KR101486484B1

KR101486484B1 - A food composition for the improvement or prevention of asthma comprising extract of allium hookeri

Info

Publication number: KR101486484B1
Application number: KR1020140017425A
Authority: KR
Inventors: 박대훈; 방미애
Original assignee: 동신대학교산학협력단
Priority date: 2014-02-14
Filing date: 2014-02-14
Publication date: 2015-01-26

Abstract

The present invention relates to a food composition for preventing and treating asthma containing an Allium hookeri extract as an active ingredient, which can be a functional food composition. The Allium hookeri extract has an excellent effect of preventing and treating asthma. Allium hookeri which is a material of the Allium hooker extract has been used as a food for a long time, is harmless to a human body, and does not have side effects, thereby being used for preventing and treating asthma or asthma diseases.

Description

TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a food composition for preventing or improving asthma,

본 발명은 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 천식 예방 또는 개선용 식품조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a food composition for preventing or improving asthma, which comprises a plant extract as an active ingredient.

2011년 기준 전 세계적으로 약 2억 3천 5백만 여명이 천식으로 고통을 받고 있는 것으로 알려져 있으며, 발병률은 환경에 따라서 많은 차이가 있으나, 전체 인구 대비 1% 내지 18%에 달하는 것으로 알려져 있다. 우리나라의 경우, 천식 유병률이 어린이에서는 1981년 5.6%에서 1990년 10.1%로 점차 증가하고 있으며, 성인에서도 천식환자가 증가되고 있는 것으로 조사되어, 특히 65세 이상의 노련 인구에서는 12.7% 높은 유병율을 보이고 있다.About 235 million people worldwide are suffering from asthma in 2011, and the incidence is estimated to range from 1% to 18% of the total population, although the incidence varies widely depending on the environment. In Korea, the prevalence of asthma is gradually increasing from 5.6% in 1981 to 10.1% in 1990, and in asthmatic patients in adults, the prevalence of asthma is 12.7% .

상기 천식(asthma)은 발작성 호흡곤란을 반복적으로 나타내는 증상을 가지는 질환으로, 기관지 천식과 심장 천식이 있으며, 좁은 의미의 천식은 주로 기관지 천식을 의미한다. 상기 기관지 천식은 알레르기에 의한 대표적인 질환 중 하나로, 비만세포 표면의 IgE Fc 수용체에 결합하는 즉시과민항체(reagin)와 알레르겐(allergen)이 반응하여 화학물질을 유리시키며, 이에 따라 기도폐색이 일어나 발병하게 된다.The asthma is a disease that repeatedly shows symptoms of paroxysmal dyspnea, and includes bronchial asthma and cardiac asthma, and narrow asthma mainly means bronchial asthma. The bronchial asthma is one of the most common diseases caused by allergies. As soon as it binds to the IgE Fc receptors on the surface of mast cells, the sensitizer reacts with the allergen to liberate the chemical substances, resulting in airway obstruction do.

상기 천식은 먼지진드기, 곰팡이나 바퀴벌레에 의한 감염, 애완동물의 털이나 오염물질과 같은 알레르기 유발물질 또는 흡연 등 다양한 원인에 의해 발병되는 것으로 알려져 있다.The asthma is known to be caused by various causes such as dust mites, infections caused by fungi or cockroaches, allergenic substances such as pet hair or pollutants, or smoking.

구체적으로, 상기 천식은 헬퍼 T 세포(helper T cell)와 밀접한 관련이 있는 면역관련 질환이다. 상기 헬퍼 T 세포는 분비를 유도하는 사이토카인(cytokine)의 종류에 따라, Th1 cell과 Th2 cell로 구분될 수 있다. 상기 Th1 cell은 주로 인터류킨-2(IL-2)나 인터페론-감마(IFN-γ)를 분비하고, 상기 Th2 cell은 IL-4, IL-5 및 IL-13을 분비한다. 또한, 상기 Th2 cell은 B 세포(B-cell)의 분화와 IgG가 IgE로 변화되는 것을 촉진하기도 한다. 상기 천식은 상기 Th1 cell과 Th2 cell의 균형이 파괴되어 발생하는 것으로 보고 되고 있다.Specifically, the asthma is an immune-related disease closely related to helper T cells. The helper T cells can be divided into Th1 cell and Th2 cell depending on the type of cytokine that induces secretion. The Th1 cell mainly secretes interleukin-2 (IL-2) or interferon-gamma (IFN-γ), and the Th2 cell secretes IL-4, IL-5 and IL-13. In addition, the Th2 cell promotes the differentiation of B cells (B-cells) and the change of IgG to IgE. It has been reported that asthma is caused by destruction of the balance between Th1 cell and Th2 cell.

상기 천식은 면역관련 질환으로 다양한 사이토카인에 의해 유발 또는 억제될 수 있다. 보다 구체적으로, CD4 T 세포(CD4 T-cell)의 기능을 조절하는 것으로 알려진 IL-6는 천식 유도를 조절하는 것으로 알려져 있다. 반면에, IL-12는 Th1 cell과 Th2 cell의 균형을 조절하며, 천식의 억제와 관련이 있는 IFN-γ의 생산을 촉진하는 것으로 알려져 있다. 또한, IL-4와 IL-13은 염증과정의 진행, 기도과민반응, 점액분비 세포인 배상세포(goblet-cell)의 이상증식, 호산구 침윤, 점액 과분비 또는 B-cell 활성화에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 천식발생의 주요인자로 보고되고 있다. 또한, IL-5는 호산구의 분화, 활성화 및 이동에 관여하며, 천식과 관련이 있는 것으로 알려져 있다.The asthma is an immune-related disease and can be induced or suppressed by various cytokines. More specifically, IL-6, which is known to modulate the function of CD4 T cells (CD4 T-cells), is known to modulate asthma induction. On the other hand, IL-12 regulates the balance of Th1 and Th2 cells and is known to promote the production of IFN-y, which is associated with the inhibition of asthma. In addition, IL-4 and IL-13 are known to be involved in inflammatory processes, airway hyperresponsiveness, abnormal growth of mucus-secreting goblet-cells, eosinophil infiltration, mucus hypersecretion, or B-cell activation , And is reported to be a major factor in the development of asthma. IL-5 is also involved in the differentiation, activation and migration of eosinophils and is known to be associated with asthma.

상기 천식과 관련하여, 기존 치료방법으로 기관 확장제, 코르티코스테로이드(corticosteroid), 류코트리엔 조절제(leukotriene modifier), 테오필린(theophylline) 또는 항 IgE제가 제안되었으나, 이러한 치료제의 투여에도 불구하고 천식을 완벽히 치료하지 못하였으며, 몇몇 부작용에 대한 문제가 제기되고 있다. 일 예로, 구체적으로, 천식 치료제로 폭 넓게 이용되는 코르티코스테로이드 흡기제는 다양한 부작용이 보고되면서, 그 사용이 감소하고 있는 추세이다.Regarding the above-mentioned asthma, an organ dilator, a corticosteroid, a leukotriene modifier, a theophylline or an anti-IgE agent has been proposed as a conventional therapeutic method. However, despite the administration of such a therapeutic agent, And some problems have been raised. For example, cortico steroid air intoxication agents widely used as therapeutic agents for asthma have been reported to have various adverse effects and their use is decreasing.

상기한 바와 같이, 상기 천식은 호흡기계와 관련된 난치성 면역질환으로, 치료를 위한 다양한 치료법이나 치료제와 관련된 연구가 진행되고 있으나, 각 치료제의 문제점 등으로 인해 그 사용이 제한되어있는 실정이다.As described above, the asthma is a refractory immune disease related to the respiratory system, and various therapies and therapies for treatment are being studied, but the use thereof is limited due to problems of each therapeutic agent.

특히, 의료비 증가에 따른 국가 부담가중, 노령화 사회 진입, 소비자의 건강관심 고조, 식품산업계의 신제품 개발 방향 등을 고려할 때, 자생식물과 같은 부작용 등의 문제가 적은 천연물 기반의 천식 개선 또는 예방을 위한 건강기능식품의 국내수요는 지속적으로 증가될 것으로 전망된다.In particular, when considering the burden of the state burden due to the increase in medical expenses, entry into the aging society, consumer's interest in health, development direction of new products in the food industry, Domestic demand for functional foods is expected to increase steadily.

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본 발명은 인체에도 무해한 천연물질을 유효성분으로 포함하는 천식 개선 또는 예방용 식품조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.The present invention provides a food composition for improving or preventing asthma, which comprises a natural substance harmless to human body as an effective ingredient.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 천식의 개선 또는 예방용 식품조성물을 제공한다. 상기 식품 조성물은 식품, 식품첨가제 또는 음료일 수 있으며, 바람직하게는 기능석 식품 조성물일 수 있다.In order to attain the above object, the present invention provides a food composition for improving or preventing asthma, which comprises a tubular extract as an active ingredient. The food composition may be a food, a food additive or a beverage, and may preferably be a functional food composition.

상기 삼채 추출물은 탄소수 1 내지 5의 알코올, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나로 추출된 것 일 수 있고, 구체적으로 상기 삼채 추출물은 물로 추출된 것일 수 있다.The triple extract may be one selected from the group consisting of alcohols having 1 to 5 carbon atoms, water, and mixtures thereof. Specifically, the triple extract may be extracted with water.

또한, 본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여 삼채의 용도(Use), 구체적으로 삼채의 천식 개선 또는 예방용 용도를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention also provides a use of a trichome, specifically, a use for improving or preventing asthma in a trichogram.

본 명세서에서 특별한 언급이 없는 한, 유효성분이란 조성물, 구체적으로 식품조성물에 있어서 천식의 개선 또는 예방 효과를 제공하는 성분을 의미한다.As used herein, unless otherwise specified, an effective component means a composition, specifically, a component that provides an improvement or prevention effect of asthma in a food composition.

본 발명의 발명자들은 부작용이 적고 투약이 쉬운 천연물질 중 천식의 개선 또는 예방 효과가 있는 천연물 유래의 물질을 찾기 위하여, 항천식 효과, 구체적으로, BALB/c 마우스(BALB/c mouse)에서 ovalbumin으로 기도 염증 및 기도 과민성(airway hyperresopnsiveness, AHR)을 유발한 천식 유도 동물 실험모델을 이용하여 확인한 결과, 삼채 물 추출물의 투여에 의하여, 폐기관지 세척액(bronchoalveolar lavage fluid, BALF) 중 총 백혈구(white blood cell, WBC) 수와 호중구(Neutrophil, NE) 수의 변화에 대한 관찰 및 폐 조직의 조직병리학적 관찰 및 면역염색법을 통한 관찰을 통해 항천식 효과를 가진 천연물 유래의 물질을 탐색해 왔으며, 상기 탐색 과정에서 삼채(Allilum hookeri)가 천식 개선 및 예방능이 우수한 것으로 평가되어, 이로부터 본 발명을 완성하였다.
The inventors of the present invention have found that an anti-asthmatic effect, specifically, an ovalbumin in a BALB / c mouse (BALB / c mouse) can be effectively used as a natural antimicrobial agent (BALF) of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) by the administration of water extract of the asthma induction animal, which was induced by airway hyperresponsiveness (AHR) , WBC) and neutrophil (Neutrophil, NE) number, histopathological observation of lung tissue, and immunostaining, and have been searching for a substance derived from a natural substance having an anti-asthmatic effect. From the hookeri ) was evaluated to be excellent in the improvement and prevention of asthma. Thus, the present invention was completed.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 천식 개선 또는 예방용 식품조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a food composition for improving or preventing asthma, comprising a tubular extract as an active ingredient.

상기 삼채(Allilum hookeri)는 미얀마 북쪽 히말라야 산백의 고산지가 원산지인 백합과의 여러해살이풀 식물로, 미얀마 현지어로는 쥬밋(jumyint)이라고도 불리운다. 상기 삼채는 동아시아의 중국 남부, 인도, 부탄, 스리랑카 등에서 서식하며, 주로, 해발 1,400 m 내지 4,200 m의 고산지에서 자라며, 그늘에서는 잘 자라지 못하고, 습윤한 도랑 주변과 같은 축축한 토양에서 잘 자란다. 상기 삼채는 8월 내지 9월경에 백황색의 구형의 꽃이 피고, 잎은 근생하고 선형이며, 가운데 잎맥이 뚜렷하고, 굵고 단단한 뿌리를 가진다. 상기 삼채는 매운 맛이 강하지만, 쓴맛과 단맛이 있어, 세가지 맛을 갖는다 하여 삼채라고 하며, 뿌리의 모양과 맛이 인삼의 잔뿌리와 흡사하다고 하여 삼채라고도 한다. 상기 삼채는 유황화합물(sulphur compounds), 비타민 A, 철분, 칼슘 등의 성분들이 함유되어 있고, 특히 식이 유황화합물의 함량이 높아, 식용과 약용으로 사용되고 있다. 상기 삼채는 기존에 항암효과, 항산화효과, 또는 고혈압 조절능 등을 갖는 것으로 알려져 있으나, 천식과 같은 기관지 질환에 대한 기능은 전혀 알려진 바가 없다. Allilum hookeri is a perennial herbaceous plant native to the Himalayan region of northern Myanmar. It is also called jumyint in Myanmar. It grows in the high mountains of 1,400 m to 4,200 m above sea level, and does not grow well in the shade. It grows well in damp soil such as around wet ditches. The above-mentioned tub is a yellowish-yellow sphere flower bloomed from August to September, the leaves are symmetrical and linear, the center vein is clear, and the roots are coarse and firm. Though the above-mentioned tripe is strong in spicy taste, it has a bitter taste and sweet taste, and it is said to have three flavors, and it is said that the shape and taste of roots is similar to the root roots of ginseng. The above-mentioned triplex contains components such as sulphur compounds, vitamin A, iron, and calcium, and is particularly used for edible and medicinal purposes because of high content of dihydrogen sulfide compounds. It is known that the above-mentioned tubers have anticancer effect, antioxidative effect, or hypertension control function, but the function for bronchial diseases such as asthma is not known at all.

상기 본 발명의 삼채 추출물은 추출용매로 추출하거나 추출용매로 추출하여 제조한 추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조할 수 있다.The above-mentioned tubular extract of the present invention can be prepared by extracting with an extraction solvent or extracting with an extraction solvent, and then fractionating the extract with a fraction solvent.

상기 추출용매는 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 일 수 있다. 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 5의 알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 벤젠, 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매 일 수 있으며, 바람직하게는 탄소수 1 내지 5의 알코올, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나, 더욱 바람직하게는 물일 수 있다.The extraction solvent may be at least one selected from the group consisting of water and an organic solvent. The organic solvent may be a polar solvent such as methanol, ethanol or the like, an alcohol having 1 to 5 carbon atoms, ethyl acetate or acetone, a nonpolar solvent such as benzene, hexane or dichloromethane, or a mixed solvent thereof, preferably 1 to 5 carbon atoms Of an alcohol, water and a mixture thereof, more preferably water.

상기 본 발명의 삼채 추출물은 통상의 식물 추출물, 구체적으로 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있다. 보다 구체적으로, 불순물을 제거한 삼채에 추출용매를 가하고 추출과정을 수행하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 추출과정은 냉침추출법, 온침추출법, 가압추출법 또는 초음파 분쇄 추출법일 수 있다.The above-mentioned tubular extract of the present invention may be a conventional plant extract, specifically, a plant extract prepared according to the method for producing a plant extract. More specifically, the extraction can be performed by adding an extraction solvent to the triplets from which the impurities have been removed. The extraction process may be a cold extraction method, a warm extraction method, a pressure extraction method, or an ultrasonic pulverization extraction method.

상기 분획용매는 물, 부탄올, 에틸아세테이트, 클로로포름, 헥산 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 분획물은 상기 추출법으로 제조한 추출물, 구체적으로 조추출액에 분획과정을 더욱 실시한 분획물일 수 있다. 상기 분획용매는 에틸아세테이트, 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 메틸렌클로라이드 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매일 수 있다. 상기 분획과정은 구체적으로 상기 조추출액에 헥산, 플로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물을 순서로 가한 후에, 층 분리한 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 분획물을 순차적으로 수득하는 방법으로 수행할 수 있다.The fraction solvent may be water, butanol, ethyl acetate, chloroform, hexane or a mixture thereof. The fraction may be an extract prepared by the above extraction method, specifically, a fraction obtained by further fractionating the crude extract. The fraction solvent may be a solvent selected from the group consisting of ethyl acetate, ether, chloroform, benzene, hexane, methylene chloride, and mixed solvents thereof. Specifically, the fractionation step is performed by sequentially adding hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, and water to the crude extract in this order, then sequentially fractionating the hexane fraction, the chloroform fraction, the ethyl acetate fraction, the butanol fraction, . &Lt; / RTI >

상기 추출물 또는 분획물은 추출 또는 분획과정을 수행한 이후, 감압 여과 과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 농축하거나 용매를 제거할 수 있다. 상기 수득한 추출물은 사용시까지 급속 냉동 냉장고(deep freezer)에 보관할 수 있다.After the extraction or fractionation, the extract or fraction may be subjected to a vacuum filtration process or may be further concentrated and / or lyophilized to concentrate or remove the solvent. The obtained extract can be stored in a deep freezer until use.

구체적으로, 상기 삼채 추출물은 상기 용매 추출 공정 후에 여과 공정, 농축 공정 및/또는 건조 공정을 선택적으로 또는 중복하여 추가 수행한 것일 수 있으며, 상기 여과공정은 여과지를 이용하여 수행할 수 있고, 상기 농축공정은 감압농축 등을 통하여 수행할 수 있으며, 상기 건조공정은 열풍건조 또는 냉동건조 등의 방법으로 수행할 수 있다.Specifically, the triple extract may be a filtration process, a concentration process, and / or a drying process after the solvent extraction process. Alternatively, the filtration process may be performed using a filter paper, The process may be carried out through reduced pressure concentration or the like, and the drying process may be performed by a method such as hot air drying or freeze drying.

상기 삼채 추출물은 천식 유래 동물 실험모델을 통해 확인한 결과, 백혈구 수의 증가를 억제시키고, 폐의 조직병리학적 관찰 및 면역염색법을 통한 관찰 결과, 기관지와 혈관주변의 염증세포의 침윤 및 점액 분비를 억제함으로써, 천식의 개선 또는 예방 효과를 갖는 것으로 확인되었다.The above-mentioned triple extract inhibits the increase of leukocyte count and inhibits infiltration of inflammatory cells and mucus secretion around the bronchial and blood vessels as a result of histopathological observation and immunohistochemical staining of the lung. , Thereby confirming the improvement or prevention of asthma.

이러한 측면에서, 상기 삼채 추출물은 천식의 개선 또는 예방을 위한 용도로 사용될 수 있고, 상기 삼채 추출물은 천식의 개선 또는 예방용 식품조성물의 유효성분 또는 약리성분으로 사용될 수 있다.In this respect, the tubular extract may be used for the purpose of improving or preventing asthma, and the tubular extract may be used as an active ingredient or pharmacological ingredient of a food composition for improving or preventing asthma.

본 발명에서 천식(asthma)이란 폐 속에 있는 기관지가 아주 예민해진 상태로, 때때로 기관지가 좁아져서 숨이 차고 가랑가랑하는 숨소리가 들리면서 기침을 심하게 하는 증상을 나타내는 질환을 의미하며, 기관지의 알레르기 염증 반응 때문에 발생하는 알레르기 질환이다. 상기 증상들은 반복적으로 또는 발작적으로 나타나며 유전적 요인과 환경적 요인이 합쳐져서 나타난다. 상기 천식은 기관지 천식과 심장 천식일 수 있으며, 좁은 의미로는 기관지 천식일 수 있다.In the present invention, asthma refers to a disease in which the bronchus in the lung is very sensitive, sometimes the bronchus narrows, and the breathing, cramp, and breath sounds are heard and the cough is severe. It is an allergic disease caused by the reaction. These symptoms appear repeatedly or seizurefully, with genetic and environmental factors combined. The asthma may be bronchial asthma and cardiac asthma, and in a narrow sense may be bronchial asthma.

상기 기관지 천식의 대표적인 증상은 호흡곤란, 기침 또는 천명이다. 이러한 증상이 반복적으로 또는 발작적으로 나타나며, 실제 천식 환자는 상기와 같은 전형적인 천식의 증상 외에 비전형적인 증상을 호소하는 경우도 많다. 즉, 가슴이 답답하거나 흉부 압박감을 호소하는 경우 또는 목구멍에 가래가 걸려있는 것 같은 증상만을 호소하는 경우도 있다. 일반적으로, 감기에 걸린 후에 호흡곤란이 악화하거나, 달리기 같은 운동 후에 호흡곤란, 거친 숨소리 증상들이 많이 나타난다. 때로는 심한 천식 발작으로 즉각적인 응급치료 및 입원 치료가 절대적으로 필요한 경우가 있는데, 이때 환자는 곧 죽을 것 같은 공포를 느끼며, 실제로 심한 천식 발작은 생명을 위협하기도 한다.Typical symptoms of bronchial asthma include dyspnea, cough, or wheezing. These symptoms appear repeatedly or spontaneously. In actual asthma patients, in addition to the typical asthmatic symptoms described above, there are many cases of atypical symptoms. In other words, the chest tightness, chest tightness, or the throat of the throat may be appealing symptoms such as hanging. Generally, dyspnea deteriorates after taking a cold, or dyspnea and heavy breathing symptoms occur after exercise such as running. Sometimes severe asthma attacks require immediate first aid and inpatient treatment, in which the patient feels fearful of death and, in fact, severe asthma attacks are life-threatening.

상기 천식의 원인은 유전적 요인과 환경적 요인이 있으며, 주로 이들의 상호작용에 의해 발병한다. 구체적으로, 부모로부터 물려받은 알레르기 체질과 주위의 천식유발 인자들이 상호 작용을 일으켜 면역체계에 혼란이 생기면서 천식이 발생하게 된다.The causes of asthma are genetic and environmental factors, and they are mainly caused by their interaction. Specifically, allergic inheritance inherited from parents and surrounding asthma inducing factors interact with each other, resulting in confusion in the immune system, resulting in asthma.

천식을 유발하는 요인으로는 원인 물질과 악화 요인이 있다. 상기 원인 물질을 알레르겐(allergen)이라고 하는데, 대표적인 알레르겐은 집먼지 진드기, 꽃가루, 동물의 털이나 비듬 또는 바퀴벌레 등이 있다. 상기 악화 요인은, 감기, 담배연기와 실내오염, 대기오염, 식품첨가제, 과격한 운동 등 신체적 활동, 기후 변화, 황사, 스트레스 등이 있다.Factors causing asthma include causative agents and worsening factors. Such causative substances are called allergens. Representative allergens include house dust mites, pollen, animal hair, dandruff, or cockroaches. These deteriorating factors include physical activity such as cold, tobacco smoke and indoor pollution, air pollution, food additives, intense exercise, climate change, dustiness, and stress.

천식, 특히 기관지 천식의 치료법으로는 증상이 있으면 신속하게 증상을 회복시키고 재발을 방지하기 위해서 질병을 조절하는 약제를 장기간 사용하는 약물요법과, 천식의 원인 물질을 찾아 원인 알레르겐 노출을 최소화하고 악화인자로부터 회피하는 회피요법이 있다.The treatment of asthma, especially bronchial asthma, includes the long-term use of medicines that regulate disease in order to quickly recover symptoms and prevent recurrence if symptoms are present, to find the causative agent of asthma, to minimize allergen exposure, There is a avoiding therapy to avoid.

상기 약물요법으로는 좁아진 기관지를 짧은 시간 내에 완화시키는 기관지 확장제와 같은 증상 완화제와 기관지의 알레르기 염증을 억제하여 천식발작을 예방 또는 개선하는 질병 조절제로 구분한다. 상기 증상 완화제의 경우, 부작용의 문제는 적은 편이나 근본적인 개선 효과를 발휘할 수 없고, 상기 질병 조절제의 경우 호르몬 제제 등이어서 부작용이 문제가 되고 있다.The drug therapy includes a symptom relief agent such as bronchodilator which relaxes the narrowed bronchus in a short time and a disease control agent which suppresses or improves asthma attack by inhibiting bronchial allergy inflammation. In the case of the symptom-relieving agent, the problem of the side effect is small, but the fundamental improvement effect can not be exerted. In the case of the disease-controlling agent, side effects such as hormone preparations become a problem.

본 발명의 천식 예방 또는 치료용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 삼채를 0.001 내지 99.99중량%, 바람직하게는 0.1 내지 99 중량%로 포함할 수 있으며, 상기 천식 예방 또는 치료용 조성물의 사용방법 및 사용목적에 따라 유효성분의 함량을 적절히 조절할 수 있다.The composition for preventing or treating asthma according to the present invention may contain 0.001 to 99.99% by weight, preferably 0.1 to 99% by weight, of the above-mentioned triangle, based on the total weight of the composition. The content of the active ingredient can be appropriately controlled depending on the purpose of use.

상기 조성물은 삼채 추출물 외에 부형제, 일 예로 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 상기 조성물에는 상기 성분들이 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다. 상기 추가성분의 함량은 바람직하게는 상기 삼채 추출물 100 중량부 당 0.1 내지 20,000 중량부 범위에서 추가할 수 있다.The composition may contain various additives such as an excipient such as an excipient such as nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, agrochemicals, pectic acid and its salts, organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, A carbonating agent used in beverages, and the like. The components may be added to the composition independently or in combination. The content of the additional ingredient is preferably in the range of 0.1 to 20,000 parts by weight per 100 parts by weight of the above-mentioned three-leaf extract.

이러한 측면에서, 본 발명의 식품조성물은 상기 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하고, 천식이나 천식 관련 질병의 개선 또는 예방 효과를 가진 식품조성물일 수 있다. In this respect, the food composition of the present invention may be a food composition containing the above-mentioned tuberous extract as an active ingredient and having an effect of improving or preventing asthma or asthma-related diseases.

본 명세서에서 있어서, 식품이란 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서 식품, 식품 첨가제, 건강 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 의도이다.As used herein, the term " food " means a natural product or a processed product containing one or more nutrients. Preferably, the term " food " Is intended to include foods, food additives, health functional foods and beverages.

본 발명의 삼채 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명의 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(예, 각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다.Foods to which the tubular extract of the present invention can be added include, for example, various foods, beverages, gums, tea, vitamin complexes, and functional foods. In addition, the food of the present invention may contain special nutritional foods (such as crude oil, infant formula, etc.), meat products, fish products, tofu, jelly, noodles (such as ramen, (Such as soy sauce, soybean paste, kochujang, and mixed potato), sauces, confectionery (eg, snacks), dairy products (eg fermented milk, cheese, etc.), other processed food, kimchi, (E.g., fruit, vegetable beverages, two oils, fermented beverages, etc.), natural seasoning (e.g., ramen soup, etc.).

상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다. The food, beverage or food additive may be prepared by a conventional production method.

본 발명에서 기능성 식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다.In the present invention, the functional food refers to a food group which is imparted with added value to function and express the function of the food by using physical, biochemical, biotechnological techniques and the like, the regulation of the biological defense rhythm of the food composition, Means a food which is processed and designed so that the body control function regarding the body is sufficiently expressed to the living body.

상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.The functional food may include a food-acceptable food-aid additive, and may further comprise suitable carriers, excipients and diluents conventionally used in the production of functional foods.

본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함하는 의도이다.In the present invention, beverage is a generic term for drinking or enjoying a taste, and is intended to include functional beverages.

상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 삼채 추출물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.There is no particular limitation on the other ingredients other than the above-mentioned triple extract as an essential ingredient as an essential ingredient in the indicated ratios, and it may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary drinks.

상기의 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, and the like; And polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural flavors (tau martin, stevia extract (e.g., rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavors (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used as flavors other than those described above .

상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g이다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably 5 to 12 g per 100 ml of the composition of the present invention. In addition, the composition of the present invention may further contain flesh for the production of natural fruit juice, fruit juice drink, and vegetable drink.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.In addition to the above, the composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and intermediates such as cheese and chocolate, pectic acid and its salts, Colloidal thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like.

이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 삼채 추출물 100 중량부 당 0 내지 20,000 중량부 범위에서 선택될 수 있다.These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical, but may be selected in the range of 0 to 20,000 parts by weight per 100 parts by weight of the tubular extract of the present invention.

본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다. The functional beverage according to the present invention can be used to control the bio-defense rhythm of the beverage group or beverage composition to which the added value is imparted so that the function of the beverage acts on the specific purpose by physical, biochemical or biotechnological techniques, Means a beverage which has been designed so that the body control function related to restoration and the like is sufficiently expressed in the living body.

상기 기능성 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 삼채 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.The above-mentioned functional beverage is not particularly limited to the other components other than the triple extract of the present invention as an essential ingredient in the indicated ratio, and may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages.

상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.Examples of such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, and the like; And polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. Natural flavors (tau martin, stevia extract (e.g., rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavors (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used as flavors other than those described above .

상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g일 수 있다.The ratio of the natural carbohydrate may generally be about 1 g to 20 g, preferably 5 g to 12 g per 100 ml of the composition of the present invention.

또한, 천식 개선 또는 예방을 목적으로 하는 식품 조성물에 있어서, 상기 삼채 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 중량% 내지 15 중량%로 포함할 수 있으며, 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 g 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 g 내지 1 g의 비율로 포함할 수 있다.In addition, in the food composition for improving or preventing asthma, the amount of the tubular extract may be 0.01 to 15% by weight of the total food, and the beverage composition may contain 0.02 to 5 g , Preferably from 0.3 g to 1 g.

또한, 본 발명은 삼채 추출물의 용도(Use), 구체적으로 삼채의 천식 개선 또는 예방용 용도에 관한 것이다. 상기 삼채 추출물은 삼채 물 추출물일 수 있다.In addition, the present invention relates to the use of a tubular extract, specifically, a use for improving or preventing asthma in a tub. The triple extract may be a triple-water extract.

상기 삼채 추출물, 구체적으로 삼채 물 추출물은 실험동물에 의한 천식 동물 모델을 통하여 확인한 결과, 백혈구 수의 증가를 억제시키고, 폐의 조직병리학적 관찰 및 면역염색법을 통한 관찰 결과, 기관지와 혈관주변의 염증세포의 침윤 및 점액 분비를 억제하는 것으로 확인되어, 천식 또는 천식과 관련된 질환의 예방 또는 개선에 효과적인 것으로 예상되어, 천식이나 천식 관련 질환의 개선 또는 예방용 용도가 우수한 것으로 평가된다.The above-mentioned triple extract, specifically the triple-water extract, was confirmed through an animal model of asthma by an experimental animal. As a result, the increase of leukocyte count was suppressed, and histopathologic observation and immunohistochemistry of the lung revealed that inflammation Cell infiltration and mucus secretion and is expected to be effective for preventing or ameliorating asthma or asthma-related diseases. Therefore, it is evaluated that the use for improving or preventing asthma or asthma-related diseases is evaluated as excellent.

본 발명의 삼채 추출물은 동물 실험을 통하여 확인한 결과, 백혈구 수의 증가를 억제시키고, 기관지와 혈관주변의 염증세포의 침윤 및 점액 분비를 억제하는 것으로 확인되었으며, 상기 유효성분인 삼채는 식품으로 이용되는 식물이므로, 이로부터 제조된 삼채 추출물은 부작용에 대한 문제도 없을 것으로 예상되어, 천식 등의 새로운 예방 또는 치료제로서 매우 가치가 높을 것으로 판단된다.The triacylgia extract of the present invention was found to inhibit the increase of leukocyte count, suppress infiltration of inflammatory cells around bronchi and blood vessels, and inhibit mucus secretion. The triacylglycerol derivative, which is an active ingredient, Since the plant is a plant, it is expected that there will be no problem about the side effect of the tuberous extract prepared from this, and thus it is considered to be highly valuable as a new preventive or therapeutic agent for asthma and the like.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 백혈구 세포의 세포 수 변화를 나타낸 그래프로, 도 1a는 단위 부피당 백혈구 세포(WBC) 수(x10³ cells/μL)를 나타낸 그래프이고, 도 1b는 단위 부피당 호중구 세포 또는 중성 백혈구(NE, Neutrophil) 수(x10³ cells/μL)를 나타낸 그래프이다. 또한, Control은 아무런 처리를 하지 않은 정상 대조군을 의미하고, Induction Control은 천식을 유발한 음성 대조군을 의미하며, Dexamethasone은 덱타메타손(dexamethasone)을 처리한 양성 대조군을 의미하고, Al. hookeri 300 mg/kg은 300 mg/kg/day 함량으로 삼채 추출물을 처리한 실험군을 의미한다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 천식 실험 모델을 이용한 동물 실험에서 폐조직의 병리조직학적인 변화를 기관지와 폐조직의 혈관주변을 H&E(헤마토톡신 & 에오진 염색, hematoxylin and eosin stain)으로 염색한 후 관찰한 사진으로, 화살표(Arrow)는 염증 세포의 침윤을 의미하고, Br은 모세 기관지(bronchiole)를 의미하며, V는 혈관(vessel)을 의미한다. 또한, A는 아무런 처리를 하지 않은 정상 대조군(Control)을 의미하고, B는 천식을 유발한 음성 대조군(Induction Control)을 의미하며, C는 덱타메타손(dexamethasone)을 처리한 양성 대조군(Dexamethasone)을 의미하고, D는 30 mg/kg/day 함량으로 삼채 추출물을 처리한 실험군, E는 100 mg/kg/day 함량으로 삼채 추출물을 처리한 실험군, F는 300 mg/kg/day 함량으로 삼채 추출물을 처리한 실험군(Al. hookeri 300 mg/kg)을 의미한다.FIG. 1 is a graph showing cell numbers of leukocyte cells according to an embodiment of the present invention. FIG. 1A is a graph showing the number of leukocyte (WBC) cells per unit volume (x10 ³ cells / Neutrophil cells or neutrophils (NE, Neutrophil) (x 10 ³ cells / μL). In addition, Control means a normal control group without any treatment, Induction Control means a negative control group causing asthma, Dexamethasone means a positive control group treated with dexamethasone, and Al. The hookeri 300 mg / kg means 300 mg / kg / day of the experimental group treated with the tuberous extract.
FIG. 2 is a graph showing the histopathological changes of pulmonary tissues in an animal experiment using an asthma experimental model according to an embodiment of the present invention, showing H & E (hematoxylin and eosin stain) around blood vessels of bronchi and lung tissue, (Arrow) means infiltration of inflammatory cells, Br means bronchiole, and V means a vessel. B means a negative control inducing asthma, C means a positive control (dexamethasone) treated with dexamethasone, A indicates a normal control without any treatment, B indicates a negative control inducing asthma, , D was the experimental group treated with 30 mg / kg / day of the water extract, E was the experimental group treated with the water extract of 100 mg / kg / day, F was 300 mg / kg / (Al. Hooker 300 mg / kg) which had been treated with Alzheimer's disease.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail so that those skilled in the art can easily carry out the present invention. The present invention may, however, be embodied in many different forms and should not be construed as limited to the embodiments set forth herein.

실시예Example 1: One: 삼채Triptych 추출물의 제조 Preparation of extract

삼채 시료는 전라남도 나주시에서 재배된 것을 구입한 삼채를 10℃ 내지 20℃의 온도조건 및 통풍이 가능한 조건에서 3일간 자연건조시킨 후, 분쇄기로 분쇄하여 제조하였다.The triplicate specimens were prepared by naturally drying for 3 days under conditions of 10 ° C to 20 ° C and ventilating conditions, and then pulverizing the triplets purchased from Naju City, Jeollanam-do, with a pulverizer.

삼채 추출물은 상기 삼채 분쇄물 100 g을 추출용기에 넣고, 증류수(D.W.) 3,900 ml를 첨가한 후, 40℃에서 24시간 동안 물 추출을 수행하여 삼채 물 추출액을 제조하였다. 상기 제조된 삼채 물 추출액을 종이여과지(Whatman, No.2)를 이용하여 감압여과 하였으며, 상기 여과 후 회전식 감압농축기(Rotary Vacuum Evaporator)를 이용하여 농축하였으며, 상기 농축 후 동결건조기를 이용하여 -70℃에서 동결건조시켜 분말화시켜 추출물을 제조하였다. 최종 제조된 추출물 -20℃ 보관하며 실험에 사용하였다.
The watery extract was prepared by adding 3,900 ml of distilled water (DW) and then extracting water at 40 ° C for 24 hours. The watery extract of the above-described trifoliate was filtered under reduced pressure using a paper filter (Whatman, No. 2), concentrated using a rotary vacuum evaporator after filtration, and then concentrated using a freeze dryer to -70 Lt; 0 > C to obtain an extract. The final extract was stored at -20 ℃ and used for the experiment.

실시예Example 2: 동물모델을 이용한 천식 치료 효과 확인 2: Identification of asthma treatment effect using animal model

실험동물은 BALB/c 48마리를 중앙실험동물(대한민국)으로부터 구입하여, 6군으로 구분하였다. 상기 실험동물은 오전 8시부터 오후 8시까지 150 Lux 내지 300 Lux의 빛을 가하는 일정한 명암주기, 20℃ 내지 26℃의 온도 및 40% 내지 60%의 상대습도의 조건을 갖는 폴리카보네이트 사육상자에서 각 사육상자별로 4마리씩 사육하였으며, 사료와 물은 상시로 섭취할 수 있게 하였다. 상기 실험동물의 사료는 일반적인 펠렛 건조 사료(대한실험동물, 대한민국)를 사용하였고, 동물실험은 동물실험 윤리규정 준수 여부를 동신대학교 동물윤리위원회에 의해 승인을 받아 수행하였다.Forty eight BALB / c animals were purchased from the central laboratory animals (Korea) and classified into six groups. The experimental animals were housed in a polycarbonate breeding box having a constant light-dark cycle of light of 150 Lux to 300 Lux, a temperature of 20 to 26 ° C and a relative humidity of 40% to 60% from 8:00 am to 8:00 pm Four rabbits were kept in each cage, and feed and water were constantly ingested. The animal feeds used were pellet-dried diets (Korea Experimental Animals, Korea) and animal experiments were approved by the animal ethics committee of the Dongshin University.

상기 실험동물은 구입 후 8일 동안 동물실내에서 순화시켜 안정시킨 후, 6군으로 구분하여 실험을 수행하였다. 상기 실험동물은 멸균수를 제공한 정상 대조군, OVA(ovalbumin)으로 천식을 유도한 후, 멸균수를 처리한 음성 대조군, 1 mg/kg/day dexamethasone를 투여한 양성 대조군, 30 mg/kg/day 실시예 1에서 제조된 삼채 추출물 투여군, 100 mg/kg/day 삼채 추출물 투여군, 300 mg/kg/day 삼채 추출물 투여군으로 구분하였다.The experimental animals were stabilized in an animal room for 8 days after the purchase and stabilized, and were divided into 6 groups. The experimental animals were divided into two groups: a normal control group provided with sterilized water, a negative control group treated with sterilized water after inducing asthma with OVA (ovalbumin), a positive control group administered with 1 mg / kg / day dexamethasone, The extracts were divided into the group of the extract of the tuberous extract prepared in Example 1, the group administered the extract of 100 mg / kg / day and the extract of the group of 300 mg / kg / day.

구체적으로, 실험시작 1일 및 7일에 정상 대조군을 제외한 모든 군에 20 ㎍ OVA(Albumin from chicken egg white, Sigma Chemical Co., USA)과 1 mg Alum(aluminum hydroxide hydrate, Thermo Co., USA)를 0.5 ml PBS 완충액(PBS buffer)에 첨가하고 볼텍싱(vortexing)하여 용해시켜 제조한 감작액을 복강으로 투여하는 방법으로 감작(sensitization)을 수행하였다. 실험시작 후, 14일이 경과한 뒤, OVA를 PBS 완충액에 녹여 제조한 5% OVA 용액을 nebulizer system(Aerosol 5210, BUXCO Electronics, Inc., USA)을 이용하여 야기(challenge)를 수행하였다. 구체적으로, 상기 nebulizer head에 상기 5% OVA 용액 20 ml를 충진한 후, 상기 nebulizer distribution chamber와 실리콘 호스로 연결된 실험동물 사육상자에 실험동물을 넣은 후, nebulizer의 duty percentage를 100%로 조절한 후, 30분 동안 5% OVA 용액을 연속 분사하는 방법으로 5일 동안 5회 수행하였다. 다만, 정상대조군의 경우, 상기 5% OVA 용액의 부형제 즉, 용매인 PBS 완충액을 충진하여 분사하는 방법으로 수행하였다.In particular, 20 μg OVA (Albumin from chicken egg white, Sigma Chemical Co., USA) and 1 mg Alum (aluminum hydroxide hydrate, Thermo Co., USA) were added to all groups except the normal control on the 1st and 7th days of the experiment. Was added to 0.5 ml PBS buffer (PBS buffer), vortexed and dissolved, and sensitization was performed by intraperitoneally injecting the sensitization solution. After 14 days from the start of the experiment, 5% OVA solution prepared by dissolving OVA in PBS buffer was challenged with a nebulizer system (Aerosol 5210, BUXCO Electronics, Inc., USA). Specifically, the nebulizer head was filled with 20 ml of the 5% OVA solution, and the experimental animals were placed in an experimental animal breeding box connected with the nebulizer distribution chamber and the silicone hose. The duty percentage of the nebulizer was adjusted to 100% , And 5 times for 5 days by continuously spraying 5% OVA solution for 30 minutes. However, in the case of the normal control group, the 5% OVA solution was injected by filling with an excipient, that is, a PBS buffer solution.

이 후 5일의 야기기간 동안, 오전에 매일 1회씩 주사관을 이용하여 위내에 직접 투여하는 방법으로 멸균수(정상대조군 및 음성대조군), dexamethasone(양성 대조군, 삼남제약, 대한민국) 및 30 mg/kg/day, 100 mg/kg/day 및 300 mg/kg/day의 함량으로 삼채 추출물을 투여하였고, nebulizer system과 5% OVA 용액을 이용한 야기는 오후에 진행하였다. 모든 동물실험은 동신대 동물실험윤리위원회의 허가를 득하였으며, 동신대 동물실험윤리위원회의 규정을 준수하면서 수행하였다.(Normal control and negative control), dexamethasone (positive control, Samsan Pharmaceutical, Korea), and 30 mg / day of sterile water (day) kg / day, 100 mg / kg / day and 300 mg / kg / day, respectively, and the nebulizer system and 5% OVA solution were used in the afternoon. All animal experiments were approved by the Dongshin Animal Experimental Ethics Committee and were carried out in accordance with the provisions of the Dongshin Animal Experimental Ethics Committee.

상기 실험과정을 수행한 후, 6군의 실험동물을 희생한 후, 폐기관지 세척액(bronchoalveolar lavage fluid, BALF) 채취하여 백혈구 수의 변화를 측정하였고, 폐조직을 분리하여, 분리된 폐조직을 고정한 후, H&E 염색과 PAS 염색을 수행하였다(Carson FL, Hladik C. Histotechnology: A Self-Instructional Text(3 ed.). Hong Kong: American Society for Clinical Pathology Press. pp.　137 139(2009)).After performing the above procedure, groups of six experimental animals were sacrificed and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was collected to measure the change of leukocyte count. The lung tissue was separated and the isolated lung tissue was fixed (Hashimoto et al., 1998). H & E staining and PAS staining were performed (Hashimoto et al., 1997).

우선, 폐기관지세척액 채취 및 백혈구 수의 변화 측정은 다음과 같은 방법으로 수행하였다. 상기 실험동물의 기도를 열고 폐기관지 세척용 PBS 완충액이 들어 있는 카테터를 연결한 후, 상기 PBS 완충액 0.4 mL을 폐기관지에 천천히 밀어 넣고 0.2 mL 내지 0.3 mL을 뽑아낸 후, 다시 PBS 완충액 0.4 mL을 천천히 밀어 넣고 0.4 mL을 뽑아낸 다음, 다시 PBS 완충액 0.4 mL을 밀어넣고 0.4 mL을 뽑아내었다.First, the changes in the collection of lung bronchial washing solution and the change in leukocyte count were performed in the following manner. After opening the airway of the experimental animal and connecting a catheter containing PBS buffer for lung bronchial washing, 0.4 mL of the PBS buffer was slowly pushed into the lung bronchus, and 0.2 mL to 0.3 mL of the PBS was drained. Then 0.4 mL of PBS buffer solution Slowly pushed in, 0.4 mL was withdrawn, 0.4 mL of PBS buffer was again pushed in and 0.4 mL was withdrawn.

상기 채취한 폐기관지세척액을 4℃ 및 3,000 rpm의 조건으로 10 분간 원심분리한 후, 상층액을 Th2 cytokine 측정용 폐기관지 세척액으로 분리하여 - 70℃에서 냉동보관하였다. 또한, 원심분리 후 상측액을 제거하고 남은 펠렛(pellet)은 0.08 mL PBS 완충액에 현탁하여 총 백혈구수 및 백혈구감별계수 측정용 폐기관지 세척액으로 분리하여 냉장 상태로 보관하였다.The collected bronchoalveolar lavage fluid was centrifuged at 4 ° C and 3,000 rpm for 10 minutes, and then the supernatant was separated from the bronchial washing solution for Th2 cytokine measurement and stored frozen at -70 ° C. After centrifugation, the supernatant was removed, and the remaining pellet was suspended in 0.08 mL of PBS buffer, and the cells were separated into a total amount of leukocyte counts and a lung bronchial washing solution for measurement of leukocyte differentiation coefficient.

상기 총 백혈구수 및 백혈구감별계수 측정용 폐기관지 세척액으로 분리된 측정용 폐기관지 세척액의 측정은 분리 후 4시간 이내에 자동혈액분석기(ADVIA 2120, SIEMENS, USA)를 이용하여 측정하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.The measurement of the total lung leukocyte count and the lung bronchial lavage fluid separated by the bronchial washing fluid for measurement of leukocyte differentiation coefficient was performed using an automatic blood analyzer (ADVIA 2120, SIEMENS, USA) within 4 hours after the separation, Respectively.

상기 도 1에 나타낸 바와 같이, 실험동물에서 천식을 유발한 음성 대조군(Induction Control)에서는 총 백혈구수 및 호중구 세포의 수가 급격하게 증가한 반면, 삼채 추출물을 300 mg/kg/day 함량으로 처리한 실험군에서는 양성대조군인 덱타메타손(dexamethasone)을 처리한 실험군과 거의 유사한 정도로 총 백혈구 수 및 호중구 세포 수가 감소되는 것이 확인되어, 삼기 삼채 추출물은 면역학적으로 천식 질환을 개선할 수 있는 것으로 확인되었다As shown in FIG. 1, the total number of leukocyte counts and neutrophil counts in the control group induced asthma in the experimental animals was rapidly increased, whereas in the experimental group treated with the 300 mg / kg / day of the tubercle extract It was confirmed that the total number of leukocyte counts and neutrophil counts was reduced to a similar degree to that of the test group treated with the positive control dexamethasone, and thus it was confirmed that the extract of Trichomonium trifolius can immunologically improve the asthma disease

또한, 폐조직을 분리하여, 분리된 폐조직을 고정한 후, H&E 염색과 PAS 염색은 우선, 희생된 실험동물로부터 분리된 폐조직을 10%(v/v) formaldehyde solution으로 고정하고, 99.9% 에탄올 수용액, 90% 에탄올 수용액, 80% 에탄올 수용액 및 70% 에탄올 수용액을 이용하여 순차적으로 탈수한 후, 파라핀 고정(paraffin block)을 수행하였다. 상기 파라핀 고정된 폐조직을 4 μm의 두께로 자른 후, H&E 염색 및 PAS 염색(PAS stain)을 실시하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다.The H & E staining and PAS staining were performed by first fixing the lung tissue isolated from the sacrificed experimental animals with a 10% (v / v) formaldehyde solution, adding 99.9% ethanol Aqueous solution, 90% ethanol aqueous solution, 80% ethanol aqueous solution and 70% ethanol aqueous solution, and paraffin block was performed. The paraffin-fixed lung tissue was cut to a thickness of 4 μm, and then subjected to H & E staining and PAS staining. The results are shown in FIG.

상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 삼채 추출물은 농도의존적으로 천식에 의한 폐조직의 변화를 억제하는 것으로 확인되었다. 구체적으로, 도 2에 나타낸 바와 같이, 대조군인 B의 폐조직과 비교할 경우, 30 mg/kg/day 삼채 추출물을 5일간 투여한 군은 기관지와 혈관주변의 염증세포 침윤 및 점액 분비를 억제정도가 낮았으나, 삼채 추출물을 100 mg/kg/day 투여한 경우에는 명확하게 기관지와 혈관주변의 염증세포 침윤 및 점액 분비를 억제가 확인되었으며, 삼채 추출물을 400 mg/kg/day 투여한 군의 경우 양성대조군인 dexamethasone을 투여한 C의 폐조직이나 아무런 처리를 하지 않은 A의 폐조직과 거의 유사하게 기관지와 혈관주변의 염증세포 침윤 및 점액 분비를 억제하는 결과를 확인하여, 삼채 추출물은 OVA로 유도된 천식에 따른 병리학적 변화를 농도의존적으로 억제하는 것으로 확인되었다.As shown in Fig. 2, it was confirmed that the tubercle leaf extract suppressed the change of lung tissue by asthma in a concentration-dependent manner. Specifically, as shown in FIG. 2, the group administered with 30 mg / kg / day of tuberous extract for 5 days had a degree of suppression of inflammatory cell infiltration and mucus secretion around bronchi and blood vessels . However, when 100 mg / kg / day of tuberous extract was administered, inflammatory cell infiltration and mucus secretion were clearly inhibited in bronchial and blood vessels. In the group administered with 400 mg / kg / The inhibition of inflammatory cell infiltration and mucus secretion around the bronchus and blood vessels was observed in the lung tissue of C treated with dexamethasone or in the absence of any treatment. It was confirmed that the pathological changes caused by asthma were inhibited in a concentration-dependent manner.

Claims

An extract of Allium hookeri as an active ingredient,
Wherein the tubular extract is extracted with any one selected from the group consisting of alcohols having 1 to 5 carbon atoms, water, and mixtures thereof.

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The method according to claim 1,
Wherein the food composition is food, food additive or beverage.

The method of claim 3,
Wherein the food composition is a functional stone food composition.