KR101495631B1 - Kit of centrifuge separation and method for centrifuging using the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 원심분리 키트 및 이를 이용한 원심분리 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 원심분리 키트는, 원심분리하기 위한 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액을 수용하는 혼합용액 수용부와, 상기 혼합용액으로부터 원심분리된 원심분리액이 배출되는 배출부와, 상기 혼합용액 수용부의 하단에 마련되어 상기 혼합용액를 여과하는 필터부로 형성된 스핀 컬럼과; 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 원심분리액을 수용하는 원심분리액 수용부가 형성된 집적 용기와; 상기 집적 용기의 원심분리액 수용부에 마련되어, 상기 배출부로부터 배출되는 상기 원심분리액을 분리 수용하도록 상기 원심분리액 수용부를 부분적으로 분리하는 격벽을 포함하는 것을 특징으로 한다. 이에 의해, 원심분리 작업 중 시료의 오염과 소실을 방지하며, 또한 시료의 분리 작업이 간편하고, 작업성을 향상시킬 수 있으며 원심분리 작업의 자동화를 용이하게 할 수 있다.The present invention relates to a centrifugal separation kit and a centrifugal separation method using the centrifugal separation kit. The centrifugation kit according to the present invention comprises a mixed solution containing portion for containing a sample containing a biological or chemical substance such as a nucleic acid for centrifugal separation and a mixed solution containing a buffer and a centrifugal separator centrifuged from the mixed solution A spin column provided at a lower end of the mixed solution receiving part and formed of a filter part for filtering the mixed solution; An accumulation vessel in which a centrifuge solution accommodating portion for accommodating a centrifugation solution centrifuged from the spin column is formed; And a partition wall that is provided in the centrifuge solution receiving portion of the accumulation container and partially separates the centrifuge solution receiving portion to separate the centrifuge solution discharged from the discharge portion. Thereby, it is possible to prevent the contamination and loss of the sample during the centrifugal separation operation, to simplify the separation operation of the sample, to improve the workability, and to facilitate the automation of the centrifugal separation operation.

Description

원심분리 키트 및 이를 이용한 원심분리 방법{KIT OF CENTRIFUGE SEPARATION AND METHOD FOR CENTRIFUGING USING THE SAME}BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a centrifugal separation kit,

본 발명은, 원심분리 키트 및 이를 이용한 원심분리 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료를 버퍼와 혼합하여 원심분리를 통해 상이한 두 종류의 원하는 물질을 간편하게 채집할 수 있는 원심분리 키트 및 이를 이용한 원심분리 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a centrifugal separation kit and a centrifugal separation method using the centrifugal separation kit. More particularly, the present invention relates to a centrifugal separation kit, And a centrifugal separation method using the centrifugal separation kit.

통상, 원심분리 키트는 튜브 형상의 스핀 컬럼(spin column)과, 스핀 컬럼의 하부에 삽입되어 있는 필터와, 스핀 컬럼이 삽입 장착되는 튜브 형상의 집적 용기(collection container)를 포함한다.Typically, the centrifugation kit includes a tube-shaped spin column, a filter inserted in the lower portion of the spin column, and a tube-shaped collection container into which the spin column is inserted.

이러한 원심분리 키트는 스핀 컬럼과 집적 용기가 결합된 상태에서 원심분리하기 위한 시료와 버퍼(buffer)가 함유된 혼합용액이 스핀 컬럼에 주입하고, 스핀 컬럼과 집적 용기가 결합된 원심분리 키트를 원심분리기에 적재하여, 원심분리기의 원심력에 의해 스핀 컬럼에 수용된 혼합용액 내의 원하는 물질이 필터에 남고 나머지 물질 및 버퍼들은 스핀 컬럼 밖으로 유출되어 집적 용기에 모이게 된다. 이러한 원리를 이용하여 여러 종류의 스핀 컬럼들이 공지되어 있고(U.S. Pat. No. 4,270,921(1981), U.S. Pat. No. 4,787,971(1988), U.S. Pat. No. 6,103,195(2000), U.S. Pat. No. 4,871,675(1989), U.S. Pat. No. 8,062,533(2011)), 상업화 되었다.In this centrifugation kit, a mixture solution containing a sample and a buffer for centrifugation in a state where a spin column and an accumulation container are combined is injected into a spin column, and a centrifuge kit in which a spin column and an accumulation container are combined is centrifuged The centrifugal force of the centrifugal separator causes the desired substance in the mixed solution contained in the spin column to remain in the filter and the remaining substances and buffers to flow out of the spin column to be collected in the integrated container. Various types of spin columns are known from this principle (US Pat. No. 4,270,921 (1981), US Pat. No. 4,787,971 (1988), US Pat. No. 6,103,195 (2000), US Pat. 4,871,675 (1989), US Pat. No. 8,062,533 (2011)).

그런데, 종래의 원심분리 키트는, 1차원심분리하여 스핀 컬럼의 필터에 남아있는 잔류 시료를 얻기 위해서는, 잔류 시료가 수용된 스핀 컬럼에 기존의 집적 용기를 제거하고 새로운 집적 용기를 결합한 후 새로운 상이한 버퍼를 주입하고 나서 원심분리기에 적재하여 원심분리기의 원심력에 의해 스핀 컬럼의 잔류 시료와 새로운 상이한 버퍼를 새로운 집적 용기로 모이게 한다.However, in the conventional centrifuge kit, in order to obtain a residual sample remaining in the filter of the spin column by one-dimensional seam separation, the existing accumulation vessel is removed from the spin column containing the residual sample, the new accumulation vessel is combined, And then loaded on a centrifuge to centrifuge the centrifuge to collect the new sample from the spin column and the new buffer into a new integrated container.

이와 같이, 스핀 컬럼에 남아있는 잔류 시료를 얻기 위해 기존의 집적 용기와 새로운 집적용기의 교환 작업으로 인해 잔류 시료의 오염 또는 소실이 발생할 염려가 있고, 또한 작업시간이 길어져 작업성이 저감되며 상기 과정의 자동화를 어렵게 한다.Thus, in order to obtain the residual sample remaining in the spin column, there is a possibility that the residual sample is contaminated or lost due to the exchange operation between the existing integrated vessel and the new integrated vessel. In addition, the work time is lengthened, .

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 원심분리 작업 중 시료의 오염과 소실을 방지하며, 또한 시료의 분리 작업이 간편하고, 작업성을 향상시키고 자동화를 용이하게 하는 원심분리 키트 및 이를 이용한 원심분리 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.Disclosure of Invention Technical Problem [8] Accordingly, the present invention has been made keeping in mind the above problems occurring in the prior art, and it is an object of the present invention to provide a centrifugal separator which prevents contamination and destruction of a sample during centrifugal separation, And a centrifugal separation method using the same.

본 발명은 상기 목적을 달성하기 위해, 원심분리하기 위한 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액을 수용하는 혼합용액 수용부와, 상기 혼합용액으로부터 원심분리된 원심분리액이 배출되는 배출부와, 상기 혼합용액 수용부의 하단에 마련되어 상기 혼합용액를 여과하는 필터부로 형성된 스핀 컬럼과; 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 원심분리액을 수용하는 원심분리액 수용부가 형성된 집적 용기와; 상기 집적 용기의 원심분리액 수용부에 마련되어, 상기 배출부로부터 배출되는 상기 원심분리액을 분리 수용하도록 상기 원심분리액 수용부를 부분적으로 분리하는 격벽을 포함하는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트를 제공한다.In order to achieve the above-mentioned object, the present invention provides a centrifugal separator comprising: a mixed solution containing portion for containing a sample and a buffered solution containing a biological or chemical substance such as a nucleic acid for centrifugal separation; A spin column provided at a lower end of the mixed solution receiving part and formed of a filter part for filtering the mixed solution; An accumulation vessel in which a centrifuge solution accommodating portion for accommodating a centrifugation solution centrifuged from the spin column is formed; And a partition wall that is provided in the centrifuge solution receiving portion of the accumulation vessel and partially separates the centrifuge solution receiving portion to separate and receive the centrifuge fluid discharged from the discharge portion .

여기서, 상기 필터부는 분리막 (membrane) 또는 여과제 (media filter)로 이루어질 수 있다.Here, the filter unit may be a membrane or a media filter.

상기 격벽은 상기 집적 용기의 내부 바닥면으로부터 수직하게 마련되는 것을 특징으로 한다.And the partition is vertically provided from an inner bottom surface of the accumulation container.

상기 집적 용기를 수용하는 보조 집적 용기를 더 포함하고, 상기 격벽에 의해 분리된 상기 원심분리액 수용부 중 어느 하나의 수용부에 수용된 원심분리액이 상기 보조 집적 용기로 유동하도록 상기 집적 용기의 일측 내부 바닥면에는 개구가 형성되어 있는 것을 특징으로 한다.Further comprising an auxiliary accumulation vessel for receiving the accumulation vessel, wherein centrifugal separation liquid accommodated in any one of the centrifuged liquid receivers separated by the partition wall flows to one side of the accumulation vessel And an opening is formed in the inner bottom surface.

한편, 상기 목적은, 본 발명의 다른 분야에 따르면, 원심분리하기 위한 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액을 상기 스핀 컬럼에 주입하는 단계와; 상기 격벽의 판면이 원심분리기의 회전축선과 동일 평면을 이루도록 상기 집적 용기를 원심분리기에 적재하는 단계와; 상기 원심분리기를 일방향으로 회전시켜 상기 원심분리기의 회전반대방향에 위치한 원심분리액 수용부로 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 제1원심분리액을 채집하는 단계와; 상기 원심분리기의 회전을 정지하는 단계와; 상기 1차원심분리하여 잔류한 잔류 시료를 수용하는 스핀 컬럼에 상기 버퍼와 상이한 새로운 버퍼를 주입하는 단계와; 상기 원심분리기를 타방향으로 회전시켜 상기 원심분리기의 회전반대방향에 위치한 원심분리액 수용부로 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 제2원심분리액을 채집하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트를 이용한 원심분리 방법에 의해서도 달성된다.According to another aspect of the present invention, there is provided a method for preparing a spin column, comprising the steps of: injecting a mixed solution containing a buffer and a sample having a biological or chemical substance such as nucleic acid for centrifugation into the spin column; Loading the accumulation vessel on the centrifuge such that the plate surface of the partition wall is flush with the axis of rotation of the centrifuge; Collecting a first centrifugal separator centrifuged from the spin column by rotating the centrifugal separator in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separator; Stopping rotation of the centrifuge; Injecting a new buffer different from the buffer into the spin column accommodating the residual sample remaining after one-dimensional seam separation; And rotating the centrifuge in the other direction to collect a second centrifugal separation liquid centrifuged from the spin column into a centrifugal separation liquid accommodation unit located in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separation unit. And the centrifugal separation method using the centrifugal separator.

본 발명에 따르면, 원심분리 작업 중 시료의 오염과 소실을 방지하며, 또한 시료의 분리 작업이 간편하고, 작업성을 향상시킬 수 있으며 원심분리 작업의 자동화를 용이하게 할 수 있다.Industrial Applicability According to the present invention, it is possible to prevent contamination and loss of a sample during centrifugal separation, simplify separation of samples, improve workability, and facilitate automation of centrifugal separation.

도 1은 본 발명의 제1실시예에 따른 원심분리 키트의 분해 사시도,
도 2는 도 1의 결합 상태도,
도 3은 도 1의 원심분리 키트가 일방향으로 회전하는 원심분리기에 장착되어 원심분리되는 모습의 모식도,
도 4는 도 3의 요부 확대도,
도 5는 도 1의 원심분리 키트가 타방향으로 회전하는 원심분리기에 장착되어 원심분리되는 모습의 모식도,
도 6은 도 5의 요부 확대도,
도 7은 본 발명의 제2실시예에 따른 원심분리 키트의 분해 사시도,
도 8은 도 7의 원심분리 키트가 일방향으로 회전하는 원심분리기에 장착되어 원심분리되는 모습의 모식도,
도 9는 도 7의 원심분리 키트가 타방향으로 회전하는 원심분리기에 장착되어 원심분리되는 모습의 모식도이다.1 is an exploded perspective view of a centrifugal separation kit according to a first embodiment of the present invention,
Fig. 2 is a combined state diagram of Fig. 1,
FIG. 3 is a schematic view of the centrifugal separator of FIG. 1 mounted on a centrifugal separator rotating in one direction,
4 is an enlarged view of the main part of Fig. 3,
FIG. 5 is a schematic view of the centrifugal separator of FIG. 1 mounted on a centrifugal separator rotating in the other direction,
Fig. 6 is an enlarged view of the main part of Fig. 5,
7 is an exploded perspective view of a centrifugal separation kit according to a second embodiment of the present invention,
FIG. 8 is a schematic view of the centrifugal separator of FIG. 7 mounted on a centrifugal separator rotating in one direction,
FIG. 9 is a schematic diagram of centrifugal separation of the centrifugal separator of FIG. 7 mounted on a centrifugal separator rotating in the other direction.

이하, 첨부도면을 참조하여 본 발명에 대해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

설명에 앞서, 여러 실시예에 있어서, 동일한 구성을 가지는 구성요소에 대해서는 동일 부호를 사용하여 대표적으로 제1실시예에서 설명하고, 그 외의 실시예에서는 제1실시예와 다른 구성에 대해서만 설명하기로 한다.Prior to the description, components having the same configuration are denoted by the same reference numerals as those in the first embodiment. In other embodiments, only components different from those in the first embodiment will be described do.

도 1 및 도 2에는 본 발명의 제1실시예에 따른 원심분리 키트가 도시되어 있다.1 and 2 show a centrifuge kit according to a first embodiment of the present invention.

이들 도면에 도시된 바와 같이, 본 발명의 제1실시예에 따른 원심분리 키트(10)는 스핀 컬럼(11, spin column)과, 집적 용기(31, collection container)와, 격벽(41)을 포함한다.As shown in these drawings, the centrifugation kit 10 according to the first embodiment of the present invention includes a spin column 11, a collection container 31, and a partition wall 41 do.

스핀 컬럼(11)은 일정 길이를 가지며, 양측이 개구된 속이 빈 원형의 튜브 형상을 가진다.The spin column 11 has a constant length and has a hollow circular tube shape with openings on both sides.

스핀 컬럼(11)의 내측에는 원심분리하기 위한 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼(buffer)가 함유된 혼합용액(3,3', 도 3 및 도 5 참조)을 수용하는 혼합용액 수용부(13)가 형성되어 있다.A mixed solution (3, 3 ', see FIGS. 3 and 5) containing a sample having a biological or chemical substance such as a nucleic acid for centrifugal separation and a buffer is contained in the spin column 11 A receiving portion 13 is formed.

스핀 컬럼(11)의 일측 개구는 혼합용액 수용부(13)로 혼합용액(3,3')이 주입되는 주입부(15)를 형성한다. 주입부(15)에는 캡(17)이 장착되며, 캡(17)은 연결끈(19)에 의해 스핀 컬럼(11)에 연결되어 있다. 여기서, 캡(17)은 선택적으로 개재될 수 있다.One side opening of the spin column 11 forms an injection part 15 into which the mixed solution 3, 3 'is injected into the mixed solution receiving part 13. A cap 17 is attached to the injection part 15 and the cap 17 is connected to the spin column 11 by a connection cord 19. [ Here, the cap 17 can be selectively interposed.

스핀 컬럼(11)의 타측 개구는 혼합용액(3,3')으로부터 원심분리되는 원심분리액(5a,5b)이 배출되는 배출부(21)를 형성한다. 배출부(21)는 혼합용액 수용부(13)와 단차를 형성하며, 주입부(15)보다 상대적으로 작은 직경을 가진다.The other opening of the spin column 11 forms a discharge portion 21 through which centrifugal separation liquids 5a and 5b to be centrifuged from the mixed solution 3 and 3 'are discharged. The discharge portion 21 forms a step with the mixed solution containing portion 13 and has a smaller diameter than the injection portion 15.

스핀컬림(11)의 수용부(13) 하단에는 필터부(45)가 삽입된다. 필터부(45)는 배출부(21)를 통해 배출되는 혼합용액(3,3')을 선택적으로 여과하는, 즉 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액(3,3')으로부터 원하는 물질을 걸러 내거나, 또는 통과시키는 역할을 한다. 상기 필터부(45)는 분리막(Membrane) 또는 여과제(Media filter)로 이루어질 수 있다. 일반적인 분리막의 구성물질은 실리카(Silica), 셀루로스(Cellulose), 나이론(Nylon), 그리고 PTFE(Polytetrafluorethylene) 등이며, 여과제의 구성 물질은 덱스트린(Dextrans), 폴리아키릴아미드(Polyacryamides), 그리고 이온 익스체인지 레진(ion-exchange resin) 등이다.At the lower end of the receiving portion 13 of the spin curl 11, a filter portion 45 is inserted. The filter unit 45 filters out the desired substance from the mixture solution 3,3 'containing the sample and the buffer, which selectively filters the mixed solution 3,3' discharged through the discharge unit 21 , Or passing through. The filter unit 45 may be a membrane or a media filter. Typical materials of the separation membrane are silica, cellulose, nylon, and polytetrafluorethylene (PTFE). The constituents of the filtration materials include dextrans, polyacryamides, and ions Ion-exchange resin, and the like.

또한, 스핀 컬럼(11)은 외주를 따라 걸림턱(25)이 돌출 형성되어 있다. 걸림턱(25)은 스핀 컬럼(11)이 집적 용기(31)에 결합시 스핀 컬럼(11)의 배출부(21)가 격벽(41)과 간섭하지 않도록 후술할 집적 용기(31)의 삽입부(35)에 걸림 유지된다.Further, the spin column 11 is formed with a latching jaw 25 protruding along the outer periphery thereof. The engagement jaw 25 is formed in the insertion portion 31 of the accumulation container 31 to be described later so that the discharge portion 21 of the spin column 11 does not interfere with the partition wall 41 when the spin column 11 is coupled to the accumulation container 31. [ (35).

한편, 집적 용기(31)는 일정 길이를 가지며, 일측이 개구된 속이 빈 원형의 튜브 형상을 가진다.On the other hand, the accumulation container 31 has a certain length and has a hollow circular tube shape with one side opened.

집적 용기(31)의 내측에는 스핀 컬럼(11)으로부터 원심분리되는 원심분리액(5a,5b)을 수용하는 원심분리액 수용부(33)가 형성되어 있으며, 원심분리액 수용부(33)에는 스핀 컬럼(11)이 부분적으로 삽입 장착된다. 원심분리액 수용부(33)의 하부 영역은 격벽(41)에 의해 제1원심분리액 수용부(33a)와 제2원심분리액 수용부(33b)로 구분된다. 이하에서는 설명의 편리상 도 1에 도시된 바와 같이 집적 용기(31)의 격벽(41)의 좌측에 위치하는 원심분리액 수용부를 제1원심분리액 수용부(33a)라 하고, 우측에 위치하는 원심분리액 수용부를 제2원심분리액 수용부(33b)라고 한다.A centrifugal separating liquid containing portion 33 for accommodating centrifugal separating liquids 5a and 5b to be centrifugally separated from the spin column 11 is formed inside the accumulating container 31, The spin column 11 is partially inserted and mounted. The lower region of the centrifuging liquid storing portion 33 is divided into a first centrifuging liquid storing portion 33a and a second centrifuging liquid storing portion 33b by the partition wall 41. [ Hereinafter, as shown in Fig. 1 for convenience of explanation, the centrifuged-liquid receiving portion located on the left side of the partition wall 41 of the integrated container 31 is referred to as a first centrifuged-liquid receiving portion 33a, And the centrifuged liquid containing portion is referred to as a second centrifuged liquid containing portion 33b.

집적 용기(31)의 일측 개구는 스핀 컬럼(11)이 삽입되는 삽입부(35)를 형성하며, 삽입부(35)는 원심분리액 수용부(33)와 연통한다.One side opening of the accumulation container 31 forms an insertion portion 35 into which the spin column 11 is inserted and the insertion portion 35 communicates with the centrifuge liquid receiving portion 33.

집적 용기(31)의 외주에는 집적 용기(31)에 수용되는 원심분리액(5a,5b)의 양을 육안으로 용이하게 확인할 수 있도록 복수의 눈금(37)이 형성되어 있다.A plurality of graduations 37 are formed on the outer periphery of the accumulating container 31 so that the amount of the centrifugal separating liquids 5a and 5b accommodated in the accumulating container 31 can be visually confirmed easily.

격벽(41)은 판 형상을 가지며, 집적 용기(31)의 원심분리액 수용부(33)의 하부 영역에 마련된다. 격벽(41)은 배출부(21)로부터 배출되는 원심분리액을 분리 수용하도록 원심분리액 수용부(33)의 하부 영역을 제1원심분리액 수용부(33a)와 제2원심분리액 수용부(33b)로 분리한다. 격벽(41)은 도 3 및 도 4에 도시된 바와 같이 원심분리기(1)를 일방향으로 회전시킬 때 원심분리기(1)의 회전반대방향에 위치한 제1원심분리액 수용부(33a)로 스핀 컬럼(11)으로부터 원심분리된 제1원심분리액(5a)을 채집하거나, 또는 도 5 및 도 6에 도시된 바와 같이 원심분리기(1)를 타방향으로 회전시킬 때 원심분리기(1)의 회전반대방향에 위치한 제2원심분리액 수용부(33b)로 스핀 컬럼(11)으로부터 원심분리된 제2원심분리액(5b)을 채집하도록, 원심분리액 수용부(33)를 부분적으로 분리한다. 격벽(41)은 집적 용기(31)에 삽입 장착된 스핀 컬럼(11)의 배출부(21)와 간섭이 발생하지 않도록 일정 높이를 가지며, 집적 용기(31)의 내부 바닥면으로부터 삽입부(35)에 대해 수직하게 기립 설치된다.The partition wall 41 has a plate shape and is provided in a lower region of the centrifuge solution receiving portion 33 of the accumulation container 31. The partition wall 41 separates the lower region of the centrifugal solution receiving portion 33 from the first centrifugal solution receiving portion 33a and the second centrifugal solution receiving portion 33a to separate and accommodate the centrifugal separation liquid discharged from the discharge portion 21. [ (33b). 3 and 4, when the centrifugal separator 1 is rotated in one direction, the partition wall 41 is divided into a first centrifugal separator liquid receiving portion 33a located in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separator 1, The first centrifuging liquid 5a centrifuged from the centrifugal separator 11 is collected or the centrifugal separator 1 is rotated in the other direction as shown in Figures 5 and 6, The centrifuging liquid containing portion 33 is partially separated so as to collect the second centrifuging liquid 5b centrifuged from the spin column 11 into the second centrifuging liquid containing portion 33b positioned in the direction of the arrow X. The partition wall 41 has a predetermined height so as not to interfere with the discharge portion 21 of the spin column 11 inserted into the accumulation container 31 and is inserted from the inner bottom surface of the accumulation container 31 into the insertion portion 35 In the vertical direction.

이하에서는, 본 발명의 제1실시예에 따른 원심분리 키트(10)를 이용하여 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액(3,3')을 원심분리하는 방법에 대해 설명한다.Hereinafter, a method of centrifuging a mixed solution (3, 3 ') containing a buffer and a sample having a biological or chemical substance such as nucleic acid using the centrifugation kit 10 according to the first embodiment of the present invention .

먼저, 원심분리하기 위한 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액(3)을 스핀 컬럼(11)에 주입하고, 스핀 컬럼(11)을 집적 용기(31)에 삽입 장착한다. 여기서, 순서를 바꾸어서 스핀 컬럼(11)을 집적 용기(31)에 삽입 장착한 후, 원심분리하기 위한 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액(3)을 스핀 컬럼(11)에 주입할 수도 있다.First, a mixed solution 3 containing a sample and a buffer having a biological or chemical substance such as a nucleic acid for centrifugal separation is injected into the spin column 11, and the spin column 11 is inserted into the accumulation container 31 do. After the spin column 11 is inserted into the accumulation container 31 by changing the order, the mixed solution 3 containing a buffer and a sample having a biological or chemical substance such as a nucleic acid for centrifugal separation is applied to a spin column 11).

다음, 격벽(41)의 판면이 원심분리기(1)의 회전축선과 동일 평면을 이루도록 집적 용기(31)를 원심분리기(1)에 적재한다. 도 3 내지 도 5에는 일 예로서, 본 발명에 따른 3개의 원심분리 키트(10)가 원심분리기(1)에 적재된 상태가 도시되어 있다.Next, the accumulation container 31 is loaded on the centrifuge 1 so that the plate surface of the partition wall 41 is flush with the rotation axis of the centrifuge 1. 3 to 5 show a state in which three centrifuge kits 10 according to the present invention are loaded on the centrifuge 1 as an example.

이어서, 원심분리기(1)를 일방향으로 회전시켜, 설명의 편리상 도 3 및 도 4에 도시된 바와 같이 반시계방향으로 회전시킨다.Then, the centrifuge 1 is rotated in one direction, and is rotated counterclockwise as shown in Figs. 3 and 4 for convenience of explanation.

이 때, 스핀 컬럼(11)에 수용된 혼합용액(3)은 원심력에 의해 필터부(45)를 통과하여 여과되면서 원심분리된 후, 원심분리된 제1원심분리액(5a)은 스핀 컬럼(11)의 배출부(21)를 통해 집적 용기(31)를 향해 배출된다. 동시에, 스핀 컬럼(11)의 배출부(21)를 통해 배출되는 제1원심분리액(5a)은 관성력에 의해 원심분리기(1)의 회전반대방향으로 유동하면서, 즉 원심분리기(1)의 시계방향으로 유동하면서 원심분리기(1)의 회전반대방향에 위치한 제1원심분리액 수용부(33a)로 채집된다.At this time, the mixed solution 3 contained in the spin column 11 is centrifuged while passing through the filter section 45 by centrifugal force, and then the centrifuged first centrifugation liquid 5a is collected by the spin column 11 And is discharged toward the accumulation container 31 through the discharge portion 21 of the accumulator 31. At the same time, the first centrifuging liquid 5a discharged through the discharge portion 21 of the spin column 11 flows in the direction opposite to the rotation of the centrifugal separator 1 by the inertial force, And is collected into the first centrifuge liquor receiving portion 33a located in the direction opposite to the rotation of the centrifuge 1.

다음, 제1원심분리액 수용부(33a)에 제1원심분리액의 채집이 완료되면, 원심분리기(1)의 회전을 정지한다.Next, when the collection of the first centrifuge liquid is completed in the first centrifuge liquor receiving portion 33a, the rotation of the centrifuge 1 is stopped.

그리고, 1차원심분리하여 잔류한 잔류 시료를 수용하는 스핀 컬럼(11)에 1차원심분리시 사용한 버퍼와 상이한 새로운 버퍼를 주입하여 새로운 혼합용액(3')을 만든다.Then, a new mixed solution (3 ') is prepared by injecting a new buffer different from the buffer used for one-dimensional segregation into the spin column (11) containing the residual sample remaining after one-dimensional seam separation.

이어서, 원심분리기(1)를 타방향으로 회전시켜, 설명의 편리상 도 5 및 도 6에 도시된 바와 같이 시계방향으로 회전시킨다.Then, the centrifugal separator 1 is rotated in the other direction and rotated clockwise as shown in Figs. 5 and 6 for convenience of explanation.

이 때, 스핀 컬럼(11)에 수용된 잔류 시료와 새로운 버퍼의 혼합용액(3')은 원심력에 의해 필터부(45)를 통과하여 여과되면서 원심분리된 후, 원심분리된 제2원심분리액(5b)은 스핀 컬럼(11)의 배출부(21)를 통해 집적 용기(31)를 향해 배출된다. 동시에, 스핀 컬럼(11)의 배출부(21)를 통해 배출되는 제2원심분리액(5b)은 관성력에 의해 원심분리기(1)의 회전반대방향으로 유동하면서, 즉 원심분리기(1)의 반시계방향으로 유동하면서 원심분리기(1)의 회전반대방향에 위치한 제2원심분리액 수용부(33b)로 채집된다.At this time, the mixed solution 3 'of the residual sample stored in the spin column 11 and the new buffer is centrifuged while passing through the filter unit 45 by centrifugal force, and then centrifuged to obtain a second centrifugal liquid 5b are discharged toward the accumulating container 31 through the discharge portion 21 of the spin column 11. [ At the same time, the second centrifuging liquid 5b discharged through the discharge portion 21 of the spin column 11 flows in the direction opposite to the rotation of the centrifugal separator 1 by the inertial force, And is collected into a second centrifugation liquid containing portion 33b located in a direction opposite to the rotation of the centrifuge 1 while flowing in a clockwise direction.

이로써, 본 발명에 따른 원심분리 키트(10)를 이용하여, 핵산 등의 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료로부터 상이한 두 종류의 원하는 물질을 간편하게 얻을 수 있게 된다.Thus, using the centrifugal separation kit 10 according to the present invention, two different kinds of desired substances can be easily obtained from a sample having a biological or chemical substance such as nucleic acid.

한편, 도 7에는 본 발명의 제2실시예에 따른 원심분리 키트가 도시되어 있고, 도 8에는 도 7의 원심분리 키트가 일방향으로 회전하는 원심분리기에 장착되어 원심분리되는 모습의 모식도가 도시되어 있고, 도 9에는 도 7의 원심분리 키트가 타방향으로 회전하는 원심분리기에 장착되어 원심분리되는 모습의 모식도가 도시되어 있다. 본 발명의 제2실시예에 따른 원심분리 키트(10' )는 전술한 제1실시예와는 달리, 집적 용기(31' )를 수용하는 보조 집적 용기(51)를 더 포함한다.7 shows a centrifugal separation kit according to a second embodiment of the present invention, and FIG. 8 is a schematic view of centrifugal separation of the centrifugal separation kit of FIG. 7 mounted on a centrifugal separator rotating in one direction And FIG. 9 is a schematic view showing a state where the centrifugal separation kit of FIG. 7 is mounted on a centrifugal separator rotating in the other direction and is centrifuged. The centrifugal kits 10 'according to the second embodiment of the present invention further include an auxiliary accumulation container 51 which accommodates the accumulation container 31', unlike the first embodiment described above.

보조 집적 용기(51)는 일정 길이를 가지며, 일측이 개구된 속이 빈 원형의 튜브 형상을 가진다.The auxiliary accumulation vessel (51) has a constant length and has a hollow circular tube shape with one side opened.

보조 집적 용기(51)의 내측에는 집적 용기(31' )의 일측 수용부, 즉 제2수용부(33b)로 원심분리된 원심분리액(5b)을 수용하는 보조 원심분리액 수용부(53)가 형성되어 있으며, 보조 원심분리액 수용부(53)에는 집적 용기(31' )가 부분적으로 삽입 장착된다.An auxiliary centrifuge solution receiving portion 53 for receiving the centrifuge fluid 5b centrifuged by the second receiving portion 33b is provided in the interior of the auxiliary accumulation vessel 51 at one side of the accumulation container 31 ' And the accumulation container 31 'is partially inserted into the auxiliary centrifuge solution receiving portion 53. [

보조 집적 용기(51)의 일측 개구는 집적 용기(31' )가 삽입되는 집적 용기 삽입부(55)를 형성하며, 집적 용기 삽입부(55)는 보조 원심분리액 수용부(53)와 연통한다.One opening of the auxiliary accumulation container 51 forms an accumulation container insertion portion 55 into which the accumulation container 31 'is inserted and the accumulation container insertion portion 55 communicates with the auxiliary centrifuge solution receiving portion 53 .

또한, 본 발명의 제2실시예에 따른 원심 분리 키트(10' )는 제2수용부(33b)를 형성하는 집적 용기(31' )의 내부 바닥면에 개구(33c)가 형성되어 있으며, 이에 제2수용부(33b)로 원심분리된 원심분리액(5b)은 도 9에 도시된 바와 같이 개구(33c)를 통해 보조 집적 용기(51)의 보조 원심분리액 수용부(53)로 유동하게 된다.In the centrifuge kit 10 'according to the second embodiment of the present invention, an opening 33c is formed in the inner bottom surface of the accumulation container 31' forming the second accommodating portion 33b, The centrifugal separation liquid 5b centrifuged in the second containing portion 33b flows into the auxiliary centrifuge liquid receiving portion 53 of the auxiliary accumulation vessel 51 through the opening 33c as shown in Fig. do.

한편, 제1수용부(33a)로 원심분리된 원심분리액(5a)은 도 8에 도시된 바와 같이 제1수용부(33a)에 채집된다.On the other hand, the centrifugal separation liquid 5a centrifuged in the first receiving portion 33a is collected in the first receiving portion 33a as shown in Fig.

이로써, 본 발명의 제2실시예에 따른 원심분리 키트(10 ')는, 개구(33c)가 형성된 집적 용기(31' )의 일측 수용부(33b)에 채집된 원심분리액(5b)의 많은 버퍼를 보조 집적 용기(51)에 간편하게 채집할 수 있게 된다.Thus, the centrifugal separator kit 10 'according to the second embodiment of the present invention has a large number of the centrifugal separator 5b collected in one storage 33b of the accumulation container 31' in which the opening 33c is formed The buffer can be easily collected in the auxiliary accumulation vessel 51.

또한, 원심분리 작업 중 추가적인 원하는 물질을 얻기 위해 스핀 컬럼과 집적 용기를 분리할 필요가 없어, 시료의 오염과 소실을 방지하며, 아울러 시료의 분리 작업이 간편하고, 작업성을 향상시킬 수 있으며 자동화가 용이하게 된다.In addition, there is no need to separate the spin column and the integrated vessel in order to obtain additional desired substances during the centrifugal separation operation, thereby preventing the contamination and loss of the sample, simplifying the separation operation of the sample, .

한편, 전술한 실시예에서는 도시되어 있지 않지만 본 발명에 따른 복수, 예로서 96 또는 384의 원심분리 키트를 격자 형상으로 배열하여 사용할 수 있음은 물론이다.Needless to say, a plurality of centrifugal separation kits 96 or 384 according to the present invention may be arranged in a lattice form although not shown in the above-described embodiments.

본 발명은 기재된 실시예에 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 사상 및 범위를 벗어나지 않고 다양하게 수정 및 변형할 수 있음은 이 기술의 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명하다. 따라서 그러한 수정 예 또는 변형 예들은 본 발명의 특허청구범위에 속한다 하여야 할 것이다.It will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations can be made in the present invention without departing from the spirit and scope of the invention. Accordingly, such modifications or variations are intended to fall within the scope of the appended claims.

1 : 원심분리기 3,3' : 혼합용액
5a : 제1원심분리액 5b : 제2원심분리액
10,10' : 키트 11 : 스핀 컬럼
13 : 혼합용액 수용부 15 : 주입부
17 : 캡 19 : 연결끈
21 : 배출부 25 : 걸림턱
31,31 ' : 집적 용기 33,33a,33b : 원심분리액 수용부
35 : 삽입부 37 : 눈금
41 : 격벽 45 : 필터부
51 : 보조 집적 용기1: Centrifuge 3,3 ': Mixed solution
5a: First centrifuge liquid 5b: Second centrifuge liquid
10, 10 ': Kit 11: Spin column
13: mixed solution receiving part 15: injection part
17: cap 19: connecting cord
21: discharge part 25:
31, 31 ': integrated container 33, 33a, 33b:
35: insertion part 37: graduation
41: partition wall 45: filter part
51: auxiliary accumulation vessel

Claims (5)

원심분리하기 위한 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액을 수용하는 혼합용액 수용부와, 상기 혼합용액으로부터 원심분리된 원심분리액이 배출되는 배출부와, 상기 혼합용액 수용부의 하단에 마련되어 상기 혼합용액를 여과하는 필터부로 형성된 스핀 컬럼과;
상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 원심분리액을 수용하는 원심분리액 수용부가 형성된 집적 용기와;
상기 집적 용기의 원심분리액 수용부에 마련되어, 원심분리기를 일방향으로 회전시킬 때 상기 원심분리기의 회전반대방향에 위치한 원심분리액 수용부로 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 제1원심분리액을 채집하거나, 또는 상기 원심분리기를 타방향으로 회전시킬 때 상기 원심분리기의 회전반대방향에 위치한 원심분리액 수용부로 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 제2원심분리액을 채집하도록, 상기 원심분리액 수용부를 부분적으로 분리하는 격벽을 포함하는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트.A mixed solution holding part for holding a mixed solution containing a sample and a buffer having a biological or chemical substance for centrifugal separation; a discharge part for discharging centrifugal separation liquid centrifuged from the mixed solution; A spin column provided in the filter unit to filter the mixed solution;
An accumulation vessel in which a centrifuge solution accommodating portion for accommodating a centrifugation solution centrifuged from the spin column is formed;
A first centrifugal separator which is provided in the centrifugal separator reservoir of the accumulation vessel and is centrifuged from the spin column to collect the centrifugal separator in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separator when the centrifugal separator is rotated in one direction, Or when the centrifugal separator is rotated in the other direction, the second centrifugal separator centrifuged from the spin column is collected by the centrifugal separator containing the centrifugal separator in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separator, And a partition wall for partitioning the partition wall. 제1항에 있어서,
상기 필터부는 분리막 (membrane) 또는 여과제 (media filter)로 이루어지는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트.The method according to claim 1,
Wherein the filter unit comprises a membrane or a media filter. 제1항에 있어서,
상기 격벽은 상기 집적 용기의 내부 바닥면으로부터 수직하게 마련되는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트.The method according to claim 1,
Wherein the partition is vertically provided from an inner bottom surface of the accumulation vessel. 제1항에 있어서,
상기 집적 용기를 수용하는 보조 집적 용기를 더 포함하고,
상기 격벽에 의해 분리된 상기 원심분리액 수용부 중 어느 하나의 수용부에 수용된 원심분리액이 상기 보조 집적 용기로 유동하도록 상기 집적 용기의 일측 내부 바닥면에는 개구가 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트.The method according to claim 1,
Further comprising an auxiliary accumulation vessel for receiving said accumulation vessel,
And an opening is formed in one inner bottom surface of the accumulation container so that centrifugal separation liquid accommodated in any one of the centrifuged liquid receivers separated by the partition wall flows to the auxiliary accumulation container. Separation kit. 상기 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 기재된 원심분리 키트를 이용한 원심분리 방법에 있어서,
원심분리하기 위한 생물학적 또는 화학적 물질을 갖는 시료와 버퍼가 함유된 혼합용액을 상기 스핀 컬럼에 주입하는 단계와;
상기 격벽의 판면이 원심분리기의 회전축선과 동일 평면을 이루도록 상기 집적 용기를 원심분리기에 적재하는 단계와;
상기 원심분리기를 일방향으로 회전시켜 상기 원심분리기의 회전반대방향에 위치한 원심분리액 수용부로 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 제1원심분리액을 채집하는 단계와;
상기 원심분리기의 회전을 정지하는 단계와;
상기 원심분리하여 잔류한 잔류 시료를 수용하는 스핀 컬럼에 상기 버퍼와 상이한 새로운 버퍼를 주입하는 단계와;
상기 원심분리기를 타방향으로 회전시켜 상기 원심분리기의 회전반대방향에 위치한 원심분리액 수용부로 상기 스핀 컬럼으로부터 원심분리된 제2원심분리액을 채집하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 원심분리 키트를 이용한 원심분리 방법.A centrifugal separation method using the centrifugal separation kit according to any one of claims 1 to 4,
Injecting a spinning solution containing a buffer and a sample having biological or chemical substances for centrifugation into the spin column;
Loading the accumulation vessel on the centrifuge such that the plate surface of the partition wall is flush with the axis of rotation of the centrifuge;
Collecting a first centrifugal separator centrifuged from the spin column by rotating the centrifugal separator in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separator;
Stopping rotation of the centrifuge;
Injecting a new buffer, which is different from the buffer, into the spin column which receives the remaining sample by centrifugation;
And rotating the centrifuge in the other direction to collect a second centrifugal separation liquid centrifuged from the spin column into a centrifugal separation liquid accommodation unit located in a direction opposite to the rotation direction of the centrifugal separation unit. .
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