KR101270143B1 - The method for preparation of cell culture scaffold - Google Patents
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Abstract
본 발명은 세포배양 지지체의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 세포성장을 촉진하는 약물을 약물 저장탱크에 공급하고, 지지체로 사용되는 합성 고분자를 합성 고분자 저장탱크에 공급한 후 상기 합성 고분자 저장탱크에 기공을 생성시키는 수용성 또는 생분해성 물질을 공급하는 단계(단계 1); 및 상기 단계 1의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자와, 수용성 또는 생분해성 물질을 제2 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 2);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for preparing a cell culture support, and more specifically, to supply a drug that promotes cell growth to a drug storage tank, and to supply the synthetic polymer used as a support to a synthetic polymer storage tank, the synthetic polymer storage Supplying a water-soluble or biodegradable material that creates pores to the tank (step 1); And injecting the drug of step 1 into the double injection nozzle through the first supply pipe, and then introducing the synthetic polymer and the water-soluble or biodegradable material into the double injection nozzle through the second supply pipe, and then using the plotter device to float. It relates to a method for producing a cell culture support comprising 2).
Description
본 발명은 세포배양 지지체의 제조방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a method for producing a cell culture support.
생체 조직공학(Tissue Engineering)이란 환자의 몸에서 필요한 조직을 채취하고 그 조직편으로부터 세포를 분리한 다음 분리된 세포를 배양을 통하여 필요한 양만큼 증식시키고 다공성을 가지는 생분해성 고분자 지지체에 심어 일정기간 체외 배양함으로써 형성되는 세포배양 지지체(scaffold)를 다시 인체 내에 이식하는 것이다. 이식 후 세포들은 대부분의 조직이나 장기의 경우 신생 혈관이 형성될 때까지는 체액의 확산에 의해 산소와 영양분을 공급받다가 인체 내의 혈관이 들어와 혈액의 공급이 이루어지면 세포들이 증식 분화하여 새로운 조직 및 장기를 형성하고 생분해성 고분자 지지체는 그동안 분해되어 사라지는 기법을 응용하는 것이다.Tissue engineering is to collect the tissue from the patient's body, separate the cells from the tissue pieces, and then proliferate the separated cells in the required amount through cultivation and incubate in vitro for a certain period of time by planting them on a porous biodegradable polymer support. Cell culture scaffolds formed by implanting them back into the human body. After transplantation, most tissues and organs receive oxygen and nutrients by the diffusion of body fluid until new blood vessels are formed, but when blood vessels enter the body and supply blood, the cells proliferate and differentiate to form new tissues and organs. The biodegradable polymer support is formed by applying a technique that is decomposed and disappeared.
따라서 이러한 조직공학 연구를 위해서는 우선 생체 조직과 유사한 생분해성 고분자 지지체를 제조하는 일이 중요하다. 인체 조직의 재생을 위해 사용되는 지지체의 재료의 주된 요건은 조직세포가 재료 표면에 유착하여 3차원적 구조를 가진 조직을 형성할 수 있도록 기질 또는 지지체의 역할을 충분히 할 수 있는 기계적 강도를 가져야 하고, 이식된 세포와 숙주 세포 사이에 위치하는 중간 장벽으로서의 역할도 해야 하는데 이를 위해서는 이식 후 혈액응고나 염증반응이 일어나지 않는 무독성의 생체적합성이 있어야 한다. 또한 이식된 세포가 새로운 체내 조직으로서 기능과 역할을 하게 되면 원하는 시간 안에 생체 내에서 완전히 분해되어 사라질 수 있는 생분해성을 지녀야 한다.
Therefore, it is important to prepare biodegradable polymer scaffolds similar to biological tissues for such tissue engineering studies. The main requirement of the material of the support used for the regeneration of human tissue should be mechanical strength enough to serve as a substrate or support so that the tissue cells can adhere to the material surface to form a three-dimensional structure of tissue. In addition, it should also serve as an intermediate barrier between the transplanted and host cells, which requires non-toxic biocompatibility without blood coagulation or inflammatory reactions. In addition, when transplanted cells function and function as new body tissues, they must have biodegradability that can be completely degraded and disappeared in vivo within the desired time.
본 발명의 목적은 세포배양 지지체의 제조방법을 제공하는 데 있다.
An object of the present invention is to provide a method for producing a cell culture support.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 세포성장을 촉진하는 약물을 약물 저장탱크에 공급하고, 지지체로 사용되는 합성 고분자를 합성 고분자 저장탱크에 공급한 후 상기 합성 고분자 저장탱크에 기공을 생성시키는 수용성 또는 생분해성 재료를 공급하는 단계(단계 1); 및In order to achieve the above object, the present invention is a water-soluble to supply pores in the synthetic polymer storage tank after supplying a drug that promotes cell growth to the drug storage tank, and supplying a synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank Or supplying a biodegradable material (step 1); And
상기 단계 1의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자 및 수용성 또는 생분해성 물질을 제2 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 2);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법을 제공한다.Injecting the drug of
또한, 본 발명은 세포성장을 촉진하는 약물을 약물 저장탱크에 공급하고, 지지체로 사용되는 합성 고분자를 합성 고분자 저장탱크에 공급하고, 기공을 생성시키는 수용성 또는 생분해성 물질을 첨가물 저장탱크에 공급하는 단계(단계 A); 및In addition, the present invention is to supply a drug for promoting cell growth to the drug storage tank, to supply the synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank, and to supply the additive storage tank with a water-soluble or biodegradable material that generates pores Step (step A); And
상기 단계 A의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자 및 수용성 또는 생분해성 재료를 각각 제2 공급관과 제3 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 B);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법을 제공한다.
The drug of step A is introduced into the double injection nozzle through the first supply pipe, and then the synthetic polymer and the water-soluble or biodegradable material are introduced into the double injection nozzle through the second supply pipe and the third supply pipe, respectively, and floated using a plotter device. It provides a method for producing a cell culture support comprising the step (step B).
본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법은 플로터 장치를 이용하여 약물과 합성고분자로 이루어진 세포배양 지지체를 한번에 제조할 수 있으며, 수용성 또는 생분해성 물질을 첨가하여 세포에 약물을 공급할 수 있고, 약물 방출을 조절할 수 있으므로, 세포배양 지지체 제조에 유용하게 사용할 수 있다.
In the method for preparing a cell culture support according to the present invention, a cell culture support composed of drugs and synthetic polymers can be prepared at one time using a plotter device, and a drug can be supplied to cells by adding a water-soluble or biodegradable substance, and drug release. Since it can be controlled, it can be usefully used for preparing a cell culture support.
도 1은 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치를 나타낸 모식도이고;
도 2는 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치의 이중 분사노즐을 나타낸 모식도이고;
도 3은 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치를 나타낸 모식도이고;
도 4는 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치의 이중 분사노즐을 나타낸 모식도이고; 및
도 5는 본 발명에 따른 세포배양 지지체에서 발생하는 약물 방출을 나타낸 모식도이다. 1 is a schematic view showing a plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention;
Figure 2 is a schematic diagram showing a double jet nozzle of the plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention;
Figure 3 is a schematic diagram showing a plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention;
Figure 4 is a schematic diagram showing a double jet nozzle of the plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention; And
Figure 5 is a schematic diagram showing the drug release occurring in the cell culture support according to the present invention.
이하, 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법을 단계별로 상세히 설명한다.
Hereinafter, a method for preparing a cell culture support according to the present invention will be described in detail step by step.
본 발명은 세포성장을 촉진하는 약물을 약물 저장탱크에 공급하고, 지지체로 사용되는 합성고분자를 합성고분자 저장탱크에 공급한 후 상기 합성 고분자 저장탱크에 기공을 생성시키는 수용성 또는 생분해성 물질을 공급하는 단계(단계 1); 및The present invention is to supply a drug that promotes cell growth to the drug storage tank, and supplying a synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank and then supplying a water-soluble or biodegradable material to create pores in the synthetic polymer storage tank. Step (step 1); And
상기 단계 1의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자 및 수용성 또는 생분해성 물질을 제2 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 2);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법을 제공한다(도 1 참조).
Injecting the drug of
본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 있어서, 단계 1은 약물 및 합성고분자를 각각의 저장탱크에 투입한 후 합성 고분자가 공급된 합성고분자 저장탱크에 수용성 또는 생분해성 물질을 공급하는 단계이다. In the method for preparing a cell culture support according to the present invention,
상기 단계 1의 약물은 세포성장을 촉진할 수 있으며, 성장인자(growth factor), 사이토카인(cytokine), 항생제, 항균제 등을 사용할 수 있다. 더욱 구체적으로, 상기 성장인자는 골형성단백질(BMP), 세포증식억제 인자(TGF-β), 인슐린 유사 성장인자(IGF), 섬유아세포 성장인자(FGF), 혈소판 유래 성장인자(PDGF), 상피세포 성장인자(KGF), 표피 성장인자(EGF) 등을 사용할 수 있고, 상기 사이토카인은 인터루킨-2, 인터페론-α(IFN-α), 인터페론-β(IFN-β) 등을 사용할 수 있으며, 상기 항생제는 페니실린, 스트렙토마이신, 카나마이신, 네오마이신, 바시트라신, 젠타마이신 및 반코마이신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용할 수 있고, 상기 항균제는 암포테리신-비, 니스타틴, 폴리믹신 등을 사용할 수 있다. 상기 약물에는 세포가 포함되거나 포함되지 않을 수 있다. The drug of
또한, 상기 단계 1의 합성 고분자는 지지체로 사용될 수 있고, 폴리카프로락톤, 폴리락타이드, 폴리글리콜리드, 폴리다이옥사논으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 사용할 수 있다. In addition, the synthetic polymer of
또한, 상기 단계 1에서 합성 고분자 저장탱크에 첨가되는 물질은 물에 녹을 수 있는 재료(수용성 물질) 또는 생분해 속도가 빠른 재료(생분해성 물질)이고, 수용성 물질 또는 생분해성 물질의 성분을 조절하여 세포배양 지지체를 물에 담궜을 때 생성되는 기공(pore)을 조절할 수 있으므로, 약물의 방출량을 조절할 수 있다. 상기 수용성 물질로는 염류용액(salt solution), 수크로즈(sucrose), 폴리에틸렌옥사이드(PEO), 폴리비닐알콜(PVA) 등을 사용할 수 있고, 생분해성 물질로는 폴리글리콜산(polyglycolic acid), 폴리카프로락톤(polycaprolactone), 폴리락틴산(polylactic acid), 폴리다이옥사논(polydioxanone) 등을 사용할 수 있다.
In addition, the material added to the synthetic polymer storage tank in
다음으로, 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 있어서, 단계 2는 상기 단계 1의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성고분자와, 수용성 또는 생분해성 물질을 제2 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계이다.Next, in the method for producing a cell culture support according to the present invention,
이때, 상기 플로터 장치는 저판과 상기 저판 양측단에 각각 상호 이격되어 돌출 형성되는 일자형의 X축 가이드레일 지지대를 구비하며, 상기 X축 가이드레일 지지대 사이에 상기 수집테이블이 설치되는 베이스프레임; 상기 X축 가이드레일 지지대에 각각 설치되는 X축 가이드레일; Y축 가이드레일이 설치되며 상기 X축 가이드레일에 탑재되어 X축 방향으로 이송되는 Y축 가이드레일 지지대; 상기 Y축 가이드레일에 탑재되어 Y축 방향으로 이송되는 Y축 이송 브라켓; 상기 Y축 이송 브라켓에 고정 설치되며, Z축 가이드레일이 설치되는 Z축 가이드레일 지지대; 및 상기 Z축 가이드레일에 탑재되어 Z축 방향으로 이송되며, 상기 약물 저장탱크, 합성고분자 저장탱크 및 이중 분사노즐이 고정 설치되는 Z축 이송 브라켓;을 포함한다. 또한, 상기 플로터 장치는 약물을 저장하는 약물 저장탱크 및 합성고분자를 저장하는 합성고분자 저장탱크를 구비하고, 상기 약물 저장탱크와 연결되는 제1 공급관은 제1 분사노즐과 연결되고 상기 제1 분사노즐의 외측을 길이방향으로 감싸며 환상 도관으로 형성되어 합성고분자와, 수용성 또는 생분해성 물질이 분사되도록 상기 제2 공급관과 연결되는 제2 분사노즐로 이루어진 이중 분사노즐을 포함하며, 상기 약물, 합성고분자 및 첨가물이 플로팅되는 수집테이블을 포함한다. 상기 Z축 이송 브라켓에는 상기 약물 저장탱크, 합성고분자 저장탱크 및 이중 분사노즐이 각각 다수개 고정 설치될 수 있다(미도시).
At this time, the plotter device includes a base frame having a linear X-axis guide rail support that is formed to be spaced apart from each other at both ends of the bottom plate and the bottom plate, the collection table is installed between the X-axis guide rail support; X-axis guide rails respectively installed on the X-axis guide rail support; A Y-axis guide rail installed on the X-axis guide rail and installed in the X-axis guide rail; A Y-axis transport bracket mounted on the Y-axis guide rail and moved in the Y-axis direction; A Z-axis guide rail support fixed to the Y-axis transfer bracket and provided with a Z-axis guide rail; And a Z-axis transport bracket mounted on the Z-axis guide rail and transported in the Z-axis direction, wherein the drug storage tank, the synthetic polymer storage tank, and the double injection nozzle are fixedly installed. In addition, the plotter device includes a drug storage tank for storing the drug and a synthetic polymer storage tank for storing the synthetic polymer, the first supply pipe connected to the drug storage tank is connected to the first injection nozzle and the first injection nozzle Wrapped in the longitudinal direction of the outer side and formed of an annular conduit comprising a double injection nozzle composed of a synthetic polymer, and a second injection nozzle connected to the second supply pipe so that water-soluble or biodegradable material is injected, wherein the drug, synthetic polymer and And a collection table in which the additive is floated. A plurality of drug storage tanks, synthetic polymer storage tanks, and double injection nozzles may be respectively fixed to the Z-axis transfer bracket (not shown).
또한, 본 발명은 세포성장을 촉진하는 약물을 약물 저장탱크에 공급하고, 지지체로 사용되는 합성고분자를 합성고분자 저장탱크에 공급하고, 기공을 생성시키는 수용성 또는 생분해성 물질을 첨가물 저장탱크에 공급하는 단계(단계 A); 및In addition, the present invention is to supply a drug that promotes cell growth to the drug storage tank, to supply the synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank, and to supply the additive storage tank with a water-soluble or biodegradable material that generates pores Step (step A); And
상기 단계 A의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자 및 수용성 또는 생분해성 재료를 각각 제2 공급관과 제3 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 후 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 B);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법을 제공한다.
The drug of step A is introduced into the double injection nozzle through the first supply pipe, and then the synthetic polymer and the water-soluble or biodegradable material are introduced into the double injection nozzle through the second supply pipe and the third supply pipe, respectively, and then floated using a plotter device. It provides a method for producing a cell culture support comprising the step (step B).
본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 있어서, 단계 A는 세포 성장을 촉진하는 약물을 약물 저장탱크에 공급하고, 지지체로 사용되는 합성고분자를 합성고분자 저장탱크에 공급하며, 기공을 생성시키는 수용성 또는 생분해성 물질을 첨가물 저장탱크에 공급하는 단계이다. In the method for producing a cell culture support according to the present invention, step A is to supply a drug for promoting cell growth to the drug storage tank, supplying the synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank, water-soluble to generate pores Or feeding the biodegradable material into the additive storage tank.
상기 단계 A의 약물은 성장인자(growth factor), 사이토카인(cytokine), 항생제, 항균제 등을 사용할 수 있다. 더욱 구체적으로, 상기 성장인자는 골형성단백질(BMP), 세포증식억제 인자(TGF-β), 인슐린 유사 성장인자(IGF), 섬유아세포 성장인자(FGF), 혈소판 유래 성장인자(PDGF), 상피세포 성장인자(KGF), 표피 성장인자(EGF) 등을 사용할 수 있고, 상기 사이토카인은 인터루킨-2, 인터페론-α(IFN-α), 인터페론-β(IFN-β) 등을 사용할 수 있으며, 상기 항생제는 페니실린, 스트렙토마이신, 카나마이신, 네오마이신, 바시트라신, 젠타마이신 및 반코마이신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 사용할 수 있고, 상기 항균제는 암포테리신-비, 니스타틴, 폴리믹신 등을 사용할 수 있다. 상기 약물에는 세포가 포함되거나 포함되지 않을 수 있다. The drug of step A may be a growth factor, a cytokine, an antibiotic, an antibacterial agent, or the like. More specifically, the growth factor is bone morphogenetic protein (BMP), cytostatic factor (TGF-β), insulin-like growth factor (IGF), fibroblast growth factor (FGF), platelet-derived growth factor (PDGF), epithelium Cell growth factor (KGF), epidermal growth factor (EGF), and the like, and the cytokine may be interleukin-2, interferon-α (IFN-α), interferon-β (IFN-β), and the like. The antibiotic may be used at least one selected from the group consisting of penicillin, streptomycin, kanamycin, neomycin, bacitracin, gentamicin and vancomycin, and the antimicrobial agent may be amphotericin-B, nystatin, polymyxin and the like. Can be used. The drug may or may not contain cells.
또한, 상기 단계 A의 합성 고분자는 폴리카프로락톤, 폴리락타이드, 폴리글리콜리드, 폴리다이옥사논으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 사용할 수 있다. In addition, the synthetic polymer of step A may be used one or two or more selected from the group consisting of polycaprolactone, polylactide, polyglycolide, polydioxanone.
또한, 상기 단계 A의 수용성 물질로는 염류용액(salt solution), 수크로즈(sucrose), 폴리에틸렌옥사이드(PEO), 폴리비닐알콜(PVA) 등을 사용할 수 있고, 생분해성 물질로는 폴리글리콜산(polyglycolic acid), 폴리카프로락톤(polycaprolactone), 폴리락틴산(polylactic acid), 폴리다이옥사논(polydioxanone) 등을 사용할 수 있다.
In addition, as the water-soluble material of step A may be used a salt solution (salt solution), sucrose (sucrose), polyethylene oxide (PEO), polyvinyl alcohol (PVA) and the like, as a biodegradable material polyglycolic acid ( polyglycolic acid, polycaprolactone, polylactic acid, polydioxanone, and the like can be used.
다음으로, 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 있어서, 단계 B는 상기 단계 A의 약물 저장탱크에 구비되어 있는 제1 공급관, 합성고분자 저장탱크에 구비되어 있는 제2 공급관 및 첨가물 저장탱크에 구비되어 있는 제3 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 약물, 합성고분자 및 첨가물을 플로팅하는 단계이다. Next, in the method for producing a cell culture support according to the present invention, step B is the first supply pipe provided in the drug storage tank of step A, the second supply pipe and the additive storage tank provided in the synthetic polymer storage tank Injecting the dual injection nozzle through a third supply pipe provided and to float the drug, synthetic polymer and additives using a plotter device.
본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치는 저판과 상기 저판 양측단에 각각 상호 이격되어 돌출 형성되는 일자형의 X축 가이드레일 지지대를 구비하며, 상기 X축 가이드레일 지지대 사이에 상기 수집테이블이 설치되는 베이스프레임; 상기 X축 가이드레일 지지대에 각각 설치되는 X축 가이드레일; Y축 가이드레일이 설치되며 상기 X축 가이드레일에 탑재되어 X축 방향으로 이송되는 Y축 가이드레일 지지대; 상기 Y축 가이드레일에 탑재되어 Y축 방향으로 이송되는 Y축 이송 브라켓; 상기 Y축 이송 브라켓에 고정 설치되며, Z축 가이드레일이 설치되는 Z축 가이드레일 지지대; 및 상기 Z축 가이드레일에 탑재되어 Z축 방향으로 이송되며, 상기 약물 저장탱크, 합성고분자 저장탱크, 첨가물 저장탱크 및 이중 분사노즐이 고정 설치되는 Z축 이송 브라켓;을 포함한다. 또한, 상기 플로터 장치는 약물을 저장하는 약물 저장탱크, 합성고분자를 저장하는 합성고분자 저장탱크 및 수용성 또는 생분해성 물질이 저장되는 첨가물 저장탱크를 구비하고, 상기 약물 저장탱크와 연결되는 제1 공급관은 제1 분사노즐과 연결되고 상기 제1 분사노즐의 외측을 길이방향으로 감싸며 환상 도관으로 형성되어 합성고분자와, 수용성 또는 생분해성 물질이 분사되도록 상기 제2 공급관과 제3 공급관과 연결되는 제2 분사노즐로 이루어진 이중 분사노즐을 포함하며, 상기 약물, 합성고분자 및 첨가물이 플로팅되는 수집테이블을 포함한다. 상기 Z축 이송 브라켓에는 상기 약물 저장탱크, 합성고분자 저장탱크 및 첨가물 저장탱크가 각각 다수개 고정 설치될 수 있다(미도시).
The plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention includes a bottom plate and a linear X-axis guide rail support formed to protrude from each other at both ends of the bottom plate, and between the X-axis guide rail supports. A base frame on which a collection table is installed; X-axis guide rails respectively installed on the X-axis guide rail support; A Y-axis guide rail installed on the X-axis guide rail and installed in the X-axis guide rail; A Y-axis transport bracket mounted on the Y-axis guide rail and moved in the Y-axis direction; A Z-axis guide rail support fixed to the Y-axis transfer bracket and provided with a Z-axis guide rail; And a Z-axis transfer bracket mounted on the Z-axis guide rail and transferred in the Z-axis direction, wherein the drug storage tank, the synthetic polymer storage tank, the additive storage tank, and the dual injection nozzle are fixedly installed. In addition, the plotter device includes a drug storage tank for storing the drug, a synthetic polymer storage tank for storing the synthetic polymer and an additive storage tank for storing the water-soluble or biodegradable material, the first supply pipe connected to the drug storage tank is A second injection connected to the first injection nozzle and connected to the second supply pipe and the third supply pipe so as to surround the outer side of the first injection nozzle in a longitudinal direction and form an annular conduit so that the synthetic polymer and the water-soluble or biodegradable material are injected; It comprises a double spray nozzle consisting of a nozzle, and comprises a collection table in which the drug, synthetic polymer and additives are floated. The drug storage tank, the synthetic polymer storage tank, and the additive storage tank may be fixed to the Z-axis transport bracket, respectively (not shown).
본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법은 수용성 또는 생분해성 물질을 포함하여 약물을 머금고 있다가 수용성 또는 생분해성 물질이 물에 녹거나 생분해되어 생진 기공을 통해 약물이 서서히 서방형으로 방출(releasing)될 수 있으므로, 상기 수용성 또는 생분해성 물질의 양을 조절하여 기공을 조절할 수 있고, 결과적으로 약물 방출까지 조절할 수 있다. 도 5는 본 발명에 따른 세포배양 지지체에서 발생하는 약물 방출을 나타낸 모식도이다. 도 5의 (a)에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 세포배양 지지체에 약물(1)이 함유된 것을 나타내며, 서방형으로 조절되는 것을 알 수 있고, 도 5의 (b)에 나타난 바와 같이, 수용성 또는 생분해성 물질이 녹거나 생분해되어 기공(2)이 발생하고 이를 통해 약물(1)이 방출되는 것을 알 수 있다.
The method for preparing a cell culture support according to the present invention includes a drug containing a water-soluble or biodegradable material, and then slowly releases the drug in a sustained-release form through the pores generated by dissolving the water or biodegradable material in water or biodegrading. The pore can be controlled by adjusting the amount of the water-soluble or biodegradable substance, and consequently, the drug release. Figure 5 is a schematic diagram showing the drug release occurring in the cell culture support according to the present invention. As shown in Figure 5 (a), it shows that the cell culture support according to the present invention contains the drug (1), it can be seen that it is controlled to sustained release, as shown in Figure 5 (b), It can be seen that the water-soluble or biodegradable substance is dissolved or biodegraded to generate pores (2), through which the drug (1) is released.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부된 도면을 참조하며 상세히 설명한다.
Hereinafter, with reference to the accompanying drawings, preferred embodiments of the present invention will be described in detail.
<실시예 1> 세포배양 지지체의 제조 1Example 1 Preparation of
도 1은 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치를 나타낸 모식도이고, 도 2는 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치의 이중 분사노즐을 나타낸 모식도이다. 1 is a schematic diagram showing a plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention, Figure 2 is a schematic diagram showing a double spray nozzle of the plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention.
도 1 및 도 2를 참조하면, 플로터 장치(800)는 베이스프레임(100)을 포함하고, 베이스프레임(100)은 저판(110)과 X축 가이드레일 지지대(120)를 포함한다. 상기 X축 가이드레일 지지대(120)는 일자형의 블록 형상일 수 있는데, 상기 저판(110) 양측단에 각각 상호 이격되어 상부로 돌출 형성된다. 상기 X축 가이드레일 지지대(120)에는 각각 X축 가이드레일(122)이 설치된다. 상기 X축 가이드레일(122)에는 Y축 가이드레일 지지대(310)가 X축 방향으로 이송 가능하도록 탑재된다. 이 경우, 상기 Y축 가이드레일 지지대(310)의 일측단은 일측 X축 가이드레일(122)에 탑재되고, 상기 Y축 가이드레일 지지대(310)의 타측단은 타측 X축 가이드레일(122)에 탑재될 수 있다. 한편, 상기 Y축 가이드레일 지지대(310)의 상면에는 Y축 가이드레일(312)이 설치된다. 상기 Y축 가이드레일(312)에는 Y축 이송 브라켓(410)이 Y축 방향으로 이송 가능하도록 탑재된다. 상기 Y축 이송 브라켓(410)은 Z축 방향으로 세워지는 수직판을 포함한다. 상기 Y축 이송 브라켓(410)에는 Z축 가이드레일 지지대(420)가 설치된다. 상기 Z축 가이드레일 지지대(420)는 상기 Y축 이송 브라켓(410)의 수직판에 고정 설치된다. 한편, 상기 Z축 가이드레일 지지대(420)에는 Z축 가이드레일(422)이 설치된다. 상기 Z축 가이드레일(422)에는 Z축 방향으로 이송 가능하도록 Z축 이송 브라켓(510)이 탑재된다. 상기 Z축 이송 브라켓(510)의 외측면에는 약물 저장탱크(610) 및 합성고분자 저장탱크(620)가 고정 설치된다. 1 and 2, the
상기 약물 저장탱크(610)는 약물이 저장되는 탱크이고, 상기 합성고분자 저장탱크(620)는 지지체를 형성하는 합성고분자가 저장되는 탱크이다. 상기 합성고분자 저장탱크(620)에는 추가적으로 세포배양 지지체에 기공(pore)을 형성하는 수용성 또는 생분해성 물질이 첨가된다. The
상기 플로터 장치(800)는 약물 저장탱크(610)에 연결되는 제1 공급관(611)과 상기 합성고분자 저장탱크(620)에 연결되는 제2 공급관(621)을 포함하고, 약물이 공급되는 상기 제1 공급관(611)의 타측단은 제1 분사노즐(710)로 연결되고, 합성고분자가 공급되는 상기 제2 공급관(621)은 제2 분사노즐(720)과 연결된다. 이중 분사노즐(700)은 제1 분사노즐(710)과 제2 분사노즐(720)로 이루어지고, 제2 분사노즐(720)은 제1 분사노즐(710)의 외측을 길이방향으로 감싸며 환상 도관으로 형성된다. The
상기 X축 가이드레일 지지대(120) 사이에는 수집테이블(200)이 설치된다. 수집테이블(200)은 이중 분사노즐(700)을 통하여 분사된 약물과 합성고분자 및, 수용성 또는 생분해성 물질이 플로팅(plotting)되는 테이블이다.The collection table 200 is installed between the X-axis
상기 수집테이블(200)은 보조 가이드레일(130)에 Y축 방향으로 이송 가능하도록 탑재될 수 있다. 이 경우, 보조 가이드레일(130)의 일측단은 일측 X축 가이드레일 지지대(120)에 연결되고, 보조 가이드레일(130)의 타측단은 타측 X축 가이드레일 지지대(120)에 연결될 수 있다.The collection table 200 may be mounted on the
본 발명에 따른 세포배양 지지체는 상기 플로터 장치(800)를 이용하여 제조할 수 있으며, 먼저 약물을 약물 저장탱크(610)에 공급하고, 지지체를 형성하는 합성고분자를 합성고분자 저장탱크(620)에 공급하며, 기공을 형성하는 수용성 또는 생분해성 물질을 합성고분자 저장탱크(620)에 첨가한다. 상기 약물은 제1 공급관(611)을 통해 제1 분사노즐(710)로 유입시키고, 상기 합성고분자와, 수용성 또는 생분해성 물질은 제 2 공급관(621)을 통해 제2 분사노즐(720)로 유입시킨 후 플로터 장치(800)를 이용하여 플로팅하여 세포배양 지지체를 제조하였다.
Cell culture support according to the invention can be prepared using the
<실시예 2> 세포배양 지지체의 제조 2Example 2 Preparation of
도 3은 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치를 나타낸 모식도이고, 도 4는 본 발명에 따른 세포배양 지지체의 제조방법에 사용되는 플로터 장치의 이중 분사노즐을 나타낸 모식도이다. Figure 3 is a schematic diagram showing a plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention, Figure 4 is a schematic diagram showing a double spray nozzle of the plotter device used in the method for producing a cell culture support according to the present invention.
도 3 및 도 4를 참조하면, 상기 Z축 이송 브라켓(510)의 외측면에는 약물 저장탱크(610), 합성고분자 저장탱크(620) 및 첨가물 저장탱크(630)가 고정 설치된다. 3 and 4, the
상기 약물 저장탱크(610)는 약물이 저장되는 탱크이고, 상기 합성고분자 저장탱크(620)는 지지체를 형성하는 합성고분자가 저장되는 탱크이고, 첨가물 저장탱크(630)는 세포배양 지지체에 기공(pore)을 형성하는 수용성 또는 생분해성 물질이 저장되는 탱크이다. The
상기 플로터 장치(900)는 약물 저장탱크(610)에 연결되는 제1 공급관(611)과 상기 합성고분자 저장탱크(620)에 연결되는 제2 공급관(621) 및 첨가물 저장탱크(630)에 연결되는 제3 공급관(631)을 포함하고, 약물이 공급되는 상기 제1 공급관(611)의 타측단은 제1 분사노즐(710)로 연결되고, 합성고분자가 공급되는 상기 제2 공급관(621)과 첨가물이 공급되는 상기 제3 공급관(631)은 제2 분사노즐(720)과 연결된다. 이중 분사노즐(700)은 제1 분사노즐(710)과 제2 분사노즐(720)로 이루어지고, 제2 분사노즐(720)은 제1 분사노즐(710)의 외측을 길이방향으로 감싸며 환상 도관으로 형성된다. The
상기 X축 가이드레일 지지대(120) 사이에는 수집테이블(200)이 설치된다. 수집테이블(200)은 이중 분사노즐(700)을 통하여 분사된 약물, 합성고분자와, 수용성 또는 생분해성 물질이 플로팅(plotting)되는 테이블이다.The collection table 200 is installed between the X-axis
상기 수집테이블(200)은 보조 가이드레일(130)에 Y축 방향으로 이송 가능하도록 탑재될 수 있다. 이 경우, 보조 가이드레일(130)의 일측단은 일측 X축 가이드레일 지지대(120)에 연결되고, 보조 가이드레일(130)의 타측단은 타측 X축 가이드레일 지지대(120)에 연결될 수 있다.The collection table 200 may be mounted on the
본 발명에 따른 세포배양 지지체는 상기 플로터 장치(900)를 이용하여 제조할 수 있으며, 먼저 약물을 약물 저장탱크(610)에 공급하고, 지지체를 형성하는 합성고분자를 합성고분자 저장탱크(620)에 공급하며, 기공을 형성하는 수용성 또는 생분해성 물질을 첨가물 저장탱크(630)에 공급한다. 상기 약물은 제1 공급관(611)을 통해 제1 분사노즐(710)로 유입시키고, 상기 합성고분자를 제 2 공급관(621)을 통해 제2 분사노즐(720)로 유입시키며, 수용성 또는 생분해성 물질을 제3 공급관(631)을 통해 제2 분사노즐(720)로 유입시킨 후 플로터 장치(800)를 이용하여 플로팅하여 세포배양 지지체를 제조하였다.
Cell culture support according to the invention can be prepared using the
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진자가 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 또는 변형하여 실시할 수 있다.
While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is clearly understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be taken in conjunction with the present invention. The present invention can be variously modified or modified.
S100: 단계 1 S110: 단계 2
S200: 단계 A S210: 단계 B
1: 약물 2: 기공
100: 베이스프레임 110: 저판
120: 지지대 122: X축 가이드레일
200: 수집테이블
310: Y축 가이드레일 지지대 312: Y축 가이드레일
410: Y축 이송 브라켓 420: Z축 가이드레일 지지대
422: Z축 가이드레일
510: Z축 이송 브라켓
610: 약물 저장탱크 611: 제1 공급관
620: 합성고분자 저장탱크 621: 제2 공급관
630: 첨가물 저장탱크 631: 제3 공급관
700: 이중 분사노즐 710: 제1 분사노즐
720: 제2 분사노즐
800, 900: 플로터 장치S100: step 1 S110:
S200: Step A S210: Step B
1: drug 2: pore
100: base frame 110: bottom plate
120: support base 122: X-axis guide rail
200: collection table
310: Y-axis guide rail support 312: Y-axis guide rail
410: Y-axis feed bracket 420: Z-axis guide rail support
422: Z-axis guide rail
510: Z axis feed bracket
610: drug storage tank 611: first supply pipe
620: synthetic polymer storage tank 621: second supply pipe
630: additive storage tank 631: third supply pipe
700: dual jet nozzle 710: first jet nozzle
720: second injection nozzle
800, 900: plotter device
Claims (14)
상기 단계 1의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자 및 수용성 또는 생분해성 물질을 제2 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 2);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법.
Supplying a drug that promotes cell growth to the drug storage tank, and supplying a synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank, and then supplying a water-soluble or biodegradable substance that creates pores to the synthetic polymer storage tank (step One); And
Injecting the drug of step 1 into the double injection nozzle through the first supply pipe and then introducing the synthetic polymer and water-soluble or biodegradable material into the double injection nozzle through the second supply pipe and floating by using a plotter device (Step 2) Method for producing a cell culture support comprising a.
The method of claim 1, wherein the drug of step 1 is a growth factor, a cytokine, an antibiotic, or an antimicrobial agent.
According to claim 2, wherein the growth factor BMP, cell growth inhibitory factor (TGF-β), insulin-like growth factor (IGF), fibroblast growth factor (FGF), platelet-derived growth factor (PDGF) , Epidermal growth factor (KGF) or epidermal growth factor (EGF) method for producing a cell culture support characterized in that.
The method of claim 2, wherein the cytokine is interleukin-2, interferon-α (IFN-α) or interferon-β (IFN-β).
The method of claim 2, wherein the antibiotic is at least one selected from the group consisting of penicillin, streptomycin, kanamycin, neomycin, bacitracin, gentamycin and vancomycin.
The method of claim 2, wherein the antimicrobial agent is amphotericin-r, nistatin or polymyxin.
The method of claim 1, wherein the synthetic polymer of step 1 is one or two or more cells selected from the group consisting of polycaprolactone, polylactide, polyglycolide, polydioxanone Way.
The method of claim 1, wherein the water-soluble substance of step 1 is a salt solution, sucrose, sucrose, polyethylene oxide (PEO), or polyvinyl alcohol (PVA).
The cell according to claim 1, wherein the biodegradable substance of step 1 is polyglycolic acid, polycaprolactone, polylactic acid, or polydioxanone. Method for preparing a culture support.
상기 X축 가이드레일 지지대에 각각 설치되는 X축 가이드레일;
Y축 가이드레일이 설치되며 상기 X축 가이드레일에 탑재되어 X축 방향으로 이송되는 Y축 가이드레일 지지대;
상기 Y축 가이드레일에 탑재되어 Y축 방향으로 이송되는 Y축 이송 브라켓;
상기 Y축 이송 브라켓에 고정 설치되며, Z축 가이드레일이 설치되는 Z축 가이드레일 지지대; 및
상기 Z축 가이드레일에 탑재되어 Z축 방향으로 이송되며, 상기 약물 저장탱크, 합성고분자 저장탱크 및 이중 분사노즐이 고정 설치되는 Z축 이송 브라켓;을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포배양 지지체의 제조방법.
According to claim 1, The plotter has a base plate and the X-axis guide rail support that is formed to be spaced apart from each other at both ends of the bottom plate and the bottom plate, the base frame is installed between the X-axis guide rail support;
X-axis guide rails respectively installed on the X-axis guide rail support;
A Y-axis guide rail installed on the X-axis guide rail and installed in the X-axis guide rail;
A Y-axis transport bracket mounted on the Y-axis guide rail and moved in the Y-axis direction;
A Z-axis guide rail support fixed to the Y-axis transfer bracket and provided with a Z-axis guide rail; And
A Z-axis transport bracket mounted on the Z-axis guide rail and transported in the Z-axis direction, wherein the drug storage tank, the synthetic polymer storage tank, and the dual injection nozzle are fixedly installed. .
The method of claim 10, wherein the drug storage tank and the synthetic polymer storage tank are fixed to each of the Z-axis transport bracket, characterized in that the manufacturing method of the cell culture support.
상기 단계 A의 약물을 제1 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시킨 후 합성 고분자 및, 수용성 또는 생분해성 재료를 각각 제2 공급관과 제3 공급관을 통해 이중 분사노즐로 유입시키고 플로터 장치를 이용하여 플로팅하는 단계(단계 B);를 포함하는 세포배양 지지체의 제조방법.
Supplying a drug that promotes cell growth to the drug storage tank, supplying the synthetic polymer used as a support to the synthetic polymer storage tank, and supplying the additive storage tank with a water-soluble or biodegradable substance that generates pores (step A). ; And
The drug of step A is introduced into the double injection nozzle through the first supply pipe, and then the synthetic polymer and the water-soluble or biodegradable material are introduced into the double injection nozzle through the second supply pipe and the third supply pipe, respectively, and floated using a plotter device. Method for producing a cell culture support comprising the step (step B).
상기 X축 가이드레일 지지대에 각각 설치되는 X축 가이드레일;
Y축 가이드레일이 설치되며 상기 X축 가이드레일에 탑재되어 X축 방향으로 이송되는 Y축 가이드레일 지지대;
상기 Y축 가이드레일에 탑재되어 Y축 방향으로 이송되는 Y축 이송 브라켓;
상기 Y축 이송 브라켓에 고정 설치되며, Z축 가이드레일이 설치되는 Z축 가이드레일 지지대; 및
상기 Z축 가이드레일에 탑재되어 Z축 방향으로 이송되며, 상기 약물 저장탱크, 합성고분자 저장탱크, 첨가물 저장탱크 및 이중 분사노즐이 고정 설치되는 Z축 이송 브라켓;을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포배양 지지체의 제조방법.
The base frame according to claim 12, wherein the plotter device has a linear X-axis guide rail support formed on the bottom plate and both sides of the bottom plate to protrude from each other, and a collection table is installed between the X-axis guide rail supports. ;
X-axis guide rails respectively installed on the X-axis guide rail support;
A Y-axis guide rail installed on the X-axis guide rail and installed in the X-axis guide rail;
A Y-axis transport bracket mounted on the Y-axis guide rail and moved in the Y-axis direction;
A Z-axis guide rail support fixed to the Y-axis transfer bracket and provided with a Z-axis guide rail; And
A Z-axis transport bracket mounted on the Z-axis guide rail and transported in the Z-axis direction, wherein the drug storage tank, the synthetic polymer storage tank, the additive storage tank, and the double injection nozzle are fixedly installed. Method for producing a support.
The method of claim 13, wherein the drug storage tank, the synthetic polymer storage tank, and the additive storage tank are respectively fixed to the Z-axis transport bracket.
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