and connecting to the gravity generating device, and a support body which is included so as to be suspended in a culture liquid inside the culture part, and in which cells are attached and cultured.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 지지체는 디스크 형태일 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the support may have a disk shape.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 지지체는 3차원 구조체일 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the support may be a three-dimensional structure.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 중력 발생 장치는,According to an embodiment of the present invention, the gravity generating device,

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부를 회전시켜 인위적으로 중력을 발생시켜 무중력환경을 형성할 수 있다. According to an embodiment of the present invention, the gravity generating device may artificially generate gravity by rotating the culture unit to form a zero gravity environment.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 배양부 내부와 물질교환을 하는 교환관을 더 포함하고, 상기 연결부는 내부에 관이 형성되어 있고 상기 교환관은 상기 연결부 내부 관에 삽입될 수 있다.According to an embodiment of the present invention, it further includes an exchange tube for exchanging material with the inside of the culture part, the connection part has a tube formed therein, and the exchange tube may be inserted into the inner tube of the connection part.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 배양부의 배양액이 빠져나가지 않도록 상기 배양부의 입구를 밀봉하는 밀봉부;를 더 포함할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, a sealing portion for sealing the entrance of the culture portion so that the culture medium of the culture portion does not escape; may further include.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 연결부는, 상기 배양부의 회전축의 기울기를 조정할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the connection part may adjust the tilt of the rotation axis of the culture part.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부에 중력이 가해지는 방향 및 크기를 감지할 수 있는 중력 센서를 더 포함할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the gravity generating device may further include a gravity sensor capable of detecting a direction and a size in which gravity is applied to the culture unit.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 중력센서에서 감지한 중력의 방향 및 크기에 따라 상기 배양부에 발생시키는 인공 중력 및 상기 배양부의 기울기를 조절할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the artificial gravity generated in the culture section and the inclination of the culture section may be adjusted according to the direction and magnitude of the gravity detected by the gravity sensor.

본 발명의 일 실시 예에 따르면, 상기 미세 중력 배양 장치는 24시간 이상 세포 배양을 하는 것일 수 있다.According to an embodiment of the present invention, the microgravity culture device may be a cell culture for 24 hours or more.

본 발명에 따르면, 미세 중력 세포 배양 장치에서 보다 더 완전한 무중력 환경에서 세포를 배양할 수 있다. According to the present invention, cells can be cultured in a more complete zero gravity environment than in a microgravity cell culture apparatus.

또한, 배양부의 기울기 등을 조절해 세포 배양시 중력의 방향 및 크기 변화에 대응해 무중력 환경을 형성할 수 있는 장치를 제공할 수 있다. In addition, it is possible to provide a device capable of forming a zero gravity environment in response to changes in the direction and size of gravity during cell culture by adjusting the inclination of the culture unit.

한편, 본 발명의 효과는 이상에서 언급한 효과들로 제한되지 않으며, 이하에서 설명할 내용으로부터 통상의 기술자에게 자명한 범위 내에서 다양한 효과들이 포함될 수 있다.Meanwhile, the effects of the present invention are not limited to the above-mentioned effects, and various effects may be included within a range that will be apparent to a person skilled in the art from the contents to be described below.

도 1은 기존의 세포 배양 장치의 일 예시이다.
도 2는 기존 세포 배양 장치의 배양부의 일 예시이다.
도 3은 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치의 사시도이다.
도 4는 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치의 일 예시이다.
도 5는 본 본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부의 사시도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부 내에 포함되는 지지체의 일 예시이다.
도 7 및 도 8은 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치와 기존 장치에 따른 세포 생장을 비교한 결과이다.
도 9 내지 도 11은 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치와 기존 장치에 따른 세포 생장을 RNA 레벨에서 확인한 결과 그래프이다.1 is an example of a conventional cell culture device.
2 is an example of a culture unit of an existing cell culture device.
3 is a perspective view of a cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention.
4 is an example of a cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention.
5 is a perspective view of a culture unit according to an embodiment of the present invention.
6 is an example of a support included in the culture unit according to an embodiment of the present invention.
7 and 8 are results of comparing the cell growth according to the cell culture device according to an embodiment of the present invention and the conventional device.
9 to 11 are graphs of results of confirming cell growth according to the cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention and the existing apparatus at the RNA level.

이하, 첨부된 도면들을 참조하여 본 발명에 따른 '미세 중력 배양 장치 및 방법'를 상세하게 설명한다. 설명하는 실시 예들은 본 발명의 기술 사상을 당업자가 용이하게 이해할 수 있도록 제공되는 것으로 이에 의해 본 발명이 한정되지 않는다. 또한, 첨부된 도면에 표현된 사항들은 본 발명의 실시 예들을 쉽게 설명하기 위해 도식화된 도면으로 실제로 구현되는 형태와 상이할 수 있다.Hereinafter, a'fine gravity culture apparatus and method' according to the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. The described embodiments are provided so that those skilled in the art can easily understand the technical idea of the present invention, and the present invention is not limited thereto. In addition, matters expressed in the accompanying drawings are schematic drawings for easy explanation of embodiments of the present invention and may be different from the actual implementation form.

한편, 이하에서 표현되는 각 구성부는 본 발명을 구현하기 위한 예일 뿐이다. 따라서, 본 발명의 다른 구현에서는 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않는 범위에서 다른 구성부가 사용될 수 있다. Meanwhile, each component expressed below is only an example for implementing the present invention. Accordingly, in other implementations of the present invention, other components may be used without departing from the spirit and scope of the present invention.

또한, 각 구성부는 순전히 하드웨어 또는 소프트웨어의 구성만으로 구현될 수도 있지만, 동일 기능을 수행하는 다양한 하드웨어 및 소프트웨어 구성들의 조합으로 구현될 수도 있다. 또한, 하나의 하드웨어 또는 소프트웨어에 의해 둘 이상의 구성부들이 함께 구현될 수도 있다. In addition, each component may be implemented with purely hardware or software, but may be implemented with a combination of various hardware and software components that perform the same function. In addition, two or more components may be implemented together by one piece of hardware or software.

또한, 어떤 구성요소들을 '포함'한다는 표현은, '개방형'의 표현으로서 해당 구성요소들이 존재하는 것을 단순히 지칭할 뿐이며, 추가적인 구성요소들을 배제하는 것으로 이해되어서는 안 된다. In addition, the expression'including' certain elements is an expression of'open type' and simply refers to the existence of the corresponding elements, and should not be understood as excluding additional elements.

도 1은 기존의 세포 배양 장치의 일 예시이다.1 is an example of a conventional cell culture device.

도 1을 참조하면, 기존의 세포 배양 장치는 단단한 소재로 구성되는 배양부에 배양액을 체우고 외벽에 세포를 부착시켜 세포를 배양했다. 상기 배양부는 외부와 물질교환이 가능하고 세포가 고정되어 안정적으로 배양될 수 있으나 무중력 환경을 만들어 주더라도 세포가 상기 배양부의 외부에 고정되어 있어 무중력 환경을 완벽히 구성할 수 없다는 단점이 있다.Referring to FIG. 1, in the conventional cell culture apparatus, the cells were cultured by filling the culture solution in a culture unit made of a hard material and attaching the cells to the outer wall. The culture unit is capable of exchanging substances with the outside, and the cells are fixed to be cultivated stably, but there is a disadvantage in that the cells are fixed outside the culture unit even if a zero gravity environment is created, so that a zero gravity environment cannot be completely configured.

도 2는 기존 세포 배양 장치의 배양부의 일 예시이다.2 is an example of a culture unit of an existing cell culture device.

도 2를 참조하면, 기존의 세포 배양 장치의 배양부는 가스교환이 가능한 멤브레인막(201)을 포함할 수 있다. 상기 멤브레인막(201)은 상기 배양부의 외벽 형성할 수 있다. 상기 멤브레인막(201)은 상기 배양부의 외벽을 형성하고 내부에 배양액(203)이 주입될 수 있다. 상기 기존의 세포 배양 장치의 배양부는 내부에 상기 멤브레인막(201)에 세포(202)가 부착되어 배양될 수 있다. 세포(202)는 부유하지 않고 특정 위치에 부착되어 지지되어야 생장이 이루어질 수 있다. 따라서 상기 세포(202)는 상기 멤브레인막(201)에 부착되어 뿌리를 내리면 세포가 생장하면서 발생하는 가스와 필용한 가스를 상기 멤브레인막(201)을 통해 교환하며 생장이 이루어 졌다. 따라서 상기 배양부에 발생하는 인공 중력에 의해 무중력 상태를 만들어도 그 효과를 완벽하게 적용할 수 없었다.Referring to FIG. 2, the culture unit of the conventional cell culture apparatus may include a membrane membrane 201 capable of gas exchange. The membrane layer 201 may form an outer wall of the culture unit. The membrane layer 201 may form an outer wall of the culture unit and a culture solution 203 may be injected therein. The culture unit of the conventional cell culture apparatus may be cultured by attaching the cells 202 to the membrane membrane 201 therein. The cells 202 are not floating and can be grown only when they are attached and supported at a specific location. Therefore, when the cells 202 attach to the membrane membrane 201 and take root, the gas generated while the cells grow and the gas required are exchanged through the membrane membrane 201 to grow. Therefore, even if the weightless state was created by the artificial gravity generated in the culture unit, the effect could not be fully applied.

도 3은 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치의 사시도이다.3 is a perspective view of a cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention.

도 3으 참조하면, 본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 배양 장치는 배양부(301), 연결부(302), 지지체(303) 및 교환관(304)을 포함할 수 있다. Referring to FIG. 3, the microgravity culture apparatus according to an embodiment of the present invention may include a culture unit 301, a connection unit 302, a support 303, and an exchange tube 304.

상기 배양부(301)에서 세포 배양이 이루어질 수 있다. 상기 배양부(301)는 내부에 배양액이 주입될 수 있고, 상기 배양액이 내부에 포함된 상태에서 밀봉 또는 밀폐될 수 있다. 상기 배양부(301)는 멤브레인막으로 구성될 수 있다. 상기 배양부(301)는 일부 또는 전체가 멤브레인막으로 구성될 수 있다. 상기 배양부(301)는 사면이 멤브레인막으로 구성될 수 있고, 외부와 물질 교환이 이루어질 수 있다. 상기 교환되는 물질은 기체를 포함할 수 있다. 상기 기체는 산소 및 이산화탄소를 포함할 수 있고 이에 한정되지 않고 세포 배양에서 발생하거나 요구될 수 있는 모든 기체를 포함할 수 있다. 상기 배양부(301)는 내부에 세포 배양이 이루어질 수 있다. 상기 배양부(301)는 중력 발생 장치에 연결되어 상기 중력 발생 장치가 인위적으로 발생시키는 인공중력의 영향을 받을 수 있다. 상기 배양부(301)는 인공중력의 영향으로 중력이 조절된 상태에서 세포 배양을 할 수 있다. 상기 배양부(301)는 인공중력의 영향으로 미세 중력 상태에서 세포 배양을 할 수 있다. 상기 배양부(301)는 인공중력의 영향으로 무중력 상태에서 세포 배양을 할 수 있다.Cell culture may be performed in the culture unit 301. The culture unit 301 may be injected with a culture solution therein, and may be sealed or sealed while the culture solution is contained therein. The culture unit 301 may be formed of a membrane membrane. The culture unit 301 may be partially or entirely composed of a membrane membrane. The culture unit 301 may be formed of a membrane membrane on the slope, and material exchange with the outside may be performed. The material to be exchanged may include gas. The gas may include oxygen and carbon dioxide, but is not limited thereto, and may include any gas that may be generated or required in cell culture. The culture unit 301 may culture cells therein. The culture unit 301 is connected to a gravity generating device and may be affected by artificial gravity artificially generated by the gravity generating device. The culture unit 301 may culture cells in a state in which gravity is controlled under the influence of artificial gravity. The culture unit 301 may culture cells in a microgravity state under the influence of artificial gravity. The culture unit 301 may culture cells in a zero gravity state under the influence of artificial gravity.

상기 연결부(302)는 상기 배양부(301)를 고정할 수 있다. 상기 연결부(302)는 단수 또는 복수로 포함될 수 있다. 상기 연결부(302)는 상기 배양부(301)를 중력 발생 장치에 연결할 수 있다. 상기 연결부(302)는 상기 배양부(301)가 회전하도록 할 수 있다. 상기 연결부(302)는 상기 배양부(301)의 일측면 또는 양측면에 결합해 상기 배양부(301)를고정할 수 있다. 상기 연결부(302) 상기 배양부(301)와 결합해 상기 배양부(301)를 회전시킬 수 있다. 상기 연결부(302)는 관절부를 포함할 수 있다. 상기 연결부(302)는 개별적으로 복수개의 관절부를 포함할 수 있고, 상기 관절부를 움직여 각도 및 방향을 자유롭게 조절 또는 변경할 수 있다. 상기 연결부(302)는 상기 배양부(301)의 각도, 방향 또는 기울기를 조절할 수 있다. 상기 연결부(302)는 상기 배양부(301)의 각도, 방향 또는 기울기를 조절해 3차원상의 배치를 조절할 수 있다. The connection part 302 may fix the culture part 301. The connection part 302 may be included in a single or plural number. The connection part 302 may connect the culture part 301 to a gravity generating device. The connection part 302 may allow the culture part 301 to rotate. The connection portion 302 may be coupled to one side or both sides of the culture portion 301 to fix the culture portion 301. The connection part 302 may be combined with the culture part 301 to rotate the culture part 301. The connection part 302 may include a joint part. The connection part 302 may individually include a plurality of joint parts, and the angle and direction may be freely adjusted or changed by moving the joint part. The connection part 302 may adjust the angle, direction or inclination of the culture part 301. The connection part 302 may adjust the three-dimensional arrangement by adjusting the angle, direction or inclination of the culture part 301.

상기 지지체(303)는 상기 배양부(301) 내에 포함될 수 있다. 상기 배양부(301)는 유입구를 포함할 수 있고 상기 지지체(303)는 상기 유입구를 통해 상기 배양부(301) 내에 삽입될 수 있다. 상기 지지체(303)는 배양되는 세포가 부착될 수 있다. 상기 지지체(303)는 상기 배양되는 세포가 부착되어 상기 배양부(301) 내부에서 배양액 중에 부유할 수 있다. 상기 지지체(303)는 2차원 구조 또는 3차원 구조를 가질 수 있다. 상기 지지체(303)는 2차원 디스크 형태를 가질 수 있다. 상기 지지체(303)는 3차원 구조체 형태를 가질 수 있다. 상기 2차원 디스크 형태의 지지체(303) 원판 형태로 구성될 수 있고, 양 면뿐만 아니라 원호에도 세포가 부착되어 생장할 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 육면체의 모서리만 연결한 골조 형태를 가질 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 육면체의 모서리 골조를 복수개 결합한 형태로 형성될 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 골조의 모든 위치에 세포가 부착되어 배양될 수 있다. The support 303 may be included in the culture unit 301. The culture unit 301 may include an inlet, and the support 303 may be inserted into the culture unit 301 through the inlet. Cells to be cultured may be attached to the support 303. The support 303 may be attached to the cells to be cultured and may be suspended in the culture medium inside the culture unit 301. The support 303 may have a two-dimensional structure or a three-dimensional structure. The support 303 may have a two-dimensional disk shape. The support 303 may have a three-dimensional structure shape. The two-dimensional disk-shaped support 303 may be configured in the form of a disk, and cells may be attached to not only both sides but also arcs to grow. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may have a frame shape in which only edges of a hexahedron are connected. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may be formed in a form in which a plurality of corner frames of a hexahedron are combined. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may be cultured with cells attached to all positions of the skeleton.

상기 교환관(304)은 상기 배양부(301)와 연결될 수 있다. 상기 교환관(304)은 상기 배양부(301)의 물질교환에 이용될 수 있다. 상기 교환관(304)는 상기 배양부(301)에 물질을 주입하거나 배출하도록 할 수 있다. 상기 교환관(304)은 탄성있는 소재로 구성될 수 있다. 상기 교환관(304)은 상기 배양부(301)가 회전할 때 함께 회전할 수 있다. 상기 교환관(304)은 상기 연결부(302)의 내부에 빈 공간으로 형성되거나 상기 연결부(302)가 내부가 빈 관으로 형성되고, 상기 연결부(302) 내부에 삽입되어 배치될 수 있다. 상기 교환관(304)은 복수로 포함될 수 있다. 상기 교환관(304)은 교환하는 물질마다 개별적으로 이용될 수 있다. 상기 교환관(304)은 상기 배양부(301)의 회전시 함께 회전하여 복수의 교환관(304)이 엉키지 않고 회전할 수 있다.The exchange tube 304 may be connected to the culture unit 301. The exchange tube 304 may be used for material exchange of the culture unit 301. The exchange tube 304 may inject or discharge a substance into the culture unit 301. The exchange pipe 304 may be made of an elastic material. The exchange pipe 304 may rotate together when the culture unit 301 rotates. The exchange pipe 304 may be formed as an empty space inside the connection part 302, or the connection part 302 may be formed as an empty pipe and inserted into the connection part 302. The exchange pipe 304 may be included in plural. The exchange tube 304 may be used individually for each material to be exchanged. The exchange tube 304 rotates together when the culture unit 301 rotates, so that the plurality of exchange tubes 304 may rotate without being entangled.

도 4는 본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 세포 배양 장치의 일 예시이다.4 is an example of a microgravity cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention.

도 4를 참조하면, 본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 세포 배양 장치는 중력 발생 장치에 상기 연결부(302)를 통해 상기 배양부(301)를 고정할 수 있다. 상기 배양부(301)는 상기 연결부(302)가 움직여 기울기, 각도 및 방향이 조절될 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)에 인위적으로 중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)를 회전시키는 방식으로 상기 배양부(301) 내부에 인공 중력을 발생시킬 수 있고, 이에 한정되지 않고 인공 중력을 발생시킬 수 있는 모든 방식으로 인공 중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치에 부착되는 연결부(302)는 적어도 하나 이상의 관절을 포함할 수 있고, 상기 관절을 움직여 상기 배양부(301)가 지구의 중력가속도와 이루는 각도, 방향 또는 기울기 등을 결정할 수 있다. 상기 연결부(302)는 상기 관절을 움직여 상기 배양부(301)에 상기 중력 발생 장치가 발생시칸 인공 중력이 가해지는 방향이 지구의 중력 가속도와 반대되는 방향으로 가해지도록 할 수 있다. Referring to FIG. 4, the microgravity cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention may fix the culture unit 301 to the gravity generating device through the connection unit 302. The inclination, angle, and direction of the culture unit 301 may be adjusted by moving the connection unit 302. The gravity generating device may artificially generate gravity in the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity inside the culture unit 301 by rotating the culture unit 301, and is not limited thereto, and generates artificial gravity in any manner capable of generating artificial gravity. I can make it. The connection part 302 attached to the gravity generating device may include at least one joint, and the cultivation part 301 may determine an angle, direction, or inclination made by the earth's gravitational acceleration by moving the joint. The connection part 302 may move the joint so that the direction in which the artificial gravity is applied to the culture part 301 when the gravity generating device is generated is applied in a direction opposite to the acceleration of the earth's gravity.

본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 세포 배양 장치는 중력 감지 센서(미도시)를 포함할 수 있다. 상기 중력 감지 센서는 상기 배양부(301)에 가해지는 중력의 방향 및 크기를 감지할 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 중력 감지 센서에서 상기 배양부(301)에 가해지는 중력의 크기 및 방향을 감지하면 상기 중력의 크기 및 방향에 따라 인공 중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)에 가해지는 중력 방향의 반대 방향으로 인공중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)에 가해지는 중력 크기와 같은 크기로 인공중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)에 가해지는 중력 방향과 같은 방향으로 인공중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)에 가해지는 중력 방향과 수직한 방향으로 인공중력을 발생시킬 수 있다. 상기 중력 발생 장치는 상기 배양부(301)에 가해지는 중력 크기의 특정 비율의 크기로 인공중력을 발생시킬 수 있다. 상기 특정 비율을 사용자의 설정에 따라 정해질 수 있다.The microgravity cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention may include a gravity sensor (not shown). The gravity detection sensor may detect the direction and magnitude of gravity applied to the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity according to the magnitude and direction of the gravity when the gravity detection sensor detects the magnitude and direction of gravity applied to the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity in a direction opposite to the direction of gravity applied to the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity in the same size as the gravity applied to the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity in the same direction as the direction of gravity applied to the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity in a direction perpendicular to a direction of gravity applied to the culture unit 301. The gravity generating device may generate artificial gravity at a specific ratio of the size of gravity applied to the culture unit 301. The specific ratio may be determined according to the user's setting.

도 5는 본 본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부의 사시도이다.5 is a perspective view of a culture unit according to an embodiment of the present invention.

도 5를 참조하면, 본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부는 멤브레인막(501)을 포함할 수 있다. 상기 멤브레인막(501)은 상기 배양부의 외면 전체를 구성할 수 있다. 상기 멤브레인막(501)은 상기 배양부의 외면의 일부를 구성할 수 있다. 상기 멤브레인막(501)은 상기 배양부가 외부와 기체 교환을 수행하도록 할 수 있다. 상기 멤브레인막(501)은 적어도 하나 이상의 유출입구를 포함할 수 있다. 상기 유출입구를 통해 상기 배양부 내부에 포함되는 물질을 주입 또는 투입하거나 배출하도록 할 수 있다.Referring to FIG. 5, the culture unit according to an embodiment of the present invention may include a membrane membrane 501. The membrane film 501 may constitute the entire outer surface of the culture unit. The membrane film 501 may form a part of the outer surface of the culture unit. The membrane membrane 501 may allow the culture unit to exchange gas with the outside. The membrane film 501 may include at least one outlet port. The material contained in the culture unit may be injected, injected, or discharged through the outlet.

본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부는 상기 멤브레인막(501) 내부에 배양액(502)이 포함될 수 있다. 상기 배양액(502)은 상기 유출입구를 통해 상기 멤브레인막(501) 내부에 포함될 수 있다. 상기 배양액(502)은 세포 배양에 필요한 물질을 포함할 수 있다. 상기 배양액(502)은 생물의 생존 ·발육에 불가결한 물을 비롯하여 영양물질로서 다량요소 ·미량요소 등을 포함할 수 있다. 상기 배양액(502)은 기체상으로 얻어지는 것을 제외하고는 모두 무기 또는 유기화합물을 포함할 수 있다. 상기 무기 또는 유기 화합물은 독립영양 ·종속영양 등 영양 형식에 따라 필요한 화합물을 모두 포함할 수 있다. 상기 배양액(502)은 탄소원 ·질소원 ·무기염류 ·발육인자(비타민류) 등의 화합물을 포함할 수 있다. 특히 발육인자와 관련하여 생물체에서 추출한 비교적 복잡한 조성을 가진 것을 주체로 하는 천연배지(天然培地)를 포함할 수 있다. 상기 배양액(502)은 세균배양의 경우 육즙 ·혈청, 곰팡이배양의 경우 맥아추출물 등을 포함할 수 있다. 상기 배양액(502)은 무기염류만 또는 구조가 확실한 탄소원 ·질소원을 가한 조성이 명확한 합성배지(合成培地)를 포함할 수 있다. 상기 배양액(502)은 액체배지, 고형배지를 포함 할 수 있다. The culture unit according to an embodiment of the present invention may include a culture solution 502 inside the membrane film 501. The culture solution 502 may be included in the membrane film 501 through the outlet port. The culture medium 502 may contain a material necessary for cell culture. The culture medium 502 may include water, which is indispensable for the survival and development of living organisms, as well as a large amount of nutrients and a trace element. The culture solution 502 may contain all inorganic or organic compounds except that it is obtained in a gaseous phase. The inorganic or organic compounds may include all compounds necessary for nutritional types, such as autotrophic and dependent nutrition. The culture medium 502 may contain a compound such as a carbon source, a nitrogen source, an inorganic salt, and a growth factor (vitamins). In particular, it may include a natural medium (天然培地) whose main body is one having a relatively complex composition extracted from living organisms in relation to growth factors. The culture medium 502 may contain meat juice and serum in the case of bacterial culture, and malt extract in the case of mold culture. The culture medium 502 may contain only inorganic salts or a synthetic medium having a clear composition in which a carbon source and a nitrogen source having a certain structure are added. The culture medium 502 may include a liquid medium and a solid medium.

본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부는 밀봉부(503)를 포함할 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 상기 상기 멤브레인막(501)의 내부가 외부와 완전히 차단되도록 할 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 상기 배양부의 멤브레인막(501)의 일부를 접촉 또는 결합하여 상기 멤브레인막(501)의 내부를 외부와 완전히 차단되도록 할 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 상기 멤브레인막(501)의 상기 유출입구를 통한 물질의 이동을 차단할 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 집게 형태로 구성될 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 상기 멤브레인막(501)의 유출입구를 집어 물질의 유출입이 차단되도록 할 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 지퍼락 형태를 가질 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 분리된 집게 형태를 가질 수 있고, 분리된 집게를 하나로 합쳐 상기 멤브레인막(501)을 밀봉할 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 가열 밀봉 형태를 가질 수 있다. 상기 밀봉부(503)는 가스가 통과되는 폴리머 재질의 멤브레인막은 가열을 통해, 두장을 한장으로 합쳐 상기 멤브레인막(501)을 밀봉할 수 있다.The culture unit according to an embodiment of the present invention may include a sealing part 503. The sealing part 503 may completely block the inside of the membrane layer 501 from the outside. The sealing part 503 may contact or couple a part of the membrane film 501 of the culture part to completely block the inside of the membrane film 501 from the outside. The sealing part 503 may block the movement of the material through the outlet of the membrane film 501. The sealing part 503 may be configured in the form of tongs. The sealing part 503 may pick up the outlet of the membrane film 501 to block the inflow and outflow of the material. The sealing part 503 may have a zipper lock shape. The sealing part 503 may have a form of a separated forceps, and may seal the membrane film 501 by combining the separated forceps into one. The sealing part 503 may have a heat sealing form. The sealing part 503 may seal the membrane layer 501 by combining two membrane membranes made of a polymer material through which gas passes through heating.

도 6은 본 발명의 일 실시 예에 따른 배양부 내에 포함되는 지지체의 일 예시이다.6 is an example of a support included in the culture unit according to an embodiment of the present invention.

도 6 (a)를 참조하면, 본 발명의 일 실시 예에 따른 지지체는 2차원 디스크 형태를 가질 수 있다. 상기 2차원 디스크 형태의 지지체(303) 원판 형태로 구성될 수 있고, 양 면뿐만 아니라 원호에도 세포가 부착되어 생장할 수 있다. Referring to Figure 6 (a), the support according to an embodiment of the present invention may have a two-dimensional disk shape. The two-dimensional disk-shaped support 303 may be configured in the form of a disk, and cells may be attached to not only both sides but also arcs to grow.

도 6 (b)를 참조하면, 상기 지지체(303)는 3차원 구조체 형태를 가질 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 육면체의 모서리만 연결한 골조 형태를 가질 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 육면체의 모서리 골조를 복수개 결합한 형태로 형성될 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 적어도 하나 이상의 관통구가 형성된 구 형태로 형성될 수 있다. 상기 3차원 구조체 형태의 지지체(303)는 골조의 모든 위치에 세포가 부착되어 배양될 수 있다.Referring to FIG. 6B, the support 303 may have a three-dimensional structure. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may have a frame shape in which only edges of a hexahedron are connected. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may be formed in a form in which a plurality of corner frames of a hexahedron are combined. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may be formed in a spherical shape in which at least one through hole is formed. The support 303 in the form of a three-dimensional structure may be cultured with cells attached to all positions of the skeleton.

도 7 및 도 8은 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치와 기존 장치에 따른 세포 생장을 비교한 결과이다.7 and 8 are results of comparing the cell growth according to the cell culture device according to an embodiment of the present invention and the conventional device.

도 7 및 도 8을 참조하면, A549와 H1703의 휴먼 폐암세포로 RPMI 1640배지에 10% FBS, 1% aniti-anti를 더한 배지를 사용하여 37도, 5% CO2 조건 하에서 본 발명의 미세 중력 배양 장치와 기존의 미세 중력 배양 장치의 배양부 외벽에 세포를 부착시켜 배양한 배양한 결과를 확인할 수 있다.7 and 8, microgravity culture of the present invention under conditions of 37 degrees and 5% CO2 using a medium in which 10% FBS and 1% aniti-anti were added to RPMI 1640 medium with A549 and H1703 human lung cancer cells. The results of culturing by attaching cells to the outer wall of the culture unit of the device and the conventional microgravity culture device can be confirmed.

미세중력을 주기 위하여 3차원 클리노스텟 장비와 Confocal dish(SPL), Culture bag(SPL)을 사용하여 A549, H1703 각각 1.7 x 10^5 cells/dish, 2 x 10^5 cells/dish의 seeding을 진행 후 confocal dish에서 slip을 떼어 내어 50ml의 RPMI 1640 with 10% FBS, 1% anti-anti를 넣고 봉하여 클리노스텟 장비에 고정하였다. To give microgravity, seeding of 1.7 x 10^5 cells/dish and 2 x 10^5 cells/dish respectively for A549 and H1703 using 3D Clinostat equipment, Confocal dish (SPL), and culture bag (SPL). After proceeding, the slip was removed from the confocal dish, 50 ml of RPMI 1640 with 10% FBS, and 1% anti-anti were added, sealed, and fixed to the clinostat equipment.

Migration을 측정하기 위하여 confocal dish에서 A549, H1703 각각 1.7 x 10^5 cells/dish, 2 x 10^5 cells/dish seeding을 O/N배양하고 옐로우 팁을 이용하여 상처를 준 뒤 confocal dish에 부착되어 있는 slip을 떼어 내어 culture bag에 넣고 RPMI 1640 with 10% FBS, 1% anti-anti 배지 50ml을 넣고 sealing한 뒤 24h, 48h 배양 후 confocal 현미경으로 Wound healing assay를 확인했다.In order to measure migration, A549 and H1703 are cultured in O/N with 1.7 x 10^5 cells/dish and 2 x 10^5 cells/dish seeding, respectively, in a confocal dish, wound with a yellow tip, and attached to a confocal dish. Remove the slip and put it in a culture bag, put RPMI 1640 with 10% FBS, 50 ml of 1% anti-anti medium, and seal it. After culturing for 24 h and 48 h, the Wound healing assay was confirmed with a confocal microscope.

미세중력이 A549와 H1703의 migration에 미치는 영향을 알아 보기 위해 미세중력을 24h, 48h 2가지 시간 동안 배양 후 wound healing assay를 통해 알아본 세포 migration 실험으로 현미경으로 찍힌 wound의 넓이를 측정하여 확인하였다. 미세중력을 준 이 후 대조군에 비해 migration이 시간이 지남에 따라 훨씬 잘 일어난다는 것을 알 수 있었다. 즉, 본 발명의 일 실시 예에 따른 미세 중력 세포 배양 장치가 세포 배양 효과가 크다는 것을 확인할 수 있다.In order to find out the effect of microgravity on the migration of A549 and H1703, microgravity was cultured for two hours for 24h and 48h, and then the width of the wound was measured and confirmed by a cell migration experiment that was determined through wound healing assay. After microgravity was applied, it was found that migration occurred much better over time compared to the control group. That is, it can be seen that the microgravity cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention has a large cell culture effect.

도 9 및 도 10은 본 발명의 일 실시 예에 따른 세포 배양 장치와 기존 장치에 따른 세포 생장을 RNA 레벨에서 확인한 결과 그래프이다.9 and 10 are graphs of results of confirming cell growth according to the cell culture apparatus according to an embodiment of the present invention and the existing apparatus at the RNA level.

도 9 및 도 10을 참조하면, RNA extraction, RT-PCR 과 real-time PCR을 통한 RNA량을 비교하기 위해 24h, 48h 배양한 세포를 culture bag에서 slip을 꺼내 35파이 dish에 옮겨 RNA를 뽑아내기 위하여 Trizol 용액 1ml 씩 분주 후 cell lifter를 사용하여 EP tube에 모아 클로로포름 200ul을 넣고 vortexing 한 다음 37도에서 5분간 incubation 후 12000rpm 4도 20분간 원심분리하여 sample 400ul와 2-propanol(400ul)를 넣고 37도에서 incubation 5분 12000rpm 4도 20분간 원심분리 한 뒤 상층액을 버린 후 75% 에탄올 600ul를 넣고 7500rpm 4도 5분간 원심분리 후 상층액을 버리고 5분간 air dry 해준다. RNase free water 20ul를 넣고 heating block에 65도 5분간 열을 가해준 뒤 Nano drop을 사용하여 sample을 정량했다.9 and 10, in order to compare the amount of RNA through RNA extraction, RT-PCR and real-time PCR, cells cultured for 24h and 48h were removed from the culture bag and transferred to a 35 pie dish to extract RNA. For this purpose, 1 ml of Trizol solution was dispensed each, collected in an EP tube using a cell lifter, and 200 ul of chloroform was added and vortexed. After incubation at 37 degrees for 5 minutes, centrifugation at 12000 rpm 4 degrees for 20 minutes, 400 ul of sample and 2-propanol (400 ul) were added 37 After centrifugation for 5 minutes at 12000rpm 4°C for 20 minutes, discard the supernatant, add 600ul of 75% ethanol, centrifuge at 7500rpm 4°C for 5 minutes, discard the supernatant and air dry for 5 minutes. After adding 20ul of RNase free water, heating the heating block at 65°C for 5 minutes, the sample was quantified using a nano drop.

RT-PCR은 2ug을 기준으로 진행하였으며 정량값에 맞추어 RNA와 Primer oligo(dt) 1ul, 10mM DNTP mix 1ul, 5x RT buffer 4ul, Ribosafe RNase inhibitor 1ul, Tetro Reverse Transcripase 1ul를 넣고 total volume을 20ul로 넣고 PCR 기계를 사용 45도 30min, 85도 5min, 4도 O/N하여 RT PCR을 진행 했다.RT-PCR was performed based on 2ug, and according to the quantitative value, 1ul of RNA and Primer oligo(dt), 1ul of 10mM DNTP mix, 4ul of 5x RT buffer, 1ul of Ribosafe RNase inhibitor, and 1ul of Tetro Reverse Transcripase were added, and the total volume was 20ul. RT PCR was performed using a PCR machine at 45 degrees 30 minutes, 85 degrees 5 minutes, and 4 degrees O/N.

Real-time PCR은 RT PCR한DNA를 가지고 SYBR 6.25ul, Primer 1ul, cDNA 1ul, H20 4.25ul를 넣고 Real timp PCR했다. (여기서 primer는 MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2, GAPDH)Real-time PCR was performed with RT PCR DNA, SYBR 6.25ul, Primer 1ul, cDNA 1ul, H20 4.25ul, and Real-time PCR. (Here primers are MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2, GAPDH)

미세중력 상에서A549와 H1703를 노출 시켰을 때 migration과 proliferation이 촉진 되는 것을 확인 할 수 있었는데 RNA레벨에서의 변화를 확인 하기 위하여 real-timp PCR을 진행 하였다. 24h, 48h 2가지 시간 별로 확인 한 결과 A549 48h 에서 MMP2, MMP9의 발현이 높아진 것을 확인 할 수 있었으며 H1703 역시 48h에서 MMP2, MMP9의 증가를 확인 할 수 있었다.When exposed to A549 and H1703 under microgravity, it was confirmed that migration and proliferation were promoted. Real-timp PCR was performed to confirm the change in RNA level. As a result of checking at two times of 24h and 48h, it was confirmed that the expression of MMP2 and MMP9 was increased at 48h of A549, and the increase of MMP2 and MMP9 at 48h of H1703 was also confirmed.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시 예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통 상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시 예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.So far, the present invention has been looked at around its preferred embodiments. Those of ordinary skill in the technical field to which the present invention pertains will be able to understand that the present invention may be implemented in a modified form without departing from the essential characteristics of the present invention. Therefore, the disclosed embodiments should be considered from an illustrative point of view rather than a limiting point of view. The scope of the present invention is shown in the claims rather than the foregoing description, and all differences within the scope equivalent thereto should be construed as being included in the present invention.

Claims (10)

인공 중력을 발생시켜 무중력 환경을 형성하는 중력 발생 장치;
멤브레인막으로 구성되고 내부에 배양액이 채워지는 배양부;
상기 배양부를 고정하고 상기 중력 발생 장치에 연결하는 연결부; 및
상기 배양부 내부에 배양액상에 부유하도록 포함되고, 세포가 부착되어 배양되는 지지체;를 포함하는 미세 중력 배양 장치.A gravity generating device that generates an artificial gravity to form a zero gravity environment;
A culture unit composed of a membrane membrane and filled with a culture solution therein;
A connection part fixing the culture part and connecting it to the gravity generating device; And
Microgravity cultivation apparatus comprising a; is included so as to be suspended in the culture medium inside the culture unit, a support for culturing by attaching cells. 제1항에 있어서,
상기 지지체는,
디스크 형태인 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
The support,
Microgravity culture device in disk form. 제1항에 있어서,
상기 지지체는,
3차원 구조체인 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
The support,
Microgravity culture device, a three-dimensional structure 제1항에 있어서,
상기 중력 발생 장치는,
상기 배양부를 회전시켜 인위적으로 중력을 발생키텨 무중력환경을 형성하는 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
The gravity generating device,
Microgravity culture device for creating a zero gravity environment artificially generating gravity by rotating the culture unit. 제1항에 있어서,
상기 배양부 내부와 물질교환을 하는 교환관;을 더 포함하고,
상기 연결부는 내부에 관이 형성되어 있고,
상기 교환관은 상기 연결부 내부 관에 삽입되는 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
Further comprising; an exchange tube for exchanging substances with the inside of the culture unit,
The connection part has a tube formed therein,
The exchange tube is a microgravity culture device inserted into the inner tube of the connection part. 제1항에 있어서,
상기 배양부의 배양액이 빠져나가지 않도록 상기 배양부의 입구를 밀봉하는 밀봉부;를 더 포함하는 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
Microgravity culture apparatus further comprising a; sealing portion for sealing the entrance of the culture portion so that the culture medium of the culture portion to escape. 제1항에 있어서,
상기 연결부는,
상기 배양부의 회전축의 기울기를 조정할 수 있는 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
The connection part,
Microgravity culture device capable of adjusting the tilt of the rotation axis of the culture unit. 제1항에 있어서,
상기 중력 발생 장치는,
상기 배양부에 중력이 가해지는 방향 및 크기를 감지할 수 있는 중력 센서;를 더 포함하는 미세 중력 배양 장치.The method of claim 1,
The gravity generating device,
Microgravity culture apparatus further comprising a; gravity sensor capable of detecting the direction and size of gravity is applied to the culture unit. 제8항에 있어서,
상기 중력센서에서 감지한 중력의 방향 및 크기에 따라 상기 배양부에 발생시키는 인위적 중력 및 상기 배양부의 기울기를 조절하는 미세 중력 배양 장치.The method of claim 8,
Microgravity culture device for adjusting the artificial gravity generated in the culture section and the inclination of the culture section according to the direction and magnitude of the gravity sensed by the gravity sensor. 제1항에 있어서,
상기 미세 중력 배양 장치는,
24시간 이상 세포 배양을 하는 것을 특징으로 하는 미세 중력 배양 장치.
The method of claim 1,
The microgravity culture device,
Microgravity culture apparatus, characterized in that the cell culture for more than 24 hours.
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