KR101917132B1 - Composition comprising extract of lindera glauca blume for preventing or treating neurodegenerative disease - Google Patents
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- A23V2200/322—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the nervous system or on mental function
Abstract
본 발명의 일 실시예는 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.One embodiment of the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating degenerative neurological diseases comprising an extract of Lindera glauca Blume as an active ingredient.
Description
본 발명은 산호초 추출물을 유효성분으로 함유하는 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing or treating degenerative neurological diseases containing an extract of coral reefs as an active ingredient.
최근 생활환경과 식생활 패턴의 변화 등으로 현대인들은 생체조직의 노화를 비롯한 퇴행성 신경질환에 관심이 커지고 있다. 특히, 급속한 노령 인구의 증가에 따라, 뇌, 척추, 말초신경의 손상을 포함한 퇴행성 신경질환이 점차 증가하고 있는 추세이다. 퇴행성 신경질환은 허혈에 기인한 신경손상 및 활성산소에 의한 신경손상과 관련된 질환을 포함한다.Recent changes in living environment and eating patterns have caused modern people to be interested in degenerative neurological diseases including aging of living tissues. In particular, with the rapid increase in the elderly population, degenerative neurological diseases including brain, spinal, and peripheral nerve damage are increasing. Degenerative nerve diseases include diseases related to nerve injury caused by ischemia and nerve injury caused by reactive oxygen species.
신경세포는 발생 및 시냅스를 재구성하는 과정에서 끊임없이 세포사멸하며, 스트레스와 세포독성 약물에 의한 세포사멸이 퇴행성 신경질환의 주요 요인이 된다. 산화적 스트레스는 퇴행성 신경질환의 유발원인과 많은 연관관계를 가진 것으로 알려져 있으며, 최근 연구에 따르면 만성적인 스트레스 및 산화적 스트레스는 시상하부-뇌하수체-부신피질계, 해마, 선조체, 흑질 그리고 전뇌피질 부위에서 산화적 스트레스를 유발하여 세포사멸을 증가시키고 뉴런 및 성장인자를 감소시켜 퇴행성 신경질환을 초래하는 것으로 보고된 바 있다. Neurons undergo constant cell death in the process of reconstitution and synapse reconstitution, and stress and apoptotic cell death are major contributors to degenerative neurological diseases. Oxidative stress is known to be related to the cause of degenerative neurological diseases. Recent studies have shown that chronic stress and oxidative stress are related to hypothalamic-pituitary-adrenal hyperplasia, hippocampus, striatum, Induced oxidative stress, leading to increased apoptosis and decreased neuronal and growth factors, leading to degenerative neuropathy.
산소에서 유리되는 자유라디칼은 조직 손상의 주요 원인으로 알려져 있다. 신경독성과 관련된 산화적 라디칼은 과산화수소, 과산화수소 음이온, 수산화기 등이 있으며, 과산화수소가 중추신경계의 세포사멸 유발에 있어서 가장 중요한 물질로 손 꼽힌다. Free radicals liberated from oxygen are known to be the major cause of tissue damage. Oxidative radicals associated with neurotoxicity include hydrogen peroxide, hydrogen peroxide anion, and hydroxyl group, and hydrogen peroxide is considered to be the most important substance in inducing apoptosis of the central nervous system.
뇌신경세포에서 활성산소종(Reactive Oxygen Species)은 산화적 스트레스에 의해 생성되고, 이는 미토콘드리아에서의 시토크롬 C의 유리와 카스파아제-3 활성화를 일으켜 세포사멸을 유발한다. 동시에 활성산소종은 글루타메이트, 특히 NMDA 수용체를 활성화하여 메타보트로피칼 케스케이드(metabotrophical cascade)에 의한 Ca2+ 이온의 증가를 야기하고, 세포내 Ca2+의 증가는 카스파아제-2를 활성화하여 DNA를 손상시킨다. In neuronal cells, reactive oxygen species (Reactive Oxygen Species) are produced by oxidative stress, which causes activation of caspase-3 and cytochrome C in mitochondria, leading to apoptosis. At the same time, reactive oxygen species activate glutamate, particularly NMDA receptors, resulting in an increase of Ca 2+ ions by metabotrophical cascade, and increase of intracellular Ca 2+ activates caspase- .
세계적으로 고령인구의 비중은 점차 증가하고 있다. 우리나라도 2010년 기준 65세 이상 인구의 비율이 11%로 상승하였고, 2018년에는 고령사회, 2026년에는 초고령 사회로 접어들 것으로 예견되며, 고령인구의 노인성 질병의 해결이 시급한 사회적 문제로 대두되고 있다.The proportion of the elderly population worldwide is increasing gradually. In Korea, the proportion of the population aged 65 or over has risen to 11% in 2010, and it is expected that the aged society will become an aged society in 2018 and the aged society in 2026, .
특히, 노인성 치매질환의 약 절반을 차지하는 알츠하이머병은 현재 효과적인 치료방법과 예방방법이 없으며, 고령화 사회에 있어서 시급히 해결해야 할 신경질환에 해당한다. In particular, Alzheimer's disease, which accounts for about half of senile dementia diseases, currently has no effective treatment and preventive measures, and is a neurological disorder that needs urgent resolution in an aging society.
하지만, 세포 이식, 외과적 수술 등 다양한 퇴행성 신경질환 치료법은 위험요소와 부작용을 내포하며, 손상 기전의 복잡성 등으로 실질적으로 신경세포의 손상을 보호하는 치료제는 개발되지 못하고 있는 실정이다.However, a variety of degenerative neurological diseases such as cell transplantation and surgical operation have risks and side effects, and a therapeutic agent that substantially protects neuronal damage due to the complexity of damage mechanism has not been developed.
조직플라스미노겐 활성자(tissue plasminogen activator)는 FDA 공인 시판 중인 뇌허혈 치료제로서 뇌허혈을 유발시키는 혈전을 녹여 빠른 산소 및 포도당 공급을 유도하는 혈전 용해제이다. 그러나, 조직플라스미노겐 활성자는 직접적으로 신경세포를 보호하는 것이 아니기 때문에 신속한 사용이 요구되며, 과량의 사용이나 자주 사용 시에는 혈관벽이 얇아져 출혈성 뇌혈관질환을 유발할 수 있는 문제가 있다. Tissue plasminogen activator is a FDA-approved therapeutic agent for cerebral ischemia. It is a thrombolytic agent that dissolves thrombus causing cerebral ischemia and induces rapid supply of oxygen and glucose. However, the tissue plasminogen activator does not directly protect nerve cells, and therefore, it is required to be used promptly. In the case of excessive use or frequent use, the blood vessel wall becomes thin, which may lead to hemorrhagic cerebrovascular disease.
또한, MK-801은 초기의 세포 내 칼슘 유입을 효과적으로 저해하여 글루타메이트 유도 세포독성을 억제하는 것으로 알려졌으나, 임상시험 결과 부작용이 발견되어 폐기된 바 있다.In addition, MK-801 is known to effectively inhibit the initial intracellular calcium influx and thereby inhibit glutamate-induced cytotoxicity. However, side effects have been discovered and discarded as a result of clinical trials.
국내의 경우에는 다수의 천연 물질이 뇌졸중의 예방에 효과가 있는 건강식품으로 시판되고 있으나, 과학적인 검증을 거치지 않은 것이 다수이며, 건강식품 남용의 원인으로 손꼽히기도 한다. In Korea, many natural substances are marketed as health foods effective for the prevention of stroke, but many of them have not undergone scientific validation and are considered to be the cause of abuse of health food.
한편, 한의학에서 주로 사용하는 한약재들은 발병 원인 및 증상이 복합적으로 나타나는 만성, 난치성 질환의 예방 및 치료에 있어 멀티 타겟 기전에 의해 보다 근본적인 치료제로서의 가능성이 대두되고 있다.On the other hand, herbal medicines mainly used in Oriental medicine are becoming more fundamental therapeutic agents by multi-target mechanism in the prevention and treatment of chronic and intractable diseases in which causes and symptoms are complex.
또한, 이러한 한약재를 원료로 사용하는 치료제의 경우 화학 약품 사용에 따라 발생할 수 있는 다양한 부작용을 최소화할 수 있기 때문에, 현존하는 의약품 성분의 대체 소재로 주목받고 있다. In addition, therapeutic agents using such herbal medicines as raw materials are attracting attention as substitutes for existing pharmaceutical ingredients because they can minimize various side effects that may occur depending on the use of chemicals.
본 발명은 전술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 천연물 유래의 성분을 함유하여 부작용을 최소화하면서도 퇴행성 신경질환의 개선 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것이다.Disclosure of Invention Technical Problem [8] Accordingly, the present invention has been made keeping in mind the above problems occurring in the prior art, and an object of the present invention is to provide a composition containing a component derived from a natural product and having excellent adverse effects on neurodegenerative diseases.
또한, 본 발명은 상기 천연물 유래의 성분을 포함하는 퇴행성 신경질환 개선용 건강기능식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.It is another object of the present invention to provide a health functional food for the treatment of neurodegenerative degeneracy comprising the components derived from natural products.
본 발명의 일 측면에 따르면, 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 제공된다. According to one aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition for preventing or treating a degenerative neurological disease comprising an extract of Lindera glauca Blume as an active ingredient.
일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 헥산, 디클로로메탄 또는 이들의 혼합 용매로 추출될 수 있다. In one embodiment, the extract may be extracted with water, alcohol, ethyl acetate, acetone, hexane, dichloromethane or a mixed solvent thereof.
일 실시예에 있어서, 상기 알코올은 40 내지 70%(v/v) 농도의 에탄올일 수 있다. In one embodiment, the alcohol may be ethanol at a concentration of 40 to 70% (v / v).
일 실시예에 있어서, 경구적 전달, 비경구적 전달의 형태로 투여될 수 있다. In one embodiment, it can be administered in the form of oral delivery, parenteral delivery.
일 실시예에 있어서, 상기 퇴행성 신경질환은 치매(dementia), 알츠하이머 질환(Alzheimer's disease), 뇌졸증(stroke), 뇌경색(cerebral infarct), 머리외상(head trauma), 뇌동맥 경화증(cerebral arteriosclerosis), 및 파킨슨 질환(Parkinson's disease)으로 구성된 군에서 선택될 수 있다. In one embodiment, the degenerative neurological disease is selected from the group consisting of dementia, Alzheimer's disease, stroke, cerebral infarct, head trauma, cerebral arteriosclerosis, ≪ / RTI > Parkinson ' s disease.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 신경질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품이 제공된다. According to another aspect of the present invention, there is provided a health functional food for preventing or ameliorating a degenerative neurological disease comprising an extract of Lindera glauca Blume as an active ingredient.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 보호용 조성물이 제공된다. According to another aspect of the present invention, there is provided a composition for protecting a nerve cell comprising an extract of Lindera glauca Blume as an active ingredient.
본 발명의 일 측면에 따르면, 약학적 조성물 내지 건강기능식품의 일 성분으로 천연 한약재인 산호초 추출물을 사용함으로써 부작용을 최소화하면서도 퇴행성 신경질환 개선 효과를 향상시킬 수 있다.According to one aspect of the present invention, the use of a coral reef extract, which is a natural herbal medicine, as a component of a pharmaceutical composition or a health functional food can be used to minimize the side effects and improve the degenerative neuropathy improvement effect.
본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.It should be understood that the effects of the present invention are not limited to the effects described above, but include all effects that can be deduced from the description of the invention or the composition of the invention set forth in the claims.
도 1은 마우스의 기본적인 운동성 및 움직임을 관찰한 결과이다.
도 2는 Y자 미로형 시험(Y-maze test)을 통해 마우스의 단기기억을 평가한 결과이다.
도 3은 모리스 수중 미로 시험을 통해 알츠하이머 유도 마우스의 escape latency를 측정한 결과이다.
도 4는 모리스 수중 미로 시험을 통해 알츠하이머 유도 마우스의 플랫폼 체류시간을 측정한 결과이다. (a)는 베타 펩타이드 주입 이전 마우스의 체류시간을 측정한 것이고, (b)는 베타 펩타이드 주입 이후 마우스의 체류시간을 측정한 것이다.
도 5는 플랫폼에서 알츠하이머 유도 마우스가 이동한 경로를 관찰한 것이다. 실험시 탈출 플랫폼은 우측 하단의 분원(황색)에 위치하였다.Figure 1 shows the result of observing the basic motility and movement of the mouse.
FIG. 2 is a result of evaluating the short-term memory of a mouse through a Y-maze test.
FIG. 3 shows the results of measuring the escape latency of Alzheimer-induced mice through Morris water maze test.
FIG. 4 shows the result of measuring the platform retention time of the Alzheimer-induced mouse through the Morris water maze test. (a) is the measurement of the residence time of the mouse before the injection of the beta peptide, and (b) is the measurement of the residence time of the mouse after the injection of the beta peptide.
Figure 5 is a view of the pathway in which the Alzheimer-induced mouse migrated in the platform. In the experiment, the escape platform was located at the lower right branch (yellow).
본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.As used herein, the terminology used herein is intended to encompass all commonly used generic terms that may be considered while considering the functionality of the present invention, but this may vary depending upon the intent or circumstance of the skilled artisan, the emergence of new technology, and the like. Also, in certain cases, there may be a term selected arbitrarily by the applicant, in which case the meaning thereof will be described in detail in the description of the corresponding invention. Therefore, the term used in the present invention should be defined based on the meaning of the term, not on the name of a simple term, but on the entire contents of the present invention.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.Unless defined otherwise, all terms used herein, including technical or scientific terms, have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Terms such as those defined in commonly used dictionaries are to be interpreted as having a meaning consistent with the contextual meaning of the related art and are to be interpreted as either ideal or overly formal in the sense of the present application Do not.
수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.The numerical range includes numerical values defined in the above range. All numerical limitations of all the maximum numerical values given throughout this specification include all lower numerical limitations as the lower numerical limitations are explicitly stated. All the minimum numerical limitations given throughout this specification include all higher numerical limitations as the higher numerical limitations are explicitly stated. All numerical limitations given throughout this specification will include any better numerical range within a broader numerical range, as narrower numerical limitations are explicitly stated.
이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail, but it should be apparent that the present invention is not limited by the following examples.
본 발명의 일 측면에 따른 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함할 수 있다.A pharmaceutical composition for preventing or treating degenerative neurological disease according to one aspect of the present invention may include a coral reef ( Lindera glauca Blume ) extract as an active ingredient.
본 발명자들은 신경세포 보호 활성을 갖는 우수한 식물 생약을 발굴하기 위해, 다양한 생약 원료에 대한 추출 방법을 구체화하였으며 신경세포 보호 활성이 극대화된 상기 신경세포 보호용 조성물을 개발하였다. The inventors of the present invention have embodied an extraction method for various herbal medicine raw materials and developed a composition for protecting the nerve cell that maximizes the nerve cell protection activity in order to discover excellent plant herbal medicine having nerve cell protective activity.
상기 “산호초(Lindera glauca Blume)"는 녹나무과(Lauraceae)의 식물로서 '연수목, 또는 백동백나무'로도 호칭된다. 상기 산호초는 주로 중부 이남 산 50 내지 1,100m 고지의 기슭 및 바닷가 양지바른 곳에 서식한다. 상기 산호초는 잎과 열매를 약용부위로 사용할 수 있다. 상기 산호초의 열매는 관절통, 근육통, 두통, 소화 불량, 산후통 등의 치료에 사용되며, 잎은 생즙으로 타박상, 골절, 또는 상처에 사용되어 왔다. The above-mentioned " Lindera glauca Blume " is a plant of the genus Lauraceae and is also referred to as " softwood or cauliflower tree ". The coral reef mainly lives in the shores of 50 to 1,100 m The coral can be used for treating medicinal use of leaves and fruits. The fruits of the coral are used for treating arthralgia, muscular pain, headache, dyspepsia, and post-traumatic pain. Leaves are used for bruising, fracture, or wound come.
그러나, 상기 산호초의 알츠하이머 질환, 파킨슨 질환과 같은 퇴행성 신경질환의 개선 효과와 관련한 작용 기전이나 효능은 현재까지 알려진 바 없으며, 본 발명자들은 상기 산호초 추출물의 신경세포 보호 효과를 규명하고자 하였다. However, the action mechanism and the efficacy related to the improvement effect of the degenerative neurological diseases such as Alzheimer's disease and Parkinson's disease of the coral reef are not known to date, and the present inventors sought to examine the protective effect of the coral extracts on the nerve cells.
상기 산호초 추출물은 6-OHDA(6-hydroxydopamine), LPS(lipopolysaccharide) 아밀로이드-베타(amyloid-β) 등의 신경독성 물질로부터 세포를 보호하여 퇴행성 신경질환을 효과적으로 완화 또는 개선할 수 있다.The coral root extract can effectively mitigate or ameliorate degenerative neurological diseases by protecting cells from neurotoxic substances such as 6-OHDA (6-hydroxydopamine) and LPS (lipopolysaccharide) amyloid-beta.
상기 “추출물”은 용매와 추출재료를 특정 조건하에서 접촉시킴으로써 추출재료에 함유된 유효성분이 전이된 용매를 지칭하는 것으로, 상기 추출물은 산호초에 대한 추출 공정에 의해 원료 내의 유효 성분을 포함할 수 있다. The " extract " refers to a solvent in which an effective ingredient contained in an extracting material is transferred by contacting a solvent and an extracting material under specific conditions. The extract may contain an active ingredient in the raw material by an extraction process on a coral reef.
상기 “퇴행성 신경질환(neurodegenerative disease)”은 나이가 들어감에 따라 발생하는 신경퇴행성 질환 중, 뇌에서 발생하는 질환을 의미한다. 현재까지 발병 원인이 명확하게 규명된 것은 아니지만, 뇌와 척수의 특정 뇌세포군이 서서히 기능을 상실하고, 뇌신경계의 정보전달에 핵심적인 역할을 하는 뇌신경세포의 사멸, 뇌신경세포 간의 정보를 전달하는 시냅스의 형성이나 기능상 문제, 뇌신경 전위의 이상적 증감 등에 의해 야기되는 것으로 보고된다. The term " neurodegenerative disease " refers to a disease occurring in the brain, among neurodegenerative diseases caused by age. Although the cause of the disease has not been clearly elucidated to date, the brain and spinal cord specific brain cell groups gradually lose their function, and the death of neuronal cells, which play a key role in the transmission of information in the brain nervous system, , The formation of functional or functional problems, and the ideal increase and decrease of brain nerve transposition.
상기 퇴행성 신경질환은 신경세포의 점진적인 구조적, 기능적인 손실로 인해 운동 및 감각기능의 손상, 기억, 학습, 연산 추리 등의 고차원적인 기능이 저해 또는 손실되는 포괄적인 병태를 의미할 수 있다. 상기 퇴행성 신경질환은 신경계의 특정부위를 주로 침범하여 치매, 추체외로 이상, 소뇌 이상, 감각 장애, 운동 장애 등의 증상을 동반하며, 동시에 여러 부위가 침범되어 복합적으로 나타날 수 있다. The degenerative neurological disease may refer to a comprehensive condition in which the progressive structural and functional loss of neurons impairs or loses high-order functions such as impairment of motor and sensory function, memory, learning, and computational inference. The degenerative neurological disease mainly involves a specific part of the nervous system and may be accompanied by symptoms such as dementia, extrapyramidal abnormality, cerebellar abnormality, sensory disorder, and movement disorder, and at the same time, various sites may be involved and appear complex.
상기 퇴행성 신경질환은 상기 퇴행성 신경질환은 치매(dementia), 알츠하이머 질환(Alzheimer's disease), 뇌졸증(stroke), 뇌경색(cerebral infarct), 머리외상(head trauma), 뇌동맥 경화증(cerebral arteriosclerosis), 및 파킨슨 질환(Parkinson's disease)일 수 있으나, 신경세포의 손상에 의해 발생되는 질환 또는 병태라면 특별히 제한되지 않는다. The degenerative neurological disease is characterized in that the degenerative neurological disease is selected from the group consisting of dementia, Alzheimer's disease, stroke, cerebral infarct, head trauma, cerebral arteriosclerosis, (Parkinson ' s disease), but is not particularly limited as long as it is a disease or condition caused by damage to nerve cells.
상기 “예방”은 동물의 병리학적 세포의 발생 또는 세포의 손상, 소실의 정도의 감소를 의미한다. 예방은 완전할 수 있으며 또는 부분적일 수도 있다. 이 경우에는 개체 내의 병리학적 세포의 발생 또는 신경세포의 사멸이나 손실 등이 상기 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물을 사용 하지 않은 경우와 비교하여 감소하는 현상을 의미할 수 있다. 또한, 상기 “치료”는 퇴행성 신경질환의 하나 이상의 증상을 개선하거나, 증상의 진행을 저지하는 것을 의미하며, 통상적으로 사용되는 치료의 의미를 포괄할 수 있다. Said " prophylactic " means a reduction in the degree of pathological cell development or damage or loss of an animal. Prevention can be complete or partial. In this case, the occurrence of pathological cells or death or loss of nerve cells in an individual may be reduced as compared with the case where the composition for preventing and treating neurodegenerative diseases is not used. In addition, the above-mentioned " treatment " means ameliorating one or more symptoms of a degenerative neurological disorder, inhibiting the progress of symptoms, and may include the meaning of a commonly used treatment.
상기 산호초 추출물은 화학물질 등과 달리 천연물 유래의 물질을 그대로 이용하는 것이므로, 이의 섭취 내지 투여에 따른 치명적인 부작용의 발생을 최소화할 수 있다.Since the coral reef extract extracts natural substances derived from natural materials unlike chemical substances and the like, it is possible to minimize the occurrence of fatal side effects due to ingestion or administration thereof.
상기 추출 공정에 있어서 용매의 종류는 특별히 한정되지 않으며, 필요에 따라 다양한 용매를 사용할 수 있다. 또한, 상기 추출은 상기 용매를 사용하여 냉침, 온침, 가열 등 당해 기술 분야의 통상적인 방법이 사용될 수 있다. The kind of the solvent in the extraction step is not particularly limited, and various solvents may be used as needed. In addition, the extraction can be carried out using a conventional method in the art such as cold-rolling, warming, heating, and the like using the solvent.
일 실시예에 있어서, 상기 혼합 추출물은 물, 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 헥산, 디클로로메탄 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출될 수 있으나, 바람직하게는 40 내지 70% 농도의 에탄올을 용매로 사용할 수 있다. In one embodiment, the mixed extract may be extracted using water, alcohol, ethyl acetate, acetone, hexane, dichloromethane or a mixture thereof as a solvent. Preferably, ethanol is used as a solvent at a concentration of 40 to 70% .
상기 원료에 포함된 유효 성분은 용매의 극성에 따라 추출 비율이 상이해질 수 있으며, 상기 에탄올은 생약재의 생리 활성 물질의 추출에 있어서 선택성이 뛰어나므로 상기 에탄올 추출에 의해 최적의 신경 보호 효과가 구현될 수 있다. The extraction ratio of the active ingredient contained in the raw material may be different depending on the polarity of the solvent. Since the ethanol has excellent selectivity in the extraction of the physiologically active substance of the herbal medicine, the ethanol extract can realize the optimal neuroprotective effect .
상기 추출 용매로 에탄올을 사용하는 경우, 안정성을 높일 수 있을 뿐만 아니라, 인체에 무해하기 때문에 식품이나 의약품의 소재로서 사용하기 적합하며 안정성 확보를 위한 엄격한 공정 관리와 같은 비용 증가가 발생하지 않으므로 경제적 효과 역시 제고할 수 있다. When ethanol is used as the extraction solvent, it is not only harmful to the human body but also suitable for use as a material for foods and pharmaceuticals, and it does not cause cost increase such as strict process control for securing stability. Therefore, You can also enhance it.
또한, 물과 에탄올은 극성이 상이하여, 각 극성에 따라 추출되는 유효성분이 상이할 수 있으므로 최적의 신경 보호 효과가 구현될 수 있도록 상기 에탄올의 농도를 적절히 제어할 수 있다. 다만, 상기 에탄올은 농도가 70%(v/v) 초과이면 적정한 수율이 구현되지 않을 수 있고, 농도가 40%(v/v) 미만이면 신경 보호 효과를 나타내는 유효 성분이 충분하게 추출되지 않을 수 있으므로 상기 알코올의 농도를 상기 범위 내에서 적절히 조정할 수 있다.In addition, since water and ethanol have different polarities, the active ingredients to be extracted may be different depending on polarities, so that the concentration of ethanol can be appropriately controlled so that an optimal neuroprotective effect can be realized. However, if the concentration of ethanol is more than 70% (v / v), it may not be possible to obtain a proper yield, and if the concentration is less than 40% (v / v) Therefore, the concentration of the alcohol can be appropriately adjusted within the above range.
상기 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물은 경구적 전달, 비경구적 전달의 형태로 투여될 수 있다. The composition for the prevention and treatment of degenerative neurological diseases may be administered in the form of oral delivery or parenteral delivery.
상기 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물은 전신 또는 국소 투여할 수 있으며, 상기 투여는 경구 투여 및 비경구 투여를 포함할 수 있다. 상기 상기 신경세포 보호용 조성물이 치료제로서 투여되는 경우, 적절한 투여 형태를 제공하도록 적합한 양의 약학적으로 허용되는 비히클 또는 담체와 함께 제형화될 수 있다.The composition for preventing and treating neurodegenerative diseases may be administered systemically or topically, and the administration may include oral administration and parenteral administration. When the nerve cell protective composition is administered as a therapeutic agent, it may be formulated together with a suitable amount of a pharmaceutically acceptable vehicle or carrier to provide a suitable dosage form.
따라서, 상기 퇴행성 신경질환 예방 및 치료용 조성물은 약학 조성물의 제조에 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다 Thus, the composition for the prevention and treatment of degenerative neurological diseases may further comprise a carrier, an excipient and a diluent used in the production of the pharmaceutical composition
상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유를 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.Examples of the carrier, excipient and diluent include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, But are not limited to, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate or mineral oil.
또한, 상기 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제제화 하여 사용할 수 있다. In addition, the composition may be formulated in the form of oral, granule, tablet, capsule, suspension, emulsion, syrup, aerosol or the like, external preparation, suppository and sterilized injection solution.
상기 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 산호초 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제, 예컨대, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 또는 젤라틴 등을 혼합하여 조제할 수 있다. 상기 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제가 사용될 수도 있다.The solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules and the like, which are added to the coral extracts and fractions thereof with at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose, lactose , Or gelatin. In addition to the above excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may also be used.
상기 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 사용될 수 있으며, 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. Examples of the liquid preparation for oral administration include suspensions, solutions, emulsions, syrups, and the like. In addition to water and liquid paraffin which are simple diluents, various excipients such as wetting agents, sweeteners, have.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 사용될 수 있다. 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르가 사용될 수 있다. 상기 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴이 사용될 수 있다. The preparation for parenteral administration may be a sterilized aqueous solution, a non-aqueous solvent, a suspension, an emulsion, a lyophilized preparation, or a suppository. Examples of the non-aqueous solvent and suspensions may include injectable esters such as propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil and ethyl oleate. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin, and glycerogelatin.
상기 산호초 추출물을 포함하는 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양이 대상체에 투여될 수 있다. 상기 “약제학적으로 유효한 양”은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.A pharmaceutical composition comprising the coral root extract may be administered to a subject in a pharmaceutically effective amount. The " pharmaceutically effective amount " means an amount sufficient to treat the disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to the medical treatment, and the effective dosage level will depend on the type of disease, severity, activity of the drug, Sensitivity, time of administration, route of administration and rate of excretion, duration of treatment, factors including co-administered drugs, and other factors well known in the medical arts.
상기 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 바람직하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The pharmaceutical composition may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and may be administered singly or in multiple doses. It is desirable to administer an amount that allows for all of the above factors to be maximally effected in a minimal amount without side effects, which can be readily determined by one skilled in the art.
본 발명의 다른 측면은 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 신경질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.Another aspect of the present invention provides a health functional food for preventing or ameliorating a degenerative neurological disease comprising an extract of Lindera glauca Blume as an active ingredient.
즉, 상기 조성물은 약학 조성물 뿐만 아니라 식품 조성물일 수도 있다. 이러한 경우 상기 식품은 육류, 스낵류, 낙농제품, 음료수 등을 예시할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 통상적인 건강기능식품을 모두 포함하는 개념으로 이해될 수 있다.That is, the composition may be a food composition as well as a pharmaceutical composition. In this case, the food may be meat, snacks, dairy products, beverages, and the like, but the present invention is not limited thereto, and may be understood as including all conventional health functional foods.
상기 건강기능식품은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, 상기 기능성은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미할 수 있다. The health functional food refers to a food prepared and processed by using a raw material or a component having a useful function in the human body according to the Health Functional Food Act No. 6727. The functional property refers to the nutrient Or for the purpose of obtaining a beneficial effect for health use such as physiological action.
상기 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 식품 첨가물은 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 적합성 여부를 판단할 수 있다. The above-mentioned health functional foods may contain usual food additives, and the above food additives may be added to the standards and standards of the relevant items in accordance with the General Rules for Food Additives approved by the Food and Drug Administration and the General Test Methods, It can be judged whether it is suitable or not.
상기 식품 첨가물 공전에 기재된 품목은 예컨대 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류를 들 수 있다.The food additives described in the above-mentioned Food Additives Code include chemical compounds such as ketones, glycine, potassium citrate, nicotinic acid, and cinnamic acid, natural additives such as persimmon extract, licorice extract, crystalline cellulose, high- A preservative formulation, a tar coloring agent, and the like.
상기 건강기능식품은 퇴행성 신경질환 개선을 위한 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 예컨대, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 보조 식품, 식품 첨가제 등에 사용될 수 있다. The health functional food can be used for various foods and beverages for improving the degenerative neurological diseases and can be used for various foods, beverages, gums, tea, vitamin complex, health functional supplement, food additive and the like.
상기 건강기능식품은 퇴행성 신경질환 개선을 목적으로, 전체 중량 대비 1.0 내지 10.0 중량%의 상기 조성물을 포함할 수 있다. 상기 조성물이 1.0 중량% 미만이면 퇴행성 신경질환 개선 효과가 충분히 구현되지 않을 수 있고 10.0 중량% 초과이면 제품 본연의 품질이 구현되지 않거나 비용 효율이 저하될 수 있다.The health functional food may contain the composition in an amount of 1.0 to 10.0% by weight based on the total weight of the composition for the purpose of improving the neurodegenerative disease. If the amount of the composition is less than 1.0% by weight, the effect of improving the neurodegenerative disease may not be realized sufficiently. If the composition is more than 10.0% by weight, the quality of the product may not be realized or the cost efficiency may be deteriorated.
또한, 상기 건강기능식품은 퇴행성 신경질환 개선을 목적으로 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조 및 가공될 수 있다.Further, the health functional food may be manufactured and processed into any one form selected from the group consisting of tablets, granules, powders, capsules, liquid solutions and rings for the purpose of improving degenerative neurological diseases.
구체적으로 상기 정제 형태의 건강기능식품은 산호초 추출물 또는 이의 분획물, 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와의 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수 있으며, 필요에 따라 적당한 제피제로 제피할 수도 있다.Specifically, the health functional food in the form of tablets may be prepared by granulating a coral herb extract or its fractions, excipients, binders, disintegrants, and other additives in a conventional manner, and then extruding the mixture with a lubricant or the like, And can be produced by direct compression molding. The health functional food of the tablet form may contain a mating agent and the like if necessary, and may be sieved to a suitable skin care agent if necessary.
상기 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질캅셀제는 통상의 경질캅셀에 가지 추출물 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물 또는 그의 입상물 또는 제피한 입상물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질캅셀제는 산호초 추출물 또는 이의 분획물, 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물을 젤라틴 등 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 솔비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.The hard capsule of the above-mentioned capsule type health functional food can be prepared by filling a normal hard capsule with a mixture with additives such as egg branch extract and excipient, or by granulating or granulating the granular or granular granule. The soft capsule is a coral herb extract or its Fractions, and excipients, into a capsule base such as gelatin. The soft capsule may contain a plasticizer such as glycerin or sorbitol, a coloring agent, a preservative and the like, if necessary.
상기 환 형태의 건강기능식품은 산호초 추출물 또는 이의 분획물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 적당한 제피제로 제피를, 또는 전분, 탈크 또는 적당한 물질로 환의를 입힐 수도 있다.The above-mentioned ring-type health functional food can be prepared by molding a mixture of coral herb extract or its fractions, excipient, binder, disintegrant and the like in an appropriate manner. If necessary, the preparation may be mixed with white sugar or other suitable skin care agent, Or it may turn into a suitable substance.
상기 과립형태의 건강기능식품은 산호초 추출물 또는 이의 분획물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다. The granular health functional food can be prepared into a granular form by a suitable method, such as a coral herb extract or its fractions, excipients, binders, disintegrants and the like, and may contain a flavoring agent, a mating agent and the like if necessary.
또한, 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함할 수 있다.Further, the definitions of the above excipients, binders, disintegrants, lubricants, mating agents, flavoring agents and the like are described in documents known in the art, and the functions and the like may be the same or similar.
본 발명의 또 다른 일 측면은 산호초(Lindera glauca Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 신경세포 보호용 조성물을 제공한다. 상기 산호초 추출물의 작용, 효과 및 상기 조성물의 추가 성분에 관해서는 전술한 것과 같다.Another aspect of the present invention provides a composition for protecting a nerve cell comprising an extract of Lindera glauca Blume as an active ingredient. The action and effect of the coral reef extract and the additional components of the composition are as described above.
이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 관하여 상세히 서술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings, but it should be apparent that the present invention is not limited by the following embodiments.
실시예 : 산호초 추출물 제조Example: Preparation of coral reef extract
건조 후 분쇄된 산호초를 70% 에탄올에 투입하고, 80 내지 90℃의 온도에서 3시간 동안 환류 추출한 후 여액을 분리하였다. 55 내지 65℃에서 상기 추출물을 감압농축한 후, 동결 건조시켜 생약조성물 분말 엑스 19.5g을 수득하였다. After drying, the pulverized coral reef was put into 70% ethanol, refluxed for 3 hours at a temperature of 80 to 90 ° C, and the filtrate was separated. The extract was concentrated under reduced pressure at 55 to 65 占 폚 and then lyophilized to obtain 19.5 g of crude extract powder composition.
실험예 1 : 일반 운동 활성 시험(Open field test)Experimental Example 1: Open field test
마우스의 기본적인 운동성 및 움직임을 관찰하고자 일반 운동 활성 시험을 수행하였다. General motility activity tests were performed to observe the basic motility and movement of the mice.
상기 시험을 위해 아밀로이드 베타 펩타이드 주입 동물모델(Amyloid beta1-42 infused mouse model)을 구축하였다. For this test, an amyloid beta peptide injected animal model (Amyloid beta 1-42 infused mouse model) was constructed.
C57BL/6 마우스를 졸레틸 및 럼푼이 2:1로 혼합된 마취약으로 마취한 후 뇌의 해마 CA1 영역에 Amyloid beta1-42 펩타이드를 주입하여(coordinates: -2.3mm anterior/posterior, ±1.8mm medial/lateral and -1.75mm dorsal/ventral from Bregma) 신경 손상(알츠하이머)을 유발하였다.C57BL / 6 mice were anesthetized with a 2: 1 mixture of Zoletil and Rumun, followed by injections of amyloid beta1-42 peptide in the hippocampal CA1 region of the brain (coordinates: -2.3 mm anterior / posterior, ± 1.8 mm medial / lateral and -1.75 mm dorsal / ventral from Bregma) nerve damage (Alzheimer).
상기 마우스를 흰색 아크릴 박스(50×50×50㎝)에 넣고 영상추적시스템(video tracking system, smart v.2.5.21)을 이용하여 10분 동안 행동을 관찰하였으며, Open field를 9등분하여 가운데 영역을 central zone으로 설정하였다.The mice were placed in a white acrylic box (50 × 50 × 50 cm) and observed for 10 minutes using a video tracking system (smart v.2.5.21). The open field was divided into nine equal parts Was set as the central zone.
상기 알츠하이머 유도 마우스에 Donepezil 1mg/kg, 산호초 추출물 500㎎/㎏, 1000㎎/㎏ 또는 대조군인 증류수를 각각 투여한 후, 자발운동량을 이용한 보행활동량을 측정하였다.Donepezil 1 mg / kg,
알츠하이머를 유발한 후 증류수를 투여한 동물모델의 경우, 알츠하이머를 유발하지 않은 동물모델과 비교하였을 때 유의미한 차이가 관찰되지 않았으며 약물투여로 인한 보행활동량에는 유의적 변화가 없었다(도 1).In the animal model administered with distilled water after inducing Alzheimer's disease, no significant difference was observed when compared with the animal model without Alzheimer's disease, and there was no significant change in the amount of gait activity due to drug administration (FIG. 1).
즉, 상기 결과는 약물 투여에 따라 운동기능이 저하되지 않았으며, 산호초 추출물이 보행활동량에는 영향을 미치지 않았음을 시사한다.That is, the above results suggest that the exercise did not deteriorate with the administration of the drug, and that the coral reef extract did not affect the amount of gait activity.
실험예 2 : Y자 미로형 시험(Y-maze test)Experimental Example 2: Y-maze test
단기기억형태의 순간 공간 인지력을 평가하고자 Y자 미로형 시험을 수행하였다. We conducted a Y - maze test to evaluate the temporal spatial perception of short - term memory.
상기 시험에 이용되는 기구는 세 개의 arm으로 구성되며, 각 arm의 길이는 42cm, 넓이는 3cm, 높이는 12cm이고 세 arm이 접하는 각도는 120°이다. The instrument used for this test consists of three arms, each of which has a length of 42 cm, a width of 3 cm, a height of 12 cm, and an angle of contact between the three arms is 120 °.
모든 실험 장치는 검정색의 폴리비닐 플라스틱으로 구성되며, 각 가지를 A, B, C로 정한 후 한쪽 가지에 마우스를 위치시키고 8분 동안 자유롭게 움직이게 한 후 마우스가 들어간 가지를 기록하였다. All experimental apparatus consisted of black polyvinyl plastic. Each branch was set as A, B, C, and the mouse was placed on one branch and allowed to move freely for 8 minutes.
꼬리까지 완전하게 들어간 경우에 한하여 1회 이상 기록하였다. 세 개의 서로 다른 가지에 차례로 들어간 경우(ABC, CAB, BCA; 실제 변경, actualalternation) 1점씩을 부여하였다. 변경 행동력(alternation behavior)은 3가지 모두에 순차적으로 들어가는 것으로 정의되며, 하기 수학식에 의해 계산하였다.It was recorded more than once only when the tail was completely inserted. (ABC, CAB, BCA; actual change, actual alternation) were assigned to each of three different branches. The alternation behavior is defined as sequentially entering all three, and is calculated by the following equation.
[수학식][Mathematical Expression]
변경 행동력(%) = 실제변경(actualalternation) / 최고변경(maximum alternation) × 100Change Actual Power (%) = actualalternation / maximum alternation × 100
(최고변경 : 총 입장횟수 - 2)(Highest change: total number of entries - 2)
실험 결과, 아밀로이드 베타 펩타이드를 뇌에 직접 주입(1.2㎍/mouse, i.c.v)하여 신경 손상이 유발된 음성 대조군의 변경 행동력은 양성 대조군에 비해 유의적으로 감소하였다(p<0.05). As a result, amyloid beta peptide was directly injected into the brain (1.2 μg / mouse, i.c.v), and the alteration activity of the negative control group in which the nerve injury was induced was significantly decreased (p <0.05).
반면, 산호초 추출물이 투여된 군의 자발적인 변경(spontaneous alternation)은 음성대조군에 비해 유의적으로 증가하였다(P<0.05). 자발적인 변경(Spontaneous alternation)의 증가는 학습 및 기억력이 회복을 시사한다(도 2).On the other hand, the spontaneous alternation of the group treated with the coral reef extract was significantly increased (P <0.05) compared with the negative control group. Increased spontaneous alternation suggests recovery of learning and memory (Figure 2).
반면 각 구역으로 들어가는 총 횟수를 나타내는 총 진입(total entry)은 변화되지 않았으므로 쥐의 활동성 변화에 의해 상기 자발적인 변경(spontaneous alternation)이 야기되지 않은 것으로 해석된다.On the other hand, since the total entry indicating the total number of times to enter each zone has not changed, it is interpreted that the spontaneous alteration is not caused by the change in activity of the mouse.
실험예 3 : 모리스 수중 미로 시험(Morris water maze test)Experimental Example 3: Morris water maze test
설치류의 공간학습 및 기억력(spatial learning and memory)을 측정하는 방법으로서 널리 사용되는 수동 회피 시험을 통하여, 산호초 추출물의 신경세포 보호 효과를 확인하였다. The protective effects of coral reef extracts on nerve cells were confirmed by passive avoidance tests widely used as methods for measuring spatial learning and memory of rodents.
실험은 기존의 Morris의 방법을 응용하였다. 실험 1시간 전에 마우스를 행동 관찰실에 위치시킨 후 안정시켰다.The experiment was applied to the existing Morris method. One hour before the experiment, the mice were placed in an observation room and stabilized.
maze의 제원은 지름 90cm, 높이 32.5cm이며 플랫폼(white platform)의 지름은 5cm로 구성된다. 수중미로의 주변은 비디오카메라와 연결된 컴퓨터 시스템 및 수온조절용 장치 등 공간 단서들을 일정하게 유지시켰다. maze에 물을 채우고 마우스가 플랫폼을 볼 수 없도록 물 높이의 1cm 밑에 설치하였다. Maze에는 4개의 마커(marker)를 이용하여 북동(NE), 북서(NW), 남동(SE), 남서(SW) 4 분원으로 구분하였고, maze의 한 4분원에 플랫폼을 설치하였다. The specification of maze is 90cm in diameter and 32.5cm in height, and the diameter of the platform is 5cm. The perimeter of the underwater maze kept constant clues such as computer systems connected to video cameras and water temperature control devices. The maze was filled with water and placed below 1 cm above the water level so that the mouse could not see the platform. Maze was divided into four NEs, NWs, SEs and SWs using four markers, and a platform was installed in a quadrant of maze.
Morris 수중미로 시험은 6일 동안 진행하였으며, 첫째 날에는 마우스가 물에 적응을 할 수 있도록 1분간 maze 안에서 자유로이 수영하도록 하고, 플랫폼은 설치하지 않았다. The Morris Underwater Maze test was conducted for 6 days. On the first day, the mouse was allowed to swim freely in the maze for 1 minute to adapt to the water, and the platform was not installed.
둘째 날부터 5일째 되는 날까지 마우스가 1일 4회씩 10분 간격으로 1분 동안 maze에서 수영하도록 하였다. From the second day to the fifth day, the mice were allowed to swim four times a day for 10 minutes at the maze for 1 minute.
둘째 날부터 4일간 1회의 실험은 이미 maze 안에 설치한 플랫폼에 1분 이내에 10초간 올라가 있는 쥐는 실험을 종료하였으며, 1분 이내에 플랫폼을 찾지 못하거나 플랫폼에 10초간 올라가 있지 않은 쥐는 실험종료 후 인위적으로 10초간 플랫폼에 올려둔 후 실험을 종료하였다. 이때 플랫폼의 위치는 같은 자리에 고정시켰다. 6일째 되는 날에는 플랫폼을 maze에서 제거한 후 플랫폼이 있던 분원에 쥐가 머문 시간을 측정하였다.From the second day, one experiment for four days has already been completed for 10 seconds within 1 minute on the platform installed in the maze, and the mouse has not been found within 1 minute or the platform has not been raised for 10 seconds. The experiment was terminated after placing it on the platform for 10 seconds. At this time, the position of the platform was fixed at the same position. On the 6th day, the platform was removed from the maze and the time spent on the mouse was measured at the platform where the platform was located.
Morris 수중미로 학습에서 마지막 날인 5일째 되는 날 기억검사를 시행하기 위해 플랫폼을 제거한 후 60초간 자유 수영을 실시하고 이를 Smart program을 통하여 총 시간 중 플랫폼에 있었던 4분원에 머무는 시간을 비율(%)로 측정하였다.In order to perform the memory test on the last day of Morris underwater labyrinth learning, the platform was removed and the free swimming was performed for 60 seconds. The rate of staying in the quadrant of the platform during the total time was calculated as% Respectively.
실험군 및 대조에서 아밀로이드 베타 펩타이드 주입 이전 escape latency는 시간 경과에 따라 점차 감소하였다.The escape latency before the injection of amyloid beta peptide in the experimental group and control gradually decreased with time.
반면, 아밀로이드 베타 펩타이드 주입 후, 증류수를 투여한 음성 대조군의 escape latency는 현저히 증가한 반면, 산호초 추출물을 농도 별로 투여한 실험군 및 Donepezil을 투여한 양성 대조군의 escape latency는 현저하게 증가하지 않았으며 종전과 동등한 수준으로 유지되었다(도 3).On the other hand, escape latency of the negative control group treated with distilled water significantly increased after the injection of the amyloid beta peptide, whereas the escape latency of the positive control group administered with the corn root extract and donepezil group did not significantly increase, (Fig. 3).
또한, 총 시간 중 플랫폼의 4분원에 머무는 시간의 비율(%)을 측정한 결과 아밀로이드 베타 펩타이드 주입 이전 실험군 및 대조군 간 유의적인 차이는 없었으나, 아밀로이드 베타 펩타이드 주입 후 음성 대조군의 4분원에 머무는 시간은 현저히 감소하였다. 반면, 실험군 및 양성 대조군은 음성 대조군과 비교하여 4분원에 머무는 시간이 현저히 높은 수준으로 유지되었다(도 4).As a result of measuring the percentage of time spent on the platform at the quadrant of the total time, there was no significant difference between the experimental group and the control group before the injection of the amyloid beta peptide, but the time remaining in the quadrant of the negative control group after the injection of the amyloid beta peptide Was significantly decreased. On the other hand, the experimental group and the positive control group maintained a significantly higher level of staying time at the quadrant than the negative control group (FIG. 4).
베타 펩타이드 주입 후 실험군 및 대조군의 이동 경로를 관찰한 결과, 음성 대조군은 escape 플랫폼과 무관한 방향으로 이동하였으나, 실험군 및 양성 대조군의 기억력은 높은 수준으로 회복되었다(도 5).As a result of observing the migration route of the experimental group and the control group after the injection of the beta peptide, the negative control group migrated in a direction not related to the escape platform, but the memory of the experimental group and the positive control group recovered to a high level (FIG.
상기 결과는 산호초 추출물이 아밀로이드- 펩타이드에 의한 신경세포 사멸을 유의적으로 억제하여 우수한 뇌신경세포 보호능을 가지고, 퇴행성 신경질환을 효과적으로 완화 또는 개선시킬 수 있음을 시사한다. These results suggest that coral root extract significantly inhibits amyloid-peptide-induced neuronal cell death and has excellent neuroprotective ability and can effectively alleviate or improve neurodegenerative diseases.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.It will be understood by those skilled in the art that the foregoing description of the present invention is for illustrative purposes only and that those of ordinary skill in the art can readily understand that various changes and modifications may be made without departing from the spirit or essential characteristics of the present invention. will be. It is therefore to be understood that the above-described embodiments are illustrative in all aspects and not restrictive. For example, each component described as a single entity may be distributed and implemented, and components described as being distributed may also be implemented in a combined form.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is defined by the appended claims, and all changes or modifications derived from the meaning and scope of the claims and their equivalents should be construed as being included within the scope of the present invention.
Claims (7)
상기 산호초 추출물은 40 내지 70%(v/v) 농도의 에탄올 추출물인 알츠하이머 질환에 의한 기억력 장애 예방 또는 치료용 약학적 조성물.An extract of Lindera glauca Blume containing as an active ingredient,
The coral herb extract is a pharmaceutical composition for preventing or treating memory disorders caused by Alzheimer's disease, which is an ethanol extract of 40 to 70% (v / v) concentration.
경구적 전달, 비경구적 전달의 형태로 투여되는 알츠하이머 질환에 의한 기억력 장애 예방 또는 치료용 약학적 조성물.The method according to claim 1,
A pharmaceutical composition for preventing or treating memory disorders caused by Alzheimer's disease administered in the form of oral delivery or parenteral delivery.
상기 산호초 추출물은 40 내지 70%(v/v) 농도의 에탄올 추출물인 알츠하이머 질환에 의한 기억력 장애 예방 또는 개선용 건강기능식품.An extract of Lindera glauca Blume containing as an active ingredient,
The coral root extract is a health functional food for preventing or ameliorating memory disorders caused by Alzheimer's disease, an ethanol extract of 40 to 70% (v / v) concentration.
상기 산호초 추출물은 40 내지 70%(v/v) 농도의 에탄올 추출물인 아밀로이드 베타 펩타이드 축적에 의한 신경세포 손상으로 인한 기억력 장애 개선용 조성물.
An extract of Lindera glauca Blume containing as an active ingredient,
Wherein the coral root extract is a composition for ameliorating a memory disorder caused by accumulation of amyloid beta peptide, which is an ethanol extract of 40 to 70% (v / v) concentration.
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