KR101644753B1 - Cosmetic composition comprising Sargassum serratifolium extract for skin whitening - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 유효성분으로서 톱니모자반 추출물 또는 이의 분획물을 포함하여 피부미백 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.TECHNICAL FIELD The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening, and more particularly to a cosmetic composition having a skin whitening effect, which comprises an extract of Tooth mackerel or a fraction thereof as an active ingredient.
사람의 피부색은 멜라닌, 카로틴 및 헤모글로빈의 양에 따라 결정되어 지는데 이중 멜라닌이 가장 결정적인 요소이다. 멜라닌은 피부(표피)내 기저층에 존재하는 색소세포인 멜라노사이트(melanocyte)에서 합성되며 주변 각질세포(Keratinocyte)로 전이되어 사람의 피부색을 나타낸다. 멜라닌이 비정상적으로 적게 생산되면 백반증(Vitiligo)과 같은 피부 병변이 유발된다. 반대로 과잉 생산은 중년 여성들의 주요 고민 중 하나인 기미, 주근깨를 형성하며 또한 피부암과도 밀접한 관계가 있다. The skin color of a person is determined by the amount of melanin, carotene and hemoglobin. Melanin is the most important factor. Melanin is synthesized in the melanocyte, a pigmented cell in the basal layer of the skin (epidermis), and transformed into keratinocyte to show the color of human skin. Unusually low production of melanin causes skin lesions such as Vitiligo. On the contrary, overproduction is one of the major concerns of middle-aged women, forming spots and freckles, and is also closely related to skin cancer.
미백 작용을 더욱 자세히 설명하면 다음과 같다. 멜라닌은 피부 표피의 기저층에 존재하는 멜라노사이트라는 세포에서 티로신(Tyrosine)이 효소 및 비효소적 산화반응을 거쳐 생성되며, 표피를 구성하고 있는 각질세포로 전이된다. 멜라닌의 생합성에 관여하는 중요한 효소로는 티로시나제(Tyrosinase), 티로시나제 관련 프로테인 1(Tyrosinase-Related protein 1) 및 도파크롬 토토머라제(dopachrome tautomerase)가 있다. 티로시나아제 외에 이 두 효소는 주목을 끌고 있으나 멜라닌 합성에 결정적인 역할을 하는 효소는 티로시나아제이다. 멜라닌의 생합성 첫단계는 티로시나아제에 의하여 유발된다. 티로시나아제에 의해 티로신이 도파(Dopa)로 되고 이 도파를 도파퀴논(Dopa-quinone)으로 만든다. 이 두 반응의 다음단계 과정들은 비효소적인 반응에 의해서도 가능한 것으로 알려져 있으며 티로시나아제 단독으로도 멜라닌 생성이 가능하다고 알려져 있다. The whitening effect will be described in more detail as follows. Melanin is produced by enzymes and nonenzymatic oxidation of tyrosine in cells called melanocytes, which are found in the basal layer of skin epidermis, and transformed into keratinocytes constituting the epidermis. Important enzymes involved in the biosynthesis of melanin include tyrosinase, tyrosinase-
최근에는 피부 세포내의 신호 전달물질의 발현에 따른 멜라닌 형성과정에 대한 새로운 이론이 제시되고 있다. 피부가 자외선에 노출되면 염증을 유발시키는 인터루킨-알파(Interlukin-α)가 상피(Epidermis)내에 있는 케라티노사이트(Keratinocyte)로부터 발현되고, 이 인터루킨-알파가 케라티노사이트 엔도셀린(Endothelin) 발현을 촉진시킨다. 이러한 일련의 과정이 멜라노사이트의 형성을 증가시키고 멜라노사이트를 활성화시킨다. 이렇게 형성된 멜라노사이트내 멜라노좀에서 티로신이 티로시나아제에 의해 멜라닌이 형성된다. Recently, new theories about the process of melanin formation due to the expression of signaling substances in skin cells have been suggested. When the skin is exposed to ultraviolet light, interleukin-alpha, which causes inflammation, is expressed from keratinocytes in the epidermis, and this interleukin-alpha keratinocyte endothelin expression Promote. This series of processes increases the formation of melanocytes and activates melanocytes. Melanin is formed by tyrosine tyrosinase in melanocytes in melanocytes thus formed.
또, NF-κB는 여러 가지 자극에 대해 응답적으로 활성화되어, 면역이나 세포증식, 염증 등에 관하여 여러 가지 유전자의 발현을 높여준다. NF-κB의 과잉 활성화가 암이나 류마티스, 건선 등과 관계있다는 것이 보고되어, 현재 세계적으로 NF-κB의 활성화를 억제하는 약제의 개발이 활발하게 이루어지고 있다. NF-κB는 피부의 표피각화세포나 진피 섬유아세포에도 존재하며, 자외선, 세포외 자극이나 염증성 사이토카인 등에 의해 NF-κB가 과잉으로 활성화됨으로써 염증과 세포사멸에 관련된 유전자들의 전사가 증가되는 것으로 확인되고 있다. NF-κB의 과잉활성화는 세포에서의 염증성 사이토카인들을 생성시키고 그 사이토카인들에 의해 더욱 NF-κB의 활성화가 일어난다. 또한, 세포증식인자인 bFGF(basic fibroblast growth factor)나 세포외 매트릭스 분해효소 MMP-1의 합성을 증가시켜 표피각화세포의 과증식이나 각화이상에 의한 표피의 비후, 멜라노사이트의 증식에 의한 색소 침착, MMP-1의 진피 콜라겐 분해에 의한 피부 탄력의 저하 등을 일으킴으로써 피부의 광노화에도 관여한다. In addition, NF-κB is activated in response to various stimuli, and enhances the expression of various genes in relation to immunity, cell proliferation, and inflammation. It has been reported that excessive activation of NF-κB is associated with cancer, rheumatism, psoriasis, etc., and nowadays drugs are actively developed to inhibit NF-κB activation worldwide. NF-κB is also present in epidermal keratinocytes and dermal fibroblasts of the skin, and it is confirmed that NF-κB is excessively activated by ultraviolet rays, extracellular stimuli or inflammatory cytokines, thereby increasing transcription of genes involved in inflammation and apoptosis . The overactivation of NF-κB produces inflammatory cytokines in the cells, which further activate NF-κB. In addition, the synthesis of basic fibroblast growth factor (bFGF) or extracellular matrix degrading enzyme MMP-1, which is a cell proliferation factor, has been increased to cause hyperpigmentation of epidermal keratinocytes, epidermal hypertrophy due to keratinization abnormality, pigmentation by melanocyte proliferation, It is also involved in photoaging of the skin by causing reduction of skin elasticity due to decomposition of dermal collagen of MMP-1.
피부의 멜라닌 세포인 색소를 만드는 표피 멜라노사이트 세포는 자외선이나 만성적인 염증 등의 자극에 의하여 피부에서 멜라닌 색소를 과잉으로 생성함으로써 흑반, 기미, 주근깨 등의 원인이 되고 있다.The skin melanocyte cells that make up the pigment, melanocyte of the skin, are caused by excessive stimulation of the melanin pigment in the skin due to ultraviolet rays or chronic inflammation, resulting in blackness, spots and freckles.
염증이나 자외선과 같은 외부자극에 의해 표피 각화세포의 NF-κB는 과잉으로 활성화되어 과잉의 멜라닌 생성을 유도하고, 표피 각화세포의 세포증식을 유도하는 bFGF의 생성을 촉진함으로써 표피의 비후, 멜라노사이트의 증식에 의한 색소 침착을 유도한다. 따라서, NF-κB의 작용을 억제하는 물질은 염증이나 자외선에 의한 기미나 주근깨 등의 색소침착을 막는 효과를 나타낸다.NF-κB in epidermal keratinocytes is excessively activated by external stimuli such as inflammation and ultraviolet rays to induce excessive melanin production and promote the production of bFGF which induces cell proliferation of epidermal keratinocytes, To induce pigmentation by proliferation of the pigment. Therefore, a substance that inhibits the action of NF-κB has an effect of preventing pigmentation such as spots or freckles caused by inflammation or ultraviolet rays.
이미 아스코르빈산(특개평 4-9320), 하이드로퀴논(특개평 6-192062), 코직산(특개 56-7710), 알부틴(특개평 4-9315) 및 일부의 화합물들이 티로시나제 저해 활성을 가지고 있어 미백 화장료의 원료로 이용되고 있으나, 처방계 중에서의 안정성이 떨어져 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. 그리고 티로시나제의 억제 효과는 입증되었으나, 실제 생체 레벨과 유사한 실험에서는 그 효과가 낮게 나타나며 하이드로퀴논은 발암성 물질로 규정되어 사용이 금지되고 있다. It has already been reported that ascorbic acid (JP 4-9320), hydroquinone (JP 6-192062), kojic acid (JP 56-7710), arbutin (JP 4-9315) and some compounds have tyrosinase- It is used as a raw material for cosmetics, but its use is limited due to its stability in a prescription system, degradation and coloration, generation of bad odor, efficacy at a living body level, unclear effect and safety problem. And the inhibitory effect of tyrosinase has been proven, but in experiments similar to actual levels of biosynthesis, the effect is low, and hydroquinone is prescribed as a carcinogenic substance and its use is prohibited.
따라서 안정성이 뛰어난 피부 미백 활성을 가지고 있는 천연물질의 개발이 필요한 실정이다. Therefore, it is necessary to develop a natural substance having skin whitening activity with excellent stability.
따라서 본 발명의 목적은 천연 해조류의 추출물을 이용하여 장기간 사용해도 인체에 안정하면서 피부미백 활성이 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a cosmetic composition which is stable to human body and has excellent skin whitening activity even if it is used for a long time by using an extract of natural seaweed.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서,In order to achieve the above-mentioned object of the present invention,
본 발명은 톱니모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising an extract of Tooth mackerel as an active ingredient.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 톱니모자반 추출물은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 아세톤, 물 및 헥산으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매로 추출될 수 있다.In one embodiment of the present invention, the Saw Mab Extract may be extracted with at least one solvent selected from the group consisting of lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, acetone, water and hexane.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 톱니모자반 추출물은 멜라닌 생성 억제 및 티로시나아제 저해 활성을 통해 피부 미백 효과를 가질 수 있다.In one embodiment of the present invention, the Saw Moth extract may have a skin whitening effect through inhibition of melanin formation and tyrosinase inhibitory activity.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 톱니모자반 추출물은 화장료 조성물 총 중량부 대비 0.0001 내지 20 중량 %로 포함될 수 있다.In one embodiment of the present invention, the toothed moth extract may be included in an amount of 0.0001 to 20% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
본 발명은 톱니모자반 추출물에서 분리한 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising as an active ingredient a compound isolated from a teaspoon mallow extract.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화합물은 사가하이드로퀴노익산(sagahydroquinoic acid), 사가퀴노익산(sagaquinoic acid) 또는 사가크로메놀(sagachromenol)인 것일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the compound may be sagahydroquinoic acid, sagaquinoic acid or sagachromenol.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화합물은 멜라닌 생성 억제 및 티로시나아제 저해 활성을 통해 피부 미백 효과를 가질 수 있다.In one embodiment of the present invention, the compound may have a skin whitening effect through inhibition of melanin formation and tyrosinase inhibitory activity.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종으로 제형화될 수 있다.In an embodiment of the present invention, the cosmetic composition may be a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, , Nutrient essence, pack, soap, shampoo, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, latex, lipstick, makeup base, foundation, press powder and loose powder .
본 발명에 따른 톱니모자반 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물은 멜라닌 생성 억제 및 티로시나아제 저해 활성이 우수함으로, 이를 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 미백을 위한 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다. 특히 톱니모자반은 천연물질로 식용이 가능하므로 이로부터 유래한 추출물 및 화합물을 포함하는 본 발명의 미백 화장료 조성물은 장기간 사용에도 안전한 이점을 가진다.Since the extract of Tooth mothia or the compound isolated therefrom according to the present invention has excellent melanin production inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity, the composition comprising it as an active ingredient can be usefully used as a cosmetic composition for skin whitening. In particular, since the sawtooth moth can be edible as a natural substance, the whitening cosmetic composition of the present invention containing the extract and the compound derived therefrom has a safety advantage for long-term use.
도 1은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 크로마토그램이다.
도 2은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 중 1번 분획물의 2차 획분 크로마토그램이다.
도 3은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 중 1번 분획물을 2차분획한 획분을 정제하여 NMR로 분석하여 규명한 사가하이드로퀴노익산(sagahydroquinoic acid)의 크로마토그램이다.
도 4은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 중 2번 분획물의 2차 획분 크로마토그램으로 3개의 피크를 확인한 결과이다.
도 5은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 중 2번 분획물의 2차 획분에서 2번 피크를 정제한 뒤, NMR로 분석하여 규명한 사가크로메놀(sagachromenol)의 크로마토그램이다.
도 6은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 중 3번 분획물의 2차 획분 크로마토그램으로 4개의 피크를 확인한 결과이다.
도 7은 톱니모자반 n-헥산 분획물에서 얻은 4개의 획분 중 2번 분획물의 2차 획분에서 4번 피크를 정제한 뒤, NMR로 분석하여 규명한 사가퀴노익산(sagaquinoic acid)의 크로마토그램이다.
도 8은 본 발명의 톱니모자반 주정추출물(ESS)에 세포독성이 있는지 유무를 알아보기 위하여 MTS assay 분석을 한 결과이다.
도 9는 본 발명의 톱니모자반 주정추출물에서 분리한 화합물 사가하이드로퀴노익산(SHQ, sagahydroquinoic acid)에 세포독성이 있는지 유무를 알아보기 위하여 MTS assay 분석을 한 결과이다.
도 10은 본 발명의 톱니모자반 주정추출물에서 분리한 화합물 사가퀴노익산(SQA, sagaquinoic acid)에 세포독성이 있는지 유무를 알아보기 위하여 MTS assay 분석을 한 결과이다.
도 11은 본 발명의 톱니모자반 주정추출물에서 분리한 화합물 사가크로메놀(SCM, sagachromenol acid)에 세포독성이 있는지 유무를 알아보기 위하여 MTS assay 분석을 한 결과이다.
도 12는 톱니모자반 주정추출물(ESS)에 멜라닌생성억제 활성이 있는지를 알아보기 위하여 세포 내 멜라닌 함량을 확인한 결과이다.
도 13은 톱니모자반 주정추출물에서 분리한 화합물 사가하이드로퀴노익산(SHQ, sagahydroquinoic acid)에 멜라닌생성억제 활성이 있는지를 알아보기 위하여 세포 내 멜라닌 함량을 확인한 결과이다.
도 14는 톱니모자반 주정추출물에서 분리한 화합물 사가퀴노익산(SQA, sagaquinoic acid)에 멜라닌생성억제 활성이 있는지를 알아보기 위하여 세포 내 멜라닌 함량을 확인한 결과이다.
도 15는 톱니모자반 주정추출물에서 분리한 화합물 사가크로메놀(SCM, sagachromenol)에 멜라닌생성억제 활성이 있는지를 알아보기 위하여 세포 내 멜라닌 함량을 확인한 결과이다.
도 16은 본 발명의 톱니모자반 주정추출물에 미백 활성이 있는지를 알아보기 위하여 티로시나아제 발현량을 측정한 결과이다.
도 17은 본 발명의 사가퀴노익산(SHQ, sagahydroquinoic acid)에 미백 활성이 있는지를 알아보기 위하여 티로시나아제, pERK 및 ERK 발현량을 측정한 결과이다.
도 18은 본 발명의 사가퀴노익산(SQA, sagaquinoic acid)에 미백 활성이 있는지를 알아보기 위하여 티로시나아제, pERK 및 ERK 발현량을 측정한 결과이다.
도 19는 본 발명의 사가크로메놀(SCM, sagachromenol)에 미백 활성이 있는지를 알아보기 위하여 ERK의 인산화를 측정한 결과이다.Figure 1 shows four fraction chromatograms obtained from the n-hexane fraction of the toothed mats.
2 is a second fraction chromatogram of
FIG. 3 is a chromatogram of sagahydroquinoic acid identified by analyzing NMR by purifying a fraction obtained by fractionating the first fraction of the four fractions obtained from the n-hexane fraction of the toothed mackerel.
FIG. 4 shows the result of confirming three peaks of a second fraction chromatogram of the fraction No. 2 among the four fractions obtained from the n-hexane fraction of the toothed mackerel.
FIG. 5 is a chromatogram of sagachromenol identified by NMR analysis after purifying the second peak in the second fraction of the second fraction of the four fractions obtained from the n-hexane fraction of the toothed mackerel.
FIG. 6 shows the results of confirming four peaks in a second fraction chromatogram of the fraction No. 3 in the four fractions obtained from the n-hexane fraction of the toothed mackerel.
FIG. 7 is a chromatogram of sagaquinoic acid identified by NMR analysis after purifying the fourth peak in the second fraction of the second fraction of the four fractions obtained from the naphtha fraction of the toothed mackerel.
FIG. 8 shows the result of MTS assay analysis to determine whether or not the extract of the present invention has cytotoxicity.
FIG. 9 is a result of MTS assay analysis to determine whether cytotoxicity of hydroxycinnamic acid (SHQ, sagahydroquinoic acid) was detected by the compound sphaeroa extract of the present invention.
FIG. 10 is a result of MTS assay analysis to determine whether cytotoxicity of sQA (sagaquinoic acid) was detected by the compound syrup isolated from the extract of the teaspoon of the present invention.
FIG. 11 is a result of MTS assay analysis to determine whether cytotoxicity of spermine (SCM, sagachromenol acid) from the extract of the extracts of Tooth Moth extract of the present invention is cytotoxic.
FIG. 12 shows the result of confirming the intracellular melanin content in order to examine whether or not there is melanin formation inhibitory activity in the Teaspoon Corn Extract (ESS).
FIG. 13 shows the results of confirming the intracellular melanin content in order to examine whether the compound syrup separated from the extract of the teaspoon of the mother has inhibitory activity on melanin formation by hydroquinone acid (SHQ, sagahydroquinic acid).
FIG. 14 shows the result of confirming the intracellular melanin content in order to examine whether the compound saury extracted from the extract of the toothed mackerel has a melanin formation inhibitory activity on squequinic acid (SQA).
FIG. 15 shows the results of confirming intracellular melanin content in order to examine whether the compound SMA isolated from the extracts of teaspoon mushroom has melanin formation inhibitory activity on chromenol (SCM, sagachromenol).
16 shows the results of measurement of tyrosinase expression in order to examine whether or not whitening activity is exerted on the extract of the teaspoon of the present invention.
FIG. 17 shows the results of measurement of tyrosinase, pERK and ERK expression levels in order to determine whether the present invention has whitening activity on sagahydroquinoic acid (SHQ).
FIG. 18 shows the results of measurement of tyrosinase, pERK and ERK expression levels in order to determine whether the present invention has a whitening activity on SQA (sagaquinoic acid).
FIG. 19 shows the result of measuring the phosphorylation of ERK in order to determine whether the sagachromenol (SCM) of the present invention has a whitening activity.
본 발명은 피부 미백 개선에 효능이 있는 물질을 찾고자 자연의 여러 가지 천연물질들 중에서 피부 미백에 유효한 물질을 스크리닝한 결과, 톱니모자반 추출물이 매우 우수한 피부 미백 효과가 있음을 확인하였다. As a result of screening for substances which are effective for skin whitening among various natural substances of natural ones, it was confirmed that the extract of Sawtooth mackerel has an excellent skin whitening effect.
특히 본 발명자들은 천연물질로부터 유래되어 인체에 안정하면서도, 탁월한 미백효과를 나타낼 수 있는 소재를 찾고자 모색하던 중, 톱니모자반 추출물에 주목하였으며 톱니모자반 추출물이 미백 효과가 있는지 실험을 통해 확인하였다. Particularly, the present inventors have searched for a material derived from a natural substance which is stable to human body and exhibited excellent whitening effect, and focused on extracts of Sawtooth mildew.
즉, 본 발명의 일실시예에 따르면, 상기 톱니모자반 추출물을 농도별로 B16F10 세포에 처리한 결과, 세포생존율이 100% 이상으로 나타나 세포독성이 없어 인체에 안정한 것으로 나타났다(도 8 내지 11 참조).That is, according to an embodiment of the present invention, B16F10 cells were treated with the extracts of Sawtooth mildew at a concentration of 100% or more, showing no cytotoxicity and stable to the human body (see FIGS. 8 to 11).
한편, 멜라닌은 피부에 존재하는 색소로 자외선 등 외부의 자극으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 한다. 하지만 이것이 과잉 생성되어 침착되면 기미나 주근깨 등을 형성시켜 피부 외관상 문제를 야기할 수 있으며 나아가 피부노화를 촉진시켜 피부암을 유발할 수 있기 때문에 멜라닌 과잉생성을 억제할 수 있는 물질의 경우 미백제품으로 사용이 가능하다. On the other hand, melanin is a pigment present in the skin and plays an important role in protecting the body from external stimuli such as ultraviolet rays. However, when it is overproduced and deposited, it forms spots and freckles, which can cause problems in the appearance of the skin. Further, since it can induce skin cancer by promoting skin aging, a substance which can inhibit melanin excess production can be used as a whitening product It is possible.
피부의 색소침착은 자외선이나 염증 등의 자극에 의해 야기되며 또 유전적 요인이나 호르몬, 식품 등과 화학물질 등의 인자에 의해서도 발생된다고 알려져 있다. 멜라닌의 생합성 과정은 피부 멜라닌세포(melanocyte)가 관여한다. 즉, 멜라닌의 생합성은 멜라노솜(melanosome) 이라고 불리는 특수한 형태의 멜라닌세포 내 소기관에서 일어나는데 이 멜라노솜 내에서 멜라닌의 생성에서는 티로시나아제(tyrosinase)라는 효소가 가장 중요한 역할을 한다. 이 효소의 작용에 의해 티로신(tyrosine)은 도파(dopa)로 전환되며 이것이 일련의 산화과정을 통해 도파퀴논(dopaquinone)이 생성되고 다시 도파크롬(dopachrome)으로 변환됨으로서 최종적으로 흑갈색인 멜라닌을 형성하게 된다. 이 멜라닌 색소형성에 관여하는 단백질 유전자는 티로시나아제(tyrosinase), TRP-1(tyrosinase related protein-1), TRP-2(tyrosinase related protein-2), ERK(Extracellular signal-regulated kinases)와 이러한 멜라닌 합성 인자 발현을 조절하는 주요 전사인자인 MITF(Microphthalmia-associated transcription factor)의 발현이 중요한 멜라닌 합성과정으로서 역할을 한다.Skin pigmentation is caused by stimuli such as ultraviolet rays or inflammation, and it is also known to be caused by factors such as genetic factors, hormones, foods, and chemicals. The process of biosynthesis of melanin involves melanocytes in the skin. In other words, the biosynthesis of melanin occurs in a special form of melanocyte subcellular organ called melanosome. In this melanocyte, an enzyme called tyrosinase plays the most important role in the production of melanin. Tyrosine is converted to dopa by the action of this enzyme, which is converted to dopachrome by the formation of dopaquinone through a series of oxidation processes and ultimately forms melanin, a black brown color. do. Protein genes involved in melanin pigment formation include tyrosinase, tyrosinase related protein-1 (TRP-1), tyrosinase related protein-2 (TRP-2), and extracellular signal-regulated kinases (ERK) Expression of MITF (Microphthalmia-associated transcription factor), a major transcription factor that regulates expression of synthetic factors, plays an important role in melanin synthesis.
본 발명의 일실시예에 따르면, 본 발명의 톱니모자반 추출물은 멜라닌 합성 억제 효과가 우수함을 알 수 있었다(도 12 내지 15 참조).According to one embodiment of the present invention, it was found that the sawtooth moth extract of the present invention has an excellent melanin synthesis inhibitory effect (see Figs. 12 to 15).
나아가 본 발명의 톱니모자반 추출물이 멜라닌 생성에 중요한 효소인 티로시나아제 합성에 중요한 ERK 단백질의 인산화에 영향을 미치는 지 확인하기 위해 웨스턴 블롯팅 분석을 통해 ERK 단백질의 인산화 억제 여부를 확인한 결과, 본 발명의 톱니모자반 추출물은 대조군에 비하여 티로시나아제 단백질 발현을 감소시켰다는 것을 알 수 있었다(도 16 내지 19 참조).Furthermore, in order to determine whether the extract of the present invention affects the phosphorylation of ERK protein important for the synthesis of tyrosinase, which is an important enzyme for melanogenesis, Western blotting analysis confirmed the inhibition of ERK protein phosphorylation. As a result, Showed that tyrosinase protein expression was decreased compared with the control group (see Figs. 16 to 19).
이와 같은 결과를 통해 본 발명자들은 본 발명의 톱니모자반 추출물이 피부 미백 효과를 가지고 있다는 사실을 실험적으로 입증하였다. From these results, the inventors of the present invention have experimentally proved that the teaspoon mallow extract of the present invention has a skin whitening effect.
그러므로 본 발명은 톱니모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공할 수 있다. Therefore, the present invention can provide a cosmetic composition for skin whitening containing an extract of Tooth mackerel as an active ingredient.
나아가 본 발명의 톱니모자반 추출물이 국내 연안산 모자반류의 멜라닌 생성억제능과 비교하여 우수함을 입증하기 위해 다른 종류의 모자반으로 참모자반, 괭생이모자반, 왜모자반, 알쏭이모자반, 큰잎모자반, 엔도로모자반 및 외톨개모자반과 비교하였고, 이들의 EC50 값을 측정함으로써 본원발명의 톱니모자반 추출물이 다른 모자반류 추출물에 비해 월등히 높은 미백효과가 있음을 확인하였다. In order to prove the superiority of the extract of the present invention on the inhibition of the melanin production of the Korean mushroom repellent moth, it is possible to use other kinds of moths such as the staffs, the horns, the moths, the moths, And the extracts of Solanum tuberosum, and by measuring the EC50 values thereof, it was confirmed that the sawtooth moth extract of the present invention had much higher whitening effect than the other hat repellent extracts.
본 발명의 톱니모자반 추출물의 EC50 값 산출결과, 7.2ug/mL의 값이 도출되었고, 이는 기타 모자반류와 비교하여 최소 13배 이상 효과가 우수한 것으로 확인하였다.As a result of EC50 value calculation of the sawtooth moth extract of the present invention, a value of 7.2 ug / mL was obtained, and it was confirmed that the efficacy was at least 13 times higher than that of other hat repellents.
‘EC50’이라 함은 본원발명에 따른 α-MSH 처리에 의해 생성된 멜라닌 양을 100%라 하였을 때 멜라닌 생성량의 50%를 억제하는 농도를 의미하며, 50% 유효 농도 또는 50% 효능 농도라고 한다. 'EC50' means a concentration that inhibits 50% of the amount of melanin produced when the amount of melanin produced by the α-MSH treatment according to the present invention is 100%, and is referred to as 50% effective concentration or 50% efficacy concentration .
한편, 본 발명자들은 상기 톱니모자반 추출물 중 특히 어떠한 성분이 피부 미백 효과를 가지고 있는지 추가적으로 실험해 보았다.On the other hand, the present inventors have further tested whether any of the above-mentioned Sawmill extracts have a skin whitening effect.
그 결과, 톱니모자반을 주정 (95% 에탄올, v/v)으로 추출한 분획물에서 사가하이드로퀴노익산(SHQ, sagahydroquinoic acid), 사가퀴노익산(SQA, sagaquinoic acid), 사가크로메놀(SCM, sagachromenol)을 분리하였고, 상기의 세 가지 화합물 모두 우수한 티로시나아제 합성 저해능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.As a result, it was found that SHQ, sagahydroquinoic acid (SQA), sagaquinoic acid (SQA), sagachromenol (SCM), and sagachromenol And it was confirmed that all of the above three compounds had excellent tyrosinase synthesis inhibiting ability.
따라서, 본 발명은 톱니모자반 추출물 뿐만 아니라, 사가하이드로퀴노익산(SHQ, sagahydroquinoic acid), 사가퀴노익산(SQA, sagaquinoic acid), 사가크로메놀(SCM, sagachromenol)을 유효성분으로 하는 피부 미백 화장료 조성물을 제공할 수 있다.Accordingly, the present invention provides a skin whitening cosmetic composition comprising, as an active ingredient, not only an extract of Tooth mackerel, but also a combination of sachet hydroquinic acid (SHQ), sagequinoic acid (SQA), and sagachromenol .
본 발명에 따른 톱니모자반 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 추출물은 적절한 용매를 이용하여 톱니모자반으로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 톱니모자반의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.The toothed mothball extract according to the present invention can be obtained by extracting and isolating from nature using an extraction and separation method known in the art, and the extract defined in the present invention can be obtained by extracting from a sawtooth moth with an appropriate solvent And includes, for example, a crude extract of a saw moth, a polar solvent-soluble extract or a non-polar solvent-soluble extract.
상기 톱니모자반으로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 바람직하게는 에탄올(주정), 부탄올 또는 에틸아세테이트를 사용할 수 있다.As an appropriate solvent for extracting the extract from the sawtooth mackerel, any pharmaceutically acceptable organic solvent may be used, and water or an organic solvent may be used. Examples of the solvent include, but are not limited to, purified water, methanol alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ether, benzene, chloroform (including methanol, ethanol, propanol, isopropanol, and butanol) various solvents such as chloroform, ethyl acetate, methylene chloride, hexane and cyclohexane may be used alone or in combination. Preferably, ethanol (alcohol), butanol or ethyl acetate can be used.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 톱니모자반 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.As the extraction method, any one of the methods such as hot water extraction method, cold extraction method, reflux cooling extraction method, solvent extraction method, steam distillation method, ultrasonic extraction method, elution method and compression method can be selected and used. In addition, the desired extract may be further subjected to a conventional fractionation process or may be purified using a conventional purification method. There is no limitation on the production method of the sawtooth extract of the present invention, and any known method may be used.
예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 톱니모자반 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.For example, in the composition of the present invention, the first extract extracted with the hot water extraction method or the solvent extraction method can be prepared into a powder state by an additional process such as vacuum distillation, freeze drying or spray drying have. Further, the primary extract can be further purified by using various chromatographies such as silica gel column chromatography, thin layer chromatography, high performance liquid chromatography and the like, You can get it.
본 발명에 있어서 톱니모자반 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.In the present invention, the teaspoon mushroom extract is a concept that includes all the extracts, fractions and tablets obtained in each step of extraction, fractionation or purification, their diluted solutions, concentrates or dried products.
본 발명의 일실시예에 따른 톱니모자반 주정추출물 및 분획물을 제조하는 방법을 조금 더 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.Methods for preparing extracts and fractions of teaspoon mine according to one embodiment of the present invention will be described in more detail as follows.
본 발명에서는 톱니모자반을 양지에서 자연건조 후, 마쇄하여 얻은 분말 1.5kg을 주정 6L에 넣고 70℃에서 3시간 가량 2회 반복하여 환류냉각 추출한 후, 한외여과기로 이물질을 제거한 후 추출된 잔사로서 톱니모자반 조추출물을 수득할 수 있었다.In the present invention, 1.5 kg of the powder obtained by natural drying and grinding of the saw blades in a sunny place was put in 6 L of a syrup, and the mixture was refluxed and cooled twice at 70 캜 for about 3 hours, and then the foreign substances were removed by an ultrafilter. The crude oil extract was obtained.
상기 톱니모자반 조추출물은 물:에탄올(9:1, v/v)의 혼합용매에 현탁한 후, n-헥산을 이용하여 n-헥산 가용성 분획물을 수득하였다. The crude extract of the sawtooth moths was suspended in a mixed solvent of water: ethanol (9: 1, v / v), and n-hexane soluble fraction was obtained by using n-hexane.
본 발명의 일실시예에 따른 상기 톱니모자반 추출물 또는 이의 분획물은 화장료 조성물에 1ppm 내지 1000ppm의 농도로 포함될 수 있다.The toothed moth extract or the fractions thereof according to an embodiment of the present invention may be contained in the cosmetic composition at a concentration of 1 ppm to 1000 ppm.
이와 같이 톱니모자반으로부터 추출된 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물은 화장품 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 조성물은 상술한 톱니모자반 추출물 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.When the extract or the compound isolated therefrom is prepared from a cosmetic composition as described above, the composition of the present invention may contain components commonly used in the cosmetic composition as well as the above-mentioned Sawmill extract, Antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, customary adjuvants such as pigments and flavoring agents, and carriers.
또한, 본 발명의 조성물은 상술한 톱니모자반 추출물 이외에, 톱니모자반 추출물과 반응하여 피부보호효과를 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용되어오던 유기 자외선 차단제를 혼합하여 사용할 수도 있다.In addition, the composition of the present invention may be mixed with an organic UV blocking agent which has been used in the past so long as it does not deteriorate the skin protecting effect by reacting with the sawtooth moth extract.
유기 자외선 차단제로는 글리세릴파바, 드로메트리졸트리실록산, 드로메트리졸, 디갈로일트리올리에이트, 디소듐페닐디벤즈이미다졸테트라설포네이트, 디에칠헥실부타미도트리아존, 디에칠아미노하이드록시벤조일헥실벤조에이트, 디이에이-메톡시신나메이트, 로우손과 디하이드록시아세톤의 혼합물, 메칠렌비스-벤조트리아졸릴테트라메칠부틸페놀, 4-메칠벤질리덴캠퍼, 멘틸안트라닐레이트, 벤조페논-3(옥시벤존),벤조페논-4, 벤조페논-8(디옥시페벤존), 부틸메톡시디벤조일메탄, 비스에칠헥실옥시페놀메톡시페닐트리아진, 시녹세이트, 에칠디하이드록시프로필파바, 옥토크릴렌, 에칠헥실디메칠파바, 에칠헥실메톡시신나메이트, 에칠헥실살리실레이트, 에칠헥실트리아존, 이소아밀-p-메톡시신나메이트, 폴리실리콘-15(디메치코디에칠벤잘말로네이트), 테레프탈릴리덴디캠퍼설포닉애씨드 및 그 염류, 티이에이-살리실레이트 및 아미노벤조익애씨드(파바)로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 사용할 수 있다.Organic UV protectors include, but are not limited to, glyceryl paraben, drometrizol trisiloxane, drometrizole, dipaloyyl trioleate, disodium phenyldibenzimidazole tetrasulfonate, diethylhexylbutamidotriazone, Benzoylhexyl benzoate, di-methoxy cinnamate, a mixture of Rawson and dihydroxyacetone, methylenebis-benzotriazolyltetramethylbutylphenol, 4-methylbenzylidene camphor, menthyl anthranilate, benzophenone- Benzophenone-3 (oxybenzone), benzophenone-4, benzophenone-8 (dioxyphenylbenzene), butylmethoxydibenzoylmethane, bishexylhexyloxyphenol methoxyphenyltriazine, synoxate, Octyl-p-methoxycinnamate, polysilicon-15 (dimethicone-ethylbenzylphthalate, ethylhexylmethoxycinnamate, ethylhexylmethoxycinnamate, ethylhexylsalicylate, ethylhexyltriazone, isoamyl- Yeah Bit), terephthalic ylidene dikaem peoseol sulphonic Acid and their salts, tea yieyi - may be used salicylate and at least one member selected from the group consisting of amino-benzo ripening Acid (paba).
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 화장료 조성물은 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may be prepared in any form conventionally produced in the art, and examples thereof include solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactants- Containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray, but is not limited thereto. More specifically, the cosmetic composition of the present invention can be manufactured in the form of a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component may include aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, fatty acid amide ether Alkylamido betaine, aliphatic alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative, or ethoxylated glycerol fatty acid ester.
또한, 본 발명은 톱니모자반 추출물 또는 사가하이드로퀴노익산(sagahydroquinoic acid), 사가퀴노익산(sagaquinoic acid), 사가크로메놀(sagachromenol)을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 적용하여 피부미백 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공할 수 있다.The present invention also relates to a cosmetic composition comprising, as an active ingredient, a cosmetic composition comprising an extract of Tortola extract or sagahydroquinoic acid, sagaquinoic acid and sagachromenol as an active ingredient, And a cosmetic method comprising the steps of:
본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.The cosmetic process of the present invention refers to all cosmetic processes using the cosmetic composition of the present invention. That is, all methods known in the art using a cosmetic composition belong to the cosmetic method of the present invention.
본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or may be used in combination with other cosmetic compositions other than the present invention. The cosmetic composition according to the present invention may be used according to a conventional method of use, and may be used in a number of times depending on the skin condition or taste of the user.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing formulation or a surfactant-free cleansing formulation, it may be applied to the skin and then wiped off, washed or rinsed with water. The surfactant-containing cleansing formulation may be a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing towel and a cleansing pack. The surfactant-free cleansing formulation may be a cleansing cream, , Cleansing lotion, cleansing water and cleansing gel, but is not limited thereto.
본 발명에 따르면, 본 발명의 유효성분(톱니모자반 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물)의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001-40중량%이며, 바람직하게는 0.0005-40%이며, 보다 바람직하게는 0.0005-10중량%이다. 상기 유효성분(톱니모자반 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물)의 함량이 0.0001중량% 미만이면 피부 미백 효과가 크게 감소되고, 40중량%를 초과하는 경우에는 피부 자극을 초래할 수 있으며, 제형상의 문제점이 발생할 수 있다.According to the present invention, the content of the active ingredient (trehalose extract or the compound isolated therefrom) of the present invention is 0.0001-40% by weight, preferably 0.0005-40%, more preferably 0.0005-40% -10% by weight. If the content of the active ingredient (the extract of the sawtooth mackerel or the compound separated therefrom) is less than 0.0001% by weight, the skin whitening effect is greatly reduced. If the content is more than 40% by weight, skin irritation may be caused. Lt; / RTI >
한편, 본 발명에 따른 상기 화장료 조성물은 유효성분(톱니모자반 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물)을 나노리포좀 내부에 함유시켜 안정화하여 제형화할 수도 있다. 상기 유효성분(톱니모자반 추출물 또는 이로부터 분리된 화합물)을 나노리포좀 내부에 함유시키면, 유효성분이 안정화되어 제형화시 침전형성, 변색, 변취 등의 문제점을 해결할 수 있으며, 성분의 용해도 및 경피흡수율을 높일 수 있어 상기 추출물로부터 기대되는 효능을 최대로 발현시킬 수 있다.On the other hand, the cosmetic composition according to the present invention may be formulated by incorporating an effective ingredient (a saphenic extract or a compound isolated therefrom) into the nanoliposome and stabilizing it. When the above active ingredient (the extract of Tooth mackerel or the compound isolated therefrom) is contained in the nanoliposome, the active ingredient is stabilized, thereby solving problems such as formation of precipitate, discoloration and detachment during formulation, and solubility and transdermal absorption So that the expected efficacy from the extract can be maximized.
본 발명에서 나노리포좀은 통상적인 리포좀의 형태를 갖는 것으로서 평균 입자 지름이 10~500nm인 리포좀을 의미한다. 본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 나노리포좀의 평균 입자 지름은 50~300nm이며, 더욱 바람직하게는 100~200nm이다. 나노리포좀의 평균 입자 지름이 500nm를 초과하는 경우에는 본 발명에서 달성하고자 하는 기술적 효과 중 피부침투의 개선 및 제형 안정성의 개선이 매우 미약하다.In the present invention, nanoliposome refers to a liposome having a typical liposome form and having an average particle diameter of 10 to 500 nm. According to a preferred embodiment of the present invention, the average particle diameter of the nanoliposome is 50 to 300 nm, more preferably 100 to 200 nm. When the average particle diameter of the nanoliposome exceeds 500 nm, improvement of skin penetration and improvement of formulation stability is very weak among technical effects to be achieved in the present invention.
본 발명에 따라 상기 추출물을 안정화하는데 사용되는 나노리포좀은 폴리올, 유성성분, 계면활성제, 인지질, 지방산 및 물을 포함하는 혼합물에 의해 제조될 수 있다.The nanoliposomes used to stabilize the extract according to the present invention may be prepared by a mixture comprising a polyol, an oily component, a surfactant, a phospholipid, a fatty acid and water.
본 발명의 나노리포좀에 이용되는 폴리올은 특히 제한되지 않으며, 바람직하게는 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 메틸프로판디올, 이소프로필렌글리콜, 펜틸렌글리콜, 에리스리톨, 자일리톨, 솔비톨 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 10~80중량%, 바람직하게는 30~70중량%이다. The polyol used in the nanoliposome of the present invention is not particularly limited and is preferably a polyol such as propylene glycol, dipropylene glycol, 1,3-butylene glycol, glycerin, methylpropanediol, isopropylene glycol, pentylene glycol, erythritol, , Sorbitol, and mixtures thereof. The amount thereof is 10 to 80% by weight, preferably 30 to 70% by weight, based on the total weight of the nanoliposome.
본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 유성(oil) 성분은 당업계에 공지된 다양한 오일이 이용될 수 있으며, 바람직하게는 헥사데칸 및 파라핀 오일과 같은 하이드로카본계 오일, 에스테르계의 합성오일, 디메치콘 및 사이크로메치콘계와 같은 실리콘 오일, 해바라기유, 옥수수유, 대두유, 아보카도유, 참깨유 및 어유와 같은 동식물성 오일, 에톡시레이티드 알킬에테르계오일, 프로폭시레이티드 알킬에테르계오일, 피토스핑고신, 스핑고신 및 스핑가닌과 같은 스핑고노이드 지질, 세레브로사이드 콜레스테롤, 시토스테롤 콜레스테릴설페이트, 시토스테릴설페이트, C10-40 지방알콜 및 이의 혼합물이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여1.0~30.0중량%일 수 있으며, 바람직하게는 3.0~20.0중량%이다. The oil component used in the preparation of the nanoliposome of the present invention may be selected from a variety of oils known in the art and is preferably a hydrocarbon oil such as hexadecane and paraffin oil, Vegetable oils such as silicon oil such as dimethicone and cyclomethicone, sunflower oil, corn oil, soybean oil, avocado oil, sesame oil and fish oil, ethoxylated alkyl ether oils, propoxylated alkyl ether oils , Sphingoid lipids such as phytosphingosine, sphingosine and sphinganine, celecrose cholesterol, sitosterol cholesteryl sulfate, cetostearyl sulfate, C10-40 fatty alcohols and mixtures thereof. The amount thereof may be 1.0 to 30.0% by weight, and preferably 3.0 to 20.0% by weight based on the total weight of the nanoliposome.
본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 계면활성제는 당업계에 공지된 어떠한 것도 사용할 수 있다. 예를 들어, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용될 수 있다. 바람직하게는 음이온성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제이다. 음이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알킬아실글루타메이트, 알킬포스페이트, 알킬락틸레이트, 디알킬포스페이트 및 트리알킬포스페이트를 포함한다. 비이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알콕시레이티드 알킬에테르, 알콕시레이티드 알킬에스테르, 알킬폴리글리코사이드, 폴리글리세릴에스테르 및 슈가에스테르를 포함한다. 특히 바람직한 계면활성제는 비이온성 계면활성제에 속하는 폴리솔베이트류이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.1~10중량%일 수 있으며, 바람직하게는 0.5~5.0중량%이다. Any surfactant known in the art may be used as the surfactant used in the preparation of the nanoliposome of the present invention. For example, anionic surfactants, cationic surfactants, amphoteric surfactants and nonionic surfactants can be used. Preferred are anionic surfactants and nonionic surfactants. Specific examples of anionic surfactants include alkyl acyl glutamates, alkyl phosphates, alkyl lactylates, dialkyl phosphates and trialkyl phosphates. Specific examples of nonionic surfactants include alkoxylated alkyl ethers, alkoxylated alkyl esters, alkyl polyglycosides, polyglyceryl esters and sugar esters. Particularly preferred surfactants are polysorbates belonging to nonionic surfactants. The amount thereof may be 0.1 to 10% by weight, preferably 0.5 to 5.0% by weight, based on the total weight of the nanoliposome.
본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 또 다른 성분인 인지질은 양쪽친화성 지질이 이용되며, 천연 인지질(예를 들어, 난황 레시틴 또는 대두 레시틴, 스핑고마이엘린) 및 합성 인지질(예를 들어, 디팔미토일포스파티딜콜린 또는 수첨 레시틴)을 포함하며, 바람직하게는 레시틴이다. 특히, 대두 또는 난황에서 추출한 천연 유래의 불포화 레시틴 또는 포화 레시틴이 바람직하다. 통상적으로 천연 유래의 레시틴은 포스파티딜콜린의 양이 23~95%, 그리고 포스파디딜에탄올아민의 양이 20% 이하이다. 본 발명의 나노리포좀의 제조에 있어서, 인지질의 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.5~20.0중량%이며, 바람직하게는 2.0~8.0중량%이다.The phospholipid, another component used in the preparation of the nanoliposomes of the present invention, is a lipophilic lipid that is used with both affinity lipids and is composed of natural phospholipids (e.g., egg yolk lecithin or soy lecithin, sphingomyelin) Dipalmitoyl phosphatidylcholine or hydrogenated lecithin), preferably lecithin. In particular, unsaturated lecithin or saturated lecithin derived from natural origin extracted from soybean or egg yolk is preferable. Normally, the amount of phosphatidylcholine is 23 to 95% and the amount of phosphatidylethanolamine is 20% or less in natural derived lecithin. In the production of the nanoliposome of the present invention, the amount of the phospholipid to be used is 0.5 to 20.0% by weight, preferably 2.0 to 8.0% by weight based on the total weight of the nanoliposome.
본 발명의 나노리포좀 제조에 이용되는 지방산은 고급 지방산으로서, 바람직하게는 C12-22 알킬 체인의 포화 또는 불포화 지방산으로서, 예컨대, 라우린산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아린산, 올레산 및 리놀레산을 포함한다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.05~3.0중량%일 수 있으며, 바람직하게는 0.1~1.0중량%이다.The fatty acid used in the production of the nanoliposome of the present invention is a higher fatty acid, preferably saturated or unsaturated fatty acids of C12-22 alkyl chain, such as lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid and linoleic acid . The amount thereof may be 0.05 to 3.0% by weight, preferably 0.1 to 1.0% by weight, based on the total weight of the nanoliposome.
본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 물은 일반적으로 탈이온화된 증류수이며, 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 5.0~40중량%일 수 있다.The water used in the preparation of the nanoliposome of the present invention is generally deionized distilled water, and the amount thereof may be 5.0-40 wt% based on the total weight of the nanoliposome.
나노리포좀의 제조는 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 이루어질 수 있으나, 가장 바람직하게는 상기 성분들을 포함하는 혼합물을 고압 호모게나이저에 적용하여 제조된다. 고압 호모게나이저에 의한 나노리포좀의 제조는 소망하는 입자 크기에 따라 다양한 조건(예: 압력, 횟수 등)으로 실시할 수 있으며, 바람직하게는 600~1200bar의 압력 하에서 1~5회 고압 호모게나아저를 통과하도록 하여 나노리포좀을 제조할 수 있다.The preparation of nanoliposomes can be accomplished through a variety of methods known in the art, but most preferably is made by applying a mixture comprising the ingredients to a high pressure homogenizer. The preparation of a nanoliposome by a high pressure homogenizer can be carried out under various conditions (for example, pressure, number of times, etc.) depending on a desired particle size, and preferably at a high pressure homogenizer So that the nanoliposome can be produced.
본 발명의 화장료 조성물을 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부미백 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or it may be used in combination with other cosmetic compositions other than the present invention. The cosmetic composition having an excellent skin whitening effect according to the present invention can be used according to a conventional method of use, and may be used in a number of times depending on the skin condition or taste of the user.
이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It will be apparent to those skilled in the art that these embodiments are merely illustrative of the present invention and that the scope of the present invention is not limited to these embodiments.
<실시예 1>≪ Example 1 >
톱니모자반Saw blade 주정추출물의 제조 Manufacture of alcohol extracts
본 발명에 사용한 톱니모자반은 부산시 기장군과 경남 통영시에서 자생하는 천연산을 스쿠버를 동원하여 채취하였고, 기장산의 종확인은 부경대학교 생태공학과 최창근 교수, 통영산의 종확인은 경상대학교 해양생명과학과의 김남길 교수가 수행하였다. 톱니모자반을 양지에서 자연건조 후, 마쇄하여 얻은 분말 1.5kg을 주정 6L에 넣고 70℃에서 3시간 가량 2회 반복하여 환류냉각 추출한 후, 한외여과기 (MWCO 50 kDa)로 이물질을 제거하였다. 여과 추출물은 진공회전농축기로 40℃에서 주정을 제거한 후, 추출된 잔사로서 조추출물 160g을 수득하였다(본 발명에서는 톱니모자반 주정추출물을 이하 “ESS”로 약칭함). 이렇게 수득한 톱니모자반 주정추출물은 4℃온도에서 냉장보관하면서 하기 실험의 시료로 사용하였다. The sawtooth moths used in the present invention were obtained by scuba diving using natural scavengers from Gyujang-gun and Gyeongnam Tongyeong-si in Busan. Professor Chang-geun Choi of Ecological Engineering Department of Pukyong National University and Professor of Department of Marine Life Science, Gyeongsang National University Professor Kim Nam-gil performed this. The toothed mushroom was naturally dried in sunshine, and 1.5 kg of the obtained powder was put into 6 L of a syrup, and the mixture was refluxed and cooled twice at 70 캜 for about 3 hours, and then dehydrated by an ultrafilter (
<실시예 2>≪ Example 2 >
톱니모자반 주정추출물로부터 유효성분인 사가하이드로퀴노익산, 사가크로메놀 및 사가퀴노익산의 분리Separation of Saga Hydroquinone, Sagacromenol and Sagaquinoxaline as Effective Ingredients from Extracts of Sawtooth Matter
<2-1> 사가하이드로퀴노익산의 분리<2-1> Isolation of Saga Hydroquinoxaline
톱니모자반 주정추출물을 15 g을 물:에탄올 (9:1, v/v)의 혼합용매 1 리터에 녹인 후 분액깔때기에 넣고 동량의 n-hexane을 넣어 평형화시킨 후 위층의 n-hexane 가용부를 모아 무수황산나트륨으로 탈수한 다음 농축하여 n-hexane 분획물을 분리하였다. 분리된 n-hexane 분획물 12.2g을 120 mL methanol에 녹여 membrane filter로 여과 후 200 uL을 주입하여 Phenomenex C18(2) (15μm, 21.2 mm × 250 mm) 칼럼이 장착된 HPLC로 4개의 획분으로 분리하였다(도 1 참조). 크로마토그래피의 이동상으로는 메탄올 (A)과 물 (B)의 혼합용매를 사용하였으며 유속은 7 mL로 설정하였다. 크로마토그래피 조건은 처음 A/B(90/10) ∼ A/B(94/6) 농도로 33분간, A/B(94/6) ∼ A/B(100/0) 농도로 2 분간, A/B(100/0)로 10 분간 씻어준 후에 A/B(90:10) 농도로 10분간 칼럼을 평형화하였다. 크로마토그래피는 Autosampler로 자동으로 시료를 주입하는 방식으로 50-100회 실시하여 대량의 1번 분획물의 1차 획분을 얻었다. Sawtooth mung bean extract 15 g was dissolved in 1 liter of a mixed solvent of water: ethanol (9: 1, v / v), placed in a separatory funnel, equilibrated with the same amount of n-hexane, and the upper n-hexane- After dehydration with anhydrous sodium sulfate, the n-hexane fraction was isolated by concentration. The separated n-hexane fraction (12.2 g) was dissolved in 120 mL of methanol, filtered through a membrane filter, and then 200 μL was injected and separated into four fractions by HPLC equipped with Phenomenex C18 (2) (15 μm, 21.2 mm × 250 mm) column (See Fig. 1). As a mobile phase of the chromatography, a mixed solvent of methanol (A) and water (B) was used and the flow rate was set to 7 mL. The chromatographic conditions were A / B (90/10) to A / B (94/6) for 33 minutes, A / B (94/6) to A / B / B (100/0) for 10 minutes and the column was equilibrated for 10 minutes at A / B (90:10) concentration. Chromatography was performed 50-100 times by automatic sample injection with Autosampler to obtain a large fraction of the first fraction of fraction No. 1.
대량으로 얻은 1차 획분의 순도를 높이기 위하여 동일한 기기와 칼럼을 사용하였다. 크로마토그래피 조건은 처음 A/B(85/15) ∼ A/B(87/13) 농도로 26분간, A/B(87/13) ∼ A/B(100/0) 농도로 2 분간, A/B(100/0)로 6 분간 씻어준 후에 A/B(87:13) 농도로 10분간 칼럼을 평형화하였다. 크로마토그래피는 Autosampler로 자동으로 시료를 주입하는 방식으로 실시하여 보다 순도가 높은 1번 분획물의 2차 획분을 얻었다(도 2 참조). The same instrument and column were used to increase the purity of the first fraction obtained in large quantities. The chromatographic conditions were A / B (85/15) to A / B (87/13) for 26 min, A / B (87/13) to A / B / B (100/0) for 6 minutes and the column was equilibrated for 10 minutes at A / B (87:13) concentration. Chromatography was performed by automatically injecting the sample into an autosampler to obtain a second fraction of
1번 분획물의 2차 획분중 1번을 동일한 조건으로 재크로마토그래피하여 정제하였으며 (523 mg), 분석용칼럼 (Phenomenex C18(2), 3 μm, 3 mm × 150 mm)으로 분석한 결과 단일물질로 판명되었으며, 이를 NMR로 분석한 결과 사가하이드로퀴노익산(sargahydroquinoic acid, 이하 “SHQ”)로 판명되었다(도 3 참조). One of the second fractions of fraction No. 1 was purified by rechromatography (523 mg) under the same conditions and analyzed with an analytical column (Phenomenex C18 (2), 3 μm, 3 mm × 150 mm) , Which was analyzed by NMR and found to be sargahydroquinoic acid (hereinafter referred to as "SHQ") (see FIG. 3).
<화학식 1> 사가하이드로퀴노익산 (sagahydroquinoic acid)(1) Sagahydroquinoic acid
<2-2> 사가크로메놀의 분리<2-2> Isolation of Sagar Chromenol
도 1의 2번 분획물을 실시예 2-1의 1번 분획물과 동일한 HPLC 장치와 칼럼을 사용하여 재크로마토그래피하였다. 크로마토그래피 조건은 처음 A/B(91.5/8.5) ∼ A/B(92.2/7.8) 농도로 26분간, A/B(92.2/7.8) ∼ A/B(100/0) 농도로 2 분간, A/B(100/0)로 6 분간 씻어준 후에 A/B(91.5:8.5) 농도로 10분간 칼럼을 평형화하였다. 크로마토그래피는 Autosampler로 자동으로 시료를 주입하는 방식으로 50-100회 실시하여 대량의 2번 분획물의 2차 획분을 얻었다(도 4 참조). 도 4에 나타난바와 같이 2번 분획물은 3개의 피크를 나타내었으며, 이중 2번 피크 (Frc2-2)를 다시 정제하여 도 5와 같은 크로마토그램을 얻었다 (126 mg). 분리물을 NMR로 분석한 결과 사가크로메놀(sargachromenol, 이하 SCA)로 판명되었다(도 5 참조). The
<화학식 2> 사가크로메놀 (sagachromenol)≪
<2-3> 사가퀴노익산의 분리<2-3> Isolation of Saga cuneoic acid
도 1의 3번 분획물을 실시예 2-1의 1번 분획물과 동일한 HPLC 장치와 칼럼을 사용하여 재크로마토그래피하였다. 크로마토그래피 조건은 처음 A/B(93.4/6.6) ∼ A/B(93.8/6.2) 농도로 20분간, A/B(93.8/6.2) ∼ A/B(100/0) 농도로 2 분간, A/B(100/0)로 6 분간 씻어준 후에 A/B(93.8/6.2) 농도로 10분간 칼럼을 평형화하였다. 크로마토그래피는 Autosampler로 자동으로 시료를 주입하는 방식으로 50-100회 실시하여 대량의 3번 분획물의 2차 획분을 얻었다(도 6 참조). 도 6에 나타난바와 같이 3번 분획물은 4개의 피크를 나타내었으며, 이중 4번 피크 (Frc3-4)를 다시 정제하여 도 7와 같은 크로마토그램을 얻었다 (171 mg). 분리물을 NMR로 분석한 결과 사가퀴노익산(sargaquinoic acid, 이하 SQA)로 판명되었다(도 7 참조). The fraction No. 3 in Fig. 1 was re-chromatographed using the same HPLC apparatus and column as the fraction No. 1 in Example 2-1. The chromatographic conditions were A / B (93.4 / 6.6) to A / B (93.8 / 6.2) for 20 min, A / B (93.8 / / B (100/0) for 6 minutes and the column was equilibrated for 10 minutes at A / B (93.8 / 6.2) concentration. Chromatography was performed 50-100 times by automatic sample injection with Autosampler to obtain a large fraction of the second fraction of the fraction No. 3 (see FIG. 6). As shown in FIG. 6, the fraction No. 3 showed four peaks. The peak No. 4 (Frc 3-4) was further purified to obtain a chromatogram as shown in FIG. 7 (171 mg). The separated product was analyzed by NMR and found to be sargaquinoic acid (hereinafter referred to as SQA) (see FIG. 7).
<화학식 3> 사가퀴노익산 (sagaquinoic acid)≪
<실험예 1><Experimental Example 1>
톱니모자반 추출물의 세포독성 평가Evaluation of Cytotoxicity of Extract of Sawtooth Moth
본 발명자들은 실시예 1 및 2의 방법으로 제조된 톱니모자반 주정 추출물(ESS), 사가하이드로퀴노익산(본 발명에서는 이하 “SHQ”로 명명함), 사가퀴노익산(본 발명에서는 이하 “SQA”로 명명함) 및 사가크로메놀(본 발명에서는 이하 “SCM”)의 세포독성을 평가하였다. The inventors of the present invention have found that a toothed mucilage extract (ESS), a saccharide hydroquinic acid (hereinafter referred to as "SHQ" in the present invention), a sagaquinoxanic acid (hereinafter referred to as "SQA" (Hereinafter referred to as " SCM ") and sagarpromenol (hereinafter referred to as " SCM "
자세하게는 상기 실시예 1 및 2를 통해 제조한 톱니모자반 주정추출물 및 화합물을 농도별로 B16F10 세포에 처리하여 세포 생존율을 MTS kit (ellTiter96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit)를 사용하여 엠티에스(MTS, (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2-H-tetrazolium) 분석하였다. well 당 B16F10 세포를 6 x 103 cells 농도로 세포를 분주하여 24 시간 배양 후, 각각의 추출물을 농도별로 1시간 동안 전처리한 뒤, α-MSH 1 μM로 24시간 처리 및 배양한 후, 95 μl의 배지와 5 μl의 MTS 용액을 가한 뒤 3시간 후 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.In detail, B16F10 cells were treated with the extracts and compounds of teaspoon mushroom prepared in Examples 1 and 2, and the cell viability was measured by MTS kit (ellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit) B16F10 cells per well were cultured at 6 × 10 3 cells / well in the presence of 1 mM Tris-HCl After 24 hours of incubation, each extract was pretreated for 1 hour at each concentration, treated with 1 μM α-MSH for 24 hours and cultured, and then 95 μl of medium and 5 μl of MTS solution were added After 3 hours, absorbance was measured at 490 nm.
<1-1> 톱니모자반 주정추출물의 세포독성 ≪ 1-1 > Cytotoxicity of Extract of Spearmill
본 발명자들은 실시예 1의 방법으로 제조된 톱니모자반 주정추출물(ESS)의 세포독성 측정을 위해 B16F10 세포에 주정추출물을 5, 7.5, 15, 20 ㎍/ml로 처리하여 세포 생존율을 MTS assay로 측정하였다. The present inventors measured the cell viability by the MTS assay by treating the extract of B16F10 with 5, 7.5, 15, and 20 μg / ml of the extract of B16F10 cells to determine the cytotoxicity of the extracts of Echinochloa crus-galli (ESS) prepared by the method of Example 1 Respectively.
톱니모자반 주정추출물의 세포독성 측정 결과, 톱니모자반 주정추출물은 20㎍/ml 이하의 범위에서 B16F10 세포주에 세포독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도 8 참조).As a result of the cytotoxicity measurement of the extracts of teaspoon mushroom, it was confirmed that the extract of teaspoon mushroom did not show cytotoxicity on the B16F10 cell line in the range of 20 / / ml or less (see FIG. 8).
<1-2> 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가하이드로퀴노익산의 세포독성<1-2> Cytotoxicity of Compound Saga Hydroquinoxaline Derived from Spearman's Extract
본 발명자들은 실시예 2의 방법으로 제조된 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가하이드로퀴노익산(SHQ)의 세포독성 측정을 위해 B16F10 세포에 SHQ를 2, 2.5, 3 μm의 농도로 처리하여 세포 생존율을 MTS assay로 측정하였다. The present inventors measured the cell survival rate of B16F10 cells at a concentration of 2, 2.5, and 3 μm by measuring the cytotoxicity of hydroquinone acid (SHQ) produced by the method of Example 2, assay.
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가하이드로퀴노익산(SHQ)의 세포독성 측정 결과, SHQ는 3 μM 이하의 범위에서 B16F10 세포주에 세포독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도 9 참조).As a result of the cytotoxicity measurement of the compound saga hydroquinoxalic acid (SHQ) derived from the teaspoon of Chenopodium album filtrate, SHQ showed no cytotoxicity in the B16F10 cell line in the range of 3 μM or less (see FIG. 9).
<1-3> 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가퀴노익산의 세포독성≪ 1-3 > Cytotoxicity of Saga cuneoic acid derived from Tephriton sp. Extract
본 발명자들은 실시예 2의 방법으로 제조된 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가퀴노익산(SQA)의 세포독성 측정을 위해B16F10 세포에 SQA를 2, 2.5, 3 μm의 농도로 처리하여 세포 생존율을 MTS assay로 측정하였다. The present inventors measured SQA at a concentration of 2, 2.5, and 3 μm on B16F10 cells by measuring the cell survival rate using an MTS assay .
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가퀴노익산(SQA)의 세포독성 측정 결과, SQA는 3 μM 이하의 범위에서 B16F10 세포주에 세포독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도 10 참조).As a result of the cytotoxicity measurement of the compound sagaquinoxanic acid (SQA) derived from the teaspoon of Chenopodium albumaline, SQA showed no cytotoxicity in the B16F10 cell line in the range of 3 μM or less (see FIG. 10).
<1-4> 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가크로메놀의 세포독성≪ 1-4 > Cytotoxicity of sagarchromenol derived from extracts of teaspoon mine extract
본 발명자들은 실시예 2의 방법으로 제조된 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가크로메놀(SMC)의 세포독성 측정을 위해 B16F10 세포에 SCM를 1, 2, 4, 6 μm의 농도로 처리하여 세포 생존율을 MTS assay하였다. The present inventors measured the cell viability of B16F10 cells at a concentration of 1, 2, 4, and 6 μm by measuring the cytotoxicity of chromenol (SMC) MTS assay.
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 SCM의 세포독성 측정 결과, SCM는 6 μM 이하의 범위에서 B16F10 세포주에 세포독성이 나타나지 않음을 확인하였다(도 11 참조).As a result of the cytotoxicity measurement of the compound SCM derived from the teaspoon of spore extract, SCM showed no cytotoxicity on the B16F10 cell line in the range of 6 μM or less (see FIG. 11).
종합적으로 톱니모자반 주정추출물 및 주정추출물 유래 화합물을 처리한 실험군에서 100% 이상의 세포 생존율을 나타내어 본 발명의 톱니모자반 주정추출물, 사가하이드로퀴노익산, 사가퀴노익산 및 사가크로메놀이 피부에 안전한 소재임을 확인하였다.Overall, the cell survival rate was 100% or higher in the experimental group treated with the extracts of the extracts of the Tohmae mushroom extract and the extract of the mushroom extract. Thus, it was confirmed that the extracts of the teaspoon mushroom extract of the present invention, saga hydroquinone acid, sagaquinoxy acid and sagacromenol were safe for skin Respectively.
<실험예 2> <Experimental Example 2>
톱니모자반 추출물 또는 그로부터 분리된 화합물의 B16F10 세포에 대한 멜라닌 생합성 저해 효과Inhibitory effect on melanin biosynthesis of B16F10 cells in extracts of or from leaves
본 발명자들은 톱니모자반 추출물이 멜라닌 생합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포에 추출물을 농도별로 처리하고 세포 내 멜라닌 함량을 측정하였다. 자세하게는, B16F10세포를 12 웰 플레이트에 웰당 8×104 세포를 분주한 후, 24시간 뒤 주정추출물 또는 화합물을 농도별로 1시간 동안 전처리한 뒤, α-MSH 1 μM로 72시간 동안 처리하고 72시간 뒤에 PBS로 2번 씻은뒤, 1N NaOH로 cell을 녹인 다음, eppendorf tube에 담아서 30 min 동안 60℃에서 가열한다. 세포용해물을 5000 x g에서 5분간 원심분리한 후 상층액의 흡광도를 405 nm에서 측정하였다.The present inventors examined the effect of extracts on the melanin biosynthesis of Bombyx mori extract on B16F10 cells at various concentrations and measured intracellular melanin content. Specifically, B16F10 cells were plated at 8 × 10 4 cells / well in a 12-well plate. After 24 hours, the extract or compound of the alcohol was pretreated for 1 hour by concentration, treated with 1 μM of α-MSH for 72 hours, After 2 hours, wash with PBS, dissolve the cells with 1N NaOH, heat in an eppendorf tube and heat at 60 ° C for 30 min. Cell lysates were centrifuged at 5000 xg for 5 min and the absorbance of the supernatant was measured at 405 nm.
<2-1> 톱니모자반 주정추출물 처리 세포 내 멜라닌 함량 측정<2-1> Determination of Melanin Content in Cells Treated with Extract of Teapot
톱니모자반 주정추출물(ESS)이 멜라닌 생합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포주에 15, 20, 25 ㎍/ml의 톱니모자반 주정추출물을 처리하고 1 시간 후, 1uM의 a-MSH를 처리하여 72시간 배양하여 세포내 멜라닌 함량을 측정하였다. 도 12에 나타낸 바와 같이, 톱니모자반 주정추출물은 흑색종 세포내 멜라닌 생합성을 농도의존적으로 저해시키는 것으로 나타났다.To investigate the effect of ESS on the melanin biosynthesis, B16F10 cells were treated with 15, 20, and 25 ㎍ / ml Sawtooth milt seed extract and 1 hour after treatment with 1 μM a-MSH. And the melanin content in the cells was measured. As shown in Fig. 12, the extracts of teaspoon mushrooms inhibited melanin biosynthesis in melanoma cells in a concentration-dependent manner.
<2-2> 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가하이드로퀴노익산 처리 세포 내 멜라닌 함량 측정<2-2> Determination of melanin content in cells treated with a compound of sardine hydroquinone acid derived from extracts of Tephritidae
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물이 멜라닌 생합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포주에 1, 2, 3 μm 농도의 사가하이드로퀴노익산(SHQ) 화합물을 처리하고 1시간 후, 1 uM의 a-MSH를 처리하여 72 시간 배양하여 세포내 멜라닌 함량을 측정하였다. 도 13에 나타낸 바와 같이, 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가하이드로퀴노익산(SHQ)은 세포내 멜라닌 생합성을 농도의존적으로 저해시키는 것으로 나타났다.In order to investigate the effect of the extract from the extracts of melanin on the melanin biosynthesis, B16F10 cells were treated with 1, 2, and 3 μM saghydroquinoxanic acid (SHQ) compounds and treated with 1 μM a-MSH For 72 hours to measure intracellular melanin content. As shown in Fig. 13, hydroquinone acid (SHQ), which is a compound derived from a teaspoon of alcohol extract, inhibits intracellular melanin biosynthesis in a concentration-dependent manner.
<2-3> 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가퀴노익산의 멜라닌 함량 측정<2-3> Determination of Melanin Content of Saga cuneoic Acid Derived from Extract of Teapot Matter
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물이 멜라닌 생합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포주에 2, 2.5, 3 μm 농도의 사가퀴노익산(SQA) 화합물을 처리하고 1시간 후, 1 uM의 a-MSH를 처리하여 72 시간 배양하여 세포내 멜라닌 함량을 측정하였다. 도 14에 나타낸 바와 같이, 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가퀴노익산(SQA)은 세포내 멜라닌 생합성을 농도의존적으로 저해시키는 것으로 나타났다.In order to examine the effect of the extract from the extract of Sawtooth Bombyx mori extract on melanin biosynthesis, B16F10 cells were treated with 1, 2, 2.5 and 3 μg of SAGA and 1 μM of a-MSH The cells were incubated for 72 hours to measure the intracellular melanin content. As shown in Fig. 14, it was shown that the compound of squeeze mung bean extract-derived compound, quinoxalic acid (SQA), inhibited intracellular melanin biosynthesis in a concentration-dependent manner.
<2-4> 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가크로메놀의 멜라닌 함량 측정<2-4> Determination of Melanin Contents of Sagar Chromenol Derived from Extract of Teapot
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가크로메놀(SCM)이 멜라닌 생합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포주에 3, 4, 5 μm의 사가크로메놀(SCM) 화합물을 처리하고 1시간 후, 1 uM의 a-MSH를 처리하여 72 시간 배양하여 세포내 멜라닌 함량을 측정하였다. 도 15에 나타낸 바와 같이, 톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가크로메놀(SCM)은 흑색종 세포내 멜라닌 생합성을 저해시키는 것으로 나타났다.To investigate the effect of sagarchromenol (SCM) on the biosynthesis of melanin, the B16F10 cell line was treated with 3, 4, and 5 μm sagarchromenol (SCM) compound and after 1 hour, 1 μM a -MSH and cultured for 72 hours to measure intracellular melanin content. As shown in FIG. 15, it was found that chromanol (SCM), which is a compound derived from a toothed mung bean extract, inhibits melanin biosynthesis in melanoma cells.
<실험예 3> <Experimental Example 3>
톱니모자반 추출물 또는 그로부터 분리된 화합물의 티로시나아제 효소의 활성 저해 평가Assessment of Inhibition of Activity of Tyrosinase Enzymes of Extract of Sawtooth moth or Extracted Compounds Thereof
본 발명의 톱니모자반 추출물이 멜라닌 생성에 중요한 효소인 티로시나아제와 멜라닌 생성 신호전달기전에 중요한 ERK의 인산화 조절을 통한 미백효과가 있는지 확인하고자 하였다. 이에 본 발명에서는 ERK의 인산화 정도를 측정하여 톱니모자반 추출물이 MITF의 활성화를 억제하여 미백효과를 나타내는지 확인하기 위하여 B16F10 세포에서 톱니모자반 추출물의 억제 효과를 Western blot으로 확인하였다. 즉, 시료를 처리한 세포를 일정 시간 배양한 후 세포의 단백질을 회수하고, 각각을 Western blot 분석으로 단백질 발현량을 분석하였다.It was tried to determine whether the extract of Tooth mothball of the present invention has a whitening effect through regulation of phosphorylation of ERK which is important for tyrosinase and melanin signal transduction mechanism which are important enzymes for melanin production. In the present invention, the degree of phosphorylation of ERK was measured, and the inhibitory effect of the Sawtooth mildew extract on B16F10 cells was confirmed by Western blotting to determine whether the extract of Sawtooth moth was inhibiting the activation of MITF and exhibiting a whitening effect. That is, the cells treated with the sample were incubated for a certain period of time, and the protein of the cells was recovered and the amount of protein expression was analyzed by Western blot analysis.
톱니모자반 주정추출물 유래 화합물 사가크로메놀(SCM)이 멜라닌 생합성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 B16F10 세포주에 상기 실시예 1을 통해 제조된 본 발명의 톱니모자반 주정추출물 및 헥산분획물을 각각 농도별로 화합물을 처리하고 1시간 후, 1 uM의 a-MSH를 처리하여 72시간 배양하여 1% 프로테아제 억제제(protease inhibitor)를 넣은 RIPA 버퍼로 단백질을 추출한 후 4℃에서 12,000 rpm으로 25분간 원심 분리하여 상등액을 취하였다. 단백질 함량은 소 혈청 알부민(bovine serum albumin)을 표준물질로 BCA 프로테인 에세이 키트(Pierce, Rockford, IL, USA)를 사용하여 정량하였다. 20-40 μg의 단백질을 5X SDS 샘플 버퍼에 넣고 100℃ 에서 10분간 가열하여 변성(denaturation)시킨 후 전기영동을 실시하였다. 10% SDS 폴리아크릴아마이드 젤(polyacrylamide gel)에서 120V로 2시간동안 전기영동한 후 니트로셀룰로오스 멤브레인(nitrocellulose membrane)으로 transfer시키고 5% 스킴 밀크(skim milk)를 함유한 차단 용액(blocking solution)에서 1시간 동안 반응시켰다. 1차 항체를 1:1000로 희석하여 상온에서 1시간동안 반응시킨 후 Tris-Buffered Saline Tween-20(TBS-T)으로 10분씩 3번 세척하였다. 그 후 1:5000의 비율로 희석한 2차 항체로 1시간 동안 상온에서 반응시킨 후 TBS-T로 10분씩 4번 세척하였다. ECL western blotting substrate(Thermo Scientific)를 이용하여 단백질의 발현량 차이를 luminoimager (ChemiDoc™ XRS+, BIO-RAD)이용해 관찰하였다.To investigate the effect of sagarchromenol (SCM) on the melanin biosynthesis, the extracts of Tohmae mushroom extract and hexane fraction of the present invention prepared in Example 1 were added to the B16F10 cell line, After 1 hour, 1 μM of a-MSH was treated and cultured for 72 hours. Proteins were extracted with RIPA buffer containing 1% protease inhibitor, followed by centrifugation at 12,000 rpm for 25 minutes at 4 ° C. to obtain supernatant . Protein content was quantified by using bovine serum albumin as a standard substance using a BCA protein assay kit (Pierce, Rockford, Ill., USA). 20-40 μg of the protein was put into a 5 × SDS sample buffer and denatured by heating at 100 ° C. for 10 minutes and then subjected to electrophoresis. After electrophoresis in a 10% SDS polyacrylamide gel at 120 V for 2 hours, the membrane was transferred to nitrocellulose membrane and blocked in a blocking solution containing 5% skim milk. Lt; / RTI > The primary antibody was diluted 1: 1000, reacted at room temperature for 1 hour, and washed with Tris-Buffered Saline Tween-20 (TBS-T) three times for 10 minutes each. Then, the reaction was performed with a secondary antibody diluted at a ratio of 1: 5000 at room temperature for 1 hour and then washed with TBS-T four times for 10 minutes each. Differences in protein expression were observed using a luminoimager (ChemiDoc ™ XRS +, BIO-RAD) using an ECL western blotting substrate (Thermo Scientific).
그 결과, 톱니모자반 주정추출물(ESS), 사가하이드로퀴노익산(SHQ), 사가퀴노익산(SQA) 및 사가크로메놀(SCM)은 ERK의 인산화를 효과적으로 억제시키는 것으로 확인하였고, 이에 따라 티로시나아제의 발현량도 감소하는 것을 통해 톱니모자반 주정추출물은 미백효과가 있음을 확인하였다(도 16 내지 19 참조).As a result, it was confirmed that EGF, SQH, SQA and SCM effectively inhibited the phosphorylation of ERK. Thus, it was confirmed that tyrosinase (SQA) and sagaproic acid And the amount of expression was also decreased, thereby confirming the whitening effect of the teaspoon extract (see Figs. 16 to 19).
<비교예> <Comparative Example>
톱니모자반Saw blade 추출물 또는 그로부터 분리된 화합물과 국내 Extracts or compounds isolated therefrom and domestic 연안산Yan An Mountain 모자반류의 멜라닌 생성억제효과 Inhibitory effect of capillary reversal on melanin production
본 발명의 톱니모자반 추출물이 국내 연안산 모자반류의 멜라닌 생성억제능과 비교하여 우수함을 입증하기 위해 다른 모자반으로 참모자반, 괭생이모자반, 왜모자반, 알쏭이모자반, 큰열매모자반, 엔도오모자반 및 외톨개모자반과 비교하였고, 이들의 EC50 값을 측정함으로써 본원발명의 톱니모자반 추출물이 다른 모자반류 추출물에 비해 월등히 높은 미백효과가 있음을 확인하였다.In order to prove the superiority of the extract of the present invention on the inhibition of the melanin production of the Korean mulberry harvest moth, it was found that the other mulberry cultivars such as the chief serpent, horny moth moth moth, moth moth moth moth moth moth moth moth moth moth moth moth moth moth moth, The EC50 value of these extracts was compared with that of the seedless moth, and it was confirmed that the sawtooth moth extract of the present invention had a much higher whitening effect than the other moth repulsive extracts.
본 발명의 톱니모자반 추출물의 EC50 값 산출결과, 7.2ug/mL의 값이 도출되었고, 이는 기타 모자반류와 비교하여 최소 13배 이상 효과가 우수한 것으로 확인하였다(표 1 참조).As a result of calculation of the EC50 value of the sawtooth mildew extract of the present invention, a value of 7.2 ug / mL was obtained, and it was confirmed that the efficacy was at least 13 times higher than that of the other hatchbacks (see Table 1).
통계처리Statistical processing
각 실험은 3회 이상 반복실험을 통하여 그 결과를 얻어 각각의 시료농도에 대해 평균± 표준편차로 나타내었다. 각 시료농도군에 대한 유의차 검정은 대조군과 비교하여 Students t test 한 후 P < 0.05 값을 통계적으로 유의성 있는 결과로 간주하였다.Each experiment was repeated three times or more, and the results were expressed as mean ± standard deviation for each sample concentration. Significant difference test for each sample concentration group was considered as statistically significant result after Student t test compared with control group.
<제조예 1>≪ Preparation Example 1 &
본 발명의 미백 화장료 조성물 제조The whitening cosmetic composition preparation of the present invention
<1-1> 유연화장수(skin)<1-1> Softened skin (skin)
본 발명의 톱니모자반 주정추출물, 사가하이드로퀴노익산, 사가퀴노익산 또는 사가크로메놀을 함유한 유연화장수(skin)를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다. The softened skin containing the teaspoon mine extract of the present invention, sago hydroquinone acid, sagaquinoxanic acid or sagacromenol of the present invention was prepared in a conventional manner at the following proportions.
<1-2> 영양화장수(lotion)<1-2> Nourishing lotion
본 발명의 톱니모자반 주정추출물, 사가하이드로퀴노익산, 사가퀴노익산 또는 사가크로메놀을 함유한 영양화장수(lotion)를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다. Nutritional lotions containing the teaspoon juice extract of the present invention, saga hydroquinone acid, sagaquinoxanic acid or sagacromenol were prepared in a conventional manner at the following proportions.
<1-3> 영양크림<1-3> Nourishing cream
본 발명의 톱니모자반 주정추출물, 사가하이드로퀴노익산, 사가퀴노익산 또는 사가크로메놀을 함유한 영양크림을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다. The nutritional cream containing the teaspoon juice extract of the present invention, saga hydroquinone acid, sagaquinoxanic acid or sagacromenol was prepared in a conventional manner at the following proportions.
<1-4> 마사지크림<1-4> Massage Cream
본 발명의 톱니모자반 주정추출물, 사가하이드로퀴노익산, 사가퀴노익산 또는 사가크로메놀을 함유한 마사지크림을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다. Massage creams containing the teaspoon of the present invention extract of the present invention, saga hydroquinone acid, sagaquinoxanic acid or sagacromenol were prepared in a conventional manner at the following proportions.
<1-5> 팩<1-5> Pack
본 발명의 톱니모자반 주정추출물, 사가하이드로퀴노익산, 사가퀴노익산 또는 사가크로메놀을 함유한 팩을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다. A pack containing the sawtooth extract of the present invention, saga hydroquinone acid, sagaquinoxanic acid or sagacromenol of the present invention was prepared in a conventional manner at the following proportions.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.The present invention has been described with reference to the preferred embodiments. It will be understood by those skilled in the art that various changes in form and details may be made therein without departing from the spirit and scope of the invention as defined by the appended claims. Therefore, the disclosed embodiments should be considered in an illustrative rather than a restrictive sense. The scope of the present invention is defined by the appended claims rather than by the foregoing description, and all differences within the scope of equivalents thereof should be construed as being included in the present invention.
Claims (8)
상기 톱니모자반 주정 추출물은 a) 톱니모자반을 양지에서 자연건조 후 마쇄하여 분말화하는 단계; b) 상기 분말에 주정을 첨가하여 70℃에서 환류냉각 추출한 후 50kDa의 여과막을 사용한 한외여과기를 통해 이물질을 제거하는 단계; 및 c) 상기 b) 단계를 통해 수득한 여과 추출물에서 주정을 제거하는 단계를 포함하는 과정을 통해 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.A cosmetic composition for whitening skin, comprising as an active ingredient,
The toothed mugwort extract comprises: a) natural drying of the sawtooth moth in sunny place, followed by grinding and pulverizing; b) adding the alcohol to the powder, refluxing and cooling at 70 ° C, and removing foreign matter through an ultrafilter using a 50 kDa filtration membrane; And c) removing the alcohol from the filtrate extract obtained through step b). ≪ Desc / Clms Page number 20 >
상기 톱니모자반 주정 추출물은 멜라닌 생성 억제 및 티로시나아제 저해 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.The method according to claim 1,
The cosmetic composition for whitening skin according to claim 1, wherein the toothed mugwort extract has melanin production inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity.
상기 톱니모자반 주정 추출물은 화장료 조성물 총 중량부 대비 0.0001 내지 20 중량 %로 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.The method according to claim 1,
The cosmetic composition for whitening skin according to claim 1, wherein the toothed pan extract is contained in an amount of 0.0001 to 20% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
상기 화합물은 멜라닌 생성 억제 및 티로시나아제 저해 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.6. The method of claim 5,
Wherein the compound has a melanin production inhibitory activity and a tyrosinase inhibitory activity.
상기 화장료 조성물은 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종으로 제형화 되는 것을 특징으로 하는 피부 미백 화장료 조성물.6. The method according to any one of claims 1 to 5,
The cosmetic composition of the present invention can be used as a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, a nutritive cream, a moisturizing cream, a hand cream, Wherein the composition is formulated as one selected from the group consisting of cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion, body cleanser, emulsion, lipstick, makeup base, foundation, press powder and loose powder .
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