KR102010951B1

KR102010951B1 - Skin external composition interleukin 27

Info

Publication number: KR102010951B1
Application number: KR1020120154702A
Authority: KR
Inventors: 한지연; 조은경; 이태룡
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2012-12-27
Filing date: 2012-12-27
Publication date: 2019-08-14
Also published as: KR20140084808A

Abstract

본 발명은 인터루킨 27(IL-27)을 함유하는 피부 미백용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 IL-27을 함유하여 피부에서의 성체 멜라닌 세포의 색소 생성을 억제함으로써 피부 미백 효과를 제공하고 기미 또는 흑자와 같은 과색소성 피부 질환의 치료에 효과적인 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for skin whitening containing interleukin 27 (IL-27), and more particularly, contains IL-27 to inhibit pigment production of adult melanocytes in the skin, thereby providing a skin whitening effect. Or to an external preparation composition for the treatment of hyperpigmentary skin diseases such as surpluses.

Description

Skin external composition comprising interleukin 27 {Skin external composition interleukin 27}

본 발명은 인터루킨 27(IL-27)을 함유하는 피부 미백용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 IL-27을 함유하여 피부에서의 성체 멜라닌 세포의 색소 생성을 억제함으로써 피부 미백 효과를 제공하고 기미 또는 흑자와 같은 과색소성 피부 질환의 치료에 효과적인 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a composition for skin whitening containing interleukin 27 (IL-27), and more particularly, contains IL-27 to inhibit pigment production of adult melanocytes in the skin, thereby providing a skin whitening effect. Or to an external preparation composition for the treatment of hyperpigmentary skin diseases such as surpluses.

성체 멜라닌 세포는 피부 표피의 기저막(basal epidermis)에 존재하며, UV와 같은 외부 인자에 의해 멜라닌 색소를 생성하여 생성된 멜라닌 색소를 주변 각질세포에 전달하여 해당 각질세포의 DNA 손상을 억제하는 역할을 한다. 그러나 이러한 성체 멜라닌 세포의 활성은 유전적인 요인, 호르몬 및 여러 질병 요인에 따라 비정상적으로 조절되어 정상적인 색소 생성단계를 벗어나 과다한 색소 생성 및 과증식으로 인해 기미 혹은 흑자와 같은 과색소성 질환을 일으키는 요인이 된다. Adult melanocytes exist in the basal epidermis of the skin epidermis, and act to inhibit the DNA damage of the keratinocytes by transferring the melanin pigment produced by the production of melanin pigment by external factors such as UV to the surrounding keratinocytes. do. However, the activity of these adult melanocytes is abnormally regulated according to genetic factors, hormones, and various disease factors, and it is a factor that causes hyperpigmentation diseases such as blemishes or surpluses due to excessive pigment production and hyperplasia beyond the normal pigment production stage.

해당 질환은 진피에 위치한 멜라닌 세포의 비정상적인 활성에 의해 일어나는 것으로 알려져 있으며, 이렇게 생성된 색소는 각질세포 탈락에 의해 정상적으로 제거되지 않아 미용상 문제를 일으키게 된다. 이러한 과색소성 질환을 조절하기 위해 피부를 구성하는 세포에서 유래되는 다양한 조절 인자에 대한 연구가 진행되고 있으나, 피부 면역 세포 중 면역수지상세포(dendritic cell) 유래 인자인 IL-27이 성체 멜라닌 세포에 직접적으로 미치는 영향은 잘 알려져 있지 않다. 지금까지 IL-27은 면역세포의 성숙을 유도하거나 반대로 면역반응을 억제하는 인자로 연구되어 왔다. 구체적으로 IL-27은 주로 관절염(arthritis)과 같은 염증관련 질병유발인자로서, 또한 피부에서는 각질세포의 비정상적인 증식으로 유래되는 건선(psoriasis) 혹은 비정상적인 기능으로 유래되는 습진(eczema)을 유발하는 주요 면역인자로서 연구되어 왔을 뿐, IL-27이 성체 멜라닌 세포에 직접적으로 미치는 영향에 대해서는 연구가 진행되어 있지 않다.
The disease is known to be caused by abnormal activity of melanocytes located in the dermis, and the pigments thus produced are not normally removed by keratinocyte dropouts, causing cosmetic problems. In order to control the hyperpigmented disease, various regulatory factors derived from the cells constituting the skin are being studied. However, IL-27, a factor derived from the dendritic cell, is directly directed to adult melanocytes. The effect is not well known. To date, IL-27 has been studied as a factor that induces the maturation of immune cells or vice versa. Specifically, IL-27 is mainly an inflammation-related disease-causing factor such as arthritis, and in the skin, the main immune system that causes psoriasis, which is caused by abnormal proliferation of keratinocytes, or eczema, which is caused by abnormal function. Although it has been studied as a factor, there is no study on the direct effect of IL-27 on adult melanocytes.

이에 본 발명자들은 IL-27이 성체 멜라닌 세포의 색소 생성에 영향을 미침을 발견하고, 이를 통해 IL-27을 피부 멜라닌 세포의 색소 생성 억제에 활용할 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다. Accordingly, the present inventors have found that IL-27 affects the pigment production of adult melanocytes, and through this, it was found that IL-27 can be used to inhibit the pigment production of skin melanocytes, thereby completing the present invention.

따라서 본 발명의 목적은 IL-27을 함유하여 피부에서의 성체 멜라닌 세포 활성을 억제시키는 조성물을 제공하는 것이다.
It is therefore an object of the present invention to provide a composition containing IL-27 which inhibits adult melanocyte activity in the skin.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 IL-27을 함유하는 미백용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
In order to achieve the above object, the present invention provides a topical skin composition for whitening containing IL-27.

본 발명에 의한 조성물은 IL-27을 함유하여 피부에서의 멜라닌 세포의 활성화를 억제시킴으로써 피부 미백 효과를 제공할 수 있으며, 이에 더하여 기미 또는 흑자와 같은 과색소성 피부 질환의 증상을 완화 및 치료하는데 에도 효과적이다.
The composition according to the present invention may contain the IL-27 to provide a skin whitening effect by inhibiting the activation of melanocytes in the skin, in addition to alleviating and treating the symptoms of hyperpigmented skin diseases such as blemishes or surpluses. effective.

도 1은 IL-27을 처리한 인간 멜라닌 세포에서의 멜라닌 색소 생성 관련 인자의 유전자 발현이 감소한 결과를 보여주는 그래프이다.1 is a graph showing the result of reduced gene expression of melanin pigment production-related factors in human melanocytes treated with IL-27.

본 발명은 성체 멜라닌 세포의 활성화를 억제하여 멜라닌 색소의 생성을 방지함으로서 피부 미백 효과를 제공할 수 있는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 본 발명의 조성물은 인터루킨 27(IL-27)을 유효성분으로 함유한다.The present invention relates to an external composition for skin that can provide skin whitening effect by inhibiting the activation of adult melanocytes and preventing the production of melanin pigment, wherein the composition of the present invention contains interleukin 27 (IL-27) as an active ingredient. do.

본 발명에서 사용되는 IL-27은 다수의 적당한 기원(예: 인간 재조합 IL-27, R&D systems, 제품번호 2526-IL)으로부터 입수할 수 있다. 이는 재조합 DNA 방법론, 예를 들면 다량의 순수한 인간 IL-27의 생산을 허용하면서 인간 IL-27을 암호화하는 유전자가 클로닝되고 숙주 시스템에서 발현되는 방법에 의해 생산될 수 있다. 생물학적으로 활성인 IL-27의 구성단위 또는 단편 또한 본 발명에서 사용될 수 있다.IL-27 for use in the present invention can be obtained from a number of suitable sources (eg, human recombinant IL-27, R & D systems, product no. 2526-IL). This can be produced by recombinant DNA methodology, for example, in which genes encoding human IL-27 are cloned and expressed in a host system while allowing the production of large amounts of pure human IL-27. Biologically active structural units or fragments of IL-27 may also be used in the present invention.

본 발명의 조성물은 유효성분으로 사용되는 IL-27을 조성물 총 중량에 대하여 0.002~0.01중량%의 양으로 함유한다. 0.002중량% 미만으로 함유되면 피부의 미백을 위하여 티로시나제의 활성을 저해시키기에 충분하지 못하고, 0.01중량%를 초과하여 함유되면 다른 성분의 함량 및 제형화에 있어서 적절하지 못하다. The composition of the present invention contains IL-27 used as an active ingredient in an amount of 0.002 to 0.01 wt% based on the total weight of the composition. The content of less than 0.002% by weight is not sufficient to inhibit the activity of tyrosinase for whitening of the skin, and the content of more than 0.01% by weight is not suitable for the content and formulation of other ingredients.

본 발명에 따른 조성물은 우수한 피부 미백 효과를 제공하며, 또한 과색소성 피부 질환, 예를 들어 기미 또는 흑자의 증상을 완화 및 치료하는데에도 효과적이다.The composition according to the invention provides an excellent skin lightening effect and is also effective in alleviating and treating the symptoms of hyperpigmented skin diseases such as blemishes or surpluses.

본 발명에 따른 조성물은 피부 외용제 조성물로서, 통상의 외용 제제, 화장료 제형 또는 약학 제형으로 제형화될 수 있다.The composition according to the present invention may be formulated into a topical external preparation, a conventional external preparation, a cosmetic formulation or a pharmaceutical formulation.

본 발명에 따른 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The composition according to the invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example emulsions, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) and non- It may be provided in the form of an ionic vesicle dispersant or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or cone stick. It may also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions can be prepared according to conventional methods in the art.

또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.In addition, the composition according to the present invention is a fatty substance, an organic solvent, a dissolving agent, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic or nonionic. Such as type emulsifiers, fillers, metal ion sequestrants, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics. It may contain adjuvants conventionally used in the cosmetic or dermatology field. Such adjuvants are introduced in amounts generally used in the cosmetic or dermatological arts.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 약학적으로 허용가능한 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 함유하여 약학 조성물로서 제형화될 수 있다.In addition, the compositions according to the invention may be formulated as pharmaceutical compositions further containing appropriate pharmaceutically acceptable carriers, excipients and diluents.

본 발명의 약학적 투여 형태는 특별히 제한되는 것은 아니지만, 단독으로 또는 다른 약학적 활성 화합물과 조합하여 사용될 수 있다.The pharmaceutical dosage form of the present invention is not particularly limited, but may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds.

본 발명에 따른 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 로션, 연고, 겔, 크림, 패취, 분무제와 같은 경피투여형 제형을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용될 수 있다.The pharmaceutical compositions according to the invention can be used in any form suitable for pharmaceutical preparations, including transdermal formulations such as lotions, ointments, gels, creams, patches, sprays, respectively, according to conventional methods.

본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 약학 조성물은 1mg/kg/일 내지 5000mg/kg/일의 범위로 투여할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 투여는 하루에 한번 할 수도 있고, 수회 나누어 할 수도 있다. 또한, 그 투여량은 연령, 성별, 체중, 질병의 정도, 투여경로 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Preferred dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention vary depending on the subject's age, sex, weight, symptoms, extent of disease, drug form, route of administration and duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the pharmaceutical composition of the present invention may be administered in the range of 1 mg / kg / day to 5000 mg / kg / day, but is not limited thereto. Administration may be once a day or may be divided several times. In addition, the dosage may be increased or decreased depending on age, sex, weight, degree of disease, route of administration, and the like. Therefore, the above dosage does not limit the scope of the present invention in any aspect.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 미백 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.
In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin lightening effect.

이하, 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. 이들 실시예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들 실시예 및 시험예로 한정되는 것은 아니고, 당업계에서 통상적으로 주지된 변형, 치환 및 삽입 등을 수행할 수 있으며, 이에 대한 것도 본 발명의 범위에 포함된다.
Hereinafter, the content of the present invention will be described in more detail through examples and test examples. These examples are provided only for understanding the contents of the present invention, but the scope of the present invention is not limited to these examples and test examples, and modifications, substitutions, and insertions commonly known in the art may be performed. It may be included in the scope of the present invention.

[[ 참고예Reference Example 1] 멜라닌 세포의 준비 1] Preparation of melanocytes

Cascade 사에서 구입한 인간 멜라닌 세포(Normal Human Epidermal Melanocyte-Darkelyy pigmented, 제품번호 C-102-5C)를 100㎠ 플레이트에 2 x 10⁵ 개수로 심고, 기본 배지는 HMGS(Human Melanocyte Growth Supplement, 제품번호 S-002-5, Gibco)를 포함한 254 배지(제품번호 M-254-500, Gibco)를 사용하였으며 37℃, 5% CO₂ 인큐베이터로 배양하였다. 약 70%~80%의 밀도가 되었을 때 계대 배양을 하였고, 이 후 진행되는 실험들에 계대 배양한 멜라닌 세포를 제공하였다.
Normal human Epidermal Melanocyte-Darkelyy pigmented (C-102-5C), purchased from Cascade, was planted in 100 x 2 plates in 2 x 10 ⁵ counts, and the basal medium was HMGS (Human Melanocyte Growth Supplement, 254 medium containing S-002-5, Gibco) (product number M-254-500, Gibco) was used and incubated in a 37 ° C., 5% CO ₂ incubator. Passage was cultured when the density was about 70% to 80%, and the melanocytes that were passaged were provided to subsequent experiments.

[[ 시험예Test Example 1] One] ILIL -27에 의한 멜라닌 세포의 멜라닌 색소 생성 관련 인자 발현 감소 여부Decreased Expression of Melanin-related Factors in Melanocytes by -27

IL-27에 의해 멜라닌 세포의 색소 생성이 증가되는지 여부를 확인하기 위하여 인간 멜라닌 세포에 IL-27을 처리하였다. IL-27은 R&D systems에서 구입한 IL-27(제품번호 2526-IL)을 사용하였다. Human melanocytes were treated with IL-27 to determine whether the pigment production of melanocytes was increased by IL-27. IL-27 used IL-27 (product number 2526-IL) purchased from R & D systems.

상기 참고예 1에서 배양된 인간 멜라닌 세포를 HMGS를 포함한 기본배지(254 배지, 제품번호 M-254-500; Gibco)에서 37℃, 5% CO₂ 인큐베이터로 72시간 동안 배양하였다. 상기 배양된 인간 멜라닌 세포에 IL-27을 0.02, 0.2μg/ml 농도로 처리하고 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 멜라닌 세포를 이용하여 상기 조건에서 72시간 동안 배양하였다. 상기 배양된 인간 멜라닌 세포의 총 mRNA를 추출하여 실시간 PCR(Real-time PCR)을 이용하여 샘플간 멜라닌 색소 생성 효소인 타이로시나제 (tyrosinase) 유전자의 상대적인 발현차이를 측정하였다. 이 때 프라이머는 사람 타이로시나제에 대한 프라이머(tyrosinase (oculocutaneous albinism IA), Applied Biosystems, 제품 번호; Hs00165976_m1*)를 사용하였으며, 95℃에서 15초, 60℃ 60초 싸이클을 총 40회 반복해서 대조군 유전자 발현에 비해 해당 유전자 발현이 얼마나 감소하였는지 상대적인 값을 측정하였다. 측정 결과는 도 1에 나타내었다.Human melanocytes cultured in Reference Example 1 were incubated for 72 hours in a basic medium (254 medium, product number M-254-500; Gibco) containing HMGS at 37 ℃, 5% CO ₂ incubator. The cultured human melanin cells were incubated for 72 hours under the above conditions using melanin cells treated with IL-27 at a concentration of 0.02, 0.2 μg / ml and no treatment as a control. Total mRNA of the cultured human melanocytes was extracted and the relative expression difference of tyrosinase gene, a melanin-producing enzyme, was measured between samples using real-time PCR. At this time, primers were used for primers for human tyrosinase (tyrosinase (oculocutaneous albinism IA), Applied Biosystems, product number; Hs00165976_m1 *). The relative value of how the gene expression decreased compared to the control gene expression was measured. The measurement result is shown in FIG.

도 1에 나타낸 결과를 통하여, IL-27의 처리에 의하여 색소 생성 효소인 타이로시나제(tyrosinase)의 발현양이 농도의존적으로 감소하였으며, 특히 0.2μg/ml의 농도로 IL-27을 처리한 경우에는 유전자의 발현을 30% 이상으로 감소시킬 수 있음을 확인할 수 있다.Through the results shown in FIG. 1, the expression amount of the tyrosinase, a pigment-producing enzyme, was reduced depending on the concentration of IL-27. In particular, IL-27 was treated at a concentration of 0.2 μg / ml. In this case, it can be confirmed that the expression of the gene can be reduced to 30% or more.

Claims

A whitening cosmetic composition containing IL-27 as an active ingredient in an amount of 0.002 to 0.01 wt% based on the total weight of the composition.

delete

The cosmetic composition according to claim 1, wherein the composition inhibits pigment production of adult melanocytes.

The cosmetic composition according to claim 1, wherein the composition improves hyperpigmented skin disease.

The cosmetic composition according to claim 4, wherein the hyperpigmented skin disease is a blemish or surplus.

A pharmaceutical composition for improving hyperpigmented skin disease, comprising IL-27 as an active ingredient in an amount of 0.002 to 0.01 wt% based on the total weight of the composition.

The pharmaceutical composition of claim 6, wherein the hyperpigmented skin disease is a blemish or surplus.