KR101292085B1 - A method of preparing for onion fermented-beverage - Google Patents

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Abstract

본 발명은 양파 착즙액을 발효하여, 사과산(malic acid), 구연산(citric acid) 및 숙신산(succinic acid)을 생성할 수 있고, 양파 착즙액으로부터 초산을 생성할 수 있는 능력이 매우 우수하며, 생성된 양파 초산발효액에 항암활성 및 혈전생성 억제능을 강화시킬 수 있는 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis)를 이용하여 양파 발효 음료의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 제조방법은 상기 미생물의 최적 발효 조건에 의한 발효과정을 수행하여 산도 4%(v/v) 이상의 발효 음료를 제조할 수 있을 뿐만 아니라, 상기 발효 음료의 기간을 최소화할 수 있고, 나아가 상기 양파 발효 음료의 양파에 의한 이취미를 최적으로 제어할 수 있는 조건을 확인하여 완성한 것이다.
The present invention is fermented onion juice, can produce malic acid, citric acid (citric acid) and succinic acid (succinic acid), very excellent ability to produce acetic acid from onion juice, It relates to a method for producing onion fermented beverages using Acetobacter tropicalis ( Acetobacter tropicalis ) which can enhance anticancer activity and antithrombotic activity in the fermented onion acetate acetic acid.
The production method of the present invention may not only produce a fermentation beverage having an acidity of 4% (v / v) or more by performing a fermentation process according to the optimum fermentation conditions of the microorganisms, and further minimize the duration of the fermentation beverage. The onion fermentation drink is completed by confirming the conditions that can be optimally controlled by the onion taste.

Description

양파 발효 음료의 제조방법{A METHOD OF PREPARING FOR ONION FERMENTED-BEVERAGE}A method of preparing onion fermented beverages {A METHOD OF PREPARING FOR ONION FERMENTED-BEVERAGE}

본 발명은 초산 발효 균주를 이용한 양파 발효 음료의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for preparing onion fermented beverage using acetic acid fermentation strain.

양파(Allium cepa L.)는 외떡잎식물 백합목 백합과에 속하는 다년초로서, 양파는 비교적 냉한 기후에 적합한 작물로 연작이 가능한 채소이다.Onion ( Allium cepa L.) is a perennial plant belonging to the monocotyledonous liliaceae, onion is a vegetable that can be grown as a crop suitable for a relatively cold climate.

양파는 오랜 재배 역사를 가지고 있고, 향기성분의 특성으로 인하여 고추, 마늘 등과 더불어 전 세계적으로 많이 이용되고 있는 조미 채소 중의 하나이다. 양파의 독특한 냄새는 육류의 좋지 못한 냄새나 맛을 제거하는데 효과적일 뿐만 아니라 방부효과도 있는 것으로 알려져 주로 고기 등의 요리에 향신료로 사용되고 있다. 또한, 영양학적으로 양파에는 각종 비타민과 함께 칼슘 및 인산 등의 무기질이 들어 있는 것으로 알려져 있다.Onion has a long history of cultivation and is one of the seasoned vegetables that are widely used around the world due to the characteristics of the fragrance ingredients, such as pepper, garlic. The unique smell of onion is not only effective in removing the bad smell and taste of meat, but also known to have an antiseptic effect and is mainly used as a spice in meat and other dishes. In addition, it is known that onions contain minerals such as calcium and phosphoric acid together with various vitamins.

양파는 우리나라에서는 주로 남부지방에서 생산되며, 대부분 5월 내지 7월 사이에 생산된다. 수확된 양파는 주로 저온고에 저장되었다가, 수요량이 많은 시기에 출하하는데, 일부는 절임용 또는 건조가공용 등으로 소비되나, 생산량의 약 90% 이상이 생채로 저온 저장되었다가 출하된다. 국내의 양파 생산량은 1990년 이후 꾸준히 증가 추세에 있으며, 2005년 전국 생산량은 1,023,000톤으로 마늘 생산량의 약 2배 정도를 차지하고 있다.Onions are mainly produced in the southern part of Korea, and most are produced between May and July. Harvested onions are mainly stored at low temperatures, and shipped at high demands, some of which are consumed for pickling or drying, but more than 90% of the yield is stored at low temperatures as raw. Domestic onion production has been steadily increasing since 1990. In 2005, the national production was 1,023,000 tons, which is about twice the garlic production.

현재까지 양파의 생리활성에 관한 연구는 상당이 많이 이루어져 동물실험을 통하여 심혈관계 질환 예방, 혈전증 치료에 관한 효과, 혈당 저하효과, 항산화 효과 및 납 독성의 해독효과, 항균 효과, 항암 효과, 항산화 및 중금속 제거 효과 등 다양한 생리활성기능에 관한 연구들이 보고되어 있다. 상기 다양한 생리활성기능에 관한 연구에 의해 양파는 소비자들에게 있어서 건강기능성 소재로 인식되어 가고 있다.To date, many studies on the physiological activity of onions have been conducted through animal experiments. The effects of cardiovascular disease prevention, thrombosis treatment, blood sugar lowering effect, antioxidant effect and detoxification effect of lead toxicity, antibacterial effect, anticancer effect, antioxidant and Studies on various bioactive functions, such as heavy metal removal effect, have been reported. Onion has been recognized as a health functional material by consumers by research on the various bioactive functions.

양파는 대부분 삶거나 볶아서 향신료 및 조미용으로 각종 요리에 사용되며, 압출스낵, 조미액, 스프 등의 가공식으로도 이용되고 있다. 그러나 양파는 저장성이 낮아 저장 중 조직의 부패, 연화 등으로 인하여 전체 생산량의 10 내지 20%가 상품적 가치를 상실하여 퇴비로 이용되거나 버려지고 있다. 또한, 양파는 양파세포가 파괴되었을 때 생성되는 allinase라는 효소는 비휘발성의 냄새가 없는 전구물질에 작용하여 황을 함유한 많은 휘발성 화합물 등을 생성함으로써 냄새가 너무 강하여 식품가공산업에서 선호도가 낮은 편이다.Onions are mostly boiled or roasted and used in various dishes for spices and seasonings. They are also used as processed snacks such as extruded snacks, seasonings, and soups. However, onions have low shelf life, and 10-20% of the total output is lost or used as compost due to the decay and softening of tissues during storage. In addition, onion is an enzyme called allinase, which is produced when onion cells are destroyed, acts on non-volatile odorless precursors to produce many volatile compounds containing sulfur. to be.

저장성이 낮은 양파의 저장성 향상 기술과 가공기술에 관한 연구도 일부 이루어져 양파의 분말화를 위해 여러 가지의 건조 공정이 적용되었으며, 방사선 처리나 훈증 처리를 통해 저장성을 향상시키려는 시도도 있었으나, 아직까지 만족할만한 높은 저장성을 확보하지 못하고 있는 실정이다. 따라서, 양파의 소비를 증진시키기 위해서 소비자가 쉽게 섭취할 수 있는 가공식품의 형태로 이용하는 방법에 대한 개발이 요구된다.Some researches have been made on improving the storage characteristics and processing techniques of onions with low shelf life, and various drying processes have been applied for the powdering of onions, and there have been attempts to improve the shelf life through radiation treatment or fumigation treatment. There is no secure high storage. Therefore, in order to increase the consumption of onion is required to develop a method of using in the form of processed food that can be easily consumed by consumers.

이러한 요구에 따라, 양파의 새로운 이용방법 및 제품에 대한 연구가 진행되고 있다. 현재까지 진행된 양파에 관한 제품 연구로는 양파스낵 제조에 관한 연구, 건조 양파 착즙박과 건조 양파를 이용한 압출스낵의 물리적 특성에 관한 연구를 바탕으로 양파 착즙박과 양파를 이용한 압출스낵을 제조하기 위한 연구, 양파로부터 퀘르세틴(quercetin)을 분리하는 기술에 대한 연구, 건조 양파의 저장 안정성에 관한 연구, 양파분말을 첨가한 식빵의 품질 특성에 관한 연구 및 양파를 첨가한 딸기잼의 품질 특성에 관한 연구 등이 보고되어 있다.In response to these demands, research is being conducted on new methods and products of onions. The product research on onions that has been conducted up to now is based on the research on the production of onion snacks and on the physical properties of extruded snacks using dried onion juice and dried onions. Research, research on separation of quercetin from onions, storage stability of dried onions, quality characteristics of bread with onion powder, and quality characteristics of strawberry jam with onion And the like have been reported.

현재 양파의 국내 자급률은 100%에 이를 정도로 양파의 국내 생산량이 높아, 저장성이 낮은 양파의 소비촉진을 위해서는 다양한 양파의 이용방법이 요구되고 있는 실정이다.Currently, domestic self-sufficiency rate of onions reaches 100%, and domestic production of onions is high, and various methods of using onions are required to promote consumption of onions with low shelf life.

따라서, 국내 소비량을 초과하여 생산될 수 있어, 그 소비촉진을 위한 새로운 이용형태의 개발이 요구되는 양파와 관련하여, 그 기능성을 강화시킬 수 있는 대안으로 양파를 재료로 하는 새로운 식음료에 대한 개발의 필요성이 대두되고 있다.Therefore, with respect to onions that can be produced in excess of domestic consumption, which requires the development of new forms of use for promoting consumption, the development of new foods and beverages with onions as an alternative to enhance its functionality Necessity is emerging.

본 발명은 양파를 발효시켜 발효물의 산도를 증가시킬 뿐만 아니라 기존 양파가 가지는 기능성을 개선시킬 수 있는 미생물을 이용하여 양파 발효 음료를 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.It is an object of the present invention to provide a method for producing an onion fermentation drink using microorganisms that can not only increase the acidity of fermented products by fermenting onions but also improve the functionality of the existing onions.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 양파에 아세토박터 트로피칼리스 균주를 접종하는 단계 및 상기 균주가 접종된 양파를 발효시켜 양파 발효액을 제조하는 단계를 포함하는 양파 발효 음료의 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 제조된 양파 발효 음료를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is a method for producing an onion fermented beverage comprising the step of inoculating an acetobacter tropicalis strain in the onion and the step of fermenting the onion inoculated with the strain to produce an onion fermentation broth. It provides an onion fermented beverage prepared by.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 명세서에 있어서, 발효(fermentation)란 미생물이 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정을 의미하며, 초산발효란 미생물이 유기물을 분해시키는 발효과정에서 초산이 생성되는 발효과정을 의미한다.In the present specification, fermentation (fermentation) refers to a process in which microorganisms decompose organic matter using an enzyme that it has, and acetic acid fermentation refers to a fermentation process in which acetic acid is produced in a fermentation process in which microorganisms decompose organic matter.

본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하고, 식초, 식초 음료 및 기능성 음료를 포함하는 의도이다. 또한 발효 음료란 미생물을 이용한 발효 과정을 수행하여 제조된 음료를 의미한다.Beverage in the present invention refers to a generic term of drinking to quench thirst or to enjoy the taste, it is intended to include vinegar, vinegar beverages and functional drinks. In addition, the fermented beverage refers to a beverage prepared by performing a fermentation process using a microorganism.

본 발명에서 기능성 음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다. The functional beverage according to the present invention can be used to control the bio-defense rhythm of the beverage group or beverage composition to which the added value is imparted so that the function of the beverage acts on the specific purpose by physical, biochemical, biotechnological, Means a beverage which has been designed so that the body control function related to restoration and the like is sufficiently expressed in the living body.

본 발명에서 배양배지란 동물세포, 식물세포 또는 세균 따위를 기르는 데 필요한 영양소가 들어 있는 고체배지 또는 액체배지를 의미하며, 배양액이란 액체배지에 균주를 접종하여 배양한 것을 의미한다.In the present invention, the culture medium refers to a solid medium or a liquid medium containing nutrients necessary for growing animal cells, plant cells or bacteria, and the culture medium refers to cultured by inoculating a strain into a liquid medium.

본 발명자들은 양파 착즙액의 초산 발효능이 우수하고, 양파를 발효시켜 기능성을 부가시킬 수 있는 미생물에 대해 연구하던 중, 산 생성능이 우수한 아세토박터 트로피칼리스 NO. 22(Acetobacter tropicalis NO. 22)를 양파 착즙액에 접종하여 발효시키는 경우, 양파 착즙액의 항암 활성 및 혈전생성 억제능을 개선할 수 있다는 것을 확인하고, 이에 나아가 상기 아세토박터 트로피칼리스 NO. 22(Acetobacter tropicalis NO. 22)의 생육 및 산 생성의 최적 조건을 확인하여, 이를 기초로 우수한 양파 발효 음료를 제조할 수 있음을 착안하여 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention are excellent in acetic acid fermentation ability of onion juice, and while studying the microorganisms that can add functionality by fermenting onions, acetobacter tropicalis NO. 22 ( Acetobacter tropicalis NO. 22) inoculated with onion juice to fermentation, it was confirmed that the anticancer activity and the antithrombotic activity of the onion juice can be improved, furthermore, the acetobacter tropicalis NO. 22 ( Acetobacter tropicalis NO. The present invention was completed by identifying the optimum conditions for growth and acid production in 22) and preparing an excellent onion fermented beverage based on this.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 양파에 아세토박터 트로피칼리스 균주를 접종하는 단계 및 상기 균주가 접종된 양파를 발효시켜 양파 발효액을 제조하는 단계를 포함하는 양파 발효 음료의 제조방법 및 상기 제조방법에 의해 제조된 양파 발효 음료를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is a method for producing an onion fermented beverage comprising the step of inoculating an acetobacter tropicalis strain in the onion and the step of fermenting the onion inoculated with the strain to produce an onion fermentation broth. It provides an onion fermented beverage prepared by.

상기 양파 발효 음료 제조 방법은 양파 발효 대상액을 제조하는 단계; 상기 양파 발효 대상액에 상기 아세토박터 트로피칼리스 균주를 접종하는 단계 및 상기 균주가 접종된 양파 발효 대상액을 발효시켜 양파 발효액을 제조하는 단계를 포함하는 양파 발효 음료의 제조방법일 수 있다.The onion fermentation beverage production method comprises the steps of preparing an onion fermentation target solution; It may be a method for producing an onion fermentation drink comprising the step of inoculating the acetobacter tropicalis strain in the onion fermentation target solution and the step of fermenting the onion fermentation target solution inoculated with the strain to prepare an onion fermentation broth.

상기 아세토박터 트로피칼리스 균주는 구체적으로 신냄새가 나는 복숭아로부터 분리되고, 산 생성능을 가지며, 초산 생성능이 우수하고, 양파의 초산 발효능을 가지며, 양파를 발효시켜 사과산(malic acid), 구연산(citric acid) 및 숙신산(succinic acid)을 생성할 뿐만 아니라 상기 양파를 초산 발효시켜 생성된 초산 양파 발효물에 항암활성 및 혈전생성 억제능을 강화시킬 수 있는 아세토박터 트로피칼리스 No. 22(Acetobacter tropicalis No. 22)일 수 있다.The acetobacter tropicalis strain is specifically isolated from the smelly peach, has acid producing ability, excellent acetic acid producing ability, acetic acid fermentation ability of onion, fermented onions malic acid (cilic acid), citric acid (citric acid) and succinic acid, as well as acetobacter tropical No. which can enhance anticancer activity and thrombus formation inhibitory ability in acetic acid onion ferment produced by acetic acid fermentation of the onion. 22 ( Acetobacter tropicalis No. 22).

상기 아세토박터 트로피칼리스 균주 No. 22(Acetobacter tropicalis No. 22)는 대한민국 서울특별시 서대문구 홍제1동 361-221번지 유림빌딩 2층에 위치한 한국미생물보존센터에 2009년 12월 18일자로 기탁하여, 수탁번호 KFCC 11476P를 부여 받았다.Acetobacter tropicalis strain No. 22 ( Acetobacter tropicalis No. 22) was deposited on December 18, 2009 with the Korea Microorganism Conservation Center located on the 2nd floor of Yurim Building, 361-221 Hongje 1-dong, Seodaemun-gu, Seoul, Korea, and was given accession number KFCC 11476P.

상기 아세토박터 트로피칼리스 균주는 양파에 접종하는 경우 초산 발효를 통하여 양파 발효액을 제조할 수 있으나, 보다 효율적인 음료 생산을 위하여 상기 아세토박터 트로피칼리스 균주는 발효 음료를 위해 양파를 가공한 양파 발효 대상액에 접종할 수 있다.When the acetobacter tropicalis strain is inoculated into onions, the onion fermentation broth may be prepared through acetic acid fermentation, but for more efficient beverage production, the acetobacter tropicalis strain may be prepared in an onion fermentation broth processed with onion for fermentation beverage. It can be inoculated.

상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 양파를 착즙하여 양파 착즙액을 제조하는 과정 및 양파 열수 추출액을 제조하는 과정으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 포함하는 방법으로 수행할 수 있고, 이취미 제거를 위하여 추가로 상기 양파 착즙액 및 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 열처리하는 과정을 더욱 포함할 수 있다.The preparing of the onion fermentation target solution may be performed by a method including any one selected from the group consisting of a process of preparing an onion juice solution and a process of preparing an onion hot water extract by juice of onions, and removing odors. In order to further heat treatment any one selected from the group consisting of the onion juice and onion hot water extract.

상기 양파 착즙액을 제조하는 과정은 양파를 통상의 착즙방법으로 착즙하여 양파 착즙 또는 양파 생즙을 제조하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 양파 착즙액을 제조하는 과정은 일 예로, 양파를 박피하고 세척하고 절단하는 과정; 상기 세척된 양파를 분쇄기로 분쇄하는 과정 및 상기 분쇄된 양파를 착즙하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있고, 상기 분쇄는 녹즙기와 같은 믹서를 이용할 수 있고, 상기 착즙과정은 부직포를 이용하거나 원심분리기를 이용할 수 있다.The process of preparing the onion juice solution may be carried out by a method of producing onion juice or onion juice by juice the onion in a conventional juice method. The process of preparing the onion juice solution, for example, the process of peeling, washing and cutting the onion; The washed onion may be pulverized with a pulverizer and a process including pulverizing the pulverized onion. The pulverization may be performed using a mixer such as a green juice, and the pulverizing process may be performed using a nonwoven fabric or centrifugal. Separator may be used.

상기 양파 열수 추출액을 제조하는 과정은 일 예로 양파를 절단하는 과정 및 상기 절단된 양파에 물을 첨가하고 가열하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있고, 보다 구체적으로 양파를 절단하는 과정; 상기 절단된 양파를 망에 넣고, 양파 1kg을 기준으로 물 500ml를 추가한 후, 110℃ 내지 130℃, 바람직하게는 115℃ 내지 125℃, 더욱 바람직하게는 120℃의 온도 범위에서 10분 내지 30분, 바람직하게는 15분 내지 25분, 더욱 바람직하게는 20분간 열수 추출하는 과정; 상기 열추 추출과정을 수행한 양파를 망에 넣은 채 또는 망에서 꺼내 착즙하는 과정 및 상기 착즙 과정을 통해 수득한 착즙과 양파 열수 추출과정을 통해 얻은 열수 추출물을 혼합하여 양파 열수 추출액을 제조하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있고, 상기 착즙하는 과정은 부직포를 이용하거나 원심분리기를 이용할 수 있다. 상기 양파 열수 추출액을 제조하는 과정을 통해서 얻은 양파 열수 추출액은 당도가 양파즙에 대응하는 당도인 약 10 brix이며, 양파 1kg에 약 1kg의 양파 열수 추출액을 수득할 수 있다.The process of preparing the onion hot water extract may be performed by a method including, for example, cutting onions and adding water to the cut onions and heating them, and more specifically, cutting onions; The cut onion is put in a net, and 500 ml of water is added based on 1 kg of onion, and then 10 minutes to 30 ° C in a temperature range of 110 ° C to 130 ° C, preferably 115 ° C to 125 ° C, and more preferably 120 ° C. Hydrothermal extraction for minutes, preferably 15 minutes to 25 minutes, more preferably 20 minutes; The process of preparing the onion hot water extract by mixing the hot water extract obtained through the process of extracting the onion and the hot water extraction process obtained by the extraction process and extracting the juice from the net or put the onion in the net extraction process It can be carried out by a method comprising, the process of juice can be used using a non-woven fabric or a centrifuge. The onion hydrothermal extract obtained through the process of preparing the onion hydrothermal extract is about 10 brix of sugar content corresponding to onion juice, and can obtain an onion hydrothermal extract of about 1 kg per onion.

상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 열처리하는 과정은 상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 100℃ 내지 140℃, 바람직하게는 105℃ 내지 130℃, 더욱 바람직하게는 110℃ 내지 120℃에서 1분 내지 20분, 바람직하게는 5분 내지 15분, 더욱 바람직하게는 7분 내지 12분간 열처리하는 방법일 수 있고, 상기 과정에 의하여 양파 특유의 이취가 제거될 수 있다.The process of heat-treating any one selected from the group consisting of the onion juice and the onion hot water extract is 100 ℃ to 140 ℃, preferably 105 ℃ to any one selected from the group consisting of the onion juice and the onion hot water extract 1 minute to 20 minutes, preferably 5 minutes to 15 minutes, more preferably 7 minutes to 12 minutes at 130 ° C, more preferably 110 ° C to 120 ° C, and the onion-specific process by the above process Off-flavor of can be eliminated.

상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 양파를 착즙하여 양파 착즙액을 제조하는 과정 및 양파 열수 추출액을 제조하는 과정으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나에 상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 열처리하는 과정을 더욱 포함할 수 있다. 또한, 상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 양파를 착즙하여 양파 착즙액을 제조하는 과정 및 양파 열수 추출액을 제조하는 과정으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나에 이어서 추가로 불용성 물질을 제거하는 단계를 추가로 수행할 수 있으며, 상기 불용성 물질 제거단계는 상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나 또는 상기 열처리 과정을 수행한 상기 양파 착즙액 및 상기 열처리 과정을 수행한 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 원심분리하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 원심분리하는 방법은 원심분리기를 이용하여 수행할 수 있다. 상기 원심분리기를 이용하는 경우, 원심분리 조건은 8,000 내지 12,000xg, 바람직하게는 9,000xg 내지 11,000xg, 더욱 바람직하게는 9,500xg 내지 10,500xg 및 10분 내지 45분, 바람직하게는 20분 내지 40분, 더욱 바람직하게는 25분 내지 35분일 수 있다.The preparing of the onion fermentation target solution may include extracting the onion juice and the onion hydrothermal extract from any one selected from the group consisting of a process of preparing an onion juice by extracting the onion and extracting the onion hydrothermal extract. The method may further include heat treating any one selected. The preparing of the onion fermentation target solution further comprises the step of removing the insoluble material after any one selected from the group consisting of a process of preparing an onion juice solution by preparing an onion juice by juice of onions and a process of preparing an onion hydrothermal extract solution. The insoluble material removing step may be performed by any one selected from the group consisting of the onion juice solution and the onion hydrothermal extract solution or the onion juice solution that performs the heat treatment process and the onion juice solution that performs the heat treatment process. Any one selected from the group consisting of can be carried out by the method of centrifugation. The centrifugation method may be performed using a centrifuge. When using the centrifuge, the centrifugation conditions are 8,000 to 12,000xg, preferably 9,000xg to 11,000xg, more preferably 9,500xg to 10,500xg and 10 minutes to 45 minutes, preferably 20 minutes to 40 minutes, More preferably, it may be 25 to 35 minutes.

상기 열처리된 양파 착즙액 및 상기 열처리된 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나에는 세균과 효모 등이 존재하여 초산 발효를 저해하고, 제품의 품질을 저하시킬 수 있으므로, 상기 세균과 효모를 제거하기 위하여 상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나에 상기 아세토박터 트로피칼리스 균주를 접종하는 단계 전에 살균단계를 추가로 수행할 수 있다. In any one selected from the group consisting of the heat-treated onion juice and the heat-treated onion hot water extract, bacteria and yeast may be present to inhibit acetic acid fermentation and lower the quality of the product, thereby removing the bacteria and yeast. In order to inoculate the acetobacter tropicalis strain to any one selected from the group consisting of the onion juice solution and the onion hot water extract may be further sterilized.

상기 살균단계는 63℃ 내지 65℃에서 약 30분간 살균하는 저온장시간 살균법(Low temperature long time, LTLT), 72℃ 내지 75℃에서 15 내지 30초간 살균하는 고온단시간살균법(High temperature short time, HTST) 및 120℃ 내지 150℃에서 1 내지 3초간 살균하는 초고온순간살균법 (Ultra high temperature, UHT) 등으로 수행할 수 있으며, 원료의 갈변현상을 최소화하면서 오염세균을 최대한 살균시키기 위하여, 120℃ 내지 130℃, 바람직하게는 121℃에서 10 내지 20분, 바람직하게는 15분간 가열살균을 실시할 수 있다.The sterilization step is a low temperature long time (LTLT) sterilization for about 30 minutes at 63 ℃ to 65 ℃, high temperature short time, sterilization for 15 to 30 seconds at 72 ℃ to 75 ℃ HTST) and ultra high temperature sterilization (UHT) for 1 to 3 seconds at 120 ° C to 150 ° C. In order to sterilize contaminated bacteria as much as possible while minimizing browning of raw materials, To sterilization may be performed at from 130 ° C. to 130 ° C., preferably at 121 ° C. for 10 to 20 minutes, preferably for 15 minutes.

또한, 상기 균주는 에탄올 농도가 전체 발효 대상액 대비 4%(v/v)일 때 산 생성 효율이 가장 좋으므로, 상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 상기 발효 대상액의 에탄올 농도를 발효 대상액 전체 대비 3%(v/v) 내지 5%(v/v), 바람직하게는 3.5%(v/v) 내지 4.9%(v/v), 더욱 바람직하게는 3.7%(v/v) 내지 4.7%(v/v)이 되도록 에탄올 농도를 조절하는 과정을 더욱 포함할 수 있다.In addition, the strain is the acid production efficiency is best when the ethanol concentration is 4% (v / v) compared to the total fermentation target solution, the step of preparing the onion fermentation target solution to the ethanol concentration of the fermentation target solution 3% (v / v) to 5% (v / v), preferably 3.5% (v / v) to 4.9% (v / v), more preferably 3.7% (v / v) to the total liquid The method may further include adjusting the ethanol concentration to be 4.7% (v / v).

상기 에탄올 농도를 조절하는 과정은 에탄올 농도가 상기 농도로 조절되도록 발효 대상액, 구체적으로 상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나, 상기 열처리 과정을 수행한 상기 양파 착즙액 및 상기 열처리 과정을 수행한 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나 및 상기 살균 과정을 수행한 상기 양파 착즙액 및 상기 살균 과정을 수행한 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나에 에탄올을 첨가하는 방법 또는 상기 발효 대상액에 효모, 구체적으로 싸카로마이세스 세르비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 접종하여 에탄올 농도를 상기 농도로 조절되도록 전 발효를 진행한 후, 상기 싸카로마이세스 세르비지에를 제거하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 싸카로마이세스 세르비지에 균주는 일 예로 싸카로마이세스 세르비지에 KCCM 7913(Saccharomyces cerevisiae)일 수 있다.The process of adjusting the ethanol concentration is any one selected from the group consisting of the fermentation target solution, specifically the onion juice and the onion hot water extract, so that the ethanol concentration is adjusted to the concentration, the onion juice solution subjected to the heat treatment process and Method of adding ethanol to any one selected from the group consisting of onion hot water extract having undergone the heat treatment process and the onion juice solution having the sterilization process and onion hot water extract having the sterilization process Or inoculating yeast, specifically Saccharomyces cerevisiae , into the fermentation broth to undergo fermentation to adjust the ethanol concentration to the concentration, and then removing the saccharomyces servizier. It can be done by the method. Said saccharomyces serbizi strain is one example of Saccharomyces serbizi KCCM 7913 ( Saccharomyces cerevisiae .

또한, 상기 균주는 글루코스(glucose) 농도가 전체 발효 대상액 대비 2.5%(v/v) 내지 3%(v/v), 구체적으로 2.5%(v/v)일 때 균주 생육 효율 및 산 생성 효율이 가장 좋으므로, 상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 상기 발효 대상액의 글루코스 농도를 발효 대상액 전체 대비 2.5%(v/v) 내지 3.0%(v/v)이 되도록 글루코스 농도를 조절하는 과정을 더욱 포함할 수 있다.In addition, the strain growth efficiency and acid production efficiency of the strain when the glucose (glucose) concentration of 2.5% (v / v) to 3% (v / v), specifically 2.5% (v / v) compared to the total fermentation target solution Since the best, the step of preparing the onion fermentation target solution is to adjust the glucose concentration so that the glucose concentration of the fermentation target solution is 2.5% (v / v) to 3.0% (v / v) relative to the total fermentation target solution The process may further include.

상기 글루코스 농도를 조절하는 과정은 상기 발효 대상액, 구체적으로 상기 양파 착즙액 및 상기 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나, 상기 열처리 과정을 수행한 상기 양파 착즙액 및 상기 열처리 과정을 수행한 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나 및 상기 살균 과정을 수행한 상기 양파 착즙액 및 상기 살균 과정을 수행한 양파 열수 추출액으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나에 글루코스를 상기 농도로 조절되도록 첨가하는 방법으로 수행할 수 있다.The process of adjusting the glucose concentration is any one selected from the group consisting of the fermentation target solution, specifically the onion juice solution and the onion hydrothermal extract solution, the onion juice solution performing the heat treatment process and the onion heat treatment process The method of adding glucose to adjust the concentration to any one selected from the group consisting of hot water extract and the onion juice solution performing the sterilization process and the onion hot water extract performing the sterilization process to adjust the concentration. can do.

상기 양파 발효 대상액에 상기 아세토박터 트로피칼리스 균주를 접종하는 단계는 상기 양파 발효 대상액에 상기 아세토박터 트로피칼리스 균주를 접종 또는 첨가하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 균주의 접종 또는 첨가는 균주 자체를 접종하거나 균주의 배양액 또는 균주의 배양배지를 첨가하는 방법으로 수행할 수 있다.Inoculating the acetobacter tropicalis strain in the onion fermentation target solution may be performed by inoculating or adding the acetobacter tropicalis strain to the onion fermentation target solution. Inoculation or addition of the strain may be carried out by inoculating the strain itself or adding a culture medium of the strain or a culture medium of the strain.

상기 균주의 접종량은 양파 발효 대상액을 기준으로 7.5 x 106 CFU/mL 내지 1.5 x 107 CFU/mL 또는 0.8 x 107 CFU/mL 내지 1.25 x 107 CFU/mL 또는 0.9 x 107 CFU/mL 내지 1.2 x 107 CFU/mL일 수 있으나, 이에 반드시 한정되는 것은 아니다.The inoculation amount of the strain was 7.5 x 10 6 CFU / mL to 1.5 x 10 7 CFU / mL or 0.8 x 10 7 CFU / mL to 1.25 x 10 7 CFU / mL or 0.9 x 10 7 CFU / based on the onion fermentation broth. but may not be limited to mL to 1.2 × 10 7 CFU / mL.

상기 균주가 접종된 양파 발효 대상액을 발효시켜 양파 발효액을 제조하는 단계는 일정 조건에서 수행할 수 있다.Fermenting the onion fermentation target solution inoculated with the strain to prepare the onion fermentation broth may be performed under certain conditions.

상기 발효는 20 내지 40℃, 바람직하게는 25 내지 35℃, 더욱 바람직하게는 27 내지 33℃ 및 pH 2 내지 pH 4, 바람직하게는 pH 3 내지 pH 3.8의 조건에서 수행할 수 있다.The fermentation may be carried out at 20 to 40 ℃, preferably 25 to 35 ℃, more preferably 27 to 33 ℃ and pH 2 to pH 4, preferably pH 3 to pH 3.8 conditions.

또한, 상기 균주는 혐기적 조건 보다는 통기적 조건에서 발효 효율이 현저하게 상승되므로, 상기 발효액을 제조하는 단계는 통기 조건에서 수행하는 것이 바람직하고 일 예로, 통기 조건은 0.5 vvm 내지 1.5 vvm 또는 0.5 vvm 내지 1.2 vvm조건 및 300 rpm 내지 700 rpm의 교반속도 조건에서 수행할 수 있다. 상기 vvm은 발효기 안에 공기가 1분 동안 1L 유입되는 단위를 의미한다.In addition, since the strain is significantly increased fermentation efficiency under aeration conditions rather than anaerobic conditions, the step of preparing the fermentation broth is preferably carried out under aeration conditions, for example, aeration conditions are 0.5 vvm to 1.5 vvm or 0.5 vvm To 1.2 vvm conditions and agitation speed conditions of 300 rpm to 700 rpm. The vvm refers to a unit in which 1L of air is introduced into the fermenter for 1 minute.

또한, 상기 발효액을 제조하는 단계는 추가로 양파 발효 대상액 발효 과정에서 효모 추출물 및 옥수수 침지액으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 첨가하는 과정을 더욱 포함할 수 있다.In addition, the step of preparing the fermentation broth may further include the process of adding at least one selected from the group consisting of yeast extract and corn steep liquor during the fermentation process of onion fermentation solution.

상기 효모 추출물(Yesat Extract)은 식용 효모 균주를 분리, 정제한 후 자가소화 등의 방법에 의해 추출물을 분리한 것으로, 액체, 분말, 과립 또는 페이스트 상 물질의 천연첨가물로 사용된다. 상기 옥수수 침지액(corn steep liquor, CSL)은 옥수수를 불려 갈아서 만든 액체 또는 옥수수 녹말 제조 시 침지과정에서 발생하는 액상 부산물을 의미하며, 옥수수 전분 침출액이라고도 한다.The yeast extract (Yesat Extract) is a separation of the extract by a method such as self-digestion after separating and purifying the edible yeast strain, it is used as a natural additive of liquid, powder, granules or paste-like material. The corn steep liquor (CSL) refers to a liquid by-product produced during soaking during the production of liquid or corn starch by grinding corn, and is also referred to as corn starch leachate.

상기 첨가되는 성분이 효모 추출물인 경우에는 효모 추출물의 양은 상기 발효 대상액 전체 대비 0.05%(w/v) 내지 1.05%(w/v)일 수 있다. 상기 효모 추출물의 첨가량이 0.05%(w/v) 미만인 경우에는 산도 증가의 효과를 나타낼 수 없고, 상기 효모 추출물의 첨가량이 1.05%(w/v) 초과인 경우에는 효모 추출물의 첨가에도 불구하고 산도 증가에 따른 저항작용으로 산도의 증가가 매우 둔화되므로 경제적으로 바람직하지 아니할 수 있다.When the added ingredient is a yeast extract, the amount of yeast extract may be 0.05% (w / v) to 1.05% (w / v) relative to the entire fermentation broth. When the addition amount of the yeast extract is less than 0.05% (w / v) can not exhibit the effect of increasing the acidity, and when the addition amount of the yeast extract is more than 1.05% (w / v) acidity despite the addition of the yeast extract The increase in acidity is very slow due to the increase in resistance, which may be economically undesirable.

상기 첨가되는 성분이 옥수수 침지액인 경우에는 옥수수 침지액의 양은 상기 발효 대상액 전체 대비 0.05%(v/v) 내지 0.65%(v/v), 바람직하게는 0.1%(v/v) 내지 0.25%(v/v)일 수 있다. 상기 옥수수 침지액의 첨가량이 0.05%(v/v) 미만인 경우에는 산도 증가의 효과를 나타낼 수 없고, 상기 옥수수 침지액의 첨가량이 0.65%(v/v) 초과인 경우에는 옥수수 침지액의 첨가에도 불구하고 산도 증가에 따른 저항작용으로 산도의 증가가 매우 둔화되므로 경제적으로 바람직하지 아니할 수 있다. 또한, 산의 생성이란 측면과 맛 및 색과 관련된 전체적인 풍미를 고려하면 0.1%(v/v) 내지 0.25%(v/v)인 것이 바람직하다.When the added ingredient is corn steep liquor, the amount of corn steep liquor is 0.05% (v / v) to 0.65% (v / v), preferably 0.1% (v / v) to 0.25, based on the total fermentation broth. may be% (v / v). When the addition amount of the corn steep liquor is less than 0.05% (v / v) can not exhibit the effect of increasing the acidity, and when the addition amount of the corn steep liquor is more than 0.65% (v / v) also added to the corn steep liquor Nevertheless, the increase in acidity is very slow due to the resistance action due to the increase in acidity, which may not be economically desirable. In addition, the production of acid is preferably 0.1% (v / v) to 0.25% (v / v) in consideration of the overall flavor associated with the side, taste and color.

상기 양파 발효 음료 제조방법은 상기 양파 발효액을 제조하는 단계에 추가로 양파 발효액에 사과즙, 베타-사이클로덱스트린 및 사과향으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 첨가하고 혼합하는 단계 및/또는 양파 발효액을 희석하는 단계를 더욱 포함할 수 있다.The onion fermentation beverage manufacturing method is in addition to the step of preparing the onion fermentation broth in addition to and mixing the onion fermentation broth with at least one selected from the group consisting of apple juice, beta-cyclodextrin and apple flavor and / or diluting the onion fermentation broth It may further comprise a step.

상기 양파 발효액에 사과즙, 베타-사이클로덱스트린 및 사과향으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 첨가하고 혼합하는 단계는 바람직하게는 상기 양파 발효액에 사과즙, 베타-사이클로덱스트린 및 사과향으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 첨가하고, 과당 및 올리고당으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 더 첨가하고 혼합하는 단계 또는 사과즙, 과당, 베타-사이클로덱스트린, 올리고당 및 사과향을 첨가하고 혼합하는 단계일 수 있다.Adding and mixing the at least one selected from the group consisting of apple juice, beta-cyclodextrin and apple flavor to the onion fermentation broth is preferably at least one selected from the group consisting of apple juice, beta-cyclodextrin and apple flavor to the onion fermentation broth. And adding and mixing one or more selected from the group consisting of fructose and oligosaccharide, or adding and mixing apple juice, fructose, beta-cyclodextrin, oligosaccharide and apple flavor.

상기 사과즙, 과당, 베타-사이클로덱스트린, 올리고당 및 사과향을 첨가하고 혼합하는 단계는 상기 발효액의 관능성 향상과 관련하여 상기 재료를 조합하여 첨가할 수 있다.The step of adding and mixing the apple juice, fructose, beta-cyclodextrin, oligosaccharide and apple flavor may be added in combination with the ingredients in connection with the functional improvement of the fermentation broth.

일 예로, 양파 발효액의 희석 및 첨가재료를 첨가하여 제조한 최종 양파 발효 음료의 구성성분의 함량은 중량을 기준으로, 양파 발효액 82.5 중량비 내지 87.5 중량비, 사과즙 9 중량비 내지 11 중량비, 과당 1.5 중량비 내지 2.5 중량비, 베타-사이클로덱스트린 1.5 중량비 내지 2.5 중량비, 올리고당 0.8 중량비 내지 1.2 중량비 및 사과향 0.25 중량비 내지 0.35 중량비일 수 있고, 바람직하게는 양파 발효액 84 중량비 내지 86 중량비, 사과즙 9 중량비 내지 11 중량비, 과당 1.5 중량비 내지 2.5 중량비, 베타-사이클로덱스트린 1.5 중량비 내지 2.5 중량비, 올리고당 0.9 중량비 내지 1.1 중량비 및 사과향 0.27 중량비 내지 0.32 중량비일 수 있다.For example, the content of the components of the final onion fermented beverage prepared by diluting the onion fermentation broth and adding the additive material is 82.5 to 87.5 weight ratio of onion fermentation broth, 9 to 11 weight ratio of apple juice, 1.5 to 2.5 weight fructose, based on weight. Weight ratio, beta-cyclodextrin 1.5 weight ratio to 2.5 weight ratio, oligosaccharide 0.8 weight ratio to 1.2 weight ratio and apple flavor 0.25 weight ratio to 0.35 weight ratio, preferably 84 to 86 weight ratio of onion fermentation broth, 9 to 11 weight ratio of apple juice, 1.5 weight ratio of fructose To 2.5 weight ratio, beta-cyclodextrin 1.5 weight ratio to 2.5 weight ratio, oligosaccharide 0.9 weight ratio to 1.1 weight ratio and apple flavor 0.27 weight ratio to 0.32 weight ratio.

상기 양파 발효액의 희석은 상기 양파 발효액에 정제수를 첨가하고 혼합하는 방법으로 수행할 수 잇으며, 발효액의 관능성 향상 및 발효액의 기능성 유지란 차원에서 상기 정제수를 중량비를 기준으로 상기 양파 발효액의 10 중량비 내지 200 중량비, 바람직하게는 50 중량비 내지 150 중량비 첨가할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.Dilution of the onion fermentation broth may be performed by adding purified water to the onion fermentation broth and mixing the mixture, and 10 wt% of the onion fermentation broth based on the weight ratio of the purified water in order to improve the functionality of the fermentation broth and maintain the functionality of the fermentation broth. To 200 weight ratio, preferably 50 to 150 weight ratio may be added, but is not limited thereto.

상기 양파 발효 음료 제조방법은 상기 발효 과정을 수행한 후, 추가로 생성된 불용성 고형물을 제거하여, 최종제품의 품질을 향상시키기 위해 여과지나 여과포 또는 부직포를 이용하여 여과하는 공정을 추가로 수행할 수 있다.The onion fermentation beverage manufacturing method may be performed after the fermentation process, to further remove the insoluble solids generated, to further filter the filter using filter paper or filter cloth or non-woven fabric to improve the quality of the final product. have.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 양파 발효 음료에 관한 것이다.The present invention also relates to an onion fermented beverage prepared by the production method of the present invention.

본 발명에 따른 양파 발효 음료는 다양한 미네랄과 유기산을 포함하고 있어 영양학적으로 우수할 뿐만 아니라, 항암활성 및 혈전생성 억제능 등 다양한 생리활성을 유지하고 있어, 고기능성이 인정된다.The onion fermented beverage according to the present invention contains various minerals and organic acids and is not only nutritionally superior, but also maintains various physiological activities such as anticancer activity and antithrombotic activity, and is highly functional.

특히, 기존 초산 균주를 이용한 제조방법에 의하거나 본 발명의 균주의 최적 조건을 고려하지 않고 양파 음료를 제조하는 경우, 산도(acidity)가 식품의약품안전청의 기준에서 요구하는 양조 식초의 기준인 4%의 산도 미만인 반면, 상기 본 발명의 균주를 이용하는 본 발명의 제조방법으로 양파 음료를 제조하는 경우 4%의 산도 이상의 발효 음료를 제조할 수 있다.In particular, when preparing an onion beverage by using a manufacturing method using an existing acetic acid strain or without considering the optimum conditions of the strain of the present invention, acidity (acidity) is 4% which is the standard of brewing vinegar required by the Food and Drug Administration standard While less than the acidity of, when producing an onion beverage by the production method of the present invention using the strain of the present invention can produce a fermented beverage of more than 4% acidity.

따라서, 본 발명의 제조방법에 의하면 양조 식초를 제조할 수 있으므로 본 발명의 제조방법은 양조 식초를 제조하기 위한 방법으로 응용될 수 있다.Therefore, since the brewing vinegar can be manufactured according to the manufacturing method of the present invention, the manufacturing method of the present invention can be applied as a method for manufacturing the brewing vinegar.

본 발명의 제조방법에 의하면 4%의 산도 이상의 양조 식초, 양조 식초를 이용하여 제조된 식초 음료, 4%의 산도 미만의 발효 음료 등 다양한 양파 발효 음료를 제조할 수 있으므로, 상기 제조방법은 요구되는 최종 음료의 종류에 따라 적절한 조건을 이용하여 산도를 조절함으로써 다양한 음료를 제조할 수 있도록 응용될 수 있다.According to the production method of the present invention, since it is possible to produce a variety of onion fermented beverages, such as brewed vinegar of 4% or more acidity, vinegar drinks prepared using brewed vinegar, fermented beverages of less than 4% acidity, the production method is required It can be applied to produce a variety of beverages by adjusting the acidity using appropriate conditions depending on the type of the final beverage.

이상 살펴본 바와 같이, 본 발명에 따른 아세토박터 트로피칼리스 NO. 22(Acetobacter tropicalis NO. 22)를 이용한 양파 발효 음료의 제조방법에 의해 제조된 양파음료는 상기 아세토박터 트로피칼리스 NO. 22에 의해 항암활성 및 혈전생성 억제능과 같은 기능성이 개선되었을 뿐만 아니라, 상기 방법은 아세토박터 트로피칼리스 NO. 22의 최적 산 생성 조건 및 생육 조건을 이용한 것이므로 식품의약품안전청의 기준에서 요구하는 양조 식초의 기준인 4%의 산도 이상 발효액을 효율적으로 단기간에 제조할 수 있어 경제적으로 유리하며, 사과 향미, 양파 향미, 단맛 및 전반적인 기호도를 고려하여 첨가물을 첨가함으로써 기호도가 개선된 양파 발효 음료를 제조할 수 있으므로, 본 발명의 방법은 양파 식초 및 양파를 이용한 고기능성 음료의 제조를 포함한 양파와 관련된 다양한 제품의 생산에 이용될 수 있을 뿐만 아니라 국내에서 생산되는 농산물을 이용한 건강식품시장의 활성화와 우리나라 농산물의 새로운 수요 창출 및 고부가가치화를 유도한다는 점에서 산업적 이용가치가 매우 크다할 것이다.As described above, the acetobacter tropicalis NO. Onion drink prepared by the method for preparing an onion fermented beverage using Actetobacter tropicalis NO. 22 may be prepared using the acetobacter tropicalis NO. 22 not only improved functionality such as anticancer activity and antithrombotic activity, but also the method described above. Since it uses the optimum acid production condition and growth condition of 22, it is economically advantageous because it can efficiently produce fermentation broth of more than 4% acidity, which is the standard of vinegar, which is required by the Korea Food and Drug Administration. Since the onion fermentation drink with improved taste can be prepared by adding an additive in consideration of sweetness, overall taste, and the method of the present invention, the method of the present invention produces various products related to onions, including the production of high functional drinks using onion vinegar and onions. In addition, the industrial use value will be very high in that it will activate the health food market using domestically produced agricultural products, create new demand for Korean agricultural products, and induce high added value.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 초기 에탄올농도에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22의 배양배지의 산도변화를 나타내는 그래프이다. 상기 도 3에서 *는 초기 에탄올 농도가 3%인 것을 의미하고, ●는 초기 에탄올 농도가 4%인 것을 의미하며, ▲는 초기 에탄올 농도가 5%인 것을 의미하고, ◆는 초기 에탄올 농도가 6%인 것을 의미하며, ■는 초기 에탄올 농도가 7%인 것을 의미한다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22를 이용하여 양파 착즙액을 발효시켜 발효액을 제조함에 있어서, 초기 초산농도가 미치는 영향을 나타낸 것으로, 상기 도 2a는 배양기간에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22의 생육도를 나타낸 그래프이고, 상기 도 2b는 발효기간에 따른 발효액의 산도 변화를 나타낸 그래프로, ● 및 ○는 초기 초산농도가 0%인 것을 의미하고, ◆ 및 ◇는 초기 초산농도가 1%인 것을 의미하며, ▲ 및 △는 초기 초산농도가 2%인 것을 의미하고, ■ 및 □는 초기 초산농도가 3%인 것을 의미하며, *는 초기 초산농도가 4%인 것을 의미한다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22를 이용하여 양파 착즙액을 발효시켜 발효액을 제조함에 있어서, 초기 글루코스(glucose) 농도가 미치는 영향을 나타낸 것으로, 상기 도 3a는 초기 글루코스 농도 별 배양기간에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22의 생육도를 나타낸 그래프이고, 상기 도 3b는 초기 글루코스 농도 별 발효기간에 따른 발효액의 산도 변화를 나타낸 그래프로, 도면에 표시된 수치는 글루코스 농도(w/v)를 의미한다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22를 이용하여 양파 착즙액을 발효시켜 발효액을 제조함에 있어서, 공기가 통하지 않는 혐기조건(flask) 및 통기가 되는 통기조건(fermentor)에서 균주의 생육 및 산 생성 정도를 비교한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22를 이용하여 양파 착즙액을 발효시켜 발효액을 제조함에 있어서, 효모 추출물을 이용한 유가식배양에 의한 효과를 확인하기 위한 그래프로, 숫자 1은 배양 중간에 4% 에탄올을 첨가한 경우이고, 숫자 2는 2% 에탄올 및 1% 그루코스를 첨가한 경우이며, 숫자 3은 2% 에탄올, 1% 글루코스 및 0.05% 효모 추출물(yeast extract)을 첨가한 경우이고, 숫자 4는 2% 에탄올, 1% 글루코스 및 0.5% 효모 추출물을 첨가한 경우이며, 숫자 5는 2% 에탄올 및 0.5% 효모 추출물을 첨가한 경우를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis) No. 22를 이용하여 양파 착즙액을 발효시켜 발효액을 제조함에 있어서, 옥수수 침지액(corn steep liquor)을 이용한 유가식배양에 의한 효과를 확인하기 위한 그래프로, 숫자 1은 배양 중간에 2% 에탄올 및 0.05% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이고, 숫자 2는 1% 에탄올 및 0.2% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이며, 숫자 3은 1% 에탄올 및 0.2% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이고, 숫자 4는 1% 에탄올 및 0.2% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이고, 숫자 5는 1% 에탄올 및 0.15% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이며, 숫자 6은 1% 에탄올 및 0.3% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이고, 숫자 7은 1% 에탄올 및 0.4% 옥수수 침지액을 첨가한 경우이다.
1 is acetobacter tropicalis according to the initial ethanol concentration according to an embodiment of the present invention ( Acetobacter tropicalis ) No. 22 is a graph showing the acidity change of the culture medium. In FIG. 3, * means an initial ethanol concentration of 3%, and ● means an initial ethanol concentration of 4%, ▲ means an initial ethanol concentration of 5%, ◆ indicates an initial ethanol concentration of 6 % Means, ■ means that the initial ethanol concentration is 7%.
Figure 2 is an Acetobacter tropicalis No. according to an embodiment of the present invention. In the fermentation of onion juice using 22 to prepare a fermentation broth, the effect of the initial acetic acid concentration was shown, Figure 2a shows the acetobacter Tropicalis ( Actobacter) according to the culture period tropicalis ) No. 22 is a graph showing the growth rate of the above, Figure 2b is a graph showing the acidity change of the fermentation broth according to the fermentation period, ● and ○ means the initial acetic acid concentration is 0%, ◆ and ◇ is the initial acetic acid concentration 1 % And ▲ and △ means the initial acetic acid concentration is 2%, ■ and □ means the initial acetic acid concentration is 3%, * means the initial acetic acid concentration is 4%.
Figure 3 is Acetobacter tropicalis No. according to an embodiment of the present invention. In the fermentation of onion juice using 22 to prepare a fermentation broth, it shows the effect of the initial glucose (glucose) concentration, Figure 3a is acetobacter tropicalis ( Acetobacter tropicalis ) according to the culture period for each initial glucose concentration No . Figure 22 is a graph showing the growth degree, Figure 3b is a graph showing the acidity change of the fermentation broth according to the fermentation period for each initial glucose concentration, the numerical value shown in the figure means the glucose concentration (w / v).
Figure 4 is Acetobacter tropicalis No. according to an embodiment of the present invention. In the fermentation of the onion juice using 22 to prepare a fermentation broth, it is a graph comparing the growth and acid production of the strain in the anaerobic conditions (flask) and aeration (fermentor) through the air.
FIG. 5 shows Acetobacter tropicalis No. 1 according to one embodiment of the present invention. FIG. In the fermentation of onion juice using 22 to prepare a fermentation broth, a graph for confirming the effect of fed-batch culture using yeast extract, the number 1 is the case of adding 4% ethanol in the middle of the culture, the number 2 Is when 2% ethanol and 1% glucose are added, the number 3 is when 2% ethanol, 1% glucose and 0.05% yeast extract are added, and the number 4 is 2% ethanol, 1% glucose And 0.5% yeast extract was added, and the number 5 shows the case where 2% ethanol and 0.5% yeast extract were added.
Figure 6 is Acetobacter tropicalis No. according to an embodiment of the present invention. In the fermentation of onion juice using 22 to prepare a fermentation broth, a graph for confirming the effect of fed-batch culture with corn steep liquor, the number 1 is 2% ethanol and 0.05 in the middle of the culture % Corn steep liquor is added, number 2 is the addition of 1% ethanol and 0.2% corn steep liquor, number 3 is the addition of 1% ethanol and 0.2% corn steep liquor, and number 4 is 1 % Ethanol and 0.2% corn steep liquor were added, number 5 is for 1% ethanol and 0.15% corn steep liquor, number 6 is for 1% ethanol and 0.3% corn steep liquor, Figure 7 shows the addition of 1% ethanol and 0.4% corn steep liquor.

이하 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위하여 실시예를 제시한다. 그러나, 하기 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 예시한 것일 뿐, 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, examples will be given to more specifically describe the present invention. However, the following examples are merely illustrated to help the understanding of the present invention, and may be modified in various forms, and the scope of the present invention is not limited to the following examples.

<< 실시예Example 1> 초산균주의 분리 및 동정 1> Isolation and Identification of Acetic Acid Strains

낙과 복숭아를 밀폐용기 안에 넣고 30℃에서 5일간 보관하면서 신 냄새가 나는 시기에 낙과 복숭아 액을 취하여 10진 희석법(serial dilution)에 의해 희석하여 CaCO3가 1% 함유되어 있는 YCE 아가배지(glucose 3g, beef extract 1g, ethanol 4 ml, CaCO3 1g, agar 1.5g 및 증류수 88.3 ml)에 도말하였다. 상기 도말한 아가배지(agar plate)는 30℃에서 3일간 배양한 다음, 투명환을 형성한 균주를 분리하여, 총 23주의 초산균을 분리하고, 이 중 생육도와 초산생성능이 가장 우수하여 양파의 초산 발효능이 우수할 것으로 예상되는, No 22.의 균주를 선택하였다.Put the fallen and peach in an airtight container at 30 ℃ for 5 days, take the fallen and peach liquid at the time of sour smell, dilute by serial dilution, and contain 1% CaCO 3 (glucose 3g). , beef extract 1g, ethanol 4 ml, CaCO 3 1g, agar 1.5g and distilled water 88.3 ml). The smeared agar plate (agar plate) is incubated for 3 days at 30 ℃, and then isolate the strain forming a transparent ring, a total of 23 weeks of acetic acid isolates, of which the best growth and acetic acid production of the acetic acid of onion No 22. strains were selected, which are expected to have good fermentation capacity.

상기 균주에 대하여 형태학적 분석, 보다 구체적으로 광학현미경을 통한 형태의 분석, 그람 염색(Gram stain kit BD Co., USA), 운동성 시험, 카탈라아제 시험(Biomrieux Co., France), 포자 염색, decarboxylase 시험, MR 시험, VP 시험, oxidase 시험, indole 시험 및 gelatin 시험을 수행하였고, 그 결과를 표 1에 나타내었다.Morphological analysis of the strain, more specifically, analysis of the form through an optical microscope, Gram stain kit (Gram stain kit BD Co., USA), mobility test, catalase test (Biomrieux Co., France), spore staining, decarboxylase test , MR test, VP test, oxidase test, indole test and gelatin test were performed, and the results are shown in Table 1.

특 성Characteristics No.22No.22 SourceSource 복숭아peach 형태(Morphology, Shape)Morphology, Shape 간균Bacillus 그람염색(Gram-stain) 여부Gram-stain 그람음성Gram voice 운동성 시험Motility test -- 카탈라아제 시험(catalase test)Catalase test ++ 포자염색Spore Dyeing -- 디카복시라아제 시험(decarboxylase test)Decarboxylase test -- MR 시험MR test -- VP 시험VP test -- 옥시다아제 시험(oxidase test)Oxidase test -- 인돌 시험(indole test)Indole test -- 젤라틴 시험(gelatin test)Gelatin test --

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 상기 No 22. 균주는 간균이고, 그람음성이며, 운동성은 없고, 포자염색에서는 음성반응으로 무포자균으로 확인되었다. 또한, 카탈라아제 시험에서 양성 반응을 나타내었다. 또한, decarboxylase test, MR test, VP test, oxidase test, indole test 및 gelatin test에서 모두 음성반응을 나타내어, 잠정적으로 초산균(Acetobacter spp.)의 특성을 지니고 있는 것으로 확인되었다.As shown in Table 1, the No 22 strain was bacillus, was gram-negative, had no motility, and was identified as spore-free by spore staining. In addition, the catalase test showed a positive response. In addition, the decarboxylase test, MR test, VP test, oxidase test, indole test and gelatin test were all negative, confirming that they have the characteristics of acetic acid bacterium ( Acetobacter spp.).

상기 잠정적으로 초산균으로 분리된 No 22. 균주의 분자유전학적 특성에 의한 동정을 위해 16S rRNA 유전자의 염기서열을 결정한 후 분석하였다.The nucleotide sequence of the 16S rRNA gene was determined and analyzed for identification by the molecular genetic characteristics of the No 22.

분석결과, 초산 생성능이 가장 우수한 분리균주 No. 22의 경우 Acetobacter tropicalis LMG 1663 및 Acetobacter tropicalis NRIC 0312 isolate No. 39의 16S rRNA 유전자의 염기서열과 각각 98%의 높은 상동성을 나타내어, 상기 No. 22 균주는 아세토박터 트로피칼리스(Acetobacter tropicalis)로 최종 동정되었다.As a result, the isolated strain No. 1 with the highest acetic acid production capacity was found. Acetobacter tropicalis LMG 1663 and Acetobacter for 22 tropicalis NRIC 0312 isolate No. The sequence of 16S rRNA gene of 39 showed high homology of 98%, respectively. 22 strain is Acetobacter tropicalis ) was finally identified.

상기 아세토박터 트로피칼리스로 최종 동정된 No. 22를 아세토박터 트로피칼리스 No. 22로 명명하였고, 대한민국 서울특별시 서대문구 홍제1동 361-221번지 유림빌딩 2층에 위치한 한국미생물보존센터에 2009년 12월 18일자로 기탁하여, 수탁번호 KFCC 11476P를 부여 받았다.
No. last identified as the Acetobacter Tropicalis. 22 to Acetobacter Tropicalism No. It was named 22 and was deposited on December 18, 2009 at the Korea Microorganism Conservation Center located on the 2nd floor of Yurim Building, 361-221 Hongje 1-dong, Seodaemun-gu, Seoul, Korea, and was given accession number KFCC 11476P.

<< 실시예Example 2> 아세토박터  2> acetobacter 트로피칼리스Tropicalis NoNo . 22의 최적 산 생성 조건 분석. Analysis of 22 Optimal Acid Generation Conditions

2-1 초기 에탄올 농도에 따른 초산 2-1 Acetic acid according to the initial ethanol concentration 생성능Generation

상기 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 GYP 배지(glucose 1.5g, Peptone 0.3g, Yeast extract 0.2g, ethanol 3ml, Acetic acid 1g 및 증류수 94 ml)에 접종한 후, 진탕배양기를 이용하여 160 rpm 및 30℃의 조건으로 3일간 생육시켜 배양액을 제조하였다.Acetobacter Tropicalis No. 22 was inoculated in GYP medium (1.5 g of glucose, 0.3 g of Peptone, 0.2 g of Yeast extract, 3 ml of ethanol, 1 g of Acetic acid and 94 ml of distilled water), and then grown on a shaker incubator for 3 days at 160 rpm and 30 ° C. To prepare a culture solution.

상기 배양액을 최종농도가 3%가 되도록 GYP 배지에 첨가한 후, 2일 간격으로 배양액 10ml를 취하고, 상기 배양액에 에탄올의 농도(v/v)가 3%, 4%, 5% 및 6%가 되도록 에탄올을 첨가한 후, 30℃에서 10일간 배양하였다. 상기 배양에 의한 배양액의 산도를 도 1에 나타내었다. 본 실시예에서 산도란 아세트산을 중화시키기 위한 적정 산도(titratable acidity, %)로 10 ml의 배양액을 중화시키기 위해 사용된 0.1N NaOH(NaOH/kg 당량)의 부피(volume)로 결정된다.After adding the culture solution to the GYP medium so that the final concentration was 3%, 10 ml of the culture solution was taken every two days, and the concentration of ethanol (v / v) in the culture solution was 3%, 4%, 5% and 6%. After ethanol was added, the cells were incubated at 30 ° C. for 10 days. The acidity of the culture solution by the culture is shown in FIG. Acidity in this example is determined by the volume of 0.1N NaOH (NaOH / kg equivalent) used to neutralize 10 ml of the culture with the titratable acidity (%) to neutralize acetic acid.

상기 도 1에 나타낸 바와 같이, 초기 에탄올 농도가 3%(v/v)인 경우에 비하여 초기 에탄올 농도가 4%(v/v)인 경우에 산도가 증가하여, 현저하게 초산 생성능이 증가하는 것이 확인되었다. 한편, 초기 에탄올 농도가 5%(v/v) 및 6%(v/v)인 경우에는 오히려 산도가 낮아지는 것으로 확인되었다. 따라서, 상기 초기 에탄올 농도가 4%(v/v)인 경우가 최적 산 생성 조건인 것으로 확인되었다.
As shown in FIG. 1, the acidity is increased when the initial ethanol concentration is 4% (v / v) compared to the case where the initial ethanol concentration is 3% (v / v), and the acetic acid production ability is significantly increased. Confirmed. On the other hand, when the initial ethanol concentration of 5% (v / v) and 6% (v / v) it was confirmed that the acidity is lower. Therefore, it was confirmed that the optimum acid production conditions when the initial ethanol concentration is 4% (v / v).

2-2 초기 산도에 따른 초산 2-2 acetic acid according to the initial acidity 생성능Generation

상기 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 상기 실시예 2-1의 GYP 배지에 3%의 에탄올을 첨가하여 제조한 배지의 초기산도를 0%, 1%, 2%, 3% 및 4%로 각각 초산을 첨가하여 조절한 배지에 상기 실시예 1-3과 같은 방법으로 균주를 30℃에서 10일간 배양하였다. 상기 배양에 의한 균의 생육결과와 총산을 측정한 결과를 도 2에 나타내었다.Acetobacter Tropicalis No. 22 was added to the medium adjusted by adding acetic acid to 0%, 1%, 2%, 3% and 4% of the initial acidity of the medium prepared by adding 3% ethanol to the GYP medium of Example 2-1, respectively. The strain was incubated at 30 ° C. for 10 days in the same manner as in Example 1-3. The results of the growth and total acid of the bacteria by the culture are shown in Figure 2.

상기 도 2에 나타낸 바와 같이, 초기 산도가 낮을수록 균의 생육이 활발하고, 최종 산 생성정도도 더 높은 것으로 확인되었다. 보다 구체적으로, 도 2a에서 확인된 바와 같이, 초기 산도가 높을수록 균의 생육이 현저하게 감소되는 것이 확인되었다. 또한, 도 2b에서 확인된 바와 같이, 초기 산도가 높을수록 생성되는 총산함량은 민감하게 감소하였고, 배양 7일째까지는 초기산도가 1%일 때 산도가 가장 높았으나, 배양 8일째부터는 초산을 첨가하지 않은 배양군에서 최종 산도가 가장 높게 나타났으며, 10일째를 기준으로 초산을 첨가하지 않은 실험군에서 산도가 가장 높게 나와 산생성 정도가 가장 많은 것으로 확인되었다.As shown in FIG. 2, the lower the initial acidity, the more active the growth of the bacteria, and the higher the final acid production was confirmed. More specifically, as shown in Figure 2a, the higher the initial acidity was confirmed that the growth of the bacteria significantly reduced. In addition, as confirmed in Figure 2b, the higher the initial acidity, the total acid content is sensitively reduced, the acidity was highest when the initial acidity is 1% until the 7th day of culture, but acetic acid is not added from the 8th day of culture The final acidity was highest in the non-cultured group, and the highest acidity was found in the experimental group without adding acetic acid on the 10th day, and the highest acid production was found.

상기 결과로부터 본 발명의 균주를 이용하여 초산을 생성하는 경우, 발효대상 물질에 인위적으로 산을 첨가하지 않는 것이 가장 바람직한 것으로 확인되었다.
From the above results, it was confirmed that when acetic acid is produced using the strain of the present invention, it is most preferable not to artificially add acid to the fermentation target material.

2-3 초기 2-3 initial glucoseglucose 농도에 따른 초산  Acetic acid by concentration 생성능Generation

상기 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 4%(v/v)의 에탄올을 첨가하고 초기 산도를 0으로 조절한 변형된 GYP 배지에 glucose 농도(w/v)를 0%, 0.5%, 1%, 1.5%, 2%, 2.5%, 3%, 6% 및 8%로 각각 glucose를 첨가하여 조절한 배지에 상기 실시예 2-1과 같은 방법으로 균주를 30℃에서 10일간 배양하였다. 상기 배양에 의한 균의 생육결과와 총산을 측정한 결과를 도 3에 나타내었다.Acetobacter Tropicalis No. 22 glucose concentration (w / v) was added to 0%, 0.5%, 1%, 1.5%, 2%, 2.5 in modified GYP medium with 4% (v / v) ethanol and initial acidity adjusted to zero. The strains were cultured at 30 ° C. for 10 days in the same manner as in Example 2-1 in the medium adjusted by adding glucose to%, 3%, 6% and 8%, respectively. 3 shows the results of the growth of the bacteria and the total acid by the culture.

상기 도 3a에 나타낸 바와 같이, 균의 생육 정도와 관련하여, 초기 glucose 농도가 2.0% 내지 3.0%인 경우에만 5일 이전에 균의 성장이 충분히 이루어지고, 이 외의 범위에서는 5일이 경과하여 10일에 이를 때까지 균이 계속해서 성장하는 것으로 확인되었다. 균체의 빠른 증가는 효율적인 발효 특히, 제조공정 상에서 경제적 효과와 직결되는 것이므로, 상기 glucose 농도는 2.0% 내지 3.0%인 것이 바람직한 것으로 확인되었다. 특히, 상기 초기 glucose 농도가 2.5%인 경우에서는 5일 내에 균의 생육이 충분히 이루어질 뿐만 아니라, O.D. 값을 이용한 균체 수에서도 가장 우수한 것으로 확인되었다.As shown in FIG. 3A, in relation to the growth rate of the bacteria, the growth of the bacteria was sufficiently performed before 5 days only when the initial glucose concentration was 2.0% to 3.0%, and in the other ranges, 5 days had elapsed after 10 days. It was found that the bacteria continued to grow until they reached work. Since the rapid increase of the cells is directly related to the economic effect on the efficient fermentation, especially in the manufacturing process, it was confirmed that the glucose concentration is preferably 2.0% to 3.0%. In particular, when the initial glucose concentration is 2.5%, not only the growth of the bacteria is sufficiently made within 5 days, O.D. It was confirmed to be the best in the number of cells using the value.

또한, 상기 도 3b에 나타낸 바와 같이, 균의 생육 정도와 관련하여, 초기 glucose 농도가 2.5% 내지 3.0%인 경우에만 10일 이전에 충분한 산의 생성이 이루어지고, 이 외의 범위에서는 10일이 경과하여 15일에 이를 때까지 균이 계속해서 산을 생성하는 것으로 확인되었다. 균의 산 생성은 초산 발효에 있어서, 발효 진행의 지표가 될 수 있는 것으로 산 생성이 단기간 내에 이루어진다는 점은 초산 발효의 시간이 단축될 수 있다는 것을 의미하므로, 이는 제조공정 상에서 경비 절감과 직접적으로 관련이 있다. 따라서, 상기 glucose 농도는 2.5% 내지 3.0%인 것이 바람직한 것으로 확인되었다. 특히, 상기 초기 glucose 농도가 2.5%인 경우에서는 8일 내에 충분한 산이 생성될 뿐만 아니라, 가장 산 생성이 우수했던 최고점을 기준으로 glucose가 첨가된 실험군 중에서는 가장 높은 산 생성능을 나타내어 발효조건으로 가장 우수한 것으로 확인되었다.In addition, as shown in FIG. 3b, in relation to the growth of the bacteria, sufficient acid is produced before 10 days only when the initial glucose concentration is 2.5% to 3.0%, and in the other range, 10 days have elapsed. The bacteria continued to produce acid until they reached day 15. Acid production of bacteria can be an indicator of fermentation progress in acetic acid fermentation. The fact that acid production takes place in a short period of time means that the time for acetic acid fermentation can be shortened. It is related. Therefore, it was confirmed that the glucose concentration is preferably 2.5% to 3.0%. In particular, when the initial glucose concentration is 2.5%, not only enough acid is produced within 8 days, but also the highest acid production ability among the experimental groups to which glucose was added based on the highest peak of acid production was the best as fermentation conditions. It was confirmed.

상기 결과로부터 본 발명의 균주를 이용하여 초산을 생성하는 경우, 발효대상 물질에 glucose 농도를 2.0% 내지 3.0%, 바람직하게는 2.5% 내지 3.0%, 더욱 바람직하게는 2.5%로 조절하여야 최적 조건에서 초산을 생성할 수 있는 것으로 확인되었다.
When producing acetic acid using the strain of the present invention from the above results, the glucose concentration in the fermentation target material should be adjusted to 2.0% to 3.0%, preferably 2.5% to 3.0%, more preferably 2.5% in the optimum conditions It was found that acetic acid could be produced.

2-4 2-4 통기여부에Aeration 따른 초산  Acetic acid 생성능Generation

양파의 껍질을 제거한 후, 세척하고 잘게 절단하여 녹즙기로 갈아 즙을 내어 양파즙을 제조한 후, 110℃에서 10분간 열처리를 하였다. 상기 열처리한 양파즙을 10,000 x g의 조건으로 30분간 원심분리하여 불용성물질을 제거하여, 양파 착즙액을 제조하였다.After removing the peel of the onion, washed and cut finely to grind juice with a juicer to prepare the onion juice, heat treatment at 110 ℃ 10 minutes. The heat-treated onion juice was centrifuged at 10,000 x g for 30 minutes to remove insoluble materials, thereby preparing onion juice.

500mL Ernmeyer 삼각플라스크에 상기 양파 착즙액을 150mL를 넣고 상기 양파 착즙액에 상기 실시예 2-1와 같은 방법으로 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 접종한 후, 삼각플라스크의 통기를 제한한 채로 삼각플라스크를 교반하면서 배양하였다.150 mL of the onion juice was added to a 500 mL Ernmeyer Erlenmeyer flask, and Acetobacter tropicalis No. 1 was added to the onion juice in the same manner as in Example 2-1. After inoculating 22, the Erlenmeyer flask was incubated with stirring while restricting the aeration of the Erlenmeyer flask.

한편, 발효조(fermentor) 내에 상기 양파 착즙액을 150mL를 넣고 상기 삼각플라스크와 동일한 조건으로 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 접종하고 배양하였다. 다만, 발효조에서는 1vvm의 통기 조건으로 배양하였다.On the other hand, 150 mL of the onion juice solution in a fermenter (fermentor) and put into acetobacter Tropical No. 22 was inoculated and incubated. However, the fermenter was cultured under aeration conditions of 1vvm.

상기 양파 착즙액의 에탄올 농도는 모두 4%(v/v)로 조절하였다.Ethanol concentration of the onion juice was adjusted to 4% (v / v).

상기 통기조건을 달리한 배양 결과, 배양에 의한 균의 생육결과와 총산을 측정한 결과를 도 4에 나타내었다.As a result of culturing with different aeration conditions, the results of the growth and total acid of the bacteria by the culture are shown in FIG. 4.

상기 도 4에 나타낸 바와 같이, 통기 조건에서 발효를 수행하는 경우 균의 생육 및 산의 생성 즉, 식초의 생성이란 측면에서 현저하게 우수한 것을 확인하였다. 특히, 산도는 통기 조건에서 배양 2일 만에 약 3.3%에 해당하는 최고산도에 해당하여 특성을 나타냄을 볼 수 있었다. As shown in FIG. 4, it was confirmed that when fermentation was performed under aeration conditions, the growth of bacteria and the production of acid, that is, the production of vinegar were remarkably excellent. In particular, the acidity was found to be characterized by the highest acidity corresponding to about 3.3% in two days of culture in aeration conditions.

상기 결과로부터 본 발명의 균주를 이용하여 초산을 생성하는 경우, 발효 조건을 통기 조건으로 하여, 발효를 수행하는 것이 발효 기간 단축 및 초산 생성 효율이란 점에서 바람직한 것으로 확인되었다.
From the above results, it was confirmed that when acetic acid is produced using the strain of the present invention, fermentation is carried out using the fermentation conditions as aeration conditions, in terms of shortening the fermentation period and the efficiency of acetic acid production.

2-5 효모 추출물을 첨가하며 2-5 yeast extract is added 유가식Oil price formula 배양을 진행한 경우의 초산  Acetic acid when incubating 생성능Generation

상기 실시예 2-4의 방법으로 양파 착즙액을 제조하였다.Onion juice was prepared by the method of Example 2-4.

상기 양파 착즙액을 삼각플라스크에서 싸카로마이세스 세르비지에 KCCM 7913(Saccharomyces cerevisiae)로 에탄올 농도가 4%가 될 때까지 진탕발효를 수행하였다.The onion juice was shaken and fermented to a saccharomyces cerevisiae in a Erlenmeyer flask with KCCM 7913 ( Saccharomyces cerevisiae ) until the ethanol concentration reached 4%.

상기 양파 착즙액 전체를 기준으로 에탄올 농도가 4%가 되었을 때, 발효를 중단하고, 무균적으로 원심분리하여 효모를 제거한 후, 상기 양파 착즙액을 살균한 발효조로 옮겼다. 상기 발효조의 양파 착즙액에 상기 실시예 2-1와 같은 방법으로 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 접종한 후, 교반속도 600 rpm 및 1 vvm의 통기 조건에서 배양하였다. 상기 배양에 의한 균의 생육결과와 총산을 측정한 결과를 도 5에 나타내었다.When the ethanol concentration was 4% based on the onion juice as a whole, the fermentation was stopped, and aseptic centrifugation to remove the yeast, and then the onion juice was transferred to the sterilized fermentation tank. In the onion juice of the fermenter in the same manner as in Example 2-1, acetobacter tropicalis No. After the inoculation of 22, the culture was carried out under aeration conditions at agitation speed of 600 rpm and 1 vvm. 5 shows the results of the growth of the bacteria and the total acid by the culture.

상기 도 5에 나타낸 바와 같이, 배양 4일 만에 균체의 증식이 완료되었으며, 배양 2일 만에 최대 산도가 3.4%까지 도달하였다. 상기 실시예 2-4에서 확인된 바와 같이, 통기 조건에서의 발효 효과가 발효기간의 단축 및 초산 생성 효율이란 측면에서 현저하게 우수한 것으로 확인되었다. 상기 생산된 산도에 대한 초기 알코올농도에 대한 발효효율은 65.18%로 계산되었다. As shown in FIG. 5, the growth of the cells was completed in 4 days of culture, and the maximum acidity reached 3.4% in 2 days of culture. As confirmed in Example 2-4, it was confirmed that the fermentation effect in aeration conditions is remarkably excellent in terms of shortening the fermentation period and the efficiency of acetic acid production. Fermentation efficiency for the initial alcohol concentration for the acidity produced was calculated to be 65.18%.

한편, 식품의약안전청 기준에 의하면, 양조식초의 경우 산도 4% 이상을 충족시켜야 하므로, 본 발명의 균주에 의한 양조식초의 생산을 위해 효모 추출액을 이용한 유가식 배양법(fed-batch culture)에 의한 실험결과를 측정하였다.On the other hand, according to the Food and Drug Administration standard, in the case of brewed vinegar must meet the acidity of more than 4%, the experiment by fed-batch culture using yeast extract for the production of brewed vinegar by the strain of the present invention The results were measured.

상기 실험은 유가식 배양법에 의한 추가적인 산도 증가 조건을 확인하기 위한 것이므로, 본 발명의 균주에 의한 배양액의 산도가 더 이상 증가하지 않는 시점인 배양 4일 이후 시점부터 수행하였다.Since the experiment is to confirm the additional acidity increase condition by the fed-batch culture method, the acidity of the culture solution by the strain of the present invention was carried out from the time point 4 days after the culture is no longer increased.

균 접종 후, 4일이 경과된 시점에 에탄올만을 4% (v/v)첨가한 경우(도 5의 화살표 숫자 1)에 에탄올 함량은 감소하였으나, 산도는 변화하지 않아, 상기 조건에서는 아세토박터 트로피칼리스 No. 22는 에탄올은 소비하나 산은 생성하지 않는 것으로 확인되었다. 또한, 균 접종 후 6일이 경과된 시점에 에탄올 2%(v/v) 및 글루코스 1%(v/v)를 첨가한 경우(도 5의 화살표 숫자 2)에도 산도의 증감 변화가 거의 없는 것으로 확인되었다.After 4 days of inoculation, when only 4% (v / v) of ethanol was added (arrow number 1 in FIG. 5), the ethanol content was decreased, but the acidity did not change, and the acetobacter trophy Callis No. 22 was found to consume ethanol but not acid. In addition, even when the ethanol 2% (v / v) and glucose 1% (v / v) was added 6 days after the inoculation (Fig. 5 arrow number 2) there is almost no change in acidity change Confirmed.

균 접종 후 7일이 경과한 시점에 에탄올 2%(v/v), 글루코스 1%(v/v) 및 효모 추출물 0.05%(w/v)를 첨가한 경우(도 5의 화살표 숫자 3) 산도가 3.67%에서 4.31%로 증가하는 것이 확인되었다. 이에 따라, 균 접종 후 8일이 경과한 시점에 에탄올 2%(v/v), 글루코스 1%(v/v) 및 효모 추출물 0.5%(w/v)를 첨가(도 5의 화살표 숫자 4)하고, 균 접종 후 9일이 경과한 시점에 에탄올 2%(v/v) 및 효모 추출물 0.5%(w/v)를 첨가(도 5의 화살표 숫자 5)함에 따라 최종적으로 균 접종 후 12일이 경과한 시점에서 최종 양파 발효액의 산도가 6.65%까지 상승하였고, 에탄올 함량과 환원당 함량을 통하여 확인한 결과 에탄올 소비 및 당소비도 활발하게 증가된 것으로 확인되었다.When 7 days after inoculation, 2% (v / v) of ethanol, 1% (v / v) of glucose and 0.05% (w / v) of yeast extract were added (arrow number 3 in FIG. 5). Was increased from 3.67% to 4.31%. Accordingly, at 8 days after inoculation, 2% (v / v) of ethanol, 1% (v / v) of glucose and 0.5% (w / v) of yeast extract were added (arrow number 4 in FIG. 5). After 9 days of inoculation, ethanol 2% (v / v) and yeast extract 0.5% (w / v) were added (arrow number 5 in FIG. 5), and finally 12 days after inoculation. As time passed, the acidity of the final onion fermentation broth increased to 6.65%, and the ethanol consumption and sugar consumption were found to increase actively as a result of ethanol content and reducing sugar content.

상기 결과로부터, 효모 추출물(yeast extract)을 이용한 유가식배양을 통하여 아세토박터 트로피칼리스 No. 22의 산 생성능을 개선시킴으로써 양파 착즙액으로부터 양파 발효 음료뿐만 아니라 양파 발효 양조 식초의 제조도 가능할 수 있는 공정을 확립하였다. 구체적으로, 산도와 균체의 수가 거의 최고치에 도달하는 시점인 균 접종 후 4일이 경과된 시점 이후에 탄소원인 에탄올 및 글루코스를 충분히 공급 하는 것만으로는 산도의 상승 즉, 산의 생성을 개선하는 것에는 한계가 있으며, 균이 충분히 생육되는 시점인 접종 후 4일이 경과된 시점부터는 효모 추출물의 공급이 요구되는 것으로 확인되었다.
From the results, acetobacter tropicalis No. 1 through fed-batch culture using yeast extract (yeast extract). Improving the acid production capacity of 22 established a process that could allow the production of onion fermented brewed vinegar from onion juice as well as onion fermented beverages. Specifically, by supplying ethanol and glucose, which are carbon sources, after 4 days of inoculation, which is the time when the number of acidity and the number of cells reaches an almost highest level, the increase in acidity, that is, the production of acid, is improved. There is a limit, and 4 days after the inoculation, which is the time when the bacteria are sufficiently grown, it was confirmed that the supply of the yeast extract is required.

2-6 옥수수 2-6 corn 침지액을Immersion liquid 첨가하며  Adding 유가식Oil price formula 배양을 진행한 경우의 초산  Acetic acid when incubating 생성능Generation

상기 실시예 2-5의 결과를 바탕으로 옥수수 침지액을 첨가하며 유가식 배양을 진행한 경우에 초산 생성능을 확인하였다. 초산 생성능을 확인하기 위한 양파 착즙액은 상기 실시예 2-4의 방법으로 제조된 양파 착즙액을 사용하였다.Based on the results of Example 2-5, the addition of corn steep liquor was confirmed the ability to produce acetic acid when fed-batch culture. Onion juice to check the ability to produce acetic acid was used onion juice prepared in the method of Example 2-4.

상기 양파 착즙액에 전체 양파 착즙액을 기준으로 에탄올 농도가 4%(v/v)가 되도록 에탄올을 첨가한 후, 삼각플라스크에서 배양한 실시예 1의 아세토박터 트로피칼리스 No. 22를 실시예 2-1의 방법으로 접종하여 실시예 2-5의 방법으로 배양하였다. 상기 배양에 의한 균의 생육결과와 총산을 측정한 결과를 도 6에 나타내었다.After adding ethanol such that the ethanol concentration is 4% (v / v) based on the whole onion juice solution, the acetobacter tropicalis No. 22 was inoculated by the method of Example 2-1 and cultured by the method of Example 2-5. 6 shows the results of the growth of the bacteria and the total acid by the culture.

상기 도 6에 나타낸 바와 같이, 균 접종 후, 3일이 경과된 시점에 에탄올 2%(v/v) 및 0.05% 옥수수 침지액을 첨가한 경우(도 6의 화살표 숫자 1)에 산도의 증가 경향이 확인되지 아니하고, 배양 5일째가 되서 산도가 4.1%로 증가하여, 상기 조건에서는 아세토박터 트로피칼리스 No. 22는 에탄올은 소비하나 산 생성율은 높지 않는 것으로 확인되었다. 또한, 균 접종 후 5일 및 6일이 경과된 시점에 에탄올 1%(v/v) 및 옥수수 침지액 0.2%(v/v)를 각각 첨가한 경우(도 6의 화살표 숫자 2 및 3), 산도는 계속적으로 증가하였고, 균 접종 후 7일 및 8일이 경과된 시점에 에탄올 1%(v/v) 및 옥수수 침지액 0.2%(v/v)와 1%(v/v) 및 옥수수 침지액 0.15%(v/v)를 각각 첨가한 경우(도 6의 화살표 숫자 2 및 3), 산도는 계속적으로 증가하여 배양 8일째에는 산도가 약 5.6%로 확인되었다.As shown in FIG. 6, the acidity tendency was increased when 2% (v / v) of ethanol and 0.05% corn steep liquor were added after 3 days of inoculation (arrow number 1 in FIG. 6). This was not confirmed, and the acidity was increased to 4.1% by the 5th day of culture, and in the above conditions, Acetobacter Tropicalis No. 22 was found to consume ethanol but not high acid production rate. In addition, when 5 and 6 days after inoculation, 1% (v / v) of ethanol and 0.2% (v / v) of corn steep liquor were added (arrow numbers 2 and 3 in FIG. 6), Acidity continued to increase, and at 7 and 8 days post inoculation, 1% (v / v) ethanol and 0.2% (v / v) and 1% (v / v) and corn steep When 0.15% (v / v) of the liquid was added (arrow numbers 2 and 3 in FIG. 6), respectively, the acidity was continuously increased, and the acidity was confirmed to be about 5.6% at 8 days of culture.

상기 결과로부터, 옥수수 침지액(corn steep liquor, CSL)을 이용한 유가식배양을 통하여 아세토박터 트로피칼리스 No. 22의 산 생성능을 개선시킴으로써 양파 착즙액으로부터 양파 발효 음료뿐만 아니라 양파 발효 양조 식초의 제조도 가능할 수 있는 공정을 확립하였다. 다만, 옥수수 침지액의 경우에 전체 조성물 기준으로 0.25%(v/v) 초과로 포함되는 경우에는 옥수수 침지액 특유의 향과 맛으로 인하여, 발효 음료 또는 식초의 풍미가 훼손될 수 있으므로, 상기 옥수수 침지액의 함량은 0.1(v/v) 내지 0.25%(v/v)인 것이 바람직한 것으로 확인되었다.
From the results, acetobacter tropicalis No. 1 through fed-batch culture using corn steep liquor (CSL). Improving the acid production capacity of 22 established a process that could allow the production of onion fermented brewed vinegar from onion juice as well as onion fermented beverages. However, when the corn steep liquor is contained in an amount greater than 0.25% (v / v) based on the total composition, the flavor and flavor of the fermented beverage or vinegar may be impaired due to the unique flavor and taste of the corn steep liquor. It was confirmed that the content of the immersion liquid is preferably 0.1 (v / v) to 0.25% (v / v).

<< 실시예Example 3> 양파 초산발효액의 유기산 조성 분석 3> Analysis of Organic Acid Composition of Onion Acetate Fermentation Solution

양파의 껍질을 제거한 후, 세척하고 잘게 절단하여 녹즙기로 갈아 즙을 내어 양파즙을 제조한 후, 110℃에서 10분간 열처리를 하였다. 상기 열처리한 양파즙을 10,000 x g의 조건으로 30분간 원심분리하여 불용성물질을 제거하여, 양파 착즙액을 제조하였다.After removing the peel of the onion, washed and cut finely to grind juice with a juicer to prepare the onion juice, heat treatment at 110 ℃ 10 minutes. The heat-treated onion juice was centrifuged at 10,000 x g for 30 minutes to remove insoluble materials, thereby preparing onion juice.

상기 양파 착즙액 1,000 ml에 상기 실시예 1의 아세토박터 트로피칼리스 No. 22의 전배양액을 3%(v/v)가 되도록 접종한 후, 교반속도 600 rpm 및 1vvm의 통기 조건으로 10일간 배양하였다. 상기 양파 착즙액의 초산발효액에 대해 유기산분석을 통하여, 상기 아세토박터 트로피칼리스 No. 22의 유기산 생성능을 측정하였다.The acetobacter tropicalis No. 1 of Example 1 was added to 1,000 ml of the onion juice solution. After inoculating 22 of the pre-culture solution to 3% (v / v), and incubated for 10 days at aeration conditions of agitation speed 600 rpm and 1vvm. Acetobacter Tropicalis No. The organic acid producing ability of 22 was measured.

보다 구체적으로 하기 표 2의 조건으로 고성능 액체크로마토그래피(HPLC)를 수행하였다.More specifically, high performance liquid chromatography (HPLC) was performed under the conditions of Table 2 below.

사용기기Used equipment Agilent 1200 sereiesAgilent 1200 sereies 분석 컬럼Analytical column Sep-pak C18(Waters Co.)Sep-pak C18 (Waters Co.) 검출기Detector UV detector(210 nm)UV detector (210 nm) 유속Flow rate 1.0 mL/분1.0 mL / min 시료 부피Sample volume 10 μL10 μL 이동상 Mobile phase 인산(phosphoric acid)으로 pH를 조정한 1% acetonitril에 NaHPO4가 20 mM 포함된 용액A solution containing 20 mM NaHPO 4 in 1% acetonitril adjusted to pH with phosphoric acid

상기 표 2의 조건으로 수행한 고성능 액체크로마토그래피 분석 결과를 발효 전 양파 착즙액의 유기산 함량과 발효 후 양파 발효 음료의 유기산 함량을 비교하여 표 3에 나타내었다. 상기 표 3에서 ND 표시는 해당 유기산이 검출되지 않았음을 의미한다.The results of high performance liquid chromatography analysis performed under the conditions of Table 2 are shown in Table 3 by comparing the organic acid content of the onion juice before fermentation and the organic acid content of the onion fermentation drink after fermentation. In Table 3, ND means that the corresponding organic acid was not detected.

유기산Organic acid 발효하지 않은 양파 착즙액(w/v,%)Unfermented Onion Juice (w / v,%) 초산균으로 발효한 양파 발효액(w/v,%)Onion fermentation broth fermented with acetic acid bacteria (w / v,%) 사과산Malic acid 0.180.18 0.690.69 유산Legacy NDND NDND 초산Acetic acid NDND 4.54.5 구연산Citric acid 0.040.04 0.70.7 숙신산Suche mountain 0.010.01 0.620.62 푸마르산Fumaric acid 0.00060.0006 NDND 옥살산Oxalic acid NDND 0.010.01 주석산Tartaric acid NDND 0.090.09

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 발효 전 양파 착즙액의 경우, 사과산(malic acid)의 함량이 가장 높았으나, 발효 후에는 발효 전에 검출되지 않았던 초산이 가장 많이 포함되어 있어서, 상기 아세토박터 트로피칼리스 No. 22의 초산 생성능이 매우 우수함이 다시 확인되었다.As shown in Table 3, in the case of onion juice before fermentation, the content of malic acid was the highest, but acetic acid that was not detected before fermentation after fermentation contained the most, so that the acetobacter tropicalis No. . It was confirmed again that the acetic acid production capacity of 22 was very good.

또한, 사과산의 함량이 0.51% 증가되었고, 이 외에도 구연산 및 숙신산이 증가되었으며, 발효 전에는 전혀 검출되지 않았던 옥살산과 주석산도 검출되어 상기 아세토박터 트로피칼리스 No. 22는 초산뿐만 아니라 사과산, 구연산, 숙신산, 옥살산 및 주석산에 대한 산 생성능이 있는 것으로 확인되었다.
In addition, the content of malic acid was increased by 0.51%, citric acid and succinic acid were also increased, and oxalic acid and tartaric acid, which were not detected at all before fermentation, were also detected. 22 was found to have acid production capacity for acetic acid, citric acid, succinic acid, oxalic acid and tartaric acid as well.

<< 실시예Example 4> 양파 초산발효액의 생리활성 4> Biological Activity of Onion Acetate Fermentation Solution

상기 실시예 3의 양파 착즙액 1,000 ml에 상기 실시예 1의 아세토박터 트로피칼리스 No. 22의 전배양액을 3%(v/v)가 되도록 접종한 후, 교반속도 600 rpm 및 1vvm의 통기 조건으로 배양하였다. 상기 양파 착즙액의 초산발효액의 최종 산도가 1%인 시점까지 배양한 후, 최종 산도가 1%인 발효액과 상기 양파 착즙액의 암세포에 대한 항암활성과 혈전 생성 억제능에 대하여 측정하였다.
In 1,000 ml of onion juice of Example 3, Acetobacter Tropicalis No. 22 of the preculture was inoculated to 3% (v / v), and then cultured under aeration conditions of agitation rate 600 rpm and 1vvm. After culturing to the final acidity of 1% acetic acid fermentation of the onion juice solution was measured for the anticancer activity and antithrombotic activity against the cancer cells of the fermentation broth and the onion juice of 1% final acidity.

4-1 항암활성의 측정4-1 Measurement of anticancer activity

항암활성 측정을 위한 세포주는 폐암 세포주와 대장암 세포주를 사용하였고, 구체적으로 A-549(human lung carcinoma), SK-MES-1(human lung carcinoma), DLD-1(human colon adenocarcinoma) 및 Caco-2(human colon adenocarcinoma)를 사용하였다. 상기 세포의 배양은 Gibco사(Life Tech nologies, INC., USA)의 RPMI1640 배지와 DMEM 및 MEM 배지에 10% fetal bovine serum(FBS, heat inactivated)과 1% penicillin-streptomycin을 각각 첨가한 배지를 사용하여 37℃ 및 5% CO2의 조건으로 incubator에서 수행하였다.Cell lines for measuring anticancer activity were lung cancer cell lines and colon cancer cell lines. Specifically, A-549 (human lung carcinoma), SK-MES-1 (human lung carcinoma), DLD-1 (human colon adenocarcinoma) and Caco- 2 (human colon adenocarcinoma) was used. Culture of the cells was performed using RPMI1640 medium of Gibco (Life Technologies, Inc., USA) and medium containing 10% fetal bovine serum (FBS, heat inactivated) and 1% penicillin-streptomycin in DMEM and MEM medium, respectively. Was carried out in an incubator at 37 ° C. and 5% CO 2 .

상기 종양세포주에 대한 항암활성의 측정은 MTT(3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay법으로 수행하였다.The anticancer activity of the tumor cell line was measured by MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay.

구체적으로, 상기 각각의 종양 세포주를 2×105 cells/mL 농도로 조절한 후에, 96 well plate에 100 μL씩 접종하여 37℃ 및 5% CO2의 조건으로 incubator에서 24시간 배양하고, 상기 양파 착즙액 및 양파 발효액 시료를 각각 100 μL 접종하여 48시간 동안 배양하였다.Specifically, after adjusting each tumor cell line to 2 × 10 5 cells / mL concentration, 100 μL inoculated in 96 well plate and incubated in the incubator for 24 hours at 37 ℃ and 5% CO 2 conditions, the onion Juice and onion fermentation broth samples were inoculated at 100 μL and incubated for 48 hours.

상기 배양이 끝나기 4시간 전에 MTT solution(0.5 mg/mL)을 각 well당 50 μL씩 첨가한 후, 4시간 추가 배양하여 formazan 형성을 유도시켰고, 이것을 용해시키기 위하여 dimethyl sulfoxide(DMSO)를 각 well당 100 μL 첨가한 후, plate shaker에서 20분간 교반하여 Multi-well scanning spectrophotometer(microlate autoreader, Bio-Tek instrument, USA)로 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 흡광도에 따른 세포성장 저해율로 항암활성을 평가하였고, 세포성장 저해율이 50%이상인 경우에 항암활성이 있는 것으로 확인하였으며, 상기 세포 성장 저해율은 하기 수학식 1로 계산하였다.Four hours before the end of the incubation, 50 μL of MTT solution (0.5 mg / mL) was added to each well, followed by further incubation for 4 hours to induce formazan formation. To dissolve this, dimethyl sulfoxide (DMSO) was added to each well. After adding 100 μL, the plate was stirred for 20 minutes in a plate shaker, and the absorbance was measured at 570 nm with a multi-well scanning spectrophotometer (microlate autoreader, Bio-Tek instrument, USA). The anticancer activity was evaluated by the cell growth inhibition rate according to the absorbance. When the cell growth inhibition rate was 50% or more, the anticancer activity was confirmed. The cell growth inhibition rate was calculated by Equation 1 below.

Figure 112010013023666-pat00001
Figure 112010013023666-pat00001

상기 측정 결과는 하기 표 4에 기재하였다.The measurement results are shown in Table 4 below.

발효하지 않은 양파 착즙액Unfermented onion juice 초산균으로 발효한 양파 발효액Onion fermentation broth fermented with acetic acid bacteria A-549A-549 79%79% 96%96% SK-MES-1SK-MES-1 60%60% 95%95% DLD-1DLD-1 76%76% 96%96% Caco-2Caco-2 66%66% 97%97%

상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 균주인 아세토박터 트로피칼리스 No. 22으로 발효하는 경우 항암 활성이 현저하게 증가되는 것이 확인되었다.As shown in Table 4, the acetobacter tropicalis No. Fermentation with 22 was found to significantly increase the anticancer activity.

보다 구체적으로, 폐암세포주인 A549 및 SK-MES-1와 관련하여, 양파 착즙액은 A549 세포에 대하여 79%의 증식억제 효과를 나타낸 반면, 양파 발효액의 경우에는 96%의 증식억제 효과를 나타내 항암효과가 개선되었고, SK-MES-1 세포에 대한 양파 착즙액의 증식억제 활성은 60%를 나타내었으나, 양파 발효액의 경우에는 현저히 상승된 95%의 높은 항암 활성을 나타내었다.More specifically, in relation to lung cancer cell lines A549 and SK-MES-1, onion juice solution showed a 79% proliferation inhibitory effect on A549 cells, whereas onion fermentation broth showed a 96% proliferation inhibitory effect The effect was improved, and the growth inhibitory activity of onion juice on SK-MES-1 cells was 60%, but the onion fermentation broth showed a significantly elevated 95% anti-cancer activity.

또한 대장암세포인 DLD-1과 Caco-2와 관련하여, 발효 전의 양파 착즙액은 DLD-1와 Caco-2 세포에 대하여 각각 76%와 66%의 증식억제 효과를 나타내었으나, 양파 발효액의 경우에는 두 대장암세포에 대하여 모두 95% 이상의 높은 항암 활성을 나타내어, 현저한 항암활성의 개선효과가 확인되었다.
In addition, in relation to colon cancer cells DLD-1 and Caco-2, onion juice before fermentation showed a proliferation inhibitory effect of 76% and 66% for DLD-1 and Caco-2 cells, respectively. Both colon cancer cells showed high anticancer activity of more than 95%, and the effect of remarkable anticancer activity was confirmed.

4-2. 혈소판응집억제 활성4-2. Platelet aggregation inhibitory activity

혈액응고는 여러 가지 응고인자들이 연속적으로 활성화되어 최종적으로 피브리노겐(fibrinogen)을 피브린(fibrin)으로 변화시킴으로써 응혈(clot)을 만드는 과정이다. 상기 혈액응고 과정은 혈관벽 손상 등으로 인한 내인계 경로와 외상 등에 의해 유발되는 외인계 경로가 존재한다.Coagulation is the process by which a number of coagulation factors are activated and finally make a clot by converting fibrinogen into fibrin. In the blood coagulation process, there are endogenous pathways caused by damage to blood vessel walls and extraneous pathways caused by trauma.

따라서, 혈전 생성 억제능은 내인성경로에 기인하는 억제활성의 측정 기준인 활성 트롬보플라스틴 시간(activated partial thromboplastin time, APTT) 및 트롬빈 시간(thrombin time, TT)과 외인성경로(extrinsic pathwat)에 기인하는 억제활성의 측정 기준인 프로트롬빈시간(prothrombin time, PT)과 fibrinogen(FIB)의 양을 혈액응고 자동분석기(CLOT-2S, SEAC SRL., 이탈리아)로 측정하였다.Therefore, thrombus generation inhibitory activity is attributable to activated partial thromboplastin time (APTT), thrombin time (TT) and extrinsic pathwat, which are measures of inhibitory activity due to endogenous pathways. Prothrombin time (PT) and fibrinogen (FIB) were measured using a blood coagulation analyzer (CLOT-2S, SEAC SRL., Italy).

구체적으로, 상기 실시예 4-1의 방법으로 양파 발효액을 제조하였고, 상기 측정은 Rat plasma(IRT-N, Innovative research, 3.8% Na citrate)에 시료를 0.1 mL 및 0.01 mL의 함량으로 첨가한 뒤, 37℃에서 5 내지 10 분간 incubation하여, 응고시간을 측정하는 방법으로 수행하였고, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.Specifically, an onion fermentation broth was prepared by the method of Example 4-1, and the measurement was performed after adding the sample to 0.1 mL and 0.01 mL in Rat plasma (IRT-N, Innovative research, 3.8% Na citrate). , 5 to 10 minutes incubation at 37 ℃, was carried out by measuring the coagulation time, the results are shown in Table 5 below.

APTT(sec)APTT (sec) TT(sec)TT (sec) PT(sec)PT (sec) FIB(mg/Dl)FIB (mg / Dl) Rat plasmaRat plasma 62.462.4 31.531.5 22.622.6 100100 양파 착즙액(0.1ml)Onion Juice (0.1ml) 63.263.2 31.331.3 23.023.0 101101 양파 발효액(0.1ml)Onion Fermentation Broth (0.1ml) VmaxVmax VmaxVmax VmaxVmax 3636 양파 발효액(0.01ml)Onion Fermentation Broth (0.01ml) 71.771.7 30.130.1 23.023.0 104104

APTT(activated partial thromboplastin time), TT(thrombin time) 및 PT(prothrombin time)는 수치가 높을수록 항혈전기능이 있는 것으로 평가되고, FIB(fibrinogen)는 수치가 낮을수록 항혈전기능이 있는 것으로 평가된다.Activated partial thromboplastin time (APTT), thrombin time (TT), and prothrombin time (PT) are assessed as having antithrombotic function at higher levels, and fibrinogen (FIB) as anti-thrombotic function at lower levels. .

상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 양파 즙의 경우에는 APTT, TT 및 PT와 FIB 함량에서 대조군과 거의 유사하여 항혈전기능이 거의 없는 것으로 확인된 반면 양파 초산 발효액의 경우에는 현저하게 높은 항혈전기능이 있는 것으로 확인되었다. 특히, APTT의 경우에는 160초 이상, TT의 경우에는 240초 이상 및 PT의 경우에는 33초 이상의 시간이 소요되어 항혈전기능이 매우 우수한 것으로 확이되었고, 상기 양파 초산 발효액을 양파 즙의 10%에 해당하는 0.01 ml 첨가한 경우에 양파 즙과 유사한 활성을 나타낸 것으로, 본 발명의 균주인 아세토박터 트로피칼리스 No. 22는 발효 과정을 통해 양파에 현저히 상승된 항혈전기능을 부여할 수 있는 것으로 확인되었다.
As shown in Table 5, in the case of onion juice, APTT, TT and PT and FIB contents were found to be almost similar to the control group, showing little antithrombotic function, whereas onion acetic acid fermentation broth showed significantly high antithrombotic function. It was confirmed that there is. In particular, the APTT 160 seconds or more, TT 240 seconds or more PT and 33 seconds or more time was found to be very excellent anti-thrombotic function, the onion acetate fermentation broth 10% of onion juice When added to 0.01 ml corresponding to Onion juice showed similar activity, the acetobacter tropicalis No. 22 was found to impart significantly elevated antithrombotic function to onions through fermentation.

<< 실시예Example 5> 양파 발효 음료의 기호도 향상 5> Improve the acceptability of onion fermented beverages

5-1. 기호도 측정5-1. Preference measurement

상기 실시예 4에서 기능성이 우수한 것으로 확인된 양파 발효 음료와 기존 양조 식초의 기호도를 비교 측정하였다.In Example 4, the onion fermentation beverage, which was confirmed to have excellent functionality, and the degree of acceptance of the existing brewed vinegar were measured.

보다 상세하게는, 상기 실험은 상기 실시예 2-4에서 제조된 산도가 4 이상인 양파 식초(실험군)와 시판 양조 식초(대조군, ㈜청정원)를 대상으로 식초의 관능특성을 기준으로 신맛, 발효취 강도, 원료취 강도, 원료취 기호도 및 전체적인 기호도에 대한 관능평가를 수행하였다.More specifically, the experiment is based on the sour taste, fermentation odor based on the sensory characteristics of vinegar for onion vinegar (experimental group) and commercial brewing vinegar (control group, Chungjeongwon Co., Ltd.) having a pH of 4 or more prepared in Example 2-4 Sensory evaluation was performed for strength, raw odor intensity, raw odor acceptivity and overall acceptability.

각 시료의 용기에는 난수표에서 선택한 세 자리 숫자를 표시하였고, 제시 순서는 Microsoft Office Excel 2007(MIcrosoft Inc., USA) 이용하여 랜덤하게 제시하였다. 관능평가에서 시료와 시료 사이에 입을 헹굴 수 있도록 정수된 물(20 ± 2℃)과 뱉는 컵을 함께 제공하여 시료를 평가하기 전에 시료의 강한 특성에 따른 전 시료와의 혼란과 감각의 둔화를 줄이기 위해, 3회 충분한 입 헹굼을 하도록 하였다.The container of each sample was marked with three digits selected from the random number table, and the presentation order was randomly presented using Microsoft Office Excel 2007 (MIcrosoft Inc., USA). In the sensory evaluation, provided with a spitting cup of purified water (20 ± 2 ° C) to rinse the mouth between the sample and the sample, reducing confusion and desensitization with the whole sample due to the strong characteristics of the sample before the sample is evaluated. In order to do this, a sufficient mouth rinse was performed three times.

상기 관능평가는 이화여자대학교 아산 공학관 학생 휴게실에서 1:1 면접 방식으로 실시하였으며, 신맛, 발효취 강도, 원료취 강도, 원료취 기호도 및 전체적인 기호도 순으로 평가하였다. 상기 측정 평가는 5점 척도의 Rank-rating scale를 사용하여 1점은 ‘매우 좋지 않다’로 평가하고, 5점은 ‘매우 좋다’로 평가하였으며, 그 결과를 표 6에 나타내었다.The sensory evaluation was conducted in a 1: 1 interview in the student lounge of Asan Engineering Hall, Ewha Womans University, and evaluated in order of sour taste, fermentation odor intensity, raw odor intensity, raw odor preference and overall acceptability. In the measurement evaluation, one point was evaluated as 'very bad' using a rank-rating scale of a five point scale, and five points were evaluated as 'very good', and the results are shown in Table 6.

신맛Sour taste 발효취Fermentation 원료취Raw material 원료취 기호도Material odor symbol 전체적인 기호도Overall preference 대조군Control group 3.453.45 2.502.50 2.352.35 2.902.90 2.952.95 실험군Experimental group 2.752.75 2.702.70 2.852.85 2.902.90 3.003.00

상기 표 6에 나타낸 바와 같이, 신맛의 강도는 시판 양조식초가 본 발명의 양파 식초보다 높았으며, 발효취는 2.5점의 시판 양조식초 보다 본 발명의 양파 식초가 2.7로 약간 높았다. 양파에서 기인한 원료취를 인식할 수 있었으며, 선호도면에서도 시판 양조식초에 비해 우수한 것으로 확인되었다. 시판 양조식초는 단당류와 전분을 첨가한 반면, 본 발명의 양파식초는 아무것도 첨가하지 않은 상태에서 관능검사를 한 결과로 볼 때 양파식초는 배양 중 양파의 이취가 제거되어 선호도 면에서 우수한 편에 속한다고 판단되었다. 다만, 선호도에 대한 개선을 위한 후속 연구의 필요성이 제기되었다.
As shown in Table 6, the strength of the sour taste of the commercial brewed vinegar was higher than the onion vinegar of the present invention, the fermentation odor of the present invention was slightly higher than the commercial vinegar of 2.5 points 2.7. It was able to recognize raw odor due to onions, and it was confirmed to be superior to commercial vinegar in terms of preference. While commercially brewed vinegar added monosaccharides and starch, onion vinegar of the present invention is the result of sensory test without adding anything onion vinegar is excellent in terms of preference because the off-flavor of onion during the culture is removed It was judged. However, the necessity of follow-up research to improve preferences was raised.

5-2. 기호도 개선5-2. Improved sign

상기 실시예 5-1에서 확인된 바와 같이, 본 발명의 양파 발효 식초는 양파 자체의 이취미를 최소화하기는 하였으나, 제품화를 위해서는 상기 양파 발효 음료의 기능성을 최대한 유지하면서, 상기 양파 발효 음료에서 양파 특유의 이취미를 제한하고 기호도를 향상시킬 것 것이 요구된다.As confirmed in Example 5-1, the onion fermentation vinegar of the present invention, while minimizing the taste of the onion itself, while maintaining the maximum functionality of the onion fermentation drink for commercialization, the onion in the onion fermentation drink It is required to limit peculiar taste and to improve palatability.

상기 양파 발효 음료에 남아 있는 양파 특유의 이취를 제한할 목적으로 같이 혼합될 다른 채소즙 또는 과일즙을 우리나라 농가에서 주로 재배되는 당근, 고구마, 배, 포도, 귤 및 사과 중에서 검토한 결과, 사과를 혼합하는 경우 양파취를 최대한 저감할 뿐만 아니라 양파의 향 및 맛과 적절하게 조화되는 것으로 확인되었다.As a result of examining other vegetable juices or fruit juices to be mixed together for the purpose of limiting the smell of onions remaining in the onion fermented beverage among carrots, sweet potatoes, pears, grapes, tangerines and apples, which are mainly grown in Korean farms, When mixed, it was confirmed that not only the onion odor was reduced as much as possible but also appropriately harmonized with the flavor and taste of the onion.

상기 사과즙은 통상의 과일즙을 제조하는 방법과 같이, 사과를 박피한 후 세척하거나 또는 껍질과 함께 세척하고 적당한 크기로 절단한 후, 분쇄기로 분쇄하고, 부직포 등을 이용하여 착즙하는 방법으로 제조하였다.The apple juice is prepared by the method of preparing the fruit juice, washing the skin after peeling or washing it with a peel, cutting it to a suitable size, pulverizing with a grinder, and juice by using a nonwoven fabric. .

상기 사과즙과 함께, 사과향, 베타-사이클로덱스트린, 올리고당 및 과당을 첨가하여 최종 제품을 제조하였고, 상기 제품의 조성 중, 양파 식초발효액과 사과즙의 함량을 달리하여, 관능평가를 통해 최적 조성비를 측정하였다.The final product was prepared by adding apple flavor, beta-cyclodextrin, oligosaccharide and fructose together with the apple juice, and the optimum composition ratio was determined through sensory evaluation by varying the content of onion vinegar fermentation solution and apple juice in the composition of the product. .

보다 상세하게는, 상기 사과즙, 올리고당 및 액상과당 등은 CJ Food Inc(대한민국)에서 구입하였고, 상기 베타 사이클로 덱스트린은 BK Bio Co(대한민국)에서 구입하였으며, 상기 사과향은 JEY'S F.I. Inc.(대한민국)에서 구입하여 사용하였다. 상기 실험은 상기 실시예 5-1에서 사용된 양파 발효 식초에 하기 표 7의 조성으로 각각의 재료를 전날 혼합하여 제조한 후, 제조된 양파 발효 음료에 대한 관능검사를 실행하는 방법으로 수행하였다.More specifically, the apple juice, oligosaccharides and liquid fructose and the like was purchased from CJ Food Inc (Korea), the beta cyclodextrin was purchased from BK Bio Co (Korea), the apple flavor is JEY'S F.I. It was purchased from Inc. (Korea). The experiment was performed by mixing the ingredients of the onion fermentation vinegar used in Example 5-1 with the ingredients of Table 7 the day before, and then performing a sensory test on the prepared onion fermented beverage.

하기 표 7의 조성에서 각 수치는 중량을 기준으로 한 %를 의미하고. 상기 남은 함량은 정제수의 양을 의미한다. 상기 제조된 제품을 4℃ 냉장고에서 보관하였다가, 실험 10분 전에 냉장고에서 꺼내 얼음을 담은 아이스박스에 보관하면서, 검사 직전에 일회용 플라스틱 용기(직경 4.5cm, 높이 5.5cm)에 약 30mL씩 담아 평가 시 온도가 5.5 ± 1℃가 되도록 준비하였다. 각 시료의 용기에 는 난수표에서 선택한 세 자리 숫자를 표시하였고, 제시 순서는 Microsoft Office Excel 2007(MIcrosoft Inc., USA)) 이용하여 랜덤하게 제시하였다. 관능평가에서 시료와 시료 사이에 입을 헹굴 수 있도록 정수된 물 (20 ± 2℃)과 뱉는 컵을 함께 제공하여 시료를 평가하기 전에 시료의 강한 특성에 따른 전 시료와의 혼란과 감각의 둔화를 줄이기 위해, 3회 충분한 입 헹굼을 하도록 하였다.In the compositions of Table 7 below, each figure means% by weight. The remaining content means the amount of purified water. The prepared product was stored in a 4 ° C. refrigerator and removed from the refrigerator 10 minutes before the experiment, and stored in an ice box containing ice, and placed in a disposable plastic container (4.5 cm in diameter and 5.5 cm in height) about 30 mL immediately before the test. Prepared to have a time temperature of 5.5 ± 1 ° C. The containers of each sample were marked with three digits selected from the random number table, and the presentation order was randomly presented using Microsoft Office Excel 2007 (MIcrosoft Inc., USA). In the sensory evaluation, provided with a spit cup with purified water (20 ± 2 ° C) to rinse the mouth between the sample and the sample to reduce confusion and slowness of feeling with the whole sample before the sample is evaluated. In order to do this, a sufficient mouth rinse was performed three times.

양파식초Onion Vinegar 사과즙Apple juice 과당fruit sugar 베타-사이클로덱스트린Beta-cyclodextrin 올리고당oligosaccharide 사과향Apple flavor 1One 5050 2525 22 1One 0.80.8 0.100.10 22 8080 55 22 1.51.5 1One 0.150.15 33 8585 1010 22 22 1One 0.30.3 44 9090 55 22 1.51.5 1One 0.150.15

상기 관능평가는 이화여자대학교 아산 공학관 학생 휴게실에서 1:1 면접 방식으로 실시하였으며, 전반적인 기호도, 단맛의 정도, 사과 향미의 정도, 양파 향미의 정도 순으로 평가하였다. 전반적인 기호도는 10점 척도의 Rank-rating scale를 사용하여 1점은 ‘매우 좋지 않다’, 10은 ‘매우 좋다’로 평가하였고, 단맛의 정도와 사과 향미의 정도 및 양파 향미의 정도는 11점 척도의 Just about right scale을 사용하였으며 각 항목의 특성강도가 적당한 것은 척도 중간의 Just about right로 특성 강도가 약한 것을 Much Too Week로, 특성 강도가 강한 것을 Much too strong으로 평가하였다. 먼저, 전반적인 기호도 평가에서는 입헹굼을 하면서 세 가지 시료를 다 맛본 후, 전반적인 기호도가 높은 순으로 점수를 매겨 해당하는 칸에 시료의 번호를 적도로 하였으며, 한 칸에 하나의 시료 번호만을 쓰도록 하였다. 전반적인 기호도를 평가한 후 5분 정도 휴식 시간을 갖고 다음의 3가지 항목에 대해 평가하도록 하였는데, 제시되는 시료를 왼쪽의 시료부터 평가하도록 하였으며, 한 시료에 대한 단맛의 정도, 사과 향미의 정도, 양파 향미의 정도를 한 번에 평가하는 Monadic 평가 절차를 사용하였으며, 전반적인 기호도에 대한 측정치를 하기 표 8에 나타내었다. 상기 평가된 결과는 시료간의 전반적인 기호도에 대한 유의적 차이를 검증하기 위하여 분산 분석(analysis of variance, ANOVA)을 수행하였으며, 그 결과에 따라 Duncan’s multiple range test(α=0.05)를 수행하였다. 단맛의 정도, 사과 향미의 정도, 양파 향미의 정도는 Just about right는 0점으로, Much Too Week는 -5점, Much Too Strong은 +5점으로 환산하여 시료간의 평균값을 계산하였다. 통계 분석에는 SPSS for Windows 14.0(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 사용하였다.The sensory evaluation was conducted in a 1: 1 interview in the student lounge of Asan Engineering Hall, Ewha Womans University, and evaluated in order of overall preference, sweetness, apple flavor, and onion flavor. The overall acceptability was evaluated by using the Rank-rating scale on a 10-point scale, with 1 point being 'not very good' and 10 being 'very good'.The degree of sweetness, apple flavor, and onion flavor were 11 points. Just about right scale was used. The characteristic strength of each item was just about right in the middle of the scale, and Much Too Week was evaluated as weak characteristic strength, and Much too strong was evaluated as strong characteristic strength. First, in the general preference evaluation, all three samples were tasted while rinsing, and then the scores were ranked in the order of high overall preference, and the sample number was written in the corresponding column, and only one sample number was written in one column. . After evaluating the overall preference, we took a five-minute rest period and evaluated the following three items.The presented sample was evaluated from the left sample, and the sweetness, the apple flavor, and the onion for one sample were evaluated. A Monadic evaluation procedure was used to evaluate the degree of flavor at one time, and the measurements for overall acceptability are shown in Table 8 below. The evaluated results were analyzed by analysis of variance (ANOVA) in order to verify a significant difference in overall acceptability between samples, and Duncan's multiple range test (α = 0.05) was performed according to the results. The sweetness, apple flavor, and onion flavor were calculated as 0 for Just about right, -5 for Much Too Week, and +5 for Much Too Week. For statistical analysis, SPSS for Windows 14.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) was used.

NoNo 1One 22 33 44 평가값Evaluation 7.02b 7.02 b 5.21b 5.21 b 7.88a 7.88 a 7.21a 7.21 a

상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 발효 양파 착즙액의 양과 사과즙의 양을 다르게 하여 실험한 결과, 3번에서 양파 향미에 관한 측정치는 약간 높게 나왔으나, 전체적인 기호도 가장 우수하게 나와, 전반적인 기호도 면에서 3번 시료가 가장 우수한 것으로 나타났으며, 본 음료의 기능성이란 측면에서도 3번에서 양파 발효액이 가장 많이 포함되어 기능성도 우수한 것으로 확인되었다.As shown in Table 8, as a result of experiments varying the amount of fermented onion juice and the amount of apple juice, the measured value for onion flavor at 3 was slightly higher, but the overall preference was the best, and the overall preference was 3 No. 1 sample was found to be the best, and in terms of functionality of this beverage, No. 3 contained the most fermented onion fermentation solution, which was confirmed to be excellent.

한국미생물보존센터(국내)Korea Microorganism Conservation Center (Domestic) KFCC11476KFCC11476 2009121820091218

Claims (8)

양파 발효 대상액을 제조하는 단계; 상기 양파 발효 대상액에 기탁번호 KFCC 11476P를 갖는 아세토박터 트로피칼리스 균주(Acetobacter tropicalis KFCC 11476P)를 접종하는 단계 및 상기 균주가 접종된 양파 발효 대상액을 발효시켜 양파 발효액을 제조하는 단계를 포함하는 양파 발효 음료의 제조방법.Preparing an onion fermentation target solution; An onion comprising inoculating the onion fermentation broth with an acetobacter tropicalis KFCC 11476P having an accession number KFCC 11476P and preparing an onion fermentation broth by fermenting the onion fermentation broth with the strain inoculated; Process for preparing fermented beverages. 제1항에 있어서,
상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 양파를 착즙하여 양파 착즙액을 제조하는 과정 및 양파 열수 추출액을 제조하는 과정으로 이루어진 군 중에서 선택된 어느 하나를 포함하는 것을 특징으로 하는 양파 발효 음료의 제조방법.
The method of claim 1,
The step of preparing the onion fermentation target solution is a method of producing an onion fermentation drink, characterized in that it comprises any one selected from the group consisting of the process of preparing the onion juice solution by the juice of the onion and the process of producing the onion hot water extract.
제1항에 있어서,
상기 양파 발효 대상액을 제조하는 단계는 상기 발효 대상액의 에탄올 농도를 발효 대상액 전체 대비 3.5%(v/v) 내지 4.9%(v/v)가 되도록 에탄올 농도를 조절하는 과정 및 글루코스 농도를 발효 대상액 전체 대비 2.5%(v/v) 내지 3.0%(v/v)가 되도록 글루코스 농도를 조절하는 과정을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 양파 발효 음료의 제조방법.
The method of claim 1,
The preparing of the onion fermentation target solution may include adjusting the ethanol concentration of the fermentation target solution to 3.5% (v / v) to 4.9% (v / v) of the fermentation target solution and glucose concentration. Method for producing an onion fermented beverage, characterized in that further comprising the step of adjusting the glucose concentration to 2.5% (v / v) to 3.0% (v / v) relative to the total fermentation broth.
제1항에 있어서,
상기 양파 발효액을 제조하는 단계는 27 내지 33℃의 온도 조건, 0.5 vvm 내지 1.2 vvm의 통기조건 및 300 rpm 내지 700 rpm의 교반속도 조건에서 양파 발효 대상액 발효를 수행하는 것을 특징으로 하는 양파 발효 음료의 제조방법.
The method of claim 1,
The preparing of the onion fermentation broth is an onion fermentation beverage, characterized in that the fermentation of the onion fermentation target solution is carried out at a temperature condition of 27 to 33 ° C., aeration condition of 0.5 vvm to 1.2 vvm, and a stirring speed condition of 300 rpm to 700 rpm. Manufacturing method.
제1항에 있어서,
상기 양파 발효액을 제조하는 단계는 상기 양파 발효 대상액 발효 과정에서 효모 추출물 및 옥수수 침지액으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 첨가하는 과정을 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 양파 발효 음료의 제조방법.
The method of claim 1,
The preparing the onion fermentation broth further comprises the step of adding at least one selected from the group consisting of yeast extract and corn steep liquor during the fermentation of the onion fermentation target solution.
제1항에 있어서,
상기 양파 발효액에 사과즙, 베타-사이클로덱스트린 및 사과향으로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 더 첨가하고 혼합하는 단계를 추가로 포함하는 것인 양파 발효 음료의 제조방법.
The method of claim 1,
Apple onion, beta-cyclodextrin and apple flavor to the onion fermentation broth further comprises the step of adding at least one selected from the group consisting of and mixing the onion fermentation beverage manufacturing method.
제6항에 있어서,
상기 성분의 함량비는 각 성분의 중량을 기준으로 양파 발효액 82.5 내지 87.5 중량비, 사과즙 9 내지 11 중량비, 베타-사이클로덱스트린 1.5 내지 2.5 중량비 및 사과향 0.25 내지 0.35 중량비인 양파 발효 음료의 제조방법.
The method according to claim 6,
The content ratio of the components is an onion fermentation broth 82.5 to 87.5 weight ratio, apple juice 9 to 11 weight ratio, beta-cyclodextrin 1.5 to 2.5 weight ratio and apple flavor 0.25 to 0.35 weight ratio based on the weight of each component.
제1항의 제조방법에 의해 제조된 양파 발효 음료.Onion fermented beverage prepared by the method of claim 1.
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