KR101158039B1 - Immune-Boosting Composition Comprising Immuned Beestings and Immuned York - Google Patents

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Abstract

본 발명은 특정 항원으로 면역된 면역 초유 및 면역 난황을 포함하는 면역증강 조성물에 관한 것으로, 더 구체적으로 본 발명은 양축농가에서 발생하는 주요 질병을 감소시킬 수 있는 특이 항체를 포함하는 면역 초유와 면역 난황을 생산하여 이를 포집, 보존, 건조, 멸균 후 제조한 분말형 복합초유를 제공한다.

본 발명의 면역증강 조성물은 자축의 혈중 내 특이 항체가를 고도의 수준으로 높여 신생 자축의 질병을 유의적으로 감소시키고 면역원성을 증가시킬 수 있다.
The present invention relates to immunopotentiating compositions comprising immune colostrums and immune yolks immunized with specific antigens, and more particularly, the present invention relates to immune colostrums and immunizations comprising specific antibodies capable of reducing major diseases occurring in farms. It provides powdered complex colostrum prepared by producing egg yolk and collecting, preserving, drying and sterilizing it.

The immunopotentiating composition of the present invention can significantly increase the specific antibody titer in the blood of the axial axis to a high level and significantly reduce the disease of the new axial axis and increase the immunogenicity.

Description

면역 초유 및 면역 난황이 복합된 면역증강 조성물 {Immune-Boosting Composition Comprising Immuned Beestings and Immuned York}Immune-Boosting Composition Comprising Immuned Beestings and Immuned York}

본 발명은 원하는 면역글로불린이 포함된 면역 초유 및 면역 난황이 복합된 면역증강 조성물에 관한 것으로, 더 구체적으로는 특이 항체로 면역된 초유와 난황 진피추출물 등이 첨가된 복합초유 조성물 및 이의 생산 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 조성물을 급여하여 어린 동물의 면역력을 증강시키는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to an immuno-enhanced composition comprising a combination of immune colostrum and immune yolk containing the desired immunoglobulin, and more specifically, to a complex colostrum composition to which colostrum and egg yolk dermis extract, etc. immunized with a specific antibody are added, and a method for producing the same. It is about. The present invention also relates to a method of feeding the composition to enhance immunity of young animals.

송아지의 설사증은 전 세계적으로 널리 분포된 질병으로, 송아지 폐사의 가장 높은 비율을 차지한다. 송아지의 폐사율은 최소한 평균 5~25% 정도로써 사양관리 조건에 따라 많은 차이가 있다. 송아지 설사는 세균, 바이러스, 기생충 등의 병원성 감염, 질이 나쁜 대용유의 급여, 우유의 과다급여, 소화가 잘 안 되는 탄수화물이나 거친 조사료의 다량섭취, 우유의 급변, 한랭, 보온상태 불량, 이물 섭취, 장거리 수송, 심리적 스트레스, 어미소의 유방염, 어미소의 비만, 어미소의 영양결핍 등의 매우 다양한 원인으로 발생한다.
Calf diarrhea is the most prevalent disease worldwide, with the highest rate of calf mortality. The average mortality of calves is at least 5-25%, depending on the conditions of specification management. Calf diarrhea, pathogenic infections such as bacteria, viruses, parasites, poor quality substitutes, overdose of milk, ingestion of indigestible carbohydrates and coarse fertilizers, sudden changes in milk, cold, poor warmth, and foreign body intake , Long distance transport, psychological stress, mastitis of the mother, obesity of the mother, malnutrition of the mother.

또한, 소의 호흡기 질병은 밀집 사육, 집단 사육에 따른 스트레스, 오염된 공기 등의 환경요인에 의해 호흡기계 점막이 손상되면 자축은 기본적인 면역체계가 약화되므로 항병력이 떨어진다. 저하된 생체 환경에 세균 또는 바이러스가 복합 감염되면 호흡기 질병이 발생하게 된다. 호흡기 질병의 미생물학적 원인체는 주로 다양한 세균과 바이러스가 대부분이다. 주요한 세균성 원인체로는 파스튜렐라 균, 헤필루스 균 및 마이코플라즈마 균 등이며, 바이러스성 원인체로는 소 전염성비기관염 바이러스 (IBRV), 소 바이러스설사증 바이러스 (BVDV), 소 파라인플루엔자 바이러스 (PI-3), 소 합포체성폐렴 바이러스 (BRSV) 등이다.
In addition, the respiratory disease of cows, when the respiratory system mucosa is damaged by dense breeding, stress caused by group breeding, polluted air, etc., the axial axis weakens the basic immune system, so the anti-morbidity falls. Recombinant infection of bacteria or viruses in a degraded biological environment results in respiratory illness. The microbiological agents of respiratory diseases are mainly various bacteria and viruses. The major bacterial causes are Pasteurella, Hephilus and Mycoplasma. Viral causes include bovine infectious rhinitis virus (IBRV), bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine parainfluenza virus (PI-3). ) And microvesicle pneumonia virus (BRSV).

한편, 신생 송아지의 경우에는 초유 급여를 통해 어미로부터 충분한 수동면역을 획득하지 못하면 장관계 또는 호흡기계 점막에서 1차적으로 방어가 가능한 면역글로불린 A (IgA)가 충분하지 못하여 장관계 점막과 호흡기계 점막의 파괴가 발생하게 된다. 그로 인해 점막에 대한 2차 감염이 쉽게 되고 송아지의 건강 상태는 심각하게 된다. 그러므로, 어미의 초유를 충분히 섭취하게 함으로써 IgA에 의한 1차적인 점막 면역을 충분히 발휘할 수 있도록 하고, 면역글로불린 G (IgG)에 의한 패혈증 또는 바이러스혈증으로 발전하지 못하게 하는 것이 송아지 폐사를 줄이는 핵심이다 (Tizard, Ian R., 2004). 이를 위하여 분만 직후는 물론 이유 전후에 송아지의 면역력을 높이기 위해서는 특이항체가 충분한 초유를 신생 자우에게 먹임으로써, 송아지 혈중 내에 항체가를 높게 유지시키면 병에 대한 저항력이 커져서 소화기 질병 또는 호흡기 질병에 잘 걸리지 않을 뿐만 아니라 혼합감염 역시 막을 수 있다.
On the other hand, in the case of newborn calves, the intestinal mucosa and respiratory mucosa are insufficient due to the lack of sufficient immunoglobulin A (IgA) that can be primarily defended in the intestinal or respiratory mucosa if colostrum does not provide sufficient passive immunity from the mother. Destruction occurs. This makes secondary infections easier on the mucous membrane and puts the calf in serious condition. Therefore, it is key to reduce calf mortality by ensuring that the mother's colostrum is adequately ingested so that primary mucosal immunity caused by IgA can be exerted and prevented from developing sepsis or viremia caused by immunoglobulin G (IgG). Tizard, Ian R., 2004). To this end, in order to increase calf immunity immediately after delivery and before and after weaning, by feeding colostrum with sufficient amounts of specific antibodies to newborn cows, maintaining high antibody value in calf blood increases the resistance to disease, making it difficult to develop digestive or respiratory diseases. Not only that, but mixed infections can also be prevented.

젖소는 분만 후 1주일 정도 자축의 원활한 성장을 가능케 하는 초유를 분비한다. 특히, 일반 우유에 비해 초유 내에는 면역인자, 성장인자, 상처치유인자, 항균인자 등 생체 방어 기능에 중요한 역할을 하는 생리활성인자를 다량 함유하고 있다 (Buttler, 1971, 1986. Pakkanen and Aalto, 1997). 또한, 초유는 신생아의 풍부한 영양 공급원으로써 DNA 합성과 세포분열 활성을 증가시키며 신생아의 면역계 (immune system)를 확립하고 그 활성을 촉진함으로써 소화관내에 세균이나 바이러스 등의 감염을 막아준다 (Wilson, 1997; Schams, 1994).
The cows secrete colostrum, which allows for a smooth growth of their cattle for about a week after delivery. In particular, compared to regular milk, colostrum contains a large amount of physiologically active factors that play an important role in biological defense functions such as immune factors, growth factors, wound healing factors, and antibacterial factors (Buttler, 1971, 1986. Pakkanen and Aalto, 1997). ). In addition, colostrum is a rich nutrient source for newborns, which increases DNA synthesis and cell division activity, establishes the immune system of the newborn, and promotes its activity to prevent infection of bacteria and viruses in the digestive tract (Wilson, 1997; Schams, 1994).

초유 내의 대표적인 면역 물질로서는 혈액 내에 함유된 IgG, IgM과 주로 점막 조직에 존재하여 직접적 방어를 담당하는 IgA가 있다 (Buttler, 1994). 또한, 초유 내의 성장인자로서 Insulin-like Growth Factor (IGF-Ⅰ, Ⅱ), Epidermal Growth Factor (EGF), Transforming Growth Factor (TGF), Platelet-Derived Growth Factor (PDGF) 등이 대표적인 Milk Growth Factor (MGF)라고 보고되어 있다 (Butler, 1994; Regester et al., 1997).
Representative immune substances in colostrum are IgG, IgM contained in the blood and IgA, which is mainly present in mucosal tissues and is responsible for direct defense (Buttler, 1994). In addition, Insulin-like Growth Factor (IGF-I, II), Epidermal Growth Factor (EGF), Transforming Growth Factor (TGF), and Platelet-Derived Growth Factor (PDGF) are typical growth factors in colostrum. (Butler, 1994; Regester et al., 1997).

한편, 분만 후 시간이 경과함에 따라 젖소 초유속의 면역물질 성분은 6 시간 내에 50%에서 20 시간이 경과하면 12%로 급격히 떨어지고, 초유 내의 풍부한 영양인자와 면역인자들 역시 분만 후 시간이 지남에 따라 감소하게 된다 (Gregory S., Kelly, N. D., 2003). 특히, 신생 자우의 경우에는 태어난 초기 24시간 정도만 소화효소를 분비하지 않고, 소화관의 장관벽을 통해 초유 내 면역 물질들을 원형 그대로 흡수하게 되므로 분만 후 하루 이내에 송아지에게 초유를 포유시키는 것은 매우 중요하다 (Tizard, Ian R., Schubot, Richard M., 2004). 그러므로, 분만 관찰과 처치를 철저히 하여 송아지가 출생한 직후 30분 이내에 어미소의 초유를 포유할 수 있도록 도와주거나 인공포유를 실시함으로써 늦어도 24시간 이내에는 충분한 양의 초유를 (1.0~1.5ℓ)을 먹이도록 하여야 한다.
On the other hand, as time passes after delivery, the immune component of the cow's superfluid drops sharply from 50% within 6 hours to 12% after 20 hours, and the rich nutrients and immunofactors in colostrum also change over time after delivery. Decreased (Gregory S., Kelly, ND, 2003). In particular, newborn cows do not secrete digestive enzymes only during the first 24 hours of birth, and they absorb the immune substances in colostrum through the gut wall of the digestive tract as it is. Tizard, Ian R., Schubot, Richard M., 2004). Therefore, thorough observation and treatment of the calf will help the mammary colostrum to be delivered within 30 minutes of the calf's birth, or by artificial breastfeeding, a sufficient amount of colostrum (1.0-1.5l) should be obtained within 24 hours at the latest. It must be fed.

한편, 포유동물의 면역체계와 마찬가지로 닭의 경우에는 계란을 통하여 태어날 병아리에게 면역항체를 이행시킴으로써 해로운 병원균의 침입으로부터 병아리를 보호하게 된다. 즉, 어미닭의 혈청 내 항체가 난황내로 이행되고 (york immunoglobulin ; IgY), 이것이 발육 중인 계태아와 금방 부화한 병아리의 면역항체가 된다 (Akita, E.M. and Li Chan, E.C.Y., 1998).
On the other hand, as in the mammal's immune system, chickens protect the chicks from invading harmful pathogens by transferring immune antibodies to chicks born through eggs. That is, the antibody in the serum of the mother chicken is transferred into yolk (york immunoglobulin; IgY), which becomes the immune antibody of developing chicks and newly hatched chicks (Akita, EM and Li Chan, ECY, 1998).

특히 관련 연구 'Field evaluation of chicken egg yolk immunoglobulins specific for bovine rotavirus in neonatal calves'에서는 송아지 설사의 주 원인균인 로타바이러스의 치료에 난황 내의 면역글로불린의 효과가 있다고 보고하였으며, 'Chicken Egg Yolk Antibodies as Therapeutics in Enteric Infectious Disease'에서는 난황속의 면역글로불린이 소의 로타바이러스 외에 대장균, 여시니아, 코로나, 살모넬라 등 장내 감염균에 대해서도 효과가 크며, 미래의 동물과 사람의 장내감염증에 면역난황이 큰 역할을 할 것이라고 보고하였다.
In particular, the related field 'Field evaluation of chicken egg yolk immunoglobulins specific for bovine rotavirus in neonatal calves' reported the effect of immunoglobulin in egg yolk on the treatment of rotavirus, a major causative agent of diarrhea in calves, and' Chicken Egg Yolk Antibodies as Therapeutics in Enteric Infectious Disease reported that immunoglobulins in egg yolk are effective against gut infections such as E. coli, yeastia, corona, and salmonella in addition to bovine rotavirus, and that immune yolk will play a significant role in the future infection of animals and humans. .

특히, 포유동물에 비해 산란계는 대규모 사육이 쉽고 1수당 1년간 평균 285개의 계란을 생산해 낼 수 있다. 난황 ml당 8~20mg의 IgY를 함유하며, 난황 1개의 무게는 약 15~17g이므로, 계란 1개의 총 난황글로부린 (IgY)은 136~340mg이며, 산란계 한 마리로부터 1년에 30g 이상의 IgY를 얻을 수 있다. 1일째에 채취한 초유 100ml로부터 생산할 수 있는 IgG의 양은 3-4g이므로 년간 산란계 1수로부터 난황을 통해 생산할 수 있는 IgY의 량은 초유 내 IgG의 10배 정도이다 (Sim, J. S. 2003). In particular, laying hens are easier to breed on a larger scale than mammals and can produce an average of 285 eggs per year per breeder. It contains 8 ~ 20mg of IgY per ml of egg yolk, and the weight of one egg yolk is about 15 ~ 17g, so the total egg yolk globulin (IgY) per egg is 136 ~ 340mg and more than 30g of IgY per year from one laying hen. Can be. The amount of IgG that can be produced from 100 ml of colostrum collected on the first day is 3-4 g, so that the amount of IgY that can be produced from egg laying water per year through egg yolk is about 10 times that of IgG in colostrum (Sim, J. S. 2003).

산란계에 특이 항원을 주사하면 특이 항체가 포함된 계란을 얻을 수 있고, 이를 가공한 면역 난황은 대장균, 살모넬라, 특정 바이러스에 대한 특정 IgY를 생산할 수 있다. 그러므로, 사람과 동물들에게서 발생하는 특정 질환의 예방과 치료에 응용할 수 있으며, 또한 신생축의 초유를 대체하여 활용할 수 있다.
Injection of a specific antigen into the laying hens yields eggs containing specific antibodies, and the processed immune yolks can produce specific IgY against E. coli, Salmonella and certain viruses. Therefore, it can be applied to the prevention and treatment of certain diseases occurring in humans and animals, and can also be used as a substitute for colostrum of new growth.

신생자축에게 발생하는 질병과 폐사의 문제점을 해결하기 위한 방안으로써 주로 소화기와 호흡기병을 유발하여 치명적인 경과를 초래하는 수종의 특이항원을 불활화 처리한 백신을 분만전의 젖소와 산란계에게 투여하게 되면, 체내에 특이항체가 형성되므로 분만한 젖소는 고역가의 면역글로부린(Ig)을 함유한 초유를, 산란계는 고역가의 면역 난황글로불린 (IgY)을 함유한 면역계란을 생산한다. 특이 면역초유와 면역난황을 건조, 가공, 멸균처리를 하여 분말형 복합초유를 만든 후, 이들을 신생축에게 출생 후 3시간 내에 긴급 급여하면, 고역가의 면역물질이 자축에게 이행되므로 신생축의 질병과 폐사를 개선시키고, 보존성과 이용성을 획기적으로 증대시킬 수 있는 방법을 확인하고, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.In order to solve the disease and mortality problems of newborn cattle, when a vaccine inactivated several specific antigens that induce digestive and respiratory diseases and cause fatal course is administered to cows and laying hens before delivery, Because of the formation of specific antibodies in the body, delivery cows produce colostrum containing high titers of immunoglobulin (Ig) and laying hens produce immune eggs containing high titers of immune yolk globulin (IgY). After drying, processing and sterilizing specific immune colostrum and egg yolk, make powdered complex colostrum, and if they are urgently given to new livestock within 3 hours after birth, high titer of immune substance is transferred to the livestock, which causes disease and mortality of new livestock. The present invention has been made to identify a method that can improve the preservation efficiency and dramatically increase the preservation and usability, and to complete the present invention.

본 발명의 특정 항원으로 면역된 면역 초유와 면역 난황을 포함한 면역증강 조성물을 제공하고자 한다. It is intended to provide an immunopotentiating composition comprising immune colostrum and immune yolk immunized with a specific antigen of the present invention.

또한, 본 발명은 특정 항원으로 면역된 면역 초유와 면역 난황을 생산하여 이를 건조 및 가공하는 면역증강 조성물의 제조방법을 제공하고자 한다. In addition, the present invention is to provide a method for producing an immuno-enhancing composition to produce the immune colostrum and immune yolk immunized with a specific antigen, drying and processing it.

또한 본 발명의 다른 목적은 상기 방법에 의하여 생산된 제품과 이의 급여 방법 및 이를 통한 동물의 면역증강 방법을 제공하는 것이다. In addition, another object of the present invention is to provide a product produced by the above method and a method of feeding the same, and a method of boosting the animal through the same.

본 발명자는 상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 일례로 주로 소화기와 호흡기병을 유발하여 치명적인 경과를 초래하는 수종의 특이항원을 불활화처리한 백신을 분만 전의 젖소와 산란계에게 투여하게 되면, 체내에 특이항체가 형성되므로 분만한 젖소는 고역가의 면역글로부린 (Ig)을 함유한 초유를, 산란계는 고역가의 면역난황글로불린 (IgY)을 함유한 면역계란을 생산한다. 이들 특이 면역 초유와 면역 난황을 포집, 건조, 가공, 병입, 멸균처리를 하여 신생 송아지에게 급여하기 용이한 분말형 복합초유를 만들기 위한 방법을 개발하였다.In order to achieve the above object, the present inventors, for example, when a vaccine inactivated several specific antigens, which mainly cause digestive and respiratory diseases and cause fatal course, is administered to cows and laying hens before delivery, Because specific antibodies are formed, delivery cows produce colostrum containing high titers of immunoglobulin (Ig), and laying hens produce immune eggs containing high titers of immune yolk globulin (IgY). We have developed a method for making powdered complex colostrum that is easy to feed to newborn calves by collecting, drying, processing, bottling, and sterilizing these specific immune colostrums and immune yolks.

또한, 본 발명에서는 소화 흡수성과 기호성을 획기적으로 증대시킬 수 있는 진피 등과 자일리톨을 첨가하여, 이들을 신생축에게 출생 후 3시간 내에 긴급 급여하면, 고역가의 면역물질이 자축에게 이행되므로 신생축의 질병과 폐사를 효율적으로 개선시킬 수 있음을 확인하였다.
In addition, in the present invention, by adding the dermis and xylitol, which can dramatically increase digestive absorption and palatability, and urgently feed them to the new livestock within 3 hours after birth, high titers of immune substances are transferred to the livestock, resulting in disease and mortality of the new livestock. It was confirmed that can be efficiently improved.

즉, 본 발명은 백신으로 면역된 어미 포유류로부터 수득한 면역 초유 및 어미 조류로부터 수득한 면역 난황을 함유하는 면역증강 조성물을 제공한다. 또한, 상기 백신은 대장균, 살모넬라, 소 로타바이러스, 소 코로나 바이러스, 소 바이러스점막병 바이러스, 파스튜렐라 멀토시다 및 파스튜렐라 헤모라니티카로 이루어진 그룹으로 선택되는 미생물에 대한 백신일 수 있다.That is, the present invention provides an immunopotentiating composition containing immune colostrum obtained from a mother mammal immunized with a vaccine and an immune yolk obtained from a mother bird. The vaccine may also be a vaccine against a microorganism selected from the group consisting of E. coli, Salmonella, bovine rotavirus, bovine corona virus, bovine virus mucosal virus, Pasteurella multocida and Pasteurella hemoranitica.

또한, 본 발명의 조성물의 면역 초유와 면역 난황은 필요에 따라 적절한 배합비로 구성될 수 있으며, 바람직하게는 각각의 중량배합비가 1:1로 포함될 수 있다. In addition, the immune colostrum and the egg yolk of the composition of the present invention may be composed of an appropriate blending ratio as necessary, preferably, each weight ratio may be included in 1: 1.

또한, 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 액체, 정체 또는 캡슐형 형태로 제조될 수 있으며, 바람직하게는 분말 형태로 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물, 식품, 식품 첨가제 또는 건강 기능식품 등으로 제조될 수 있다. In addition, the composition of the present invention may be prepared in powder, granule, liquid, stagnate or capsule form, and preferably in powder form. In addition, the composition of the present invention may be prepared as a pharmaceutical composition, food, food additives or health functional food.

또한, 본 발명의 조성물은 보존의 목적으로 자몽씨추출물이 더 추가될 수 있으며, 일례로 500~1000ppm의 농도로 추가될 수 있다. In addition, the composition of the present invention may be added grapefruit seed extract for the purpose of preservation, for example, may be added at a concentration of 500 ~ 1000ppm.

또한, 본 발명의 조성물은 소화 또는 진통의 목적으로 진피, 작약 또는 감초 추출물이 더 추가될 수 있다. 일례로, 상기 추출물들은 각각 초유 10g당 1~5g 첨가될 수 있다.In addition, the composition of the present invention may be further added dermis, peony or licorice extract for the purpose of digestion or analgesic. For example, the extracts may be added 1 ~ 5g per 10g of colostrum, respectively.

또한, 본 발명의 조성물은 감미 또는 발효억제의 목적으로 자일리톨이 더 추가될 수 있으며, 일례로 상기 자일리톨은 1~5중량% 첨가될 수 있다. In addition, the composition of the present invention may be further added to xylitol for the purpose of sweetening or inhibition of fermentation, for example the xylitol may be added 1 to 5% by weight.

한편, 본 발명은 본 발명의 조성물을 급여하여 개체의 면역을 증강시키는 방법을 제공한다. 특히, 상기 급여는 바람직하게는 분만 12시간 내에 이루어지는 것을 포함한다.On the other hand, the present invention provides a method of enhancing the immunity of an individual by feeding the composition of the present invention. In particular, the salary preferably comprises within 12 hours of delivery.

또한, 본 발명은 (a) 어미 동물에게 특정 미생물 항원을 백신하여 면역 초유 및 난항을 채취하는 단계; 및 (b) 상기 면역 초유 및 난항을 혼합하여 면역증강 조성물을 제조하는 단계;로 이루어지는 면역증강조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 특히, 상기 미생물은 대장균 (Escheria Coli), 살모넬라 (Salmonella), 로타바이러스 (Bovine rota virus), 코로나바이러스 (Bovine corona virus), 전염성비기관염 (Infectious bovine rhinotrichitis ; IBR), 바이러스점막병 (Bovine vira disease-mucosal disease ; BVD-MD), 파스튜렐라 멀토시다 (Pasturella multocida) 및 파스튜렐라 헤모라이티카 (Pasturella hemolytica)로 이루어진 그룹으로 선택될 수 있다. 또한, 상기 면역 초유는 포유류로부터, 면역 난황은 조류로부터 수득할 수 있다. In addition, the present invention comprises the steps of (a) vaccinating a specific microbial antigen to the mother animal to obtain immune colostrum and eggs; And (b) mixing the immune colostrum and egg to prepare an immuno-enhancing composition. In particular, the microorganisms include Escheria Coli, Salmonella, Bovine rota virus, Bovine corona virus, Infectious bovine rhinotrichitis (IBR), Bovine vira disease -mucosal disease (BVD-MD), Pasteurella multocida, and Pastureella hemolytica. In addition, the immune colostrum can be obtained from mammals, and the immune yolk from birds.

또한, 본 발명의 조성물은 건조하여 분말형태로 제조될 수 있으며, 제조방법은 통상적인 방법에 의해 수행될 수 있다.
In addition, the composition of the present invention can be dried and prepared in powder form, the production method can be carried out by conventional methods.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

1. 특이항원의 접종 및 채혈
1. Inoculation and Blood Collection of Specific Antigens

본 발명의 면역증강 조성물은, 백신으로 면역된 어미 포유류로부터의 면역 초유 및 어미 조류로부터의 면역 난황을 포함한다. 또한, 상기 백신은 이에 제한되는 것은 아니지만, 대장균 (Escheria Coli), 살모넬라 (Salmonella), 로타바이러스 (Bovine rota virus), 코로나바이러스 (Bovine corona virus), 전염성비기관염 (Infectious bovine rhinotrichitis ; IBR), 바이러스점막병 (Bovine vira disease-mucosal disease ; BVD-MD), 파스튜렐라 멀토시다 (Pasturella multocida) 및 파스튜렐라 헤모라이티카 (Pasturella hemolytica)로 이루어진 그룹으로 선택되는 미생물에 대한 백신일 수 있다.
The immunopotentiating composition of the present invention includes immune colostrum from the mother mammal immunized with the vaccine and immune yolk from the mother bird. In addition, the vaccines include, but are not limited to, Escheria Coli, Salmonella, Bovine rota virus, Coronavirus, Infectious bovine rhinotrichitis (IBR), Virus It may be a vaccine against a microorganism selected from the group consisting of Bovine vira disease-mucosal disease (BVD-MD), Pastureella multocida and Pastureella hemolytica.

본 발명에서 백신은 상업적으로 입수 가능한 시판용을 사용하거나 또는 자가 제작된 항원을 활용할 수 있다. 백신방법은 통상의 방법에 따라 수행될 수 있으며, 일예로 상기 미생물 특이항원의 약독화 백신을 분만 전 2, 4주의 젖소에 근육 또는 피하주사하였다. 또한, 상기 특이항원의 약독화 백신을 산란 중인 닭에게 3, 6, 9주에 백신군 산란계들의 흉부에 0.1ml씩 근육주사를 실시하였다. 처음 주사 전 및 각 시험단계별 주사 전에 5~10ml의 혈액을 채취한 후 원심분리하여 비동화 처리후 영하 20℃에 냉동 보존하였으며, 추후에 항체가 분석에 사용하였다.
In the present invention, the vaccine may use commercially available commercially available or self-produced antigen. The vaccine method can be carried out according to a conventional method, for example, the attenuated vaccine of the microbial specific antigen was injected into muscle or subcutaneously in cows 2 and 4 weeks before delivery. In addition, the chickens spawning the attenuated vaccine of the specific antigens were injected intramuscularly by 0.1 ml into the chest of the vaccine group laying hens at 3, 6 and 9 weeks. After the first injection and before each injection step 5 ~ 10ml of blood was collected and centrifuged and cryopreserved at minus 20 ℃ after inactivation treatment, the antibody was used for later analysis.

2. 초유 및 난황의 채취와 보존
2. Collection and Preservation of Colostrum and Egg Yolk

본 발명에서 초유의 채취와 난황의 채집은 통상의 방법으로 이루어질 수 있다. 초유의 채취는 일례로, 분만 직후, 6, 12, 24, 36시간에 걸쳐 각각 basket 착유를 실시하고, 500~1,000ml 플라스틱 병에 시료를 채취할 때 자몽종자추출물[DF-100, (주)에프에이뱅크, 한국)]을 500~1,000ppm 농도로 첨가하여 진탕한 후 영하 20℃에 보존하였으며, 추후에 미생물 및 항체가 분석에 제공하였다.In the present invention, the collection of colostrum and the collection of egg yolk can be made by conventional methods. For example, the collection of colostrum is carried out for 6, 12, 24 and 36 hours immediately after delivery, and the grapefruit seed extract when collecting samples in 500-1,000 ml plastic bottles [DF-100, Ltd.] FB Bank, Korea)] was added at a concentration of 500 ~ 1,000ppm was shaken and stored at minus 20 ℃, microorganisms and antibodies were later provided for analysis.

한편, 난황의 채집은 일례로, 백신 접종 후 3주부터 난황란을 매일 집란하여 실험계획의 각 시기별로 20~30개씩 난좌에 넣어 냉장 보존 후 1주일마다 난황을 채집하였다. 난황란의 난각 표면을 수도물로 세척하고, 10배로 희석한 포비딘요드로 소독하였다. 난황란은 파란 후 난백을 제거하고 난황만을 채취하여 멸균된 폴리비닐백에 충진 할 때 자몽종자추출물을 500~1,000ppm 첨가하여 진탕한 후 영하 20℃에 보존하였으며, 추후에 미생물 및 항체가 분석에 제공하였다.
On the other hand, for example, egg yolk is collected from three weeks after vaccination, and egg yolks are collected every day, and each egg yolk is collected in one week after refrigeration. The eggshell surface of the egg yolk was washed with tap water and sterilized with 10-fold diluted povidin iodine. After egg yolk was removed, egg whites were removed and only egg yolks were collected and filled into sterilized polyvinyl bags. After grapefruit seed extract was added and shaken with 500 ~ 1,000 ppm, the eggs were preserved at minus 20 ℃, and microorganisms and antibodies were later provided for analysis. It was.

3. 초유 및 난황의 건조
3. Drying Colostrum and Egg Yolk

본 발명에서 수득된 초유 및 난황의 분말형태의 가공, 유통, 보존 등의 필요에 따라 건조될 수 있다. 일례로, 초유 및 난황의 건조방법으로 고온 분무건조 방법으로써 냉동보존된 시료를 상온에서 해동하였고 난황은 증류수 3배를 가하여 교반하여 전처리한 후 분무건조에 제공하였다. 분무법으로 분무건조기의 초기 배출온도를 102℃로 설정하였고, 면역초유와 난황 각각의 시료를 별도로 분무건조하였다. 또한, 항체가 및 미생물 평가를 위한 시료를 채취하여 영하 20℃의 냉동고에 동결보존한 후 실험목적에 따라 추후 활용하였다. The colostrum and egg yolk obtained in the present invention may be dried as necessary, such as processing, distribution, and preservation in powder form. For example, the cryopreserved samples were thawed at room temperature by the hot spray drying method of colostrum and egg yolk, and the yolk was pretreated by adding 3 times distilled water, and then provided to the spray drying. The initial discharge temperature of the spray dryer was set to 102 ° C. by spraying, and each sample of Immune colostrum and egg yolk was spray dried separately. Also, samples for antibody titer and microbial evaluation were collected and cryopreserved in a freezer at minus 20 ° C., and later used according to the purpose of the experiment.

4. 시료의 항체가 측정
4. The antibody of the sample is measured

본 발명에서 시료의 항체가 측정은 일례로 다음의 과정으로 수행할 수 있다. 먼저, 냉동보존된 혈액시료의 혈청은 56℃에서 30분 처리하여 비동화시킨후 ELISA 방법을 이용하여 항체가를 측정하였다. 냉동 보존된 초유와 난황 시료는 해동 후 먼저, 면역초유는 12,000rpm/mim으로 10분간 처리하여 초유성분을 채취하여 처리하였고, 면역난황은 증류수 10ml에 난황 1g을 취하여 12,000rpm으로 10분 처리 후 상층액의 난황을 채취하여 ELISA 항체측정방법을 이용하여 각각 시료의 항체가를 측정하였다.
In the present invention, the antibody titer of the sample may be performed by the following procedure. First, the serum of cryopreserved blood samples was inactivated by treatment at 56 ° C. for 30 minutes, and then antibody titers were measured using an ELISA method. Cryopreserved colostrum and egg yolk samples were thawed first, and then treated with colostrum for 10 minutes at 12,000 rpm / mim. Immune egg yolk was treated with 1 g of egg yolk in 10 ml of distilled water for 10 minutes at 12,000 rpm. The yolk of the liquid was collected, and the antibody titer of each sample was measured using the ELISA antibody measuring method.

초유와 난황 및 본 발명 조성물인 복합초유분말의 각 병원체별 역가는 indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)를 이용해 측정되었다. The titer of each pathogen of colostrum and egg yolk and the composite colostrum powder of the present invention was measured using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

① 폴리스티렌 well (Greiner bio-one, America)에 0.5M sodium carbonate buffer (pH 9.6)에 희석된 E. coli, Salmonella Typhimurum , Corona virus, Rota virus, Bovine Viral Diarrhea virus, 100μl를 도포하였다. 4℃에서 밤을 넘겨 배양한 plate를 0.05% Tween 20 (PBST, pH 7.4)를 함유한 0.1M phosphate buffered saline으로 3회 세척하였다. Well을 200μl 1% gelatine (Sigma, USA)로 37℃에서 1시간 blocking 시킨 후 PBST로 3회 세척하였다.① 100 μl of E. coli, Salmonella Typhimurum, Corona virus, Rota virus, Bovine Viral Diarrhea virus, diluted in 0.5M sodium carbonate buffer (pH 9.6) was applied to polystyrene wells (Greiner bio-one, America). The plate incubated at 4 ° C. overnight was washed three times with 0.1 M phosphate buffered saline containing 0.05% Tween 20 (PBST, pH 7.4). The wells were blocked with 200 μl 1% gelatine (Sigma, USA) for 1 hour at 37 ° C. and washed three times with PBST.

② 송아지 혈청 샘플은 PBS로 10배, 100배, 1000배, 10,000배 희석하여 항원이 도포된 well에 100μl씩 넣어 주었다. 37℃에서 60분 동안 배양한 후 이전과 같은 방법으로 세척한 후 horseradishperoxidase-conjugated rabbit anti-bovine IgG (dilution 1:2000, Sigma, USA) 100μl에서 60분간 37℃에 감작하였다.② Calf serum samples were diluted 10-fold, 100-fold, 1000-fold, 10,000-fold with PBS and put 100μl into wells coated with antigen. After incubation at 37 ° C. for 60 minutes, the cells were washed in the same manner as before, followed by sensitization at 37 ° C. for 60 minutes at 100 μl of horseradishperoxidase-conjugated rabbit anti-bovine IgG (dilution 1: 2000, Sigma, USA).

③ 다시 세척한 후 OPD (ο-phenylendiamine, Shanghai Chemicals, China)를 substrate로 사용하였다. 50μl의 2M H2SO4에서 30분간의 반응이 끝나면 490nm에서 EL ×800 Microplate Reader (Bio-Tek Instruments Inc. Winooski, Vermont, USA)를 이용해 흡광도를 측정하였다.
③ After washing again, OPD (ο-phenylendiamine, Shanghai Chemicals, China) was used as a substrate. After 30 minutes of reaction at 50 μl of 2M H 2 SO 4 , absorbance was measured at 490 nm using an EL × 800 Microplate Reader (Bio-Tek Instruments Inc. Winooski, Vermont, USA).

5. 시료의 미생물 검출
5. Microbial detection of samples

본 발명에서 시료의 미생물 검출은, 일례로 아래의 방법으로 수행할 수 있다. 즉, 냉동 보존시료의 미생물 검출은 냉동보존된 초유와 난황시료를 융해 후 처리하여, 24시간 배양하여 총 세균수를 측정하였으며, 혈액배지에 72시간 배양하여 일반세균의 집락 (colony)을 판정하였다. 분말건조물의 미생물 검출은 분무 건조 직후와 감마 살균 후 각각의 시료를 채취하여 희석 후 처리하여, 24시간 배양하여 총 세균수를 측정하였으며, 혈액배지에 72시간 배양하여 일반세균의 집락 (colony)을 판정하였다.Microorganism detection of the sample in the present invention, for example can be carried out by the following method. In other words, Microbial detection of cryopreserved samples was treated after thawing cryopreserved colostrum and yolk sample, and cultured for 24 hours to measure the total number of bacteria, and cultured in blood medium for 72 hours to determine colonies of general bacteria. For microbial detection of powdered dry, each sample was taken immediately after spray drying and after gamma sterilization. After dilution, the total number of bacteria was measured by culturing for 24 hours, and the colonies of general bacteria were collected by culturing in blood medium for 72 hours. Determined.

검출 대상균은 대장균, 살모넬라, 파스튜렐라, 포도상구균, fungus, 그람양성균, 그람음성균, proteus로 한정하였다. 건조 전 보존 중인 Whey와 난황에서 각종 미생물의 변화를 관찰하기 위하여 백신군 어미 젖소의 출산후 12시간 이내에 생산된 초유와 백신군 산란계로부터 생산된 신선란을 상기의 방법으로 whey와 난황만을 분리하였다. 곰팡이는 시료를 채취하여 0.1% peptone 용액에 적절한 배율로 희석하여 APHA방법 (1985)에 따라 곰팡이수의 변화를 측정하였다. 곰팡이는 Potato Dextrose 배지에서 25℃, 48시간 배양한 후 측정하였다.
The detection target bacteria were limited to Escherichia coli, Salmonella, Pasteurella, Staphylococcus aureus, fungus, Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria, and proteus. In order to observe various microbial changes in the preserved Whey and egg yolk before drying, only whey and egg yolk were isolated from the colostrum produced within 12 hours after the birth of the vaccine mother and the egg laying hens. Mold was sampled and diluted in 0.1% peptone solution at an appropriate magnification to determine the change in mold water according to the APHA method (1985). Mold was measured after incubation for 48 hours at 25 ℃ in Potato Dextrose medium.

6. 건조분말 시료의 배합 및 포장
6. Mixing and Packaging of Dry Powder Sample

본 발명의 면역증강 조성물은 건조 분말의 형태로 제조될 수 있다. 일례로, 본 발명 조성물에서 건조분말의 배합비는 면역초유와 면역난황 각각의 건조물의 무게용량에 따라 결정하였다. 건조분말의 병입과 포장은 100ml PVP병에 면역초유분말 10g과 면역난황 10g, Xylitol 1g, 식물성 추출물 (진피, 작약, 감초 등) 3g, 비타민 등을 각각 첨가하였다.
The immunopotentiating composition of the present invention may be prepared in the form of a dry powder. In one example, the blending ratio of the dry powder in the composition of the present invention was determined according to the weight capacity of each of the dried colostrum and the immune egg yolk. The bottling and packaging of the dry powder was added to 100ml PVP bottles with 10g of immunoprepared milk powder, 10g of immune egg yolk, 1g of Xylitol, 3g of vegetable extracts (dermis, peony, licorice) and vitamins.

7. 건조분말 시료의 살균
7. Sterilization of Dry Powder Samples

상기 병입된 건조분말 시료의 살균은 감마살균기 (JS-8900, Canada)를 사용하여 실시하였으며, 감마-ray 조사량은 25kg rey, 28시간 동안 조사하였다.
Sterilization of the bottling dry powder sample was carried out using a gamma sterilizer (JS-8900, Canada), the gamma-ray irradiation was irradiated for 25kg rey, 28 hours.

8. 모자행동의 분석
8. Analysis of Maternal Behavior

한우의 산차에 따른 수유행동의 분석을 실시하였으며, 수유행동의 평가로서, 자축의 포유 허용은 '허용행동', 모축의 도망 또는 무관심한 행동은 '회피행동', 축장 (발길질)과 뿔로 자축을 밀어내는 행동은 '공격행동'으로 분류하였다.An analysis of lactation behavior according to the birthing of Hanwoo was conducted, and as an evaluation of lactation behavior, the allowance of mammals for the livestock was allowed in 'permissible behavior', and the fleeing or indifferent behavior of the livestock was 'avoided behaviour', and the intestines (kicking) and horns were pushed. The acts they make were classified as 'attack actions'.

자축의 품종에 따른 포유행동 분석을 실시하였으며, 포유반응의 평가는 인공포유 자극 유발 후 준비된 총량을 거부 없이 10분 내에 섭취하는 경우는 '양호', 10~20분 동안 천천히 섭취하는 경우는 '보통', 포유반응이 약하고 혀로써 유두를 밀어내거나 초유를 삼키지 않는 경우는 '불량'으로 판정하였다.
Maternal behavior analysis was carried out according to the breed of the axial axis, and the evaluation of the mammalian response was 'good' if the intake within 10 minutes without rejection of the total amount prepared after the stimulation of artificial lactation was 'normal', and if it was taken slowly for 10 to 20 minutes 'If the mammalian reaction is weak and the tongue is not pushed out or the colostrum is not swallowed, it is judged as'bad'.

9. 초유의 급여방법
9. How to Feed Colostrum

인공포유는 출생 직후 1, 2, 3, 6, 12, 24시간에 걸쳐 50, 100, 500, 1,000, 2,000ml의 다양한 용량별로 실시하였다. 면역초유 급여는 백신이 전처리된 초유 1~2L를 인공포유병에 넣고 출생한 자축에게 인공포유를 하였다. 면역난황 급여는 백신이 전처리된 난황 1~3개를 물로 5배 희석 진탕 후 동결보존하였으며, 실험목적에 따라 미온수에 침적 융해 후 출생한 자축에게 인공포유를 실시하였다.Artificial lactation was performed at various doses of 50, 100, 500, 1,000, and 2,000 ml over 1, 2, 3, 6, 12, and 24 hours immediately after birth. Immune colostrum supplemented with 1 to 2 liters of colostrum pretreated with artificial milk in artificial breast bottles and artificial breast milk to the livestock. Immune yolk supplementation was preserved after diluting 1 to 3 vaccine yolks diluted with water five times and shaken them.

본 발명 조성물의 일례인 분말형복합 초유의 급여는 분무 건조된 면역초유분말과 면역난황분말을 각각 1:1로 배합한 총량 20g의 분말을 포유병에 넣고 1~5배의 미온수를 가하여 강하게 진탕한 후 인공포유를 실시하였다.
Feeding of powdered complex colostrum, which is an example of the composition of the present invention, is mixed with a spray-dried colostrum powder and an egg yolk powder, each containing a total amount of 20 g of powder in a bottle and added 1 to 5 times of lukewarm water. After that, artificial lactation was performed.

10. 채혈 및 혈액 분석
10. Blood Collection and Blood Analysis

본 발명의 일례로, 젖소 모축에 대한 채혈 시간은 백신 실시 전, 분만 7~10일 전, 분만직후, 12, 24시간 내로 설정하여 경정맥에서 5~10ml를 채혈, 원심분리, 비동화, 시료번호 부여, 영하 20℃에 동결한 후 추후 실험에 제공하였다.In one example of the present invention, the blood collection time for cows is set before the vaccine, 7-10 days before delivery, within 12, 24 hours immediately after delivery, blood collection, centrifugation, inactivation, sample number 5-10ml in the jugular vein Granted, frozen at minus 20 ℃ and then provided for later experiments.

포유 자축에 대한 채혈 시간은 포유 전, 포유 후 1, 2, 3, 6~12시간, 12~24시간, 24시간 이상으로 설정하였으며, 경정맥에서 5~10ml를 채혈, 원심분리, 비동화, 시료번호 부여, 영하 20℃에 동결한 후 추후 실험에 제공하였다.The blood collection time for the mammalian axis was set at 1, 2, 3, 6-12 hours, 12-24 hours, 24 hours or more before and after mammaling. 5-10 ml was collected from the jugular vein, centrifuged, inactivated and sampled. Numbering, frozen at minus 20 ℃ was provided for later experiments.

질병 자축에 대한 채혈 시간은 설사와 폐렴 발생 시 경정맥에서 5~10ml를 채혈, 원심분리, 비동화, 시료번호 부여, 영하 20℃에 동결한 후 추후 실험에 제공하였다.The blood collection time for disease axis was 5-10ml in the jugular vein during diarrhea and pneumonia, blood collection, centrifugation, inactivation, sample numbering, and frozen at minus 20 ℃.

산란계에 대한 채혈은 백신 전, 1차 백신 후 3, 6, 9, 12주로 설정하여 5~6두의 산란계의 익하 정맥에서 4~5ml를 채혈, 원심분리, 비동화, 시료번호 부여, 영하 20℃에 동결한 후 추후 실험에 제공하였다.
Blood collection for laying hens was set up before, 3, 6, 9, and 12 weeks after the first vaccine, and 4-5 ml of subcutaneous veins of 5 to 6 hens were collected, centrifuged, inactivated, sampled, and minus 20. After freezing at ℃ was provided for later experiments.

11. 질병평가
11. Disease Assessment

건강검진은 출생 후 3시간 이내부터 1일 2회 (12시간 단위)로 체온, 맥박/호흡수를 2 주간 측정하였고, 질병의 평가 기간은 생후 14일까지의 소화기와 호흡기 증상에 국한하여 임상증상을 기준으로 하였다.Health checkups were performed for 3 weeks after birth and twice a day for 12 weeks. Body temperature and pulse / breathing were measured for 2 weeks, and the evaluation period of disease was limited to digestive and respiratory symptoms until 14 days after birth. It was based on.

질병형태로써 수양성 하리, 혈액성 하리 증상을 보이는 경우에는 설사로 판정하였고, 설사는 Larson 등 (1977)의 fecal fluidity score에 따라 4등급으로 분류하였다. 비경 건조, 농성 비루와 기침을 동반한 경우에는 폐렴으로 판정하였고, 생후 1 개월간의 질병의 경과 중 폐사한 경우에는 폐사로 판정하였다.Diarrhea was identified as diarrhea, and diarrhea was classified as grade 4 according to the fecal fluidity score of Larson et al. (1977). Pneumonia was determined in cases with parenteral dryness, purulent rhinorrhea, and coughing, and death in the course of one month of disease.

질병발생시 경정맥에서 5~10ml의 혈액을 채취하여 항체가 분석에 활용하였고, 동시에 설사와 폐렴의 가검물은 각각 분변과 비강분비물을 채취하였으며, 미생물의 분석에 활용하였다.When the disease occurred, 5 ~ 10ml of blood was collected from the jugular vein and the antibody was used for analysis.

본 발명의 면역증강조성물은 면역 초유와 면역 난황 내에 고역가의 특이항체가 함유되어 신생자축의 항병력이 증가되고, 진피 등과 자일리톨이 첨가되어 소화기능이 더욱 촉진되고 기호성이 증가된다. 또한, 분말형으로 제조할 수 있음으로 그 활용도를 증대시킬 수 있어 분만 후 최단 시간 내에 긴급 급여함으로써 신생자축의 질병과 폐사를 획기적으로 개선시킬 수 있다.The immune enhancing composition of the present invention contains high titers of specific antibodies in immune colostrum and egg yolk, thereby increasing the antihypertensive ability of the neonatal axis, and adding the dermis and xylitol to further promote digestion and increase palatability. In addition, it can be manufactured in a powder form can increase the utilization, it is possible to drastically improve the disease and mortality of the new livestock by urgently feeding in the shortest time after delivery.

도 1 은 본 발명의 일례에 따른 면역 초유 및 면역 난황의 분말형 조성물 (분말형복합초유)의 생산 공정과 과정을 평가하는 방법의 총괄 도해이다.
도 2 는 본 발명에 의하여 생산된 완제품이다.
1 is a general diagram of a method for evaluating the production process and process of the powdered composition (powdered colostrum) of immune colostrum and immune yolk in accordance with an example of the present invention.
2 is a finished product produced according to the present invention.

이하, 본 발명을 다음 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명하겠는 바, 본 발명이 다음 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on the following examples, but the present invention is not limited to the following examples.

<실험예 1> Experimental Example 1

특이항원 백신접종 경과일수에 따른 모축의 혈중 항체역가(titer/ml) Antibody titers in blood according to days of vaccination of specific antigens (titer / ml) 백신경과일Vaccine elapsed date
(week, hour)(week, hour)
대장균Escherichia coli 살모넬라Salmonella 로타바이러스Rotavirus 코로나바이러스Coronavirus 코로나바이러스Coronavirus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica
접종전Before vaccination 3636 5252 6464 3838 2828 4444 3232 분만 1주전1 week before delivery 736736 892892 420420 648648 728728 527527 696696 분만후 12h12h after delivery 954954 543543 234234 526526 612612 504504 756756 분만후 24h24h after delivery 979979 504504 346346 576576 662662 510510 686686

특이항원 백신이 접종 전후의 모축 항체역가 미치는 영향은 상기 표1에서 보는 바와 같이, 특이항원의 백신은 분만전후에 젖소 모축의 혈중 내 특이 항체가를 대조군 (백신전 군)에 비하여 유의적으로 증가시켰다. As shown in Table 1 above, the effect of specific antigen vaccines before and after vaccination on the antibody antibody titers significantly increased the specific antibody titer in the blood of cows before and after delivery compared to the control group (vaccine group). I was.

이와 같은 결과는 기성 수용성 백신에 비해 2~4배 항체가가 높았으며, 이는 항원정제와 농축 과정 및 특이한 부형제의 사용 때문인 것으로 파악된다.
These results were 2-4 times higher antibody titer than conventional water-soluble vaccines, which may be attributed to the use of antigen purification and enrichment and specific excipients.

<실험예 2><Experimental Example 2>

특이항원 백신접종 경과일수에 따른 산란계의 혈중 항체역가(titer/g) Serum antibody titers in laying hens according to days of vaccination of specific antigens (titer / g) 백신경과일Vaccine elapsed date
(week) (week)
대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica
접종전Before vaccination 640640 479479 146146 3636 2626 11571157 3636 접종후 3주3 weeks after vaccination 20182018 14001400 14991499 626626 526526 23132313 12261226 접종후 6주6 weeks after vaccination 21832183 17271727 17011701 12841284 10961096 25112511 24022402 접종후 9주9 weeks after vaccination 26632663 20052005 17371737 19261926 20262026 26312631 28642864

특이항원 백신이 접종전후의 산란계 항체역가 미치는 영향은 상기 표2에서 보는 바와 같이, 특이항원의 백신은 접종 후에 산란계의 혈중 내 특이항체가를 대조군 (백신전 군)에 비하여 유의적으로 증가시켰다. 이와 같은 결과는 기성 수용성 백신에 비해 20~40배 항체가가 높았으며, 이는 항원정제와 농축 과정 및 특이한 부형제의 사용 때문인 것으로 파악된다.
As shown in Table 2 above, the effect of specific antigen vaccine on pre- and post-inoculation laying antibody titers significantly increased the specific antibody titer in the blood of laying hens after inoculation compared to the control group (vaccine group). These results were 20-40 times higher than those of conventional water-soluble vaccines, which may be attributed to the use of antigen purification and enrichment and specific excipients.

<실험예 3><Experimental Example 3>

면역초유의 채취시간에 따른 초유 내 항체역가(titer/g) Antibody titers in colostrum according to the collection time of immuno colostrum (titer / g) 초유채취 시간Colostrum Collection Time
(hour)  (hour)
대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica
분만후 1~6h1 ~ 6h after delivery 24462446 15731573 368368 628628 10241024 19531953 20162016 분만후 6~12h6 ~ 12h after delivery 16731673 910910 470470 496496 965965 840840 18061806 분만후 24h 이상More than 24h after delivery 16331633 653653 272272 512512 944944 634634 18241824

면역초유의 채취시간이 초유 내 항체역가 미치는 영향은 상기 표3에서 보는 바와 같이, 분만 후 시간이 경과함에 따라 급격히 감소됨을 확인할 수 있었다. 따라서 면역 초유의 채취는 분만 후 6시간 이내에 이루어지는 것이 바람직함을 확인할 수 있었다.
As shown in Table 3, the effect of the collection time of the immuno- colostrum was confirmed that it rapidly decreases as time passes after delivery. Therefore, it was confirmed that the collection of immune colostrum is preferably made within 6 hours after delivery.

<실험예 4> <Experimental Example 4>

면역난황란의 채취시간에 따른 난황내 항체역가(titer/g) Antibody titer in egg yolk according to collection time of egg yolk (titer / g) 난황채취일Egg yolk collection
(week)(week)
대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica
접종전Before vaccination 12531253 980980 254254 3232 2828 13111311 126126 산란 3주3 weeks spawning 23032303 16161616 412412 612612 724724 21002100 862862 산란 6주6 weeks spawning 25122512 20012001 581581 11261126 12361236 21782178 12281228 산란 9주9 weeks spawning 29932993 22012201 812812 12621262 15381538 22982298 16521652

면역난황란의 채취시간이 난황 내 항체역가에 미치는 영향은 상기 표 4에서 보는 바와 같이, 산란 후 9주까지도 유지되고 있음을 확인할 수 있었다.
As shown in Table 4 above, it was confirmed that the effect of the collection time of the egg yolk on the antibody titer was maintained for 9 weeks after spawning.

<실험예 5> <Experimental Example 5>

보존재에 따른 냉동보존 면역 초유 내 미생물 검출상(수/ml)Microbial Detection Phase in Cryopreserved Immune Colostrum According to Preservatives (Water / ml) 보존재Preservative 총세균수/mlTotal bacteria count / ml 대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 황색포도구균Staphylococcus aureus 진균류fungi 그람음성간균Gram-negative bacilli 그람양성간균Gram-positive bacilli 대조군 초유Control colostrum 256,200256,200 5,9805,980 -- -- -- 192,400192,400 6,8006,800 자몽첨가 초유Grapefruit Additive Colostrum 175,600175,600 1,2201,220 -- -- -- 62,80062,800 1,2531,253

냉동보존 면역초유내에 첨가된 보존재가 미생물 증식에 미치는 영향은 상기 표5에서 보는 바와 같이, 면역초유에 보존재로 자몽씨추출물 첨가군은 대조군에 비하여 총 세균수에서 현저한 발육억제효과를 보였다.
As shown in Table 5, the effect of the preservatives added to the cryopreserved immune colostrum on the growth of microorganisms, the grapefruit seed extract added as a preservative to the immune colostrum showed a significant growth inhibitory effect in the total number of bacteria compared to the control group.

<실험예 6> <Experimental Example 6>

보존재에 따른 냉동보존 면역난황내 미생물 검출상(수/ml) Microbial detection phase in cryopreserved immune yolk sac according to preservatives (water / ml) 보존재Preservative 총세균수/mlTotal bacteria / ml 대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 황색포도구균Staphylococcus aureus 진균류fungi 그람음성간균Gram-negative bacilli 그람양성간균Gram-positive bacilli 대조군 난황Control egg yolk 52,80052,800 -- -- -- -- 36,20036,200 6,4006,400 자몽첨가 난황Grapefruit Additive Yolk 240240 -- -- -- -- 9696 --

냉동보존 면역난황 내에 첨가된 보존재가 미생물 증식에 미치는 영향은 상기 표6에서 보는 바와 같이 면역난황에 보존재로써 자몽씨추출물 첨가군은 대조군에 비하여 총세균수에서 현저한 감소와 병원성 미생물의 현저한 발육억제효과를 보였다
The effect of preservatives added to cryopreserved immune yolk yolk on the growth of microorganisms, as shown in Table 6 above, was significantly reduced in the total bacterial count and suppressed the growth of pathogenic microorganisms compared to the control group. Showed an effect

<실험예 7> Experimental Example 7

면역초유의 건조법에 따른 면역초유의 항체가(titer/g) Antibody Colostrum Antibodies According to the Drying Method of Immune Colostrum (titer / g) 건조법Drying method 대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica 흡착건조Adsorption drying 604604 10601060 274274 5656 4242 645645 6868 분무건조Spray drying 24462446 15941594 848848 928928 11261126 22992299 18861886

면역 초유의 건조방법이 분말 초유 내 항체가에 미치는 영향은 상기 표7에서 보는 바와 같이, 분무건조법에서 항체가가 다소 감소되었으나 흡착건조군과의 유의적인 차이가 없었다.
As shown in Table 7 above, the effect of the drying method of immune colostrum on the antibody titer in powdered colostrum was slightly decreased in the spray drying method, but there was no significant difference from the adsorption drying group.

<실험예 8> <Experimental Example 8>

면역난황의 건조법에 따른 면역난황의 항체가(titer/g) Antibody Value of Immune Yolk by Drying Immune Yolk (titer / g) 건조법Drying method 대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica 흡착건조Adsorption drying 6464 5252 5050 3838 6262 5454 4242 분무건조Spray drying 24622462 19631963 15251525 13261326 11281128 24812481 19261926

난황의 건조방법이 분말난황 내의 항체가에 미치는 영향은 상기 표8에서 보는 바와 같이, 분무건조법에서 항체가가 다소 감소되었으나 흡착건조군과의 유의적인 차이가 없었다.
As shown in Table 8, the effect of the egg yolk drying method on the antibody titer in the powder yolk was slightly decreased in the spray drying method, but there was no significant difference from the adsorption drying group.

<실험예 9> Experimental Example 9

배합비에 따른 분말형복합초유의 항체가(titer/g) Antibody Value of Powdered Complex Colostrum According to Mixing Ratio (titer / g) 배합비(초유:난황)Compounding ratio (cold milk: egg yolk)
(g : g)(g: g)
대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica
1 : 21: 2
(7 : 13)(7: 13)
17,122/32,00617,122 / 32,006 11,158/25,51911,158 / 25,519 5,936/19,8255,936 / 19,825 6,612/10,4286,612 / 10,428 8,662/16,9608,662 / 16,960 16,093/32,25316,093 / 32,253 15,560/28,60015,560 / 28,600
1 : 11: 1
(10 : 10)(10: 10)
24,460/24,62024,460 / 24,620 15,940/19,63015,940 / 19,630 8,480/15,2508,480 / 15,250 8,862/14,2008,862 / 14,200 7,990/12,2007,990 / 12,200 22,990/24,81,22,990 / 24,81, 14,860/15,60014,860 / 15,600
2 : 12: 1
(13 : 7)(13: 7)
32,798/17,23432,798 / 17,234 20,722,13,74120,722,13,741 11,024/10,67511,024 / 10,675 12,260/6,85612,260 / 6,856 16,680/15,62016,680 / 15,620 29,887/17,36729,887 / 17,367 29,860/14,60029,860 / 14,600

건조분말의 배합비가 분말형 복합초유의 항체가에 미치는 영향은 상기 표9에서 보는 바와 같이, 건조분말의 용량을 20을 기준으로 할 때, 초유와 난황의 비율이 1:1 이상인 군에서 최소항체역가 수준에 해당한다. 초유의 항체가가 난황의 그것에 비해 4배 이상이므로, 분말난황 50g에 해당하는 항체가가 존재하며, 분말난황 50g은 액상 난황 10개에 해당한다. 이는 초유 100ml에 존재하는 3~4g의 면역글로불린의 양이 된다.
As shown in Table 9 above, the effect of the blending ratio of dry powder on the antibody value of the powdered complex colostrum was the minimum antibody in the group where the ratio of colostrum and egg yolk was 1: 1 or more when the capacity of the dry powder was 20. Corresponds to the potency level. Since the colostrum antibody value is more than four times that of egg yolk, there is an antibody value corresponding to 50 g of powdered yolk, and 50 g of powdered yolk corresponds to 10 liquid yolks. This is the amount of 3-4 g of immunoglobulin present in 100 ml of colostrum.

<실험예 10> Experimental Example 10

살균방법에 따른 분말형복합초유의 미생물 검출(수/ml)Detection of Microorganisms in Powdered Colostrum with Sterilization Method (Water / ml) 살균법Sterilization 총세균수Total bacteria
/ml/ ml
대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 황색yellow
포도구균Staphylococcus
진균류fungi 그람음성간균Gram-negative bacilli 그람양성간균Gram-positive bacilli
대조군Control group
(분무건조)(Spray drying)
00 89,60089,600 -- -- -- 72,80072,800 15,60015,600
감마살균Gamma Sterilization
(분무건조)(Spray drying)
00 -- -- -- -- -- --

분말형복합초유의 살균방법이 미생물에 미치는 영향은 상기 표10에서 보는 바와 같이, 분무건조법의 경우 대조군과 살균군에서 일체의 미생물이 검출되지 않았다. As shown in Table 10, the effect of the sterilization method of the powdered complex colostrum was not detected any microorganisms in the control and sterilization group in the spray drying method.

<실험예 11> Experimental Example 11

급여시간에 따른 자축의 혈중 내 항체가(titer/g) Antibodies in the blood of livestock according to feeding time (titer / g) 급여경과 시간Payroll time 대장균Escherichia coli 살모넬라균Salmonella 로타-바이러스Rota-virus 코로나-바이러스Corona-virus 소바이러스점막병- 바이러스Small Virus Mucosa-Virus 파스튜렐라- 멀토시다Pasteurella- Multocida 파스튜렐라-헤모라이티카Pasteurella-Hemolytica 급여전Before pay <10<10 <10<10 <10<10 <10<10 <10<10 <10<10 <10<10 급여후 1~3h1 ~ 3h after salary 10831083 598598 717717 864864 668668 632632 726726 급여후 3~123 ~ 12 after pay 13671367 633633 473473 924924 768768 866866 822822 급여후 12~24h12 ~ 24h after pay 12591259 636636 660660 896896 812812 856856 842842

초유의 급여시간이 자축의 혈중 내 항체가에 미치는 영향은 상기 표11에서 보는 바와 같이, 자축의 출생 후 급여시간이 빠를수록 높은 항체가 수준에 도달하였다.
As shown in Table 11 above, the effect of colostrum feeding time on the antibody titer in the blood of the axial axis, the higher antibody level reached the higher the post-natal feeding time of the axial axis.

<실험예 12>Experimental Example 12

급여초유의 종류에 따른 자축의 질병율 및 폐사율(%)Morbidity and mortality of livestock according to the type of salary colostrum (%) 초유종류Colostrum Type 질병disease 폐사Our company
(%)(%)
식체Plant
(%)(%)
설사diarrhea
(%)(%)
폐렴Pneumonia
(%)(%)
일반초유급여General super paid benefits
(n=67)(n = 67)
1010
(14.9)(14.9)
1010
(14.9)(14.9)
77
(10.4)(10.4)
1616
(23.9)(23.9)
면역난황급여Immune yolk salary
(n=43)(n = 43)
22
(4.7)(4.7)
33
(7.0)(7.0)
22
(4.7)(4.7)
77
(16.3)(16.3)
면역초유급여Immune colostrum benefits
(n=52)(n = 52)
55
(9.6)(9.6)
44
(7.7)(7.7)
1One
(2)(2)
44
(7.7)(7.7)
복합초유급여Combined Collateral Benefits
(n=35)(n = 35)
00
(0.0)(0.0)
1One
(2.9)(2.9)
1(2.9)1 (2.9) 22
(5.7)(5.7)

급여초유의 종류가 자축의 질병율 및 폐사율에 미치는 영향은 상기 표12에서 보는 바와 같이, 일반 초유군에 비해서 면역초유, 난황초유, 복합초유군에서 유의적으로 감소하였다.
As shown in Table 12, the effect of the type of fed colostrum on morbidity and mortality of porcelain was significantly decreased in the group of Immune Colostrum, Yolk Colostrum, and Combined Colostrum.

상기한 바와 같이 본 발명에 의하여, 본 발명의 면역증강 조성물은 고도의 특이 항체가를 함유한 자축의 질병율과 폐사율을 현저히 떨어뜨리고 또한 분말형으로 제조할 수 있어 이의 이용성과 기능성을 획기적으로 개선시킬 수 있다.As described above, according to the present invention, the immuno-enhancing composition of the present invention can significantly reduce morbidity and mortality of the axial axis containing highly specific antibody titers and can be prepared in powder form, thereby dramatically improving its availability and functionality. You can.

Claims (12)

백신으로 면역된, 어미 포유류로부터의 면역 초유 및 어미 조류로부터의 면역 난황을 1:1의 중량비로 배합한 복합초유를 함유하며,
상기 복합초유 총 중량에 대해 진피 추출물, 작약 추출물 또는 감초 추출물 중에서 선택된 식물 추출물 10~20 중량%와 자일리톨 1~5 중량%를 첨가한 것을 특징으로 하는, 면역증강 조성물.
Contains a mixed colostrum formulated with a 1: 1 by weight ratio of immune colostrum from the mother mammal and immune yolk from the mother bird, immunized with the vaccine,
Immuno-enhancing composition, characterized in that 10 to 20% by weight and 1 to 5% by weight of xylitol extract selected from the dermis extract, peony extract or licorice extract relative to the total weight of the complex colostrum.
제1항에 있어서,
상기 백신은 대장균, 살모넬라, 소 로타바이러스, 소 코로나 바이러스, 소 바이러스점막병 바이러스, 파스튜렐라 멀토시다 및 파스튜렐라 헤모라니티카로 이루어진 그룹으로 선택되는 미생물에 대한 백신인 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 1,
The vaccine is a vaccine against a microorganism selected from the group consisting of Escherichia coli, Salmonella, bovine rotavirus, bovine corona virus, bovine virus mucosal virus, Pasteurella multocida and Pastureella hemoranitica. .
제1항에 있어서,
자몽씨 추출물이 더 추가되는 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 1,
A composition, characterized in that the grapefruit seed extract is further added.
제3항에 있어서,
상기 자몽씨 추출물은 500~1000ppm로 추가되는 것을 특징으로 하는 조성물.
The method of claim 3,
The grapefruit seed extract is characterized in that the composition is added to 500 ~ 1000ppm.
삭제delete 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 액체, 정체 또는 캡슐형 형태인 것을 특징으로 하는 조성물.The composition of claim 1 wherein the composition is in powder, granule, liquid, stagnate or capsule form. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete
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