KR101706284B1 - Fumigation type compositions having antimicrobial and antifungal activity and Fumigation apparatus comprising the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 훈증 및 항균 성분으로서, 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀을 포함하는 훈증형 항균 조성물 및 이를 포함하는 훈증기를 제공한다. 본 발명의 조성물은 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀의 훈증을 통하여 그람양성균, 그람음성균 및 진균에 대하여 광범위한 항균 효과를 나타내므로, 본 발명의 조성물이 구비된 훈증기를 차량 실내 소독과 건물 실내 소독 등에 유용하게 사용할 수 있다.The present invention provides fumigant antimicrobial compositions including time oil, isothymol and chloroxylenol as fumigation and antibacterial components and fumigants containing the same. The composition of the present invention exhibits a wide range of antimicrobial effects against Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria and fungi through fumigation of time oil, isothymol and chloroxylenol. Therefore, the fumigant provided with the composition of the present invention can be sterilized Disinfection and so on.

Description

훈증형 항균 조성물 및 이를 포함하는 훈증기{Fumigation type compositions having antimicrobial and antifungal activity and Fumigation apparatus comprising the same}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a fumigation type antimicrobial composition and a fumigation method including the same,

본 발명은 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀을 포함하는 훈증형 항균 조성 및 이를 포함하는 훈증기에 관한 것이다.The present invention relates to fumigant antimicrobial compositions comprising time-oil, isothymol and chloroxylenol, and fumigants containing the same.

훈증기(훈증 소독장치)는 건물 실내 소독과 차량 실내 소독 등을 위하여 사용되고 있다. 훈증기는 물과 산화칼슘의 발열반응에 의해 발생된 고열이 훈증기 내에 구비된 항균 활성을 갖는 훈증 성분을 훈증시키는 것으로 항균 효과를 나타낸다.The fumigation (fumigation disinfection device) is used for interior disinfection of a building and disinfection of a vehicle interior. The fumigant is an antimicrobial effect that fumigates the fumigant that has the antimicrobial activity that the high heat generated by the exothermic reaction of water and calcium oxide is equipped in the fumigant.

훈증기는 항균제 등의 유효성분이 공기 중으로 증발되기 때문에 밀폐된 실내에서 더욱 효과적인 항균 효과를 나타내고, 훈증된 약재가 실내의 구석구석에서 작용하여 사람의 손이 닿지 않는 부분의 곰팡이와 해충의 박멸이 가능한 이점이 있다.Since fumigant is evaporated into the air, effective ingredients such as antimicrobial agents are more effective in airtight room, and fumigant medicines work in all corners of the room, which can kill fungi and insect pests that are not reachable by human hands .

이와 같이, 훈증기는 훈증 성분을 공중으로 증산시키는 것으로 항균 효과를 달성하므로, 훈증기에 적용 가능한 훈증 성분은 열에 의하여 공중으로 증산될 수 있어야 할 뿐만 아니라, 기체 상태로 증산 시에도 다양한 세균과 진균에 대하여 항균 활성을 나타내야 한다.
Thus, since the fumigant vaporizes the fumigant to the air, it achieves the antimicrobial effect, so that the fumigant applicable to the fumigant must be able to be released to the air by heat, Should exhibit antibacterial activity.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.Numerous papers and patent documents are referenced and cited throughout this specification. The disclosures of the cited papers and patent documents are incorporated herein by reference in their entirety to better understand the state of the art to which the present invention pertains and the content of the present invention.

대한민국 공개특허 제10-2014-0104011호 (2014.08.27)Korean Patent Publication No. 10-2014-0104011 (2014.08.27)

본 발명자들은 기체 상태로 공중으로 확산(훈증)되는 경우에도 세균과 진균에 대하여 우수한 항균 활성을 나타내는 훈증용 항균 소재를 개발하기 위하여 연구 노력하였다. 그 결과, 단독으로 훈증 시에는 미미한 항균 활성을 보인 타임오일을 이소티몰 및 클로록실레놀과 함께 훈증시키는 것으로 세균과 진균에 대한 광범위한 항균 효과를 얻을 수 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors have made efforts to develop an antimicrobial material for fumigation that exhibits excellent antimicrobial activity against bacteria and fungi even when they are diffused (fumigated) into the air in a gaseous state. As a result, it has been confirmed that a wide range of antibacterial effects against bacteria and fungi can be obtained by fuming time oil, which shows only a slight antimicrobial activity at fumigation, with isothymol and chloroxylenol, thereby completing the present invention .

따라서, 본 발명의 목적은 훈증형 항균 조성물을 제공하는 데 있다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a fuming antibacterial composition.

본 발명의 다른 목적은 훈증기를 제공하는 데 있다.
Another object of the present invention is to provide fumigant.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.Other objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention, claims and drawings.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 타임 오일(Thyme Oil), 이소티몰(Isothymol) 및 클로록실레놀(chloroxylenol, PCMX)을 포함하는 훈증형 항균 조성물을 제공한다.
According to one aspect of the present invention, there is provided a fuming antibacterial composition comprising Thyme Oil, isothymol and chloroxylenol (PCMX).

본 발명자들은 기체 상태로 공중으로 확산(훈증)되는 경우에도 세균과 진균에 대하여 우수한 항균 활성을 나타내는 훈증용 항균 소재를 개발하기 위하여 연구 노력하였다. 그 결과, 단독으로 훈증 시에는 미미한 항균 활성을 보인 타임오일을 이소티몰 및 클로록실레놀과 함께 훈증시키는 것으로 세균과 진균에 대한 광범위한 항균 효과를 얻을 수 있음을 확인하였다.The present inventors have made efforts to develop an antimicrobial material for fumigation that exhibits excellent antimicrobial activity against bacteria and fungi even when they are diffused (fumigated) into the air in a gaseous state. As a result, it was confirmed that a wide range of antimicrobial effects against bacteria and fungi could be obtained by fuming time oil, which shows only a slight antibacterial activity at fumigation, with isothymol and chloroxylenol.

본 명세서에서 사용된 용어, "훈증형 항균 조성물"은 열에 의하여 공중으로 증산하여 세균과 진균에 대하여 이들의 생육을 억제시키거나, 살균 작용을 나타내는 성분을 포함하는 조성물을 의미한다.As used herein, the term "fuming antibacterial composition" refers to a composition comprising a component that is capable of being released into the air by heat to inhibit the growth of bacteria and fungi, or exhibit a bactericidal action.

본 발명에 따르면, 상기 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀은 훈증 및 항균 성분으로서 조성물에 포함된다. 상기 용어, "훈증 성분"은 열에 의하여 공중으로 증산하는 성분을 의미하며, 용어 "항균 성분"은 세균과 진균에 대하여 이들의 생육을 억제시키거나, 살균 작용을 나타내는 성분을 의미한다.According to the present invention, the time oil, isothymol and chloroxylenol are included in the composition as fumigation and antibacterial components. The term "fumigant component" means a component that is heated to the air by heat, and the term "antibacterial component " means a component that inhibits the growth of bacteria and fungi or exhibits a bactericidal action.

본 발명의 일구현예에 따르면, 상기 타임 오일은 조성물 전체 중량에 대하여 0.8-2.0 중량%로 포함된다.According to one embodiment of the present invention, the time oil is contained in an amount of 0.8-2.0 wt% based on the total weight of the composition.

하나의 특정예에서, 상기 타임 오일은 조성물 전체 중량에 대하여 0.8-1.9 중량%, 0.8-1.8 중량%, 0.8-1.7 중량%, 0.8-1.6 중량% 또는 0.8-1.5 중량%로 포함되고, 다른 특정예에서는 0.9-1.9 중량%, 0.9-1.8 중량%, 0.9-1.7 중량%, 0.9-1.6 중량% 또는 0.9-1.5 중량%로 포함되며, 또 다른 특정예에서는 1-1.9 중량%, 1-1.8 중량%, 1-1.7 중량%, 1-1.6 중량% 또는 1-1.5 중량%로 포함된다.In one specific example, the time oil is comprised in the range of 0.8-1.9 wt.%, 0.8-1.8 wt.%, 0.8-1.7 wt.%, 0.8-1.6 wt.% Or 0.8-1.5 wt.%, 0.9-1.9 wt.%, 0.9-1.7 wt.%, 0.9-1.6 wt.% Or 0.9-1.5 wt.%, In another specific example 1-1.9 wt.%, 1-1.8 wt. %, 1-1.7% by weight, 1-1.6% by weight or 1-1.5% by weight.

본 발명의 일구현예에 따르면, 상기 조성물 내 이소티몰 : 타임 오일 : 클로록실레놀의 중량비는 1 : 0.05-0.14 : 0.8-1.1이다. 하기 실시예에 기재된 바와 같이, 상기와 같은 중량비로 세 성분을 포함하는 조성물이 구비된 훈증캔(훈증캔 B와 F)은 다른 훈증캔과 달리 모든 세균과 진균에 대하여 완벽한 항균 활성을 나타내었다(표 8 및 9 참조).According to one embodiment of the present invention, the weight ratio of isothiomol: time oil: chloroxylenol in the composition is 1: 0.05-0.14: 0.8-1.1. As described in the following examples, the fumigant cans (fumigant cans B and F) equipped with the composition containing the three components at the above-mentioned weight ratio showed a perfect antibacterial activity against all bacteria and fungi, unlike the other fumigants See Tables 8 and 9).

하나의 특정예에서, 상기 이소티몰 : 타임 오일 : 클로록실레놀의 중량비는 1 : 0.05-0.13 : 0.8-1.1, 1 : 0.05-0.12 : 0.8-1.1, 1 : 0.05-0.11 : 0.8-1.1 또는 1 : 0.05-0.10 : 0.8-1.1이고, 다른 특정예에서는 1 : 0.06-0.13 : 0.8-1.1, 1 : 0.06-0.12 : 0.8-1.1, 1 : 0.06-0.11 : 0.8-1.1, 1 : 0.06-0.10 : 0.8-1.1 또는 1 : 0.065-0.10 : 0.8-1.1이며, 또 다른 특정예에서는 1 : 0.05-0.13 : 0.9-1, 1 : 0.05-0.12 : 0.9-1, 1 : 0.05-0.11 : 0.9-1 또는 1 : 0.05-0.10 : 0.9-1이고, 또 다른 특정예에서는 1 : 0.06-0.13 : 0.9-1, 1 : 0.06-0.12 : 0.9-1, 1 : 0.06-0.11 : 0.9-1, 1 : 0.06-0.10 : 0.9-1 또는 1 : 0.065-0.10 : 0.9-1이다.In one particular example, the weight ratio of isotimol: time oil: chloroxylenol is 1: 0.05-0.13: 0.8-1.1, 1: 0.05-0.12: 0.8-1.1, 1: 0.05-0.11: 0.8-1.1 or 1: 0.05-0.10: 0.8-1.1, in other specific examples 1: 0.06-0.13: 0.8-1.1, 1: 0.06-0.12: 0.8-1.1, 1: 0.06-0.11: 0.8-1.1, 1: 0.06-0.10 : 0.8-1.1 or 1: 0.065-0.10: 0.8-1.1, and in another specific example 1: 0.05-0.13: 0.9-1, 1: 0.05-0.12: 0.9-1, 1: 0.05-0.11: 0.9-1 Or 1: 0.05-0.10: 0.9-1 and in another specific example 1: 0.06-0.13: 0.9-1, 1: 0.06-0.12: 0.9-1, 1: 0.06-0.11: 0.9-1, 1: 0.06 -0.10: 0.9-1 or 1: 0.065-0.10: 0.9-1.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 왁스를 더 포함한다. 상기 왁스에는 훈증 및 항균 성분(타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀)이 함침되며, 가열에 의하여 왁스가 융해함에 따라 상기 훈증 및 항균 성분이 기체 상태로 공중으로 확산된다.According to one embodiment of the present invention, the composition of the present invention further comprises a wax. The wax is impregnated with fuming and antibacterial components (time oil, isothymol and chloroxylenol), and as the wax is melted by heating, the fumigant and antimicrobial components diffuse into the air in a gaseous state.

본 발명에서는 상온에서는 고체이나, 가열에 의해 융해되어 액체상이 되는 왁스라면 제한 없이 사용할 수 있다. 이러한 왁스로는, 식물성 왁스, 동물성 왁스, 미네랄 왁스 및 석유계 왁스를 포함하는 천연 왁스와, 합성 왁스가 있다.In the present invention, a solid at room temperature or a wax which is melted by heating to become a liquid phase can be used without limitation. Such waxes include natural waxes including vegetable waxes, animal waxes, mineral waxes, and petroleum waxes, and synthetic waxes.

상기 식물성 왁스의 예로는 카바우나 왁스, 켄들리라 왁스, 라이스 왁스, 목납, 베이베리 왁스 및 호호바유 등이 있으며; 상기 동물성 왁스의 예로는 밀납, 라놀린, 경납, 울 왁스, 비즈왁스, 쉘락 왁스 및 슈페르마세티 왁스 등이 있고; 상기 미네랄 왁스의 예로는 몬탄 왁스, 오조케라이트 왁스 및 세레신 왁스 등이 있으며; 상기 석유계 왁스의 예로는 파라핀 왁스, 마이크로 크리스탈린 왁스, 페트로라튬 및 유동파라핀 등이 있고; 상기 합성왁스의 예로는 합성 탄화수소 왁스(예컨대, 피셔-트롭쉐왁스, 폴리에틸렌 왁스 등), 변성 왁스(예컨대, 몬탄 왁스 유도체, 파라핀 왁스 유도체, 마이크로크리스탈린 왁스 유도체 등), 수소화 왁스(예컨대, 경화피마자유와 이의 유도체 등) 및 지방산 아미드 에스테르케톤 왁스(예컨대, 스테아린산아미드, 무수프탈린산아미드, 염소화탄화수소 등) 등이 있다.Examples of the vegetable wax include carnauba wax, Kendilla wax, rice wax, wood wax, bayberry wax and jojoba oil; Examples of the animal wax include beeswax, lanolin, beeswax, wool wax, beeswax, shellac wax and superhemeteceti wax; Examples of the mineral wax include montan wax, ozokerite wax and ceresin wax; Examples of the petroleum wax include paraffin wax, microcrystalline wax, petrolatum and liquid paraffin; Examples of the synthetic wax include synthetic hydrocarbon waxes such as Fischer-Tropsch wax and polyethylene wax, modified waxes such as montan wax derivatives, paraffin wax derivatives and microcrystalline wax derivatives, hydrogenated waxes such as hydrogenated waxes Castor oil and derivatives thereof) and fatty acid amide ester ketone waxes (e.g., stearic acid amide, non-hydantoic acid amide, and chlorinated hydrocarbons).

본 발명의 훈증형 항균 조성물은 상술한 성분 외에 발포제, 살충 성분, 해충 기피 성분, 탈취 성분, 향 또는 이들의 조합을 추가적으로 포함할 수 있다. 이들 성분은 왁스에 함침 된 형태로 제공될 수 있다.The fuming antimicrobial composition of the present invention may further include a foaming agent, an insecticide component, an insect repellent component, a deodorant component, an aroma, or a combination thereof in addition to the above-mentioned components. These components may be provided in the form impregnated with the wax.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 항세균 활성을 나타낸다.According to one embodiment of the present invention, the composition of the present invention exhibits antibacterial activity.

본 발명의 조성물이 항세균 활성을 나타낼 수 있는 세균으로는, 예를 들어, 포도상구균(Staphylococcus aureus), 폐렴연쇄상구균(Streptococcus pneumoniae), 세레우스균(Bacillus cereus), 대장균(Escherichia coli) 및 이들의 조합이 있다. S. aureus는 생활환경 중에 널리 분포되어져 있는 세균과 원내 감염균으로 널리 알려져 있고, S. aureusB. cereus는 이들 균에 감염된 음식물을 섭취했을 때 식중독을 유발함은 물론, 이들 세균이 생성하는 장독소에 의하여 장염을 유발하는 것으로 알려져 있다.Examples of the bacterium that can exhibit the antibacterial activity of the composition of the present invention include Staphylococcus aureus , Streptococcus pneumoniae , Bacillus cereus , Escherichia coli , . S. aureus is widely known to be widely distributed in the living environment, and S. aureus and B. cereus induce food poisoning when food is infected with these bacteria, It is known to cause enteritis by toxins.

특히, B. cereus는 토양 및 공기 부유 미생물로서, 구토형 독소인 cereulide 또는 설사와 장염을 일으키는 독소인 Nhe (non-hemolytic enterotoxin), Hbl (hemolytic enterotoxin), CytK (cytotoxin K)를 분비하는 것으로 알려져 있다. 하기 실시예에 기재된 바와 같이, 타임 오일을 비롯한 오일 단독을 훈증캔에 적용한 경우에는 B. cereus에 대한 항균 효과를 얻을 수 없었지만(표 6 참조), 타임 오일을 이소티몰 및 PCMX와 조합하여 훈증캔에 적용한 경우에는 B. cereus를 완벽하게 사멸할 수 있었다(표 8 및 9 참조).In particular, B. cereus is known to secrete Nhe (non-hemolytic enterotoxin), Hbl (hemolytic enterotoxin) and CytK (cytotoxin K), which are toxins that cause vomiting toxins such as cereulide or diarrhea and enteritis as soil and airborne microorganisms have. As described in the examples below, when the oil alone, including time oil, was applied to the fumed can, the antimicrobial effect against B. cereus could not be obtained (see Table 6). Combination of time oil with isothymol and PCMX, (See Tables 8 and 9). ≪ tb >< TABLE >

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 항진균 활성을 나타낸다.According to one embodiment of the present invention, the composition of the present invention exhibits antifungal activity.

본 발명의 조성물이 항진균 활성을 나타낼 수 있는 진균으로는, 예를 들어, 칸디다 알비칸스(Candida albicans)가 있다.
The fungus in which the composition of the present invention can exhibit antifungal activity is, for example, Candida albicans .

본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 본 발명의 훈증형 항균 조성물을 포함하는 훈증기를 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided a fumigant comprising the fuming antibacterial composition of the present invention.

본 발명의 훈증형 항균 조성물은 다양한 훈증기에 적용가능하다. 상기 훈증기는 구비하고 있는 가열수단을 통하여 훈증형 항균 조성물에 열을 가하여 훈증 및 항균 성분을 공기 중으로 증산시킴으로써 항균 작용을 하는 장치이다. 본 발명의 훈증형 항균 조성물을 당업계에 공지된 다양한 훈증기에 구비시키는 방법을 통하여 본 발명의 훈증기를 제조할 수 있다.The fuming antibacterial composition of the present invention is applicable to various fumigants. The fumigant is an apparatus that performs an antibacterial action by heating fumigant type antimicrobial composition through a heating means and fumigating the fumigant and antibacterial component into the air. The fumigant of the present invention can be prepared through a method of providing the fumigant antimicrobial composition of the present invention to various fumigants known in the art.

상기 가열수단으로는 가수 발열수단, 공기산화 발열수단 및 전기가열 수단 과 같은 공지의 가열수단을 사용할 수 있다.As the heating means, known heating means such as hydrothermal heating means, air oxidizing heat generating means and electric heating means can be used.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 훈증기에는 가수 발열방식이 적용된다. 가수 발열물질로서, 산화칼슘, 염화마그네슘, 염화알루미늄, 염화칼슘 및 염화철과 같이 물을 첨가함으로써 발열반응을 개시하는 물질을 사용한다.According to one embodiment of the present invention, a hydrothermal heating method is applied to the fumigant of the present invention. As the hydrothermal substance, substances such as calcium oxide, magnesium chloride, aluminum chloride, calcium chloride and iron chloride, which initiate an exothermic reaction by adding water, are used.

본 발명의 일구현예에 따르면, 본 발명의 훈증기는 차량의 실내 소독을 위한 훈증기이다.According to one embodiment of the present invention, the fumigant of the present invention is fumigant for indoor disinfection of a vehicle.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:The features and advantages of the present invention are summarized as follows:

(ⅰ) 본 발명은 훈증 및 항균 성분으로서, 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀을 포함하는 훈증형 항균 조성물 및 이를 포함하는 훈증기를 제공한다.(I) The present invention provides fumigant antimicrobial compositions including time oil, isothymol and chloroxylenol as fumigation and antibacterial components, and fumigants containing the same.

(ⅱ) 본 발명의 조성물은 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀의 훈증을 통하여 그람양성균, 그람음성균 및 진균에 대하여 광범위한 항균 효과를 나타내므로, 본 발명의 조성물이 구비된 훈증기를 차량 실내 소독과 건물 실내 소독 등을 위하여 유용하게 사용할 수 있다.(Ii) Since the composition of the present invention exhibits a wide range of antimicrobial effects against Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria and fungi through fumigation of time oil, isothymol and chloroxylenol, the fumigant provided with the composition of the present invention can be sterilized And disinfecting the interior of the building.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .

실시예Example

실험재료 및 실험방법Materials and Experiments

공시균종Published species

세균으로는 Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Streptococcus pneumoniae (ATCC 49619), Bacillus cereus (ATCC 27438), Escherichia coli (ATCC 25922)를 사용하였고, 진균으로는 Candida albicans (ATCC 10231)를 사용하였다. 본 실험에 사용한 균주는 한국미생물보존센터(KFCC, 서울 홍제동)에서 분양받아 사용하였다.
Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Streptococcus pneumoniae (ATCC 49619), Bacillus cereus (ATCC 27438) and Escherichia coli (ATCC 25922) were used as fungi and Candida albicans (ATCC 10231) was used as fungi. The strains used in this experiment were purchased from the Korean Microorganism Conservation Center (KFCC, Hongje-dong, Seoul).

페이퍼 디스크 확산법Paper disk diffusion method

병원성균을 포함한 목적하는 균주에 대한 각각의 오일에 대한 항균 활성을 페이퍼 디스크법을 이용하여 측정하였다. 각 균들을 0.85% 생리식염수에 희석해 탁도계를 이용하여 공시균주에 적합한 탁도를 맞췄다. 탁도를 맞춘 균들을 항생제 감수성 검사배지(muller hinton agar; MHA)에 도말 접종한 후, 직경 10 mm의 멸균된 페이퍼 디스크(Advantec filter paper, Toyo Roshi Kaisha Ltd, Japan)에 원액을 비롯한 3 단계 희석한 시료(원액, 70%, 50%)와 음성대조군으로 0.85% 생리식염수를 각각 15 ㎕씩 흡수하게 하고, 용매를 휘발시킨 후 평판배지의 표면에 밀착시켜 37℃에서 24시간 배양하여 나타난 클리어 존(clear zone)의 크기를 측정하였다.
The antimicrobial activity of each of the desired strains including pathogenic bacteria was measured using the paper disk method. Each strain was diluted in 0.85% physiological saline solution and the turbidity was adjusted to a suitable turbidity using a turbidimeter. The turbidity-matched bacteria were inoculated onto a muller hinton agar (MHA), and the cells were diluted three times in a sterilized paper disk (Advantec filter paper, Toyo Roshi Kaisha Ltd., Japan) having a diameter of 10 mm After 15 μl of 0.85% physiological saline was adsorbed to the sample (stock solution, 70%, 50%) and the negative control, the solvent was evaporated, and the mixture was adhered to the surface of the plate medium at 37 ° C. for 24 hours. Clear zone was measured.

최소억제농도와 최소사멸농도Minimum inhibitory concentration and minimum killing concentration

최소억제농도(minimum inhibitory concentration, MIC) 분석은 액체 배지 희석법(broth dilution method)을 사용하여 수행하였다(Mann, C.M. and MarkhamA, J.L. Journal of Applied Microbiology. 1998; 84:538-44). 항균물질을 99% 알코올로 희석하여 0-20 ㎍/㎖ 농도로 희석하였다. 각각의 균주는, 농도를 탁도계를 이용하여 조절한 후 100배 희석하여 본 실험에 사용하였다. 멸균된 Kahn 튜브에 MHB(muller hinton broth, MHB) 500 ㎕에 타임 오일 500 ㎕를 연속적으로 희석시킨 뒤, 균 희석액 500 ㎕를 순차적으로 첨가한 뒤 18-22시간 동안 37℃에서 배양하였다. 이후, 육안 상으로 탁도를 관찰한 후 음성, 양성 대조군과 비교한 뒤, 균의 생육 곡선 상에서 균의 생장(turbidity)이 검출되지 않는 최소 농도를 MIC로 설정하였다.The minimum inhibitory concentration (MIC) assay was performed using a broth dilution method (Mann, CM and Markham A, JL Journal of Applied Microbiology . 1998; 84: 538-44). The antimicrobial material was diluted with 99% alcohol and diluted to a concentration of 0-20 ㎍ / ml. For each strain, the concentration was adjusted by using a turbidimeter and then diluted 100 times to be used in this experiment. 500 μl of time oil was continuously diluted in 500 μl of MHB (muller hinton broth, MHB) in a sterilized Kahn tube, and then 500 μl of a bacterial dilution was sequentially added and cultured at 37 ° C. for 18-22 hours. Thereafter, turbidity was visually observed, and compared with the negative and positive control groups, the minimum concentration at which no bacterial growth was detected on the growth curve of the microorganism was set as MIC.

최소사멸농도(minimum bactericidal concentration, MBC)는 MIC의 결정을 위한 각 시간대 별 배양 시료 100 ㎕를 취해 각 균의 기초선택배지에 도말하여, 24-48시간 동안 37℃에서 배양한 후, 생성되는 콜로니 수를 관찰하였을 때 목적 균을 완전하게 사멸(99%)시키는 최소 농도를 MBC로 설정하였다. 모든 실험은 3개의 독립적인 실험을 수행하여 결과를 종합하였다. 디스크 확산법을 포함한 미생물의 최소억제농도(MIC)와 최소사멸농도(MBC)의 모든 실험은 CLSI(Clinical &Laboratory Standards Institutes) 가이드라인에 준하여 수행되었다.
The minimum bactericidal concentration (MBC) was determined by taking 100 μl of the culture samples for each time zone for determination of MIC, plated on the basal selection medium of each microorganism, culturing for 24-48 hours at 37 ° C, When the number was observed, the minimum concentration to completely kill (99%) the target bacteria was set to MBC. All experiments performed three independent experiments and synthesized the results. All experiments with minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum killing concentration (MBC) of microorganisms including disk diffusion method were performed in accordance with CLSI (Clinical & Laboratory Standards Institutes) guidelines.

훈증캔 제조Manufacture of fumigation cans

수조(Water bath)를 가온시킨 후, 왁스를 정량 칭량하여 70℃ 온도에서 충분히 녹여주었다. 혼합기에 클로록실레놀과 이소티몰(Isothymol)을 정량 투입한 후 각 분말이 뭉치지 않도록 지속적으로 분해시켜 주면서 10분간 교반하였다. 왁스가 충분히 녹은 것을 확인한 후, 향과 타임 오일을 넣고 균일 혼합하였다.After the water bath was warmed, the wax was quantitatively weighed and sufficiently dissolved at a temperature of 70 ° C. Chloroxylenol and isothymol were added to the mixer in a fixed amount, followed by stirring for 10 minutes while continuously dissolving the powders so as not to aggregate. After confirming that the wax was sufficiently melted, the incense and time oil were added and mixed uniformly.

산화칼슘이 하단에 충전된 캔에 왁스 제형을 정량 충전하고, 냉각 공정을 거친 후 혼합된 분말을 충전하였다. 캔 상단에 스티커를 부착한 후 상단에 구멍 (Pin Hole)을 두개 뚫었다. PP 용기에 캔을 맞추어 넣고, 상단면을 실링하여 훈증캔을 제조하였다.
A can filled with calcium oxide at the lower end was filled with the wax formulation in a quantitative manner, cooled, and then filled with the mixed powder. A sticker was attached to the top of the can, and two holes were drilled on the top. The can was put into the PP container, and the upper surface was sealed to prepare the fumen can.

실내 훈증캔 부스 테스트Indoor fumigation cans booth test

접종할 균을 일정한 수로 맞추기 위해 맥팔랜드(McFarland) 비탁법을 이용하였다. 맥팔랜드의 표준을 설정하기 위하여, 메틸렌 블루와 멸균된 생리식염수를 이용해 기준 눈금을 맞추었다. 그람양성균의 경우, 맥팔랜드 No. 0.5와 동일한 균수를 가지도록 하였으며, 1.5 X 108 CFU/㎖의 균을 생리식염수에 녹여 멸균된 면봉으로 BAP 배지에 접종하였다. 그람음성균은 같은 방법으로 맥팔랜드 No. 1.0 (3.0 X 108 CFU/㎖)에 맞춘 후 MAC 배지에 접종하였고, 곰팡이의 경우 맥팔랜드 No. 2.0(6.0 X 108 CFU/㎖)으로 맞춰 일정한 수의 균을 SDA에 접종하였다. 맥팔랜드법을 통해 균수를 일정하게 맞춘 후, 선택배지에 접종한 다음 배지를 일정규격의 아크릴 상자에 뚜껑을 열은 채로 배치했다.The McFarland turbidimetric method was used to adjust the number of bacteria to be inoculated to a certain number. To establish the McFarland standards, the reference scale was fitted using methylene blue and sterile saline. In the case of Gram-positive bacteria, 0.5, and 1.5 × 10 8 CFU / ㎖ of bacteria were dissolved in physiological saline and inoculated into BAP medium with sterilized cotton swabs. Gram-negative bacteria were obtained from the same method using McFarland No. 1. 1.0 (3.0 × 10 8 CFU / ml) and then inoculated on MAC medium. 2.0 (6.0 X 10 < 8 > CFU / ml) and a certain number of bacteria were inoculated into SDA. After adjusting the number of bacteria through the McFarland method, the medium was inoculated on a selective medium, and then the medium was placed in an acrylic box of a certain size while the lid was opened.

이소티몰 1 g을 발포하는 시험군 캔(훈증캔 A 내지 F)을 아크릴 상자 내부에 투입한 후, 풍속기를 가동하여 상자 내부에 골고루 훈증이 퍼질 수 있도록 해 주었다. 시험물질 훈증이 시작된 후 10분 동안 접촉시킨 후, BAP 배지와 MAC 배지는 37℃에 24시간 동안 배양하였다. 같은 방법으로 실행한 곰팡이 실험 배지 SDA는 28℃에서 48시간 동안 배양시켰다. 시험물질이 세어나가는 것을 막기 위하여, 실험 중에는 아크릴 상자 뚜껑 주위를 테이프로 모두 막은 후 실험을 진행하였다. 배양 후 실험군의 배지를 비교 관찰하여 내부 훈증캔의 살균력에 대한 평가를 실시하였다. 같은 방법으로, 항균 성분으로 오일만을 포함하는 훈증캔의 살균력 평가를 실시하였다.
Test group cans (Fumigation cans A to F) for blowing 1 g of isothymol were put into an acrylic box, and the air speed was operated so that fumigation could spread evenly inside the box. After contact with the test material for 10 minutes after the start of fumigation, BAP medium and MAC medium were incubated at 37 ° C for 24 hours. SDA, a fungal laboratory medium, was cultivated at 28 ° C for 48 hours. In order to prevent the test substances from being counted, the test was conducted after all the tape around the acrylic box lid was covered during the experiment. After the incubation, the sterilization ability of the internal fuming cans was evaluated by comparing the media of the experimental group. In the same manner, the fungicidal ability of the fumigant containing only oil as an antibacterial component was evaluated.

실험결과Experiment result

디스크 확산법 결과Disk diffusion method result

타임 오일을 원액부터 100% 에탄올에 희석하여 70%, 50%까지 제조한 후, 디스크 확산법을 실시하여 클리어 존을 측정하였다. 그 결과, 타임 오일 원액의 경우에는, 모든 그람양성균과 그람음성균 및 진균에서 클리어 존이 최대로 형성되었다(여기서'최대'라는 뜻은 직경이 35 mm 이상을 뜻함). 70%와 50% 농도의 타임 오일에서도 원액에서와 같은 결과가 나타났다(표 1 내지 3).The time oil was diluted with 100% ethanol from the undiluted solution to make 70% and 50%, and then subjected to disk diffusion method to measure the clear zone. As a result, in the case of the time oil stock solution, a clear zone was maximally formed in all Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria and fungi ('max' means 35 mm or more in diameter). Similar results were obtained with the 70% and 50% time oils (Table 1 to 3).

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최소억제농도(MIC) 측정 결과Minimal inhibitory concentration (MIC) measurement results

최소억제농도는 공시균주인 S. aureus, E. coli, C. albicans에 대해서 0.0625 ㎍/㎖ 이었으나, B. cereus에서는 뚜렷한 효과가 관찰되지 않았다.The minimum inhibitory concentration was 0.0625 ㎍ / ㎖ for S. aureus , E. coli and C. albicans , but no significant effect was observed for B. cereus .

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최소사멸농도(MBC) 측정 결과The results of MBC measurement

공시균주인 S, aureus는 0.1250 ㎍/㎖에서 억제되었으며, E. coli는 0.0625 ㎍/㎖ 농도에서 억제되었고, C. albicans는 0.0625 ㎍/㎖의 농도에서 억제되어, 최소억제농도에서와 같은 결과를 얻었다. 일반 환경 하에서 많이 관찰되는 B. cereus를 제외한 모든 균에서 항균 효과를 보였다(표 5). S, aureus was inhibited at 0.1250 ㎍ / ㎖, E. coli was inhibited at 0.0625 ㎍ / ㎖, and C. albicans was inhibited at 0.0625 ㎍ / ㎖, . All of the bacteria except B. cereus , which is frequently observed under normal environment, showed antibacterial effect (Table 5).

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실내 훈증캔 부스 테스트 결과Indoor Fumigation Cans Booth Test Results

먼저, 훈증캔에 항균 성분으로 오일(타임 오일, 티트리 오일 또는 아키헬퍼 F-55)만을 충전하여 실내 훈증캔 부스 테스트를 실시하였다.First, the fumigation cans were filled with antimicrobial oil (time oil, tea tree oil, or Aki Helper F-55) as an antimicrobial agent.

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그 결과, 표 6에 나타난 바와 같이, 오일 단독을 훈증시키는 것으로는 항균 효과를 얻을 수 없었다.
As a result, as shown in Table 6, an antibacterial effect could not be obtained by fumigating oil alone.

다음으로, 항균 성분으로 타임 오일뿐만 아니라, 이소티몰과 PCMX를 포함하는 훈증캔으로 실내 훈증캔 부스 테스트를 실시하였다. 타임 오일의 함유 비율(0.3, 1.0, 1.5, 3.0, 18.0, 20.0 중량%)을 표 7과 같이 달리하여 실험을 진행하였다(표 7의 단위는 중량%임). 실험결과는 표 8에 나타내었다.Next, indoor fumigation can booth tests were conducted with fumigation cans containing isothymol and PCMX as well as time oil as an antibacterial component. The test was carried out by varying the content of time oil (0.3, 1.0, 1.5, 3.0, 18.0, 20.0% by weight) as shown in Table 7 (unit in Table 7 is wt%). The experimental results are shown in Table 8.

Figure 112015023379240-pat00007
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표 8에 나타난 바와 같이, 0.3 중량%의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 A는 균을 억제하지 못하였으나, 1.0%의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 F와 1.5 중량%의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 B는 모든 균종을 억제하였다. 훈증캔 F와 B에서는 그람양성세균(S. aureus, S. pneumonia)에서 용혈이 특징적으로 관찰되었다. 3.0 중량%의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 C의 경우에는 B. cereus에서 디스크확산법과 MIC/MBC에서의 결과와 마찬가지로 전혀 억제 효과를 나타내지 못하였다. 18 중량%의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 D는 항균 효과를 나타내었지만, 더 적은 양의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 B와 F 보다 못한 항균 효과를 나타내었고, 가장 많은 양인 20 중량%의 타임 오일을 포함하는 훈증캔 E는 오히려 모든 균종에 대하여 항균 효과를 나타내지 못하였다. 2차 실험결과에서도 1차에서와 동일한 결과를 얻었다(표 9).As shown in Table 8, the fumigant can A containing 0.3% by weight time oil did not inhibit the fungus, but the fumigant can F containing 1.0% time oil and the fumigant can containing 1.5% B inhibited all the species. In the fumigants F and B, haemolysis was distinctly observed in gram-positive bacteria ( S. aureus , S. pneumonia ). In the case of fumigant can C containing 3.0 wt% time oil, no inhibitory effect was exhibited in B. cereus as in the case of disk diffusion method and MIC / MBC. Fumigation cans D containing 18% by weight time oil showed antimicrobial effects, but showed less antimicrobial effect than fumigation cans B and F containing less time oil, and the most abundant 20% Was not able to show antimicrobial effect against all the species. The results of the second experiment were the same as those of the first (Table 9).

Figure 112015023379240-pat00009
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끝으로, 하기 표 10과 같이 타임 오일을 포함하지 않는 훈증캔으로 실내 훈증캔 부스 테스트를 실시하였다(표 10의 단위는 중량%임). 실험결과를 표 11에 나타내었다.Finally, as shown in Table 10 below, the room fumigation can booth test was conducted with fumigant can not contain time oil (the unit in Table 10 is wt%). The experimental results are shown in Table 11.

Figure 112015023379240-pat00010
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표 11에 나타난 바와 같이, 타임 오일이 포함되지 않는 훈증캔은 미미한 항균 효과를 나타내거나(확인물질 A), 거의 항균 효과를 나타내지 못하였다(확인물질 B).
As shown in Table 11, fumigation cans not containing time oil exhibited a slight antibacterial effect (Identification substance A) or showed almost no antimicrobial effect (Identification substance B).

이상과 같이, 디스크 확산법과 최소억제농도/최소사멸농도 측정 실험에서 우수한 항균 활성을 나타낸 타임 오일은 훈증 시에는 항균 활성을 거의 나타내지 못하였으나(표 6), 이소티몰과 PCMX와 함께 훈증 시에는 모든 실험균주에 대하여 우수한 항균 활성을 나타내었고(표 8 및 9), 타임 오일 없이 이소티몰과 PCMX만을 훈증시킨 경우에도 미미한 항균 효과가 나타났다(표 11).As described above, the time oil exhibiting excellent antimicrobial activity in the disk diffusion method and the minimum inhibitory concentration / minimum killing concentration test showed almost no antibacterial activity at fumigation (Table 6). In addition to isothiomol and PCMX, Showed excellent antimicrobial activity against the experimental strains (Tables 8 and 9) and showed only slight antibacterial effects even when isothymol and PCMX were fumed without time oil (Table 11).

이상의 실험결과는, 훈증기에 적용 시 타임 오일을 이소티몰 및 PCMX와 조합 사용하여야만 이들 성분의 훈증을 통하여 그람양성균, 그람음성균 및 진균에 대하여 광범위한 항균 효과를 얻을 수 있음을 보여준다.
The results of the above experiments show that when applied to fumigation, time oil is used in combination with isothymol and PCMX to obtain a wide range of antimicrobial effects against gram-positive bacteria, gram-negative bacteria and fungi through fumigation of these components.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims (7)

타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀을 포함하고, 상기 타임 오일은 조성물 전체 중량에 대하여 0.8-2.0 중량%로 포함되는 훈증형 항균 조성물.
Time oil, isothymol and chloroxylenol, wherein the time oil is contained in an amount of 0.8-2.0 wt% based on the total weight of the composition.
삭제delete 제 1 항에 있어서, 상기 조성물 내 이소티몰 : 타임 오일 : 클로록실레놀의 중량비는 1 : 0.05-0.14 : 0.8-1.1인 것을 특징으로 하는 조성물.The composition of claim 1, wherein the weight ratio of isothiomol to time-oil: chloroxylenol in the composition is 1: 0.05-0.14: 0.8-1.1. 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 왁스를 더 포함하고, 상기 왁스에는 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀이 함침되며, 가열에 의한 왁스의 융해에 따라 타임 오일, 이소티몰 및 클로록실레놀이 공중으로 증산되는 것을 특징으로 조성물.The composition of claim 1, wherein the composition further comprises a wax, wherein the wax is impregnated with time oil, isothymol, and chloroxylenol, the time oil, isothymol, and chloroxylenol ≪ / RTI > 제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 포도상구균(Staphylococcus aureus), 폐렴연쇄상구균(Streptococcus pneumoniae), 세레우스균(Bacillus cereus), 대장균(Escherichia coli) 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된 균에 대하여 항세균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물.The composition of claim 1, wherein the composition is selected from the group consisting of Staphylococcus aureus , Streptococcus pneumoniae , Bacillus cereus , Escherichia coli , and combinations thereof. Wherein the composition exhibits bacterial activity. 제 1 항에 있어서, 조성물은 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대하여 항진균 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물.The composition of claim 1, wherein the composition exhibits an antifungal activity against Candida albicans . 제 1 항 및 제 3 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 훈증형 항균 조성물을 포함하는 훈증기.7. A fumigation comprising the fuming antimicrobial composition of any one of claims 1 and 6 to 6.
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