KR102116516B1 - Methods for Discriminating the Origins of Spirulina using bio-maker and Solvent Extraction Method for them - Google Patents
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Abstract
본 발명은 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법은, 산지가 다른 다수개의 스피루리나 분말을 비교 분석하는 분별방법에 있어서, 상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있다.The present invention relates to a method for fractionating a production area using spirulina powder powder and a solvent extraction method for the same, and a method for fractionating a production area using spirulina powder powder according to the present invention is a method for comparative analysis of a plurality of spirulina powders having different production areas. , By extracting and comparing the index component contained in the plurality of spirulina powder, and extracting and comparing the characteristics of each of the plurality of spirulina powder, and analyzing and comparing one or more of the methods, the production area can be classified.
Description
본 발명은 스피루리나 분말 가루의 지표성분을 이용한 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는, 스피루리나 분말 가루에 함유된 지표성분을 이용하여 생산지를 확인할 수 있는 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method of fractionating a mountain using an index component of spirulina powder powder and a solvent extraction method for the same, and more specifically, a method of classifying a mountain region capable of confirming a production area using the index component contained in spirulina powder powder and the same It relates to a solvent extraction method for.
일반적으로, 조류(algae)는 크기를 기준으로 김, 미역 등 수십 미터까지 성장하는 거대조류(macroalgae)와, 식물성 플랑크톤 등 현미경으로 관찰할 수 있는 수 마이크로미터 크기의 단세포 생물인 미세조류(microalgae)로 분류되고 있다. 대표적인 예로서 식물성 플랑크톤이 약 35억 년 전에 지구 해양에 출현한 최초의 생물 중 하나로, 대부분이 미세조류에 속한다.In general, algae are macroalgae that grow to several tens of meters, such as seaweed and seaweed, based on their size, and microalgae, a single-celled organism that can be observed under a microscope, such as phytoplankton. It is classified as. As a typical example, phytoplankton is one of the first organisms to appear in the Earth's oceans about 3.5 billion years ago, most of which belong to microalgae.
여기서, 미세조류는 육상식물을 제외한 모든 광합성 생물의 통칭으로 분류학적 용어는 아니며, 매우 다양한 분류군을 지칭하는 일반 용어이다. 이들은 지구 전체 광합성의 90%를 담당하는 것으로 추정되고 있으며, 지구 생태계의 1차 생산자로 매우 중요한 위치를 점하고 있다. 대부분은 바다 속에서 광합성을 통해 이산화탄소를 흡수하여 산소를 만들어 낸다.Here, microalgae is a general term for all photosynthetic organisms except terrestrial plants, and is not a taxonomic term, but is a general term referring to a very diverse taxonomic group. It is estimated that they account for 90% of the photosynthesis of the entire Earth, and are very important as primary producers of the Earth's ecosystem. Most of them make oxygen by absorbing carbon dioxide through photosynthesis in the sea.
또한, 미세조류는 종류가 다양하다는 특징을 보유하고 있다. 알려진 미세조류는 이미 4만 종 이상이며, 미등록된 것을 포함하면 30만 종 이상의 종류가 존재할 것으로 추정하고 있다. 미세조류는 주로 광합성을 통해 세포 성장과 번식을 행하는 식물군 또는 넓은 의미로 일부는 세균으로 분류되고 있으며, 그 종류나 수에 있어서는 매우 다양하고 많다. In addition, microalgae have a variety of types. It is estimated that there are more than 40,000 species of known microalgae, and that there are more than 300,000 species including unregistered. Microalgae are mainly a group of plants that grow and reproduce cells through photosynthesis, or in a broad sense, some are classified as bacteria, and are very diverse and many in their types and numbers.
또한, 미세조류는 빠른 증식 속도를 갖고 있으며, 다양한 성분을 함유하고 있어 산업적 활용 가능성이 높다는 특징을 갖고 있다. 미세조류는 물, 햇빛 및 CO2등을 공급하면 무제한 증식(배양)이 가능하다. 일반적으로, 미세조류는 지상 식물보다 훨씬 빨리 성장하고 생균체 생산성이 높은 점, 담수나 해수는 물론이고 빛 에너지를 확보할 수 있는 자연 환경에서는 쉽게 생육된다는 점, 다양한 조류에서 단백질, 지질, 당질 및 색소와 같은 산업적으로 흥미가 있는 생물 고분자 물질은 물론이고 특정의 생리 기능을 갖는 물질을 고농도로 생산할 수 있다는 점 등 중요한 생물 산업 소재로서의 가능성이 충분하다고 할 수 있다. 이를 바탕으로, 미세조류를 산업적으로 응용 가능한 분야는 폐수처리, 대기 오염 정화(CO2고정화), 양식사료, 건강식품 소재, 생리활성 물질 생산, 가공용 소재 및 의약품 소재 등으로 매우 다양하다.In addition, the microalgae have a fast growth rate and contain various components, so it has the characteristics of high industrial utilization potential. Microalgae can grow (cultivate) indefinitely by supplying water, sunlight, and CO2. In general, microalgae grow faster than terrestrial plants and have high productivity of probiotics, and are easily grown in natural environments capable of securing light energy as well as freshwater or seawater. Proteins, lipids, sugars, and It can be said that there is sufficient potential as an important bio-industrial material, such as being able to produce high-concentration materials having specific physiological functions as well as bio-polymer materials of industrial interest such as pigments. Based on this, fields of industrial application of microalgae are very diverse, such as wastewater treatment, air pollution purification (CO 2 immobilization), aquaculture feed, health food material, bioactive material production, processing material, and pharmaceutical material.
또한, 미세조류는 광합성 미생물로서, 유기물의 생산성이 높아 산업적 활용 가치가 있다는 특징이 있다. 미세조류는 지상 식물과 마찬가지로 빛을 필수 에너지원으로 하고 CO2를 기질로 하여 유기물을 합성하는 특성을 갖고 있으며, 이의 유기물 생산성은 식물에 비해 4 ~ 20배 가량 높은 것으로 알려져 있다. 미세조류에 의해 생산되는 유기물은 다양한 유용 물질(예: 불포화 지방산, 단백질, 비타민 및 다당류 물질등)을 함유하고 있어 사용 균주에 따라 생물 의약, 생리 활성물질, 건강 보조식품 및 치어 양식용 사료 등 고부가가치 제품을 생산하는 공정에 활용이 가능하다는 장점이 있다.In addition, microalgae are photosynthetic microorganisms, and are characterized by high industrial productivity and industrial value. Microalgae have the property of synthesizing organic matters using light as an essential energy source and CO 2 as a substrate, and the productivity of organic matters is known to be 4 to 20 times higher than that of plants. Organic substances produced by microalgae contain various useful substances (eg, unsaturated fatty acids, proteins, vitamins, and polysaccharide substances), so depending on the strain used, biopharmaceuticals, bioactive substances, dietary supplements, and feed for aquaculture It has the advantage that it can be used in the process of producing value-added products.
한편, 미세조류의 산업적 이용에 대한 본격적 연구는 독일에서 2차 세계대전 중에 규조류의 대량 배양을 통한 식물성 지방과 오일(oil) 생산을 위하여 시작되었다. 이어서 녹조류인 클로렐라(chlorella)와 세네데스무스(scenedesmus)로부터 지방과 단백질 등의 생산에 관한 연구가 광범위하게 이루어졌다.Meanwhile, a full-scale study of the industrial use of microalgae began in Germany for the production of vegetable fats and oils through mass cultivation of diatoms during World War II. Subsequently, studies on production of fats and proteins from green algae chlorella and scenedesmus have been extensively conducted.
또한, 미세조류의 잠재성이 막대한 만큼 향후 에너지 분야, 화학 분야 및 환경 분야 등을 중심으로 활용성이 확대될 전망이다. In addition, as the potential of microalgae is enormous, its utility is expected to expand in the energy, chemical, and environmental fields.
최근, 산업적으로 그 활용성이 증가하고 있는 대표적인 미세조류로 해양 미생물인 스피루리나(Spirulina sp.)가 있다.Recently, as a representative microalgae that is increasing in utility in industry, there is a marine microorganism, Spirulina sp.
스피루리나는 단백질, 지질, 비타민, 무기질 등 유효한 성분을 함유하는 시아노박테리아(cyanobacteria)의 일종으로 전세계적으로 인정받은 건강기능식품으로 알려져 있다. 최근 친환경적 인공 배양법 활용으로 대량생산에 성공하게 되어 스피루리나의 활용에 더욱 주목하고 있으며, 특히, 스피루리나는 식품, 화장품, 의약품, 바이오연료(fuel), 센서(sensor) 등의 다양한 분야에서 광범위하게 연구 개발 중이다. Spirulina is a kind of cyanobacteria that contains active ingredients such as protein, lipid, vitamin, and mineral, and is known as a health functional food recognized worldwide. Recently, the mass production has been successful through the use of environmentally friendly artificial cultivation methods, and more attention is paid to the use of spirulina. In particular, spirulina has been extensively researched and developed in various fields such as food, cosmetics, pharmaceuticals, biofuels, and sensors. In progress.
따라서, 그 이용성이 확대되고 있는 스피루리나의 품질과 조성물을 확인하여 산업상 이용시 안정성을 높일 수 있는 현실적이고도 적용이 가능한 기술이 절실히 요구되고 있는 실정이다.Accordingly, there is an urgent need for a realistic and applicable technology that can increase the stability in the industrial use by confirming the quality and composition of Spirulina, which has been expanding its usability.
본 발명은 상기 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명은, 스피루리나 분말 가루에 함유된 지표성분을 이용하여 생산지를 확인할 수 있는 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법을 제공하는데 있다.The present invention has been devised to solve the above problems, and the present invention provides a method for classifying a production area and a solvent extraction method for the same, which can identify a production area using an index component contained in a spirulina powder.
본 발명의 실시예에 따른 스피루리나 분말 가루의 지표성분을 이용한 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법은 산지가 다른 다수개의 스피루리나 분말을 비교 분석하는 분별방법을 제공한다.The method of fractionating a mountain using an index component of a spirulina powder powder according to an embodiment of the present invention and a solvent extraction method for the same provide a classification method of comparatively analyzing a plurality of spirulina powders having different mountainous regions.
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명은, 스피루리나 분말 가루에 함유된 지표성분을 이용하여 생산지를 확인할 수 있는 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법을 제공하는 효과가 있다.As described above, the present invention has an effect of providing a method of fractionating the production area and a solvent extraction method for the same, which can confirm the production area by using the index component contained in the spirulina powder powder.
도 1은 본 발명의 실시예에 따라 전계방출형 주사전자현미경(FE-SEM)을 이용하여 스피루리나 분말의 형태 및 표면을 분석한 이미지를 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 따라 푸리에 변환 적외선(FT-IR) 분광스펙트럼을 이용하여 스피루리나 분말을 분석한 결과를 나타내는 도면이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 따라 X선 회절패턴분석(XRD)을 이용하여 스피루리나 분말을 분석한 결과를 나타내는 도면이다.
도 4는 본 발명의 실시예에 따라 X선 광전자분광(XPS)을 이용하여 스피루리나 분말을 분석한 결과를 나타내는 도면이다.
도 5a 내지 도 5f는 본 발명의 실시예에 따라 다양한 종류의 용매를 이용하여 스피루리나 분말의 UV-Vis 흡광도를 분석한 결과를 나타내는 도면이다.
도 6a 내지 도 6b는 본 발명의 실시예에 따라 다양한 농도별로 스피루리나 분말의 UV-Vis 흡광도를 분석한 결과를 나타내는 도면이다.
도 7은 도 6에 사용된 스피루리나 분말의 농도별 추출물에 대한 이미지를 나타내는 도면이다.
도 8은 본 발명의 실시예에 따라 전기영동법을 이용한 스피루리나 분말의 용매추출물에 대한 단백질 분석결과를 나타내는 도면이다.1 is a view showing an image analyzing the shape and surface of the spirulina powder using a field emission scanning electron microscope (FE-SEM) according to an embodiment of the present invention.
2 is a view showing the results of analyzing the spirulina powder using a Fourier transform infrared (FT-IR) spectral spectrum according to an embodiment of the present invention.
3 is a view showing the results of analyzing the spirulina powder using X-ray diffraction pattern analysis (XRD) according to an embodiment of the present invention.
4 is a view showing the results of analyzing the spirulina powder using X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) according to an embodiment of the present invention.
5A to 5F are diagrams showing results of analyzing UV-Vis absorbance of spirulina powder using various types of solvents according to an embodiment of the present invention.
6A to 6B are diagrams showing results of analyzing UV-Vis absorbance of spirulina powder according to various concentrations according to an embodiment of the present invention.
7 is a view showing an image of the extract by concentration of the spirulina powder used in FIG.
8 is a view showing the results of protein analysis for a solvent extract of spirulina powder using electrophoresis according to an embodiment of the present invention.
본 발명은 산지가 다른 다수개의 스피루리나 분말을 비교 분석하는 분별방법에 관한 것으로, 상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있다.The present invention relates to a classification method for comparatively analyzing a plurality of spirulina powders having different production areas, a solvent extraction method for extracting and comparing index components contained in the plurality of spirulina powders, and a physico-pharmaceutical for each of the plurality of spirulina powders One or more of the methods of analyzing and comparing characteristics can be used to classify the production area.
본 발명에 있어서, 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은, 전계방출형 주사전자현미경(FE-SEM)을 사용하여 상기 스피루리나 분말의 표면을 구성하는 작은 돌기의 구형을 이루는 일그러진 형태를 각각 비교함으로써 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In the present invention, a method of analyzing and comparing the physico-pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders, using a field emission scanning electron microscope (FE-SEM), the spherical shape of the small protrusions constituting the surface of the spirulina powder It may include a method of classifying the production area by comparing each of the distorted forms constituting the.
또한, 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은, 상기 스피루리나 분말 각각을 푸리에 변환 적외선(FT-IR) 분광스펙트럼을 이용하여 분석한 결과에서 나타나는 피크 형태를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In addition, the method of analyzing and comparing the physico-pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders is produced by comparing each of the spirulina powders using a Fourier transform infrared (FT-IR) spectral spectrum to compare peak shapes appearing in the analysis results. It may include a method of discriminating.
또한, 본 발명에 따르면, 상기 스피루리나 분말은, 3,500-3,200, 3,000-2,850, 3,300-2,500, 2,260-2,100, 1,680-1,640, 1,550-1,475, 1,470-1,450, 1,500-1,400, 1,400-1,290, 1,320-1,000, 1,300-1,150, 1,250-1,020, 1,250-1,020, 910-665, 700-610 및 690-515의 파수(cm-1)에서 피크를 갖는 alcohols과 phenols(O-H stretching vibration), alkenes(C-H stretching vibration), carboxylic acids(O-H stretching vibration), alkynes-C(triple bond)C- stretching vibration, alkenes(-C=C- stretching vibration), nitro compounds(N-O asymmetric stretching vibration), alkenes(C-H bend stretching vibration), aromatics(C-C stretching vibration), nitro compounds(N-O stretching vibration), alcohols과 carboxylic acids, esters, ethers(C-O stretching vibration), alkyl halides(C-H wag (-CH2X) stretching vibration), aliphatic amines(C-N s stretching vibration), aliphatic amines(C-N stretch stretching vibration), primary 및 secondary amines(N-H wag stretching vibration), alkynes-C(triple bond)C-H: C-H bend stretching vibration, alkyl halides(C-Br stretching vibration)를 포함하는 혼합물질일 수 있다.In addition, according to the present invention, the spirulina powder, 3,500-3,200, 3,000-2,850, 3,300-2,500, 2,260-2,100, 1,680-1,640, 1,550-1,475, 1,470-1,450, 1,500-1,400, 1,400-1,290, 1,320- Alcohols and phenols (OH stretching vibration), alkenes (CH stretching vibration) with peaks at wavenumbers (cm -1 ) of 1,000, 1,300-1,150, 1,250-1,020, 1,250-1,020, 910-665, 700-610 and 690-515 ), carboxylic acids (OH stretching vibration), alkynes-C (triple bond) C- stretching vibration, alkenes (-C=C- stretching vibration), nitro compounds (NO asymmetric stretching vibration), alkenes (CH bend stretching vibration), aromatics(CC stretching vibration), nitro compounds(NO stretching vibration), alcohols and carboxylic acids, esters, ethers(CO stretching vibration), alkyl halides(CH wag (-CH2X) stretching vibration), aliphatic amines(CN s stretching vibration) , aliphatic amines (CN stretch stretching vibration), primary and secondary amines (NH wag stretching vibration), alkynes-C (triple bond) CH: CH bend stretching vibration, alkyl halides (C-Br stretching vibration) It can be a substance.
또한, 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은, 상기 스피루리나 분말 각각을 X선 회절분석패턴(XRD)으로 결정성을 확인하여 5~80도 범위의 theta (θ)까지 분석하였을 때 40도 이하에서 나타나는 피크형태를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In addition, in the method of analyzing and comparing the physico-pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders, theta (θ) in the range of 5 to 80 degrees by confirming crystallinity of each of the spirulina powders by X-ray diffraction analysis pattern (XRD) When analyzed up to, it may include a method of classifying the mountain regions by comparing peak shapes appearing below 40 degrees.
또한, 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은, 상기 스피루리나 분말 각각을 X선 광전자분광법(XPS)으로 분석하여 Na1s, N1s, Si2p, Ca2p, Fe2p, 및 Zn2p 를 나타내는 결합에너지 피크형태를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In addition, the method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders, each of the spirulina powders is analyzed by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) to indicate Na1s, N1s, Si2p, Ca2p, Fe2p, and Zn2p It may include a method of classifying the mountain regions by comparing the peak form of the binding energy.
본 발명에 있어서, 상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은, 스피루리나 분말을 0.2 g/mL의 농도로서 사용하여 물리약학적 특성이 다른 다수개의 용매에 분산시켰을 때 용매의 종류에 따라 서로 다른 지표성분을 용출시킬 수 있으며, 상기 용출된 지표성분의 최대 흡광도 값을 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In the present invention, the solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powders, when the spirulina powder is used as a concentration of 0.2 g/mL, when dispersed in a plurality of solvents having different physicochemical properties Different indicator components may be eluted depending on the type of the solvent, and a method of classifying the production area by comparing the maximum absorbance value of the eluted indicator components may be included.
이때, 상기 다수개의 용매는, HEPES, PBS, NaCl 수용액, 에탄올, 이소프로파놀, 및 아세토니트릴 일 수 있다.At this time, the plurality of solvents, HEPES, PBS, NaCl aqueous solution, ethanol, isopropanol, and acetonitrile may be.
또한, 상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은, 스피루리나 분말을 0.05 - 0.60 g/mL의 농도로 사용하여 특정 용매에 분산시켰을 때 스피루리나 분말 농도에 따라 방출되는 지표성분의 방출양 및 방출 속도에 차이가 있으며, 상기 용출된 지표성분의 최대 흡광도 값을 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In addition, the solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powders is an indicator that is released according to the concentration of spirulina powder when spirulina powder is dispersed in a specific solvent using a concentration of 0.05-0.60 g/mL. There is a difference in the release amount and release rate of the components, and may include a method of classifying the production area by comparing the maximum absorbance value of the eluted indicator component.
여기서, 상기 특정용매는, HEPES, 및 에탄올 일 수 있다.Here, the specific solvent may be HEPES, and ethanol.
또한, 상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은, 스피루리나 분말을 0.0012 ~ 0.006 g/mL의 농도로서 희석하여 특정 용매에 분산시켰을 때 용출된 추출물의 색깔을 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In addition, the solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powders is to compare the color of the eluted extract when diluting the spirulina powder to a concentration of 0.0012 to 0.006 g/mL and dispersing it in a specific solvent. It may include a method of discerning the production area.
이때, 상기 특정용매는, HEPES, 및 에탄올 일 수 있다.At this time, the specific solvent may be HEPES, and ethanol.
또한, 상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은, 스피루리나 분말을 특정 용매에 분산시켰을 때 용출된 추출액을 전기영동법으로 겔 상에 단백질 밴드로서 분석한 결과를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함할 수 있다.In addition, the solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powders, compares the results of analyzing the eluted extract as a protein band on the gel by electrophoresis when the spirulina powder is dispersed in a specific solvent. It may include a method of discerning the production area.
여기서, 상기 특정용매는, HEPES, NaCl 수용액, 및 PBS 일 수 있다.Here, the specific solvent may be HEPES, NaCl aqueous solution, and PBS.
이하, 실시예 및 실험예를 들어 본 발명에 따른 스피루리나 분말 가루의 지표성분을 이용한 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법을 보다 상세하게 설명하지만, 본 발명의 범위가 반드시 이들 예에만 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, for example and experimental examples, the method of fractionating the acid using the indicator component of the spirulina powder according to the present invention and the solvent extraction method therefor will be described in more detail, but the scope of the present invention is not necessarily limited to these examples. .
본 발명의 실험예에 따르면, 스피루리나 분말의 물리약학적 특성을 이용한 방법과, 스피루리나 분말가루를 구성하는 지표성분(Bio Marker) 확인을 위해 HEPES, PBS 등의 완충액, NaCl 용액 및 에탄올, 이소프로파놀(IPA), 아세토니트릴(ACN) 등의 유기용매를 이용한 용매추출법을 이용하여 스피루리나 분말가루의 산지를 분별하였다.According to the experimental example of the present invention, a method using the physico-pharmaceutical properties of spirulina powder and buffers such as HEPES, PBS, NaCl solution and ethanol, isopropanol to confirm the indicator component (Bio Marker) constituting spirulina powder The origin of spirulina powder was fractionated using a solvent extraction method using an organic solvent such as (IPA) or acetonitrile (ACN).
<실시예 1> 스피루리나 분말가루의 산지를 분별하기 위한 재료 준비<Example 1> Preparation of materials for fractionating the origin of spirulina powder
스피루리나 분말은 하와이산, 중국산, 및 국내 자체 생산한 것을 각각 준비하여 사용하였다.Spirulina powder was prepared and used in Hawaiian, Chinese and domestically produced ones.
HEPES 및 NaCl, 이소프로파놀은 시그마에서 구매하였고, 에탄올 및 아세토니트릴은 머크사에서 구입하였다. 그 외 시약은 분석용 이상으로 사용하였고, 물은 3차 증류수를 고압증기멸균하여 사용하였다.HEPES and NaCl, isopropanol were purchased from Sigma, and ethanol and acetonitrile were purchased from Merck. Other reagents were used for analytical anomalies, and water was used by autoclaving tertiary distilled water.
[실험예 1]스피루리나 분말가루의 물리 약학적 특성을 이용한 산지분별방법[Experimental Example 1] Mountain classification method using physical and pharmaceutical properties of Spirulina powder
도 1 내지 도 4를 참조하여 스피루리나 분말가루의 물리 약학적 특성을 이용한 산지분별방법을 실험예의 결과로써 상세하게 설명하면 다음과 같다.Referring to Figures 1 to 4, the method of classifying the acid using the physico-pharmaceutical properties of spirulina powder powder will be described in detail as follows.
<실시예 2> FE-SEM(전계방출형 주사전자현미경)을 이용한 방법 <Example 2> Method using FE-SEM (field emission scanning electron microscope)
도 1은 본 발명의 실시예에 따라 전계방출형 주사전자현미경(FE-SEM)을 이용하여 스피루리나 분말의 형태 및 표면을 분석한 이미지를 나타내는 도면이다.1 is a view showing an image analyzing the shape and surface of the spirulina powder using a field emission scanning electron microscope (FE-SEM) according to an embodiment of the present invention.
도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 표면을 확대한 이미지이다.Reference numerals (a), (b), and (c) shown in the drawings are respectively enlarged surfaces of (a) Hawaiian, (b) Chinese, and (c) domestic spruurina powder. It is an image.
FE-SEM(전계방출형 주사전자현미경)을 이용하여 산지를 분별하는 방법을 실시예로써 설명하면, 스피루리나 분말을 Pt(백금)로 코팅 한 후 FE-SEM을 이용하여 스피루리나 분말 가루의 형태 및 표면을 저배율 및 고배율로 관찰하여 비교하였다.When the method of classifying the production area using an FE-SEM (field emission scanning electron microscope) is described as an example, the form and surface of the spirulina powder powder after coating the spirulina powder with Pt (Platinum) Were observed and compared at low magnification and high magnification.
도면을 참조하면, 스피루리나 분말의 표면에는 수 마이크로미터 크기의 작은돌기가 있으며, 대개 구형의 일그러진 형태를 나타내고 있다.Referring to the drawings, the surface of the spirulina powder has small protrusions several micrometers in size, and usually shows a spherical distorted shape.
따라서, 도면에 도시된 바와 같이, 본 발명의 실시예에 따라 전계방출형 주사전자현미경(FE-SEM)을 사용하여 상기 스피루리나 분말의 표면을 구성하는 작은 돌기의 구형을 이루는 일그러진 형태를 각각 비교함으로써 산지를 분별할 수 있다.Thus, as shown in the drawings, by comparing each of the distorted forms constituting the spherical shape of the small projections constituting the surface of the spirulina powder using a field emission scanning electron microscope (FE-SEM) according to an embodiment of the present invention You can discern the production area.
<실시예 3> FT-IR(푸리에 변환 적외선) 분광스펙트럼을 이용한 방법 <Example 3> Method using FT-IR (Fourier transform infrared) spectral spectrum
도 2는 본 발명의 실시예에 따라 푸리에 변환 적외선(FT-IR) 분광스펙트럼을 이용하여 스피루리나 분말을 분석한 결과를 나타내는 도면이다.2 is a view showing the results of analyzing the spirulina powder using a Fourier transform infrared (FT-IR) spectral spectrum according to an embodiment of the present invention.
도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말을 분석한 결과를 나타내고 있다.Reference numerals (a), (b), and (c) shown in the drawings indicate the results of analyzing sprulina powder produced in Hawaii, (a) in Hawaii, (b) in China, and (c) in Korea. Is showing.
FT-IR(푸리에 변환 적외선) 분광스펙트럼을 이용하여 산지를 분별하는 방법을 실시예로써 설명하면, KBr(브롬화칼륨)법을 활용하여 스피루리나 분말의 FT-IR 분광스펙트럼을 측정(4,000~400
도면을 참조하면, 상기 스피루리나 분말은, 3,500-3,200, 3,000-2,850, 3,300-2,500, 2,260-2,100, 1,680-1,640, 1,550-1,475, 1,470-1,450, 1,500-1,400, 1,400-1,290, 1,320-1,000, 1,300-1,150, 1,250-1,020, 1,250-1,020, 910-665, 700-610 및 690-515의 파수(cm-1)에서 피크를 가질 수 있으며, 본 발명의 실시예에 따르면, alcohols과 phenols(O-H stretching vibration), alkenes(C-H stretching vibration), carboxylic acids(O-H stretching vibration), alkynes-C(triple bond)C- stretching vibration, alkenes(-C=C- stretching vibration), nitro compounds(N-O asymmetric stretching vibration), alkenes(C-H bend stretching vibration), aromatics(C-C stretching vibration), nitro compounds(N-O stretching vibration), alcohols과 carboxylic acids, esters, ethers(C-O stretching vibration), alkyl halides(C-H wag (-CH2X) stretching vibration), aliphatic amines(C-N s stretching vibration), aliphatic amines(C-N stretch stretching vibration), primary 및 secondary amines(N-H wag stretching vibration), alkynes-C(triple bond)C-H: C-H bend stretching vibration, alkyl halides(C-Br stretching vibration)를 포함하는 혼합물질일 수 있다.Referring to the drawings, the spirulina powder is 3,500-3,200, 3,000-2,850, 3,300-2,500, 2,260-2,100, 1,680-1,640, 1,550-1,475, 1,470-1,450, 1,500-1,400, 1,400-1,290, 1,320-1,000, 1,300-1,150, 1,250-1,020, 1,250-1,020, 910-665, 700-610 and 690-515 can have peaks at wavenumbers (cm-1), according to an embodiment of the present invention, alcohols and phenols (OH stretching vibration), alkenes (CH stretching vibration), carboxylic acids (OH stretching vibration), alkynes-C (triple bond) C- stretching vibration, alkenes (-C=C- stretching vibration), nitro compounds (NO asymmetric stretching vibration) , alkenes(CH bend stretching vibration), aromatics(CC stretching vibration), nitro compounds(NO stretching vibration), alcohols and carboxylic acids, esters, ethers(CO stretching vibration), alkyl halides(CH wag (-CH2X) stretching vibration) , aliphatic amines (CN s stretching vibration), aliphatic amines (CN stretch stretching vibration), primary and secondary amines (NH wag stretching vibration), alkynes-C (triple bond) CH: CH bend stretching vibration, alkyl halides (C-Brstretching vibration).
따라서, 본 발명의 실시예에 따라, 상기 스피루리나 분말 각각을 푸레에 변환 적외선(FT-IR) 분광스펙트럼을 이용하여 분석한 결과에서 나타나는 피크 형태를 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Therefore, according to an embodiment of the present invention, each of the spirulina powders can be classified by comparing the peak shape appearing in the results of analysis using a Fourier transform infrared (FT-IR) spectral spectrum.
<실시예 4> XRD(X선 회절분석패턴)을 이용한 방법 <Example 4> Method using XRD (X-ray diffraction analysis pattern)
도 3은 본 발명의 실시예에 따라 X선 회절패턴분석(XRD)을 이용하여 스피루리나 분말을 분석한 결과를 나타내는 도면이다.3 is a view showing the results of analyzing the spirulina powder using X-ray diffraction pattern analysis (XRD) according to an embodiment of the present invention.
도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 X선 회절패턴분석(XRD) 결과를 나타내고 있다.Reference numerals (a), (b), and (c) shown in the drawings are (a) Hawaiian, (b) Chinese, and (c) X-ray diffraction patterns of domestic spruurina powder. The results of the analysis (XRD) are shown.
XRD(X선 회절분석패턴)을 이용하여 산지를 분별하는 방법을 실시예로써 설명하면, 상기 스피루리나 분말 각각을 X선 회절분석패턴(XRD)으로 결정성을 확인하여 5~80도 범위의 2 theta (θ)까지 분석하였을 때 40도 이하에서 나타나는 피크형태를 비교하였다.When an example of a method of classifying an acid region using XRD (X-ray diffraction analysis pattern) is described as an example, crystallinity of each of the spirulina powders is confirmed by X-ray diffraction analysis pattern (XRD), and 2 theta in a range of 5 to 80 degrees. When analyzed to (θ), peak shapes appearing below 40 degrees were compared.
따라서, 본 발명의 실시예에 따라, 상기 스피루리나 분말 각각을 X선 회절분석패턴(XRD)으로 결정성을 확인하여 5~80도 범위의 2 theta (θ)까지 분석하였을 때 40도 이하에서 나타나는 피크형태를 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Accordingly, according to an embodiment of the present invention, when the spirulina powder is analyzed to 2 theta (θ) in the range of 5 to 80 degrees by confirming crystallinity by X-ray diffraction analysis pattern (XRD), peaks appearing below 40 degrees You can compare the morphology and discern the mountainous area.
<실시예 5> XPS(광전자분광기)를 이용한 방법 <Example 5> Method using XPS (photoelectron spectroscopy)
도 4는 본 발명의 실시예에 따라 X선 광전자분광(XPS)을 이용하여 스피루리나 분말을 분석한 결과를 나타내는 도면이다.4 is a view showing the results of analyzing the spirulina powder using X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) according to an embodiment of the present invention.
도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 XPS(광전자분광기) 분석 결과를 나타내고 있다.Reference numerals (a), (b), and (c) shown in the drawings are respectively (a) Hawaiian, (b) Chinese, and (c) XPS (photoelectron spectroscopy) of domestic spruurina powder. ) It shows the analysis result.
XPS(광전자분광기)을 이용하여 산지를 분별하는 방법을 실시예로써 설명하면, 광전자분광기(XPS)를 이용하여 스피루리나 분말에서 광전자분광패턴 중 Na1s, N1s, Si2p, Ca2p, Fe2p,및 Zn2p 를 나타내는 결합예너지피크(eV)로 성분을 분석하여 비교하였다.When an example of a method of classifying a mountain region using an XPS (photoelectron spectroscopy) is described as an example, a combination of Na1s, N1s, Si2p, Ca2p, Fe2p, and Zn2p among the photoelectron spectral patterns in spirulina powder using a photoelectron spectroscopy (XPS) The components were analyzed by energy peak (eV) and compared.
따라서, 본 발명의 실시예에 따라, 상기 스피루리나 분말 각각을 X선 광전자분광법(XPS)으로 분석하여 결합에너지 피크형태를 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Therefore, according to an embodiment of the present invention, each of the spirulina powders can be analyzed by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) to compare peak shape of binding energy and to discern the origin.
[실험예 2]스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 유기용매로 추출하여 비교하는 용매추출방법[Experimental Example 2] Solvent extraction method of extracting and comparing the index component contained in Spirulina powder with an organic solvent
도 5a 내지 도 8를 참조하여 스피루리나 분말가루의 물리 약학적 특성을 이용한 산지분별방법을 실험예의 결과로써 상세하게 설명하면 다음과 같다.Referring to FIGS. 5A to 8, the method of classifying the acid using the physico-pharmaceutical properties of spirulina powder powder will be described in detail as follows.
<실시예 6> 용매별로 추출한 물질을 모니터링 하는 방법<Example 6> Method for monitoring substances extracted by solvent
용매별로 추출한 물질을 모니터링하는 방법을 실시예로써 순차적으로 설명하면 다음과 같다.A method of monitoring the extracted material for each solvent is sequentially described as an example.
먼저, 산지별로 100g 이상의 스피루리나 분말에서 0.2g을 정밀히 칭량하여 용매 1mL에 분산시켰다.First, 0.2 g was accurately weighed from 100 g or more of spirulina powder for each production area, and dispersed in 1 mL of a solvent.
여기서, 0.1M HEPES, 0.1M PBS, 이소프로파놀(IPA), 0.1M NaCL, 에탄올,및 아세토니트릴을 각각 용매로 사용하여 스피루리나 분말을 분산시킨다.Here, spirulina powder is dispersed using 0.1M HEPES, 0.1M PBS, isopropanol (IPA), 0.1M NaCL, ethanol, and acetonitrile as solvents, respectively.
다음으로, 각각의 용매에 분산시킨 스피루리나 분말을 soaking 하여 30분간 100 rpm에서 흔들어 섞은 뒤, 3000 rpm 에서 10분간 원심분리하였다.Next, the spirulina powder dispersed in each solvent was soaked and shaken at 100 rpm for 30 minutes, followed by centrifugation at 3000 rpm for 10 minutes.
다음으로, 상등액을 취해 희석한 후 300~700nm의 파장에서 5nm 간격으로 흡광도를 스캔하였다.Next, the supernatant was taken and diluted, and absorbance was scanned at 5 nm intervals at a wavelength of 300-700 nm.
도 5a 내지 도 5f는 본 발명의 실시예에 따라 다양한 종류의 용매를 이용하여 스피루리나 분말의 UV-Vis 흡광도를 분석한 결과를 나타내는 도면이다.5A to 5F are diagrams showing results of analyzing UV-Vis absorbance of spirulina powder using various types of solvents according to an embodiment of the present invention.
도면을 참조하면, 각각의 스피루리나 분말의 용매별 UV-Vis 흡광도 분석결과로서, 도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 UV-Vis 흡광도 분석 결과를 나타내고 있다.Referring to the drawings, as a result of UV-Vis absorbance analysis for each solvent of each spirulina powder, reference numerals (a), (b), (c) shown in the figure, (a) are from Hawaii, and (b ) Shows the results of UV-Vis absorbance analysis of Chinese-made, and (c) domestic spruurina powder.
여기서, 본 발명의 실시예에 적용된 다수개의 용매는, 상술한 바와 같이, HEPES, PBS, NaCl 수용액, 에탄올, 이소프로파놀, 및 아세토니트릴 일 수 있다.Here, the plurality of solvents applied to the embodiment of the present invention, as described above, HEPES, PBS, NaCl aqueous solution, ethanol, isopropanol, and acetonitrile may be.
유기용매별로 추출한 물질을 이용해 산지를 분별하는 방법을 실시예로써 설명하면, 스피루리나 분말을 0.2 g/mL의 농도로서 사용하여 물리약학적 특성이 다른 다수개의 용매에 분산시켰을 때 용매의 종류에 따라, 도면에 도시된 바와 같이, 서로 다른 지표성분을 용출시킬 수 있으며,When the method of classifying the production area using the material extracted by each organic solvent is described as an example, when spirulina powder is used as a concentration of 0.2 g/mL and dispersed in a plurality of solvents having different physicochemical properties, depending on the type of the solvent, As shown in the figure, different indicator components can be eluted,
따라서, 본 발명의 실시예에 따라 상기 용매별로 용출된 지표성분의 최대 흡광도 값을 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Therefore, according to an embodiment of the present invention, the maximum absorbance value of the index component eluted for each solvent may be compared to discriminate the production area.
<실시예 7> 용매의 농도별로 추출한 물질을 모니터링 하는 방법<Example 7> Method for monitoring the substance extracted by the concentration of the solvent
농도별로 추출한 물질을 모니터링하는 방법을 실시예로써 순차적으로 설명하면 다음과 같다.A method for monitoring the extracted substances by concentration is sequentially described as an example.
먼저, 100g 이상의 스피루리나 분말에서 0.05~0.40g 혹은 0.05~0.60g을 정밀히 칭량하여 용매 1mL에 분산시켰다. 이때, 사용된 용매는 0.1M HEPES, 0.1M PBS, 0.1 M NaCl, 에탄올, 이소프로파놀 및 아세토니트릴에 해당하며, 본 발명의 실시예에서는 HEPES와 에탄올을 대표용매로 사용하였다.First, 0.05 to 0.40 g or 0.05 to 0.60 g was precisely weighed from 100 g or more of spirulina powder and dispersed in 1 mL of a solvent. At this time, the solvent used corresponds to 0.1M HEPES, 0.1M PBS, 0.1 M NaCl, ethanol, isopropanol and acetonitrile, and HEPES and ethanol were used as representative solvents in the examples of the present invention.
다음으로, 용매에 분산시킨 스피루리나 분말을 soaking하여 30 분간 100 rpm에서 흔들어 섞은 뒤, 3 일간 암소에서 방치하고, 3,000 rpm에서 10분간 원심분리하였다.Next, the spirulina powder dispersed in a solvent was soaked and shaken at 100 rpm for 30 minutes, then left in the dark for 3 days and centrifuged at 3,000 rpm for 10 minutes.
다음으로, 상등액을 취해 동일 용매로 희석하여 사진을 촬영하고, 300-700 nm의 파장에서 5 nm 간격으로 흡광도를 스캔하였다. Next, the supernatant was taken, diluted with the same solvent, and photographed, and absorbance was scanned at 5 nm intervals at a wavelength of 300-700 nm.
도 6a 내지 도 6b는 본 발명의 실시예에 따라 다양한 농도별로 스피루리나 분말의 UV-Vis 흡광도를 분석한 결과를 나타내는 도면이다.6A to 6B are diagrams showing results of analyzing UV-Vis absorbance of spirulina powder according to various concentrations according to an embodiment of the present invention.
도면을 참조하면, 각각의 스피루리나 분말의 농도별 UV-Vis 흡광도 분석결과로서, 도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 UV-Vis 흡광도 분석 결과를 나타내고 있다. Referring to the drawings, as a result of UV-Vis absorbance analysis by concentration of each spirulina powder, reference numerals (a), (b), (c) shown in the figure, (a) are from Hawaii, and (b ) Shows the results of UV-Vis absorbance analysis of Chinese-made, and (c) domestic spruurina powder.
여기서, 본 발명의 실시예에 적용된 대표 용매는, 상술한 바와 같이, HEPES, 및 에탄올 일 수 있다.Here, the representative solvent applied to the embodiment of the present invention, as described above, HEPES, and may be ethanol.
용매별로 추출한 물질을 이용해 산지를 분별하는 방법을 실시예로써 설명하면, 스피루리나 분말을 0.05 - 0.60 g/mL의 농도로 사용하여 특정 용매에 분산시켰을 때 스피루리나 분말 농도에 따라 방출되는 지표성분의 방출양 및 방출 속도에 차이가 있으며,When the method of classifying the production area using the material extracted by the solvent is described as an example, the amount of the surface component released when the spirulina powder is dispersed in a specific solvent using the concentration of 0.05-0.60 g/mL and There is a difference in the release rate,
따라서, 본 발명의 실시예에 따라 상기 용매별로 용출된 지표성분의 최대 흡광도 값을 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Therefore, according to an embodiment of the present invention, the maximum absorbance value of the index component eluted for each solvent may be compared to discriminate the production area.
<실시예 8> 희석 농도를 사용한 용매의 농도별 추출물 이미지를 이용하는 방법<Example 8> Method of using extract image by concentration of solvent using dilution concentration
도 7은 도 6에 사용된 스피루리나 분말의 농도별 추출물에 대한 이미지를 나타내는 도면이다.7 is a view showing an image of the extract by concentration of spirulina powder used in FIG.
도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 농도별 추출물 이미지를 나타내고 있다. Reference numerals (a), (b), and (c) shown in the drawings, respectively, (a) is from Hawaii, (b) is from China, and (c) is an extract image by concentration of domestic spruurina powder Is shown.
본 발명의 실시예에서는, 흡광도 비교 분석을 위해 희석 농도를 사용하였으며, 즉, 스피루리나 분말을 0.0012 ~ 0.006 g/mL의 농도로서 희석하여 특정 용매에 분산시켰을 때 용출된 추출물의 색깔을 비교하였다.In the embodiment of the present invention, a dilution concentration was used for comparative analysis of absorbance, that is, the color of the eluted extract was compared when diluting spirulina powder to a concentration of 0.0012 to 0.006 g/mL and dispersing it in a specific solvent.
이때, 상기 특정용매는, HEPES, 및 에탄올 일 수 있다.At this time, the specific solvent may be HEPES, and ethanol.
따라서, 본 발명의 실시예에 따라 스피루리나 분말을 0.0012 ~ 0.006 g/mL의 농도로서 희석하여 특정 용매에 분산시켰을 때 용출된 추출물의 색깔을 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Therefore, according to an embodiment of the present invention, dilute the spirulina powder to a concentration of 0.0012 to 0.006 g/mL and disperse it in a specific solvent to compare the color of the eluted extract to distinguish the production area.
<실시예 9> 전기영동법(SDS-PAGE)을 이용하는 방법<Example 9> Method using electrophoresis (SDS-PAGE)
도 8은 본 발명의 실시예에 따라 전기영동법을 이용한 스피루리나 분말의 용매추출물에 대한 단백질 분석결과를 나타내는 도면이다.8 is a view showing the results of protein analysis for a solvent extract of spirulina powder using electrophoresis according to an embodiment of the present invention.
도면에 도시된 도면참조부호 (a),(b),(c)는 각각, (a)는 하와이산, (b)는 중국산, 및 (c)는 국내산 스프리루리나 분말의 차이를 나타내고 있다. Reference numerals (a), (b), and (c) shown in the drawings indicate differences between (a) Hawaiian, (b) Chinese, and (c) domestic spruurina powders. .
본 발명의 실시예에 따르면, 먼저, SDS-PAGE용 스피루리나 시료는 0.20 g/mL의 0.1 M HEPES 용액 혹은 Nacl, 에탄올을 사용하여 3일간 추출한 것을 사용할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, first, the spirulina sample for SDS-PAGE can be used for extraction for 3 days using 0.20 g/mL of 0.1 M HEPES solution or Nacl, ethanol.
다음으로, BCA정량법을 이용하여 562nm에서 흡광도를 측정하여 정량하였다.Next, the absorbance was measured at 562 nm using the BCA quantitative method to quantify it.
다음으로, 상등액을 취해 6일간 방치 후 사용하였다Next, the supernatant was taken and used after being left for 6 days.
다음으로, SDS-PAGE용 겔은 550μg을 8-16%의 gradient gel을 사용하였으며, 100 V에서 60 min간 전기영동하여, Coomassie brilliant blue staining kit (BMS)로 염색하였다.Next, for the SDS-PAGE gel, 550 μg of 8-16% gradient gel was used, electrophoresis at 100 V for 60 min, and stained with Coomassie brilliant blue staining kit (BMS).
따라서, 본 발명의 실시예에 따라 스피루리나 분말을 특정 용매에 분산시켰을 때 용출된 추출액을 전기영동법으로 겔 상에 단백질 밴드로서 분석한 결과를 비교하여 산지를 분별할 수 있다.Therefore, according to an embodiment of the present invention, when the spirulina powder is dispersed in a specific solvent, the eluted extract can be compared by analyzing the result of analysis as a protein band on a gel by electrophoresis to discriminate the production area.
상기와 같이, 본 발명은, 스피루리나 분말 가루에 함유된 지표성분을 이용하여 생산지를 확인할 수 있는 산지 분별방법 및 이를 위한 용매추출방법을 제공하는 효과가 있다.As described above, the present invention has an effect of providing a method of fractionating a production area and a method of extracting a solvent therefor, which can confirm a production area using an index component contained in a spirulina powder powder.
지금까지 본 발명에 대해서 상세히 설명하였으나, 그 과정에서 언급한 실시예는 예시적인 것일 뿐이며, 한정적인 것이 아님을 분명히 하고, 본 발명은 이하의 특허청구범위에 의해 제공되는 본 발명의 기술적 사상이나 분야를 벗어나지 않는 범위내에서, 균등하게 대처될 수 있는 정도의 구성요소 변경은 본 발명의 범위에 속한다 할 것이다.The present invention has been described in detail so far, but the embodiments mentioned in the process are merely illustrative, and it is clear that it is not limited, and the present invention is the technical spirit or field of the present invention provided by the following claims. Within the scope of not departing from, it will be said that component changes to the extent that they can be dealt with equally fall within the scope of the present invention.
Claims (14)
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있는 것을 특징으로 하고,
상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은,
상기 스피루리나 분말 각각을 푸레에 변환 적외선(FT-IR) 분광스펙트럼을 이용하여 분석한 결과에서 나타나는 피크 형태를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함하고,
상기 스피루리나 분말은,
3,500-3,200, 3,000-2,850, 3,300-2,500, 2,260-2,100, 1,680-1,640, 1,550-1,475, 1,470-1,450, 1,500-1,400, 1,400-1,290, 1,320-1,000, 1,300-1,150, 1,250-1,020, 1,250-1,020, 910-665, 700-610 및 690-515의 파수(cm-1)에서 피크를 갖는 alcohols과 phenols(O-H stretching vibration), alkenes(C-H stretching vibration), carboxylic acids(O-H stretching vibration), alkynes-C(triple bond)C- stretching vibration, alkenes(-C=C- stretching vibration), nitro compounds(N-O asymmetric stretching vibration), alkenes(C-H bend stretching vibration), aromatics(C-C stretching vibration), nitro compounds(N-O stretching vibration), alcohols과 carboxylic acids, esters, ethers(C-O stretching vibration), alkyl halides(C-H wag (-CH2X) stretching vibration), aliphatic amines(C-N s stretching vibration), aliphatic amines(C-N stretch stretching vibration), primary 및 secondary amines(N-H wag stretching vibration), alkynes-C(triple bond)C-H: C-H bend stretching vibration, alkyl halides(C-Br stretching vibration)를 포함하는 혼합물질인 것을 특징으로 하는 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법
In the classification method for comparative analysis of a number of spirulina powder of different origin,
It is possible to discriminate the production area by using one or more of a method of extracting and comparing an index component contained in the plurality of spirulina powders, and a method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders. Features,
The method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders,
Each of the spirulina powder includes a method of classifying the production area by comparing the peak form shown in the analysis result using the Fourier transform infrared (FT-IR) spectral spectrum,
The spirulina powder,
3,500-3,200, 3,000-2,850, 3,300-2,500, 2,260-2,100, 1,680-1,640, 1,550-1,475, 1,470-1,450, 1,500-1,400, 1,400-1,290, 1,320-1,000, 1,300-1,150, 1,250-1,020, 1,250- Alcohols and phenols (OH stretching vibration), alkenes (CH stretching vibration), carboxylic acids (OH stretching vibration), alkynes- with peaks at wavenumbers (cm-1) of 1,020, 910-665, 700-610 and 690-515 C(triple bond)C- stretching vibration, alkenes(-C=C- stretching vibration), nitro compounds(NO asymmetric stretching vibration), alkenes(CH bend stretching vibration), aromatics(CC stretching vibration), nitro compounds(NO stretching vibration), alcohols and carboxylic acids, esters, ethers (CO stretching vibration), alkyl halides (CH wag (-CH2X) stretching vibration), aliphatic amines (CN s stretching vibration), aliphatic amines (CN stretch stretching vibration), primary and Secondary amines (NH wag stretching vibration), alkynes-C (triple bond) CH: CH bend stretching vibration, alkyl halides (C-Br stretching vibration), characterized in that the mixture using spirulina powder powder Method of classification
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있는 것을 특징으로 하고,
상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은,
상기 스피루리나 분말 각각을 X선 회절분석패턴(XRD)으로 결정성을 확인하여 5~80도 범위의 theta (θ)까지 분석하였을 때 40도 이하에서 나타나는 피크형태를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함하는 것을 특징으로 하는 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법
In the classification method for comparative analysis of a number of spirulina powder of different origin,
It is possible to discriminate the production area by using one or more of a method of extracting and comparing an index component contained in the plurality of spirulina powders, and a method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders. Features,
The method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders,
Includes a method of discriminating mountain regions by comparing peak shapes appearing below 40 degrees when each of the spirulina powders is analyzed to X-ray diffraction analysis pattern (XRD) to theta (θ) in a range of 5 to 80 degrees Method of fractionating production using spirulina powder powder, characterized in that
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있는 것을 특징으로 하고,
상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법은,
상기 스피루리나 분말 각각을 X선 광전자분광법(XPS)으로 분석하여 Na1s, N1s, Si2p, Ca2p, Fe2p,및 Zn2p 를 나타내는 결합에너지 피크형태를 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함하는 것을 특징으로 하는 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법
In the classification method for comparative analysis of a number of spirulina powder of different origin,
It is possible to discriminate the production area by using one or more of a method of extracting and comparing an index component contained in the plurality of spirulina powders, and a method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders. Features,
The method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders,
Spirulina powder characterized in that it comprises a method of analyzing each of the spirulina powder by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) to compare the peak form of binding energy representing Na1s, N1s, Si2p, Ca2p, Fe2p, and Zn2p Method of classifying the production area using flour
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있는 것을 특징으로 하고,
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은,
스피루리나 분말을 0.2 g/mL의 농도로서 사용하여 물리약학적 특성이 다른 다수개의 용매에 분산시켰을 때 용매의 종류에 따라 서로 다른 지표성분을 용출시킬 수 있으며,
상기 용출된 지표성분의 최대 흡광도 값을 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함하는 것을 특징으로 하는 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법
In the classification method for comparative analysis of a number of spirulina powder of different origin,
It is possible to discriminate the production area by using one or more of a method of extracting and comparing an index component contained in the plurality of spirulina powders, and a method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders. Features,
Solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powder,
When spirulina powder is used as a concentration of 0.2 g/mL and dispersed in multiple solvents with different physicochemical properties, different indicator components can be eluted depending on the type of the solvent.
A method of fractionating a region using spirulina powder powder, comprising a method of fractionating the region by comparing the maximum absorbance value of the eluted indicator component.
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있는 것을 특징으로 하고,
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은,
스피루리나 분말을 0.05 - 0.60 g/mL의 농도로 사용하여 특정 용매에 분산시켰을 때 스피루리나 분말 농도에 따라 방출되는 지표성분의 방출양 및 방출 속도에 차이가 있으며,
상기 방출된 지표성분의 최대 흡광도 값을 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함하는 것을 특징으로 하는 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법
In the classification method for comparative analysis of a number of spirulina powder of different origin,
It is possible to discriminate the production area by using one or more of a method of extracting and comparing an index component contained in the plurality of spirulina powders, and a method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders. Features,
Solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powder,
When the spirulina powder is dispersed in a specific solvent using a concentration of 0.05-0.60 g/mL, there is a difference in the release amount and release rate of the surface components released depending on the spirulina powder concentration.
A method of fractionating a region using spirulina powder powder, comprising a method of fractionating the region by comparing the maximum absorbance value of the released indicator component
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법, 및 상기 다수개의 스피루리나 분말 각각의 물리약학적 특성을 분석하여 비교하는 방법 중 하나 이상의 방법을 이용하여 산지를 분별할 수 있는 것을 특징으로 하고,
상기 다수개의 스피루리나 분말에 함유된 지표성분을 추출하여 비교하는 용매추출방법은,
스피루리나 분말을 0.0012 ~ 0.006 g/mL의 농도로서 희석하여 특정 용매에 분산시켰을 때 용출된 추출물의 색깔을 비교하여 산지를 분별하는 방법을 포함하는 것을 특징으로 하는 스피루리나 분말 가루를 이용한 산지 분별방법
In the classification method for comparative analysis of a number of spirulina powder of different origin,
It is possible to discriminate the production area by using one or more of a method of extracting and comparing an index component contained in the plurality of spirulina powders, and a method of analyzing and comparing the physical and pharmaceutical properties of each of the plurality of spirulina powders. Features,
Solvent extraction method for extracting and comparing the index components contained in the plurality of spirulina powder,
Method of fractionating acid using spirulina powder by comparing the color of the eluted extract when diluting spirulina powder to a concentration of 0.0012 to 0.006 g/mL and dispersing it in a specific solvent.
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101881977B1 (en) * | 2017-07-18 | 2018-07-25 | 한국생명공학연구원 | Single nucleotide polymorphism marker for discriminating Ever-bearing or June-bearing strawberry cultivar and uses thereof |
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2018
- 2018-10-26 KR KR1020180129321A patent/KR102116516B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (1)
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| KR20200047186A (en) | 2020-05-07 |
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