KR101420904B1 - Composition for Lowering Blood Lipid and Elevating High-density Lipoprotein and Method for Manufacturing the Same - Google Patents
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Abstract
본 발명은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 상기 조성물은 모나신(monascin) 혹은 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고, 또한 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 동시에 포함하고 있으며, 상기 조성물의 제조방법은 우선 아세톤을 이용해 홍국 발효 산물에서 반복적으로 세 번의 추출작업을 하고, 다시 감압농축 방식을 이용해 그 농도를 높인 후, 실리카 젤, 관 크로마토그래피, 실리카 젤 및 고성능 액체 크로마토그래피 등을 통해 분리 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin) 및 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 추출해 내는 방법을 말한다The present invention relates to a composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol and a method for preparing the same, wherein the composition comprises monascin or ankaflavin, And ankaflavin. The preparation method of the composition is as follows. First, three times of extraction is repeated in the fermented product of red yeast using acetone. The concentration of the extract is increased by using a reduced pressure method, Refers to a method of separating monacin and ankaflavin components by performing purification purification through chromatography, silica gel, and high performance liquid chromatography
Description
본 발명은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물에 관한 것으로서 특히 모나신(monascin) 혹은 안카플라빈(ankaflavin)을 함유하거나 모나신(monascin) 및 안카플라빈(ankaflavin)을 동시에 함유하는 조성물을 말하며 상기 조성물은 혈지방을 낮추고 고밀도지방단백 콜레스테롤을 높이는 기능을 갖추고 있다.The present invention relates to a composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol, and more particularly to a composition comprising monascin or ankaflavin or simultaneously containing monascin and ankaflavin The composition has the function of lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol.
혈액 중의 콜레스테롤 함량은 심혈관 질병 발생율과 매우 밀접한 관계가 있으며, 각종 연구 결과에 따르면 혈지방 이상이 심장 혈관 질병 발병에 매우 중요한 역할을 하며, 그로 인해 혈액 중의 콜레스테롤 농도을 예측 지표로 사용하기에 매우 적합하다고 할 수 있다. 혈청 콜레스테롤 농도가 200 mg／dL를 초과할 경우, 관상동맥 심장 질병으로 인해 사망할 확율이 급속히 상승된다. 콜레스테롤 수치가 높은 사람의 경우 관상동맥 심장 질병 발병율 및 사망율이 모두 높으며, 만약 비약물 혹은 약물 치료를 통해 콜레스테롤 수치를 낮추면 관상동맥 경화로 인한 심혈관 질병 발병율을 눈에 띄게 줄일 수 있게 된다.The cholesterol content in the blood is closely related to the incidence of cardiovascular disease, and various studies have shown that hyperlipidemia plays an important role in the development of cardiovascular disease and is therefore suitable for use as a predictor of blood cholesterol concentration can do. If the serum cholesterol level exceeds 200 mg / dL, the probability of death from coronary heart disease increases rapidly. People with high cholesterol levels have a high incidence of coronary heart disease and mortality, and lowering cholesterol levels through non-drug or drug treatment can significantly reduce the incidence of cardiovascular disease due to coronary atherosclerosis.
최근 들어 각종 보건 식품들이 매우 성행하고 있으며, 다기능성 발효 제품인 홍국 역시 점차 시장의 주목을 받고 있다. 아시아 지역에서 홍국균(Monascus species)이 음식 및 의약품 상에 사용된 것은 이미 수 천년의 역사를 가지고 있다.In recent years, various health foods have become very popular, and Hong Kong, a multi-functional fermented product, is gradually getting attention from the market. The use of Monascus species in food and pharmaceutical products in Asia has already been around for thousands of years.
홍국균 2급 대사 산물은 다음과 같은 4종류의 성분을 포함하고 있다. (1)일군 색소, 홍색색소(rubropunctamine, monascorubramine), 황색색소(ankaflavin, monascin) 및 오렌지색색소(rubropunctanin, monascorubrin)；(2)콜레스테롤을 낮추는 물질，모나콜린 K(monacolin K（lovastatin, mevinolin 및 mevacor 라고도 불림))；(3) 혈압을 낮추는 물질, γ-아미노부티르산（γ-aminobutyric acid, GABA；(4)산화방지물질 dimerumic acid 및 3-hydoxy-4-methoxy- benzoic acid.The second class metabolites of Hong Guk Kook include the following four components. (1) a group of dyes, rubropunctamine, monascorubramine, ankaflavin, monascin and orange colorants (rubropunctanin, monascorubrin); (2) substances that lower cholesterol, such as monacolin K (lovastatin, mevinolin and mevacor Aminobutyric acid (GABA); (4) dimerumic acid and 3-hydoxy-4-methoxy-benzoic acid;
홍국균의 중요 2급 대사 산물 중에서 모나콜린 K(monacolin K)는 콜레스테롤이 합성되는 과정에서 가장 중요한 발효 작용을 하는 hydroxy methylglutaryl-CoA reductase (HMG-CoA reductase)의 활성화를 방지하는 효능이 있기 때문에 모나콜린 K(monacolin K)가 가장 뚜렷하게 콜레스테롤을 낮춰주는 효과를 나타내고 있다.Monacolin K is an important class of secondary metabolites of Hong Kun Koo. It has the effect of inhibiting the activation of hydroxy methylglutaryl-CoA reductase (HMG-CoA reductase), which is the most important fermenting activity during the synthesis of cholesterol. K (monacolin K) has the most pronounced effect of lowering cholesterol.
이 외에도 혈액 중의 콜레스테롤은 고밀도 지방단백 콜레스테롤（HDL-C)와 저밀도 지방단백 콜레스테롤（LDL-C)로 나뉘며, 고농도HDL-C와 저농도 LDL-C이 혈관 질병과 동맥 죽상경화증의 발병 확율을 낮추는데 도움을 주고 있다는 사실이 연구를 통해 입증되었다.In addition, cholesterol in the blood is divided into high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), and high HDL-C and low LDL-C are used to lower the incidence of vascular disease and arterial atherosclerosis The results of the study showed that
총콜레스테롤（total cholesterol, TC)은 HDL-C, LDL-C, 트리글리세리드 triglyceride, TG) 및 기타 지방단백 콜레스테롤로 구성되어 있기 때문에, HDL-C과 LDL-C은 TC 농도가 증가함에 따라 대량으로 증가된다. 다년간의 연구 결과에 따르면 콜레스테롤을 낮추는 약물은 TC 농도를 낮춤으로써 HDL-C농도가 대폭 하락하는 결과를 가져오게 되는데 만약 이러한 HDL-C 농도를 그대로 유지하거나 증가시키면 심혈관 질병 예방에 큰 도움이 될 수 있다.Because total cholesterol (TC) is composed of HDL-C, LDL-C, triglyceride triglyceride, TG) and other lipoprotein cholesterol, HDL-C and LDL- do. Many studies have shown that cholesterol-lowering drugs can lower HDL-C levels by lowering TC levels. If these HDL-C levels are maintained or increased, they can help prevent cardiovascular disease have.
그러나 상술된 모나콜린 K(monacolin K)는 콜레스테롤을 낮추는 기능을 가지고 있지만, HDL-C의 농도를 올려주는 기능은 없기 때문에 심혈관 질병과 동맥 죽상경화증의 예방에는 제한적이라고 할 수 있다.However, the above-mentioned monacolin K has a function of lowering cholesterol, but since it does not have a function of increasing the concentration of HDL-C, it can be said that the prevention of cardiovascular disease and arterial atherosclerosis is limited.
이러한 내용에 기초하여 본 발명인은 참신하고 새로운 조성물 및 그 제조방법을 제공하여 상기 조성물로 하여금 혈지방을 낮춤과 동시에 HDL-C 농도를 높이는 기능을 함께 수행할 수 있도록 하여 심혈관 질병과 동맥 죽상경화증 발생율을 낮추는 효과를 얻을 수 있게 하였다.Based on these findings, the present invention provides a novel and novel composition and a method for preparing the same, thereby enabling the composition to lower the blood fat and simultaneously perform the function of increasing the HDL-C concentration, thereby improving the incidence of cardiovascular disease and arterial atherosclerosis The effect of lowering the temperature was obtained.
상술된 기존의 방식이 가지고 있는 문제점과 단점에 입각하여 본 발명인은 다년 간의 연구와 실험을 통해 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물과 그 제조방법을 제안하게 되었다.Based on the problems and disadvantages of the conventional methods described above, the inventors of the present invention have proposed a composition for lowering blood fat and heightening high density lipoprotein cholesterol and a method for manufacturing the same by means of many years of research and experiments.
본 발명의 주요 목적은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물을 제공하는데 있으며, 상기 조성물은 최소한 모나신(monascin)을 포함하고 있기 때문에 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높일 수 있다.The main object of the present invention is to provide a composition for lowering blood fat and for increasing high density lipoprotein cholesterol. Since the composition contains at least monacin, it can effectively lower blood fat and increase high density lipoprotein cholesterol.
상술된 목적을 달성하기 위한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물은 최소한 모나신(monascin)을 포함하고 있으며, 상기모나신(monascin)은 홍국 황색색소의 일종으로 홍국 발효 산물에서 추출하여 얻을 수 있다.In order to achieve the above-mentioned object, the composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol according to the present invention includes at least monascin, and the monastin is a kind of red pigment yellow pigment. .
본 발명의 또 다른 하나의 주요 목적은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법을 제공하는 데 있으며, 일련의 추출 순서를 통해 순화 작업을 거쳐 모나신(monascin)을 포함한 조성물을 얻을 수 있으며, 상기 조성물은 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤의 농도를 높일 수 있는 효능을 가지고 있다.Another main object of the present invention is to provide a method for producing a composition which lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol, and a composition containing monacin is obtained through a purification procedure through a series of extraction procedures And the composition has the effect of effectively lowering blood fat and increasing the concentration of high-density lipoprotein cholesterol.
상술된 목적을 달성하기 위한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법은 최소한 다음과 같은 순서를 포함한다. (1) 홍국 발효 산물을 제공한다. (2) 아세톤으로 상기 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행한다. (3) 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높인다. (4) 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피（silica gel column chromatography）방법을 사용하여 첫 번째 분리 순화 작업을 진행하여 색소 구분액(fraction)을 분리해 낸다. (5) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 색소구분액에 대해 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피（Sephadex LH-20 column chromatography） 방법을 사용하여 두 번째 분리 순화작업을 진행하여 황색색소 구분액을 분리해 낸다. (6) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피 방법을 사용하여 세 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 분리해 낸다. (7) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액에 대해 장비형 고성능 액체 크로마토그래피（preparative high performance liquid chromatography, pre-HPLC）방법을 사용하여 네 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin) 성분을 분리해 낸다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method of lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol, comprising at least the following steps. (1) Provides fermented products of Hong Kong. (2) Three extraction operations are repeatedly performed on the fermented fermented product with acetone. (3) Increase the concentration of the product obtained in the previous step by using the reduced-pressure concentration method within a specific temperature range. (4) For the product obtained in the previous step, the first separation purification work is carried out using the silica gel column chromatography method to separate the fraction of the pigment. (5) The dye separation liquid separated in the previous step is subjected to a second separation purification operation using Sephadex LH-20 column chromatography method to separate the yellow dye separation liquid . (6) The yellow coloring matter separated from the previous step is subjected to a third purification operation using a silica gel tube chromatography method to isolate the separating solution containing monacin and ankaflavin I will. (7) Using a preparative high performance liquid chromatography (HPLC) method, monoclonal and ankaflavin-separated solutions obtained in the previous step were separated into the fourth The purification process is carried out to separate the monacin components.
본 발명의 또 다른 하나의 주요 목적은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물을 제공하는 데 있으며, 상기 조성물은 최소한 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고 있기 때문에 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높일 수 있다.Another primary objective of the present invention is to provide a composition that lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol. The composition contains at least an anthracin (ancaflavin), which effectively lowers blood fat, Can increase cholesterol.
상술된 목적을 달성하기 위한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물은 최소한 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고 있으며, 상기안카플라빈(ankaflavin)은 홍국 황색색소의 일종으로 홍국 발효 산물에서 추출하여 얻을 수 있다.In order to achieve the above-mentioned object, the composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol according to the present invention includes at least an anthracin (ankaflavin), and the ancaflavin is a kind of reddish yellow pigment, .
본 발명의 또 다른 하나의 주요 목적은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법을 제공하는 데 있으며, 일련의 추출 순서를 통해 순화 작업을 거쳐 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 조성물을 얻을 수 있으며, 상기 조성물은 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤의 농도를 높일 수 있는 효능을 가지고 있다.Another main object of the present invention is to provide a method for preparing a composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol. The present invention provides a method for preparing a composition comprising an anaphylactic ankaflavin And the composition has an effect of effectively lowering blood fat and increasing the concentration of high-density lipoprotein cholesterol.
상술된 목적을 달성하기 위한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법은 최소한 다음과 같은 순서를 포함한다. (1) 홍국 발효 산물을 제공한다. (2) 아세톤으로 상기 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행한다. (3) 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높인다. (4) 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피（silica gel column chromatography）방법을 사용하여 첫 번째 분리 순화 작업을 진행하여 색소 구분액을 분리해 낸다. (5) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 색소구분액에 대해 세파덱스LH-20 관 크로마토그래피（Sephadex LH-20 column chromatography） 방법을 사용하여 두 번째 분리 순화작업을 진행하여 황색색소 구분액을 분리해 낸다. (6) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피 방법을 사용하여 세 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 분리해 낸다. (7) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액에 대해 장비형 고성능 액체 크로마토그래피 （preparative high performance liquid chromatography, pre-HPLC）방법을 사용하여 네 번째 순화 작업을 진행하여안카플라빈(ankaflavin)성분을 분리해 낸다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method of lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol, comprising at least the following steps. (1) Provides fermented products of Hong Kong. (2) Three extraction operations are repeatedly performed on the fermented fermented product with acetone. (3) Increase the concentration of the product obtained in the previous step by using the reduced-pressure concentration method within a specific temperature range. (4) For the product obtained in the previous step, the first separation purification work is carried out using the silica gel column chromatography method to separate the dye-separated liquid. (5) The dye separation liquid separated in the previous step is subjected to a second separation purification operation using Sephadex LH-20 column chromatography method to separate the yellow dye separation liquid . (6) The yellow coloring matter separated from the previous step is subjected to a third purification operation using a silica gel tube chromatography method to isolate the separating solution containing monacin and ankaflavin I will. (7) Using a preparative high performance liquid chromatography (HPLC) method, monoclonal and ankaflavin-separated solutions obtained in the previous step were separated into the fourth The purification process is carried out to separate ancaflavin components.
본 발명의 또 다른 하나의 주요 목적은 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물을 제공하는 데 있으며 상기 조성물은 최소한 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고 있기 때문에 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높일 수 있다.Another primary objective of the present invention is to provide a composition that lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol, and because the composition comprises at least monascin and ankaflavin, And high density lipoprotein cholesterol can be increased.
상술된 목적을 달성하기 위한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물은 최소한 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고 있으며, 상기 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)은 홍국 황색색소의 일종으로 홍국 발효 산물에서 추출하여 얻을 수 있다.The composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol according to the present invention includes at least monascin and ankaflavin, and monacin and ancopherol ankaflavin) is a kind of reddish yellow pigment and can be obtained by extracting from fermented product of Hongkuk.
상술된 목적을 달성하기 위한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법은 최소한 다음과 같은 순서를 포함한다. (1) 홍국 발효 산물을 제공한다. (2) 아세톤으로 상기 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행한다. (3) 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높인다. (4) 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피（silica gel column chromatography）방법을 사용하여 첫 번째 분리 순화 작업을 진행하여 색소 구분액을 분리해 낸다. (5) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 색소구분액에 대해 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피（Sephadex LH-20 column chromatography） 방법을 사용하여 두 번째 분리 순화작업을 진행하여 황색색소 구분액을 분리해 낸다. (6) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피 방법을 사용하여 세 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 분리해 낸다. (7) 앞 단계에서 분리되어 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액에 대해 장비형 고성능 액체 크로마토그래피(preparative high performance liquid chromatography, pre-HPLC）방법을 사용하여 네 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)성분을 분리해 낸다. (8) 앞 단계에서 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 특정 비율로 혼합한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a method of lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol, comprising at least the following steps. (1) Provides fermented products of Hong Kong. (2) Three extraction operations are repeatedly performed on the fermented fermented product with acetone. (3) Increase the concentration of the product obtained in the previous step by using the reduced-pressure concentration method within a specific temperature range. (4) For the product obtained in the previous step, the first separation purification work is carried out using the silica gel column chromatography method to separate the dye-separated liquid. (5) The dye separation liquid separated in the previous step is subjected to a second separation purification operation using Sephadex LH-20 column chromatography method to separate the yellow dye separation liquid . (6) The yellow coloring matter separated from the previous step is subjected to a third purification operation using a silica gel tube chromatography method to isolate the separating solution containing monacin and ankaflavin I will. (7) Using a preparative high performance liquid chromatography (HPLC) method, monoclonal and ankaflavin-separated solutions obtained in the previous step were separated into the fourth (8) Mix monascin and ancaflavin components obtained in the previous step at a specified ratio. (8) Mix monascin and ancaflavin components in a mixture of monascin and ankaflavin.
상술된 구조와 기술 특징을 종합해 보면 본 발명은 다음과 같은 장점을 가지고 있다는 것을 알 수 있다.The structure and the technical features described above show that the present invention has the following advantages.
1.본 발명에서 제공하는 각 조성물들은 모두 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤의 농도를 높이는 효능을 가지고 있으며, 그로 인해 심혈관 질병과 동맥 죽상경화증을 예방하고 치료하는데 큰 효과를 나타낸다.1. Each of the compositions provided in the present invention has an effect of effectively lowering blood fat and increasing the concentration of high density lipoprotein cholesterol and thus has a great effect in preventing and treating cardiovascular diseases and arterial atherosclerosis.
2.본 발명에서 제공하는 제조 방법을 사용해 순도가 높은 본 발명의 각종 조성물 성분을 추출해 낼 수 있으며, 이를 통해 효과적으로 심혈관 질병과 동맥 죽상경화증 발생 확율을 낮출 수 있다.2. By using the manufacturing method provided in the present invention, various components of the present invention having high purity can be extracted, thereby effectively lowering the probability of occurrence of cardiovascular diseases and arterial atherosclerosis.
3.본 발명에서 제공하는 각종 조성물은 모두 홍국 발효 산물 중에서 추출한 것이며 인공합성 화합물이 아니기 때문에 천연 식품으로 안심하고 복용할 수 있고 심혈관 질병 및 동맥 죽상경화증의 발병 확율을 낮추면서 부작용이 발생하는 것을 방지할 수 있다.3. All of the various compositions provided in the present invention are extracted from fermented red yeast products and are not synthetic synthetic compounds. Therefore, they can be safely used as natural foods and prevent the occurrence of side effects while lowering the incidence of cardiovascular diseases and arterial atherosclerosis can do.
도1은 본 발명인 홍국 발효 산물의 제조방법의 흐름을 나타낸 흐름도이다.
도2는 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 제조방법을 나타낸 흐름도이다.
도3은 상기 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 순서104에 관한 상세한 순서를 나타낸 흐름도이다.
도4는 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 순서105에 관한 상세한 순서를 나타낸 흐름도이다.
도5는 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 순서106에 관한 상세한 순서를 나타낸 흐름도이다.
도6는 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 순서107에 관한 상세한 순서를 나타낸 흐름도이다.
도7은 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 두 번째 비교적 우수한 실시예의 제조방법을 나타낸 흐름도이다.
도8은 상기 두 번째 비교적 우수한 실시예의 순서207에 관한 상세한 순서를 나타낸 흐름도이다.
도9는 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 세 번째 비교적 우수한 실시예의 제조방법을 나타낸 흐름도이다.
도10은 상기 세 번째 비교적 우수한 실시예의 순서307에 관한 상세한 순서를 나타낸 흐름도이다.
도11은 지방질 반점 염색의 양화 결과를 나타낸 도면이다.
도12는 동일한 농도의 모나신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 모나콜린 K(monacolin K) 가 콜레스테롤 생성을 억제하는 효과를 나타낸 비교도이다.Fig. 1 is a flow chart showing the flow of a method for producing a fermented product of red yeast according to the present invention.
FIG. 2 is a flow chart illustrating a method of manufacturing a first relatively good embodiment of a composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol according to the present invention.
FIG. 3 is a flow chart showing a detailed procedure for the
4 is a flow chart illustrating a detailed procedure for the
5 is a flow chart illustrating a detailed sequence of
Figure 6 is a flow chart illustrating a detailed sequence of
7 is a flow chart illustrating a method of manufacturing a second relatively good embodiment of a composition that lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol according to the present invention.
FIG. 8 is a flow chart showing a detailed procedure of
FIG. 9 is a flow chart illustrating a method of manufacturing a third relatively good embodiment of a composition for lowering blood fat and heightening high density lipoprotein cholesterol according to the present invention.
10 is a flowchart showing a detailed procedure of the
Fig. 11 shows the results of quantification of lipid spot dyeing. Fig.
FIG. 12 is a comparative chart showing the effect of inhibiting cholesterol production by monacin, ankaflavin and monacolin K at the same concentrations.
도면과 실시예를 통해 본 발명에 관한 더욱 상세한 설명을 하면 아래와 같다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS Fig.
상술된 목적과 효능을 달성하기 위해 본 발명인은 홍국 발효 산물을 추출 기초물질로 사용하여 끊임없는 실험과 조정을 거쳐 마침내 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물과 그 제조방법을 얻게 되었다. 또한 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물과 그 제조방법은 세 종류의 비교적 우수한 실시예로 설명할 수 있으며. 본 발명의 조성물과 그 제조방법에 대해 상세한 설명을 하면 다음과 같다.In order to achieve the above-mentioned objects and effects, the present invention is to provide a composition for lowering blood fat and high-density lipoprotein cholesterol of the present invention through continuous experimentation and adjustment using the fermented product of the present invention as a raw material for extraction, . In addition, the composition of the present invention for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol and its preparation method can be explained by three relatively good examples. The composition of the present invention and its preparation method will be described in detail as follows.
우선 홍국 발효 산물의 제조방법을 소개하기로 한다. 도1의 내용을 참조해 보면, 본 발명인 홍국 발효 산물의 제조방법의 흐름도인 도1은 다음과 같은 순서를 포함하고 있다. 배양기초물질(순서001)을 제공하고, 그 중 상기 배양기초물질은 쌀이나 건조 산약을 사용할 수 있으며, 그 수분 함량은 반드시 15%이하가 되어야 하며 가장 이상적인 수분 함량은 7%이다. 이어서 상기 배양기초물질에 물을 추가하며(순서002)，이때 배양기초물질과 물의 비율은 1:0.5%~1:1.5%가 되며 가장 이상적인 비율은 1:0.75%이다. 이어서 배양기초물질을 물에 불리며(순서003)， 이때 불리는 시간은 0~60분이 되며 가장 이상적인 불림 시간은 30분이다. 이어서 배양기초물질에 멸균 작업(순서004)을 진행하며, 멸균 조건은 121℃, 10~60분 동안 멸균 작업을 진행한다. 이어서 멸균 작업이 끝난 배양기초물질에 냉각 작업(순서005)을 진행한다. 이어서 특정 홍국균종을 상기 배양기초물질 내(순서006)에 접균하며, 이때 상기 특정 홍국균종은 Monascus purpureus를 사용할 수 있다. 이어서 접균이 완성된 배양기초물질을 배양하며(순서007), 이때 배양 조건은 25~37℃, 50~80% 습도, 8~20일 배양을 하는데 가장 이상적인 배양 조건은 30℃, 60%습도, 10일 배양이다. 배양 작업이 끝난 홍국 발효 산물을 건조하며(순서008)，이때 상기 산물의 수분이 15%이하가 될 때까지 건조하는데 가장 이상적인 수분 함량은 6%이다. 이러한 방식으로 홍국 발효 산물의 제조 과정을 마치게 된다.First, the production method of the fermented red yeast product will be introduced. Referring to FIG. 1, FIG. 1, which is a flowchart of a method for producing a fermented red yeast product according to the present invention, includes the following steps. The culture base material (Sequence 001) is provided, of which the basic culture material can be rice or dried liquor, its water content must be 15% or less, and the most ideal moisture content is 7%. Water is then added to the culture base material (step 002), wherein the ratio of the culture base material to water is from 1: 0.5% to 1: 1.5% and the most ideal ratio is 1: 0.75%. Subsequently, the culture base material is referred to as water (step 003), with a time between 0 and 60 minutes, the most ideal of which is 30 minutes. The sterilization operation (Step 004) is then carried out on the basic culture material, and sterilization is carried out at 121 ° C for 10 to 60 minutes. Subsequently, a cooling operation (Step 005) is performed on the sterilized basic culture material. Subsequently, certain P. gingkoi species are inoculated in the culture medium (step 006), wherein said P. gingkoi species may be Monascus purpureus. The culture conditions are 25 ~ 37 ℃, 50 ~ 80% humidity, 8 ~ 20 days culture. The most ideal culture conditions are 30 ℃, 60% humidity, 10 days. The fermented red yeast product after drying is dried (step 008), and the most desirable moisture content is 6% until the product becomes less than 15% moisture. In this way, the fermented product of Hong Kong is completed.
이어서 본 발명의 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 진행 과정을 소개하면 다음과 같다. 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 첫 번째 비교적 우수한 실시예는 그 성분에 모나신(monascin)을 포함하고 있고, 상기 모나신(monascin)은 홍국 황색색소이며 상술된 홍국 발효 산물 중에서 추출해 낼 수 있다. 상기 모나신(monascin)의 복용량은 성인을 기준으로 매일 2.4 mg 이상을 섭취해야 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤의 혈중 농도를 높일 수 있다.The process of the first relatively good embodiment of the present invention will now be described. The first relatively good embodiment of the composition of the present invention, which lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol, comprises monascin in its component, said monascin being a reddish yellow pigment, said red fermented product . ≪ / RTI > The dose of monacin should be 2.4 mg or more per day on an adult basis, effectively lowering blood fat and increasing the blood concentration of high-density lipoprotein cholesterol.
도2의 내용을 참조해 보면, 도2는 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 제조방법에 관한 흐름도이며 다음과 같은 순서를 포함하고 있다. 홍국 발효 산물(순서101)을 제공한다. 이어서 아세톤으로 상기 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행한다(순서102). 이때 상기 홍국 발효 산물과 상기 아세톤의 비율은 1:10~ 1:50이 된다. 이어서 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높인다(순서103). 이때 특정 온도의 범위는 40℃~60℃가 된다. 앞 단계에서 얻어진 산물에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피（silica gel column chromatography）방법을 사용하여 첫 번째 분리 순화 작업을 진행하여 색소 구분액을 분리해 낸다(순서104). 이어서 앞 단계에서 분리되어 얻어진 색소구분액에 대해 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피(Sephadex LH-20 column chromatography） 방법을 사용하여 두 번째 분리 순화작업을 진행하여 황색색소 구분액을 분리해 낸다(순서105). 이어서 앞 단계에서 분리되어 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관 크로마토그래피 방법을 사용하여 세 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 분리해 낸다(순서106). 이어서 앞 단계에서 분리되어 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액에 대해 장비형 고성능 액체 크로마토그래피（preparative high performance liquid chromatography, pre-HPLC）방법을 사용하여 네 번째 순화 작업을 진행하여 모나신(monascin)성분을 분리해 낸다(순서107).Referring to FIG. 2, FIG. 2 is a flowchart illustrating a method of manufacturing a first comparative preferred embodiment of a composition for lowering blood fat and heightening high density lipoprotein cholesterol according to the present invention, and includes the following procedure. To provide a fermented red yeast product (Step 101). Subsequently, three extraction operations are repeatedly performed on the fermented fermented product with acetone (Step 102). At this time, the ratio of the fermented red yeast product to acetone is 1:10 to 1:50. Subsequently, the concentration of the product obtained in the previous step is increased by using a reduced pressure concentration method within a specific temperature range (Step 103). In this case, the specific temperature range is 40 ° C to 60 ° C. The product obtained in the previous step is subjected to a first separation purification operation using a silica gel column chromatography method to isolate the dye-separating liquid (Step 104). Subsequently, the dye-separated liquid separated in the previous step is subjected to a second separation purification operation using Sephadex LH-20 column chromatography (Sephadex LH-20 column chromatography) to separate the yellow dye-separated liquid 105). Next, the yellow coloring matter separated from the previous step was subjected to a third purification step using a silica gel column chromatography method to separate the separating liquid containing monacin and ankaflavin (Step 106). Next, preparative high performance liquid chromatography (pre-HPLC) method was used for the separation liquid containing monacin and ankaflavin obtained separately in the previous step To proceed with a fourth refinement operation to isolate the monacin component (Step 107).
계속해서 도3의 내용을 참조해 보면, 도3은 비교적 우수한 실시예 중 순서104의 상세한 흐름을 나타낸 흐름도이다. 상기 순서104 중에서 그 내용을 더욱 자세하게 구분해 설명해 보면 다음과 같다. 우선 순서103에서 얻어진 산물을 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣는다(순서104a). 이어서 복수 개의 세척용액(wsahing solution)을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣는다(순서104b). 그 중 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 헥산(Hexane), 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol)= 9:1, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 8:2, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 7:3, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 1:1 및 에탄올(Ethanol)이 될 수 있다. 이어서 특정 시간마다 실리카 젤 관에서 흘러나오는 구분액을 수집하는데 이때 12~15개의 구분액을 수집하고(순서104c), 특정 시간은 약 5~10분이다. 이어서 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 앞 단계에서 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집해 낸다(순서104d). 이어서 앞 단계에서 구분해 낸 구분액을 함께 혼합하여 해당 색소 구분액을 얻어낸다(순서104e).Referring now to FIG. 3, FIG. 3 is a flow chart illustrating a detailed flow of
계속해서 도4의 내용을 참조해 보면, 도4는 본 발명의 비교적 우수한 실시예 중 순서105의 상세한 흐름을 나타낸 흐름도이다. 상기 순서 105중에서 그 내용을 더욱 자세하게 구분해 설명해 보면 다음과 같다. 순서104에서 얻어진 색소 구분액을 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피(Sephadex LH-20 column) 내에 넣는다(순서105a). 이어서 세척용액을 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피에 흘려 넣는다(순서105b). 이때 상기 액체는 메탄올(Methanol) : 아세토니트릴(Acetonitrile)= 9:1이 될 수 있다. 이어서 특정 시간마다 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피에서 흘러나오는 구분액을 수집하는데 이때 3~5개의 구분액을 수집하고(순서105c), 상기 특정 시간은 약 5~10분이다. 이어서 고효능 액체크로마토그래피와 포토다이오드 측정기를 사용해 앞 단계에서 얻어진 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 포함한 구분액을 수집해 낸다(순서105d). 이어서 앞 단계에서 구분해 낸 구분액을 함께 혼합하여 황색색소 구분액을 얻어낸다(순서105e).Continuing with reference to FIG. 4, FIG. 4 is a flow chart illustrating a detailed flow of
계속해서 도5의 내용을 참조해 보면, 도5는 비교적 우수한 실시예 중 순서106의 상세한 흐름을 나타낸 흐름도이다. 상기 순서106 중에서 그 내용을 더욱 자세하게 구분해 설명해 보면 다음과 같다. 우선 순서105에서 얻어진 산물을 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣는다(순서106a). 이어서 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣는다(순서106b). 그 중 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 이염화탄소(Dichloromethane): 에탄올(Ethanol) = 95:5, 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 9:1 및 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 4:1이 될 수 있다. 이어서 특정 시간마다 실리카 젤 관에서 흘러나오는 구분액을 수집하는데 이때 3~5개의 구분액을 수집하고(순서106c), 특정 시간은 약 5~10분이다. 이어서 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 앞 단계에서 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집해 낸다(순서106d). 이어서 앞 단계에서 구분해 낸 구분액을 함께 혼합하여 해당 색소 구분액을 얻어낸다(순서106e).Referring now to FIG. 5, FIG. 5 is a flow chart illustrating a detailed flow of
계속해서 도6의 내용을 참조해 보면, 도6은 비교적 우수한 실시예 중 순서107의 상세한 흐름을 나타낸 흐름도이다. 상기 순서107 중에서 그 내용을 더욱 자세하게 구분해 설명해 보면 다음과 같다. 우선 순서106에서 얻어진모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 함유한 구분액을 C18 관에 넣고 HPLC와 세척용액을 사용해 흐름 분리를 하며(순서107a), 그 중 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 물 = 85:15이 될 수 있다. 이어서 특정 시간마다 C18 관에서 흘러나오는 구분액을 수집하는데 이때 2개의 구분액을 수집하고(순서107b), 특정시간은 약 5~10분이다. 이어서 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 앞 단계에서 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집해 낸다(순서107c).6 is a flowchart showing a detailed flow of
상술된 순서 104d, 105d, 106d 중에서 HPLC 분석법에서 사용되는 관(column)은 C18 column(25 cm x 4.6 mm, i.d. = 5 μm)이며 이동상은 아세토니트릴(Acetonitrile) : 물 : 트리플루오로아세테이트(trifluoroacetate) = 62:38:0.05이고, 흐름 속도는 1 mL／min이다. 또한 다파장 감지기(multiwavelength detector)를 사용해 231 nm의 UV흡수 파장을 (모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)은 231 nm의 UV흡수파장 하에서 파봉을 형성하기 때문임) 감지하게 된다. 또한 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)의 표준품을 비교 세트로 하여 표준품의 파봉 시간과 테스트물의 파봉 시간을 서로 비교하여 해당 테스물이 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)인지를 확인하게 된다.Of the
또한 상기 순서 107c 내에서, HPLC 분석법에서 사용한 조건과 순서 104d, 105d, 106d의 내용은 대체적으로 동일하며, 단지 순서107c에서 특별히 다른 점은 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)이 가지고 있는 극성차이의 특성에 근거하여 서로 분리하는 작업을 진행한다는 점이다. C18 column은 극성 성분이 비교적 이른 시간에 흘러나오게 되며, 모나신(monascin)은 안카플라빈(ankaflavin)과 비교했을 때 비교적 극성 성분에 가까운 성분이며 그로 인해 모나신(monascin) 성분이 먼저 흘러나오게 되고 안카플라빈(ankaflavin) 성분이 비교적 늦게 흘러나오게 된다. 이러한 특성을 이용해 비교적 일찍 흘러나온 구분액을 수집하여 모나신(monascin) 표준품이 흘러나오는 시간과 흡수 파장을 서로 비교하여 해당 구분액 중에 모나신(monascin) 성분이 함유되어 있는지를 확인하게 된다.Also, within the
이어서 본 발명의 두 번째 비교적 우수한 실시예의 진행 과정을 소개하면 다음과 같다. 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 첫 번째 비교적 우수한 실시예는 그 성분에 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고 있고, 상기안카플라빈(ankaflavin)은 홍국 황색색소이며 상술된 홍국 발효 산물 중에서 추출해 낼 수 있다. 상기 모나신(monascin)의 복용량은 성인을 기준으로 매일 0.6 mg 이상을 섭취해야 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤의 혈중 농도를 높일 수 있다.Next, the progress of the second comparative example of the present invention will be described as follows. The first relatively good embodiment of the composition of the present invention for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol comprises ankaflavin in its component, said ankaflavin being a reddish yellow pigment, It can be extracted from fermentation products. The dosage of monacin should be 0.6 mg or more per day on an adult basis, effectively lowering blood fat and increasing the blood concentration of high-density lipoprotein cholesterol.
도7의 내용을 참조해 보면, 도7은 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 두 번째 비교적 우수한 실시예의 제조방법에 관한 흐름도이며 그 중 201-206은 대체적으로 첫 번째 비교적 우수한 실시예와 동일하기 때문에 별다른 설명을 생략하기로 하며, 두 번째 비교적 우수한 실시예의 다른 점은 우선 순서 207에서 pre-HPLC를 사용하여 안카플라빈(ankaflavin)성분을 분리해 내는 것이다.7 is a flow chart of a method of manufacturing a second comparatively good embodiment of a composition for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol according to the present invention, wherein 201-206 is generally the first relatively superior The description of the second comparative example is different from that of the second comparative example. First, in
계속해서 도8의 내용을 참조해 보면, 도8은 두 번째 비교적 우수한 실시예 중 순서207의 상세한 흐름을 나타낸 흐름도이다. 상기 순서207 중에서 그 내용을 더욱 자세하게 구분해 설명해 보면 다음과 같다. 우선 순서206에서 얻어진모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 함유한 구분액을 C18 관에 넣고 HPLC와 세척용액을 사용해 흐름 분리를 하며(순서207a), 그 중 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 물 = 85:15이 될 수 있다. 이어서 특정 시간마다 C18 관에서 흘러나오는 구분액을 수집하는데 이때 2개의 구분액을 수집하고(순서207b), 특정시간은 약 5~10분이다. 이어서 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 앞 단계에서 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집해 낸다(순서207c).Continuing with reference to FIG. 8, FIG. 8 is a flow chart illustrating a detailed flow of
상술된 순서 207c 에서, 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)이 가지고 있는 극성차이의 특성에 근거하여 서로 분리하는 작업을 진행한다. C18 column은 극성 성분이 비교적 이른 시간에 흘러나오게 되며, 모나신(monascin)은 안카플라빈(ankaflavin)과 비교했을 때 비교적 극성 성분에 가까운 성분이며 그로 인해 모나신(monascin) 성분이 먼저 흘러나오게 되고 안카플라빈(ankaflavin) 성분이 비교적 늦게 흘러나오게 된다. 이러한 특성을 이용해 비교적 일찍 흘러나온 구분액을 수집하여 안카플라빈(ankaflavin) 표준품이 흘러나오는 시간과 흡수 파장을 서로 비교하여 해당 구분액 중에 안카플라빈(ankaflavin) 성분이 함유되어 있는지를 확인하게 된다.In the above-described procedure 207c, the separation work is performed on the basis of the polarity difference characteristics possessed by monascin and ankaflavin. C 18 the polar component flows out at a relatively early time and monascin is a relatively polar component as compared to ankaflavin and therefore the monascin component first flows out, Ankaflavin components will flow relatively late. By using these characteristics, the comparatively early separated solutions are collected to compare the time of the flow of the ancaflavin standard and the absorption wavelength to check whether the ancaflavin component is contained in the separated solution .
계속해서 본 발명의 세 번째 비교적 우수한 실시예에 관해 상세한 설명을 하면 다음과 같다. 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 세 번째 비교적 우수한 실시예는 그 성분에 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함하고 있고, 상기 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)은 홍국 황색색소이며 상술된 홍국 발효 산물 중에서 추출해 낼 수 있다. 그 중 상기 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분의 함량비율 범위는 1:1 ~ 10:1이며, 가장 이상적인 함량비율은 3.56:1이고, 이러한 이상적인 함량비율을 사용해야만 가장 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높일 수 있게 된다. 또한 상기 모나신(monascin)의 복용량은 성인을 기준으로 매일 2.4 mg 이상을 섭취해야 하고, 상기안카플라빈(ankaflavin)의 복용량은 성인을 기준으로 매일 0.6 mg 이상을 섭취해야만 효과적으로 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤의 혈중 농도를 높일 수 있다.Next, a third comparative excellent embodiment of the present invention will be described in detail. A third relatively good embodiment of a composition that lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol according to the present invention comprises monascin and ankaflavin in the composition, said monascin and ancopuline Ankaflavin is a reddish yellow pigment and can be extracted from the fermented red yeast products described above. The ratio of monacin to ankaflavin is 1: 1 to 10: 1, and the ideal content ratio is 3.56: 1. Therefore, the use of this ideal content ratio is the most effective. It is possible to lower the fat and increase the high density lipoprotein cholesterol. In addition, the above-mentioned dose of monascin should be at least 2.4 mg / day for an adult, and the dosage of ankaflavin should be at least 0.6 mg / day for an adult to effectively lower blood fat, The blood concentration of fat protein cholesterol can be increased.
도9의 내용을 참조해 보면, 도9는 본 발명인 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 세 번째 비교적 우수한 실시예의 제조방법에 관한 흐름도이며 그 중 301-306은 대체적으로 첫 번째 비교적 우수한 실시예와 동일하기 때문에 별다른 설명을 생략하기로 하며, 세 번째 비교적 우수한 실시예의 다른 점은 우선 순서 307에서 pre-HPLC를 사용하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 분리해 내고, 마지막으로 순서 208에 의거하여 모나신(monascin)와 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 특정 비율로 혼합하며, 이때 상기 특정비율의 범위값은 1:1 ~ 10:1이며, 가장 이상적인 값은 3.56:1이다. 9 is a flow chart of a method of manufacturing a third comparatively good embodiment of a composition that lowers blood fat and increases high density lipoprotein cholesterol according to the present invention, wherein 301-306 is generally the first relatively superior The description of the third comparative example is as follows. First, in
계속해서 도10의 내용을 참조해 보면, 도10은 세 번째 비교적 우수한 실시예 중 순서307의 상세한 흐름을 나타낸 흐름도이다. 상기 순서307 중에서 그 내용을 더욱 자세하게 구분해 설명해 보면 다음과 같다. 우선 순서306에서 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 함유한 구분액을 C18 관에 넣고 HPLC와 세척용액을 사용해 흐름 분리를 하며(순서307a), 그 중 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 물 = 85:15이 될 수 있다. 이어서 특정 시간마다 C18 관에서 흘러나오는 구분액을 수집하는데 이때 2개의 구분액을 수집하고(순서207b), 특정시간은 약 5~10분이다. 이어서 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 앞 단계에서 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)와 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집해 낸다(순서307c).Continuing with reference to FIG. 10, FIG. 10 is a flow chart illustrating a detailed flow of
상술된 순서307c에서, 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)이 가지고 있는 극성차이의 특성에 근거하여 서로 분리하는 작업을 진행한다. C18 column은 극성 성분이 비교적 이른 시간에 흘러나오게 되며, 모나신(monascin)은 안카플라빈(ankaflavin)과 비교했을 때 비교적 극성 성분에 가까운 성분이며 그로 인해 모나신(monascin) 성분이 먼저 흘러나오게 되고 안카플라빈(ankaflavin) 성분이 비교적 늦게 흘러나오게 된다. 이러한 특성을 이용해 비교적 일찍 흘러나온 구분액과 늦게 흘러나온 구분액을 각각 수집하고 모나신(monascin) 및 안카플라빈(ankaflavin) 표준품의 흘러나오는 시간과 흡수 파장과 상기 구분액의 흘러나오는 시간과 흡수파장을 서로 비교하여 해당 구분액 중에 안카플라빈(ankaflavin)성분이 함유되어 있는지를 확인하게 된다.In the above-described
본 발명의 첫 번째, 두 번째, 세 번째 비교적 우수한 실시예의 조성물이 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤 농도를 높이는 효과를 가지고 있는지에 대해 검증하기 위해, 이하 다양한 실험 방법을 통해 분석과 비교를 진행하였다. 이하 분석 내용 중에 본 발명의 첫 번째 비교적 우수한 실시예의 조성물이 모나신(monascin)(약칭 MS)일 때, 그 복용량이 성인 매일 섭취량 9.82 mg에 상당하며, 두 번째 비교적 우수한 실시예의 조성물이 안카플라빈(ankaflavin)(약칭 AF)일 때 그 복용량이 성인 매일 섭취량 1.43 mg에 상당하며, 세 번째 비교적 우수한 실시예의 조성물이 모나신(monascin) 과 안카플라빈(ankaflavin)(약칭 MS+AF)일 때, 그 복용량은 각각 성인의 매일 섭취량 9.82 mg과 1.43 mg에 상당하였다. 또한 모나콜린 K(monacolin K)를 암유한 조성물과 비교했을 때는 이를 약칭 MK라고 한다.In order to test whether the compositions of the first, second and third comparative examples of the present invention have the effect of lowering blood fat and increasing the concentration of high-density lipoprotein cholesterol, analysis and comparison were conducted through various experimental methods . In the following analysis, when the composition of the first relatively good embodiment of the present invention is monacin (abbreviated as MS), the dose corresponds to an adult daily intake of 9.82 mg, and the second relatively good example composition is ancopherol when the dose is equivalent to an adult daily intake of 1.43 mg and the composition of the third relatively good embodiment is monacin and ankaflavin (abbreviated as AF) The doses were equivalent to the daily intake of 9.82 mg and 1.43 mg, respectively. Also, when the composition is compared with a composition obtained by blending monacolin K (K), it is abbreviated as MK.
우선 고콜레스테롤 먹이를 먹인 햄스터군을 실험 동물로 하여, 각각 8주 동안 MS, AF, MS+AF 및 MK를 복용시킨 후, 혈액 중의 각종 콜레스테롤 수치를 분석하였다. 이때 분석한 수치로는 혈청 중의 총콜레스테롤(total cholesterol, TC)함량, 트리글리세리드(triglyceride, TG)함량, 고밀도 지방단백 콜레스테롤(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)함량, 저밀도 지방단백 콜레스테롤(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)함량, LDL-C와 HDL-C의 비율 및 혈청 중의 지방질 과양화 산물 말론디알데히드(malondialdehyde, MDA) 함량 등이 포함되어 있다. 그 중 MK의 복용량은 성인 매일 섭취량 2.89 mg에 상당하였다. 또한 정상 먹이를 복용한 군을 NOR군 이라고 하고 고콜레스테롤 먹이를 복용한 군을 HC 군이라고 한다.First, the hamster group fed with the high cholesterol diet was used as an experimental animal, and MS, AF, MS + AF, and MK were administered for 8 weeks, and various cholesterol levels in the blood were analyzed. The levels of serum total cholesterol, triglyceride, triglyceride, high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol, LDL-C), the ratio of LDL-C to HDL-C, and the serum lipid and malondialdehyde (MDA) content. The dose of MK was equivalent to 2.89 mg of adult daily intake. The group that took the normal diet was called the NOR group and the group that took the high cholesterol diet was called the HC group.
아래 표1은 상술된 동물 실험군의 실험 결과이며 표2는 MS, AF, MS+AF 및 MK군이 HC군과 비교했을 때의 각 항목의 수치 감소율 및 증가율을 나타낸 것이다. 우선 TC 하강율의 경우, MS군과 AF군이 모두 혈청 중의 TC함량이 확연하게 감소하였으며, 또한 그 효과가 MK군 보다 월등하였다. 그리고 MS+AF군의 TC 하강 효과 역시 기타 군에 비해 높게 나타났다. TG 하강율의 경우, MS군, AF군 및 MS+AF군 모두 혈청 중의 TG함량이 확연하게 감소하였으며, 그 효과가 MK군보다 높게 나타났다. HDL-C 상승율의 경우, MS군과 AF군이 모두 혈청 중의 HDL-C 함량이 확연하게 증가하였으며, 그 효과가 MK군보다 높게 나타났다. 또한 MS+AF군의 HDL-C 상승 효과 역시 기타 군에 비해 높게 나타났다. HDL-C하강율의 경우, MS군의 효과와 MK군의 효과가 비슷하지만 AF군과 MS+AF군의 혈청 중의 HDL-C 감소 효과는 MK군보다 높게 나타났다. LDL/HDL 비교값의 하강율의 경우, MS군의 효과가 MK군보다 높게 나타났고, AF군과 MS+AF군의 효과도 역시 다른 군에 비해 높게 나타났다. 그러므로 모나신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 모나신(monascin)+안카플라빈(ankaflavin)이 모나콜린 K(monacolin K)에 비해 심혈관 질병과 동백죽상 경화증 발병을 개선하는 데 더욱 도움이 되는 것을 알 수 있다. MDA 하강율의 경우, MS군, AF군 및 MS+AF군이 모두 혈청 중의 MDA 함량율을 감소시키는 것으로 나타났고 그 효과가 MK군보다 높은 것으로 나타났다.Table 1 below shows the experimental results of the above-mentioned animal experimental group. Table 2 shows the numerical reduction rate and the increase rate of each item when compared with the HC group in MS, AF, MS + AF and MK group. In the case of TC decline rate, the TC content in the serum was significantly decreased in the MS group and the AF group, and the effect was also superior to that in the MK group. The TC reduction effect of MS + AF group was also higher than that of the other groups. In the case of TG decline, serum TG content in MS, AF, and MS + AF group was significantly decreased and its effect was higher than that of MK group. In HDL-C raising rate, HDL-C content in serum was significantly increased in MS group and AF group, and the effect was higher than that in MK group. In addition, the HDL-C synergistic effect of MS + AF group was also higher than that of the other groups. In the case of HDL-C decline, the effect of MK group was similar to that of MS group, but the serum HDL-C reduction effect of AF group and MS + AF group was higher than that of MK group. The decrease of the LDL / HDL compared to the MK group was higher than that of the MK group, and the effect of the AF group and the MS + AF group was also higher than that of the other groups. Therefore, monacin, ankaflavin, monascin + ankaflavin are more likely to improve cardiovascular disease and cambium atherosclerosis than monacolin K . In the case of MDA decline, both MS, AF, and MS + AF groups showed decreased MDA content in the serum and the effect was higher than that of MK group.
비율LDL / HDL
ratio
±10.7111.8
± 10.7
±35.6168.8
± 35.6
±5.9766.6
± 5.97
±2.5919.9
± 2.59
±0.0380.278
± 0.038
±1.798.93
± 1.79
±18.9236.5
± 18.9
±76.5226.3
± 76.5
±8.8998.1
± 8.89
±9.7568.3
± 9.75
±0.0930.569
± 0.093
±1.8511.80
± 1.85
±25.1190.3
± 25.1
±36.7131.1
± 36.7
±8.8496.9
± 8.84
±6.9745.0
+ - 6.97
±0.0500.489
± 0.050
±1.7310.37
± 1.73
±10.6165.8
± 10.6
±9.082.8
± 9.0
±9.36114.2
± 9.36
±3.3645.1
± 3.36
±0.0220.416
± 0.022
±1.458.62
± 1.45
±11.5168.9
± 11.5
±18.094.5
± 18.0
±8.09118.6
± 8.09
±5.8039.4
± 5.80
±0.0490.355
± 0.049
±1.459.07
± 1.45
±7.6160.3
± 7.6
±10.6085.6
± 10.60
±7.30125.7
± 7.30
±3.1038.5
± 3.10
±0.0510.351
± 0.051
±1.238.45
± 1.23
하강율 (%)TC
Falling rate (%)
하강율 (%)TG
Falling rate (%)
상승율
(%)HDL-C
Rate of increase
(%)
하강율
(%)LDL-C
Falling rate
(%)
비교값 하강율 (%)LDL / HDL
Comparison value drop rate (%)
하강율 (%)MDA
Falling rate (%)
동맥 죽상경화증을 판단하는 또 다른 하나의 주요 지표는 동맥 지방질 반점 염색 분석이며, 염색한 결과에 따라 지방질 반점이 동맥 혈관 벽 상에 침적되어 있는지를 판단할 수 있다. 대량의 지질 과산화는 포말세포가 대량으로 침적되는 결과를 야기시키고 혈관벽이 탄력을 상실하고 대량의 지방질 반점이 침적되면 동맥 관상경화증을 일으키게 된다. 도11의 내용을 참조해 보면, 지방질 반점 염색의 양화 결과를 나타낸 도11의 경우, 연속 8주간 고콜레스테롤 먹이를 먹인 실험 동물의 흉강 동맥 혈관에 반점이 대량으로 침적된 것을 발견할 수 있으며 정상적인 먹이를 먹인 실험 동물에 비해 침적된 량이 많이 올라간 것을 알 수 있다. MK군(복용량 2.89 mg/day)의 경우 지방질 반점 함량을 감소시키는 결과가 나타났지만 그 효과가 MS군(복용량 9.82 mg/day), AF군(복용량 1.43 mg/day), MS+AF군(MS와 AF의 비율이 3.56:1)에 비해 떨어지는 것을 알 수 있다. 이 외에도 AF군의 효과는 MS군 보다 높았으며. MS+AF군의 효과 역시 AF군 보다 높았다.Another key indicator of arterial atherosclerosis is arterial lipid spot staining, which can be used to determine whether the fatty spots are deposited on the arterial wall according to the staining results. Large amounts of lipid peroxidation lead to the massive deposition of foam cells and cause arterial coronary sclerosis if the vessel walls lose their elasticity and a large amount of lipid deposits are deposited. 11, in the case of Fig. 11 showing the result of quantification of lipid pigmentation, it can be found that a large amount of spots are deposited in the thoracic artery blood vessels of an animal fed with a high cholesterol diet for 8 consecutive weeks, The amount of sediment was much higher than that of the experimental animals. In the MK group (dose 2.89 mg / day), the effect of reducing the lipid content was observed in the MS group (dose 9.82 mg / day), AF group (dose 1.43 mg / day) And the AF ratio is 3.56: 1). In addition, the effect of AF group was higher than that of MS group. The effect of MS + AF group was also higher than that of AF group.
모나신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 모나콜린 K(monacolin K)의 콜레스테롤 생성 억제 효과를 비교하기 위해, 세포 실험 방법을 이용하여 동일한 농도(100 ppb)의 모나신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 모나콜린 K(monacolin K)로 세포를 처리하여 이들 성분이 콜레스테롤 생성에 미치는 영향을 연구하였다. 도12의 내용을 참조해 보면, 동일한 농도의 모나신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 모나콜린 K(monacolin K)가 콜레스테롤 생성 억제 효과를 나타내는 것에 대해 비교한 비교도이며, 세포 콜레스테롤 생성 억제 효과는 안카플라빈(ankaflavin), 모나신(monascin), 모나콜린 K(monacolin K) 순서대로 우수한 효과를 보였다. 이러한 결과와 동물 실험은 서로 일치하였으며 안카플라빈(ankaflavin)와 모나신(monascin)이 모나콜린 K(monacolin K)에 비해 더욱 우수한 혈지방 감소 효과를 나타내었고, 또한 안카플라빈(ankaflavin), 모나신(monascin), 모나콜린 K(monacolin K)의 순서대로 세포 콜레스테롤 생성 억제 효과가 우수한 것으로 나타났다.In order to compare the inhibitory effect of monacin, ankaflavin and monacolin K on cholesterol production, monocin and monacin were used at the same concentration (100 ppb) Cells were treated with ankaflavin and monacolin K to study the effects of these components on cholesterol production. Referring to FIG. 12, a comparative chart comparing monacin, ankaflavin, and monacolin K at the same concentrations to inhibit cholesterol production is shown. Cell cholesterol production The inhibitory effect was in the order of ancaflavin, monacin, and monacolin K in this order. These results and animal experiments were consistent with each other. Ancaflavin and monascin showed better blood fat reduction than monacolin K, and ankaflavin, Monacin, and monacolin K in order to inhibit the production of cellular cholesterol.
상술된 실험 결과에서 알 수 있듯이 모나신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 모나신(monascin)+안카플라빈(ankaflavin) 성분은 모두 혈청 TC, TG, LDL-C, MDA, 동물지방질 반점을 낮춰 주고 HDL-C을 높여주는 효과가 있으며, 또한 그 효과가 모나콜린 K(monacolin K)보다 훨씬 높다. 또한 모나신(monascin)+안카플라빈(ankaflavin)의 효과는 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 단독으로 사용할 때보다 훨씬 두드러졌다. 그러므로 본 발명의 첫 번째, 두 번째, 세 번째 비교적 우수한 실시예의 조성물은 혈청 내의 콜레스테롤 함량을 효과적으로 낮춰 줄 뿐만 아니라 혈청 내의 HDL-C 농도를 높여 주어 심혈관 질병과 동맥 죽상경화증의 발병 확율을 낮추는 데 매우 큰 도움이 된다는 것을 알 수 있다.As shown in the above-mentioned experiment results, monacin, ankaflavin, monascin + ankaflavin were all found in serum TC, TG, LDL-C, MDA, And increases the HDL-C level, and its effect is much higher than that of monacolin K. In addition, the effects of monascin + ankaflavin were more pronounced than when monascin and ankaflavin were used alone. Therefore, the compositions of the first, second and third comparative examples of the present invention not only effectively lower the cholesterol content in the serum but also increase the HDL-C concentration in the serum, thereby lowering the incidence of cardiovascular diseases and arterial atherosclerosis It is a great help.
이상 상술된 내용은 단지 본 발명의 특징과 장점 등을 상세히 설명하기 위해 비교적 우수한 실시예를 예로 들어 설명한 것으로 본 발명 청구범위는 이에 국한되지 않고 본 발명의 정신과 범주를 벗어나지 않는 범위 내에서 변경 및 기타 변형 등의 과정을 통한 경우에도 본 발명의 청구범위에 모두 포함된다.Although the present invention has been described and illustrated in detail, it is clearly understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the invention as defined by the appended claims. And the like are included in the claims of the present invention.
Claims (43)
(2) 아세톤으로 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행하고, 이때 상기 홍국 발효 산물과 상기 아세톤의 비율은 1:10~ 1:50이고,
(3) (2)에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 40℃~60℃ 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높이고,
(4.1) (3)에서 얻어진 산물을 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣고,
(4.2) 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣고, 이 때, 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 헥산(Hexane), 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol)= 9:1, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 8:2, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 7:3, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 1:1 및 에탄올(Ethanol)이 되도록 하고,
(4.3) 실리카 젤 관에서 흘러나오는 12~15개의 구분액(fraction)을 수집하고,
(4.4) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 모으고,
(4.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 해당 색소 구분액을 얻고,
(5.1) 얻어진 색소 구분액을 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피 (Sephadex LH-20 column) 내에 넣고,
(5.2) 세척용액을 세파덱스LH-20 관 크로마토그래피에 흘려 넣고, 이 때, 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 아세토니트릴(Acetonitrile)= 9:1이 되도록 하고,
(5.3) 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피에서 흘러나오는 3~5개의 구분액을 수집하고,
(5.4) 고효능 액체크로마토그래피와 포토다이오드 측정기를 사용해 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 포함한 구분액을 모으고,
(5.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 황색색소 구분액을 얻고,
(6.1) 상기 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣고,
(6.2) 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣고, 이 때, 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 이염화탄소(Dichloromethane): 에탄올(Ethanol) = 95:5, 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 9:1 및 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 4:1으로 흘려 넣고,
(6.3) 실리카 젤 관에서 흘러나오는 3~5개의 구분액을 수집하고,
(6.4) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)-포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 모으고,
(6.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 형성하고;
(7.1) 상기 순서(6)에서 형성된 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 함유한 구분액을, HPLC 조합된 C18 관 및 세척용액을 이용하여 세척 및 분리하고, 이 때, 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 물 = 85:15이며,
(7.2) C18 관에서 흘러나오는 2개의 구분액을 수집하고,
(7.3) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)-포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin) 성분을 함유한 구분액을 수집하는 것을 특징으로 하는 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법.
(1) providing a fermented red yeast product,
(2) The fermentation product of the fermented red yeast was repeatedly extracted three times with acetone, and the ratio of the fermented fermented product to the acetone was 1:10 to 1:50,
(3) The concentration of the product obtained in (2) is increased in a specific temperature range of 40 ° C to 60 ° C by using a reduced pressure concentration method,
(4.1) The product obtained in (3) was placed in a silica gel column,
(4.2) A plurality of washing solutions are sequentially poured into the silica gel tube, and the plurality of washing solutions are sequentially washed with hexane, hexane: ethanol = 9: 1, hexane ( Hexane: Ethanol = 8: 2, Hexane: Ethanol = 7: 3, Hexane: Ethanol = 1: 1 and Ethanol,
(4.3) 12 to 15 fractions from the silica gel tube were collected,
(4.4) Analysis of the separated liquids collected by high-performance liquid chromatography (HPLC) and photodiode-array (PDA) showed that monacin and ankaflavin, The separating solution containing the components was collected,
(4.5) The divided liquids collected are mixed to obtain a corresponding coloring matter liquid,
(5.1) The resulting dye-separated liquid was placed in a Sephadex LH-20 column (Sephadex LH-20 column)
(5.2) The washing solution was poured into a Sephadex LH-20 column chromatography, and the washing solution was adjusted to be methanol: acetonitrile = 9: 1,
(5.3) Separate 3 to 5 eluent from Sephadex LH-20 column chromatography was collected,
(5.4) Separation solutions containing the components of monacin and ankaflavin were collected by performing analysis on the collected solutions using the high-performance liquid chromatography and the photodiode meter,
(5.5) The above-mentioned collected liquids are mixed to obtain a yellow coloring matter liquid,
(6.1) The obtained yellow coloring matter liquid was put into a silica gel column,
(6.2) A plurality of washing solutions are sequentially poured into the silica gel tube, and the plurality of washing solutions are sequentially washed with dichloromethane: Ethanol = 95: 5, Dichloromethane: The mixture was poured into a mixture of ethanol = 9: 1 and dichloromethane: ethanol = 4: 1,
(6.3) Collect 3 to 5 separating liquids from the silica gel tube,
(6.4) Monocin and ankaflavin were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC) - photodiode-array (PDA) The separating solution containing the components was collected,
(6.5) mixing said pooled solutions to form a separating solution comprising monascin and ankaflavin;
(7.1) Separation solution containing monacin and ankaflavin formed in the above step (6) was washed and separated using a C 18 tube and washing solution combined with HPLC, The washing solution was methanol (methanol): water = 85: 15,
(7.2) Collect two separating liquids from the C 18 pipe,
(7.3) High Performance Liquid Chromatography (HPLC) - Analysis of the separated liquids collected by a photodiode-array (PDA) is carried out to obtain a separation liquid containing a monacin component And lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol.
(2) 아세톤으로 상기 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행하고, 이때 상기 홍국 발효 산물과 상기 아세톤의 비율은 1:10~ 1:50이고,
(3) (2)에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 40℃~60℃ 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높이고,
(4.1) (3)에서 얻어진 산물을 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣고,
(4.2) 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣고, 이 때, 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 헥산(Hexane), 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol)= 9:1, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 8:2, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 7:3, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 1:1 및 에탄올(Ethanol)이 되도록 하고,
(4.3) 실리카 젤 관에서 흘러나오는 12~15개의 구분액(fraction)을 수집하고,
(4.4) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 모으고,
(4.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 해당 색소 구분액을 얻고,
(5.1) 얻어진 색소 구분액을 세파덱스LH-20 관 크로마토그래피 (Sephadex LH-20 column) 내에 넣고,
(5.2) 세척용액을 세파덱스LH-20 관 크로마토그래피에 흘려 넣고, 이 때, 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 아세토니트릴(Acetonitrile)= 9:1이 되도록 하고,
(5.3) 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피에서 흘러나오는 3~5개의 구분액을 수집하고,
(5.4) 고효능 액체크로마토그래피와 포토다이오드 측정기를 사용해 상기 수집된 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 포함한 구분액을 모으고,
(5.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 황색색소 구분액을 얻고,
(6.1) 상기 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣고,
(6.2) 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣고, 이 때, 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 이염화탄소(Dichloromethane): 에탄올(Ethanol) = 95:5, 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 9:1 및 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 4:1으로 흘려 넣고,
(6.3) 실리카 젤 관에서 흘러나오는 3~5개의 구분액을 수집하고,
(6.4) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)-포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 모으고,
(6.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 형성하고;
(7.1) 상기 순서(6)에서 형성된 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 함유한 구분액을, HPLC 조합된 C18 관 및 세척용액을 이용하여 세척 및 분리하고, 이 때 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 물 = 85:15이며,
(7.2) C18 관에서 흘러나오는 2개의 구분액을 수집하고,
(7.3) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)-포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집하는 것을 특징으로 하는 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법.
(1) providing a fermented red yeast product,
(2) The extraction process is repeated three times with respect to the fermented red yeast product with acetone, wherein the ratio of the fermented red yeast product to acetone is 1:10 to 1:50,
(3) The concentration of the product obtained in (2) is increased in a specific temperature range of 40 ° C to 60 ° C by using a reduced pressure concentration method,
(4.1) The product obtained in (3) was placed in a silica gel column,
(4.2) A plurality of washing solutions are sequentially poured into the silica gel tube, and the plurality of washing solutions are sequentially washed with hexane, hexane: ethanol = 9: 1, hexane ( Hexane: Ethanol = 8: 2, Hexane: Ethanol = 7: 3, Hexane: Ethanol = 1: 1 and Ethanol,
(4.3) 12 to 15 fractions from the silica gel tube were collected,
(4.4) Analysis of the separated liquids collected by high-performance liquid chromatography (HPLC) and photodiode-array (PDA) showed that monacin and ankaflavin, The separating solution containing the components was collected,
(4.5) The divided liquids collected are mixed to obtain a corresponding coloring matter liquid,
(5.1) The resulting dye-separated liquid was placed in a Sephadex LH-20 column (Sephadex LH-20 column)
(5.2) The washing solution was poured into a Sephadex LH-20 column chromatography, and the washing solution was adjusted to be methanol: acetonitrile = 9: 1,
(5.3) Separate 3 to 5 eluent from Sephadex LH-20 column chromatography was collected,
(5.4) High-performance liquid chromatography and a photodiode meter were used to analyze the collected solutions, collect monoclonal and ankaflavin components,
(5.5) The above-mentioned collected liquids are mixed to obtain a yellow coloring matter liquid,
(6.1) The obtained yellow coloring matter liquid was put into a silica gel column,
(6.2) A plurality of washing solutions are sequentially poured into the silica gel tube, and the plurality of washing solutions are sequentially washed with dichloromethane: Ethanol = 95: 5, Dichloromethane: The mixture was poured into a mixture of ethanol = 9: 1 and dichloromethane: ethanol = 4: 1,
(6.3) Collect 3 to 5 separating liquids from the silica gel tube,
(6.4) Monocin and ankaflavin were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC) - photodiode-array (PDA) The separating solution containing the components was collected,
(6.5) mixing said pooled solutions to form a separating solution comprising monascin and ankaflavin;
(7.1) Separation solution containing monacin and ankaflavin formed in the above step (6) was washed and separated using a C 18 tube and washing solution combined with HPLC, The solution was methanol: water = 85: 15,
(7.2) Collect two separating liquids from the C 18 pipe,
(7.3) High performance liquid chromatography (HPLC) - The collected solutions were analyzed by a photodiode-array (PDA) to obtain a fraction containing an ancaflavin component The method comprising the steps of: (a) collecting high-density lipoprotein cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol.
(2) 아세톤으로 상기 홍국 발효 산물에 대해 반복적으로 3회의 추출 작업을 진행하고,이때 상기 홍국 발효 산물과 상기 아세톤의 비율은 1:10~ 1:50이고,
(3) (2)에서 얻어진 산물에 대해 특정 온도 범위 40℃~60℃ 내에서 감압농축 방식을 사용하여 그 농도를 높이고,
(4.1) (3)에서 얻어진 산물을 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣고,
(4.2) 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣고, 이 때, 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 헥산(Hexane), 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol)= 9:1, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 8:2, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 7:3, 헥산(Hexane) : 에탄올(Ethanol) = 1:1 및 에탄올(Ethanol)이 되도록 하고,
(4.3) 실리카 젤 관에서 흘러나오는 12~15개의 구분액(fraction)을 수집하고,
(4.4) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)와 포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 모으고,
(4.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 해당 색소 구분액을 얻고,
(5.1) 상기 얻어진 색소 구분액을 세파덱스 LH-20 관 크로마토그래피 (Sephadex LH-20 column) 내에 넣고,
(5.2) 세척용액을 세파덱스LH-20 관 크로마토그래피에 흘려 넣고, 이 때, 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 아세토니트릴(Acetonitrile)= 9:1이 되도록 하고,
(5.3) 특정 시간마다 세파덱스LH-20 관 크로마토그래피에서 흘러나오는 3~5개의 구분액을 수집하고,
(5.4) 고효능 액체크로마토그래피와 포토다이오드 측정기를 사용해 상기 수집된 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 포함한 구분액을 모으고,
(5.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 황색색소 구분액을 얻고,
(6.1) 상기 얻어진 황색색소 구분액에 대해 실리카 젤 관(silica gel column) 내에 넣고,
(6.2) 복수 개의 세척용액을 순서대로 상기 실리카 젤 관에 흘려 넣고, 이 때, 상기 복수 개의 세척용액은 순서대로 이염화탄소(Dichloromethane): 에탄올(Ethanol) = 95:5, 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 9:1 및 이염화탄소(Dichloromethane) : 에탄올( Ethanol) = 4:1으로 흘려 넣고,
(6.3) 실리카 젤 관에서 흘러나오는 3~5개의 구분액을 수집하고,
(6.4) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)-포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 모으고,
(6.5) 상기 모아진 구분액을 혼합하여 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 포함한 구분액을 형성하고;
(7.1) 상기 순서(6)에서 형성된 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin)을 함유한 구분액을, HPLC 조합된 C18 관 및 세척용액을 이용하여 세척 및 분리하고, 이 때 상기 세척용액은 메탄올(Methanol) : 물 = 85:15이며,
(7.2) C18 관에서 흘러나오는 2개의 구분액을 수집하고,
(7.3) 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography, HPLC)-포토다이오드 측정기(photodiode-array, PDA)로 상기 수집한 구분액에 대해 분석을 진행하여 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 함유한 구분액을 수집하고, 모나신(monascin) 성분을 함유한 구분액을 수집하여,
(8) 상기 얻어진 모나신(monascin)과 안카플라빈(ankaflavin) 성분을 특정 비율 3.56:1로 혼합하는 것을 특징으로 하는 혈지방을 낮추고 고밀도 지방단백 콜레스테롤을 높이는 조성물의 제조방법.(1) providing a fermented red yeast product,
(2) The extraction process is repeated three times with respect to the fermented red yeast product with acetone, wherein the ratio of the fermented red yeast product to acetone is 1:10 to 1:50,
(3) The concentration of the product obtained in (2) is increased in a specific temperature range of 40 ° C to 60 ° C by using a reduced pressure concentration method,
(4.1) The product obtained in (3) was placed in a silica gel column,
(4.2) A plurality of washing solutions are sequentially poured into the silica gel tube, and the plurality of washing solutions are sequentially washed with hexane, hexane: ethanol = 9: 1, hexane ( Hexane: Ethanol = 8: 2, Hexane: Ethanol = 7: 3, Hexane: Ethanol = 1: 1 and Ethanol,
(4.3) 12 to 15 fractions from the silica gel tube were collected,
(4.4) Analysis of the separated liquids collected by high-performance liquid chromatography (HPLC) and photodiode-array (PDA) showed that monacin and ankaflavin, The separating solution containing the components was collected,
(4.5) The divided liquids collected are mixed to obtain a corresponding coloring matter liquid,
(5.1) The dye-separated liquid obtained above was placed in Sephadex LH-20 column (Sephadex LH-20 column)
(5.2) The washing solution was poured into a Sephadex LH-20 column chromatography, and the washing solution was adjusted to be methanol: acetonitrile = 9: 1,
(5.3) Three to five seperate solutions flowing from the Sephadex LH-20 tube chromatography at specific times are collected,
(5.4) High-performance liquid chromatography and a photodiode meter were used to analyze the collected solutions, collect monoclonal and ankaflavin components,
(5.5) The above-mentioned collected liquids are mixed to obtain a yellow coloring matter liquid,
(6.1) The obtained yellow coloring matter liquid was put into a silica gel column,
(6.2) A plurality of washing solutions are sequentially poured into the silica gel tube, and the plurality of washing solutions are sequentially washed with dichloromethane: Ethanol = 95: 5, Dichloromethane: The mixture was poured into a mixture of ethanol = 9: 1 and dichloromethane: ethanol = 4: 1,
(6.3) Collect 3 to 5 separating liquids from the silica gel tube,
(6.4) Monocin and ankaflavin were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC) - photodiode-array (PDA) The separating solution containing the components was collected,
(6.5) mixing said pooled solutions to form a separating solution comprising monascin and ankaflavin;
(7.1) Separation solution containing monacin and ankaflavin formed in the above step (6) was washed and separated using a C 18 tube and washing solution combined with HPLC, The solution was methanol: water = 85: 15,
(7.2) Collect two separating liquids from the C 18 pipe,
(7.3) High performance liquid chromatography (HPLC) - The collected solutions were analyzed by a photodiode-array (PDA) to obtain a fraction containing an ancaflavin component , Collecting the separating liquid containing the monacin component,
(8) A method for lowering blood fat and increasing high density lipoprotein cholesterol, comprising mixing monacin and ancaflavin components at a specific ratio of 3.56: 1.
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