KR101807605B1 - Composition for prevention, improvement or treatment of cognitive dysfunction comprising Ficus erecta extract as effective component - Google Patents

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정수진
임혜선
김유진
김부여
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한국 한의학 연구원
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Abstract

The present invention relates to a composition for preventing, ameliorating, or treating cognitive dysfunction containing a Ficus erecta Thunb. extract as an active ingredient. More specifically, the Ficus erecta Thunb. extract of the present invention shows anti-oxidative functions, functions of inhibiting amyloid-beta coagulation, neural cell protection effects, and effects of suppressing inflammation in brain cells, thereby being useful as compositions for preventing, ameliorating, or treating cognitive dysfunction.

Description

천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition for prevention, improvement or treatment of cognitive dysfunction comprising Ficus erecta extract as effective component}[0001] The present invention relates to a composition for preventing, improving or treating a cognitive dysfunction which comprises cucumber and tree extract as an active ingredient.

본 발명은 천선과나무(Ficus erecta) 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for the treatment of cicadas and trees ( Ficus e recta ) extract as an active ingredient.

인지는 인간이 살아가면서 뇌를 이용해 생각하고, 말하고, 기억하고, 판단하고 실행하는 모든 과정을 의미한다. 따라서 '인지기능'은 주의력, 지각력, 기억력, 언어능력, 집행능력 등을 포함하며, '인지기능 장애'는 뇌의 노화 현상 중 가장 두드러진 현상으로, 학습과 기억 능력의 저하, 판단력의 저하로 특징 지워지는 생리적 현상이다. 특히, 이러한 인지기능 장애는 다양하게 나타날 수 있는데, 그 중에서 치매는 기억력을 비롯한 언어 능력, 시 지각 및 시공간 구성 능력, 실행 기능 등의 인지 기능 감퇴로 대인 관계, 직업 기능 및 일상생활 기능에 현저한 지장이 초래되는 복합적인 질환으로 진단하고 있다. 노인성 치매는 주로 알츠하이머 치매가 대부분을 차지하며, 알츠하이머 치매는 흔히 알츠하이머병(Alzheimer's disease, AD)으로 불리며 아무런 치료 노력이 없으면 서서히 죽게 되는 질병이라고 할 수 있다. 이 질병은 1906년 독일의 신경병리학자인 Alois Alzheimer에 의해 알려졌다. 우리나라는 1960년에는 전체 인구 2,500만 명 중 노인 인구가 72만 명으로 2.9%에 불과했지만 본격적인 고령화 사회가 되어 2026년 이후에는 65세 이상 고령인구가 전체 인구의 20%까지 증가할 것으로 예측되고 있다. 노인성 치매 환자의 수도 이에 비례하여 급격히 증가하는데 65세 이상의 연령대에서는 10%, 85세 이상의 경우에는 40~50% 정도가 노인성 치매에 시달리게 될 것으로 전문가들은 예측하고 있다. Cognition is the whole process of thinking, speaking, remembering, judging, and practicing using the brain as human beings live. Thus, 'cognitive function' includes attention, perception, memory, language ability and executive ability. 'Cognitive dysfunction' is the most prominent phenomenon of brain aging phenomenon. It is characterized by deterioration of learning and memory ability, It is a physiological phenomenon that is erased. In particular, such cognitive dysfunction can be manifested in various ways. Among them, dementia is caused by cognitive dysfunction such as memory capacity, language ability, temporal perception, space-time composition ability and executive function, and remarkable influence on interpersonal relationship, Of the total number of patients. Alzheimer's disease (AD) is a disease that is slowly terminated without any treatment. It is known that Alzheimer's disease (AD) is the most common form of dementia. The disease was reported by German neuropathologist Alois Alzheimer in 1906. In 1960, the number of elderly people was only 2.9% of the total population of 25 million in 1960, but it is expected to increase to 20% of the total population after 2026 since the age of 65 . Experts predict that the number of senile dementia patients will rapidly increase in proportion to the number of senile dementia, which is 10% for those aged 65 and over and 40 to 50% for those aged 85 and over.

이와 같은 노인성 치매의 일종인 알츠하이머병(Alzheimer's disease, AD)으로부터 유발되는 기억력 및 학습능력의 상실 등 인지 기능 장애는 해마와 피질에 불용성의 두 가지 단백질이 응집하여 침착되어 발병하는 것인데, 상기 두 가지 단백질의 응집은 신경세포에서 아밀로이드 베타(amyloid beta, Aβ)로 구성된 노인판(senile plaque)과 과인산화된 타우 단백질로 이루어진 신경섬유농축제(neurofibrillary tangle)가 축적되는 것이다. 수많은 노력에도 불구하고, 알츠하이머의 원인과 발명 기전은 아직도 완전하게 밝혀지지 않은 실정이다. 인구의 고령화가 가속되는 상황이므로 인지기능 또는 기억능력 저하 현상 개선을 위한 더욱 효과적인 제제(건강기능성 식품 소재 포함)의 개발 수요가 어느 때보다 높은 시기이다. 결국, 치매 발병에 대한 뇌신경 세포의 기작을 대상으로 새로운 다중 기능성 효과(multi-functional effect)를 갖는 소개 개발을 위한 연구가 필요한 실정이다.Cognitive dysfunction such as loss of memory and learning ability caused by Alzheimer's disease (AD), a kind of senile dementia of the senile dementia, occurs when two proteins insoluble in the hippocampus and cortex are aggregated and deposited, Protein aggregation is the accumulation of neurofibrillary tangles consisting of senile plaques composed of amyloid beta (Aβ) and hyperphosphorylated tau proteins in neurons. Despite numerous efforts, the cause of the Alzheimer's disease and the mechanism of the invention are still not completely understood. As population aging accelerates, demand for more effective drugs (including health-functional food ingredients) for improving cognitive function or memory capacity deterioration is higher than ever. In conclusion, there is a need for research on the development of a new multi-functional effect introducing a neuronal cell mechanism for the onset of dementia.

한편, 천선과나무는 바닷가의 산기슭에서 자라며, 높이 2∼4m이고 나무껍질은 밋밋하며 가지는 회백색이고 상처를 내면 젖 같은 즙액이 나오고, 잎은 어긋나고 달걀을 거꾸로 세운 모양의 타원형이며 가장자리가 밋밋한 것이 특징이다. 측맥은 5~6쌍이며 길이 8~17cm, 표면은 녹색이고 털이 있으며 뒷면은 연한 갈색이다. 잎자루는 길이 1~4cm이다. 꽃은 5∼6월에 피고 단성화이며, 새가지의 잎겨드랑이에 1개의 꽃이삭이 달린다. 꽃줄기 끝에 둥근 열매 같은 화낭(花囊)이 달리고 바로 밑에 3개의 포가 있다. 화낭은 지름 15mm 내외이며 안에 많은 꽃이 들어 있다. 수꽃은 5∼6개의 화피갈래조각과 3개 정도의 수술이 있고 암꽃은 3∼5개의 화피갈래조각과 1개의 암술이 있다. 화낭이 자라서 열매로 되며 지름 15∼17mm로 되고 8~9월에 흑자색으로 익으면 먹을 수 있다. 종자는 달걀 모양으로 길이 1.6mm정도이다. 천상의 선녀들이 따 먹는 과일이라는 의미로 이름지어졌다. 한국, 일본 및 중국에 분포한다. On the other hand, celestial trees and trees grow at the foot of the beach and are 2 ~ 4m high. The bark is plain, the branches are grayish white, the wasted juice comes out from the wound, the leaves are oval and the eggs are inverted and the edges are flat to be. The lateral veins are 5 to 6 pairs long and 8 to 17 cm long. The surface is green and has hairs and the back side is light brown. Petiole is 1 ~ 4cm long. Flower is bloomed in May-June, is unisex, and one flower ear is attached to the axilla of new branch. At the end of the stem of a flower, a round flower-like flower (囊 囊) runs and there are three bollocks underneath. The cocoon is about 15mm in diameter and contains many flowers inside. Male flower has 5 ~ 6 crustaceans and 3 stamens. Female flower has 3 ~ 5 crusts and 1 pistil. The flower bud grows into fruit, becomes 15 ~ 17mm in diameter, and can be eaten if it is harvested in black color from August to September. Seeds are egg-shaped and about 1.6mm long. It was named for the fruit that the heavenly females eat. It is distributed in Korea, Japan and China.

천선과나무 추출물 관련 기술의 일례로는, 중국공개특허 제104998174호에 천선과나무의 뿌리 부위인 우내장근을 포함하는 한약재 조성물을 유효성분으로 포함하는 뇌 위축증 예방, 개선 또는 치료방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1042718호에 천선과 잎 추출물을 함유하는 피부노화방지 또는 피부미백 활성을 갖는 화장료 조성물이 개시되어 있으며, 한국등록특허 제0694570호에 골다공증 반응의 주체가 되는 IL-6 및 COX-2 발현억제를 나타내는 좁은잎 천선과 추출물 및 분획물을 포함하는 골다공증의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이 개시되어 있으나, 본 발명의 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 대해 개시된 바 없다.As an example of a technique related to celestial and tree extracts, Chinese Patent Laid-Open No. 104998174 discloses a method for preventing, improving or treating brain atrophy, which comprises, as an active ingredient, a herbal medicine composition including a root of the root, Korean Patent No. 1042718 discloses a cosmetic composition having skin anti-aging or skin whitening activity, which contains celery root and leaf extract. Korean Patent Registration No. 0694570 discloses a cosmetic composition containing IL-6 and COX- 2 expression inhibition, and a composition for preventing and treating osteoporosis, which comprises an extract and a fraction. However, the composition for prevention and / or improvement of cognitive dysfunction, which comprises the celecoxib and extract of the present invention as an active ingredient, Have not been disclosed for therapeutic compositions.

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 천선과나무 추출물의 아밀로이드 베타 응집 저해, 항산화 활성, 신경세포 보호 및 뇌세포의 염증 억제 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.The present invention relates to a composition for preventing, ameliorating or treating cognitive dysfunction which comprises celery root and tree extract as an active ingredient. The present invention relates to a composition for inhibiting amyloid beta aggregation, an antioxidative activity , Neuronal cell protection, and inflammation-suppressing effect of brain cells, thereby completing the present invention.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cognitive dysfunction, comprising celery root and tree extract as an effective ingredient.

또한, 본 발명은 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food composition for preventing or ameliorating cognitive dysfunction, which contains cucumber and tree extract as active ingredients.

본 발명은 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 천선과나무 추출물이 아밀로이드 베타 응집 저해, 항산화 활성, 신경세포 보호 및 뇌세포의 염증 억제 효과가 있으므로, 인지기능 장애의 예방, 개선 또는 치료에 사용할 수 있다.The present invention relates to a composition for preventing, ameliorating or treating cognitive dysfunction which comprises celestial and tree extract as an active ingredient, wherein the celestial and tree extracts inhibit amyloid beta aggregation inhibition, antioxidant activity, nerve cell protection and inflammation suppression of brain cells It can be used for prevention, amelioration or treatment of cognitive dysfunction.

도 1은 본 발명의 천선과나무 추출물의 아밀로이드 베타 응집 저해 효능을 확인한 것으로, (A)는 천선과나무 잎 추출물, (B)는 천선과나무 가지 추출물의 아밀로이드 베타 응집 저해 효능을 확인한 것이며, 양성대조군으로 100μM의 모린(Morin) 화합물을 사용하였다.
도 2는 본 발명의 천선과나무 추출물의 항산화 활성을 확인한 것으로, (A)는 천선과나무 잎 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성을 확인한 결과이고, (B)는 천선과나무 잎 추출물의 DPPH 라디칼 소거활성을 확인한 결과이며, (C)는 천선과나무 가지 추출물의 ABTS 라디칼 소거활성을 확인한 결과이고, (D)는 천선과나무 가지 추출물의 DPPH 라디칼 소거활성을 확인한 결과이다. 양성대조군으로 비타민 C(vit. C)를 사용하였다.
도 3은 본 발명의 천선과나무 잎 추출물의 신경세포 보호 효능(CCK)을 확인한 것으로, (A)는 신경 해마 세포주에 대한 세포독성을 확인하기 위하여, 천선과나무 잎 추출물을 처리하고 세포생존률을 확인한 결과이고, (B)는 H2O2를 처리하여 신경세포 손상이 유도된 신경세포에 천선과나무 잎 추출물을 처리하여 세포보호 효능을 확인한 결과이며, (C)는 세포막 손상으로 인한 LDH 유출의 측정을 통하여 세포 생존율을 측정한 결과이다. ##, ###는 정상군에 대비하여, H2O2의 처리에 따른 신경세포의 손상에 의한 세포생존률 또는 LDH 방출이 통계적으로 유의하게 차이가 있다는 것으로, ##는 p<0.01이고, ###는 p<0.001임을 의미한다. *, **, ***는 H2O2 처리군에 대비하여, 천선과나무 잎 추출물의 처리에 의해 신경세포의 생존률 또는 LDH 방출이 통계적으로 유의하게 차이가 있다는 것으로, *는 p<0.05이고, **는 p<0.01이며, ***는 p<0.001임을 의미한다.
도 4는 본 발명의 천선과나무 잎 추출물의 처리에 따른 뇌세포 염증 억제 효능을 확인한 결과로, (A)는 미세아교 세포의 독성을 확인한 결과이고, (B)는 BV-2 세포에 염증을 유도한 후, 천선과나무 잎 추출물의 처리에 따른 NO 어세이 결과이며, (C)는 BV-2 세포에 염증을 유도한 후, 천선과나무 잎 추출물의 처리에 따른 PGE2 어세이 결과이다. ###는 정상군에 대비하여, LPS 처리에 따른 신경세포의 손상에 의해 NO(nitric oxide) 또는 PGE2 생성량이 통계적으로 유의하게 증가하였다는 것으로, p<0.001임을 의미한다. ***는 LPS 처리군에 대비하여, 천선과나무 추출물의 처리에 의해 NO(nitric oxide) 또는 PGE2 생성량이 통계적으로 유의하게 감소하였다는 것으로, ***는 p<0.001임을 의미한다.
FIG. 1 is a graph showing the inhibitory effect of the celecoxib and extract of the present invention on the amyloid beta agglutination inhibition effect, wherein (A) shows the inhibitory effect on the amyloid beta agglutination of celestial and tree leaf extracts, (B) 100 [mu] M of Morin compound was used as a control.
FIG. 2 shows the antioxidant activity of the extracts of the present invention and (A) the ABTS radical scavenging activity of celestial and tree leaf extracts, and (B) the DPPH radical scavenging activity (C) is the result of ABTS radical scavenging activity of celestial and tree branch extracts, and (D) is the result of DPPH radical scavenging activity of celestial and tree branch extracts. Vitamin C (vit. C) was used as a positive control.
FIG. 3 is a graph showing the neuronal cell protection effect (CCK) of celestial and tree leaf extracts of the present invention. To examine the cytotoxicity against neural hippocampal cell line, (A) (B) shows the result of cytoprotective effect of neurons treated with H 2 O 2 and treated with celestial and tree leaf extracts, and (C) And the cell viability was measured by measuring the cell viability. ##, ### indicates a statistically significant difference in cell survival rate or LDH release due to damage of nerve cells due to treatment with H 2 O 2 as compared to the normal group. ## is p <0.01, ### means p <0.001. *, ** and *** indicate statistically significant differences in neuronal cell survival or LDH release by treatment with celestial and tree leaf extracts compared to the H 2 O 2- treated group, p <0.05 ** indicates p < 0.01, and *** indicates p < 0.001.
FIG. 4 shows the result of examining the effect of the present invention on the inhibition of brain cell inflammation according to the treatment of celestial and tree leaf extracts of the present invention, (A) confirming toxicity of microglia, and (B) (C) is the result of PGE 2 assay after treatment with celecoxib and leaf extract after inducing inflammation in BV-2 cells. ### means that the amount of NO (nitric oxide) or PGE 2 production was statistically significantly increased by the damage of nerve cells by LPS treatment compared to the normal group, which means that p <0.001. *** means that the amount of NO (nitric oxide) or PGE 2 production was statistically decreased by treatment of celestial and tree extracts compared to the LPS treatment group, *** means p <0.001.

본 발명은 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating cognitive dysfunction, which contains celeriac and wood extract as an active ingredient.

상기 천선과나무 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조되는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:The celestial and tree extracts may be prepared by methods including, but not limited to, the following steps:

1) 천선과나무 식물에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;1) extracting celestial plants and tree plants with an extraction solvent;

2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계; 및2) filtering the extract of step 1); And

3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.3) Concentrating the filtrate obtained in step 2) under reduced pressure and drying to prepare an extract.

상기 단계 1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 에탄올 추출물이고, 더욱더 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올 초음파 추출물이지만 이에 한정하지 않는다. In step 1), the extraction solvent is preferably water, a C 1 -C 4 lower alcohol or a mixture thereof, more preferably an ethanol extract, more preferably a 70% (v / v) ethanol ultrasonic extract But is not limited thereto.

상기 제조방법에 있어서, 천선과나무의 추출은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 천선과나무 부피의 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 3~10배 첨가하는 것이다. 추출온도는 20 내지 50℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 0.5~10시간인 것이 바람직하며, 0.5~5시간이 더욱 바람직하고, 1시간이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결 건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. In the above production method, the conventional methods such as filtration, hot water extraction, immersion extraction, reflux cooling extraction, and ultrasonic extraction can be used for extraction of celestial and wood. The extraction solvent is preferably added by 1 to 20 times the volume of the dried celestial sieve and the volume of the wood, more preferably 3 to 10 times. The extraction temperature is preferably 20 to 50 DEG C, but is not limited thereto. The extraction time is preferably 0.5 to 10 hours, more preferably 0.5 to 5 hours, most preferably 1 hour, but not always limited thereto. In the above method, it is preferable to use a vacuum decompression concentrator or a vacuum rotary evaporator for the decompression concentration in step 3), but it is not limited thereto. The drying is preferably performed under reduced pressure, vacuum drying, boiling, spray drying or freeze drying, but not always limited thereto.

상기 천선과나무 추출물은 전초, 꽃, 잎, 가지, 뿌리 또는 종자의 추출물일 수 있으나, 바람직하게는 천선과나무의 잎 또는 가지 추출물이다. The celestial and tree extracts may be extensions of outposts, flowers, leaves, branches, roots or seeds, preferably celestial trees and tree leaves or egg plant extracts.

상기 인지기능 장애는 치매, 알츠하이머, 허혈성 뇌졸중, 외상선 뇌손상, 건망증, 파킨슨병, 픽(pick)병, 크루츠펠트-야곱병 및 경도 인지기능 장애 중에서 선택된 어느 하나인 것이 바람직하지만 이에 한정하지 않는다. Preferably, the cognitive dysfunction is selected from dementia, Alzheimer's disease, ischemic stroke, traumatic brain injury, amnesia, Parkinson's disease, pick disease, Kruszfeld-Jacob disease, and mild cognitive dysfunction Do not.

본 발명에서, 경도 인지기능 장애는 기억력 및 인지 기능이 연령, 교육 수준에 비해 유의하게 저하된 상태이나 생활에 지장을 초래하지는 않는 치매 전 임상 단계로 정의한다.In the present invention, the mild cognitive dysfunction is defined as the pre-dementia phase in which memory and cognitive function are significantly lowered compared to the age and education level, but do not interfere with life.

본 발명의 조성물은 상기 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있으며, 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 캡슐제, 산제, 과립제, 정제, 환제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제 및 현탁 용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로 젤라틴 등이 사용될 수 있다. 비경구 투여 시 피부 외용 또는 복강 내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사 방식을 선택하는 것이 바람직하며, 가장 바람직하게는 피부 외용으로 사용한다.The composition of the present invention may contain a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent in addition to the above-mentioned effective ingredient, and may be various oral or parenteral formulations. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid formulations for oral administration include capsules, powders, granules, tablets, pills, and the like, which may contain one or more excipients such as starch, calcium carbonate, sucrose or lactose lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate, talc, and the like may also be used. Liquid formulations for oral administration include suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like. Various excipients such as wetting agents, sweetening agents, fragrances, preservatives and the like may be included in addition to water and liquid paraffin which are commonly used simple diluents. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Examples of non-aqueous solvents and suspensions include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate, and the like. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, laurin, glycerogelatin and the like. Intraperitoneal, rectal, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine, intraperitoneal, or intracerebral injection methods are preferably selected for parenteral administration, and most preferably used for external skin application.

본 발명에 따른 약학 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효량의 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. In the present invention, "pharmaceutically effective amount" means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment, and the level of effective amount depends on the type of disease, severity, , Sensitivity to the drug, time of administration, route of administration and rate of release, duration of treatment, factors including co-administered drugs, and other factors well known in the medical arts. The composition of the present invention can be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, and can be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and can be administered singly or in multiple doses. It is important to take into account all of the above factors and to administer the amount in which the maximum effect can be obtained in a minimal amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.

본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하며, 일일 투여량은 천선과나무 추출물의 양을 기준으로 0.01~2,000mg/kg이고, 바람직하게는 30~500mg/kg이고, 더욱 바람직하게는 50~300mg/kg이며, 하루 1~6회 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 단독으로 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The dosage of the composition of the present invention varies depending on the patient's body weight, age, sex, health condition, diet, administration time, administration method, excretion rate and severity of the disease, and the daily dose is the amount , Preferably 30 to 500 mg / kg, more preferably 50 to 300 mg / kg, and may be administered 1 to 6 times a day. The composition of the present invention can be used alone or in combination with methods using surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemotherapy, and biological response modifiers.

또한, 본 발명은 천선과나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 인지기능 장애의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 항산화 활성을 갖는 것이 특징이고, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것이 바람직하지만 이에 제한하는 것은 아니다.The present invention also relates to a health functional food composition for preventing or ameliorating a cognitive dysfunction which contains cucumber and tree extract as an active ingredient. The composition is characterized by having an antioxidative activity. The composition is preferably prepared by any one of powder, granule, ring, tablet, capsule, candy, syrup and beverage, but is not limited thereto.

본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 천선과나무 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출물 또는 이의 분획물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합체 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다. When the health functional food composition of the present invention is used as a food additive, the celery and the tree extract may be directly added, used together with other food or food ingredients, and suitably used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to its intended use (prevention, health or therapeutic treatment). Generally, the composition of the present invention is added in an amount of not more than 15 parts by weight, preferably not more than 10 parts by weight, based on the raw material, when the food or beverage is produced. However, in the case of long-term intake intended for health and hygiene purposes or for the purpose of controlling health, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range. There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of foods to which the extract or its fractions can be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, dairy products including ice cream, various soups, , A drink, an alcoholic beverage, and a vitamin complex, all of which include health functional foods in a conventional sense.

본 발명의 조성물을 건강 음료로 사용할 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 텍스트린, 사이클로텐스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100g당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02~0.03g이다. 상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물은 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
When the composition of the present invention is used as a health drink, various flavors or natural carbohydrates may be added as an additional ingredient such as ordinary beverages. The above-mentioned natural carbohydrates are sugar alcohols such as monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, polysaccharides such as texturin and cyclotensitrin, and xylitol, sorbitol and erythritol. Examples of sweeteners include natural sweeteners such as tau martin and stevia extract, synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame, and the like. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 g of the composition of the present invention. In addition to the above, the composition of the present invention may further comprise various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloid concentrating agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, , A carbonating agent used in carbonated drinks, and the like. In addition, the composition of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks. These components may be used independently or in combination. Although the ratio of such additives is not critical, the composition of the present invention is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight.

이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are merely illustrative of the present invention and that the scope of the present invention is not limited thereto.

1. 추출물의 제조방법1. Method for producing extract

천선과나무 잎 및 가지는 가천대학교 생명과학과 약용식물소재은행으로부터 분양받아 사용하였다. 상기 천선과나무 잎 및 가지를 건조한 각 시료 500.0g에 대하여 70%(v/v) 에탄올 5ℓ를 가하고 초음파 추출기를 이용하여 1시간 동안 3회 초음파 추출하였다. 상기 초음파 추출액을 어드벤텍 2호(Advantec No. 2, 110mm) 여과지를 이용하여 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 냉각 콘덴서가 장착된 농축 장치로 40℃에서 감압 농축하였다. 감압 농축된 추출물의 용매를 완전히 제거하기 위하여 정제수 500㎖를 넣어 현탁시킨 후 동결건조기를 이용하여 농축하였다.
The leaves and branches of celestial trees, tree leaves, and branches were distributed from the Department of Life Science and Medicinal Plants Materials, Gachon University. To 500.0 g of each of the dried celestial leaves and branches were added 5 L of 70% (v / v) ethanol and ultrasonically extracted three times for 1 hour using an ultrasonic extractor. The supernatant extract was filtered using Advantec No. 2 (110 mm) filter paper to remove insoluble matter, and then concentrated under reduced pressure at 40 ° C with a condenser equipped with a cooling condenser. In order to completely remove the solvent of the concentrated extract, 500 ml of purified water was added to suspend it and then concentrated using a freeze dryer.

2. 아밀로이드 베타 응집 억제 효능 측정2. Measurement of amyloid beta aggregation inhibitory effect

아밀로이드 베타 응집 억제 활성의 측정은 형광 분석법을 이용하였다. 아밀로이드 베타 (Aβ1-42) 펩티드는 영하 80℃에서 보관하였으며, 측정 시 사용한 최종 농도는 100㎍/㎖로 사용하였다. 형광물질로 사용하는 티오플라빈 티(thioflavin T)는 어세이 버퍼(50mM Tris/150mM NaCl (pH 7.2), 20mM HEPES/150mM NaCl (pH 7.2), 10mM phosphate/150mM NaCl (pH 8.0))에 녹여 제조하여 2mM의 농도로 사용하였다. 시료는 어세이 버퍼(assay buffer)에 녹여 최종 농도 100㎍/㎖로 사용하였다. Aβ1-42 응집억제 정도를 측정하기 위하여 96웰 플레이트(black microplate)에 티오플라빈 티(thioflavin T) 10㎕와 Aβ1-42 85㎕를 넣은 후 일정 농도로 만든 시료 5㎕와 혼합하여 형광 분광 분석기로 측정하였다. 이때 사용한 형광 분광 분석기의 파장 값은 440nm/484nm(흡광/발광)이며, 37℃에서 20분 간격으로 총 2시간 측정하였다. 활성 비교를 위하여 양성 대조군으로 모린(morin) 화합물을 사용하였다.
The amyloid beta aggregation inhibitory activity was measured by fluorescence analysis. The amyloid beta (A [beta] 1-42 ) peptide was stored at -80 [deg.] C and the final concentration used was 100 [mu] g / ml. Thioflavin T used as a fluorescent substance was dissolved in an assay buffer (50 mM Tris / 150 mM NaCl (pH 7.2), 20 mM HEPES / 150 mM NaCl (pH 7.2), 10 mM phosphate / 150 mM NaCl And used at a concentration of 2 mM. Samples were dissolved in assay buffer and used at a final concentration of 100 μg / ml. In order to measure the degree of inhibition of Aβ 1-42 aggregation, 10 μl of thioflavin T and 85 μl of Aβ 1-42 were added to a 96-well microplate and mixed with 5 μl of a sample prepared at a constant concentration, Were measured with a spectrophotometer. The wavelength of the fluorescence spectrometer used was 440 nm / 484 nm (absorbance / light emission), and the measurement was carried out at 37 ° C for 20 minutes in total for 2 hours. Morin compounds were used as positive controls for activity comparisons.

3. 항산화 활성 분석3. Antioxidant activity analysis

(가) ABTS 자유 라디칼 소거능 측정(A) ABTS free radical scavenging ability measurement

ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)) 라디칼을 이용한 항산화 효능 측정은 ABTS+· cation decolorization assay방법을 96웰 플레이트에 맞게 수정하여 실시하였다. 7mM ABTS와 2.45mM 과황산칼륨(potassium persulfate)을 최종농도로 혼합하여 실온인 암소에서 24시간 동안 방치하여 ABTS+·를 형성시킨 후 743nm에서 0.7의 흡광도 값을 갖도록 PBS로 희석하였다. 96웰 플레이트에 ABTS+·용액과 시료를 혼합하여 실온에서 30분간 반응시킨 후, Epoch 마이크로플레이트 분광광도계(Microplate Spectophotometer)를 사용하여 743nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료의 라디칼 소거활성은 용매인 PBS를 대조군으로 하여 대조군에 대한 라디칼 소거능을 백분율로 나타냈다. 활성 비교를 위하여 양성 대조군으로 비타민 C(vit. C)를 사용하였다.
The antioxidant activity of ABTS (2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)) was measured by ABTS + cation decolorization assay. 7 mM ABTS and 2.45 mM potassium persulfate were mixed at a final concentration and incubated in a dark place at room temperature for 24 hours to form ABTS + 占 and diluted with PBS to an absorbance value of 0.7 at 743 nm. The ABTS + solution and the sample were mixed in a 96-well plate, reacted at room temperature for 30 minutes, and then absorbance was measured at 743 nm using an Epoch microplate spectrophotometer. The radical scavenging activity of each sample was expressed as a percentage of the radical scavenging activity relative to the control group using PBS as a control. Vitamin C (vit. C) was used as a positive control for activity comparison.

(나) DPPH 자유 라디칼 소거능 측정(B) Measurement of DPPH free radical scavenging ability

DPPH(1-1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼을 이용한 항산화 효능 측정은 96웰 플레이트를 이용하여 실시하였다. 96웰 플레이트에 0.15mM의 DPPH 용액과 시료를 혼합하여 실온에서 30분간 반응시킨 후, 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 처리 추출물의 항산화능은 용매인 DMSO를 대조군으로 하여 대조군에 대한 라디칼 소거능을 백분율로 나타내었다. 활성비교를 위하여 양성 대조군으로 비타민 C(vit. C)를 사용하였다.
DPPH (1-1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical was used to measure the antioxidant efficacy using a 96-well plate. 0.15 mM DPPH solution and sample were mixed in a 96-well plate, and reacted at room temperature for 30 minutes, and absorbance was measured at 517 nm. The antioxidative activity of each extract was expressed as a percentage of the radical scavenging activity of the control group using DMSO as a control. Vitamin C (vit. C) was used as a positive control for activity comparison.

4. 신경세포 보호 효능 측정4. Measurement of nerve cell protection efficacy

(가) 신경 해마 세포주에 대한 세포 독성 측정(A) Cytotoxicity measurement for neuronal hippocampal cell line

시료의 세포 독성을 알아보기 위해 Cell Counting Kit-8(CCK-8)을 제조사의 사용법에 따라 사용하였다. 96웰 플레이트에 분주한 HT22 세포주(5×103 세포/웰)에 시료를 농도별로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. CCK-8 용액 10㎕를 첨가하여 4시간 동안 배양한 후 450nm에서 흡광도를 측정하고 대조군과의 비교를 통해 상대적인 세포생존율(% of control)을 계산하였다.
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) was used according to manufacturer's instructions to determine the cytotoxicity of the samples. The HT22 cell line (5 × 10 3 cells / well), which had been divided into 96-well plates, was treated with the samples at different concentrations and cultured for 24 hours. 10 μl of CCK-8 solution was added and cultured for 4 hours. Absorbance was measured at 450 nm and relative cell viability (% of control) was calculated by comparison with the control group.

(나) 신경 세포 보호 효능 측정(B) Measurement of nerve cell protection efficacy

신경 세포 손상을 유도하기 위하여 HT22 세포에 250μM 과산화수소(H2O2)를 6시간 처리하였다. CCK 어세이를 통하여 H2O2 단독 처리군과 시료와 H2O2를 동시 처리군의 세포 생존율 변화를 비교하여 세포 보호 효능을 판단하였다. 양성 대조군으로 카베딜롤(carvedilol)을 사용하였다.
HT22 cells were treated with 250 μM hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) for 6 hours to induce neuronal damage. Through the CCK assay, H 2 O 2 The cell protection efficacy was evaluated by comparing changes in cell survival rate of the single treatment group and samples and simultaneous treatment group of H 2 O 2 . Carvedilol was used as a positive control.

(다) LDH 어세이(C) LDH assay

세포막 손상으로 인한 LDH 유출의 측정을 통하여 세포 생존율을 측정하였다. 신경 세포 손상을 유도하기 위하여 HT22 세포에 250μM의 과산화수소(H2O2)를 6시간 처리하였다. 배양 상등액을 수거한 후 LDH 기질 용액과 동량 혼합하여 실온에서 30분간 반응시킨 후, 1N의 HCl을 가하여 반응을 정지시켜, 490nm에서 흡광도를 측정하였다(experimental LDH release). Cell viability was measured by measuring LDH efflux due to cell membrane damage. HT22 cells were treated with 250 μM hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) for 6 hours to induce neuronal damage. The culture supernatant was collected, mixed with the LDH substrate solution in the same amount, and reacted at room temperature for 30 minutes. Then, the reaction was stopped by addition of 1N HCl and the absorbance was measured at 490 nm (experimental LDH release).

상등액을 제거한 후, 남은 세포에 용해(lysis) 용액을 가하여 37℃에서 45분간 반응시킨 후, 250g에서 4분간 원심분리 하였다. 상등액을 수거하여 위와 같은 방법으로 LDH 반응을 실시하여 490nm에서의 흡광도를 측정하였다(Maximum LDH release). 하기 식 (1)에 의하여 세포 생존율을 계산하였다.After removing the supernatant, the lysis solution was added to the remaining cells, followed by reaction at 37 ° C for 45 minutes, followed by centrifugation at 250 g for 4 minutes. The supernatant was collected and the LDH reaction was performed in the same manner as described above to measure the absorbance at 490 nm (Maximum LDH release). The cell viability was calculated by the following formula (1).

식 (1) Equation (1)

세포생존률(%)={[experimental LDH release(OD490)]/[Maximum LDH release(OD490)]}×100
Cell survival rate (%) = {[experimental LDH release (OD 490 )] / [maximum LDH release (OD 490 )]}

5. 뇌세포 염증 억제 효능 측정5. Measurement of inhibitory effect on brain cell inflammation

(가) 미세아교세포 독성 측정(A) Measurement of microglial cell toxicity

96웰 플레이트에 분주한 BV-2 세포주(1×104 세포/웰)에 시료를 농도별로 처리하여 24시간 동안 배양하였다. CCK-8 용액 10㎕를 첨가하여 4시간 동안 배양한 후 450nm에서 흡광도를 측정하고 대조군과의 비교를 통해 상대적인 세포생존율(% of control)을 계산하였다.
The BV-2 cell line (1 x 10 4 cells / well) dispensed into 96-well plates was treated with each sample for each concentration and cultured for 24 hours. 10 μl of CCK-8 solution was added and cultured for 4 hours. Absorbance was measured at 450 nm and relative cell viability (% of control) was calculated by comparison with the control group.

(나) NO (nitric oxide) 어세이(B) NO (nitric oxide) assay

BV-2 세포에 시료를 2시간 전처리한 후, 염증 반응을 유도하기 위하여 LPS(lipopolysaccharide, 1㎍/㎖)를 처리하고 24시간 배양한 후, 상등액을 회수하였다. 상등액과 Griess 시약(sulfanilamide:N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride=1:1)를 동량 혼합하여 5-10분 반응시킨 후, 540nm에서 흡광도를 측정하여 표준 곡선을 기준으로 NO(nitric oxide) 양을 계산하였다. 양성 대조군으로 이부프로펜(ibuprofen)을 사용하였다.
BV-2 cells were pretreated for 2 hours and then treated with LPS (lipopolysaccharide, 1 μg / ml) to induce an inflammatory reaction. After culturing for 24 hours, the supernatant was recovered. The supernatant was mixed with the same amount of Griess reagent (sulfanilamide: N- 1-napthylethylenediamine dihydrochloride = 1: 1) for 5 to 10 minutes, absorbance was measured at 540 nm, and the amount of NO (nitric oxide) was calculated based on the standard curve . Ibuprofen was used as a positive control.

(다) PGE2 (Prostaglandin E2) 어세이(C) PGE 2 (Prostaglandin E 2 ) assay

BV-2 세포에 시료를 2시간 전처리한 후, 염증 반응을 유도하기 위하여 LPS(lipopolysaccharide, 1㎍/㎖)를 처리하고 24시간 배양한 다음 상등액을 회수하였다. 세포 배양액 내의 PGE2의 양을 측정하기 위해 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 키트를 이용하여 실험을 수행하였다. 상등액을 goat anti-mouse IgG로 코팅된 96웰 플레이트에 각각 50㎕씩 첨가하고, 여기에 1차 항체 용액 50㎕와 PGE2 컨쥬게이트 50㎕씩 첨가하여 4℃에서 18시간 반응시켰다. 세척 완충용액으로 5회 세척하고 기질 용액을 200㎕씩 처리하여 90분간 반응시킨 후, 412nm에서 흡광도를 측정하였다.
BV-2 cells were pretreated for 2 hours and then treated with LPS (lipopolysaccharide, 1 μg / ml) to induce an inflammatory reaction. After 24 hours of culture, the supernatant was recovered. Experiments were performed using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit to measure the amount of PGE 2 in the cell culture. The supernatant was added to each well of a 96-well plate coated with goat anti-mouse IgG, and 50 μl of the primary antibody solution and 50 μl of PGE 2 conjugate were added thereto, followed by reaction at 4 ° C for 18 hours. After washing 5 times with washing buffer solution and treating 200 μl of the substrate solution for 90 minutes, the absorbance was measured at 412 nm.

실시예Example 1. 천선과나무 추출물의 아밀로이드 베타 응집 저해 효능 확인 1. Confirmation of amyloid beta agglutination inhibition efficacy of celestial and tree extracts

6.25, 12.5, 25, 50 및 100㎍/㎖의 천선과나무 잎 및 가지 추출물을 처리하여 아밀로이드 베타의 응집억제 정도를 확인하였다. 그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이 천선과나무 잎 추출물은 농도 의존적으로, 아밀로이드 베타 응집을 저해하였고, 50㎍/㎖의 천선과나무 잎 추출물을 처리한 경우, 아밀로이드 베타 응집 저해가 약 60%이고, 100㎍/㎖의 천선과나무 잎 추출물을 처리한 경우, 아밀로이드 베타 응집 저해가 약 60% 이상임을 확인하였다. 한편, 100㎍/㎖의 천선과나무 가지 추출물은 35~40%의 아밀로이드 베타 응집 저해를 나타냈다.
6.25, 12.5, 25, 50, and 100 ㎍ / ㎖ of celery, tree leaves and eggplant extracts were treated to inhibit aggregation of amyloid beta. As a result, as shown in FIG. 1, celestial and tree leaf extracts inhibited amyloid beta aggregation in a concentration-dependent manner. When 50 μg / ml of celestial and tree leaf extracts were treated, the inhibition of amyloid beta aggregation was about 60% , And 100 .mu.g / ml of celestial and tree leaf extracts showed that the inhibition of amyloid beta aggregation was about 60% or more. On the other hand, 100 ㎍ / ㎖ of celestial stem and tree branch extract showed 35 ~ 40% inhibition of amyloid beta aggregation.

실시예Example 2. 천선과나무 추출물의 항산화 활성 확인  2. Identification of Antioxidant Activity of Celestial and Tree Extracts

본 실시예 2에서는 천선과나무 잎 및 가지 추출물의 항산화 활성을 확인하기 위하여 ABTS 라디칼 소거활성과 DPPH 라디칼 소거활성을 확인하였으며, 도 2에 개시한 바와 같이, 천선과나무 잎 추출물은 농도 의존적으로 ABTS 라디칼 소거활성 및 DPPH 라디칼 소거 활성이 나타났고, 천선과나무 가지 추출물은 ABTS 라디칼 소거활성은 천선과나무 잎 추출물과 유사한 정도의 효과를 나타냈으나, DPPH 라디칼 소거 활성은 거의 나타나지 않았다.
In Example 2, the ABTS radical scavenging activity and the DPPH radical scavenging activity were confirmed in order to examine antioxidative activities of celestial, tree and branch extracts. As shown in Fig. 2, Radical scavenging activity and DPPH radical scavenging activity were shown. The ABTS radical scavenging activity of celestial and tree branch extracts were similar to those of celestial and tree leaf extracts, but DPPH radical scavenging activity showed little.

실시예Example 3. 천선과나무 추출물의 신경세포 보호 효능 확인 3. Confirmation of nerve cell protection efficacy of celestial and tree extracts

본 실시예 3에서는 천선과나무 추출물이 정상적인 신경 세포에 대한 세포 독성이 거의 없다는 것을 확인하였고(도 3(A)), H2O2에 의한 신경세포의 손상으로, 세포 생존률이 감소하였으며, H2O2에 의한 신경세포의 손상을 천선과나무 잎 추출물을 처리함으로써, 세포 생존률이 감소하는 것을 억제하는 효과가 있다는 것을 확인하였다(도 3(B)).In Example 3, it was confirmed that celecoxib and tree extracts showed almost no cytotoxicity to normal neurons (Fig. 3 (A)), cell viability was reduced due to H 2 O 2 -induced neuronal cell damage, and H 2 &lt; / RTI &gt; 2 inhibited the decrease in cell viability by treating celestial and tree leaf extracts (Fig. 3 (B)).

또한, H2O2에 의한 신경세포의 세포막이 손상되어 LDH 방출이 증가하였으나, 천선과나무 잎 추출물을 처리함으로써, LDH 방출의 증가를 완화하는 효과를 확인하였다(도 3(C)).
In addition, the cell membrane of H 2 O 2 -adrenergic neurons was damaged and the LDH release was increased. However, the treatment of celestial and tree leaf extracts alleviated the increase of LDH release (FIG. 3C).

실시예Example 4. 뇌세포 염증 억제 효능 확인 4. Confirmation of brain cell inflammation inhibitory efficacy

본 실시예 4에서는 뇌세포 염증 억제 효능을 확인하였으며, 그 결과 도 4에 개시한 바와 같이, 본 발명의 천선과나무 잎 추출물은 뇌세포에 대한 독성이 거의 없어 세포생존률이 100% 수준을 유지하였다. LPS를 처리하여 뇌세포에 염증을 유도함으로써, NO(nitric oxide) 생성량이 증가하였으나, 본원 발명의 천선과나무 잎 추출물을 처리한 경우, 현저하게 NO(nitric oxide) 생성량이 줄어들었으며, 특히, 100㎍/㎖의 천선과나무 잎 추출물을 처리한 경우 NO(nitric oxide) 생성량이 거의 생성되지 않았다. As shown in FIG. 4, the celecoxib and leaf extracts of the present invention showed almost no toxicity to brain cells and maintained cell survival rate of 100% . The production of NO (nitric oxide) was increased by inducing inflammation in brain cells by treating with LPS. However, when treated with the celery root and leaf extract of the present invention, the production of NO (nitric oxide) was remarkably reduced, Ug / ㎖ of celestial stem and tree leaf extract did not produce nitric oxide (NO).

또한, 세포 배양액 내의 PGE2 양을 측정한 결과, 염증이 유도된 경우 PGE2의 양이 증가한 반면에, 천선과나무 잎 추출물의 처리군은 LPS 처리군에 비해 PGE2 양이 감소한 것을 확인하였다.In addition, the results of measuring the PGE 2 content in cell culture, if the inflammation is induced on the other hand, the amount of PGE 2 increased processing group cheonseon and tree leaf extract was found that decreased PGE 2 quantity compared to the LPS-treated group.

Claims (10)

천선과나무(Ficus erecta) 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 치료용 약학 조성물.A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of dementia or Alzheimer which contains the extract of Ficus e recta as an active ingredient. 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 천선과나무 잎 추출물의 용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 치료용 약학 조성물.The pharmaceutical composition for preventing or treating dementia or Alzheimer's disease according to claim 1, wherein the solvent of the cucumber and tree leaf extract is water, a C 1 -C 4 lower alcohol or a mixture thereof. 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 것을 특징으로 하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 치료용 약학 조성물.The pharmaceutical composition for preventing or treating dementia or Alzheimer's disease according to claim 1, which further comprises a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent in addition to the active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 캡슐제, 산제, 과립제, 정제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 치료용 약학 조성물.The pharmaceutical composition for preventing or treating dementia or Alzheimer's disease according to claim 1, wherein the composition is prepared from any one of a capsule, a powder, a granule, a tablet, a suspension, an emulsion, a syrup and an aerosol. 천선과나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.A health functional food composition for preventing or ameliorating dementia or Alzheimer which contains celestial and tree leaf extract as an active ingredient. 제7항에 있어서, 상기 천선과나무 잎 추출물의 용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.The health functional food composition according to claim 7, wherein the solvent of the cucumber and tree leaf extract is water, a C 1 - C 4 lower alcohol or a mixture thereof. 제7항에 있어서, 상기 조성물은 항산화 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.The health functional food composition according to claim 7, wherein the composition has antioxidative activity. 제7항에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 치매 또는 알츠하이머의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.The health functional food composition according to claim 7, wherein the composition is prepared from one of powder, granule, ring, tablet, capsule, candy, syrup and beverage.
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