KR102083669B1 - Method for manufacturing germinated oats extract having high-content avenanthramides - Google Patents
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Abstract
본 발명은 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 발아 귀리 추출물의 제조 방법; 및 상기 방법으로 제조된 발아 귀리 추출물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명의 제조 방법을 통해 제조된 발아 귀리 추출물은 유용 활성 성분인 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가되고 베타글루칸의 함량이 감소되었으므로, 아베난쓰라마이드의 활성 효과가 증가할 수 있다. 특히, 다양한 국내 개발 품종 중 대양 품종의 귀리 추출물에서 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가된 수준을 나타내므로, 대양 품종의 귀리를 발아귀리 추출물로서 제조하였을 때 아베난쓰라마이드에 의한 효과가 증가될 수 있다.The present invention is a method for producing a germinated oat extract comprising a high content of abenanthramid; And it relates to a germinated oat extract prepared by the above method. More specifically, the germinated oat extract prepared through the preparation method of the present invention has a significant increase in the amount of useful active ingredient avenanthramid and a decrease in the content of beta glucan, thereby increasing the activity effect of avenanthramide. Can increase. In particular, the content of avenanthramid in oat extracts of ocean varieties among various domestically developed varieties shows a significantly increased level. Can be increased.
Description
본 발명은 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 발아 귀리 추출물의 제조 방법; 및 상기 방법으로 제조된 발아 귀리 추출물에 관한 것이다.The present invention is a method for producing a germinated oat extract comprising a high content of abenanthramid; And it relates to a germinated oat extract prepared by the above method.
전 세계 식품 트렌드는 "건강"과 "환경"으로 건강기능 향상과 원료 안정성을 고려한 식품 소비가 급격하게 늘고 있다. 이와 관련하여 국내에서도 귀리 종실의 높은 영양학적 가치로 인해 식용으로 인한 소비가 급격하게 늘고 있으며, 귀리 도입량은 2011년에 3,890톤이었으나 2012년 4,548톤, 2013년 5,019톤으로 크게 증가하였고, 2015년 상반기 귀리 수입량은 20,000톤(700만달러)으로 지난해 대비 수입량이 478.1%로 폭발적으로 증가하였다(Customs import and export trade statistics 2015, KDI Economic Information Center 2015). 국내 귀리 소비가 크게 증가하면서 2006년 2ha였던 재배면적은 2014년 350ha로 175배 증가하여 국내 생산량도 2006년에 6톤, 2011년에 600톤, 2012년에 820톤으로 꾸준히 증가하고 있다.Global food trends are "health" and "environment", and food consumption is rapidly increasing considering health functions and raw material stability. In relation to this, consumption of oat seeds is rapidly increasing in Korea due to the high nutritional value of oat seeds, and the introduction of oats was 3,890 tons in 2011, but increased to 4,548 tons in 2012 and 5,019 tons in 2013. Oat imports were 20,000 tons ($ 7 million), an increase of 478.1% over the previous year (Customs import and export trade statistics 2015, KDI Economic Information Center 2015). With a significant increase in domestic oat consumption, the cultivated area, which was 2 ha in 2006, increased 175 times to 350 ha in 2014, and domestic production has steadily increased to 6 tons in 2006, 600 tons in 2011 and 820 tons in 2012.
귀리는 다른 곡물에 비해 단백질과 지질이 풍부하고, 불포화지방산이 다량 함유 되어 있다. 라이신 등 필수아미노산이 풍부하며, 비타민 B군, 비타민 E, 미네랄도 풍부하며, 식이섬유인 베타글루칸도 다량 함유되어 있어 식품학적 가치가 매우 높은 작물로 인식되고 있다.Oats are richer in protein and lipids than other grains, and are high in unsaturated fatty acids. It is rich in essential amino acids such as lysine, it is also rich in vitamin B group, vitamin E and minerals, and contains a large amount of dietary fiber beta glucan.
귀리에는 다양한 종류의 폴리페놀이 존재하는데 귀리의 특이적인 항산화 성분인 아베난쓰라마이드류는 아토피피부염에 효능이 있는 것으로 알려져 있으며(Cai et al. 2011, Dimberg et al. 1993, Peterson et al. 2002), 아베난쓰라마이드류(Avenanthramides, AVAs)가 처음 밝혀진 후(Dimberg, 1993), AVAs를 분리 정제 하려는 시도들이 이루어졌으나 완전히 성공하고 있지는 못하다. AVAs는 현재까지 강력한 황산화제로 알려져 있으며, 잠재적인 항염증, 혈압 조절에 효능이 있음이 보고되었고(Lie, 2004; Nie, 2006), The QuakerOats Company(식품회사, 미국)와 Saskatchewan 대학(캐나다)에서 AVAs 정제 관련한 국제 특허를 점유하고 있으며, 귀리의 아베난쓰라마이드 관련 식품소재 연구는 활발히 진행되고 있다.There are various types of polyphenols in oats. Avenanthramides, a specific antioxidant component of oats, are known to be effective for atopic dermatitis (Cai et al. 2011, Dimberg et al. 1993, Peterson et al. 2002). After the first discovery of Avenanthramides (AVAs) (Dimberg, 1993), attempts have been made to isolate and purify AVAs but have not been fully successful. AVAs are known to be potent sulphating agents to date and have been reported to be potent anti-inflammatory and blood pressure control agents (Lie, 2004; Nie, 2006), The QuakerOats Company (Food Company, USA) and Saskatchewan University (Canada). OVA holds international patents related to AVAs refining, and research on food materials related to avenanthramides of oats is actively underway.
또한, 알츠하이머 질환(Alzheimer*j*s Diseas은 기억력, 사고력 및 행동상의 문제를 야기하는 퇴행성 신경질환 중 하나로, 치매 사례의 60-80%를 차지하는 것으로 추정되고 있다(Blennow et al.,2006, Lancet 368:387). 알츠하이머 질환은 조직병리학적으로는 뇌의 전반적인 위축, 뇌실의 확장, 신경섬유의 다발성 병터(신경섬유뒤틀림) 및 노인반(neuritic plaque)을 유발한다. 알츠하이머 질환의 발병 원인으로는 여러 가지가 보고되고 있으나, 아밀로이드-β 단백질의 축적에 의한 발명이 가장 유력한 원인으로 보고되어 있다. 아밀로이드-β 단백질의 축적은 신경 세포에 손상을 야기하며, GSK3β 효소를 활성화 시켜 기억 형성에 필요한 장기강화(Long Term Potentiation; LTP)를 방해하는 것으로 알려져 있다. 발병 후 사망에 이르는 기간은 일반적으로 6~8년 정도이지만, 20년이 넘는 경우도 있다. In addition, Alzheimer's disease (Alzheimer * j * s Diseas) is a degenerative neurological disorder that causes memory, thinking and behavioral problems and is estimated to account for 60-80% of dementia cases (Blennow et al., 2006, Lancet). 368: 387) Alzheimer's disease causes histopathologically atrophy of the brain, enlargement of the ventricles, multiple lesions of nerve fibers (neural fiber distortion), and neuritic plaque. Eggplants have been reported, but the invention by the accumulation of amyloid-β protein is reported to be the most likely cause: the accumulation of amyloid-β protein causes damage to nerve cells and activates GSK3β enzyme to strengthen organs necessary for memory formation. Is known to interfere with Long Term Potentiation (LTP), and death from onset is usually 6-8 years, but more than 20 years. There.
미국의 경우 5백만 명 이상이 알츠하이머 질환에 걸린 것으로 알려져 있으며 미국 내 65세 이상의 인구 비율이 계속 증가함에 따라 알츠하이머 질환 및 기타 치매에 걸린 미국인의 수는 매년 커질 것으로 예견되고 있다. 2000년에 65세 이상 노령 인구가 전체 인구의 7.2%를 넘어 고령화 사회에 접어든 한국은 2010년에 노령 인구가 전체의 11%를 차지하게 되어 치매환자의 증가가 예견되었으며, 실제 2012년에 보건복지부에서 행한 전국 치매환자 역학조사에서 65세 이상 노인의 치매 발생률은 100명당 9.18명꼴인 540,755명으로 추정되었으며 알츠하이머 질환에 의한 치매는 전체 치매의 70.5%에 이르는 것으로 나타났다. 이는 해외의 선행 연구에서 조사된 전체 치매환자 중 알츠하이머성 치매 환자가 50~70%로 나타난 것과 대비해서 높은 것으로 알츠하이머 질환의 치료가 향후 노인인구 증가와 맞물린 중요한 해결 대상으로 떠오르고 있음을 시사한다.In the United States, more than 5 million people are known to have Alzheimer's disease, and the number of Americans with Alzheimer's disease and other dementia is expected to grow each year as the proportion of people age 65 and older in the United States continues to grow. In 2000, the elderly population aged 65 years or older exceeded 7.2% of the total population and entered an aging society.In 2010, the elderly population accounted for 11% of the total population, and an increase in dementia patients was predicted. The National Epidemiology Survey of Dementia Patients conducted by the Ministry of Health and Welfare estimated that the incidence of dementia among the elderly aged 65 or older was 540,755, or 9.18 per 100 people. Alzheimer's disease was 70.5% of all dementia. This is high compared to 50% to 70% of Alzheimer's disease patients among the dementia patients surveyed in overseas studies, suggesting that treatment of Alzheimer's disease is emerging as an important solution for the elderly population.
이러한 귀리 종실에는 일반적으로 내영과 외영이라는 껍질이 있어 가공시 이것을 제거해야 하는 노력이 필요하다. 이와 관련하여 귀리는 탈곡작업을 할 때 영이 제거되지 않는 겉귀리와 영의 제거가 용이한 쌀귀리로 나뉘어진다(Han et al. 2008, Han et al. 2014). 국내에서 쌀귀리는 겉귀리에 비하여 영을 제거하기 위한 공정이 적어, 수확 후 가공 노력이 적게 들기 때문에 식용으로 이용하기 위해 영이 잘 벗겨지는 탈부율이 높은 쌀귀리 품종이 유리한것으로 여겨지고 있다(Chae et al. 2008, Han et al. 2008, Han et al. 2014, Park et al. 1995). These oat seeds usually have inner and outer shells that require efforts to remove them during processing. In this regard, oats are divided into shelled oats, which are not removed when threshing, and rice oats, which are easily removed (Han et al. 2008, Han et al. 2014). It is considered that rice oat varieties with high stripping rate, which are easily stripped for food use, are advantageous because rice oats have less process for removing zero than oat and less processing effort after harvesting (Chae et al. 2008, Han et al. 2008, Han et al. 2014, Park et al. 1995).
귀리 재배 및 가공을 보다 바람직하게 사용하기 위해 개발된 다양한 품종이 있으며, 중국에서 21 품종의 총 폴리페놀 함량을 비교 분석하여 101.7 내지 151.9 mg/100 g의 수준으로 폴리페놀 화합물이 포함되어있음이 보고된 바 있다(TONG, Li-tao, et al. 2014, 13.8: 1809-1816.). 이와 관련되어 국내에서도 귀리 품종이 다양하게 개발되었고, 귀리에 포함된 활성 성분의 추출 효율을 높이기 위한 연구 또한 계속되고 있다. 국제공개특허 WO 2010/108277호에서는 증가된 아베난쓰라마이드 농도를 가지는 귀리의 제조 방법을 개시하고 있다. 상기 제조 방법에 의하면, 귀리를 먼저 휴면성을 향상시커거나(휴면 귀리) 휴면성을 유도한 다음(비휴면 귀리), 상기 휴면 귀리 또는 비휴면 귀리를 발아처리하였을 때 아베난쓰라마이드 농도가 증가될 수 있음이 개시되어 있다. 그러나, 이는 휴면 귀리 또는 휴면화를 유도한 비휴면 귀리를 대상으로 하는 단계를 필수적으로 구성하고 있어, 발아처리 이전의 전처리 단계를 필수로 요구하고 있다.There are various varieties that have been developed to better use oat cultivation and processing, and have reported polyphenol compounds at levels of 101.7 to 151.9 mg / 100 g by comparing and analyzing the total polyphenol content of 21 varieties in China. (TONG, Li-tao, et al. 2014, 13.8: 1809-1816.). In this regard, various oat varieties have been developed in Korea, and researches to improve the extraction efficiency of the active ingredients contained in oats are also continuing. International Publication No. WO 2010/108277 discloses a method for preparing oats with increased avenanthramid concentration. According to the manufacturing method, the concentration of avenanthramide may be increased when oats are first improved in dormancy (dormant oats) or induction of dormancy (non-dormant oats), and then germinating the dormant or non-dormant oats. Yes is disclosed. However, since it essentially constitutes a step for dormant oats or non-dormant oats that induce dormancy, a pretreatment step prior to germination is required.
이에, 본 발명자들은 귀리에 대한 수요가 증가함에 따라 국내에서 개발된 귀리 품종의 이용 증진을 위해 귀리 내 유용 활성 성분인 아베난쓰라마이드의 함량이 증진된 귀리 추출물을 제조하기 위해 노력한 결과, 국내에서 개발된 다양한 품종의 귀리 중 대양 품종의 추출물에 아베난쓰라마이드가 유의적으로 높은 수준의 함량으로 포함된 것을 확인하였다. 또한, 대양 귀리를 발아처리한 후 추출한 발아 귀리 추출물에 아베난쓰라마이드의 함량이 증가하고 베타글루칸의 함량이 유의적으로 감소하는 것을 확인하였으며, 상기 발아 귀리 추출물은 항치매 활성 및 LTP(장기기억강화) 효과를 유의적으로 나타내는 것을 확인함으로써, 발아처리한 귀리의 추출물을 제조하여 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 조성물을 제조하는 방법을 개발함으로써, 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the present inventors have tried to produce an oat extract with an increased content of avenanthramid, a useful active ingredient in oats, in order to promote the use of oat varieties developed in Korea as the demand for oats increases. Among the various varieties of oats developed, it was confirmed that the extract of ocean varieties contained significantly high levels of avenanthramides. In addition, it was confirmed that the content of avenanthramide and the content of beta glucan decreased significantly in the germinated oat extract extracted after germination of ocean oats, and the germinated oat extract had antidementia activity and LTP (long-term memory). The present invention was completed by developing a method of preparing a composition containing high content of avenanthramid by preparing an extract of germinated oat to confirm that the reinforcement) effect was significantly shown.
이에, 본 발명자들은 국내에서 개발된 품종의 추출물 중 대양 품종에서 유의적으로 높은 수준의 아베난쓰라마이드 함량이 포함된 것을 확인하였으며, 발아처리한 대양 귀리의 추출물, 유도처리, 한외여과막 처리에서 아베난쓰라마이드 함량이 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 또한, 본 발명의 발아처리한 대양 귀리의 추출물에서 항치매 활성 및 LTP(장기기억강화) 효과가 나타나는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.Thus, the present inventors confirmed that the avenantramid content of a significantly higher level in the ocean varieties of the extracts of the domestically developed varieties, Ave in the extract, induction treatment, ultrafiltration membrane treatment of the germinated ocean oats It was confirmed that the nantramide content increased significantly. In addition, the present invention was completed by confirming that anti-dementia activity and LTP (long-term reinforcement) effect appeared in the germinated extract of the ocean oats.
따라서, 본 발명의 목적은, 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 발아 귀리 추출물의 제조 방법 및 이를 통해 제조된 발아 귀리 추출물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a method for producing a germinated oat extract comprising a high content of avenanthramid and a germinated oat extract produced through the same.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 단계로 구성된, 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 발아 귀리 추출물의 제조 방법을 제공한다:In order to achieve the above object, the present invention provides a method for producing a germinated oat extract comprising a high content of avenanthramid, consisting of the following steps:
i) 귀리 종자를 발아시키는 단계;i) germinating oat seeds;
ii) 상기 단계 i)에서 발아시킨 귀리를 용매 추출하여 발아 귀리 추출물을 수득하는 단계.ii) solvent extraction of the oats germinated in step i) to obtain a germinated oat extract.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된, 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 발아 귀리 추출물을 제공한다.The present invention also provides a germinated oat extract prepared by the above method, comprising a high content of avenanthramid.
본 발명의 바람직한 일실시예에서, 상기 단계 i)의 발아는 귀리 종자를 15 내지 25℃에서 24 내지 72시간 동안 수분을 공급하여 발아 처리한 것일 수 있으며, 추가로 귀리 종자에 SA(Salicilic acid), IAA(Indole acetic acid) 및 H2O2(Hydrogen peroxide)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유도인자를 처리하여 발아 처리한 것일 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the germination of step i) may be a germination treatment of the oat seeds by supplying moisture at 15 to 25 ℃ for 24 to 72 hours, further SA (Salicilic acid) to the oat seeds , IAA (Indole acetic acid) and H 2 O 2 (Hydrogen peroxide) may be a germination treatment by treating any one or more inducers selected from the group consisting of.
본 발명의 또다른 바람직한 일실시예에서, 상기 단계 i)의 귀리는 선양, 대양, 조양, 수양 및 중모 2005 중 어느 하나로 이루어진 군에서 선택된 쌀귀리; 또는 삼한, 동한, 하이스피드 및 조풍 중 어느 하나로 이루어진 군에서 선택된 겉귀리; 중 어느 하나의 품종으로 이루어진 것에서 선택되는 것일 수 있다.In another preferred embodiment of the present invention, the oat of step i) is selected from the group consisting of any one of Shenyang, ocean, Chaoyang, weeping and medium hair 2005; Or an outer oat selected from the group consisting of Samhan, Donghan, High Speed, and Tide; It may be selected from one consisting of any one of the varieties.
본 발명의 또 다른 바람직한 일실시예에서, 상기 단계 ii)의 용매 추출은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 것일 수 있으며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것일 수 있다.In another preferred embodiment of the present invention, the solvent extraction of step ii) may be to extract the water, C1 to C4 lower alcohol or a mixture thereof as a solvent, the lower alcohol is ethanol or methanol Can be.
본 발명의 또다른 바람직한 일실시예에서, 상기 아베난쓰라마이드는 아베난쓰라마이드 A, 아베난쓰라마이드 B 및 아베난쓰라마이드 C로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것일 수 있다.In another preferred embodiment of the present invention, the avenanthramid may be any one or more selected from the group consisting of avenanthramid A, avenanthramid B and avenanthramid C.
본 발명의 또다른 바람직한 일실시예에서, 상기 고함량 아베난쓰라마이드의 농도는 1500 ㎍/g 잔사 이상일 수 있고, 이 중 아베난쓰라마이드 C의 농도는 400 ㎍/g 잔사 이상일 수 있다. In another preferred embodiment of the present invention, the concentration of the high content of avenanthramid may be at least 1500 μg / g residue, and the concentration of avenanthramid C may be at least 400 μg / g residue.
본 발명의 또다른 바람직한 일실시예에서, iii) 상기 단계 ii)에서 수득한 발아 귀리 추출물을 한외여과하여 분자량 30 kDa 이하의 저분자량 추출물을 분리 및 수득하는 단계;를 추가로 포함할 수 있다. In another preferred embodiment of the present invention, iii) ultrafiltration the germinated oat extract obtained in step ii) to separate and obtain a low molecular weight extract having a molecular weight of 30 kDa or less.
본 발명의 제조 방법을 통해 제조된 발아 귀리 추출물은 유용 활성 성분인 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가되고 베타글루칸의 함량이 감소되었으므로, 아베난쓰라마이드의 활성 효과가 증가할 수 있다. 또한, 본 발명의 발아 귀리 추출물은 활성 성분의 함량이 증가함을 통해 항치매 활성 및 LTP(장기기억강화) 효과를 유의적으로 나타낼 수 있다. 특히, 다양한 국내 개발 품종 중 대양 품종의 귀리 추출물에서 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가된 수준을 나타내므로, 대양 품종의 귀리를 발아귀리 추출물로서 제조하였을 때 아베난쓰라마이드에 의한 효과가 증가될 수 있어, 효과적이다.Germinated oat extract prepared through the preparation method of the present invention has a significant increase in the content of avenanthramides, which is a useful active ingredient, and a decrease in the content of betaglucan, thereby increasing the active effect of avenanthramides. In addition, the germinated oat extract of the present invention can significantly exhibit anti-dementia activity and LTP (organic reinforcement) effects through the increase in the content of the active ingredient. In particular, the content of avenanthramid in oat extracts of ocean varieties among various domestically developed varieties shows a significantly increased level. Can be increased, it is effective.
도 1은 본 발명의 일 구현예에 따른 쌀귀리와 겉귀리의 각 품종별 아베난쓰라마이드를 정량한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 구현예에 따른 유도 인자 처리에 따른 대양 품종의 발아귀리 추출물 내 아베난쓰라마이드를 정량한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 구현예에 따른 한외 여과막 처리에 따른 대양 귀리 발아 추출물의 베아난쓰라마이드 함량에 관한 그래프이다. Figure 1 is a graph quantifying the avenanthramid for each variety of rice oats and outer oat according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 is a graph quantifying the avenanthramid in the germinated oat extract of the ocean cultivars according to the induction factor treatment according to an embodiment of the present invention.
Figure 3 is a graph of the beananthramid content of the sea oat germination extract according to the ultrafiltration membrane treatment according to an embodiment of the present invention.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.EMBODIMENT OF THE INVENTION Hereinafter, this invention is demonstrated in detail.
상술한 바와 같이, 귀리가 기능성 식품으로 수요가 증가하고 있으나, 국내에서 개발된 귀리 품종에 대한 연구가 미비하여 이용 증진을 위한 연구가 요구되고 있으며, 귀리에 포함된 활성 성분의 함량 증진에 대한 연구가 요구되고 있으나, 아직까지 국내 개발의 귀리 품종에서 유용 활성 성분의 함량을 증진할 수 있는 연구에 대하여는 보고된 바 없다.As mentioned above, although oats are increasing in demand as functional foods, studies on oat varieties developed in Korea are insufficient, and thus, research for promoting utilization is required, and studies on increasing the content of active ingredients included in oats Although there is a need for this research, there are no studies on improving the content of useful active ingredients in oat varieties of domestic development.
본 발명의 제조 방법을 통해 제조된 발아 귀리 추출물은 유용 활성 성분인 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가되고 베타글루칸의 함량이 감소되었으므로, 아베난쓰라마이드의 활성 효과가 증가할 수 있다. 또한, 본 발명의 발아 귀리 추출물은 활성 성분의 함량이 증가함을 통해 항치매 활성 및 LTP(장기기억강화) 효과를 유의적으로 나타낼 수 있다. 특히, 다양한 국내 개발 품종 중 대양 품종의 귀리 추출물에서 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가된 수준을 나타내므로, 대양 품종의 귀리를 발아귀리 추출물로서 제조하였을 때 아베난쓰라마이드에 의한 효과가 증가될 수 있어, 효과적이다.Germinated oat extract prepared through the preparation method of the present invention has a significant increase in the content of avenanthramides, which is a useful active ingredient, and a decrease in the content of betaglucan, thereby increasing the active effect of avenanthramides. In addition, the germinated oat extract of the present invention can significantly exhibit anti-dementia activity and LTP (organic reinforcement) effects through the increase in the content of the active ingredient. In particular, the content of avenanthramid in oat extracts of ocean varieties among various domestically developed varieties shows a significantly increased level. Can be increased, it is effective.
따라서, 본 발명은 하기 단계로 구성되는, 고함량 아베난쓰라마이드를 포함하는 발아 귀리 추출물의 제조 방법을 제공한다:Accordingly, the present invention provides a process for the preparation of germinated oat extract comprising high content avenanthramid, consisting of the following steps:
i) 귀리 종자를 발아시키는 단계;i) germinating oat seeds;
ii) 상기 단계 i)에서 발아시킨 귀리를 용매추출하여 발아 귀리 추출물을 수득하는 단계.ii) extracting the oats germinated in step i) to obtain a germinated oat extract.
본 발명의 "단계 i)의 귀리"는 선양, 대양, 조양, 수양, 중모 2005, 삼한, 동한, 하이스피드 및 조풍으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 귀리 품종일 수 있고, 구체적으로 대양, 중모 2005, 수양 및 선양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 귀리 품종인 것이 바람직하며, 보다 구체적으로 대양 품종인 것이 가장 바람직하다. 상기 귀리 품종 중에서, 선양, 대양, 조양, 수양 및 중모 2005 품종은 쌀귀리이며, 삼한, 동한, 하이스피드 및 조풍 품종은 겉귀리이다. 상기 귀리 품종은 모두 국내(대한민국)에서 개발 품종으로, 캐나다산 및 호주산과 같은 수입산 귀리에 비해 아베난쓰라마이드 및 페놀화합물을 높은 수준으로 포함하고 있으며, 이에 따라 높은 수준의 항산화 효과를 나타내므로 효과적이다."Oats of step i) of the present invention may be any one or more oat varieties selected from the group consisting of Shenyang, Ocean, Chaoyang, Weeping, Zhongmo 2005, Samhan, Donghan, High Speed, and Choeang, and specifically Ocean, Zhongmo 2005, preferably one or more oat varieties selected from the group consisting of weeping and Shenyang, more particularly ocean varieties. Of the oat varieties, Shenyang, Ocean, Chaoyang, Weeping and Medium Hair 2005 varieties are rice oats, and Samhan, Donghan, High Speed and Chooung varieties are oat. All of the oat varieties are developed in Korea (Korea) and contain higher levels of avenanthramides and phenolic compounds than imported oats such as Canadian and Australian, and thus exhibit high levels of antioxidant effects. to be.
본 발명의 "단계 i)의 발아"는 귀리 종자를 15 내지 25℃에서 24 내지 72시간 동안 수분을 공급하여 발아 처리한 것이 바람직하나, 통상적으로 귀리 종자를 발아시키기 위해 당업계에서 사용하는 온도, 시간 및 수분 공급의 조건이라면 제한없이 수행할 수 있다. 수분을 공급하는 것은 5 분 동안 살수; 및 20 분 동안 살수 정지를 반복 수행하는 시스템을 통하여 수행하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.The germination of step i) of the present invention is preferably an oat seed germination treatment by supplying moisture at 15 to 25 ° C. for 24 to 72 hours, but typically used in the art for germinating oat seeds, If conditions of time and water supply can be performed without limitation. Hydrating water for 5 minutes; And it is preferable to carry out through the system to repeat the watering stop for 20 minutes, but is not limited thereto.
본 발명의 "단계 i)의 발아"에서, 유도인자를 처리하는 경우에 아베난쓰라마이드의 함량이 더욱 증진될 수 있어, 효과적이다. 상기 유도인자는 SA(Salicilic acid), IAA(indole acetic acid) 및 H202(Hydrogen peroxide)으로 구성된 군으로부터 선택되는 유도인자인 것을 사용하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않으며, 귀리 종자의 발아를 유도할 수 있는 것으로 당업계에 알려진 유도제라면 제한없이 사용할 수 있다.In the "germination of step i) of the present invention, the content of avenanthramides can be further enhanced when the inducer is treated, which is effective. The inducer is preferably an inducer selected from the group consisting of SA (Salicilic acid), IAA (indole acetic acid) and H202 (Hydrogen peroxide), but is not limited thereto, and may induce germination of oat seeds. Any inducer known in the art can be used without limitation.
본 발명의 "단계 ii)의 용매 추출"은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 것이 바람직하고, 상기 저급 알코올은 메탄올 또는 에탄올을 사용하는 것이 보다 바람직하나, 이제 한정되지 않는다. 또한, 용매 추출에 사용하기 위한 물은 순수한 물 외에도 완충 용액의 수용액을 사용할 수 있다. "Solvent extraction of step ii) of the present invention is preferably extracted with water, a lower alcohol of C1 to C4 or a mixture thereof as a solvent, the lower alcohol is more preferably using methanol or ethanol, but now It is not limited. In addition, water for use in solvent extraction may use an aqueous solution of a buffer solution in addition to pure water.
보다 구체적으로, 상기 단계 ii) 의 용매 추출은 하기의 단계들을 포함하는 추출방법에 의해 추출되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다:More specifically, the solvent extraction of step ii) is preferably extracted by an extraction method comprising the following steps, but not always limited thereto:
1) 귀리에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;1) extracting by adding an extraction solvent to the oats;
2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계; 및2) filtering the extract of step 1); And
3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압 농축한 후 건조하는 단계.3) drying the filtered extract of step 2) under reduced pressure.
상기 방법에 있어서, 귀리 추출물의 추출 방법으로는 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류냉각 추출 및 초음파추출 등 당업계의 통상적인 방법을 이용할 수 있다. In the above method, as the extraction method of the oat extract may be used a conventional method in the art, such as filtration, hot water extraction, immersion extraction, reflux extraction and ultrasonic extraction.
상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.In the above method, the decompression concentration in step 3) preferably uses a vacuum decompression concentrator or a vacuum rotary evaporator, but is not limited thereto. In addition, the drying is preferably reduced pressure drying, vacuum drying, boiling drying, spray drying or freeze drying, but not always limited thereto.
본 발명의 "제조 방법"에 있어서, 단계 ii) 이후, iii) 귀리 잔사에 용매를 가하여 귀리 잔사 추출물을 용매추출하는 단계;를 추가적으로 포함할 수 있다.In the "manufacturing method" of the present invention, after step ii), iii) adding a solvent to the oat residue to extract the oat residue extract solvent.
본 발명의 "제조 방법"에 있어서, 단계 ii) 이후, iii) 수득한 발아 귀리 추출물을 한외여과하여 분자량 30 kDa 이하의 저분자량 추출물을 분리 및 수득하는 단계;를 추가로 포함할 수 있다. 분자량 30 kDa 이하의 물질을 분리하였을 때, 발아 귀리 추출물 내의 아베난쓰라마이드 함량이 증가될 수 있으며, 구체적으로 분자량 10 kDa 이하의 물질을 분리하도록 한외여과하는 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.In the "manufacturing method" of the present invention, after step ii), iii) ultrafiltration the obtained germinated oat extract to separate and obtain a low molecular weight extract having a molecular weight of 30 kDa or less. When the substance having a molecular weight of 30 kDa or less is separated, the avenanthramid content in the germinated oat extract may be increased. Specifically, ultrafiltration to separate the substance having a molecular weight of 10 kDa or less is most preferred, but not limited thereto.
상기 단계 iii)의 용매 추출은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 것이 바람직하고, 상기 저급 알코올은 메탄올 또는 에탄올을 사용하는 것이 보다 바람직하나, 이제 한정되지 않는다. 또한, 용매 추출에 사용하기 위한 물은 순수한 물 외에도 인산 완충액과 같은 완충 용액의 수용액을 사용할 수 있다. The solvent extraction of step iii) is preferably extracted with water, C1 to C4 lower alcohol or a mixture thereof as a solvent, and the lower alcohol is more preferably methanol or ethanol, but is not limited thereto. In addition, water for use in solvent extraction may be used in addition to pure water, an aqueous solution of a buffer solution such as phosphate buffer.
본 발명의 "아베난쓰라마이드(avenanthramide)"는 아베난쓰라마이드 A, 아베난쓰라마이드 B, 아베난쓰라마이드 C, 아베난쓰라마이드 O 및 아베난쓰라마이드 P로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것이 바람직하며, 구체적으로 아베난쓰라마이드 A, 아베난쓰라마이드 B 및 아베난쓰라마이드 C로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 보다 바람직하고, 더욱 구체적으로 아베난쓰라마이드 C인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되지 않는다."Avenanthramide" of the present invention is any one selected from the group consisting of Avenanthramide A, Avenanthramide B, Avenanthramide C, Avenanthramide O, and Avenanthramide P It is preferable that the above-mentioned, more specifically, it is more preferably selected from the group consisting of avenanthramid A, avenanthramid B and avenanthramid C, and more particularly it is most preferably avenanthramid C, but It is not limited.
상기 아베난쓰라마이드는 안트라닐산 아미드(Anthranilic acid amides)로도 명명할 수 있으며, 하기 [화학식 1]의 구조를 가진다:The avenanthramid may also be referred to as anthranilic acid amides, and has the structure of
[화학식 1][Formula 1]
(상기 화학식에서,(In the above formula,
n=1이고, R1은 H이며, R2는 OH이고, R3는 H이며, R4는 OH이고, R5은 H인 경우는 아베난쓰라마이드 A며;when n = 1, R 1 is H, R 2 is OH, R 3 is H, R 4 is OH, and R 5 is H, it is avenanthramide A;
n=1이고, R1은 H이며, R2는 OH이고, R3는 OCH3이며, R4는 OH이고, R5은 H인 경우는 아베난쓰라마이드 B이며; 및when n = 1, R 1 is H, R 2 is OH, R 3 is OCH 3 , R 4 is OH, and R 5 is H, it is avenanthramide B; And
n=1이고, R1은 H이며, R2는 OH이고, R3는 OH이며, R4는 OH이고, R5은 H인 경우는 아베난쓰라마이드 C이다.)n = 1, R 1 is H, R 2 is OH, R 3 is OH, R 4 is OH, and R 5 is H, avenanthramide C.)
아베난쓰라마이드는 귀리에 주로 포함되어 있는 페놀계 알칼로이드군의 활성 성분으로서 잘 알려져 있으며, 양배추, 나비 또는 포자가 감염된 카네이션 등에도 일부 포함되어있다. 아베난쓰라마이드는 항-염증, 항산화, 가려움증 억제, 피부 자극 억제 및 항동맥경화 효과 등을 나타낼 수 있다. 따라서, 상기 아베난쓰라마이드를 포함하고 있는 귀리 추출물을 피부, 모발 또는 자외선차단 제품에 사용하고자 하는 연구들이 당업계에 다수 공지되어 있다.Avenanthramides are well known as active ingredients of the phenolic alkaloid family, which is mainly contained in oats, and is partly included in carnations infected with cabbage, butterflies or spores. Avenanthramides may exhibit anti-inflammatory, antioxidant, itching inhibition, skin irritation inhibition and anti-arteriosclerosis effects. Therefore, a number of studies are known in the art to use the oat extract containing the avenanthramid in skin, hair or sunscreen products.
본 발명의 "발아 귀리 추출물"에 "고함량"으로 포함된 아베난쓰라마이드 총함량의 농도는 1500 내지 75000 ㎍/g 잔사인 것이 바람직하고, 구체적으로 1500 내지 55000 ㎍/g 잔사인 것이 보다 바람직하며, 더욱 구체적으로 3500 내지 15000 ㎍/g 잔사인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.It is preferable that the concentration of the total amount of avenanthramides contained as "high content" in the "germination oat extract" of the present invention is 1500 to 75000 µg / g residue, and more preferably 1500 to 55000 µg / g residue. In this regard, more specifically, 3500 to 15000 μg / g residue is most preferred, but is not limited thereto.
상기 아베난쓰라마이드에 있어서, 항치매 활성을 나타내는 주요 활성 성분은 아베난쓰라마이드 C이므로, 본 발명의 "발아 귀리 추출물"에서 포함되는 아베난쓰라마이드는 아베난쓰라마이드 C인 것을 의미하는 것이 보다 바람직하다. 구체적으로 본 발명에서 "고함량으로 포함된 아베난쓰라마이드 C"의 농도는 100 내지 20000 ㎍/g 잔사 이상인 것이 바람직하고, 더욱 구체적으로 400 내지 7000 ㎍/g 잔사인 것이 보다 바람직하나, 이에 한정되지 않는다In the avenanthramid, the main active ingredient exhibiting anti-dementia activity is avenanthramid C, so that the avenantramid included in the "germinated oat extract" of the present invention means avenanthramid C. More preferred. Specifically, in the present invention, the concentration of "avenanthramid C contained in a high content" is preferably 100 to 20000 µg / g or more, more preferably 400 to 7000 µg / g, but is not limited thereto. Not
본 발명의 "고함량 아베난쓰라마이드의 발아귀리 추출물"은 베타글루칸(β-glucan)의 함량이 0.01 내지 2.0 g/100g 잔사인 것이 바람직하다. 발아귀리 추출물 내에 베타글루칸의 함유량이 낮을수록 발아귀리 추출물 내 아베난쓰라마이드에 의한 치매 저해 효과가 증가할 수 있어, 본 발명의 발아귀리 추출물은 종래 귀리 추출물과 비교하여 아베난쓰라마이드의 함량이 증가하고, 베타글루칸의 함량은 감소하는 것이 보다 바람직하다.In the present invention, the "germint extract of high content avenanthramid" is preferably a beta glucan (β-glucan) content of 0.01 to 2.0 g / 100g residue. The lower the content of beta glucan in the germinated oat extract may increase the dementia inhibitory effect of the avenanthramides in the germinated oat extract, the germinated oat extract of the present invention has a higher content of avenanthramid as compared to the conventional oat extract. More preferably, the content of beta glucan is decreased.
본 발명의 바람직한 일실시예에서, 본 발명자들은 국내 개발된 귀리 품종을 대상으로 귀리 추출물을 제조하였고(표 1), 다양한 품종의 귀리 추출물 내 포함된 아베난쓰라마이드 함량을 분석한 결과(표 2), 대양 품종의 귀리 추출물에서 다른 품종에 비해 유의적으로 높은 수준의 아베난쓰라마이드 함량을 나타내는 것을 확인하였다(표 3 및 도 1).In a preferred embodiment of the present invention, the present inventors prepared oat extracts for the domestically developed oat varieties (Table 1), and analyzed the avenanthramid content contained in the oat extracts of various varieties (Table 2) ), It was confirmed that the oat extract of the ocean varieties showed a significantly higher level of avenanthramid content than the other varieties (Table 3 and FIG. 1).
또한, 귀리 추출물 내 아베난쓰라마이드 함량을 증가시키기 위해, 귀리 종자를 발아처리하여 이의 추출물을 제조하였다. 그 결과, 24 내지 72 시간 동안 발아처리한 귀리의 추출물에서 발아처리 시간의 흐름에 따라 아베난쓰라마이드 함량이 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다(표 4). 이러한 증가는 귀리 종자에 유도인자를 처리하여 발아처리하였을 때 더욱 아베난쓰라마이드 함량이 증가한 수준을 나타내는 것을 확인하여, 발아처리를 통해 귀리 추출물에서 아베난쓰라마이드 함량이 증가할 수 있음을 확인하였다(표 5, 표 6 및 도 2).In addition, in order to increase the avenanthramid content in the oat extract, an oat seed was germinated to prepare an extract thereof. As a result, it was confirmed that the avenanthramide content significantly increased as the germination treatment time in the extract of the oat treated for 24 to 72 hours (Table 4). This increase confirms that the avenanthramid content is increased when the oat seed is treated with the inducer and germinates, and it is confirmed that the avenanthramid content can be increased in the oat extract through germination. (Table 5, Table 6 and Figure 2).
또한 귀리 발아 처리후 한외여과막 처리에 따른 아베난쓰라마이드의 함량 변화 여부를 확인한 결과, 여과막을 사용하여 10kDa 이하로 여과시 아베난쓰라마이드 C 함량이 한외여과 이전에 비해 2.3배 증가한다는 것을 확인하였다 (표 7 및 도 3). 나아가, 발아처리된 대양 귀리의 추출방법에 있어서 추출 용매 조건에 따른 아베난쓰라마이드 함량 변화 여부를 확인하였다. 그 결과, 증류수를 처리하고 물층을 제거한 후 잔존물에 다시 80% 에탄올을 가하여 추출한, D48 시료에서 잔사당 아베난쓰라마이드 함량이 가장 증가되는 것을 확인하였다(표 8, 표 9). 이와 관련하여, D48 시료에서 베타글루칸의 함량이 발아처리 시간의 흐름에 따라 유의적으로 감소하는 것을 확인하였다(표 10, 표 11).In addition, after confirming the change of avenanthramid content according to the ultrafiltration membrane treatment after oat germination treatment, it was confirmed that the avenanthramid C content was increased 2.3 times compared to before ultrafiltration using a filtration membrane. (Table 7 and FIG. 3). Furthermore, in the extraction method of the oat-treated sea oats, it was confirmed whether the avenanthramid content changes depending on the extraction solvent conditions. As a result, after treating with distilled water and removing the water layer, 80% ethanol was added to the residue and extracted, and it was confirmed that the avenanthramide content per residue was most increased (Table 8, Table 9). In this regard, it was confirmed that the content of beta glucan in the D48 sample significantly decreased with the germination treatment time (Table 10, Table 11).
따라서, 본 발명의 제조 방법을 통해 제조된 발아 귀리 추출물은 유용 활성 성분인 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가되고 베타글루칸의 함량이 감소되었으므로, 아베난쓰라마이드의 활성 효과가 증가할 수 있다. 또한, 본 발명의 발아 귀리 추출물은 활성 성분의 함량이 증가함을 통해 항치매 활성 및 LTP(장기기억강화) 효과를 유의적으로 나타낼 수 있다. Therefore, the germinated oat extract prepared through the production method of the present invention has a significant increase in the content of avenanthramides and useful beta glucan and a decrease in the amount of beta glucan, thereby increasing the active effect of avenanthramides. have. In addition, the germinated oat extract of the present invention can significantly exhibit anti-dementia activity and LTP (organic reinforcement) effects through the increase in the content of the active ingredient.
상기 외에 본 발명의 건강식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the health food of the present invention is various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, coloring agents, pectic acid, salts of pectic acid, alginic acid, salts of alginic acid, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, Glycerin, alcohol or carbonation agent and the like. In addition, the health food of the present invention may contain a flesh for preparing natural fruit juice, fruit juice beverage, or vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical but is usually selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
이하, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예 및 실험예 는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예 및 실험예 에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Experimental Examples. These Examples and Experimental Examples are only for illustrating the present invention, and it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not interpreted to be limited by these Examples and Experimental Examples. .
실시예Example : 실험 재료Experimental material
(1) 재료준비(1) Material Preparation
농촌진흥청에서 육성한 쌀귀리 5품종과 겉귀리 4품종을 사용한 것을 [표 1]에 나타내었다. Table 5 shows the use of five varieties of rice oats and four varieties of oat cultivated by the Rural Development Administration.
이남 지역(추파)January minimum temperature average -4 ℃
Sub-region (Chuppa)
탈부율 매우 높은 쌀귀리Edible, Conflict,
Rice Oats with Very High Stripping Rate
탈부율 매우 높은 쌀귀리Edible, Premature,
Rice Oats with Very High Stripping Rate
쌀귀리Extreme,
Rice oats
이남 지역January minimum temperature average -4 ℃
Sub-region
재생기 이후 분얼력 강Cold-resistant river,
Burial force after regenerator
이남 지역January minimum temperature average -4 ℃
Sub-region
다얼성, 청예다수성Summer Cultivation,
Daersung
TDN 수량이 높음, 총체용It's hazard resistant,
High TDN Quantity, Gross
국립식량과학원 시험포장인 익산(쌀귀리 품종)과 김제(겉귀리 품종)에서 2013년 10월 중순에 파종하여 2014년 6월에 수확하였고, 농촌진흥청 표준 재배법에 준하여 재배하였으며, 수확한 귀리는 분석 전까지 14℃ 저장고에 저장하였다.Iksan (Rice Oat Varieties) and Gimje (Oat Oats Varieties), which were tested at the National Institute of Crop Science, were sown in mid-October 2013 and harvested in June 2014. Until stored in 14 ° C. cellar.
쌀귀리는 탈곡 후 겉껍질(영)이 벗겨지는 탈부율이 100%에 달하기 때문에 정선과정만 거쳤고, 겉귀리는 겉껍질을 벗기기 위해 간이 도정기(FC2K, Yamamoto, Japan)을 이용하여 도정하였다. 도정된 시료는 분쇄기(HMF-3100S, 한일, Korea)를 이용하여 분쇄 후 1.0mm체를 통과한 시료를 사용하였다.Since rice oat has 100% stripping rate of shelling after shelling, it has been selected only. Shelling of shelled oats was carried out using a simple potting machine (FC2K, Yamamoto, Japan). The milled sample used a sample that passed through a 1.0 mm sieve after milling using a mill (HMF-3100S, Hanil, Korea).
(2) 귀리 품종별 (2) Oat Varieties 아베난쓰라마이드Abenanthramid 함량 분석 Content analysis
분쇄한 품종별 귀리 분말 1g을 10mM Phosphate buffer(pH2.8)에 80% 에탄올 100㎖ 침지하여 37℃에서 16시간 동안 Shaking Incubator(240rpm)에서 교반 추출 3회를 실시하였다. 수득한 추출물은 와트만(Whatman) 2번 여과지로 여과하여 고형분을 제거하고, 감압농축기(N-1000, EYELA 사, 일본)를 이용하여 50℃에서 용매 성분을 제거하여 귀리 추출물을 수득하였다. 상기 제거한 고형분을 80% 에탄올로 재용해 하고, 위와 동일한 조건에서 추출하여 귀리 잔사의 추출물을 수득하였다. 귀리 추출물 및 귀리 잔사 추출물의 보관 시에는 질소 충전 후 -20℃에서 보관하였다.1 g of the crushed varieties of oat powder were immersed in 100 ml of 80% ethanol in 10 mM Phosphate buffer (pH2.8) and subjected to stirring extraction three times in a shaking incubator (240 rpm) for 16 hours at 37 ° C. The obtained extract was filtered through Whatman No. 2 filter paper to remove solids, and the solvent component was removed at 50 ° C. using a vacuum condenser (N-1000, EYELA, Japan) to obtain an oat extract. The removed solid was redissolved with 80% ethanol and extracted under the same conditions as above to obtain an extract of oat residue. When the oat extract and the oat residue extract were stored at -20 ° C after nitrogen filling.
추출물은 다음과 같은 UPLC 조건에서 아베난쓰라마이드 함량을 분석한 것을 [표 2]에 나타내었다.The extract is shown in Table 2 to analyze the abenanthramid content in the following UPLC conditions.
Solvent A: 0.01M phosphate buffer(pH2.8) / Solvent B: 100% CAN
유속(Flow late): 0.6ml/min
Injection: 1㎕
Wavelength: 340nmColumn: Acquity UPLCⓡHSS C18 1.8 μm (2.1 × 100 mm),
Solvent A: 0.01M phosphate buffer (pH2.8) / Solvent B: 100% CAN
Flow late: 0.6 ml / min
Injection: 1 μl
Wavelength: 340nm
아베난쓰라마이드 표준물질은 아베난쓰라마이드 C, 아베난쓰라마이드 B, 아베난쓰라마이드 A를 각각 DMSO에 녹여 위의 UPLC 조건에서 분석후 검량선을 얻었으며, 본 발명의 귀리 추출물 또는 귀리 잔사 추출물을 동일 조건에서 UPLC 분석후 얻은 Peak area값을 표준물질의 검량선에 대입하여 품종별 귀리 추출물 내에 포함된 아베난쓰라마이드 정량값을 [표 3]에 나타내었다.Avenanthramid standards were obtained by dissolving avenanthramid C, avenanthramid B, and avenanthramid A in DMSO to obtain a calibration curve after analysis under the above UPLC conditions, and the oat extract or oat residue extract of the present invention. In the same conditions, the peak area obtained after UPLC analysis was substituted into the calibration curve of the standard, and the quantitative values of avenanthramides contained in the oat extracts of each variety are shown in [Table 3].
그 결과, 귀리 품종 '대양'품종의 추출물 내 아베난쓰라마이드의 농도는 C가 86.7ug/g, A가 63.0 ug/g, 및 B가 57.7 ug/g 이었으며, 아베난쓰라마이드 총 함량이 207 ug/g으로 품종 중 아베난쓰라마이드가 가장 많이 함유되어 있었다. 그 다음으로 '중모 2005' 품종이 높았으며, 귀리 타입별로는 쌀귀리(naked)가 겉귀리(hulled) 보다 전체적으로 아베난쓰라마이드 함량이 많음을 확인할 수 있었다.As a result, the concentrations of avenanthramides in the extracts of the oat variety 'Ocean' varieties were 86.7 ug / g for C, 63.0 ug / g for A, and 57.7 ug / g for B, and the total content of avenanthramides was 207. ug / g was the most abundant of avenanthramides among the varieties. Next, 'Jongmo 2005' varieties were higher, and rice oats by oat type were higher in avenanthramide content than hulled.
(3) 귀리 발아 처리에 따른 (3) Oat germination 아베난쓰라마이드Abenanthramid 함량 content
아베난쓰라마이드 함량이 높은 '72시간 대양' 귀리를 대상으로 시간에 따라 발아처리하여 아베난쓰라마이드 함량을 측정하였다. '대양'귀리 500g을 발아처리장치에서 살수처리(온도 21℃, 살수시간 5분, 살수정지시간 20분) 시스템을 통해 발아처리 하였다. 처리 24시간, 48시간, 72시간에 발아처리된 귀리를 각각 500g씩 꺼낸 후 상온에서 약 10분간 표면 물기를 제거 후 건조기에 넣어 40℃ 온도에서 24시간 건조하였다. 건조된 발아 귀리는 -20℃에서 보관 후 상기 실시예 (2)와 동일 방법으로 80% 에탄올을 사용해 귀리 추출물을 수득한 다음, UPLC 분석을 통해 추출물 내 아베난쓰라마이드 함량을 분석하였다. 아베난쓰라마이드 함량은 발아 48∼72시간 동안 발아 처리 시간에 따라 증가하였으며 C, A, B 타입 모두 증가하는 것을 [표 4]에 나타내었다(도 2 참고).Abenanthramide content was measured by germination over time in '72 hour ocean 'oats with high avenanthramide content. 500 g of 'Ocean' oats were germinated in a germination treatment system through a watering treatment (temperature 21 ° C., watering time 5 minutes, watering stop time 20 minutes). After removing the germinated oats 500 g each for 24 hours, 48 hours, and 72 hours of treatment, and removing surface moisture for about 10 minutes at room temperature, the resultant was placed in a dryer and dried at 40 ° C. for 24 hours. The dried germinated oats were stored at −20 ° C., and the oat extracts were obtained using 80% ethanol in the same manner as in Example (2), and the avenanthramid content in the extracts was analyzed by UPLC analysis. Avenanthramide content was increased with germination treatment time for 48-72 hours of germination, and it is shown in Table 4 that both C, A, and B types increased (see FIG. 2).
(4) 귀리 발아처리시 (4) Oat germination 유도인자에On inducer 따른 According 아베난쓰라마이드Abenanthramid 함량 content
조양귀리를 대상으로 발아시 다양한 유도인자(Elicitor)를 처리하였다. 0.01% SA(Salicilic acid), 0.01% IAA(Indole acetic acid), 0.01% H2O2(Hydrogen peroxide) 처리시 발아 전에 비해 모두 아베난쓰라마이드 함량이 증가하였으며, 특히 SA를 처리하고 48 시간 동안 발아시킨 시료는 원곡에 비해 아베난쓰라마이드의 함량이 37배까지 증가하였다(표 5). 대양귀리에 대하여도 동일한 방법으로 유도인자를 처리하였을 때, 아베난쓰라마이드의 함량이 유의적으로 증가하였으며, 특히 0.01% H2O2(Hydrogen peroxide)를 처리하여 72시간 동안 발아 유도하였을 때, 원곡에 비해 아베난쓰라마이드의 함량이 3.5배 증가하였다. 이를 [표 6]에 나타내었다.Various elicitors were treated in germinated oats during germination. The avenanthramide content was increased in the 0.01% SA (Salicilic acid), 0.01% IAA (Indole acetic acid) and 0.01% H 2 O 2 (Hydrogen peroxide) treatments, especially during SA treatment and for 48 hours. The sample was a 37-fold increase in the content of avenanthramid compared to the original grain (Table 5). When the inducer was treated in the same way for the sea oats, the content of avenanthramide was significantly increased, especially when the germination was induced for 72 hours by treatment with 0.01% H2O2 (Hydrogen peroxide). Abenanthramid content increased 3.5 times. This is shown in [Table 6].
(5) 귀리 (5) oats 발아처리후After germination 한외여과막Ultrafiltration membrane 처리에 따른 According to treatment 아베난쓰라마이드Abenanthramid 함량 content
48시간 발아처리된 대양 귀리를 분쇄 후 시료 무게의 20배 부피의 hexane에 3회 추출 후 탈지시켰다. 탈지된 대양 귀리 1g에 20mL 80% 에탄올(0.1% HoAC)에 3회 추출하였다. 추출후 여과지에 여과한 후 한외여과막 장치를 통해 여과시시켜 분자량에 따라 추출물을 분류하였다. 그 결과, 여과막을 사용하여 10kDa 이하로 여과시 아베난쓰라마이드 C 함량이 한외여과 이전에 비해 2.3배 증가하였다. 이를 [표 7]에 나타내었다.48 hours germinated sea oats were pulverized and extracted three times in 20 volumes of hexane. Extraction was performed three times in 20 mL 80% ethanol (0.1% HoAC) in 1 g of degreased ocean oats. After extraction, the filtrate was filtered through a filter paper, and filtered through an ultrafiltration membrane apparatus to classify the extract according to molecular weight. As a result, the avenanthramid C content increased by 2.3 times compared to before ultrafiltration when the filter membrane was filtered to 10 kDa or less. This is shown in [Table 7].
(5) 추출물 제조 (5) extract preparation
48 시간 발아처리된 대양귀리에 액체 질소를 사용하여 분쇄기(Auto-mill disintegrator, Tokken, Japan)에서 200s로 분쇄하였다. 분말 시료 15g 내지 20g에 n-Hexane 시료 무게량의 10배 부피로 첨가하여 37℃에서 Homogenizer로 30분간 추출한 후 헥산층을 제거하고, 12시간 흄후드에 정치하여 탈지하였다(이 과정 3회 실시). Forty-hour germinated oats were ground to 200 s in a grinder (Auto-mill disintegrator, Tokken, Japan) using liquid nitrogen. 15 g to 20 g of the powder sample was added in a volume of 10 times the weight of n-Hexane sample, extracted with Homogenizer at 37 ° C. for 30 minutes, the hexane layer was removed, and left to stand in a fume hood for 12 hours for degreasing (this process was performed three times). .
탈지된 귀리 분말 시료 1g에 80% 에탄올을 10 mL를 첨가하여 Shaking incubator에서 16시간 추출후 상등액을 얻고, 다시 2시간씩 2회 추출하여 최종 추출물을 얻었다. 이 추출물을 감압농축(N-1000, EYELA 사, 일본)하여 처리물 G48 추출물을 수득하였다. 10 g of 80% ethanol was added to 1 g of the degreased oat powder sample, and the supernatant was obtained after extraction for 16 hours in a shaking incubator, followed by extracting twice for 2 hours to obtain a final extract. The extract was concentrated under reduced pressure (N-1000, EYELA, Japan) to obtain a treated G48 extract.
또한, 탈지된 귀리 분말 시료 1g에 증류수 10 mL를 처리하여 증류수에 용해된 수용성의 베타글루칸이 포함된 물층을 제거한 후, 잔존물에 다시 80% 에탄올 10 mL를 첨가하여 위의 추출과정과 같은 방법으로 D48 추출물을 수득하였다.In addition, 1 g of degreasing oat powder sample was treated with 10 mL of distilled water to remove the water layer containing the water-soluble beta glucan dissolved in distilled water, and then 10 mL of 80% ethanol was added to the residue, followed by the same method as the extraction process. D48 extract was obtained.
상기 수득한 G48 추출물 또는 D48 추출물은 각각 상기 실시예 (2)와 동일한 조건으로 UPLC 분석하여 각각의 추출물 내 아베난쓰라마이드 함량을 정량 분석하였고, 그 결과는 하기 [표 8]과 같다.The obtained G48 extract or D48 extract was UPLC analyzed under the same conditions as in Example (2), respectively, to quantitatively analyze the avenanthramide content in each extract, and the results are shown in the following [Table 8].
이에, 제조된 추출물의 잔사 당 아베난쓰라마이드 함량은 G48이 2623.4 ug/g 잔사 및 D48은 1550.1 ug/g 잔사인 것을 [표 9]에 나타내었다. Thus, the avenanthramide content per residue of the prepared extract is shown in Table 9 that G48 is 2623.4 ug / g residue and D48 is 1550.1 ug / g residue.
(6) 베타글루칸 함량(6) Beta Glucan Content
각 추출물에 대한 베타글루칸 함량은 Oat β-Glucan kit((K-BGLU, Megazyme Pty. Ltd. Australia)를 이용하여 측정하였다. Beta-glucan content of each extract was measured using Oat β-Glucan kit (K-BGLU, Megazyme Pty. Ltd. Australia).
구체적으로, 상기 실시예 (3)과 동일한 방법으로 0 내지 72 시간 동안 발아처리한 귀리를, 액체 질소를 사용하여 분쇄기(Auto-mill disintegrator, Tokken, Japan)에서 200s로 분쇄하였다. 이 분쇄 가루 0.1g에 50 % EtOH 0.2 mL와 20 mM Sodium phosphate buffer(pH6.5) 4 mL을 추가한 후 강하게 혼합하여 100℃ 항온수조에서 1분간 반응 시켰다. 반응한 시료는 교반하여 혼합한 다음, 다시 2분간 반응하고 재교반하여, 상층액을 추출물로서 수득하였다. 수득한 추출물은 50℃ 항온수조에서 5분 냉각 후 Lichenase 200 μL를 넣고 혼합한 다음, 50℃ 항온수조에 1 시간 동안 반응하고, 반응 종료 즉시 찬물에서 냉각시켰다. 그 다음 각 튜브에 200 Mm sodium acetate buffter(pH4.0) 5 ㎖를 첨가하고 완전히 혼합하였다. 실온에서 5 분간 방치하고 10 분동안 3000 rpm으로 원심분리 후 상징액을 얻었다. 상징액 100 μL에 β-Glucosidase 100 μL를 넣어 혼합하고, 50℃ 항온수조에서 15 분간 방치배양하였다. 이때 무처리 대조군(blank)은 Glucosidase 대신 Sodium acetate buffer를 사용하였다. 최종 반응시킨 튜브에 Glucose oxidase/peroxidase(GOPOD) reagent 3 mL 첨가하고 다시 50℃ 항온수조에 20 분 반응시킨 후 즉시 냉각시켜 각 반응이 끝난 시료를 대상으로, 510 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 표준곡선은 100∼500 ppm 농도 β-glucan 용액을 사용하였다.Specifically, the oats, which were germinated for 0 to 72 hours in the same manner as in Example (3), were ground to 200 s in a grinder (Auto-mill disintegrator, Tokken, Japan) using liquid nitrogen. To 0.1 g of the ground powder, 0.2 mL of 50% EtOH and 4 mL of 20 mM Sodium phosphate buffer (pH6.5) were added, followed by vigorous mixing and reaction for 1 minute in a 100 ° C constant temperature water bath. The reacted sample was stirred and mixed, then reacted again for 2 minutes and stirred again to obtain a supernatant as an extract. The obtained extract was cooled in a 50 ° C. constant temperature water bath for 5 minutes, mixed with 200 μL of Lichenase, and then reacted in a 50 ° C. constant temperature water bath for 1 hour, and cooled in cold water immediately after the reaction. Then 5 ml of 200 Mm sodium acetate buffter (pH 4.0) was added to each tube and mixed thoroughly. After standing at room temperature for 5 minutes and centrifugation at 3000 rpm for 10 minutes to obtain a supernatant. 100 μL of β-Glucosidase was added to 100 μL of the supernatant, mixed and incubated for 15 minutes in a 50 ° C. constant temperature water bath. The untreated control (blank) was used sodium acetate buffer instead of glucosidase. 3 mL of Glucose oxidase / peroxidase (GOPOD) reagent was added to the final reaction tube, and then reacted in a 50 ° C. constant temperature water bath for 20 minutes, and then immediately cooled, and the absorbance at 510 nm was measured for each reaction sample. Standard curves were 100-500 ppm concentration β-glucan solution.
결과적으로 대양 귀리의 발아시간에 따른 베타글루칸 함량은 [표 10]에 전체적으로 낮아지는 경향을 나타내었다. As a result, the beta glucan content according to the germination time of ocean oats showed a tendency to be lowered overall in [Table 10].
또한, 실시예 (5)에서 제조된 G48 및 D48 추출물에 대하여 위와 동일한 방법으로 베타글루칸 함량을 분석하고, 이를 [표 11]에 나타내었다.In addition, the beta glucan content of the G48 and D48 extract prepared in Example (5) was analyzed in the same manner as above, and it is shown in [Table 11].
이에, 베타글루칸 함량은 D48 시료에서 G48 시료에 비해 0.41%(g/100g)으로 양이 5배 줄어드는 것을 확인하였다. Thus, beta glucan content was confirmed that the amount is reduced by 5 times to 0.41% (g / 100g) in the D48 sample compared to the G48 sample.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제조예를 예시한다.The preparation examples for the compositions of the present invention are illustrated below.
제조예Production Example 1: 약학적 제제의 제조 1: Preparation of Pharmaceutical Formulations
1-1. 산제의 제조1-1. Manufacture of powder
귀리 추출물 10 mg10 mg oat extract
유당 1 g1 g lactose
상기의 성분을 혼합하고, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.The above components were mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.
1-2. 정제의 제조1-2. Manufacture of tablets
귀리 추출물 10 mg10 mg oat extract
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg magnesium stearate
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.
1-3. 캡슐제의 제조1-3. Preparation of Capsule
귀리 추출물 10 mg10 mg oat extract
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg magnesium stearate
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.After mixing the above components, the capsule was prepared by filling in gelatin capsules according to the conventional method for producing a capsule.
1-4. 환의 제조1-4. Manufacture of rings
귀리 추출물 10 mg10 mg oat extract
유당 1.5 gLactose 1.5 g
글리세린 1 g1 g of glycerin
자일리톨 0.5 gXylitol 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1 환 당 3 g이 되도록 제조하였다.After mixing the above components, it was prepared to be 3 g per ring in a conventional manner.
1-5. 과립의 제조1-5. Preparation of Granules
귀리 추출물 10 mg10 mg oat extract
대두 추출물 50 ㎎Soybean Extract 50mg
포도당 200 ㎎Glucose 200 mg
전분 600 ㎎Starch 600 mg
상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.After mixing the above components, 100 mg of 30% ethanol was added and dried at 60 ° C. to form granules, which were then filled into fabrics.
제조예Production Example 2: 건강기능식품의 제조 2: Preparation of dietary supplements
본 발명의 귀리 조성물, 이의 분획물 및 이로부터 분리한 페닐에스터계 화합물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다. Food comprising the oat composition of the present invention, fractions thereof and phenylester-based compounds separated therefrom were prepared as follows.
2-1. 밀가루 식품의 제조2-1. Manufacture of Flour Food
본 발명의 귀리 추출물 1 mg을 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.1 mg of oat extract of the present invention was added to flour, and bread, cake, cookies, crackers and noodles were prepared using the mixture to prepare foods for health promotion.
2-2. 유제품(dairy products)의 제조2-2. Manufacture of dairy products
본 발명의 귀리 추출물 1 mg을 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.1 mg oat extract of the present invention was added to milk, and the milk was used to prepare various dairy products such as butter and ice cream.
이상의 본 발명은 상기에 기술된 실시예 및 제조예들에 의해 한정되지 않고, 통상의 기술자들에 의해 다양한 변형 및 변경을 가져올 수 있으며, 그 효능에 따라 인체에 얇게 도포하여 바를 수 있는 약제 즉, 연고로 제조에 이용될 수 있고, 이는 첨부된 청구항에서 정의되는 본 발명의 취지와 범위에 포함된다.The present invention is not limited to the above-described embodiments and preparation examples, it can bring a variety of modifications and changes by those skilled in the art, according to the efficacy of the drug that can be applied to a thin coating on the human body, Ointments can be used in the manufacture, which fall within the spirit and scope of the invention as defined in the appended claims.
Claims (12)
ii) 상기 단계 i)에서 발아시킨 귀리를 에탄올 용매추출하여 발아 귀리 추출물을 수득하는 단계; 및
iii) 상기 단계 ii)의 에탄올 용매 추출 후 남은 귀리 잔사에 용매를 가하여 귀리 잔사 추출물을 수득하는 단계;를 포함하는,
잔사 1g 당 아베난쓰라마이드C 농도가 1500 ㎍/g 이상인 것을 특징으로 하는 고함량 아베난쓰라마이드C를 포함하는 발아 귀리 추출물의 제조 방법.
i) seeding the sea oat seed at 15 to 25 ° C. for 48 to 72 hours and treating the inducer, wherein the inducer is SA (salicilic acid), IAA (indole acetic acid) and H 2 0 2 ( Germination step of any one or more selected from the group consisting of Hydrogen peroxide);
ii) extracting the oats germinated in step i) with ethanol to obtain a germinated oat extract; And
iii) adding a solvent to the oat residue remaining after the ethanol solvent extraction of step ii) to obtain an oat residue extract;
A method for producing a germinated oat extract comprising high content of avenanthramid C, wherein the concentration of avenanthramid C per 1500 g of the residue is 1500 μg / g or more.
Germinated oat extract prepared by the method of claim 1, comprising a high content of avenanthrama C.
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| KR1020180025388A KR102083669B1 (en) | 2018-03-02 | 2018-03-02 | Method for manufacturing germinated oats extract having high-content avenanthramides |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20220111448A (en) | 2021-02-02 | 2022-08-09 | (주)애터미오롯 | Preparation Method for Germinated oats with Increased Avenanthramid Contents |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20190104817A (en) | 2019-09-11 |
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