KR101604893B1 - 혈청 바이오마커를 이용하여 심방세동 진단에 유용한 정보를 제공하는 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 심방세동 환자의 혈청으로부터 지단백질의 당화물, 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경을 바이오마커로 이용하여 심방세동 환자를 진단하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 심방세동 환자의 혈청 내 바이오마커로 증가한 지단백질의 당화물 농도와 고밀도 단백질(high density lipoprotein, HDL)의 감소된 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경을 이용하여 특히 조기진단과 예후진단이 어려운 남자 심방세동 환자의 진단을 용이하게 할 수 있다.

Description

혈청 바이오마커를 이용하여 심방세동 진단에 유용한 정보를 제공하는 방법{Method for provide useful information to diagnose atrial fibrillation using serum biomarker}
본 발명은 환자의 혈청 속 지단백질을 바이오마커로 이용하여 지단백질의 파라미터 변화를 확인함으로써, 특히 심방세동 진단과 예측이 어려운 남자 심방세동 환자의 조기진단과 예후진단을 용이하게 할 수 있도록 진단에 유용한 정보를 제공하는 방법에 관한 것이다.
심방세동(Atrial fibrillation, AF)은 주로 노년층의 인구에게서 발생하는 부정맥으로, 연령 증가에 따라 심방 부정맥이 발병할 위험도가 증가된다. 이러한 심방세동은 유전적 요인을 비롯하여 전기 생리학적, 물질대사 및 혈류 역학적 장애와 같은 복합적인 상호작용이 그 원인으로 알려져있다.
이러한 심방세동 환자에게서 고감도 C-반응단백질(high sensitivity C-reactive protein, hsCRP), 인터루킨(IL)-6 및 종양괴사인자-α(TNF-α)와 같은 염증성 표지 인자의 증가를 확인할 수 있는데 이러한 염증성 표지 인자의 증가에 대한 근본적인 매커니즘은 아직 밝혀지지 않았으나 많은 보고서에 따르면 증가된 염증은 지속적인 심방세동 환자를 유발시킨다고 한다.
혈장 지단백질 중 특히 초저밀도 지단백질(very low density lipoprotein, VLDL)과 저밀도 지단백질(low density lipoprotein, LDL)은 산화와 염증 스트레스에 매우 민감한 반면, 항산화, 항염증 및 항혈전증 효과를 포함한 건강한 생리학적 시스템을 유지하는데 중요한 역할을 하는 고밀도 지단백질(high density lipoprotein, HDL)의 활동은 필수 아포지질단백질 및 관련된 효소의 구성에 따라서 영향을 받는다. 특히, 생화학적 변화는 HDL의 구조와 기능에 영향을 미치며 산화 및 마이야르 반응(Maillard reaction)을 통한 최종당화산물(advanced glycated end products, AGE)을 합성하는 비효소적 당화가 이에 포함된다.
그러나 생화학적 변화에 의한 혈액 내 지단백질의 기능변화가 미치는 심방세동의 영향과 심방세동 진행 특성에 대해서는 알려진 바가 없다.
이에 본 발명자는 조기진단과 예후진단이 어려운 젊은 남자 심방세동 환자들의 진단방법을 연구하던 중 정상인 남성들과 비교하여 심방세동 남성환자들의 혈액 내 지단백질의 생화학적 변화를 발견하였고 이를 바이오마커로 이용하여 심방세동 진단을 용이하게 하고자 본 발명을 완성하였다.
한국 공개특허 제 10-2009-0087494 호
본 발명은 조기진단과 예후진단이 어려운 남자 심방세동 환자의 혈청에서 지단백질의 당화물 또는 감소된 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경을 바이오마커로 사용하여 환자의 심방세동을 용이하게 진단할 수 있도록 정보를 제공하는 방법을 제공하고자 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 남자 심방세동 환자로부터 얻어진 혈청, 지단백질 분획 및 혈장으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 파라미터 변화를 지표로 평가하는 심방세동 진단에 유용한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
상기 파라미터는 지단백질의 당화물 농도, 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ 단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 파라미터를 사용할 수 있다.
다른 구체예로 지단백질의 당화물 농도, 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ 단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 파라미터 변화를 이용한 심방세동 진단용 바이오마커 조성물을 제공한다.
상기 바이오마커 조성물은 지단백질에서 증가된 당화물에 의해 심방세동을 진단할 수 있다.
또한 상기 바이오마커 조성물은 고밀도 지단백질(high density lipoprotein, HDL)에서 감소된 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성 및 apoA-Ⅰ 단백질 농도와 감소된 지단백질 입자의 평균 직경에 의해 심방세동을 진단할 수 있다.
본 발명에 따르면 조기진단과 예후진단이 어려운 남자 심방세동 환자의 혈청에서 지단백질의 당화물 농도와 감소된 지단백질 입자의 평균 직경 또는 고밀도 지단백질(high density lipoprotein, HDL)에서 감소된 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성 및 apoA-Ⅰ 단백질 농도와 같은 바이오마커를 이용하여 진단에 유용한 정보를 제공함으로써, 남자 심방세동 환자의 예측 및 진단을 용이하게 하여 환자의 진단 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 지단백질 VLDL 15μg; LDL 32μg; HDL2 30μg ; HDL3 50μg 의 동일량의 심방세동 환자군(AF)과 대조군(control)의 지단백질 분획을 이용하여 당화반응 정도를 흡광도(Ex=370 nm, Em=440 nm)로 측정한 최종 당화 산물의 정량화 결과이다.
도 2는 심방세동 환자군(AF)과 대조군(control)사이의 HDL-연관된 항산화 활성을 비교한 결과로, 파라옥소나아제 활성을 나타낸 그래프로 0.5 mg/mL로 희석한 HDL2과 HDL3 20㎕에 90 mM Tris-HCl, 3.6 mM NaCl 및 2 mM CaCl2 (pH 8.5)가 포함된 파라옥소-에틸(Sigma catalog# D-9286)용액 230μL를 첨가하고 30분간 반응시켰다.
도 3는 심방세동 환자군(AF)과 대조군(control)사이의 HDL-연관된 항산화 활성을 비교한 결과로, 철이온 제거 활성을 나타낸 그래프로 593nm 흡광도의 증가 비율을 나타낸다.
도 4은 HDL2 와 HDL3 의 apoA-Ⅰ과 파라옥소나아제의 발현을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
도 5는 심방세동 환자군(AF)과 대조군(control)의 음성염색된 HDL2 와 HDL3 의 전자현미경 검사 결과이다. 모든 대식세포는 40,000×로 확대하였으며 100nm 스케일 바에 부합하였다. 또한 삽입된 테이블의 수치는 20개의 HDL 입자의 평균 직경을 측정한 결과이다. *, p<0.05 vs 대조군(control); **, p<0.01 vs 대조군(control) ; ***, p<0.001 vs 대조군(control)
본 발명은 남자 심방세동 환자로부터 얻어진 혈청, 지단백질 분획 및 혈장으로 이루어진 군에서 어느 하나 또는 둘 이상의 파라미터 변화를 지표로 평가하는 심방세동 진단에 유용한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
상기 파라미터는 지단백질의 당화물 농도, 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ 단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경으로 이루어진 군에서 어느 하나 또는 둘 이상의 파라미터를 사용할 수 있다.
다른 구체예로 지단백질의 당화물 농도, 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성, apoA-Ⅰ 단백질 농도 및 지단백질 입자의 평균 직경으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상의 파라미터 변화를 이용한 심방세동 진단용 바이오마커 조성물을 제공한다.
상기 바이오마커 조성물은 지단백질에서 증가된 당화물에 의해 심방세동을 진단할 수 있다.
또한 상기 바이오마커 조성물은 고밀도 지단백질(high density lipoprotein, HDL)에서 감소된 파라옥소나아제 활성, 철이온 환원 활성 및 apoA-Ⅰ 단백질 농도와 감소된 지단백질 입자의 평균 직경에 의해 심방세동을 진단할 수 있다.
보다 상세하게는, 남자 심방세동 환자군(AF)과 정상인 대조군(control)으로 이루어진 두 실험군의 혈액으로부터 혈장과 지단백질을 분리하여 분석한 결과, 남자 심방세동 환자군(AF)은 정상인 대조군과 비교하여 표1과 같이 혈장 내 증가된 지단백질의 당화물과 산화물의 농도를 확인할 수 있었다.
또한 두 실험군에서 분리된 지단백질의 철이온 환원능력을 분석하기 위한 FRAP실험을 진행한 결과, 도 3과 같이 심방세동 환자군의 고밀도 지질단백질의 철이온 환원능력이 대조군에 비하여 20% 감소하여 환원능력이 손상된 것을 확인하였으며, 도 2와 같은 파라옥소나아제 활성 분석에서도 역시 심방세동 환자군의 고밀도 지질단백질중 HDL3의 파라옥소나아제 활성이 감소한 것이 확인되었으며 상기 결과로부터 심방세동 환자의 항산화능이 손상된 것을 확인할 수 있다.
또한 심방세동 환자군의 고밀도 지질단백질(high density lipoprotein, HDL)에서 apoA-Ⅰ 발현농도가 웨스턴 블롯결과인 도 4에서 대조군보다 감소된 것을 확인하였으며, 도 5와 같은 Oil-red O 염색을 통한 지단백질 입자의 평균 직경을 확인한 결과에서도 대조군과 비교하여 감소한 심방세동 환자의 지단백질 입자의 평균 직경을 확인할 수 있었다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
하기의 참고예는 본 발명에 따른 각각의 실시예에 공통적으로 적용되는 참고예를 제공하기 위한 것이다.
< 참고예 > 결과분석
모든 실험결과는 두 배의 샘플로 최소 3번의 반복실험을 수행하였으며, 그 결과를 평균±SD로 나타내었다. 결과 비교는 SPSS 프로그램(version 14.0; SPSS, Inc., Chicago, IL, USA)을 이용하여 ｔ-테스트를 통하여 확인하였다.
< 실시예 1> 실험대상 선정
평균나이 48±9세의 심방세동 남성 환자 29명과 유사한 나이의 대조군으로 50±10세, 27명의 남성을 모집하였으며, 과량의 알콜(>30 g EtOH/day)섭취했거나 고지혈증, 당뇨병 및 고혈압약을 복용한 사람들은 제외되었다.
모든 실험자들은 내분비 장애를 비롯한 주목할 만한 질병을 보이지 않았다.
환자를 비롯한 모든 실험자들에게 사전동의를 얻어 수행하였고 실험과정은 기관감사위원회의 승인을 받아 진행되었다.
< 실시예 2> 혈장 분석
EDTA (final 1 mM)이 포함된 진공 체혈기(BD sciences, Franklin Lakes, NJ)를 사용하여 공복상태의 심방세동 환자와 대조군 실험자들의 혈액을 얻고 저속 원심분리를 이용하여 혈장을 분리하여 분석 전까지 -80℃ 에서 보관하였다.
혈액 파라미터, 지질 및 글루코오즈 농도는 자동 혈액 분석기(Chemistry analyzer AU4500 Olympus, Tokyo, Japan)를 이용하여 확인하였다.
< 실시예 3> 지단백질 분리
심방세동 환자들과 대조군 실험자들의 각각의 혈장에서 초저밀도 지단백질(VLDL, d<1.019 g/mL), 저밀도 지단백질(LDL , 1.019<d<1.063), HDL2(1.063<d<1.125) 및 HDL3(1.125<d<1.225)를 순차적인 초원심분리를 통하여 분리해내고 표준 방법에 따라 NaCl과 NaBr을 첨가하여 밀도를 조절하였다.
샘플들을 Himac CP-90α (Hitachi, Tokyo, Japan)를 이용하여 10℃, 100,000g에서 24시간 동안 원심분리하였다.
각각의 지단백질, 전체 콜레스테롤(TC)과 트리글리세리드(TG) 분석을 위하여 상업적으로 사용되는 키트(cholesterol, T-CHO and TG, Cleantech TS-S; Wako Pure Chemical, Osaka, Japan)를 이용하였으며, 지단백질 속 단백질 농도는 변형된 로우리 단백질 분석(Lowry protein assay, Markwell et al.)을 통하여 확인하였다.
환자군과 대조군 사이의 당화 반응 정도를 비교하기 위하여, 이미 보고되어진 방법(J.D. McPherson, B.H. Shilton, D.J. Walton, Role of fructose in glycation and crosslinking of proteins, Biochemistry. 27 (1988) 1901-7.)으로 VLDL 15μg; LDL 32μg; HDL2 30μg ; HDL3 50μg 의 동량의 단백질을 이용하여 각각의 지단백질 속의 최종당화산물(AGE)를 370nm 여기와 440nm 방출상태의 형광분석으로 측정하였다.
< 실시예 4> 혈장의 철 이온 환원 능력( FRAP ) 분석
혈장의 철 이온 환원 능력(Ferric reducing ability of plasma; FRAP)은 분석 방법(I.F. Benzie, J.J. Strain, Anal. Biochem. 239 (1996) 70-6.)을 변형하여 수행하였다.
PBS에 녹인 각각의 HDL 분획(20μg)의 항산화 활성을 593nm에서 흡광도에서 킬레이트 철 이온에 의한 흡광도 증가를 측정하여 확인하였다.
< 실시예 5> 파라옥소나아제(PON-1)분석
파라옥소나아제-1(PON-1)활성을 기존에 보고된 방법을 변형한 방법(K.H. Park, D.G. Shin, J.R. Kim, J.H. Hong, K.H. Cho, The functional and compositional properties of lipoproteins are altered in patients with metabolic syndrome with increased cholesteryl ester transfer protein activity, Int. J. Mol. Med. 25 (2010) 129-36.)으로 P-나이트로페놀 생산 시작 속도를 측정하여 확인하였다.
0.5 mg/mL로 희석한 HDL2과 HDL3 20㎕에 90 mM Tris-HCl, 3.6 mM NaCl 및 2 mM CaCl2 (pH 8.5)가 포함된 파라옥소-에틸(Sigma catalog# D-9286)용액 230μL를 첨가하고 30분간 반응시킨 후 37℃에서 405 nm 흡광도(microplate reader, Bio-Rad model 680; Bio-Rad, Hercules, CA, USA)로 측정하였으며 EDTA를 제거하기 위하여 PBS를 광범위하게 투여하였다.
< 실시예 6> 웨스턴 블롯
각각의 HDL3 에서 3μg 동일량의 단백질을 소디움 도데실 설페이트-폴리아실아마이드 겔 전기영동(SDS-PAGE) 하여 아폴리포단백질/리포단백질 구성요소들을 비교하고 아폴리포단백질의 발현 정도를 면역탐지법을 통하여 분석하였다.
항-사람 apoA-Ⅰ항체(ab7613)와 항-파라옥소나아제 항체(ab24261)를 Abcam (Cambridge, UK)에서 구입하여 사용하였으며, 상대적인 밴드 강도(BI)는 Quantity One software (version 4.5.2)을 이용하여 Gel Doc®XR (Bio-Rad)로 스캔하여 비교하였다.
< 실시예 7> 전자현미경 검사
TBS에 1% 소디움 포스포(pH 7.4)와 0.3 mg/mL 농도의 최종 아포리포단백질을 혼합하여 VLDL, LDL 및 HDL를 음성염색하고 전송 전자 현미경 검사(Transmitted electron microscopy, TEM)를 Hitachi 전자 현미경(model H-7600; Ibaraki, Japan)으로 80 kV 로 작동시켜 수행하였다.
< 실시예 8> 결과 분석
1. 혈장 파라미터 분석
표 1을 참고하면, 심방세동 환자군(AF)의 체질량지수(body mass index, BMI)는 26.6±4 kg/m2 로 실험대조군의 체질량지수 24.4±3 kg/m2 보다 조금 더 비만인 것으로 나타났으나, 혈압은 정상 범위로 확인되었으며, AF군의 혈청 콜레스테롤 수준은 대조군보다 13% 더 낮은 혈장 TC와 16% 더 낮은 HDL-C로 정상범위로 확인되었다.
반면, AF군은 대조군과 비교하여 1.6배 상승한 혈장 TG와 1.7배 높은 TG/HDL 비율을 확인할 수 있었으며, 같은 조건하에 혈장 CETP 활성은 대조군의 36% CE-transfer보다 AF군이 42% CE-transfer로 높았다.
TC/HDL과 LDL/HDL 비율은 두 실험군에서 유사하게 확인되었으나, 티로신 자극 호르몬(TSH)은 AF군이 28% 높았으며, AF군의 글루코즈와 요산의 혈장 농도가 정상범위(<110 mg/dL 및 7.4 mg/dL)에 속하였지만, 대조군과 비교하여 각각 6% 및 13%로 상승 되어있었다.
반면, AF군의 요소질소(blood urea nitrogen, BUN)와 크레아티닌이 정상 범위에 속하여 신장기능은 정상임을 확인하였다. 또한 AF군은 대조군과 비교하여 2배 높은 hsCRP 수준을 보였으며, 상기 결과로부터 AF군에 만성적인 염증이 존재하는 것이 확인되었다.
그 외에 AF군에서 간염 파라미터인 GOT 및 GPT 와 트로포닌Ⅰ의 수준은 정상으로 나타났으며 이를 통하여 심근 장애가 없음을 확인하였다.
도 3과 같이 AF군은 대조군과 비교하여 20% 낮은 혈장 FRA 활성을 보였으며, 상기 결과로부터 AF군의 혈장에서 철 이온의 환원 능력이 심각하게 손상되어 있음을 확인하였다. 또한 주요한 차이는 없었으나, 도 2를 참고하면, AF군의 혈장에서는 대조군과 비교하여 PON 활성이 감소한 것을 확인할 수 있었으며, 이러한 결과로부터 AF군의 혈장 항산화 활성이 손상되어 있음을 확인하였다.
2. 지단백질 파라미터 확인
AF군은 동일한 단백질 농도에서 대조군과 비교하여 VLDL내에 1.7배 높은 TG 함량과 LDL내에 45% 감소한 TC 함량을 확인하였다. 또한 표 1과 같이 AF군의 HDL(AF-HDL)은 대조군의 HDL(control-HDL)과 비교하여 약간의 TG 증가, TC 및 단백질 함량의 감소를 확인하였다.
3. 지질단백질의 당화 정도 확인
형광 측정결과 지단백질 중 AF-VLDL의 당화 정도가 가장 높았으며, 도 1을 참조로 대조군의 VLDL보다 AF-VLDL이 30% 더 당화된 것을 확인할 수 있었다.
또한 AF-HDL3 이 대조군 HDL3 보다 45% 더 당화된 반면, 두 그룹의 HDL2 차이는 발견되지 않았다. 상기 결과로부터 AF군의 VLDL과 HDL3 에서 더 많은 당화가 발생한 것을 확인할 수 있었다.
4. HDL 과 단백질 구성요소의 항산화 능력 확인
혈장 결과와는 반대로 170분간 인큐베이션한 결과, 도 2와 같이 AF군에서 대조군보다 약해진 HDL3 -연관된 PON 활성을 확인하였다.
반면, HDL2 -연관된 PON 활성은 두 그룹 모두 발견되지 않았는데 그 이유로 대부분의 PON 활성은 누적된 HDL3 에 의한 것임이 보고되어진바 있다(K.H. Park, D.G. Shin, J.R. Kim, K.H. Cho, Senescence-related truncation and multimerization of apolipoprotein A-I in high-density lipoprotein with an elevated level of advanced glycated end products and cholesteryl ester transfer activity, J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 65 (2010) 600-10.).
또한, PON 활성보다 큰 차이는 아니었지만, 도 3과 같이 AF-HDL3 의 철이온 제거 활성이 약해진 것을 확인할 수 있었다.
15% SDS-PAGE를 이용한 웨스턴 블롯 결과 도 4와 같이 AF군의 HDL2 와 HDL3 의 apoA-Ⅰ발현이 대조군보다 각각 9% 와 15% 감소하였으며 또한 AF군의 HDL3 의 파라옥소나아제 발현 정도가 22% 낮아진 것을 확인할 수 있었으며, AF군의 HDL의 낮은 항산화 활성 및 파라옥소나아제 활성과 표 1의 AF군 혈장결과를 뒷받침하는 결과이다.
5. 지단백질 입자의 평균 직경 확인
전자 현미경 검사를 통하여, 동일한 단백질 농도하에서 AF군의 HDL2 (0.3 mg/mL)와 HDL3 (0.5 mg/mL) 입자의 평균 직경(W×L)은 도 4의 결과와 같이 대략 16×16 nm 와 10×10 nm 로 대조군의 약 20×20 nm의 HDL2 와 11×11 nm인 HDL3 보다 더 작은 것으로 확인되었다.
심방세동 환자군(AF)과 대조군(control)의 혈장 프로파일
AF (n=29) Control (n=27)
나이(yr) 47.8±9.4 50.1±10.1
BMI (kg/m2) 26.6±4* 24.4±3.1
SBP (mmHg) 123.3±18.6 124.4±14.6
DBP (mmHg) 73.8±12.5 76.1±8.4
TC (mg/dl) 181±24.4* 206.4±45.6
TG (mg/dl) 186.6±78.2* 116.5±81.4
HDL-cholesterol(mg/dl) 44.3±8* 52.2±13.8
LDL- cholesterol(mg/dl) 114.4±23.1 130.7±38.6
% HDL-cholesterol 24.7±4.4 26.1±6.6
% LDL-cholesterol 62.8±6.1 63.1±7.4
TC/HDL ratio 4.2±0.7 4.1±1
TG/HDL ratio 4.5±2.5* 2.6±2.4
LDL/HDL ratio 2.6±0.5 2.6±0.8
GOT (U/l) 31.2±14.3 26.5±7.4
GPT (U/l) 39±32.2 32.1±26.8
TSH (U/l) 3.2±3.3 2.5±2.2
hsC-Reactive Protein(mg/l) 0.2±0.1 0.1±0.1
글루코즈 104.3±9.6* 98.1±24.4
요산 6.6±1.5* 5.8±1.7
요소질소(mg/dl) 13.1±4.1 11.5±2.6
크레아틴 0.9±0.1 1±0.1
트로포닌 I 0.08±2.1 0.08±0.15
CETP 활성(% CE-transfer) 41.8±4.3** 36.0±3.7
Serum amyloid A(AU) 0.21±0.07 0.18±0.05
인터루킨-6(AU) 0.31±0.18 0.27±0.13

Claims (8)

  1. 남자 심방세동 환자로부터 얻어진 혈장내 트리글리세롤(TG) 함량 증가 여부를 측정하고; 트리글리세롤(TG)/HDL 비율 증가 여부를 측정하고; CETP 활성 증가 여부를 측정하고; 요산 함량 증가 여부를 측정하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 남자 심방세동 진단에 유용한 정보를 제공하는 방법.
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  3. 혈장내 트리글리세롤(TG) 검출제제, 트리글리세롤(TG)/HDL 비율 검출제제, CETP 활성 검출제제 및 요산 검출제제를 포함하는 남자 심방세동 진단용 바이오마커 조성물.
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