KR101971265B1 - Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof - Google Patents

Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof Download PDF

Info

Publication number
KR101971265B1
KR101971265B1 KR1020180155989A KR20180155989A KR101971265B1 KR 101971265 B1 KR101971265 B1 KR 101971265B1 KR 1020180155989 A KR1020180155989 A KR 1020180155989A KR 20180155989 A KR20180155989 A KR 20180155989A KR 101971265 B1 KR101971265 B1 KR 101971265B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ibn
kctc
tmah
strain
smic
Prior art date
Application number
KR1020180155989A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
배철완
김진아
우상구
김문기
Original Assignee
한수테크니칼서비스(주)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 한수테크니칼서비스(주) filed Critical 한수테크니칼서비스(주)
Priority to KR1020180155989A priority Critical patent/KR101971265B1/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101971265B1 publication Critical patent/KR101971265B1/en

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/089Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/093Polyurethanes
    • C12R1/01
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)

Abstract

The present invention provides a strain of Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP) which is capable of decomposing tetramethylammonium hydroxide (TMAH), a composition containing the same, and a method for decomposing TMAH using the same.

Description

테트라메틸암모늄 하이드록사이드를 분해하기 위한 균주 및 이를 이용한 수처리 방법 {Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and a method for treating water using the same,

본 발명은 테트라메틸암모늄 하이드록사이드를 분해할 수 있는 균주, 이를 포함하는 조성물, 및 이를 이용하여 테트라메틸암모늄 하이드록사이드를 분해하는 방법에 관한 것이다. The present invention relates to a strain capable of degrading tetramethylammonium hydroxide, a composition comprising the same, and a method for decomposing tetramethylammonium hydroxide using the same.

포토리소그라피(photolithography)에 사용되는 식각액은 테트라메틸암모늄 하이드록사이드 (tetramethylammoniumhydroxide; TMAH)를 포함하는데, TMAH는 독성을 가지고 있어, 식각액을 포함하는 폐수를 적절하게 처리하는 방법이 문제가 된다. 이를 해결하기 위하여 흡착법, 이온교환법, 초여과법 또는 역삼투법으로 농축하여 폐기하는 방법, 또는 농축된 TMAH의 초임계 연소 처리법 등이 알려져 있으나, 이러한 화학적 공정은 복잡한 단계를 거칠 뿐 아니라 농축이나 연소에 따르는 2차 오염이 발생하는 문제가 있다. The etchant used for photolithography contains tetramethylammonium hydroxide (TMAH), which is toxic, and the problem is how to properly treat waste water containing etchant. In order to solve this problem, there are known methods such as an adsorption method, an ion exchange method, an ultrafiltration method, a method of concentrating and disposing by reverse osmosis method, or a supercritical combustion treatment method of concentrated TMAH. However, these chemical processes require complicated steps, There is a problem that tea contamination occurs.

이에 따라 환경 오염을 줄이면서 연속적으로 이용 가능한 TMAH를 분해할 수 있는 미생물을 이용한 생물학적 공정이 연구되고 있다. 예를 들어, 한국 특허 공개 번호 제10-2002-0009060호에서는 아시네토박터 속 IBN-H1 내지 IBN-H7균주를 이용하여 TMAH를 분해하는 방법이 개시되어 있다. 그러나 IBN-H1 내지 IBN-H7 균주는 대규모 적용 시에는 TMAH 분해능이 저하되어 실제 산업 현장에 적용하는 데에 어려움이 있다. Accordingly, biological processes using microorganisms capable of decomposing continuously available TMAH while reducing environmental pollution are being studied. For example, Korean Patent Laid-Open No. 10-2002-0009060 discloses a method of decomposing TMAH using strains IBN-H1 to IBN-H7 in the genus Ashinobacterium. However, strains IBN-H1 to IBN-H7 have a low TMAH resolution when applied on a large scale, making it difficult to apply them to actual industrial fields.

본 발명자들은 대규모 폐수에 포함된 TMAH를 분해하는 경우에도 높은 TMAH 분해능을 가지므로 산업적으로 이용가치가 높은 미생물을 발굴하고자 하였다. The inventors of the present invention sought to find microorganisms having high utilization value because they have a high TMAH resolution even when decomposing TMAH contained in large scale wastewater.

한국 특허 공개 번호 제10-2002-0009060호Korean Patent Publication No. 10-2002-0009060

Keiji Hirano, et al., An Efficient Treatment Technique for TMAH Wastewater by Catalytic Oxidation, IEEE TRANSACTIONS ON SEMICONDUCTOR MANUFACTURING, VOL. 14, NO. 3, AUGUST 2001, pp. 202-206Keiji Hirano, et al., An Efficient Treatment Technique for TMAH Wastewater by Catalytic Oxidation, IEEE TRANSACTIONS ON SEMICONDUCTOR MANUFACTURING, VOL. 14, NO. 3, AUGUST 2001, pp. 202-206

본 발명은 TMAH 분해능이 있는 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP) 균주, 이를 포함하는 TMAH 분해용 조성물, 이를 포함하는 다공성 담체, 및 이를 이용한 수처리 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.The present invention provides a Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP) strain having TMAH resolution, a composition for degrading TMAH containing the same, a porous carrier containing the same, and a water treatment method using the same .

항목 1. 테트라메틸암모늄 하이드록사이드(tetramethylammonium hydroxide; TMAH)의 분해능이 있는 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP).Item 1. Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP) with resolution of tetramethylammonium hydroxide (TMAH).

항목 2. 항목 1의 균주를 포함하는 TMAH 분해용 조성물.Item 2. A composition for degrading TMAH comprising the strain of item 1.

항목 3. 항목 2에 있어서, 아시네토박터 균주 IBN-H6(Acinetobacter sp. IBN-H6; KCTC 10809BP), 아시네토박터 속 IBN-H7(Acinetobacter sp. IBN-H7; KCTC 0836BP), 클루베마이세스 델피네시스 IBN-H1(Kluvermyces delphenisis IBN-H1; KCTC 0834BP), 바실러스 세레우스 IBN-H4(Bacillus cereus IBN-H4; KCTC 0835BP), 마이코박테리움 종 SMIC-1(Mycobacterium sp. SMIC-1 KCTC 10947 BP) 및 메틸로박테리움 엑스토쿠엔스 SMIC-1(Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 균주를 더 포함하는 TMAH 분해용 조성물.The method according to item 3. Item 2, Acinetobacter in Strain IBN-H6 (Acinetobacter sp IBN- H6;. KCTC 10809BP), Acinetobacter genus IBN-H7 (Acinetobacter sp IBN- H7;. KCTC 0836BP), Clube My process Delphi four cis IBN-H1 (Kluvermyces delphenisis IBN- H1; KCTC 0834BP), Bacillus cereus IBN-H4 (Bacillus cereus IBN- H4;. KCTC 0835BP), Mycobacterium species SMIC-1 (Mycobacterium sp SMIC- 1 KCTC 10947 BP) and a bacterium of methyl Solarium X Toku Enschede SMIC-1 ( Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP). ≪ / RTI >

항목 4. 항목 2의 TMAH 분해용 조성물을 포함하는 다공성 담체.Item 4. A porous carrier comprising the composition for degrading TMAH of item 2.

항목 5. 항목 5에 있어서, 상기 담체는 육면체 형태의 폴리우레탄 발포체인 다공성 담체.Item 5. The porous carrier according to item 5, wherein the carrier is a hexahedral polyurethane foam.

항목 6. TMAH를 포함하는 폐수를 항목 1의 균주, 항목 2 또는 3의 조성물, 또는 항목 4 또는 5의 다공성 담체와 접촉시키는 것을 포함하는 미생물학적 수처리 방법.Item 6. A microbial water treatment method comprising contacting a wastewater comprising TMAH with a strain of Item 1, a composition of Item 2 or 3, or a porous carrier of Item 4 or 5.

항목 7. 항목 6에 있어서, 상기 담체는 아시네토박터 균주 IBN-H6(Acinetobacter sp. IBN-H6; KCTC 10809BP), 아시네토박터 속 IBN-H7(Acinetobacter sp. IBN-H7; KCTC 0836BP), 클루베마이세스 델피네시스 IBN-H1(Kluvermyces delphenisis IBN-H1; KCTC 0834BP), 바실러스 세레우스 IBN-H4(Bacillus cereus IBN-H4; KCTC 0835BP), 마이코박테리움 종 SMIC-1(Mycobacterium sp. SMIC-1 KCTC 10947 BP) 및 메틸로박테리움 엑스토쿠엔스 SMIC-1(Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP)로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 균주를 더 포함하는 미생물학적 수처리 방법.Item 7. The method according to item 6, wherein said carrier is selected from the group consisting of Strain IBN-H6 (Acinetobacter sp IBN- H6;. KCTC 10809BP), Acinetobacter genus IBN-H7 (Acinetobacter sp IBN- H7;. KCTC 0836BP), Clube My process Delphi four cis IBN-H1 (Kluvermyces delphenisis IBN- H1; KCTC 0834BP), Bacillus cereus IBN-H4 (Bacillus cereus IBN- H4;. KCTC 0835BP), Mycobacterium species SMIC-1 (Mycobacterium sp SMIC- 1 KCTC 10947 BP) and a bacterium of methyl Solarium X Toku Enschede SMIC-1 ( Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP). ≪ / RTI >

항목 8. 항목 6에 있어서, 호기성 조건으로 15℃ 내지 42℃에서 수행되는 미생물학적 수처리 방법.Item 8. The microbial water treatment method according to item 6, wherein the microbial water treatment is carried out under aerobic conditions at 15 ° C to 42 ° C.

항목 9. 항목 8에 있어서, 유입 폐수의 TMAH는 4 내지 7 g/L이고, 반응조의 pH를 5-8 범위로 조정하며, 잔류시간 24-120시간의 조건으로 연속 운전하는 것을 특징으로 하는 미생물학적 수처리 방법.Item 9. The microorganism according to item 8, wherein the TMAH of the influent wastewater is 4 to 7 g / L, the pH of the reaction tank is adjusted to a range of 5-8, and the operation is continued under the condition of a residence time of 24-120 hours Water treatment method.

본 발명에 따른 균주 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP)를 이용함으로써 TMAH를 고효율로 분해할 수 있다. 본 발명에 따른 균주는 공지된 생물학적 오폐수 처리 공정에 적용 가능하며, 본 발명에 따른 균주가 포함된 조성물 또는 다공성 담체를 이용함으로써 TMAH의 분해 효율을 높일 수 있다. 본 발명에 따른 균주를 이용함으로써 TMAH를 90% 이상 분해할 수 있으며, 별도의 화합물을 첨가하지 않으므로 친환경적이다. 또한 본 발명에 따른 조성물 또는 다공성 담체에 포함된 미생물을 이용한 TMAH 분해 방법은 고농도의 TMAH를 대용량으로 분해 가능하고, 공정이 단순하여 설치비 및 유지 관리 비용이 저렴할 뿐만 아니라, 운영이 용이하다. By using the strain Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP) according to the present invention, TMAH can be degraded with high efficiency. The strain according to the present invention can be applied to a known biological wastewater treatment process, and the decomposition efficiency of TMAH can be increased by using the composition or the porous carrier containing the strain according to the present invention. By using the strain according to the present invention, TMAH can be decomposed by 90% or more, and it is environmentally friendly since no additional compound is added. Also, the TMAH decomposition method using the microorganism contained in the composition or the porous carrier according to the present invention can decompose a high concentration of TMAH into a large amount, and the process is simple, and the installation and maintenance cost is low and the operation is easy.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 균주의 16s RNA 전장 서열을 분석한 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 균주를 MALDI-TOF로 분석한 결과이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 균주를 API 키트로 분석한 결과이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 균주를 육안 및 현미경으로 관찰한 결과이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 미생물을 포함하는 다공성 담체를 이용하여 대용량으로 TMAH를 분해하는 공정을 나타낸 모식도이다.
FIG. 1 is a result of analyzing 16s RNA full-length sequence of a strain according to an embodiment of the present invention.
FIG. 2 is a result of analysis of a strain according to an embodiment of the present invention by MALDI-TOF.
FIG. 3 is a result of analyzing a strain according to an embodiment of the present invention with an API kit.
FIG. 4 shows the result of microscopic observation of a strain according to an embodiment of the present invention.
5 is a schematic view showing a process of decomposing TMAH in a large capacity using a porous carrier containing microorganisms according to an embodiment of the present invention.

이제 본 발명은 첨부된 도면을 참조로 하기에서 더욱 충분히 기술될 것이며, 그러나 본 발명의 전부가 아닌 단지 일부의 구체예가 예시된다. 실제로, 이들 발명은 많은 다양한 형태로 구체화될 수 있으며, 본원에 제시된 구체예로 제한되는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 명세서 및 첨부된 청구범위에 사용되는 단수 형태는 달리 명확하게 지시하지 않는 한 복수한 대상을 포함한다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS The present invention will now be described more fully hereinafter with reference to the accompanying drawings, but only some of the embodiments of the invention are not exhaustive of the invention. Indeed, these inventions may be embodied in many different forms and should not be construed as limited to the embodiments set forth herein. The singular forms as used in this specification and the appended claims include plural referents unless the context clearly dictates otherwise.

테트라메틸암모늄 하이드록사이드(tetramethylammonium hydroxide; TMAH)는 분자식 N(CH3)4 +OH-를 갖는 4차 암모늄 염으로서, 약 67℃의 융점을 갖는다. 실리콘을 이방성으로 에칭하는 데에 사용되며, 강염기성을 띈다. TMAH 분해가 어렵고, 높은 독성을 갖는 것으로 알려져 있다 (Izumi C. Mori, et al., Toxicity of tetramethylammonium hydroxide to aquatic organisms and its synergistic action with potassium iodide, Chemosphere, vol. 120, pp. 299-304, 2015). Tetramethylammonium hydroxide (TMAH) is a quaternary ammonium salt having the molecular formula N (CH 3 ) 4 + OH - , having a melting point of about 67 ° C. It is used to anisotropically etch silicon, and is strongly basic. It is known that TMAH decomposition is difficult and has high toxicity (Izumi C. Mori, et al., Toxicity of tetramethylammonium hydroxide to aquatic organisms and its synergistic action with potassium iodide, Chemosphere, vol. 120, pp. 299-304, 2015 ).

TMAH 분해능을 갖는 미생물 및 이를 포함하는 조성물Microorganisms having TMAH resolution and compositions comprising same

본 발명은 테트라메틸암모늄 하이드록사이드(tetramethylammonium hydroxide; TMAH)를 분해할 수 있는 균주, 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP)를 개시한다. The present invention discloses a strain capable of degrading tetramethylammonium hydroxide (TMAH), Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP), which is a strain capable of degrading tetramethylammonium hydroxide (TMAH).

또한, 상기 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP) 균주를 포함하는, TMAH를 분해하기 위한 조성물을 제공한다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은, 배지, 보존액, 또는 완충액을 더 포함할 수 있으며, 미생물의 생존 및/또는 TMAH 분해 활성을 유지하기 위한 환경을 제공할 수 있는 것이라면 이용 가능하다. 또한, 본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 활성슬러지 형태일 수 있다. Further, the above-mentioned Gordonia cholesterol riborans HTS-S2 ( Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP). ≪ / RTI > In one embodiment of the present invention, the composition may further include a medium, a preservative, or a buffer, and is capable of providing an environment for maintaining the survival and / or TMAH degrading activity of the microorganism. Further, in one embodiment of the present invention, the composition may be in the form of activated sludge.

본 발명의 일 실시예에서, 상기의 조성물은 살아있는 상기의 균주 또는 균주로부터 분리된 TMAH 분해능을 가진 활성 성분을 포함할 수 있다. 본 발명의 “조성물”은, 달리 정의되지 않는 한, 동일한 효과를 얻을 수 있는 상기의 경우를 포함하는 것으로 본원에서 언급된다. 상기의 활성 물질은, 효소 또는 단백질일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. In one embodiment of the invention, the composition may comprise an active ingredient with TMAH resolving power isolated from the strain or strain in question. The " composition " of the present invention is referred to herein as including the above case where the same effect can be obtained, unless otherwise defined. The active substance may be an enzyme or a protein, but is not limited thereto.

본 발명의 일 실시예에서, 상기의 조성물은 TMAH를 분해할 수 있는 공지의 균주를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 조성물에 병용하여 사용될 수 있는 TMAH 분해 미생물은 예를 들어, 이에 제한되는 것은 아니나, 아시네토박터 균주 IBN-H6(Acinetobacter sp. IBN-H6; KCTC 10809BP), 아시네토박터 속 IBN-H7(Acinetobacter sp. IBN-H7; KCTC 0836BP), 클루베마이세스 델피네시스 IBN-H1(Kluvermyces delphenisis IBN-H1; KCTC 0834BP), 바실러스 세레우스 IBN-H4(Bacillus cereus IBN-H4; KCTC 0835BP), 마이코박테리움 종 SMIC-1(Mycobacterium sp. SMIC-1 KCTC 10947 BP) 및 메틸로박테리움 엑스토쿠엔스 SMIC-1(Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP)일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the composition may further comprise a known strain capable of degrading TMAH. TMAH degrading microorganisms which may be used in combination in the composition according to the invention, for example, but are not limited to, Acinetobacter genus Strain IBN-H6 (Acinetobacter sp IBN- H6;. KCTC 10809BP), Acinetobacter genus IBN-H7 (Acinetobacter sp IBN- H7;. KCTC 0836BP), Clube My process Delphi four cis IBN-H1 (Kluvermyces delphenisis IBN- H1; KCTC 0834BP), Bacillus cereus IBN-H4 (Bacillus cereus IBN- H4;. KCTC 0835BP), Mycobacterium species SMIC-1 (Mycobacterium sp SMIC- 1 KCTC 10947 BP) and a bacterium of methyl Solarium X Toku Enschede SMIC-1 ( Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP).

본 발명의 일 실시예에서 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP) 균주를 포함하는, TMAH를 분해하기 위한 조성물, 또는 상기의 균주를 포함하는 담체를 이용하여 TMAH를 분해하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 상기 균주를 포함하는 조성물, 또는 상기 균주를 포함하는 담체를 TMAH를 포함하는 용액과 혼합함으로써 TMAH를 생분해하는 것을 포함한다. 상기 방법은 호기성 조건에서 수행하는 것이 바람직하고, 활성 성분의 TMAH 분해 활성이 제거되지 않는 한, 4℃ 내지 42℃, 또는 15℃ 내지 42℃에서 수행될 수 있다. In one embodiment of the present invention, Gordonia cholesterol riborans HTS-S2 ( Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP), or a method for degrading TMAH using a carrier comprising the strain. The method comprises biodegrading TMAH by mixing a composition comprising the strain, or a carrier comprising the strain, with a solution comprising TMAH. The method is preferably carried out under aerobic conditions and may be carried out at 4 ° C to 42 ° C, or 15 ° C to 42 ° C, unless the TMAH degrading activity of the active ingredient is eliminated.

본원에서 사용하는 용어 “균주”(strain)는 하나의 세포에서 증식한, 유전적으로 동일한 군집을 의미한다. The term " strain " as used herein means a genetically identical population that has grown in one cell.

TMAH의 분해Decomposition of TMAH

본 발명에 따른 미생물, 이를 포함하는 조성물 또는 다공성 담체를 TMAH를 포함하는 오폐수와 접촉시키는 단계를 포함하여, 오폐수로부터 TMAH를 분해할 수 있다. TMAH 분해 공정은 공지의 오폐수 처리 공정의 첫 공정으로, 또는 중간 공정으로, 또는 마지막 공정으로 포함될 수 있고, 통상의 기술자가 목적에 따라 TMAH 분해 공정의 시기를 변경하여 사용할 수 있다. It is possible to decompose TMAH from the wastewater containing the step of bringing the microorganism, the composition containing the same, or the porous carrier according to the present invention into contact with wastewater containing TMAH. The TMAH decomposition process may be included as a first step in a known wastewater treatment process, as an intermediate process, or as a final process, and the timing of the TMAH decomposition process may be changed according to the purpose.

수처리 방법은 한국 등록특허 한국 등록특허 제10-0823149호에 기재되어 있다. 더욱 구체적으로, 수처리는 원수조, 급수 펌프, 반응조, 응집 반응조 및 가압부상조를 포함하는 오·폐수 처리용 유동상 생물막 반응 장치를 이용하여 수행될 수 있다. 상기 반응조는 육면체 형태의 다공성 담체가 전체 반응조 겉보기 용적의 30~50% 충진되어 있으며, 웨지 와이어 스크린을 구비하고, 상기 가압부상조는 응집 반응조의 후단에 설치된다. 반응조는 원수조로부터 유입된 오·폐수내의 오염물질을 다공성 담체에 부착된 미생물과 접촉시키고, 산기 장치(diffuser)를 이용하여 공기와 혼합시킴으로써 유기물을 미생물의 생체로 변환시키거나 미생물의 대사 에너지와 대사 부산물로 변환시킴으로써 오·폐수내의 오염물질을 제거하는 역할을 한다. 반응조는 편면 폭기와 전면 폭기가 모두 가능하다. 웨지 와이어 스크린은 반응조 벽면에 대하여 수직으로 설치되어 큐빅 형태의 다공성 담체와 처리수를 분리시킨다. 웨지 와이어 스크린은 스크린의 폐색 상황이 육안으로 확인 가능한 구조로 되어 있으며, 스크린 세정용 산기관이 공기 세정 가능하도록 적당한 거리로 떨어져 설치되어 있다. 생물 분해에 의해 발생하는 잉여 오니는 담체의 유동에 의한 마찰로 반응조로부터 연속 배출된다. The water treatment method is described in Korean Patent No. 10-0823149. More specifically, the water treatment can be performed using a fluidized bed biofilm reaction apparatus for waste water treatment including a raw water tank, a feed pump, a reaction tank, a flocculation tank, and a pressurized floating tank. The reaction tank has a hexagonal porous carrier filled with 30 to 50% of the apparent volume of the whole reaction tank, and has a wedge wire screen, and the pressurized floating tank is installed at the rear end of the flocculation reaction tank. The reaction tank is a system in which the contaminants in the waste water flowing from the raw water tank are brought into contact with the microorganisms attached to the porous carrier and mixed with air using a diffuser to convert the organic matter into the microorganism body, By converting to metabolic by-products, it plays a role of removing pollutants in waste water and wastewater. The reaction tank is capable of both single side aeration and front side aeration. The wedge wire screen is installed perpendicular to the reaction vessel wall to separate the porous carrier of cubic type from the treated water. The wedge wire screen is structured so that the obstruction of the screen can be visually confirmed, and the screen for cleaning the screen is installed at a proper distance so that the air can be cleaned. The excess sludge generated by the biodegradation is continuously discharged from the reaction tank due to friction due to the flow of the carrier.

미생물의 배양Cultivation of microorganisms

본원에서 사용하는 용어 “배양”은 미생물을 성장 및 번식하게 하는 과정을 의미한다. 배양 방법은 당해 기술 분야에서 잘 알려져 있으며, 미생물의 종류에 따라 통상의 기술자는 임의 선택할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, TMAH 분해능을 갖는 미생물은 액체 배양법, 또는 고체 배양법에 따라 배양될 수 있으며, 액체 배양법은, 예를 들어, 표면 배양법, 심부 배양법, 또는 진탕 배양법일 수 있고, 고체 배양법은, 예를 들어, 정치 배양, 통기 배양, 유동층 배양일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명에 따른 미생물은 호기성 조건에서 배양하는 것이 바람직하다. The term " cultivation " as used herein means a process of growing and propagating microorganisms. The culturing method is well known in the art, and any person skilled in the art can choose according to the type of microorganism. In one embodiment of the present invention, the microorganism having TMAH resolving ability can be cultured according to a liquid culture method or a solid culture method, and the liquid culture method can be, for example, a surface culture method, a deep culture method or a shaking culture method, But is not limited to, for example, stationary culture, aeration culture, and fluidized bed culture. The microorganism according to the present invention is preferably cultured under aerobic conditions.

본원에서 사용하는 용어 “배지”는 미생물을 배양하기 위하여, 미생물이 필요로 하는 영양 물질을 인위적으로 조성해둔 조성물을 의미한다. 배지는 고체 또는 액체일 수 있고, 상기의 고체 배지는 상기 액체 배지에 아가(agar), 젤라틴, 실리카겔 등을 첨가하여 고형화 시킴으로써 제조할 수 있다. The term " medium " as used herein means a composition in which a nutrient required by a microorganism is artificially formed in order to cultivate the microorganism. The medium may be a solid or a liquid, and the solid medium may be prepared by adding agar, gelatin, silica gel or the like to the liquid medium to solidify the medium.

본원에서 사용하는 용어 "접종"은 세포 배양을 시작하기 위해 배지를 주입하고 주입된 배지에 세포를 주입하는 것을 의미한다. 여기서 배지는 세포를 주입하기 전에 미리 주입하거나 세포와 동시에 세포반응기에 주입할 수 있다.The term " inoculation " as used herein means injecting the medium to start cell culture and injecting cells into the injected medium. Here, the medium may be injected before the cells are injected or injected into the cell reactor simultaneously with the cells.

다공성 담체Porous carrier

본 발명에 따른 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP) 미생물을 포함하는 조성물은 미생물을 운반하기 위한 다공성 담체에 함유될 수 있다. The Gordonia cholesterol riborans HTS-S2 & lt ; RTI ID = 0.0 & gt ; ( Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP) microorganism may be contained in a porous carrier for carrying microorganisms.

미생물을 운반하기 위한 다공성 담체는 스폰지 형상의 합성수지 발포체, 및 다공성 폴리우레탄 발포체를 포함하는, 당해 업계에서 사용되는 임의의 다공성 담체일 수 있다. 담체는 예를 들어, 이에 제한되는 것은 아니나, 폴리우레탄, 폴리(에틸렌글리콜) 모노아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 디아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 모노메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 디메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 디비닐 에테르, 폴리(에틸렌글리콜) 에틸 에테르 메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 메틸 에테르 아크릴레 이트, 폴리(에틸렌글리콜) 메틸 에테르 메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 페닐 에테르 아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 우레탄 모노아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 우레탄 디아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 우레탄 메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 우레탄 디메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 우레탄 트리아크릴레이트, 폴리(에틸렌글리콜) 우레탄 트리메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌글리콜) 모노메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌 글리콜) 메틸 에테르 메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌 글리콜) 에틸 에테르 메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌 글리콜) 부틸 에테르 메타아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌글리콜) 모노아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌글리콜) 메틸 에테르 아크릴레이트, 폴리(에틸렌-코-프로필렌글리콜) 에틸 에테르 아크릴레이트 및 폴리(에틸렌-코-프로필렌글리콜) 부틸 에테르 아크릴레이트로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 폴리알킬렌글리콜계 전구체가 중합되어 형성된 폴리알킬렌글리콜계 중합체 분자 백본(backbone) 사이에 가교결합이 형성되어 있는 3차원 망목구조의 폴리알킬렌글리콜계 중합체가 이용될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서 바람직하게는 상기 담체는 다공성 폴리우레탄 발포체 담체일 수 있다.The porous carrier for transporting microorganisms may be any porous carrier used in the art, including sponge-like synthetic resin foams, and porous polyurethane foams. The carrier may be, for example, but not limited to, polyurethane, poly (ethylene glycol) monoacrylate, poly (ethylene glycol) diacrylate, poly (ethylene glycol) monomethacrylate, poly (Ethylene glycol) methyl ether acrylate, poly (ethylene glycol) methyl ether methacrylate, poly (ethyleneglycol) divinyl ether, poly (ethylene glycol) ethyl ether methacrylate, (Ethyleneglycol) urethane diacrylate, poly (ethylene glycol) urethane methacrylate, poly (ethylene glycol) urethane dimethacrylate, poly (ethylene glycol) urethane monoacrylate, poly ) Urethane triacrylate, poly (ethylene glycol) urethane trimethacrylate, Poly (ethylene-co-propylene glycol) monomethacrylate, poly (ethylene-co-propylene glycol) methyl ether methacrylate, (Ethylene-co-propylene glycol) methyl ether acrylate, poly (ethylene-co-propylene glycol) ethyl ether acrylate, and Polyalkylene glycol-based polymer backbone formed by polymerization of at least one polyalkylene glycol-based precursor selected from the group consisting of poly (ethylene-co-propylene glycol) butyl ether acrylate, A polyalkylene glycol-based polymer having a three-dimensional network structure may be used. In one embodiment of the present invention, the carrier is preferably a porous polyurethane foam carrier.

특히 상기 다공성 폴리우레탄 발포체 담체를 제조하는 방법은 한국 등록 특허 제10-0823151호, “다공성 폴리우레탄 발포체 담체 및 이의 제조 방법 및 유동상 생물막 반응 장치용 폭기조”에 기재되어 있다. 예를 들어, (a) i) 4,4-디페닐메탄 디이소시아네이트, 2,4-톨루엔-디이소시아네이트, 2,6-톨루엔-디이소시아네이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 이소시아네이트 화합물, ii) 분자량 3,000∼의 폴리올, iii)디메틸시클로헥실아민, 테트라메틸헥산디아민, 펜타메틸렌디에틸렌트리아민 및 트리에틸렌디아민으로 이루어진 군으로부터 선택되는 촉매, iv) Si-C 결합 또는 Si-O-C 결합을 가지는 실리콘계 정포제, 및 v) 플루오로탄화수소(HFC), 클로로플루오로탄화수소(HCFC) 및 시클로펜탄으로 이루어진 군으로부터 선택되는 발포제를 각각의 독립된 라인(line)을 통해 교반봉이 구비된 믹싱 헤드(mixing head)에 공급하여 반응시킴으로써, 스폰지 형상의 다공성 폴리우레탄 발포체 담체를 수득하는 단계; (b) 샤프트에 원형 나이프가 3~4.5 mm의 범위 내에서 등간격으로 배치되어 있는 가로축 원형 회전 나이프 번들을 상하 운동시켜, 스폰지 형상의 다공성 폴리우레탄 발포체 담체를 세로로 절단하여 등간격의 칼집을 내는 단계; (c) 샤프트에 원형 나이프가 3~4.5 mm의 범위 내에서 등간격으로 배치되어 있는 세로축 원형 회전 나이프 번들을 수평 운동시켜, 세로로 칼집이 난 스폰지 형상의 다공성 폴리우레탄 발포체 담체를 가로로 절단하여 등간격의 칼집을 내는 단계; (d) 밴드 나이프를 사용하여 마무리 절단하여, 가로, 세로 및 높이가 3~4.5 mm의 범위 내에서 일정한 육면체 형태의 다공성 폴리우레탄 발포체 담체를 수득하는 단계; (e) 담체 흡입용 펌프를 사용하여, 절단된 육면체 형태의 다공성 폴리우레탄 담체에 진공을 흡입시킨 후, 메쉬네트(Mesh Net)를 사용하여 2단계로 파편을 제거하는 단계를 포함하여 제조할 수 있으며, 통상의 기술자가 용이하게 변형 가능한 방법으로도 제조될 수 있다. 상기의 방법으로 제조된 다공성 담체는 활성탄 성분이나 접착성 수지 성분을 함유하지 않는 것이 바람직하다. Particularly, a method for producing the above porous polyurethane foam carrier is described in Korean Patent No. 10-0823151 entitled " Porous Polyurethane Foam Support and Preparation Process and Aeration Tank for Fluidized Biofilm Reactor ". (A) an isocyanate compound selected from the group consisting of i) 4,4-diphenylmethane diisocyanate, 2,4-toluene-diisocyanate, 2,6-toluene-diisocyanate and mixtures thereof, ii Iii) a catalyst selected from the group consisting of dimethylcyclohexylamine, tetramethylhexanediamine, pentamethylenediethylenetriamine and triethylenediamine; iv) a catalyst selected from the group consisting of Si-C bonds or Si-OC bonds And v) blowing agents selected from the group consisting of fluorocarbons (HFC), chlorofluoro-hydrocarbons (HCFC) and cyclopentane are introduced into the mixing head through respective independent lines through a mixing head ) To obtain a sponge-like porous polyurethane foam carrier; (b) Horizontal axis circular rotary knife bundle, in which circular knives are arranged at equal intervals in a range of 3 to 4.5 mm on a shaft, is vertically moved to vertically cut a sponge-like porous polyurethane foam carrier, Expelling step; (c) horizontally moving a vertical shaft circular rotary knife bundle having circular knives arranged at regular intervals in a range of 3 to 4.5 mm on a shaft, horizontally cutting a vertically sheathed sponge-like porous polyurethane foam carrier A step of forming an equal interval sheath; (d) finishing and cutting using a band knife to obtain a porous polyurethane foam carrier in the form of a uniform hexahedron in the range of 3 to 4.5 mm in height, width and height; (e) suctioning a vacuum on a porous polyurethane carrier in the form of a cut hexahedron using a carrier suction pump, and then removing the debris in two steps using a mesh net And can be manufactured by a person skilled in the art in an easily deformable manner. It is preferable that the porous carrier produced by the above method does not contain an active carbon component or an adhesive resin component.

미생물의 동정Identification of microorganisms

16s rRNA는 고도로 보존된 프라이머 결합 위치를 포함하며, 종 특이적으로 초가변 영역을 포함하므로, 박테리아를 동정하는 데에 이용된다. 16s rRNA 서열 분석은 8F (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'), U1492R (5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'), 928F (5'-TAAAACTYAAAKGAATTGACGGG-3'), 336R (5'-ACTGCTGCSYCCCGTAGGAGTCT-3'), 1100F (5'-YAACGAGCGCAACCC-3'), 1100R (5'-GGGTTGCGCTCGTTG-3'), 337F (5'-GACTCCTACGGGAGGCWGCAG-3'), 907R (5'-CCGTCAATTCCTTTRAGTTT -3'), 785F (5'-GGATTAGATACCCTGGTA-3'), 805R (5'-GACTACCAGGGTATCTAATC-3'), 533F (5'-GTGCCAGCMGCCGCGGTAA-3'), 518R (5'-GTATTACCGCGGCTGCTGG-3'), 27F (5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'), 또는 1492R (5'-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3'), 또는 이의 조합을 이용하여 수행될 수 있다. 유전체를 상기의 프라이머 쌍을 이용하여 PCR하고 증폭된 DNA의 서열을 분석하여, NCBI에서 제공하는 rRNA 데이터베이스 및 서열 분석 소프트웨어를 이용하여 해당 박테리아를 동정할 수 있다. 유전자 서열의 비교는 본 기술분야의 숙련자에 의한 서열의 수동 평가(manual evaluation)에 의해, 또는 BLAST(Basic Local Alignment Search Tool; Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403 (1993)); ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/ 에서 이용가능)와 같은 알고리즘을 이용한 컴퓨터-자동화 서열 비교 및 확인에 의해 이루어진다. 용어 "서열 분석 소프트웨어"는 유전자 서열을 분석하는데 유용한 임의의 컴퓨터 알고리즘 또는 소프트웨어 프로그램이다. "서열 분석 소프트웨어"는 상업적으로 이용 가능하거나 독립적으로 개발될 수 있다. 전형적인 서열 분석 소프트웨어는 GCG 프로그램 묶음(Wisconsin Package Version 9.0, Genetics Computer Group (GCG), Madison, WI), BLASTP, BLASTN, BLASTX(Altschul et al., J. Mol. Biol. 215:403 (1990)) 및 DNASTAR(DNASTAR, Inc. 1228 S. Park St. Madison, WI 53715 USA)를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 본 출원의 문맥 내에서, 서열 분석 소프트웨어가 분석을 위해 사용되는 경우 달리 특정하지 않는 , 분석결과는 표시된 프로그램의 "기본 매개변수"에 기초하는 것으로 이해될 것이다. 본 명세서에 사용된 "기본 수치 (default value)"는 처음 시작할 때 본래 소프트웨어에 담겨있는 임의의 세트의 수치 또는 매개변수를 의미할 것이다.16s rRNAs contain highly conserved primer binding sites and contain species-specifically hypervariable regions, and are therefore used to identify bacteria. 16s rRNA sequence analysis was carried out using 8F (5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 '), U1492R (5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'), 928F (5'-TAAAACTYAAAKGAATTGACGGG- 3 '), 336R (5'- ACTGCTGCSYCCCGTAGGAGTCT- (5'-GAGATTAGATACCCTGGTA-3 '), 1100R (5'-GGGTTGCGCTCGTTG-3'), 337F (5'-GACTCCTACGGGAGGCWGCAG-3 '), 907R (5'- CCGTCAATTCCTTTRAGTTT- 3 '), 275 (5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'), or 1492R (5'-GACTACCAGGGTATCTAATC- (5'-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3 '), or a combination thereof. The genome can be PCR-amplified using the primer pairs described above, and the amplified DNA sequence can be analyzed to identify the bacterium using the rRNA database and sequencing software provided by NCBI. Comparison of gene sequences can be performed by manual evaluation of sequences by those skilled in the art or by BLAST (Basic Local Alignment Search Tool; Altschul et al., J. Mol. Biol. 215: 403 (1993) ; (available at ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/) by computer-automated sequence comparison and verification. The term " sequencing software " is any computer algorithm or software program useful for analyzing gene sequences. &Quot; Sequencing software " is commercially available or can be developed independently. A typical sequence analysis software is the GCG program suite (Wisconsin Package Version 9.0, Genetics Computer Group (GCG), Madison, WI), BLASTP, BLASTN, BLASTX (Altschul et al., J. Mol. Biol. 215: 403 And DNASTAR (DNASTAR, Inc. 1228 S. Park St. Madison, Wis. 53715 USA). Within the context of the present application, the analysis results, which are not otherwise specified when sequencing software is used for analysis, will be understood to be based on the "basic parameters" of the displayed program. Quot; default value " as used herein shall mean any set of numerical values or parameters contained in the original software at the start of the process.

API 50 CH 스트립은 50개의 마이크로 튜브로 구성되어 있으며 각각의 마이크로 튜브는 발효 검사를 위한 혐기성 영역과 산화 및 동화 작용(assimilation) 검사를 위한 호기성 영역으로 구성되어 미생물의 탄수화물 대사를 검사할 수 있다. 발효는 튜브 부분 내 색 변화를 통해 확인하고, pH 지시약을 통해 혐기성 조건에서 발생되는 산에 의한 변화를 볼 수 있다.The API 50 CH strip consists of 50 microtubes, each of which can be tested for anaerobic zones for fermentation testing and aerobic zones for oxidation and assimilation testing to check for carbohydrate metabolism in microorganisms. The fermentation is confirmed by the color change in the tube part, and the pH indicator shows the change caused by the acid generated in the anaerobic condition.

API 20 E 스트립은 건조된 기질을 함유하고 있는 20개의 튜브로 되어있다. 이 테스트 튜브들에 세균 부유액을 접종하고 배양시키면 배양 시간 동안 생성된 반응 산물들에 의해 색이 변화되거나 보조 시약의 첨가로 색이 변화되며 이를 통해 결과를 판독한다. 각 튜브에는 각각의 테스트를 위하여 화학적으로 정의된 조성물을 포함하는 건조 배지(dehydrated media)를 함유한다. The API 20 E strip consists of 20 tubes containing a dried substrate. When the test tubes are inoculated with the bacterial suspension and incubated, the color is changed by the reaction products generated during the incubation time, or the color is changed by the addition of the auxiliary reagent, and the result is read. Each tube contains dehydrated media containing a chemically defined composition for each test.

하기 실시예는 오직 예시목적으로 의도되며, 어떤한 식이든 본 발명의 범위를 제한하기 위한 것이 아니다.The following examples are intended for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the invention in any way.

실시예Example

실시예 1. TMAH 분해 균주의 분리Example 1. Isolation of TMAH-degrading strain

폐수 시료 250ml를 멸균된 사이드 필터백에 투입하고, 스토마커(stomacher)를 이용하여 시료를 균질화하였다. 균질화된 시료 1ml을 멸균 생리 식염수 9ml에 접종하여 시료를 10배 희석하고, 희석된 시료 0.3ml을 1X TSA (15g Trypton, 5g Soytone, 5g Sodium chloride, 15g Agar / L) 및 0.1X TSA에 접종하고 도말한 후, 배양기에서 30℃로 5일간 배양하였다. 배양 후 생성된 콜로니를 선택하여 TSA에서 순수 분리 배양하였으며, 확보된 각각의 균주를 냉동바이알(Cryovial)에 옮겨 통상의 방법에 따라 동결 보관하였으며, 이후 실험에서는 동결 보관된 균주를 녹여서 사용하였다. 250 ml of the waste water sample was put into a sterilized side filter bag and the sample was homogenized using a stomacher. 1 ml of the homogenized sample is inoculated into 9 ml of sterile physiological saline to dilute the sample 10 times and 0.3 ml of the diluted sample is inoculated into 1X TSA (15 g Trypton, 5 g Soytone, 5 g sodium chloride, 15 g Agar / L) and 0.1X TSA After culturing, the cells were cultured in an incubator at 30 DEG C for 5 days. After culturing, the colonies were selected and cultured separately in TSA. Each strain was transferred to a cryovial and stored frozen according to the usual method. The frozen strains were then used in the experiment.

상기의 확보된 각각의 균주를 0.01%(w/v)의 TMAH를 포함하는 최소배지 및 0.2%(w/v)을 포함하는 TSA 고체 배지에 접종하여 30℃에서 24시간동안 배양하였다. 0.01%(w/v)의 TMAH를 포함하는 최소배지에서 배양된 15종의 균주를 선별하고, 이 중 형태가 비슷한 미생물을 재분류하여 13종의 균주를 선별하였으며, 0.2%(w/v)을 포함하는 TSA 고체 배지에서 배양되는 10종의 균주를 선별하였다. Each of the obtained strains was inoculated into a TSA solid medium containing 0.01% (w / v) of TMAH and 0.2% (w / v), and cultured at 30 ° C for 24 hours. Thirteen strains cultivated in a minimal medium containing 0.01% (w / v) TMAH were selected, and 13 strains were selected by reclassifying microorganisms with similar morphology, and 0.2% (w / v) Were selected from 10 strains cultured in the TSA solid medium.

실시예 2. TMAH 분해 활성 확인Example 2. Identification of TMAH decomposition activity

상기 실시예 1에서 선별된 총 23종의 미생물을 0.01%(w/v)의 TMAH를 포함하는 최소배지에서 30℃에서 24시간동안 배양한 후, 배지에 잔존하는 TMAH의 농도를 측정하였다 (표 1 및 표 2). 대조군에는 어떠한 미생물도 접종하지 않았으며, 실험군과 동일한 조건에서 동일한 시간 동안 유지하였다. A total of 23 microorganisms selected in Example 1 were cultured in a minimal medium containing 0.01% (w / v) of TMAH at 30 ° C for 24 hours, and then the concentration of TMAH remaining in the medium was measured 1 and Table 2). The control group was not inoculated with any microorganisms and maintained for the same period of time under the same conditions as the experimental group.

샘플Sample TMAH (mg/L)TMAH (mg / L) 대조군Control group 111111 66 82.982.9 1515 82.482.4 15d15d 85.285.2 21b21b *N.D.* N.D. 2424 N.D.N.D. 3737 N.D.N.D. 37d37d N.D.N.D. 44a44a 8686 5151 72.972.9 6262 71.171.1 6464 N.D.N.D. 7878 N.D.N.D. 8282 N.D.N.D.

*N.D.; Not detected; 미검출* N.D .; Not detected; Not detected

샘플Sample TMAH (mg/L)TMAH (mg / L) 대조군Control group 112112 1-11-1 *N.D.* N.D. 1-21-2 N.D.N.D. 1-61-6 N.D.N.D. 1-71-7 N.D.N.D. 1-121-12 N.D.N.D. 2-32-3 N.D.N.D. 2-92-9 N.D.N.D. 2-102-10 N.D.N.D. 2-112-11 N.D.N.D. 2-172-17 N.D.N.D.

*N.D.; Not detected; 미검출* N.D .; Not detected; Not detected

실시예 3. TMAH 분해 미생물의 동정 Example 3. Identification of TMAH-degrading microorganisms

3.1 16s rRNA 서열 분석3.1 16s rRNA Sequence Analysis

상기 실시예 2의 23종의 미생물에서 TMAH 분해 효율이 높은 미생물 중, 형태가 비슷한 미생물을 재분류하여 11종의 미생물을 선택하였고, 이들을 27F 및 1492R 프라이머를 이용하여 16s rRNA 서열 분석하였다: 27F: 5'-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3'; 1492R: 5'-CGG TTA CCT TGT TAC GAC TT-3' (Jiang H, Dong H, Zhang G, Yu B, Chapman LR, Fields MW (June 2006). "Microbial diversity in water and sediment of Lake Chaka, an athalassohaline lake in northwestern China". Applied and Environmental Microbiology. 72 (6): 3832-45.). MicroSeq 500 microbial identification system을 이용하여 분석된 서열로부터 각각의 미생물을 동정하였으며, 그 결과는 표 3에 나타내었다. SEQ ID Nos: 1, 2, 및 3은 각각 샘플 2-10, 24 및 64의 16s rRNA 서열 분석 결과이다 (도 1a 내지 1c). Of the microorganisms of Example 2, 11 microorganisms were selected by sorting microorganisms having similar TMAH degradation efficiencies and 16s rRNA sequences were analyzed using 27F and 1492R primers: 27F: 5'-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3 '; 1492R: 5'-CGG TTA CCT TGT TAC GAC TT-3 '(Jiang H, Dong H, Zhang G, Yu B, Chapman LR, Fields MW Applied and Environmental Microbiology, 72 (6): 3832-45.). Each microorganism was identified from the sequence analyzed using the MicroSeq 500 microbial identification system, and the results are shown in Table 3. SEQ ID Nos: 1, 2, and 3 are the 16s rRNA sequence analysis results of samples 2-10, 24, and 64, respectively (FIGS.

샘플Sample 결과result 24, 3724, 37 Lysinibacillus sphaericusLysinibacillus sphaericus 78, 82, 2-1078, 82, 2-10 Stenotrophomonas maltophiliaStenotrophomonas maltophilia 37d, 6437d, 64 Gordonia cholesterolivoransGordonia cholesterolivorans 1-6, 2-111-6, 2-11 Bacillus cereusBacillus cereus 1-7, 21b1-7, 21b Bacillus wiedmanniiBacillus wiedmannii

3.2 MALDI-TOF 분석3.2 MALDI-TOF Analysis

샘플 24, 2-10, 및 64를 각각 MALDI-TOF 분석 하였다. 더욱 구체적으로, 에펜도르프 튜브에 증류수 300㎕와 20㎕ 균을 혼합하여 교반하고, 100℃ 에서 30분간 가열 후 13,000rpm으로 30초 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 침전물에 100% 에탄올 900㎕을 첨가하여 교반하고, 13,000rpm으로 2분간 원심분리 후 상층액을 제거하였다. 상기와 동일한 조건으로 다시 한 번 원심분리한 후 남아있는 용액을 제거하고 펠렛을 상온 건조하였다. 비드(bead)를 건조된 펠렛과 동량으로 넣고, 동량의 20㎕ 아세토나이트릴을 첨가한 후 1분간 교반하였다. 70% 포름산 20㎕를 첨가하고 5초간 교반하고, 13,000rpm으로 2분 원심분리하였다. 상층액 1㎕를 플레이트에 로딩 후 상온에서 건조하였다. 전처치 검체는 α-시아노-4-하이드록시신남산(매트릭스 용액) 1㎕를 도포 후 MALDI-TOF MS로 측정하였다. 이 장비는 검체를 레이저 조사로 이온화시킨 후, 이온들이 전하량에 따라 검출기까지 도달하는 시간을 측정하여 분자량을 분석하였다.Samples 24, 2-10, and 64 were each subjected to MALDI-TOF analysis. More specifically, 300 μl of distilled water and 20 μl of bacteria were mixed and stirred in an Eppendorf tube, heated at 100 ° C. for 30 minutes, and centrifuged at 13,000 rpm for 30 seconds to remove the supernatant. 900 쨉 l of 100% ethanol was added to the precipitate, stirred, centrifuged at 13,000 rpm for 2 minutes, and the supernatant was removed. After centrifuging once again under the same conditions as above, the remaining solution was removed and the pellet was dried at room temperature. The beads were poured in the same amount as the dried pellets, and the same amount of 20 μl of acetonitrile was added, followed by stirring for 1 minute. 20 mu l of 70% formic acid was added, stirred for 5 seconds, and centrifuged at 13,000 rpm for 2 minutes. 1 상 of the supernatant was loaded on the plate and dried at room temperature. Pretreatment samples were coated with 1 α of α-cyano-4-hydroxycinnamic acid (matrix solution) and measured by MALDI-TOF MS. The instrument ionizes the specimen by laser irradiation, and the molecular weight is measured by measuring the time the ions reach the detector according to the amount of charge.

그 결과는 도 2에 나타내었다. 그 결과, 샘플 2-10(도 2a)는 Stenotrophomonas maltophilia로 확인되었고, 샘플 24(도 2b)는 Lysinibacillus sphaericus로 확인되었다. 샘플 64(도 2c)는 MALDI-TOF 내의 데이터 시트에 자료가 존재하지 않아 판독이 불가능 하였다. The results are shown in Fig. As a result, Sample 2-10 (FIG. 2A) was identified as Stenotrophomonas maltophilia , and Sample 24 (FIG. 2B) was identified as Lysinibacillus sphaericus . Sample 64 (FIG. 2C) was unreadable because there was no data in the data sheet in the MALDI-TOF.

3.3 API 키트 분석3.3 API Kit Analysis

샘플 24, 2-10, 및 64를 각각 API 20E 스트립 및 API 50CH (BIOMERIEUX)를 이용하여 제조자가 제공한 매뉴얼에 따라 분석하였다. Samples 24, 2-10, and 64 were analyzed according to the manufacturer's instructions using API 20E strips and API 50CH (BIOMERIEUX), respectively.

그 결과는 도 3a(샘플 24), 도 3b(샘플 2-10) 및 도 3c(샘플 64)에 나타내었다. The results are shown in Fig. 3A (sample 24), Fig. 3B (sample 2-10) and Fig. 3C (sample 64).

3.4 형태학적 분석 및 기타3.4 Morphological analysis and others

샘플 24, 2-10, 및 64를 각각 육안 및 현미경으로 미생물 형태 및 운동성을 관찰하였고, 그람 염색법으로 분석하였다. Samples 24, 2-10, and 64 were observed with microscopic and microscopic microbial morphology and motility, respectively, and analyzed by Gram stain.

2-10 균주(도 4a 및 4b)는 운동성을 가지고 있었고, 막대형(rod-shape)이었으며, 그람 음성균(Gram-negative)에 해당하는 호기성 미생물이었다. 24 균주(도 4c 및 4d)는 운동성이 있는 막대형의 그람 음성균에 해당하는 호기성 미생물이었으며, 내생 포자(endospore)를 확인하였다. 64 균주(도 4e 및 4f)는 운동성이 있는 막대형의 그람 음성균에 해당하는 호기성 미생물이었으며, 콜레스테롤을 분해할 수 있었다. The strains 2-10 (FIGS. 4A and 4B) were motile, rod-shaped, and aerobic microorganisms corresponding to Gram-negative bacteria. 24 strains (Figures 4c and 4d) were aerobic microorganisms corresponding to rod-shaped Gram-negative bacteria with motility, and confirmed endospore. 64 strains (Figs. 4E and 4F) were aerobic microorganisms corresponding to rod-shaped Gram-negative bacteria with motility, and were able to degrade cholesterol.

실시예 3.3 및 3.4의 결과 역시, 실시예 3.1의 16s rRNA 분석 결과와 마찬가지로 샘플 2-10은 스테노트로포모나스 말토필리아 (Stenotrophomonas maltophilia), 샘플 24는 라이시니바실러스 스패리커스 (Lysinibacillus sphaericus), 샘플 64는 고르도니아 콜레스테로리보란스 (Gordonia cholesterolivorans)임을 확인할 수 있었다. Examples 3.3 and 3.4 also results as in the Example 3.1 of the 16s rRNA analysis of the samples 2-10 to note stacking Pomona's malto pilriah (Stenotrophomonas maltophilia), sample 24 is a license shinny Bacillus spare Li carcass (Lysinibacillus sphaericus), Sample 64 Gordonia cholesterolivorans . ≪ / RTI >

상기와 같이 확인된 미생물들, Lysinibacillus sphaericus HTS-S3, Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1 및 Gordonia cholesterolivorans HTS-S2를 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하였다. The microorganisms identified as above, Lysinibacillus sphaericus HTS-S3, Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1 and Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 were deposited at the Korea Biotechnology Research Center.

실시예 4. 미생물을 이용한 TMAH를 포함하는 폐수 처리Example 4. Treatment of wastewater containing TMAH using microorganisms

고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP), 라이시니바실러스 스패리커스 균주 HTS-S3 (Lysinibacillus sphaericus HTS-S3) (KCTC13664BP), 및 스테노트로포모나스 말토필리아 HTS-S1 (Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1) (KCTC13662BP) 를 포함하는 다공성 담체가 충진된 생물 반응기를 이용하여 폐수에 포함된 TMAH의 분해 효율을 측정하였다. Pick Macedonia cholesteryl as ribonucleic lance HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS- S2) (KCTC13663BP), Lai shinny Bacillus spare Li coarse strain HTS-S3 (Lysinibacillus sphaericus HTS- S3) (KCTC13664BP), and a stacking notes Pomona's malto pilriah HTS-S1 The degradation efficiency of TMAH contained in wastewater was measured using a bioreactor filled with a porous carrier containing Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1 (KCTC13662BP).

4,000 내지 7,000 mg/L의 TMAH를 포함하는 폐수를 약 250m3/day로 공급하면서 상기 다공성 담체를 접촉시키고, 포기조에서 pH 5 내지 8, 및 15 내지 42℃의 온도에서 교반하며 반응시켰으며, 반응 전 및 반응 1 내지 5일 후의 TMAH 농도를 측정하였다(표 4). The porous carrier was contacted while supplying wastewater containing 4,000 to 7,000 mg / L of TMAH at about 250 m 3 / day, reacted in aeration tank at a pH of 5 to 8, and at a temperature of 15 to 42 ° C with stirring, The TMAH concentrations before and 1 to 5 days after the reaction were measured (Table 4).

구분division TMAH(mg/L)TMAH (mg / L) 시행 1Enforcement 1 원수enemy 53005300 처리수Treated water N.DN.D. 시행 2Enforcement 2 원수enemy 53005300 처리수Treated water N.DN.D. 시행 3Enforcement 3 원수enemy 40944094 처리수Treated water N.DN.D. 시행 4Enforcement 4 원수enemy 55135513 처리수Treated water 129129 시행 5Enforcement 5 원수enemy 55125512 처리수Treated water N.DN.D. 시행 6Enforcement 6 원수enemy 55065506 처리수Treated water 7676

*N.D.; Not detected; 미검출* N.D .; Not detected; Not detected

총 6회의 시행을 하였으며, 유입 원수는 평균적으로 약 5204 mg/L로 TMAH를 포함하였으며, 본 발명에 따른 미생물을 이용함으로써 농도 기준으로 평균적으로 약 99.4%의 TMAH를 분해할 수 있었다. 대규모 폐수 처리 시에도 본 발명에 따른, 다공성 담체에 포함된, 라이시니바실러스 스패리커스 HTS-S3 균주(Lysinibacillus sphaericus) HTS-S3 (KCTC13664BP), 스테노트로포모나스 말토필리아 HTS-S1 (Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1) (KCTC13662BP) 및 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP)는 평균적으로 약 98% 이상의 TMAH 분해능을 보임을 확인하였다. TMAH was contained at an average of about 5204 mg / L as the influent source, and about 99.4% of the TMAH was decomposed on an average basis by using the microorganism according to the present invention. According to the present invention, even when a large-scale waste water treatment, are included in the porous carrier, Lai shinny Bacillus spare Li coarse HTS-S3 strain (Lysinibacillus sphaericus) HTS-S3 ( KCTC13664BP), a stacking notes Pomona's malto pilriah HTS-S1 Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1 (KCTC13662BP) and Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP) showed an average TMAH resolution of about 98% or more.

예를 들어, 청구항 구성 목적을 위해, 이하 기재되는 청구항은 어떤 식으로든 이의 문자 그대로의 언어보다 좁게 해석되어선 안 되고, 따라서 명세서로부터의 예시적 구현예가 청구항으로 읽혀서는 안 된다. 따라서, 본 발명은 예시로서 기재되었고, 청구항의 범위에 대한 제한이 아님이 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명은 하기 청구항에 의해서만 제한된다. 본 출원에 인용된 모든 간행물, 발행된 특허, 특허 출원, 서적 및 저널 논문은 이들의 전체내용이 참조로서 본원에 각각 포함된다.For example, for purposes of constituting a claim, the claims set forth below should not be construed in any way as narrower than its literal language, and thus the illustrative embodiment from the specification should not be read as a claim. It is, therefore, to be understood that the present invention has been described by way of example and not limitation in the scope of the claims. Accordingly, the invention is limited only by the following claims. All publications, published patents, patent applications, publications, and journal articles cited in this application are herein incorporated by reference in their entirety.

한국생명공학연구원Korea Biotechnology Research Institute KCTC13662BPKCTC13662BP 2018101820181018 한국생명공학연구원Korea Biotechnology Research Institute KCTC13663BPKCTC13663BP 2018101820181018 한국생명공학연구원Korea Biotechnology Research Institute KCTC13664BPKCTC13664BP 2018101820181018

<110> Hansu Technical Service LTD <120> Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide <130> 18P10017 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1469 <212> DNA <213> Stenotrophomonas maltophilia <220> <221> rRNA <222> (1)..(1469) <223> 16s RNA full sequence <400> 1 gctcagagtg aacgctggcg gtaggcctaa cacatgcaag tcgaacggca gcacaggaga 60 gcttgctctc tgggtggcga gtggcggacg ggtgaggaat acatcggaat ctactctgtc 120 gtgggggata acgtagggaa acttacgcta ataccgcata cgacctacgg gtgaaagcag 180 gggatcttcg gaccttgcgc gattgaatga gccgatgtcg gattagctag ttggcggggt 240 aaaggcccac caaggcgacg atccgtagct ggtctgagag gatgatcagc cacactggaa 300 ctgagacacg gtccagactc ctacgggagg cagcagtggg gaatattgga caatgggcgc 360 aagcctgatc cagccatacc gcgtgggtga agaaggcctt cgggttgtaa agcccttttg 420 ttgggaaaga aatccagccg gctaatacct ggttgggatg acggtaccca aagaataagc 480 accggctaac ttcgtgccag cagccgcggt aatacgaagg gtgcaagcgt tactcggaat 540 tactgggcgt aaagcgtgcg taggtggtta tttaagtccg ttgtgaaagc cctgggctca 600 acctgggaac tgcagtggat actggatgac tagaatgtgg tagagggtag cggaattcct 660 ggtgtagcag tgaaatgcgt agagatcagg aggaacatcc atggcgaagg cagctacctg 720 gaccaacatt gacactgagg cacgaaagcg tggggagcaa acaggattag ataccctggt 780 agtccacgcc ctaaacgatg cgaactggat gttgggtgca atttggcacg cagtatcgaa 840 gctaacgcgt taagttcgcc gcctggggag tacggtcgca agactgaaac tcaaaggaat 900 tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagtat gtggtttaat tcgatgcaac gcgaagaacc 960 ttacctggcc ttgacatgtc gagaactttc cagagatgga ttggtgcctt cgggaactcg 1020 aacacaggtg ctgcatggct gtcgtcagct cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc 1080 aacgagcgca acccttgtcc ttagttgcca gcacgtaatg gtgggaactc taaggagacc 1140 gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaagt catcatggcc cttacggcca 1200 gggctacaca cgtactacaa tggtagggac agagggctgc aagccggcga cggtaagcca 1260 atcccagaaa ccctatctca gtccggattg gagtctgcaa ctcgactcca tgaagtcgga 1320 atcgctagta atcgcagatc agcattgctg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca 1380 ccgcccgtca caccatggga gtttgttgca ccagaagcag gtagcttaac cttcgggagg 1440 gcgcttgcca cggtgtggcc gatgactgg 1469 <210> 2 <211> 1439 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Lysinibacillus sphaericus <220> <221> rRNA <222> (1)..(1439) <223> 16s RNA full sequence <400> 2 tggctcagga cgaacgctgg cggcgtgcct aatacatgca agtcgagcga acagataagg 60 agcttgctcc tttgacgtta gcggcggacg ggtgagtaac acgtgggcaa cctaccctat 120 agtttgggat aactccggga aaccggggct aataccgaat aacttgttgt ctctcatgag 180 acaattctaa aagacggttt cggctgtcgc tataggatgg gcccgcggcg cattagctag 240 ttggtgaggt aacggctcac caaggcgacg atgcgtagcc gacctgagag ggtgatcggc 300 cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg cagcagtagg gaatcttcca 360 caatgggcga aagcctgatg gagcaacgcc gcgtgagtga agaaggattt cggttcgtaa 420 aactctgttg taagggaaga acaagtacag tagtaactgg ctgtaccttg acggtacctt 480 attagaaagc cacggctaac tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg tggcaagcgt 540 tgtccggaat tattgggcgt aaagcgcgcg caggtggttt cttaagtctg atgtgaaagc 600 ccacggctca accgtggagg gtcattggaa actgggagac ttgagtgcag aagaggatag 660 tggaattcca agtgtagcgg tgaaatgcgt agagatttgg aggaacacca gtggcgaagg 720 cgactatctg gtctgtaact gacactgagg cgcgaaagcg tggggagcaa acaggattag 780 ataccctggt agtccacgcc gtaaacgatg agtgctaagt gttagggggt ttccgcccct 840 tagtgctgca gctaacgcat taagcactcc gcctggggag tacggtcgca agactgaaac 900 tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac 960 gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatccc attgaccact gtagagatac agttttccct 1020 tcggggacaa cggtgacagg tggtgcatgg ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg 1080 gttaagtccc gcaacgagcg caacccttga tcttagttgc catcatttag ttgggcactc 1140 taaggtgact gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaaat catcatgccc 1200 cttatgacct gggctacaca cgtgctacaa tggacgatac aaacggttgc caactcgcga 1260 gagggagcta atccgataaa gtcgttctca gttcggattg taggctgcaa ctcgcctaca 1320 tgaagccgga atcgctagta atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggcc 1380 ttgtacacac cgcccgtcac accacgagag tttgtaacac ccgaagtcgg tgaggtaac 1439 <210> 3 <211> 1409 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Gordonia cholesterolivorans <220> <221> rRNA <222> (1)..(1409) <223> 16s RNA full sequence <400> 3 tggctcagga cgaacgctgg cggcgtgctt aacacatgca agtcgaacgg aaaggcccag 60 cttgctgggt actcgagtgg cgaacgggtg agtaacacgt gggtgatctg ccctggactc 120 tgggataagc ctgggaaact gggtctaata ccggatagga ccactgattg catggttggt 180 ggtggaaagc ttttgcggtt caggatgggc ccgcggccta tcagcttgtt ggtggggtaa 240 tggcctacca aggcgacgac gggtagccga cctgagaggg tgatcggcca cactgggact 300 gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtgggga atattgcaca atgggcgcaa 360 gcctgatgca gcgacgccgc gtgagggatg acggccttcg ggttgtaaac ctctttcgct 420 agggacgaag cgtaagtgac ggtacctgga gaagaagcac cggccaacta cgtgccagca 480 gccgcggtaa tacgtagggt gcgagcgttg tccggaatta ctgggcgtaa agagctcgta 540 ggcggtttgt cgcgtcgtct gtgaaattct gcaactcaat tgcaggcgtg caggcgatac 600 gggcagactt gagtactaca ggggagactg gaattcctgg tgtagcggtg aaatgcgcag 660 atatcaggag gaacaccggt ggcgaaggcg ggtctctggg tagtaactga cgctgaggag 720 cgaaagcgtg gggagcgaac aggattagat accctggtag tccacgccgt aaacggtggg 780 tactaggtgt ggggctcatt tcacgagttc cgtgccgtag ctaacgcatt aagtaccccg 840 cctggggagt acggccgcaa ggctaaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg 900 gcggagcatg tggattaatt cgatgcaacg cgaagaacct tacctgggtt tgacatacac 960 cagaaagccg tagagatacg gccccccttg tggttggtgt acaggtggtg catggctgtc 1020 gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttgtcctgt 1080 attgccagcg ggttatgccg gggacttgca ggagactgcc ggggtcaact cggaggaagg 1140 tggggatgac gtcaagtcat catgcccctt atgtccaggg cttcacacat gctacaatgg 1200 cgcgtacaga gggctgcgag accgtgaggt ggagcgaatc ccttaaagcg cgtctcagtt 1260 cggattgggg tctgcaactc gaccccatga agtcggagtc gctagtaatc gcagatcagc 1320 aacgctgcgg tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacgt catgaaagtc 1380 ggtaacaccc gaagccggtg gcctaaccc 1409 <110> Hansu Technical Service LTD <120> Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide <130> 18P10017 <160> 3 <170> KoPatentin 3.0 <210> 1 <211> 1469 <212> DNA <213> Stenotrophomonas maltophilia <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. (1469) <223> 16s RNA full sequence <400> 1 gctcagagtg aacgctggcg gtaggcctaa cacatgcaag tcgaacggca gcacaggaga 60 gcttgctctc tgggtggcga gtggcggacg ggtgaggaat acatcggaat ctactctgtc 120 gtgggggata acgtagggaa acttacgcta ataccgcata cgacctacgg gtgaaagcag 180 gggatcttcg gaccttgcgc gattgaatga gccgatgtcg gattagctag ttggcggggt 240 aaaggcccac caaggcgacg atccgtagct ggtctgagag gatgatcagc cacactggaa 300 ctgagacacg gtccagactc ctacgggagg cagcagtggg gaatattgga caatgggcgc 360 aagcctgatc cagccatacc gcgtgggtga agaaggcctt cgggttgtaa agcccttttg 420 ttgggaaaga aatccagccg gctaatacct ggttgggatg acggtaccca aagaataagc 480 accggctaac ttcgtgccag cagccgcggt aatacgaagg gtgcaagcgt tactcggaat 540 tactgggcgt aaagcgtgcg taggtggtta tttaagtccg ttgtgaaagc cctgggctca 600 acctgggaac tgcagtggat actggatgac tagaatgtgg tagagggtag cggaattcct 660 ggtgtagcag tgaaatgcgt agagatcagg aggaacatcc atggcgaagg cagctacctg 720 gaccaacatt gacactgagg cacgaaagcg tggggagcaa acaggattag ataccctggt 780 agtccacgcc ctaaacgatg cgaactggat gttgggtgca atttggcacg cagtatcgaa 840 gctaacgcgt taagttcgcc gcctggggag tacggtcgca agactgaaac tcaaaggaat 900 tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagtat gtggtttaat tcgatgcaac gcgaagaacc 960 ttacctggcc ttgacatgtc gagaactttc cagagatgga ttggtgcctt cgggaactcg 1020 aacacaggtg ctgcatggct gtcgtcagct cgtgtcgtga gatgttgggt taagtcccgc 1080 aacgagcgca acccttgtcc ttagttgcca gcacgtaatg gtgggaactc taaggagacc 1140 gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaagt catcatggcc cttacggcca 1200 gggctacaca cgtactacaa tggtagggac agagggctgc aagccggcga cggtaagcca 1260 atcccagaaa ccctatctca gtccggattg gagtctgcaa ctcgactcca tgaagtcgga 1320 atcgctagta atcgcagatc agcattgctg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca 1380 ccgcccgtca caccatggga gtttgttgca ccagaagcag gtagcttaac cttcgggagg 1440 gcgcttgcca cggtgtggcc gatgactgg 1469 <210> 2 <211> 1439 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Lysinibacillus sphaericus <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. (1439) <223> 16s RNA full sequence <400> 2 tggctcagga cgaacgctgg cggcgtgcct aatacatgca agtcgagcga acagataagg 60 agcttgctcc tttgacgtta gcggcggacg ggtgagtaac acgtgggcaa cctaccctat 120 agtttgggat aactccggga aaccggggct aataccgaat aacttgttgt ctctcatgag 180 acaattctaa aagacggttt cggctgtcgc tataggatgg gcccgcggcg cattagctag 240 ttggtgaggt aacggctcac caaggcgacg atgcgtagcc gacctgagag ggtgatcggc 300 cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg cagcagtagg gaatcttcca 360 caatgggcga aagcctgatg gagcaacgcc gcgtgagtga agaaggattt cggttcgtaa 420 aactctgttg taagggaaga acaagtacag tagtaactgg ctgtaccttg acggtacctt 480 attagaaagc cacggctaac tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg tggcaagcgt 540 tgtccggaat tattgggcgt aaagcgcgcg caggtggttt cttaagtctg atgtgaaagc 600 ccacggctg accgtggagg gtcattggaa actgggagac ttgagtgcag aagaggatag 660 tggaattcca agtgtagcgg tgaaatgcgt agagatttgg aggaacacca gtggcgaagg 720 cgactatctg gtctgtaact gacactgagg cgcgaaagcg tggggagcaa acaggattag 780 ataccctggt agtccacgcc gtaaacgatg agtgctaagt gttagggggt ttccgcccct 840 tagtgctgca gctaacgcat taagcactcc gcctggggag tacggtcgca agactgaaac 900 tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac 960 gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatccc attgaccact gtagagatac agttttccct 1020 tcggggacaa cggtgacagg tggtgcatgg ttgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg 1080 gttaagtccc gcaacgagcg caacccttga tcttagttgc catcatttag ttgggcactc 1140 taaggtgact gccggtgaca aaccggagga aggtggggat gacgtcaaat catcatgccc 1200 cttatgacct gggctacaca cgtgctacaa tggacgatac aaacggttgc caactcgcga 1260 gagggagcta atccgataaa gtcgttctca gttcggattg taggctgcaa ctcgcctaca 1320 tgaagccgga atcgctagta atcgcggatc agcatgccgc ggtgaatacg ttcccgggcc 1380 ttgtacacac cgcccgtcac accacgagag tttgtaacac ccgaagtcgg tgaggtaac 1439 <210> 3 <211> 1409 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Gordonia cholesterolivorans <220> <221> rRNA &Lt; 222 > (1) .. (1409) <223> 16s RNA full sequence <400> 3 tggctcagga cgaacgctgg cggcgtgctt aacacatgca agtcgaacgg aaaggcccag 60 cttgctgggt actcgagtgg cgaacgggtg agtaacacgt gggtgatctg ccctggactc 120 tgggataagc ctgggaaact gggtctaata ccggatagga ccactgattg catggttggt 180 ggtggaaagc ttttgcggtt caggatgggc ccgcggccta tcagcttgtt ggtggggtaa 240 tggcctacca aggcgacgac gggtagccga cctgagaggg tgatcggcca cactgggact 300 gagacacggc ccagactcct acgggaggca gcagtgggga atattgcaca atgggcgcaa 360 gcctgatgca gcgacgccgc gtgagggatg acggccttcg ggttgtaaac ctctttcgct 420 agggacgaag cgtaagtgac ggtacctgga gaagaagcac cggccaacta cgtgccagca 480 gccgcggtaa tacgtagggt gcgagcgttg tccggaatta ctgggcgtaa agagctcgta 540 ggcggtttgt cgcgtcgtct gtgaaattct gcaactcaat tgcaggcgtg caggcgatac 600 gggcagactt gagtactaca ggggagactg gaattcctgg tgtagcggtg aaatgcgcag 660 atatcaggag gaacaccggt ggcgaaggcg ggtctctggg tagtaactga cgctgaggag 720 cgaaagcgtg gggagcgaac aggattagat accctggtag tccacgccgt aaacggtggg 780 tactaggtgt ggggctcatt tcacgagttc cgtgccgtag ctaacgcatt aagtaccccg 840 cctggggagt acggccgcaa ggctaaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg 900 gcggagcatg tggattaatt cgatgcaacg cgaagaacct tacctgggtt tgacatacac 960 cagaaagccg tagagatacg gccccccttg tggttggtgt acaggtggtg catggctgtc 1020 gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttgtcctgt 1080 attgccagcg ggttatgccg gggacttgca ggagactgcc ggggtcaact cggaggaagg 1140 tggggatgac gtcaagtcat catgcccctt atgtccaggg cttcacacat gctacaatgg 1200 cgcgtacaga gggctgcgag accgtgaggt ggagcgaatc ccttaaagcg cgtctcagtt 1260 cggattgggg tctgcaactc gaccccatga agtcggagtc gctagtaatc gcagatcagc 1320 aacgctgcgg tgaatacgtt cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacgt catgaaagtc 1380 ggtaacaccc gaagccggtg gcctaaccc 1409

Claims (9)

테트라메틸암모늄 하이드록사이드(tetramethylammonium hydroxide; TMAH)의 분해능이 있는 고르도니아 콜레스테로리보란스 HTS-S2 (Gordonia cholesterolivorans HTS-S2) (KCTC13663BP) 균주.A strain Gordonia cholesterolivorans HTS-S2 (KCTC13663BP) with the ability to degrade tetramethylammonium hydroxide (TMAH). 청구항 1의 균주를 포함하고, 라이시니바실러스 스패리커스 HTS-S3 (Lysinibacillus sphaericus HTS-S3) (KCTC13664BP) 및 스테노트로포모나스 말토필리아 HTS-S1 (Stenotrophomonas maltophilia HTS-S1) (KCTC13662BP) 균주는 포함하지 않는 TMAH 분해용 조성물.Including a strain of claim 1, Lai shinny Bacillus spare Li coarse HTS-S3 (Lysinibacillus sphaericus HTS- S3) (KCTC13664BP) and a stacking notes Pomona's malto pilriah HTS-S1 (Stenotrophomonas maltophilia HTS- S1) (KCTC13662BP) strains &Lt; / RTI &gt; 청구항 2에 있어서, 아시네토박터 균주 IBN-H6(Acinetobacter sp. IBN-H6; KCTC 10809BP), 아시네토박터 속 IBN-H7(Acinetobacter sp. IBN-H7; KCTC 0836BP), 클루베마이세스 델피네시스 IBN-H1(Kluvermyces delphenisis IBN-H1; KCTC 0834BP), 바실러스 세레우스 IBN-H4(Bacillus cereus IBN-H4; KCTC 0835BP), 마이코박테리움 종 SMIC-1(Mycobacterium sp. SMIC-1 KCTC 10947 BP) 및 메틸로박테리움 엑스토쿠엔스 SMIC-1(Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 균주를 더 포함하는 TMAH 분해용 조성물.The method according to claim 2, Acinetobacter genus Strain IBN-H6 (Acinetobacter sp IBN- H6;. KCTC 10809BP), Acinetobacter genus IBN-H7 (Acinetobacter sp IBN- H7;. KCTC 0836BP), Clube My process Delphi four cis IBN-H1 (Kluvermyces delphenisis IBN- H1; KCTC 0834BP), Bacillus cereus IBN-H4 (Bacillus cereus IBN- H4;. KCTC 0835BP), Mycobacterium species SMIC-1 (Mycobacterium sp SMIC- 1 KCTC 10947 BP) and a bacterium of methyl Solarium X Toku Enschede SMIC-1 ( Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP). &Lt; / RTI &gt; 청구항 2의 TMAH 분해용 조성물을 포함하는 다공성 담체.A porous carrier comprising the TMAH decomposition composition of claim 2. 청구항 4에 있어서, 상기 담체는 육면체 형태의 폴리우레탄 발포체인 다공성 담체.The porous carrier according to claim 4, wherein the carrier is a hexahedral polyurethane foam. TMAH를 포함하는 폐수를 청구항 1의 균주, 청구항 2 또는 3의 조성물, 또는 청구항 4 또는 5의 다공성 담체와 접촉시키는 것을 포함하는 미생물학적 수처리 방법.A method of microbial water treatment comprising contacting wastewater comprising TMAH with the strain of claim 1, the composition of claim 2 or 3, or the porous carrier of claim 4 or 5. 청구항 6에 있어서, 상기 담체는 아시네토박터 균주 IBN-H6(Acinetobacter sp. IBN-H6; KCTC 10809BP), 아시네토박터 속 IBN-H7(Acinetobacter sp. IBN-H7; KCTC 0836BP), 클루베마이세스 델피네시스 IBN-H1(Kluvermyces delphenisis IBN-H1; KCTC 0834BP), 바실러스 세레우스 IBN-H4(Bacillus cereus IBN-H4; KCTC 0835BP), 마이코박테리움 종 SMIC-1(Mycobacterium sp. SMIC-1 KCTC 10947 BP) 및 메틸로박테리움 엑스토쿠엔스 SMIC-1(Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 균주를 더 포함하는 미생물학적 수처리 방법.According to claim 6, wherein said carrier is in Acinetobacter Strain IBN-H6 (Acinetobacter sp IBN- H6;. KCTC 10809BP), Acinetobacter genus IBN-H7 (Acinetobacter sp IBN- H7;. KCTC 0836BP), Clube My process Delphi four cis IBN-H1 (Kluvermyces delphenisis IBN- H1; KCTC 0834BP), Bacillus cereus IBN-H4 (Bacillus cereus IBN- H4;. KCTC 0835BP), Mycobacterium species SMIC-1 (Mycobacterium sp SMIC- 1 KCTC 10947 BP) and a bacterium of methyl Solarium X Toku Enschede SMIC-1 ( Methylobacterium extorquens SMIC-1 KCTC 10946 BP). &Lt; / RTI &gt; 청구항 6에 있어서, 호기성 조건으로 15℃ 내지 42℃에서 수행되는 미생물학적 수처리 방법.7. The microbial water treatment method according to claim 6, wherein the microbial water treatment is carried out under aerobic conditions at 15 캜 to 42 캜. 청구항 8에 있어서, 유입 폐수의 TMAH는 4 내지 7 g/L이고, 반응조의 pH를 5-8 범위로 조정하며, 잔류시간 24-120시간의 조건으로 연속 운전하는 것을 특징으로 하는 미생물학적 수처리 방법.The microbial water treatment method according to claim 8, wherein the TMAH of the influent wastewater is 4 to 7 g / L, the pH of the reaction tank is adjusted to a range of 5-8, and the operation is continued under the condition of a residence time of 24-120 hours .
KR1020180155989A 2018-12-06 2018-12-06 Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof KR101971265B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180155989A KR101971265B1 (en) 2018-12-06 2018-12-06 Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180155989A KR101971265B1 (en) 2018-12-06 2018-12-06 Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR101971265B1 true KR101971265B1 (en) 2019-04-23

Family

ID=66285299

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180155989A KR101971265B1 (en) 2018-12-06 2018-12-06 Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101971265B1 (en)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020009059A (en) * 2000-07-22 2002-02-01 구본탁 A Novel Bacillus cereus IBN-H4 for Decomposing TMAH, and Method for Waste-water Treatment using the Strain
KR20020009060A (en) 2000-07-22 2002-02-01 구본탁 A Novel Acinetobacter sp. IBN-H7 for Decomposing TMAH, and Method for Waste-water Treatment using the Strain
JP2004121068A (en) * 2002-10-01 2004-04-22 Gate:Kk New microorganism, cyclic hydrocarbon-degrading agent containing the same and method for treating waste oil with the degrading agent
KR20150032149A (en) * 2013-09-17 2015-03-25 리더만 앤드 어소시에이츠 컴퍼티 리미티드 Method and device for processing waste water containing tmah and ammonium nitrogen
CN105368737A (en) * 2015-09-21 2016-03-02 中国海洋石油总公司 Bacterial strain for treating high concentrated organic wastewater, microorganism bacterium agent and application thereof

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020009059A (en) * 2000-07-22 2002-02-01 구본탁 A Novel Bacillus cereus IBN-H4 for Decomposing TMAH, and Method for Waste-water Treatment using the Strain
KR20020009060A (en) 2000-07-22 2002-02-01 구본탁 A Novel Acinetobacter sp. IBN-H7 for Decomposing TMAH, and Method for Waste-water Treatment using the Strain
JP2004121068A (en) * 2002-10-01 2004-04-22 Gate:Kk New microorganism, cyclic hydrocarbon-degrading agent containing the same and method for treating waste oil with the degrading agent
KR20150032149A (en) * 2013-09-17 2015-03-25 리더만 앤드 어소시에이츠 컴퍼티 리미티드 Method and device for processing waste water containing tmah and ammonium nitrogen
CN105368737A (en) * 2015-09-21 2016-03-02 中国海洋石油总公司 Bacterial strain for treating high concentrated organic wastewater, microorganism bacterium agent and application thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Keiji Hirano, et al., An Efficient Treatment Technique for TMAH Wastewater by Catalytic Oxidation, IEEE TRANSACTIONS ON SEMICONDUCTOR MANUFACTURING, VOL. 14, NO. 3, AUGUST 2001, pp. 202-206

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103045507B (en) Bacteria separation method for efficiently degrading high molecular weight polycyclic aromatic hydrocarbons and application thereof
KR101787401B1 (en) Mixed strain having excellent abillity of removing organic matter and nitrogrn, method and apparatus for treating dye wastewater using the same
CN112625942B (en) Aerobic denitrifying bacterium and application thereof
CN111733113B (en) COD (chemical oxygen demand) degrading strain and application thereof
CN113215033B (en) Sulfonamide antibiotic degrading bacteria and application thereof
CN110283741A (en) One plant of rose bacillus and its application with efficient degradation polycyclic aromatic hydrocarbon function
US20070099286A1 (en) Novel radiation-resistant microorganism
KR20140119856A (en) A novel microorganism Rhodococcus pyridinovorans EDB2 degrading aromatic compounds
Taşkan et al. New quorum quenching bacteria for controlling biofilm thickness in the membrane aerated biofilm reactor
KR101971263B1 (en) Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof
JP3432214B2 (en) Algae treatment
KR101971265B1 (en) Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof
KR101971264B1 (en) Strain for decomposing tetramethylammonium hydroxide and method for water treatment using thereof
JP4707251B2 (en) Activated sludge and wastewater treatment method
Terahara et al. Isolation and characterization of Cr (VI)-reducing Actinomycetes from estuarine sediments
CN108046555B (en) Preparation method and application of bacillus altitudinis for repairing bottom sediment pollution
JP3861126B2 (en) Steroid skeleton-containing compound-degrading bacteria
EP1454980A2 (en) Female sex hormone degrading bacteria and use thereof
Grekova-Vasileva et al. Isolation and characterisation of microbial strain AZO29 capable of azo dye decolourization
JP4578879B2 (en) Bisphenol A-degrading bacteria and uses thereof
KR102652220B1 (en) Novel Shinella granuli CK-4 strain with high capability of 1,4-dioxane decomposition and method for treating 1,4-dioxane-containing wastewater using the same
Zaytseva et al. Nonylphenol biodegradation by the bacterium Raoultella planticola strain F8 isolated from the sediment of the Gulf of Finland, the Baltic Sea
US20230357064A1 (en) Enzyme booster technology for advanced decontamination of petroleum hydrocarbons
CN114231439B (en) Microbial preparation for degrading oil in high-salinity water
CN115029275B (en) Chlorobenzene degrading bacterium and application thereof

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant