KR101290587B1 - Method for controlling injurious insect pests using ultrasound - Google Patents

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KR101290587B1
KR101290587B1 KR1020120065526A KR20120065526A KR101290587B1 KR 101290587 B1 KR101290587 B1 KR 101290587B1 KR 1020120065526 A KR1020120065526 A KR 1020120065526A KR 20120065526 A KR20120065526 A KR 20120065526A KR 101290587 B1 KR101290587 B1 KR 101290587B1
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ultrasonic
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ultrasound
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이상훈
김인덕
정로덕
김주섭
김용균
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안동대학교 산학협력단
그린테코 주식회사
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Abstract

PURPOSE: A pest control method using ultrasound waves is provided to eradicate moths which are harmful to plants by using the ultrasound waves of specific frequency. CONSTITUTION: A pest control method using ultrasound waves comprises: a step of spraying chemicals on a plantation; and a step of improving the efficiency of chemical control on beet armyworms with the ultrasound waves of specific frequency which are generated by a sonicator. The frequency of the ultrasound waves is 30 kHz or 45 kHz. The intensity of the ultrasound waves is 70-95 dB. The multiple sonicators are installed in an equipment house. The ultrasonic generators facing each other are installed at regular intervals of 20-60 m. The ultrasound waves suppress the feeding activity of pests, change the nutrient content of blood plasma, increase blood sugar, control growth, prolong percent pupation and reduce an adult eclosion ratio.

Description

초음파를 이용한 해충 방제 방법{Method for controlling injurious insect pests using ultrasound}Method for controlling injurious insect pests using ultrasound}

본 발명은 해충 방제 방법에 관한 것으로, 특히 초음파를 이용한 해충 방제 방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a pest control method, and more particularly to a pest control method using ultrasonic waves.

일부 곤충은 짝을 찾는 통신수단으로 소리를 이용하고 있다. 이러한 소리는 비교적 낮은 주파수를 이용하는 충돌음과 비교적 높은 주파수를 갖는 마찰음과 진동음으로 나눌 수 있다. 충돌음은 여치류(Meconema thalassinum)가 풀잎 위에 앉아서 뒷다리로 잎 표면을 일정한 속도로 두드리면서 나오는 낮은 주파수의 소리 형태가 주변의 같은 종에게 통신 신호로 이용되는 경우이다. 반면에 몸의 상호 부위가 줄과 마찰편의 구조를 지닐 때 이 두 부위를 비비면서 발생되는 소리는 마찰음이 되며, 메뚜기와 귀뚜라미 등 많은 종류의 곤충이 이러한 소리로 교신하게 된다. 진동음은 얇은 진동막을 활처럼 진동시키며 발생되는 소리로 교신하는 매미류에서 찾아 볼 수 있다. 소리를 감지하는 곤충의 청각은 물리적 음파 신호를 전기적 신호로 전환하는 감각기와 이를 뇌로 이송하는 신경전달과정 및 이에 상응한 행동 반응으로 이어지게 된다. 청각 수용은 고막, 기계감각털, 박각시류의 아랫입술수염 및 모기류의 존스턴기관 등 곤충에 따라 다양하게 존재한다. 따라서 소리 발생과 청각이 짝을 이루면서 의사소통이 이뤄지며, 이때 소리를 이용한 통신은 종 특이적 주파수와 진동수를 갖게 된다.Some insects use sound as a means of communication to find mates. These sounds can be classified into a collision sound using a relatively low frequency and a friction sound and a vibration sound having a relatively high frequency. Collision is when a low-frequency sound pattern is emitted from a conch (Meconema thalassinum) sitting on a blade of grass and tapping the leaf surface at a constant speed with its hind legs, which is used as a communication signal to the surrounding species. On the other hand, when the mutual parts of the body have the structure of strings and friction pieces, the sounds generated by rubbing these two parts become friction sounds, and many kinds of insects such as grasshoppers and crickets communicate with these sounds. Vibration sounds can be found in cicadas that communicate with sounds generated by vibrating a thin vibrating membrane like a bow. The hearing of the insect that senses sound leads to a sensory sensor that converts a physical sonic signal into an electrical signal, a neurotransmission process that transfers it to the brain, and a corresponding behavioral response. Auditory accommodation varies with insects, such as the eardrum, the mechanical sensory hair, the lower lip beard of the hornhead, and the Johnston organ of the mosquito. Therefore, communication occurs as pairing of sound generation and hearing occurs, and communication using sound has species-specific frequency and frequency.

소리 통신은 또한 곤충과 포식자의 관계에서도 나타나고 있다. 다수의 곤충류는 식충성 박쥐의 음파탐지를 감지할 수 있는 기작을 개발시켰다. 초음파에 대한 회피행동은 이들 곤충류에서는 반사운동으로 프로그램되어 고막기관으로 수신된 초음파는 박쥐 인식으로 감지되고 다시 운동신경으로 연결된다. 밤나방의 경우 박쥐의 음파탐지 신호를 탐지하는 청각신경을 찾고 이 신경의 전기적 반응을 밝혔다.Sound communication is also seen in the relationship between insects and predators. Many insects have developed mechanisms to detect the sonic detection of insectivorous bats. The avoidance behavior for ultrasound is programmed in these insects as reflex motion, and the ultrasound received by the tympanic organ is detected by bat recognition and then connected to the motor nerve. In the case of night moths, they found an auditory nerve that detects the bat's sound detection signal and revealed the electrical response of the nerve.

스트레스 음파에 대한 연구는 척추동물을 중심으로 연구되었다. 쥐의 경우 급성 스트레스 음파에 대해서 스트레스성 무통각증(antinociception)을 유발하는 반면, 장시간 스트레스 음파노출에 대해서는 반대로 만성통증(fibromyalgin) 또는 류마티스 관절염을 유발하여 스트레스 음파가 신경계와 면역계에 해로운 영향을 줄 수 있다고 밝혔다. 또한, 대한민국 특허출원 제10-2002-0007488호에는, 가청 주파수 대역의 오디오 신호와 해충 구제용 초음파 주파수 대역의 초음파 신호가 합성된 신호를 저장하고, 재생 시에는 상기 가청 오디오 신호와 함께 해충 구제용 초음파 신호를 동시에 재생됨으로써 오디오 기기에서 방출되는 상기 초음파 신호로 인해 해충이 퇴치되는 기술이 개시됩니다.The study of stress sound waves focused on vertebrates. In rats, stress-induced acute stress sound waves are triggered (antinociception), while for long-term stress sound exposure, they can cause chronic pain (fibromyalgin) or rheumatoid arthritis, causing stress sound waves to have a detrimental effect on the nervous and immune systems. Said. In addition, the Republic of Korea Patent Application No. 10-2002-0007488, a combination of the audio signal of the audio frequency band and the ultrasonic signal of the ultrasonic frequency band for pest control is stored, and during the reproduction of the pest control with the audible audio signal By simultaneously regenerating the ultrasonic signal, a technique is disclosed in which the pest is eliminated by the ultrasonic signal emitted from the audio device.

하지만, 종래기술에 따르면 식물을 재배하면서 약제를 사용함과 동시에 특정 주파수의 초음파를 이용하여 식물에 해를 가하는 해충을 방제하는 기술은 제시되지 않고 있다. However, according to the prior art, a technique for controlling pests that harm plants using ultrasonic waves of a certain frequency while using medicinal plants while cultivating plants has not been proposed.

전술한 배경기술은 발명자가 본 발명의 도출을 위해 보유하고 있었거나, 본 발명의 도출 과정에서 습득한 기술 정보로서, 반드시 본 발명의 출원 전에 일반 공중에게 공개된 공지기술이라 할 수는 없다.
The above-described background technology is technical information that the inventor holds for the derivation of the present invention or acquired in the process of deriving the present invention, and can not necessarily be a known technology disclosed to the general public prior to the filing of the present invention.

본 발명은 식물 재배시 특정 주파수의 초음파를 이용하여 식물에 해를 가하는 나방을 퇴치하기 위한 초음파를 이용한 해충 방제 방법을 제공한다. The present invention provides a pest control method using ultrasonic waves for combating moths that harm plants using ultrasonic waves of a specific frequency during plant cultivation.

본 발명이 제시하는 이외의 기술적 과제들은 하기의 설명을 통해 쉽게 이해될 수 있을 것이다.
The technical problems other than the present invention can be easily understood from the following description.

본 발명의 일측면에 따르면, 식물의 재배지에 약제를 처리하는 단계; 및 특정 주파수의 초음파를 발생시키는 초음파 발생 장치가 상기 식물의 재배지에 상기 초음파를 발생시켜서 약제 방제 효율을 높이는 초음파를 이용한 해충 방제 방법이 제공된다.According to one aspect of the invention, the step of treating the medicament to the plantation of the plant; And an ultrasonic generator for generating ultrasonic waves of a specific frequency to generate the ultrasonic waves on the plantation of the plant, thereby providing a pest control method using the ultrasonic waves to increase the efficiency of chemical control.

여기서, 상기 초음파의 주파수는 30 kHz 또는 45 kHz가 될 수 있으며, 상기 초음파의 세기는 70 내지 95 dB이 될 수 있다. Here, the frequency of the ultrasonic waves may be 30 kHz or 45 kHz, the intensity of the ultrasonic waves may be 70 to 95 dB.

또한, 상기 초음파 발생 장치는 시설 하우스안에 설치될 수 있고, 상기 해충은 파밤나방, 배추좀나방, 아메리카잎굴파리, 복숭아혹진딧물 중 어느 하나 이상이 될 수 있다. In addition, the ultrasonic wave generating apparatus may be installed in a facility house, the pest may be any one or more of the night moth, Chinese cabbage moth, American leaf oyster flies, peach or aphid.

또한, 상기 초음파 발생 장치는 복수이며, 서로 바라보는 초음파 발생 장치는 20m 내지 60m 이격되어 설치될 수 있다.In addition, the ultrasonic generating device is a plurality, the ultrasonic generating device looking at each other may be installed spaced 20m to 60m apart.

또한, 상기 초음파는 상기 해충의 섭식 활동을 억제시키고, 혈장의 영양물질 함량을 변동시키며, 혈당을 증가시키고, 용 발육을 억제시키며, 용기간을 연장시키고, 성충으로의 우화비율을 낮추는 특징이 있으며, 상기 초음파는 상기 해충의 교미율을 1/2배 내지 1/15배 낮출 수도 있다. In addition, the ultrasound is characterized by inhibiting the feeding activity of the pest, varying the nutrient content of the plasma, increasing blood sugar, inhibiting the development of the dragon, extending the container, and lowering the rate of allegory to adult The ultrasound may lower the mating rate of the pest by 1/2 to 1/15 times.

또한, 상기 초음파 발생 장치는 서로 다른 주파수의 초음파를 주기적으로 변경하여 상기 식물의 재배지에 발생시킬 수 있다. In addition, the ultrasonic wave generating apparatus may periodically change the ultrasonic waves of different frequencies to generate in the plantation of the plant.

전술한 것 외의 다른 측면, 특징, 이점이 이하의 도면, 특허청구범위 및 발명의 상세한 설명으로부터 명확해질 것이다.
Other aspects, features, and advantages will become apparent from the following drawings, claims, and detailed description of the invention.

본 발명에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 방법은 식물 재배시 특정 주파수의 초음파를 이용하여 식물에 해를 가하는 나방을 퇴치할 수 있다.
Insect control method using the ultrasonic wave according to the present invention can be used to combat the moths harming the plant by using the ultrasonic wave of a specific frequency during plant cultivation.

도 1은 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 처리 결과 중 유충 섭식 행동 분석 그래프.
도 2a 내지 도 2c는 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 처리 결과 중 생체 물질 분석 그래프.
도 3a 내지 도 3d는 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 처리 결과 중 유전자 발현 양상을 도시한 도면.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 처리 결과 중 용 발육의 변화를 나타낸 그래프.
도 5a 내지 도 5c는 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 처리 결과 중 성충 교미 활동을 나타낸 도면.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 방법을 수행하는 초음파 발생 장치의 블록 구성도.
도 7a 및 도 7b는 본 발명의 실시예에 따른 시설 하우스에 초음파 발생 장치를 설치한 도면.
도 7c 및 도 7d는 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 처리 의 살충력을 도시한 도면.
1 is a graph of larva feeding behavior analysis results of pest control treatment using ultrasonic waves according to an embodiment of the present invention.
Figure 2a to 2c is a biological material analysis of the results of pest control treatment using ultrasonic waves in accordance with an embodiment of the present invention.
Figure 3a to 3d is a view showing the gene expression of the results of pest control treatment using ultrasonic waves in accordance with an embodiment of the present invention.
Figure 4 is a graph showing the change in dragon growth of the pest control treatment results using ultrasonic waves according to an embodiment of the present invention.
5a to 5c is a view showing the adult mating activity of the pest control treatment results using ultrasonic waves according to an embodiment of the present invention.
Figure 6 is a block diagram of an ultrasonic wave generating apparatus for performing a pest control method using the ultrasonic wave in accordance with an embodiment of the present invention.
7A and 7B are diagrams illustrating the installation of an ultrasonic wave generator in a facility house according to an embodiment of the present invention.
7C and 7D illustrate insecticidal power of pest control treatment using ultrasonic waves according to an embodiment of the present invention.

본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.While the invention is susceptible to various modifications and alternative forms, specific embodiments thereof are shown by way of example in the drawings and will herein be described in detail. It is to be understood, however, that the invention is not to be limited to the specific embodiments, but includes all modifications, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the invention.

제1, 제2 등과 같이 서수를 포함하는 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성요소들은 상기 용어들에 의해 한정되지는 않는다. 상기 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다. Terms including ordinals, such as first, second, etc., may be used to describe various elements, but the elements are not limited to these terms. The terms are used only for the purpose of distinguishing one component from another.

어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어" 있다거나 "접속되어" 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다. When a component is referred to as being "connected" or "connected" to another component, it may be directly connected to or connected to that other component, but it may be understood that other components may be present in between. Should be.

본 명세서에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.The terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to be limiting of the invention. Singular expressions include plural expressions unless the context clearly indicates otherwise. In this specification, the terms "comprises" or "having" and the like refer to the presence of stated features, integers, steps, operations, elements, components, or combinations thereof, But do not preclude the presence or addition of one or more other features, integers, steps, operations, elements, components, or combinations thereof.

또한, 명세서에 기재된 "…부", "…모듈", "…수단" 등의 용어는 적어도 하나의 기능이나 동작을 처리하는 단위를 의미하며, 이는 하드웨어나 소프트웨어 또는 하드웨어 및 소프트웨어의 결합으로 구현될 수 있다.The term " part, "" module," " means, "or the like, which is described in the specification, refers to a unit for processing at least one function or operation and may be implemented by hardware or software or a combination of hardware and software .

또한, 첨부 도면을 참조하여 설명함에 있어, 도면 부호에 관계없이 동일한 구성 요소는 동일한 참조부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다. In the following description of the present invention with reference to the accompanying drawings, the same components are denoted by the same reference numerals regardless of the reference numerals, and redundant explanations thereof will be omitted. DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, exemplary embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. In the following description, well-known functions or constructions are not described in detail since they would obscure the invention in unnecessary detail.

스트레스 음파가 곤충 생리적 현상에 미치는 현상이 파밤나방(Spodoptera exigua), 아메리카잎굴파리, 복숭아혹진딧물에서 분석되었다. 이들 곤충류는 모두 5,000 Hz의 주파수 소리에 생리적 반응이 교란되는 현상을 보였다. 파밤나방의 경우 유충의 섭식 활동이 둔화되고, 이에 따라 발육이 지연되며 면역 활동이 낮아지는 현상을 보였다. 이들 곤충류는 스트레스 음파에 노출될 경우 살충제에 대한 내성이 낮아져서 살충제의 방제 효과를 높여주는 응용적 효과도 보여 주었다.The effects of stress sound on insect physiological phenomena were analyzed in Spodoptera exigua, American leaf dens, and Peach aphids. All these insects exhibited disturbing physiological responses to the sound of 5,000 Hz. In the case of parchment moth, the larva's feeding activity was slowed, thus delaying the development and lowering the immune activity. These insects have also been shown to have an application effect that increases the effectiveness of insecticide control by reducing the resistance to insecticides when exposed to stress sound waves.

스트레스 음파 처리는 파밤나방(Spodoptera exigua)의 생리변화를 유발시킨다. 본 발명은 초음파(20 kHz 이상) 처리가 파밤나방 유충 섭식, 용 발육 및 성충 교미행동에 미치는 영향을 분석한 결과를 토대로 창작되었다. 초음파 처리는 5령충의 섭식 활동을 억제시켰다. 특별히 30 kHz 또는 45 kHz 초음파 처리를 받은 유충은 50% 이상의 섭식활동이 감소하였다. 이러한 초음파 처리를 받은 유충은 혈장의 주요 영양물질 함량이 변동되었다. 혈장 단백질은 처리 초음파의 주파수 증가에 따라 감소하였다. 그러나 혈당은 처리 초음파의 주파수 증가에 따라 증가하였다. 지질 함량은 30 kHz 처리까지는 증가하다가 이후 감소하였다. 파밤나방 5령의 혈구, 지방체 및 표피세포의 세 조직은 스트레스 관련 유전자들인 세 종류의 열충격단백질과 apolipophorin III를 발현시켰다. 그러나 초음파를 처리할 경우 이들 스트레스 유전자들의 발현이 억제되었다. 초음파 처리는 또한 용 발육을 억제시켜, 용기간을 연장시키고 성충으로 우화를 현격하게 낮추었다. 또한, 초음파 처리는 성충의 교미행동을 억제시켜 암컷의 산란력을 뚜렷하게 낮추었다. 이러한 결과를 바탕으로 야외 포장에 발생된 파밤나방과 배추좀나방(Plutella xylostella) 종령에 처리한 결과 생물농약 방제효과를 현격하게 증가시킬 수 있다.Stress sonication causes physiological changes in Spodoptera exigua. The present invention was created on the basis of the results of analyzing the effects of ultrasound (20 kHz or more) treatment on the feeding of the dragonfly moth larvae, dragon development and adult mating behavior. Sonication inhibited the feeding activity of five worms. Larvae, especially those treated with 30 kHz or 45 kHz, reduced their feeding activity by more than 50%. Larvae subjected to this sonication had a change in the plasma nutrient content. Plasma protein decreased with increasing frequency of treatment ultrasound. However, blood glucose increased with increasing frequency of treatment ultrasound. Lipid content increased until 30 kHz treatment and then decreased. Three tissues of blood cells, fat bodies and epidermal cells of Pabam moths expressed three types of stress-related genes: heat shock protein and apolipophorin III. However, ultrasound treatment inhibited the expression of these stress genes. Sonication also inhibited dragon development, extending the vessels and significantly lowering the allegory to adulthood. In addition, the ultrasonic treatment significantly suppressed mating behavior of the adult, significantly lowering the laying force of the female. On the basis of these results, the treatment of pabam moth and Chinese cabbage moth (Plutella xylostella) generated in outdoor packaging can significantly increase the biopesticide control effect.

초음파는 소리 수신자의 가청 범위에 속하나 참의사소통이라기 보다는 오히려 정상적 생리 현상을 교란시킬 수 있는 스트레스 음파로 작용할 수 있다.Ultrasound is within the audible range of sound receivers but can act as stress sound waves that can disrupt normal physiology rather than true communication.

이하에서는 파밤나방을 대상으로 상술한 초음파를 이용한 해충 방제 방법을 수행한 재료 및 방법과 처리 결과를 순서대로 설명한다.
Hereinafter, materials, methods, and treatment results of the pest control method using the above-described ultrasonic wave target moth will be described in order.

파밤나방 사육을 위하여 파밤나방 유충을 안동시에 소재한 파 재배지에서 채집한 후 약 18년간 실내에서 인공사료를 먹이로 누대 사육하였다. 사육 배양기의 조건은 온도 25ㅁ1℃, 광주기 16:8 h (L:D) 이었다. 성충의 먹이로 10%의 설탕물을 산란상자에 공급하였다.The larvae were collected from green onion plantations in Andong-si for the purpose of rearing the chestnut moths. The conditions of the breeding incubator were 25 W 1 ° C and photoperiod 16: 8 h (L: D). As a food for adults, 10% sugar water was supplied to the laying box.

초음파 처리를 위하여 음파기기는 데시벨 측정기, 음파처리구(45ㅧ90 cm), 음파송출기로 구성하였다. 분석된 파밤나방은 모두 5령충이고 실내온도 25ㅀC에서 주파수는 95 dB로 고정하고 20-45 kHz의 초음파에서 일정 시간 동안 노출시켜 생리변화를 관찰하였다.The sonic device was composed of a decibel measuring instrument, a sonic processing instrument (45 ㅧ 90 cm), and a sound wave transmitter for ultrasonic treatment. The analyzed beetroot moths were all five insects and the physiological changes were observed by fixing the frequency at 95 dB at room temperature of 25 변화 C and exposing them for 20 hours at 20-45 kHz ultrasound.

스트레스 음파처리에 따른 파밤나방의 열충격단백질(hsp70, 74, 83)과 apolipophorin (ApoLpIII) 유전자 변화를 분석하기 위하여 파밤나방 5령 유충을 각 10 마리 씩 각 초음파(20-45 kHz) 처리구에 24 시간동안 노출 시킨 후, 해부하여 각 조직(혈구, 지방체, 표피)을 적출하여 Trizol 용액(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 이용하여 RNA를 추출하였다. 추출된 RNA는 정량분석한 후 탈이온증류수를 이용하여 약 90 ng/㎕으로 희석하여 역전사효소(Bioneer, Daejon, Korea)를 이용하여 cDNA를 합성하여 PCR에 이용하였다. 열충격단백질(hsp) 가운데 hsp70, hsp74, hsp83 유전자를 특정 프라이머를 이용하여 증폭하였다. 이때 프라이머 서열은 SexHsp70은 5'-CAT GAA TCC TCG CGC ACT GC-3', 5'-CCT TGT CGT TCT TGA TCA CG-3', SexHsp74는 5'-CCT ACC TGA ACA CCT CAG T-3', 5'-GGG ATC GTA GTA TTT CTG GTG-3', SeHsp83은 5'-GCT GAC ATT AGC ATG ATT GG-3', 5'-GGC AGG TCC TCA CTG TCT AC-3'이다. To analyze changes in heat shock proteins (hsp70, 74, 83) and apolipophorin (ApoLpIII) genes of Pabam moths under stress sonication, 10 Bambap moth larvae were examined for 24 hours in each ultrasonic (20-45 kHz) treatment group. After exposure, the tissues were dissected and each tissue (blood cell, fat body, epidermis) was extracted and RNA was extracted using Trizol solution (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). The extracted RNA was quantitatively analyzed and diluted to about 90 ng / μl using deionized distilled water to synthesize cDNA using reverse transcriptase (Bioneer, Daejon, Korea) and used for PCR. Among the heat shock proteins (hsp), the hsp70, hsp74, and hsp83 genes were amplified using specific primers. In this case, the primer sequence of SexHsp70 is 5'-CAT GAA TCC TCG CGC ACT GC-3 ', 5'-CCT TGT CGT TCT TGA TCA CG-3', and SexHsp74 is 5'-CCT ACC TGA ACA CCT CAG T-3 ', 5′-GGG ATC GTA GTA TTT CTG GTG-3 ′, SeHsp83 is 5′-GCT GAC ATT AGC ATG ATT GG-3 ′, 5′-GGC AGG TCC TCA CTG TCT AC-3 ′.

또한, ApoLpIII 유전자의 특정 프라이머를 이용하였다. 이때 프라이머 서열은 5'-ATG GTC GCC AAG TTG TTC GTG-3', 5'-CTG CTT GTT GGC AGC CTC-3'이다. 각 PCR 시료의 구성은 다음과 같았다. cDNA 1 ㎕, dNTP 2.5 ㎕, 10x PCR 완충용액 2.5 ㎕, 프라이머 각각 1 ㎕ (25 pmol/㎕), Taq polymerage 0.5 ㎕, 3차 증류수 16.5 ㎕로 구성되었다. PCR 반응조건은 초기 94℃에서 2 분 동안 불활성단계를 거친 후, 35 반복으로 증폭 단계를 거쳤다. 증폭과정은 94℃에서 1 분 동안 변성단계와 프라이머 결합 반응은 hsp70, hsp74, hsp83, 및 ApoLpIII가 각각 47, 45, 48, 53℃에서 1 분, 72℃에서 1 분의 사슬연장 단계로 구성되었다. 이후 최종 사슬연장 단계가 추가로 72℃에서 10분 동안 이어졌다. PCR 생성물은 1x TAE (40 mM Tris-acetate, 1 mM EDTA, pH 8.0)에서 1% 아가로즈젤로 확인하였다.In addition, specific primers of the ApoLpIII gene were used. The primer sequence is 5'-ATG GTC GCC AAG TTG TTC GTG-3 ', 5'-CTG CTT GTT GGC AGC CTC-3'. The configuration of each PCR sample was as follows. 1 μl cDNA, 2.5 μl dNTP, 2.5 μl 10 × PCR buffer, 1 μl each primer (25 pmol / μl), 0.5 μl Taq polymerage, 16.5 μl tertiary distilled water. PCR reaction conditions were initially subjected to an inactivation step at 94 ° C. for 2 minutes, followed by an amplification step with 35 repetitions. The amplification process consisted of denaturation step at 94 ° C for 1 minute, and primer binding reaction consisted of chain extension step of 1 minute at 47, 45, 48, 53 ° C and 1 minute at 72 ° C for hsp70, hsp74, hsp83, and ApoLpIII, respectively. . The final chain extension step then continued at 72 ° C. for 10 minutes. PCR products were identified as 1% agarose gel in 1 × TAE (40 mM Tris-acetate, 1 mM EDTA, pH 8.0).

혈장 단백질 함량 분석을 위하여 파밤나방 5령 유충 10 마리를 초음파(20-45 kHz)에 24 시간 동안 노출시킨 후 혈림프를 추출하였다. 추출한 혈림프는 250 x g에서 5분간 원심분리하여 상등액 혈장을 얻었다. 측정 시료는 1 ml의 1x Bradford 용액과 20 ㎕의 혈장을 넣은 후 5 분 동안 상온에서 반응시켜 595 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 정량분석의 표준용액은 bovine serum albumin (Sigma-Aldrich Korea, Seoul, Korea)을 이용하여 단백질 함량 분석 표준식을 얻었다.For analysis of plasma protein content, 10 larvae of Pabam moths were exposed to ultrasound (20-45 kHz) for 24 hours and then blood lymphocytes were extracted. The extracted blood lymphocytes were centrifuged at 250 x g for 5 minutes to obtain supernatant plasma. The measurement sample was added with 1 ml of 1x Bradford solution and 20 μl of plasma and then reacted at room temperature for 5 minutes to measure absorbance at a wavelength of 595 nm. The standard solution of quantitative analysis was obtained by using bovine serum albumin (Sigma-Aldrich Korea, Seoul, Korea).

혈장 지질 함량 분석을 위하여 상기 방법대로 초음파 처리 이후 혈장 시료를 얻었다. 측정 시료는 100 ㎕의 혈장과 100 ㎕의 지질추출용액(chloroform : methanol (1:1), v/v)을 5 분 동안 반응시킨 후 12,500 x g에서 5 분 동안 원심분리를 하였다. 원심분리된 상층액을 95℃의 항온수조에서 20 분 동안 반응시킨 후 200 ㎕의 황산을 넣고 95℃의 항온수조에서 10 분 동안 다시 반응시켰다. 상온으로 옮긴 후 5 ml 의 Vanillin 용액(600 mg Vanillin, 400 ml phosphoric acid)을 첨가 후 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준 곡선은 linseed oil (0 - 500 ㎍)을 사용하여 지질 함량 표준 방정식을 얻었다.Plasma samples were obtained after sonication as described above for plasma lipid content analysis. The measurement sample was reacted with 100 μl of plasma and 100 μl of lipid extraction solution (chloroform: methanol (1: 1), v / v) for 5 minutes and centrifuged at 12,500 x g for 5 minutes. The centrifuged supernatant was reacted for 20 minutes in a 95 ° C constant temperature water bath, 200 μl of sulfuric acid was added and reacted again for 10 minutes in a 95 ° C constant temperature water bath. After transferring to room temperature, 5 ml of Vanillin solution (600 mg Vanillin, 400 ml phosphoric acid) was added and the absorbance was measured at 525 nm. The standard curve was obtained from the lipid content standard equation using linseed oil (0-500 μg).

혈장 유리당(free sugars) 함량 분석을 위하여 상기 방법대로 초음파 처리 이후 혈장 시료를 얻었다. 측정 시료는 100 ㎕의 혈장에 300 ㎕의 2% Na2SO4와 600 ㎕의 methanol을 첨가한 후 5 분 동안 반응시켰다. 이후 12,500 x g에서 5 분 동안 원심분리를 하였다. 상층액을 유리당 분석에 이용하였다. 상층액이 200-300 ㎕가 되도록 95℃의 항온수조에서 50 분 동안 증발시켰다. 이후 상온으로 옮긴 후 5 ml의 Anthrone 용액(750 mg of Anthrone, 380 ml H2SO4, 150 ml 증류수)을 첨가한 후 625 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준 곡선은 포도당(0 - 500 ㎍)을 이용하였다.Plasma samples were obtained after sonication as described above for plasma free sugars analysis. The sample was reacted for 5 minutes after adding 300 μl of 2% Na 2 SO 4 and 600 μl of methanol to 100 μl of plasma. After centrifugation for 5 minutes at 12,500 x g. Supernatants were used for free sugar analysis. The supernatant was evaporated in a constant temperature water bath at 95 ° C. for 50 minutes to 200-300 μl. Thereafter, after transferring to room temperature, 5 ml of Anthrone solution (750 mg of Anthrone, 380 ml H 2 SO 4, 150 ml distilled water) was added, and the absorbance was measured at 625 nm. Standard curves were glucose (0-500 μg).

초음파 처리에 따른 유충 섭식량 검정을 위하여 파밤나방 5령충(2일차)을 대상으로 주파수는 95 dB로 고정하고 0, 20, 25, 30, 35, 40 그리고 45 kHz의 음파 조건에서 24 시간 동안 노출시켜 섭식량 차이를 조사하였다. 섭식량 조사시 먹이는 배추 잎을 이용하였으며, 처리 전후의 무게 차이로 산출하였다. 자연 감소된 배추잎 무게를 산출하기 위해 동일한 조건에서 처리 전후 시간 사이에 감소된 배추 무게 차이를 산출하였다. 각 처리는 10 마리씩 3 반복 실시하였다. To test the larvae intake by sonication, the frequency was fixed at 95 dB for 5 months old insects (Day 2) and exposed for 24 hours under sonic conditions at 0, 20, 25, 30, 35, 40 and 45 kHz. The difference in feeding amount was investigated. Chinese cabbage leaves were used for feeding and calculated by the weight difference before and after treatment. To calculate the naturally reduced cabbage leaf weight, the reduced cabbage weight difference was calculated between the time before and after treatment under the same conditions. Each treatment was repeated three times with 10 animals.

초음파 처리에 따른 용 발육 검정을 위하여 용화 1 일째 번데기를 각각 10 마리씩 3 반복으로 25℃에서 각 0, 20, 25, 30, 35, 40 그리고 45 kHz의 주파수별로 노출시키고 우화될 때까지의 기간을 측정하였다. 또한 우화율도 반복별로 분석하였다.For the dragon development assay by sonication, 10 pupas on the 1st day of solubilization were exposed in 3 repetitions at 25 ° C for each frequency of 0, 20, 25, 30, 35, 40 and 45 kHz, and the period until allegorization Measured. The rate of allegory was also analyzed by repetition.

초음파 처리에 따른 성충 교미행동 검정을 위하여 갓 우화한 암컷 1 마리와 수컷 두 마리를 0.2 L 원통용기(10 cm 지름 x 10 cm 높이)에 10% 설탕물과 함께 두었다. 이 용기의 윗면은 망사로 덮고 초음파 스피커에 노출시켜 음파처리를 받을 수 있게 하였다. 각 초음파 처리는 0, 20, 25, 30, 35, 40 그리고 45 kHz의 상이한 주파수로 구성되고 4 일 동안 처리하였다. 이후 암컷 당 교미 횟수는 암컷 교미낭에 있는 정자주머니의 개수로 판정하였다. 또한 용기 내부에 산란된 알 수를 계수하여 산란력을 평가하였다. 각 처리는 5 반복으로 분석하였다. One adult female and two males were placed in a 0.2 L cylinder (10 cm diameter x 10 cm height) with 10% sugar water for adult mating behavioral tests following sonication. The top of the vessel was covered with a mesh and exposed to an ultrasonic speaker for sound wave treatment. Each sonication consisted of different frequencies of 0, 20, 25, 30, 35, 40 and 45 kHz and treated for 4 days. Since the number of copulation per female was determined by the number of sperm bags in the female copulation bag. In addition, the number of eggs scattered in the container was counted to evaluate the laying power. Each treatment was analyzed in 5 replicates.

또한, 도 7a 및 도 7b를 참조하면, 하우스 조건의 야외 배추 밭에 30 kHz, 3.28 v 그리고 70 dB 조건의 초음파를 처리하였다. 초음파 발생 장치는 복수이며, 서로 바라보는 초음파 발생 장치는 20m 내지 60m 이격되어 설치될 수 있다. 처리시간은 오후 6 시 이후부터 다음날 아침 8 시 까지 처리하였다. 시험에 사용된 배추는 삼보 얼갈이이며, 2월 중순경 발아하여, 3 월 10 일경 정식하였으며, 3 월 27 일경 파밤나방을 처리하였다. 파밤나방은 포기당 8 마리가 발생했으며, 6 포기를 한 반복으로 하였다. In addition, referring to Figures 7a and 7b, the outdoor cabbage field of the house condition was treated with ultrasonic waves of 30 kHz, 3.28 v and 70 dB conditions. There are a plurality of ultrasonic wave generators, and the ultrasonic wave generators looking at each other may be installed at a distance of 20m to 60m. The treatment time was from 6 pm until 8 am the next morning. The cabbage used for the test is a sambo ogle, germinated in mid-February, and formulated around March 10, and treated with pabam moths around March 27. The green beetle moths were 8 per abandon, with 6 repetitions.

농약, 즉 약제 처리는 Bacillus thuringiensis를 이용하였으며 200 ppm으로 조제하여 난괴법 3 반복으로 처리하였다. 배추좀나방은 포기당 15 마리 발생했으며, 5 포기를 한 반복으로 난괴법 3반복으로 처리하였다. Bt 처리는 파밤나방 방제 처리와 동일했다.Pesticides, that is, drug treatment was performed using Bacillus thuringiensis, and was prepared at 200 ppm and treated with 3 times of ingot method. Chinese cabbage moths occurred 15 per abandon and treated with 3 repetitions of the ingot method. The Bt treatment was the same as that of the beech moth control treatment.

처리에 따른 평균간 비교는 SAS의 PROC GLM (SAS Institute, 1989)을 이용하여 ANOVA 분석을 실시하였다. 자료의 도형화는 Sigma Plot 8.0 (Systat Software, Inc., Point Richmond, CA, USA)을 이용하여 도식화하였다.
ANOVA analysis was performed using SAS 'PROC GLM (SAS Institute, 1989). The data were plotted using Sigma Plot 8.0 (Systat Software, Inc., Point Richmond, CA, USA).

유충 섭식 활동에 미치는 초음파 처리 효과를 분석하면 다음과 같다. 도 1을 참조하면, 파밤나방 5령충을 대상으로 초음파의 유충 섭식 행동에 미치는 영향을 분석했다. 종령의 파밤나방은 25℃에서 5 일 동안 지내고 용화과정으로 진행된다. 이 시기에 섭식은 초기 3 일 동안 진행되고, 4 일째부터 섭식량이 줄면서 5 일째에는 먹이로부터 떨어지는 배회행동을 보이게 된다. 따라서 섭식량 분석은 2 일째 5령충을 이용하였고, 24 시간 동안 상이한 초음파에 노출 속에 섭식량을 비교하였다. 이때 초음파의 주파수가 증가하면서 섭식량은 감소하는 것으로 나타났으며, 특별히 30 kHz와 45 kHz 처리에서는 50% 이상의 섭식량 감소를 보였다.
The effects of sonication on larval feeding activity are as follows. Referring to Figure 1, it was analyzed the effect of the ultrasonic larvae feeding behavior of the five night insects. Species of beetroot moths are kept at 25 ° C. for 5 days and proceed to liquefaction. At this time, the feeding proceeds for the first three days, and the feeding decreases from the fourth day, causing the roaming behavior to fall from the food on the fifth day. Therefore, feeding analysis was performed using 5 worms on day 2, and the feeding amounts were compared in different exposures to ultrasound for 24 hours. At this time, the feeding amount decreased as the frequency of the ultrasound increased, and the feeding amount was reduced by more than 50% especially at 30 kHz and 45 kHz treatment.

초음파 처리에 따른 생체 물질 변화를 분석하면 다음과 같다. 도 2a 내지 도 2c를 참조하면, 초음파 처리 따라 파밤나방 혈장에 존재하는 전체 단백질(protein) 함량 변화를 분석한 결과, 30 kHz 까지는 주파수에 상관없이 일정하게 약 4%의 단백질 함량을 보였다. 그러나 35 kHz 이상에서는 혈장의 단백질의 함량이 줄어드는 것을 관찰하였다. 혈장 내 지질(lipid)은 대조구에서 약 0.3%를 보였으나, 모든 초음파 처리구에서는 현격하게 증가하여 30 kHz를 처리한 유충의 경우는 약 1.3%로 증가하였다. 그러나 다시 35 kHz 이상 처리에서는 지질 함량이 감소하는 경향을 보였다. 혈장에 존재하는 유리당의 경우 약 0.15%를 보였으나 초음파 처리에 따라 현저하게 증가하여 혈당이 약 0.5%를 차지하였다.Analysis of the biomaterial change by the ultrasonic treatment is as follows. Referring to Figure 2a to 2c, as a result of analyzing the change in the total protein (protein) content present in Pabam moth plasma according to the ultrasonic treatment, the protein content of about 4% was constant up to 30 kHz regardless of frequency. But above 35 kHz, plasma protein content was observed to decrease. Lipids in the plasma were about 0.3% in the control group, but increased significantly in all the ultrasonic treatment groups, and about 1.3% in the larvae treated with 30 kHz. But again, treatments above 35 kHz tended to decrease lipid content. In the case of free sugar present in the plasma, about 0.15% was shown, but the blood glucose was increased about 0.5% with the sonication.

도 3a 내지 도 3d를 참조하면, 초음파 처리에 따라 세 종류의 열충격단백질과 지질운송단백질인 ApoLpIII의 유전자 발현 양상이 도시된다. 조사된 4 종의 유전자들은 모두 대조구에서 발현을 보였다. hsp70의 경우 음파 처리에 민감하게 발현량이 줄어들었다. 그러나 조직별로 감수성 정도가 달라 혈구의 경우 모든 초음파 처리에서 발현이 감소하였고, 지방체의 경우 대조구에서 보인 약한 발현이 그대로 유지하는 경향을 보였다. 또한 표피세포의 경우는 30 kHz 이상에서 발현량이 크게 줄어드는 경향을 보였다. hsp74는 모든 초음파 처리에서 세 조직 모두 발현이 억제되었다. hsp83의 경우도 모두 초음파 처리에서 발현량이 감소하였다. ApoLpIII는 비교적 초음파 처리에 반응하지 않았으나, 표피세포는 다소 감소하는 경향을 보였다. 3A to 3D, gene expression patterns of three types of heat shock proteins and lipid transport proteins, ApoLpIII, are shown by ultrasonic treatment. All four genes examined expressed in control. In the case of hsp70, the expression level was sensitive to sonication. However, due to the different sensitivity of tissues, the expression of blood cells decreased in all sonic treatments, and in the case of fat body, the weak expressions of control were maintained. In addition, in the case of epidermal cells, the expression level tended to decrease significantly above 30 kHz. hsp74 inhibited the expression of all three tissues in all sonications. In the case of hsp83, the amount of expression was decreased by sonication. ApoLpIII was relatively unresponsive to sonication, but epidermal cells tended to decrease somewhat.

또한, 도 4를 참조하면, 초음파 처리 따라 파밤나방 용 발육의 변화가 도시된다. 처리되는 초음파의 주파수가 증가함에 따라 용 발육 기간이 지연되었다. 일반적으로 25℃에서 약 5 일 소요되는 용 발육기간이 45 kHz의 초음파로 처리할 경우 약 8일로 증가하였다. 또한 성충으로 발육이 뚜렷이 감소하여 45 kHz를 처리할 경우 우화율이 30%로 감소하였다.
In addition, referring to Figure 4, there is shown a change in the growth for the night moth according to the ultrasonic treatment. As the frequency of ultrasound treated increased, the dragon development period was delayed. In general, the growth period of about 5 days at 25 ℃ was increased to about 8 days when treated with 45 kHz ultrasound. In addition, the growth rate was significantly reduced due to adulthood, and the allegory rate was reduced to 30% when treated with 45 kHz.

또한, 도 5a 내지 도 5c를 참조하면, 성충 생리 현상에 미치는 초음파의 영향을 분석하기 위해 다양한 초음파를 처리하여 파밤나방의 교미율과 이에 따른 산란력이 도시된다. 파밤나방의 교미는 암컷의 교미낭에 존재하는 정자주머니(spermatophore)의 존재 및 개수를 중심으로 파악하였다(도 5a 참고). 도 5b를 참조하면, 본 발명에서 이용된 0.2 L 용기에서 암컷 한 마리와 수컷 두 마리를 유지한 경우 4일 동안 약 2 회 이상의 교미를 한 것으로 처리 암컷의 교미낭에 존재하는 정자주머니 개수로 판단하였다. 이러한 교미횟수는 초음파 처리에 따라 감소하여 45 kHz를 처리한 경우 평균 0.15 회로 약 10배 이상 감소하였다. 즉, 대조군의 경우 2.3, 20kHz의 초음파 처리의 경우 1.15, 45kHz의 초음파 처리의 경우 0.15의 수치를 나타내어, 초음파를 처리하는 경우 1/2 내지 1/15배로 교미율을 낮추는 것으로 파악된다.In addition, referring to Figures 5a to 5c, in order to analyze the effect of the ultrasonic wave on the adult physiological phenomenon is shown the mating rate and the scattering force of the beech moth by processing various ultrasonic waves. The mating of the beech moth was identified based on the presence and number of spermatophore present in the female dorsum sac (see FIG. 5A). Referring to FIG. 5B, when one female and two males are kept in a 0.2 L container used in the present invention, the number of sperm sacs present in the copulation sacs of the treated females is determined to have been mated about two or more times for four days. It was. The number of copulations decreased with sonication, and when the treatment was 45 kHz, the average number of copulations decreased by about 10 times. That is, in the case of the control group, 2.3, 20 kHz sonication, 1.15, 45 kHz sonication shows a value of 0.15, and it is understood that the rate of mating is reduced by 1/2 to 1/15 times when sonication is performed.

또한, 도 5c를 참조하면, 이러한 초음파 처리 속에 암컷은 산란수(number of ovipositions)의 감소를 보였다. 대조구의 경우 약 780 개의 알을 산란한 반면, 45 kHz 처리한 경우 200 개 이하의 알을 산란하였다.In addition, referring to FIG. 5C, the female showed a decrease in the number of ovipositions during the sonication. About 780 eggs were laid for the control, while up to 200 eggs were spawned when treated with 45 kHz.

도 6을 참조하면, 본 발명에 사용되는 초음파 발생 장치(600)의 구성도가 도시된다. 초음파 발생 장치(600)는 초음파 발생부(610), 전원 공급부(620), 장치 지지부(630), 타이머(640), 작동 제어부(650), 제어 유닛(660)을 포함할 수 있다. Referring to FIG. 6, a configuration diagram of an ultrasonic wave generator 600 used in the present invention is shown. The ultrasonic wave generator 600 may include an ultrasonic wave generator 610, a power supply unit 620, a device support unit 630, a timer 640, an operation controller 650, and a control unit 660.

초음파 발생부(610)는 다양한 원리로 초음파를 발생시킬 수 있다. 예를 들면, 초음파 발생부(610)는 고주파 교류전류를 역압전 효과에 의하여 기계적인 진동으로 전환하여 초음파를 발생시킬 수 있다. The ultrasonic generator 610 may generate ultrasonic waves in various principles. For example, the ultrasonic generator 610 may generate ultrasonic waves by converting a high frequency alternating current into mechanical vibration by a reverse piezoelectric effect.

전원 공급부(620)는 초음파 발생 장치(600)에 필요한 전원을 공급하며, 전류의 형태는 교류 또는 직류가 될 수 있다. The power supply unit 620 supplies power required for the ultrasonic wave generator 600, and the current may be in the form of alternating current or direct current.

장치 지지부(630)는 초음파 발생 장치(600)를 특정 시설, 예를 들면, 시설 하우스의 내부에 결합하기 위한 구성요소가 될 수 있다. 예를 들면, 장치 지지부(630)는 볼트와 너트의 결합 구조를 포함할 수 있으며, 초음파 발생 장치(600)를 비닐 하우스의 프레임에 상기 볼트와 너트의 결합 구조에 의하여 결합시킬 수 있다. The device support 630 may be a component for coupling the ultrasonic generator 600 to a specific facility, for example, the interior of the facility house. For example, the device support 630 may include a coupling structure of a bolt and a nut, and the ultrasonic wave generator 600 may be coupled to the frame of the vinyl house by a coupling structure of the bolt and the nut.

타이머(640)는 초음파 발생 동작의 시간을 재기 위해 구비될 수 있으며, 작동 제어부(650)는 타이머(640)의 시간값을 이용하여 초음파 발생부(610)의 동작 시간을 제어할 수 있다. The timer 640 may be provided to time the ultrasonic generation operation, and the operation controller 650 may control the operation time of the ultrasonic generator 610 using the time value of the timer 640.

이 경우 초음파 발생부(610)는 동일한 주파수의 초음파를 계속하여 식물에게 발생시키거나 또는 서로 다른 주파수의 초음파를 주기적으로 변경하여 식물에게 발생시킬 수 있다. 후자의 경우 본 명세서에서 설명하는 서로 다른 주파수의 초음파가 가지는 효능을 식물에게 다양하게 제공할 수 있으므로, 식물에 대한 해충 방제 효과가 우수한 특징이 있다. 예를 들면, 초음파 발생부(610)는 타이머(640)의 시간값을 이용하여 소정의 주기에 따라 30 kHz 또는 45 kHz의 초음파를 발생시킬 수 있다. 이 경우 소정의 주기는 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간 등의 시간이 될 수 있으며, 이러한 주기는 소정의 주기 설정부를 조작하는 사용자의 설정에 의해 변경될 수 있다. In this case, the ultrasonic generator 610 may continuously generate ultrasonic waves of the same frequency to the plants or periodically change ultrasonic waves of different frequencies to generate the plants. In the latter case, since the effects of the ultrasonic waves of different frequencies described herein can be provided to the plant in various ways, there is an excellent pest control effect on the plant. For example, the ultrasonic generator 610 may generate ultrasonic waves of 30 kHz or 45 kHz according to a predetermined cycle by using the time value of the timer 640. In this case, the predetermined period may be 1 hour, 2 hours, 4 hours, 6 hours, 12 hours, 24 hours, and the like, and the period may be changed by a user's setting of the predetermined period setting unit. .

제어 유닛(660)은 상술한 정보 초음파 발생부(610), 전원 공급부(620), 장치 지지부(630), 타이머(640), 작동 제어부(650)가 서로 연동하면서 자신의 고유한 기능을 수행하도록 각 기능부를 제어한다. The control unit 660 may be configured such that the above-described information ultrasonic generator 610, the power supply unit 620, the device support unit 630, the timer 640, and the operation control unit 650 interoperate with each other to perform their own functions. Control each functional unit.

또한, 도 7c를 참조하면, 야외 포장에 발생한 파밤나방(95% 이상 종령충과 나머지는 4령 말 유충)을 대상으로 하여 Bt (200 ppm)를 처리 5 일 후 약 25%의 살충력을 나타내었다. 반면 초음파를 처리한 경우 약 35%의 살충력을 나타내었으며, Bt와 초음파를 함께 처리하였을 경우 약 60%의 높은 살충률을 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 여기서, 초음파의 주파수는 30 kHz 내지 45 kHz 중 어느 하나의 주파수가 될 수 있다. In addition, referring to FIG. 7C, the insecticidal insects of about 25% after 5 days of treatment with Bt (200 ppm) were treated with pabam moths (95% or more of the larvae and the remaining four-year-old larvae) in the outdoor packaging. . On the other hand, ultrasonic treatment showed about 35% insecticidal activity, and Bt and ultrasonic treatment together showed a high insecticide rate of about 60%. Here, the frequency of the ultrasonic wave may be any one of 30 kHz to 45 kHz.

또한, 도 7d를 참조하면, 배추좀나방의 경우도 대부분 종령에 대한 방제 효과를 분석한 결과가 도시된다. Bt (200 ppm)를 단독으로 처리한 경우 처리 5 일 후 약 34%의 살충력을 나타낸 반면 초음파를 처리한 경우 약 37%의 살충력을 나타내었으며, Bt와 초음파를 함께 처리하였을 경우 약 80%의 높은 방제 효율을 나타내는 것으로 나타났다. 여기서, 초음파의 주파수는 30 kHz 내지 45 kHz 중 어느 하나의 주파수가 될 수 있다. In addition, referring to Figure 7d, the case of the Chinese cabbage moth also shows the results of analyzing the control effect on most species. Treatment with Bt (200 ppm) alone showed about 34% insecticide after 5 days of treatment, while ultrasound treatment showed about 37% insecticide, and when Bt and ultrasound were treated together, it was about 80% higher. It was shown to exhibit control efficiency. Here, the frequency of the ultrasonic wave may be any one of 30 kHz to 45 kHz.

스트레스 음파에 대한 곤충의 생리적 변화가 파밤나방에 대해 진행되었다. 분석된 곤충에서 고주파(특히, 5,000 Hz)는 발육 생리, 섭식 행동 및 산란 생리과정에 저해를 주었다. 본 발명은 초음파가 파밤나방의 생리적 교란에 미치는 영향을 분석하였다.Insect physiological changes to stress sound waves have progressed for Pabamoth moths. High frequency (particularly 5,000 Hz) in the analyzed insects inhibited developmental physiology, feeding behavior and spawning physiology. The present invention analyzed the effect of ultrasound on the physiological disturbances of Pabam moth.

초음파는 유충의 섭식 행동을 저하시켰다. 특별히 30 kHz와 45 kHz에서는 50% 이상의 섭식 행동을 억제시켰다. 또한 혈장 내 영양물질의 변동을 일으켰다. 초음파 처리에 따라 단백질의 함량은 감소하지만, 혈당과 지질의 농도는 증가하는 경향을 나타냈다. 무처리구 파밤나방 유충 혈장에 존재하는 영양물질의 함량을 퍼센트 농도로 환산하여 보면 가장 많이 존재하는 것이 단백질이고 다음으로 지질 그리고 혈당으로 이어졌다. 이러한 혈장 내 영양물질의 함량 변화는 초음파 처리가 파밤나방에게 스트레스로 작용하는 데서 기인될 수 있다. 스트레스에 관련되어 곤충에서 분비되는 주요 호르몬은 기질동원호르몬(adipokinetic hormone: AKH)이다. Ultrasound reduced the larva's feeding behavior. Especially at 30 kHz and 45 kHz, more than 50% of the feeding behaviors were suppressed. It also caused changes in nutrients in the plasma. The sonication decreased the protein content but increased the blood glucose and lipid concentrations. The percentage of nutrients present in the untreated P. vulgaris larvae plasma was the most abundant protein, followed by lipids and blood glucose. This change in the content of nutrients in the plasma may be due to the sonication acts as a stress on the beech moth. The major hormone secreted by insects in connection with stress is adipokinetic hormone (AKH).

지질과 혈당을 높여주는 AKH는 체내 이화 작용을 높여주는 생리적 변화를 유발시켜 스트레스에 대처하게 한다. 파밤나방이 스트레스 음파에 노출되면 내분비기관인 카디아체(corpora cardiaca: CC)에서는 AKH를 분비하고 이 호르몬의 작용 기관인 지방체로 하여금 이화작용을 촉진시켜 저장된 중성지질(triglyceride)이나 글리코겐(glycogen)에서 diglyceride와 포도당을 유리시키고, 포도당은 다시 곤충의 혈당인 trehalose로 전환되어 혈림프로 방출되게 된다. 이러한 결과로 스트레스 음파에 노출된 파밤나방은 혈장의 지질 함량과 유리당의 농도가 올라가는 스트레스 대처 상태로 전환되게 된다. 초음파 처리 가운데 30 kHz 이상은 단백질의 함량 저하를 유발시키는 데, 이는 전체적 대사 저하에 기인되는 효과를 초래할 수 있다.AKH, which raises lipids and blood sugar, helps to cope with stress by causing physiological changes that increase catabolism. When Pabam moths are exposed to stress sound waves, the endocrine organs, corpora cardiaca (CC), secrete AKH and promote the catabolism of fats, which are organs of this hormone, to promote the catabolism of diglycerides in stored triglycerides or glycogens. Glucose is released, and glucose is converted back into insect blood trehalose, which is released into the hemolymph. As a result, Pabam moths exposed to stress sound waves are converted into a stress coping state in which the lipid content of plasma and the concentration of free sugar are increased. More than 30 kHz of sonication causes a decrease in the content of proteins, which can result in effects due to lower overall metabolism.

초음파 스트레스에 대한 생리적 대처 능력의 저하는 스트레스 관련 유전자 발현의 억제와 연계된다. 즉, 열충격단백질(HSP)은 고온, 저온, 건조, 영양 결핍 등의 요인에 의해 발현되는 스트레스 관련 단백질이다. 이들의 본래 기능은 세포의 단백질 합성에 관여하여 단백질의 3차구조를 정상적으로 이루게 하는 chaperone 역할을 담당하게 된다. 이러한 열충격단백질은 일반적으로 네 부류로 분류되어 분자량이 20-30 kDa되는 소형 HSP와 분자량이 60 kDa의 HSP60, 70 kDa의 HSP70 그리고 83 kDa의 HSP83을 포함하게 된다. Degradation in physiological coping with ultrasound stress is associated with suppression of stress-related gene expression. That is, heat shock protein (HSP) is a stress-related protein expressed by factors such as high temperature, low temperature, dryness, and nutritional deficiency. Their original function is to play a role in chaperones, which are involved in protein synthesis in the cell and normalize the tertiary structure of proteins. These thermal shock proteins are generally classified into four classes, including small HSPs having a molecular weight of 20-30 kDa, HSP60 having a molecular weight of 60 kDa, HSP70 having a 70 kDa, and HSP83 having 83 kDa.

본 발명에서는 파밤나방에서 밝혀진 3 가지 hsp 유전자들을 대상으로 초음파 처리에 따른 발현을 분석하였다. 모든 열충격단백질의 유전자 발현이 초음파 처리에 따라 억제되는 것을 세 조직에서 관찰하였다. 이와 같은 초음파 처리에 따른 hsp 유전자들의 발현 억제는 파밤나방이 스트레스에 대해 대처하는 능력을 잃게 되는 생리적 악영향을 유발하게 된다. 초음파에 대한 스트레스 민감도는 ApoLpIII 유전자 발현에서도 나타났다. ApoLpIII는 지질 운송단백질의 구성원으로 비교적 분자량이 큰 ApoLp I과 II로 구성된 곤충의 혈장 지질운송체인 고밀도 리포포린(high density lipophorin)에 지질이 결합하여 저밀도 리포포린으로 전환될 때 지질의 단백질 결합을 견고하게 하여주는 역할을 담당하게 된다. In the present invention, three hsp genes identified in Pabam moths were analyzed for expression by ultrasonic treatment. In all three tissues, gene expression of all heat shock proteins was inhibited by sonication. Inhibition of the expression of hsp genes by the sonication causes a physiological adverse effect that Pabam moth loses its ability to cope with stress. Stress sensitivity for ultrasound was also shown in ApoLpIII gene expression. ApoLpIII is a member of the lipid transport protein, which binds lipid protein to high density lipophorin, a plasma lipid transporter of insects composed of relatively high molecular weight ApoLp I and II, and thus, firmly binds lipid protein binding when converted to low density lipophorin. It will play the role of letting them go.

또한 ApoLpIII는 세균의 외막에 존재하는 지질다당체를 인식하는 면역물질로도 기능을 담당하고 있다. 파밤나방에서 ApoLpIII의 발현을 RNA interference로 억제하여 주면 면역력이 크게 저하되고 발육이 억제되는 현상이 있다. 초음파에 의한 이 단백질의 발현억제는 지질 운송 능력의 저하 및 면역력 감소를 유발할 수 있다. 특별히 초음파 처리에 따라 혈장에 높아진 지질을 운송하려면 그만큼 이들의 면역 작용에 기여도는 낮아져서 외래 병원체 침입에 대해서 대처 능력이 떨어지는 면역 결핍으로 이어질 수 있다.ApoLpIII also functions as an immune material that recognizes lipopolysaccharides present in the outer membrane of bacteria. Inhibiting the expression of ApoLpIII by RNA interference in Pabam moth greatly reduces immunity and development is inhibited. Inhibition of expression of this protein by ultrasound can lead to decreased lipid transport capacity and reduced immunity. In particular, the transport of elevated lipids into the plasma following sonication is less likely to contribute to their immunity, leading to less immune coping deficiency.

또한, 초음파 처리에 따라 용 발육과 성충 교미행동이 억제되었다. 밤나방 성충의 경우 복부에 첫마디에 존재하는 고막기관을 통해 초음파를 감지하는 것으로 밝혀졌다. 초음파에 대한 회피행동은 이들 곤충류에서는 반사운동으로 프로그램되어 고막기관으로 수신된 초음파는 박쥐 인식으로 감지되고 다시 운동신경으로 연결된다.
In addition, the somatic treatment inhibited the development of the dragon and adult mating behavior. Chestnut moths have been shown to detect ultrasound through the tympanic organ in the first section of the abdomen. The avoidance behavior for ultrasound is programmed in these insects as reflex motion, and the ultrasound received by the tympanic organ is detected by bat recognition and then connected to the motor nerve.

그 외 본 발명의 실시예에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 방법 및 그 시스템에 대한 구체적인 장치 구성도, 임베디드 시스템, O/S 등의 공통 플랫폼 기술과 통신 프로토콜, I/O 인터페이스 등 인터페이스 표준화 기술 및 엑추에이터, 배터리, 카메라, 센서 등 부품 표준화 기술 등에 대한 구체적인 설명은 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진자에게 자명한 사항이므로 생략하기로 한다.
In addition, the method for controlling pests using ultrasonic waves according to an embodiment of the present invention and a detailed device configuration diagram for the system, an interface standardization technology such as an embedded system, O / S, communication protocols, I / O interfaces, and actuators Details of parts standardization technology, such as a battery, a camera, and a sensor, will be omitted since they are obvious to those skilled in the art.

본 발명에 따른 초음파를 이용한 해충 방제 방법은 다양한 컴퓨터 수단을 통하여 수행될 수 있는 프로그램 명령 형태로 구현되어 컴퓨터 판독 가능 매체에 기록될 수 있다. 즉, 기록 매체는 컴퓨터에 상술한 각 단계를 실행시키기 위한 프로그램을 기록한 컴퓨터로 읽을 수 있는 기록매체가 될 수 있다.The pest control method using ultrasonic waves according to the present invention can be implemented in the form of program instructions that can be executed by various computer means and recorded in a computer readable medium. That is, the recording medium may be a computer-readable recording medium having recorded thereon a program for causing a computer to execute the steps described above.

상기 컴퓨터 판독 가능 매체는 프로그램 명령, 데이터 파일, 데이터 구조 등을 단독으로 또는 조합한 형태로 포함할 수 있다. 상기 매체에 기록되는 프로그램 명령은 본 발명을 위하여 특별히 설계되고 구성된 것들이거나 컴퓨터 소프트웨어 당업자에게 공지되어 사용 가능한 것일 수도 있다. 컴퓨터 판독 가능 기록 매체의 예에는 하드 디스크, 플로피 디스크 및 자기 테이프와 같은 자기 매체(Magnetic Media), CD-ROM, DVD와 같은 광기록 매체(Optical Media), 플롭티컬 디스크(Floptical Disk)와 같은 자기-광 매체(Magneto-Optical Media), 및 롬(ROM), 램(RAM), 플래시 메모리 등과 같은 프로그램 명령을 저장하고 수행하도록 특별히 구성된 하드웨어 장치가 포함된다.The computer readable medium may include a program command, a data file, a data structure, etc. alone or in combination. The program instructions recorded on the medium may be those specially designed and constructed for the present invention or may be available to those skilled in the art of computer software. Examples of the computer-readable recording medium include magnetic media such as a hard disk, a floppy disk and a magnetic tape, optical recording media such as CD-ROM and DVD, magnetic recording media such as a floppy disk Optical media, and hardware devices specifically configured to store and execute program instructions such as ROM, RAM, flash memory, and the like.

상기 매체는 프로그램 명령, 데이터 구조 등을 지정하는 신호를 전송하는 반송파를 포함하는 광 또는 금속선, 도파관 등의 전송 매체일 수도 있다. 프로그램 명령의 예에는 컴파일러에 의해 만들어지는 것과 같은 기계어 코드뿐만 아니라 인터프리터 등을 사용해서 컴퓨터에 의해서 실행될 수 있는 고급 언어 코드를 포함한다. 상술한 하드웨어 장치는 본 발명의 동작을 수행하기 위해 하나 이상의 소프트웨어 모듈로서 작동하도록 구성될 수 있다. The medium may be a transmission medium such as an optical or metal line, a wave guide, or the like, including a carrier wave for transmitting a signal designating a program command, a data structure, or the like. Examples of program instructions include not only machine code generated by a compiler, but also high-level language code that can be executed by a computer using an interpreter or the like. The hardware devices described above may be configured to operate as one or more software modules to perform the operations of the present invention.

또한, 상술한 각 구성 요소는 물리적으로 인접한 하나의 부품으로 구현되거나 서로 다른 부품으로 구현될 수도 있다. 후자의 경우 각 구성 요소는 인접하거나 또는 서로 다른 구역에 위치하여 제어될 수 있으며, 이 경우 본 발명은 각 구성 요소를 제어하는 별도의 제어수단 또는 제어실을 구비하여 유선 또는 무선으로 각 구성요소를 제어할 수도 있다.
In addition, each of the above-described components may be implemented in one physically adjacent component or may be implemented in different components. In the latter case, each component may be controlled by being located adjacent or in different zones. In this case, the present invention is provided with a separate control means or control room for controlling each component to control each component by wire or wirelessly. You may.

상기한 바에서, 각 실시예에서 설명한 각 구성요소 및/또는 기능은 서로 복합적으로 결합하여 구현될 수 있으며, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 하기의 특허 청구의 범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
In the above description, the respective components and / or functions described in the embodiments may be combined and combined, and those skilled in the art will understand that the present invention It will be understood by those skilled in the art that various changes in form and details may be made therein without departing from the spirit and scope of the invention.

600 : 초음파 발생 장치 610 : 초음파 발생부
620 : 전원 공급부 630 : 장치 지지부
640 : 타이머 650 : 작동 제어부
660 : 제어 유닛
600: ultrasonic generator 610: ultrasonic generator
620: power supply 630: device support
640: timer 650: operation control unit
660: control unit

Claims (9)

식물의 재배지에 약제를 처리하는 단계; 및
특정 주파수의 초음파를 발생시키는 초음파 발생 장치가 상기 식물의 재배지에 상기 초음파를 발생시켜서 파밤나방에 대한 약제 방제 효율을 높이는 단계를 포함하되,
상기 초음파의 주파수는 30 kHz 또는 45 kHz인 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
Treating the medicament on the plantation of the plant; And
An ultrasonic generator for generating an ultrasonic wave of a specific frequency includes the step of generating the ultrasonic wave in the plantation of the plant to increase the efficiency of the drug control against the beetroot moth,
The frequency of the ultrasonic wave is 30 kHz or 45 kHz pest control method using ultrasonic waves, characterized in that.
삭제delete 청구항 1에 있어서,
상기 초음파의 세기는 70 내지 95 dB인 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
The method according to claim 1,
The intensity of the ultrasonic wave is 70 to 95 dB pest control method using ultrasonic waves, characterized in that.
청구항 1에 있어서,
상기 초음파 발생 장치는 시설 하우스안에 설치되는 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
The method according to claim 1,
The ultrasonic generator is a pest control method using the ultrasonic wave, characterized in that installed in the facility house.
삭제delete 청구항 1에 있어서,
상기 초음파 발생 장치는 복수이며, 서로 바라보는 초음파 발생 장치는 20m 내지 60m 이격되어 설치되는 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
The method according to claim 1,
The ultrasonic generating device is a plurality, the ultrasonic generating device to look at each other is pest control method using ultrasonic waves, characterized in that installed 20m to 60m apart.
청구항 1에 있어서,
상기 초음파는 상기 해충의 섭식 활동을 억제시키고, 혈장의 영양물질 함량을 변동시키며, 혈당을 증가시키고, 용 발육을 억제시키며, 용기간을 연장시키고, 성충으로의 우화비율을 낮추는 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
The method according to claim 1,
The ultrasound is characterized by suppressing the feeding activity of the pest, varying the content of nutrients in the plasma, increasing blood sugar, inhibiting the development of the dragon, extending the container, and lowering the rate of allegory to adult Pest control method using.
청구항 1에 있어서,
상기 초음파는 상기 해충의 교미율을 1/2배 내지 1/15배 낮추는 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
The method according to claim 1,
The ultrasonic wave is a pest control method using ultrasonic waves, characterized in that to reduce the mating rate of the pests 1/2 times to 1/15 times.
청구항 1에 있어서,
상기 초음파 발생 장치는 서로 다른 주파수의 초음파를 주기적으로 변경하여 상기 식물의 재배지에 발생시키는 것을 특징으로 하는 초음파를 이용한 해충 방제 방법.
The method according to claim 1,
The ultrasonic generator is a pest control method using the ultrasonic wave, characterized in that to periodically change the ultrasonic waves of different frequencies generated in the plantation of the plant.
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