KR101064848B1 - Extracts of Mimosa pudica for allergy treating and pharmaceutical compositions for allergy comprising the extracts - Google Patents

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Abstract

본 발명은 미모사 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 알러지 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로서, 상기 미모사의 추출물의 유용성을 확인하기 위하여 (1) 줄기세포 인자에 의한 비만세포의 유주운동에 대한 미모사의 추출물의 효과, (2) 미모사 추출물의 세포에 대한 독성 효과, (3) EoL-1 세포(human eosinophilic leukemic cell)에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인인 MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1) 및 IL-6(인터루킨-6)에 대한 미모사 추출물의 억제 효과 및 (4) 천식 질환 유발 마우스에 대한 미모사 추출물의 효과들을 확인하고, 이들로부터 아토피 및/또는 아스마의 개선 또는 치료에 효과적으로 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.The present invention relates to a mimosa extract and a pharmaceutical composition for treating allergies comprising the same as an active ingredient, in order to confirm the usefulness of the extract of the mimosa (1) extracts of mimosa for jujutsu movement of mast cells by stem cell factor Effect, (2) toxic effect of mimosa extract on cells, (3) inflammatory cytokines and chemokines, MCP-1 (monocyte chemoattractant protein-1) and IL-6 in human eosinophilic leukemic cells The inhibitory effect of mimosa extract on (Interleukin-6) and (4) the effects of mimosa extract on asthma-induced mice were confirmed, and it can be confirmed that it can be effectively used for improving or treating atopy and / or asma. there was.

아토피, 아스마, 미모사, 케모카인, 인터루킨, 비만세포 Atopy, Asma, Mimosa, Chemokine, Interleukin, Mast Cell

Description

알러지 치료용 미모사의 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 알러지 치료용 약학적 조성물 {Extracts of Mimosa pudica for allergy treating and pharmaceutical compositions for allergy comprising the extracts}Extracts of mimosa for allergy and pharmaceutical compositions for allergy comprising the same as active ingredients {Extracts of Mimosa pudica for allergy treating and pharmaceutical compositions for allergy comprising the extracts}

본 발명은 미모사 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 알러지 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로 특히 본 발명은 아토피나 아스마와 같은 알러지성 질환에 대한 경감 및/또는 치료효과를 갖는 미모사 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 알러지 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a mimosa extract and a pharmaceutical composition for treating allergies comprising the same as an active ingredient, in particular, the present invention relates to mimosa extract having an alleviating and / or therapeutic effect on an allergic disease such as atopy or asma, and the same as an active ingredient. It relates to a pharmaceutical composition for treating allergy.

아토피(atopy)는 1925년 코카(Coca)가 선천적으로 음식물과 흡입성 물질에 대한 알레르기 반응의 결과로 피부염이나 천식, 고초열이 나타나는 경향을 아토피라고 기술한 이후부터 쓰이게 된 피부질환으로서 아토피성 질환에는 아토피 피부염 이외에 천식, 알레르기성 비염, 알레르기성 결막염 등이 있다. 아토피는 알러지 반응을 수반하며 이 중 아토피 피부염은 만성 혹은 재발성 피부염으로, 피부 병변의 특징적인 모양 및 분포와 개인 혹은 가족의 아토피 병력을 가지는 즉, 아토피성 체질(유전적 소인)을 타고난 경우에 발생하는 매우 흔한 피부 질환이다. 대개 아토피 피부염은 영, 유아기, 특히 생후 2개월 전후에 시작되는데, 이 중 약 50%가 생후 2세 이전에 발생하고, 거의 5세 이전에 증상이 나타나는 반면 성인에서 처음 증상이 나타나는 예는 극히 드물다. 대부분 성장과 더불어 증상이 완화되거나 사라지며 유아기 발생 환자의 절반 이상이 2세 전에 호전된다. Atopy (atopy) is a skin disease that has been used since Coca in 1925 described atopic dermatitis, asthma and fever as a result of allergic reactions to food and inhalable substances. In addition to atopic dermatitis, there are asthma, allergic rhinitis, and allergic conjunctivitis. Atopic dermatitis is accompanied by allergic reactions. Among them, atopic dermatitis is chronic or recurrent dermatitis, which has a characteristic shape and distribution of skin lesions and atopic history of an individual or family. It is a very common skin disease that occurs. Atopic dermatitis usually begins around zero, infancy, and especially around two months of age, of which about 50% occurs before 2 years of age, and symptoms rarely occur before about 5 years of age, while in adults only very few cases appear first. . In most cases, with symptoms, the symptoms are alleviated or disappeared, and more than half of the infants develop before 2 years of age.

아토피 피부염은 심한 가려움을 동반한 홍반성 구진과 인설로 시작하여 심해지면 수포 및 장액성 삼출액과 가피를 보이는 급성 증상으로 진행한다. 가장 특징적인 증상인 소양증은 그 정도가 매우 심해서 피가 날 정도로 긁게 되며, 가려움-긁기-가려움의 악순환으로 계속 악화되며, 더 지속되면 피부가 두꺼워지고, 주름이 뚜렷해지는 태선화 현상이 나타난다. 대부분의 임상 양상은 긁거나 문지른 결과에 의해 발생하며, 밤에는 소양증이 더욱 심해져 수면장애를 일으킨다. 근래에 전 세계적으로 아토피 피부염의 발생 빈도가 증가하는 양상을 보이고 있는데, 이는 대기오염, 주거 환경의 변화로 항원에 대한 노출 증가, 모유 수유의 감소, 소아기 감염 질환의 감소 등을 그 원인으로 추정하고 있다. 1995년 대한 소아과 알레르기 및 호흡기학회에서 시행한 전국적 역학 조사에 의하면 초등학생의 경우 12 내지 24%, 중학생의 경우 6 내지 8%에서 아토피 피부염으로 진단받은 적이 있으며, 2000년도에는 초등학생의 24.9%, 중학생의 12.8%가 아토피 피부염을 진단받은 것을 비롯하여 성인 아토피 피부염도 국내에서 그 빈도가 점증하고 있다. Atopic dermatitis begins with erythematous papules and seizures with severe itching and progresses to acute symptoms with blisters and serous exudates and crusts. The most characteristic symptom is pruritus, which is so severe that it bleeds to bleeding, and it continues to worsen with a vicious cycle of itching-scratching-itching. Most clinical manifestations are caused by scratching or rubbing, and at night, pruritus becomes more severe and causes sleep disorders. In recent years, the incidence of atopic dermatitis has been increasing worldwide, which may be attributed to air pollution, changes in the residential environment, increased exposure to antigens, reduced breastfeeding, and reduced childhood disease. have. According to a national epidemiological study conducted by the Korean Academy of Pediatric Allergy and Respiratory Diseases in 1995, 12 to 24% of elementary school students and 6 to 8% of middle school students were diagnosed with atopic dermatitis.In 2000, 24.9% of elementary school students and In addition to 12.8% diagnosed atopic dermatitis, adult atopic dermatitis is also increasing in Korea.

상기의 아토피 피부질환은 정확한 병태생리는 아직까지 완전히 이해되고 있지 않으나, 유전적 소인과 함께 면역학적, 비면역학적 기전이 관여하리라고 생각되고 있다. 아토피 피부염의 대부분을 차지하는 외인성 아토피 피부염은 면역글로불린E(IgE)와 연관된 면역기전에 의하여 발생되는데, 특정 알레르겐에 대한 속발성 면역 반응보다는 T-세포 이상에 의한 원발성 면역반응이 관여한다는 보고들이 많다. 아토피 피부염 환자에서 세포 매개성 면역기능 장애가 면역글로불린E의 증가와 관련이 있음이 밝혀지면서 속발성 면역 반응 외에도 원발성 면역 반응이 아토피 피부염의 병인에 관여한다고 주장하는 보고들이 증가하고 있다(이기영, 최신알레르기 진료, 한국의학사, 서울, 2001, pp23~52). The exact pathophysiology of the atopic dermatitis is not yet fully understood, but it is thought that immunological and non-immunological mechanisms are involved with genetic predisposition. Exogenous atopic dermatitis, which accounts for the majority of atopic dermatitis, is caused by an immune mechanism associated with immunoglobulin E (IgE), and many reports indicate that the primary immune response is caused by T-cell abnormalities rather than a secondary immune response to a particular allergen. As cell-mediated immune dysfunction is associated with an increase in immunoglobulin E in patients with atopic dermatitis, there are increasing reports claiming that the primary immune response is involved in the pathogenesis of atopic dermatitis in addition to the secondary immune response (Kee Young, et al. , Korean Medicine, Seoul, 2001, pp23 ~ 52).

아토피 피부염 환자에서 세포 매개성 면역 장애는 약 80%까지 발생하는 것으로 알려져 있으며, 바이러스 및 피부 사상균 등에 의한 피부 감염증에 대하여 감수성이 증가되고, 접촉 알레르겐에 대한 감수성은 감소되는 경향을 보인다. 과거에는 T-세포 성숙 결핍설, CD8+ 억제 T-세포의 수적 감소 등이 보고된 바 있으나, 최근엔 CD4+ T-세포의 역할이 더욱 중요한 것으로 알려지고 있다. 즉, B 세포로부터 면역글로불린E의 생성을 유도 또는 촉진하는 인터루킨(interleukin) 4, 5와 증폭시키는 인터루킨 6 등을 분비하는 T-세포는 CD4+ T-세포 중 Th2 세포인데 아토피 질환자들의 피부에서 Th1 세포에 비하여 Th2 세포가 높게 존재하는 것이 밝혀졌다. 이러한 싸이토카인(cytokine)들은 비만세포, 대식세포, 호염구 등의 면역세포를 자극하여 히스타민(histamine), 루코트리엔(leukotrien), 프로스타글란딘(prostaglandin), 일산화질소(NO) 등의 분비를 촉진하게 되고, 이들 염증 매개 물질이 피부의 염증반응을 촉진하는 것으로 알려져 있다. 이들 싸이토카인들은 세포가 특정한 상황에서 세포 밖으로 분비하는 단백질들로서, 주로 인터루킨(interleukin ; IL) 계열이 많이 알려져 있으며, 인터루킨의 역할은 개개의 인터루킨에 따라 아주 다양하며, 어떤 것은 면역기능의 일부를 담당하기도 하고, 어던 것은 다른 세포의 분화를 유도하기도 한다.It is known that cell-mediated immune disorders occur in patients with atopic dermatitis up to about 80%, and the susceptibility to skin infections caused by viruses and skin filaments is increased, and the sensitivity to contact allergens tends to decrease. In the past, T-cell maturation deficiency and the decrease in the number of CD8 + inhibitory T-cells have been reported. Recently, the role of CD4 + T-cells is known to be more important. That is, T-cells secreting interleukin 4, 5 that induces or promotes the production of immunoglobulin E from B cells, and interleukin 6 that amplify are Th2 cells among CD4 + T-cells, which are Th1 cells in the skin of atopic patients. It was found that Th2 cells were present higher than that of the cells. These cytokines stimulate immune cells such as mast cells, macrophages and basophils to promote secretion of histamine, leukotrien, prostaglandin and nitric oxide (NO). These inflammatory mediators are known to promote skin inflammatory responses. These cytokines are proteins that cells secrete out of cells in certain situations, mainly known for their interleukin (IL) family, and the role of interleukins varies greatly between individual interleukins, and some may play a part in immune function. Some of them induce differentiation of other cells.

아토피 피부질환에서 나타나는 또 다른 특징은 피부 세포의 세포막을 형성하는 지질 중 감마 리놀렌산(γ-linolenic acid)의 결핍이 보고된 점이다. 감마 리놀렌산의 결핍은 필수 지방산의 생합성 경로에서 델타-6-디세추라아제(δ-6-desaturase)의 기능 결손에 의하여 리놀레산(linoleic acid)으로부터 감마 리놀렌산으로의 합성 장애로 인하여 일어나는 현상으로서, 이후 프로스타글란딘 등의 합성을 조절하지 못해 염증 매개 물질의 생성이 높아지게 된다. 또한, 감마 리놀렌산의 결핍으로 피부 지질막의 구조에 이상이 발생하여 과도한 수분 유출 등이 일어남으로써 피부 장벽이 허물어지는 결과를 초래하며 이때 세균 등의 2차 감염이 일어난다.Another characteristic of atopic dermatitis is the lack of gamma-linolenic acid in lipids that form the cell membranes of skin cells. Gamma linolenic acid deficiency is a phenomenon caused by impaired synthesis of linoleic acid to gamma linolenic acid due to a loss of function of delta-6-desaturase in the biosynthetic pathway of essential fatty acids, followed by prostaglandins Do not control the synthesis of the back, the production of inflammatory mediators will increase. In addition, the deficiency of gamma linolenic acid causes abnormalities in the structure of the skin lipid membrane, resulting in excessive water leakage, resulting in the breakdown of the skin barrier, and at this time, secondary infection such as bacteria occurs.

한편, 아토피에 대한 다른 연구들에서, 케모카인(Chemokine)들에 의한 아토피 피부염의 발생이 또한 보고되었다. 이들 케모카인들도 세포에서 발현되는 단백질인 것에서는 상기한 싸이토카인과 동일한데 그 작용은 약간 다른 것으로 알려지고 있다. 즉, 상기 케모카인들은 주로 특정 부위로 특정한 세포들을 불러 모으는 역할을 한다. 즉 어던 세포가 특정 케모카인을 발현하게 되면 그 케모카인에 반응하는 종류의 세포들이 상기 케모카인이 발현된 세포쪽으로 이동하게 되어, 일종의 집합 신호 역할을 한다고 알려지고 있다. 특히, 다양한 종류의 백혈구의 이동과 활성화를 조절하는 싸이토카인의 일종으로, 조직으로의 염증세포의 침윤을 조절한다. 특히 알려진 케모카인들로서는 CCL22/MDC 및 CCL17/TARC(T-세포의 회복 및 촉발 ; 인터루킨 4, 인터루킨 5, 인터루킨 13 및 TNF-α의 T-세포 생성), TSLP(TARC 및 MDC의 증가된 생성의 결과를 가져오는 수지상 세포의 활성화), CCL27/CTACK(림프구의 회복 및 이동) 및 RANTES(호산구 및 T-세포 이동/활성화 ; 내피세포 표면에의 호산구 부착의 증가) 들을 들 수 있다. 여기에서 MDC는 마크로파지-유래의 케모카인(macrophage-derived chemokine)을 의미하고, TARC는 흉선 및 활성화-조절 케모카인(thymus and activation-regulated chemokine)을 의미하는 것으로서, 각질세포에서도 생산할 수 있기 때문에 상피에서의 TARC의 과생산이 아토피 병변피부로의 현저한 TH2 T 세포의 침윤에 기여하고, TSLP는 흉선 기질상 림포포이에틴(thymic stromal lymphopoietin)을 의미하고, CTACK는 피부 T-세포-유인 케모카인(cutaneous T-cell-attracting chemokine)을 의미하고, 그리고 RANTES는 활성화에 대해 조절된 정상 T-세포들 발현 및 분비(regulated on activation, normal T cells expressed and secreted)를 의미한다.Meanwhile, in other studies on atopy, the occurrence of atopic dermatitis by chemokines has also been reported. These chemokines are also the same as the cytokines described above in terms of proteins expressed in cells, but the action is known to be slightly different. That is, the chemokines mainly serve to attract specific cells to a specific site. That is, when a cell expresses a specific chemokine, cells of the kind that respond to the chemokine move toward the cell where the chemokine is expressed, and it is known that it serves as a kind of aggregation signal. In particular, it is a type of cytokine that regulates the movement and activation of various types of white blood cells, and controls the infiltration of inflammatory cells into tissues. Particularly known chemokines include CCL22 / MDC and CCL17 / TARC (recovery and triggering T-cells; T-cell production of interleukin 4, interleukin 5, interleukin 13 and TNF-α), TSLP (increased production of TARC and MDC) Resulting dendritic cells activation), CCL27 / CTACK (recovery and migration of lymphocytes) and RANTES (eosinophils and T-cell migration / activation; increased eosinophil adhesion to endothelial cell surface). Here MDC stands for macrophage-derived chemokine and TARC stands for thymus and activation-regulated chemokine, which can also be produced in keratinocytes. Overproduction of TARC contributes to significant infiltration of TH2 T cells into atopic lesion skin, TSLP stands for thymic stromal lymphopoietin and CTACK stands for cutaneous T-cell-induced chemokine -cell-attracting chemokine, and RANTES means regulated on activation, normal T cells expressed and secreted.

도 1에 아토피 피부염 및 아스마의 조직병변을 일으키는 과정을 모식한 도면을 나타내었다. 또한 도 2에 아토피 피부염 및 아스마를 일으키는 사이토카인과 케모카인의 상호작용을 모식한 도면을 나타내었다.Figure 1 is a schematic diagram showing the process of causing atopic dermatitis and asma histological lesions. In addition, Fig. 2 shows a schematic diagram illustrating the interaction between cytokines and chemokines that cause atopic dermatitis and asma.

상기와 같이 현재까지 알려진 아토피 피부염의 병인, 기전, 증상 등을 감안하여 아토피 피부염에 대한 치료제가 개발되고 있으며, 그 결과 천연 또는 합성의 면역억제제, 항히스타민제제, 스테로이드 제제 등 다수가 개발되어 있다. 예를 들면, 면역 억제제로는 싸이클로스포린(Cyclosporin) A, FK506(타크로리무스, Tacrolimus; Wasik 등, Immunopharmacology 20:57-61, 1990)와 SDZ ASM981(피메크로리무스, Pimecrolimus; Grassberger 등, Br. J. Dermatology 141:264-273, 1999) 이 각광받고 있다. 반면 기존의 아토피 피부염에 대한 치료제로 사용되는 스테로이드제제와 항히스타민제 등은 증상을 일시적으로 완화해주는 효과는 있으나, 외용 또는 경구용 스테로이드 호르몬제의 장기 사용 환자들에 있어서 피부가 엷어지는 현상 및 골다공증의 유발, 어린이의 경우 성장 저해 등 그에 따른 국소 및 전신 부작용으로 인하여 임상적으로 문제가 된다. 따라서 이러한 부작용이 없으며 효능이 우수한 치료제 개발이 요구되고 있다. In view of the etiology, mechanisms, and symptoms of atopic dermatitis as described above, a therapeutic agent for atopic dermatitis has been developed. As a result, a number of natural or synthetic immunosuppressive agents, antihistamines, steroid preparations, and the like have been developed. For example, immunosuppressants include Cyclosporin A, FK506 (Tacrolimus, Tacrolimus; Wasik et al., Immunopharmacology 20: 57-61, 1990) and SDZ ASM981 (Pimecrolimus, Pimecrolimus; Grassberger et al., Br. J. Dermatology 141: 264-273, 1999). On the other hand, steroids and antihistamines, which are used as treatments for atopic dermatitis, have the effect of temporarily relieving symptoms, but skin thinning and osteoporosis in long-term use of external or oral steroid hormones. It is clinically problematic due to local and systemic side effects such as induction and growth inhibition in children. Therefore, there is a need to develop a therapeutic agent having no such side effects and excellent efficacy.

미모사는 속씨식물문 쌍떡잎식물강 콩목 콩과 미모사속에 속하는 식물로서, 학명은 Mimosa pudica(Mp)이며, 브라질 원산의 여러살이풀인데 한국에서는 한해살이풀로 취급된다. 높이 30㎝ 정도이고, 잎에 물리적 자극을 주거나 빛의 변화에 따라 움직여서 잠풀 또는 신경초라고도 한다. 한방에서는 뿌리를 제외한 나머지를 함수초라는 약제로 쓰는데, 장염, 위염, 신경쇠약으로 인한 불명증에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.Mimosa is a plant belonging to the genus Soybean Dicotyledon bean and Mimosa genus. Its scientific name is Mimosa pudica (Mp), and it is a perennial plant native to Brazil. It is about 30㎝ high and gives a physical stimulus to the leaf or moves according to the change of light. In oriental medicine, the rest of the root is used as a drug called hyacinth, and it is known to have an effect on obscurity caused by enteritis, gastritis, and nervous breakdown.

한편, 본 발명자들은 아토피 피부염 및 아스마에 관여하는 (1) 줄기세포 인자에 의한 비만세포의 유주운동에 대한 미모사의 추출물의 효과, (2) 미모사 추출물의 세포에 대한 독성 효과, (3) EoL-1 세포(human eosinophilic leukemic cell)에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인인 MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1) 및 IL-6(인터루킨-6)에 대한 미모사 추출물의 억제 효과 및 (4) 천식 질환 유발 마우스에 대한 미모사 추출물의 효과들을 확인하고 본 발명을 완성하기 에 이르렀다.On the other hand, the present inventors (1) the effect of the extract of mimosa on the migrating movement of mast cells by stem cell factor involved in atopic dermatitis and asma, (2) the toxic effect on the cells of mimosa extract, (3) EoL- Inhibitory Effect of Mimosa Extracts on Inflammatory Cytokines and Chemokines of MCP-1 and IL-6 (Interleukin-6) in Human Eosinophilic Leukemic Cells and (4) Asthma-Induced Mice The effects of mimosa extracts on were identified and the present invention was completed.

본 발명자들은 상기와 같은 점들을 감안하여 아토피성 피부염 및 아스마 등 알러지 질환을 치료할 수 있는 천연물에 대해 연구를 수행하던 중 미모사의 추출물이 줄기세포 인자에 의한 비만세포(Human Mast Cell ; HMC-1)의 유주운동에 대한 억제효과, EoL-1 세포에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인인 MCP-1, 인터루킨-6의 생성 억제효과들을 확인하고, 세포독성에 대하여 실험하여 무독성 또는 저독성의 약학적 조성물의 제조가 가능한 지의 여부를 확인하였으며, 상기 미모사의 추출물을 천식 질환 유발 마우스에 추출하여 그 효과들을 확인함으로써 상기 미모사의 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물이 아토피 질환 및 아스마(천식) 질환 등에 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.In view of the above, the inventors of the present invention, while conducting research on natural products that can treat allergic diseases such as atopic dermatitis and asma, are known as extracts of mimosa caused by stem cell factors (Human Mast Cell; HMC-1). The inhibitory effect on the exercise of jujube, the inhibitory effect of the production of inflammatory cytokines and chemokines MCP-1, interleukin-6 in EoL-1 cells were confirmed, and tested for cytotoxicity to prepare a non-toxic or low-toxic pharmaceutical composition It was confirmed whether or not, and extracting the extract of the mimosa in asthma disease-inducing mice to check the effects of the pharmaceutical composition containing the extract of the mimosa as an active ingredient useful for atopic diseases and asma (asthma) diseases, etc. The present invention has been completed by confirming that it can be used.

본 발명은 피부질환 및 아스마 개선 또는 치료용의 미모사의 추출물을 제공한다.The present invention provides an extract of mimosa for improving or treating skin diseases and asma.

상기 미모사의 추출물은 에탄올추출물, 상기 에탄올추출물의 헥산분획물, 에탄올추출물의 에틸아세테이트분획물, 에탄올추출물의 부탄올분획물 및 에탄올추출물의 물분획물들로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 것이 될 수 있다.The extract of mimosa may be selected from the group consisting of ethanol extract, hexane fraction of the ethanol extract, ethyl acetate fraction of ethanol extract, butanol fraction of ethanol extract and water fraction of ethanol extract.

또한 본 발명은 미모사의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부질환 및 아스마 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for improving or treating skin diseases and asma including the extract of mimosa as an active ingredient.

상기 피부질환에는 아토피 피부염, 여드름, 일반 피부염, 무좀으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다.The skin disease may be selected from the group consisting of atopic dermatitis, acne, general dermatitis, athlete's foot.

이하, 본 발명의 구체적인 실시예를 첨부한 도면을 참조하여 상세히 설명한다.Hereinafter, exemplary embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings.

본 발명은 피부질환 및 아스마 개선 또는 치료용의 미모사의 추출물을 제공한다. 상기 미모사의 추출물은 건조된 미모사 전초(잎, 줄기 및 뿌리 전체를 포함함)를 추출용매와 함께 통상의 추출방법에 따라 침지 및 고액분리에 의해 수득하는 액체부분을 의미한다. 상기한 추출방법은 건조된 미모사 전초를 미모사 전초의 분말 100g에 대하여 500 내지 1,500㎖의 범위의 양의 에탄올(80% 농도)에 투입하고, 실온에서 20 내지 30시간 방치하는 에탄올 침지추출을 3회 반복하여 침지추출액들을 취합한 후, 여과하여 불순물을 제거하고, 침지추출액 총량의 1/2 내지 1/4의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 에탄올추출액을 제조할 수 있으나, 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니며, 사용되는 에탄올의 농도 및 양, 침지온도 및 침지시간, 침지추출의 반복 횟수, 침지추출액의 여과 및 농축의 정도 등은 모두 적의 변경될 수 있음은 당업자에게는 용이하게 이해될 수 있는 것이다. 또한, 공지의 다른 추출방법들 예를 들면, 액체 이산화탄소를 이용하는 초임계추출방법이나 가열을 요하지 않는 상온침지추출 등의 방법들이 사용될 수 있음은 이해될 수 있는 것이다.The present invention provides an extract of mimosa for improving or treating skin diseases and asma. The extract of mimosa refers to a liquid portion obtained by dipping and solid-liquid separation of dried mimosa outpost (including whole leaves, stems and roots) with an extraction solvent according to a conventional extraction method. In the above extraction method, the dried mimosa starch is added to ethanol (80% concentration) in an amount ranging from 500 to 1,500 mL with respect to 100 g of mimosa starch, and three times the ethanol immersion extraction is allowed to stand at room temperature for 20 to 30 hours. After collecting the immersion extracts repeatedly, the impurities are filtered to remove impurities, and the ethanol extract of mimosa according to the present invention can be prepared by concentrating to a volume of 1/2 to 1/4 of the total amount of immersion extract, The invention is not limited thereto, and it is easily understood by those skilled in the art that the concentration and amount of ethanol used, the immersion temperature and immersion time, the number of repetition of immersion extraction, the degree of filtration and concentration of the immersion extract may be changed as appropriate. It can be. In addition, it is to be understood that other known extraction methods, for example, supercritical extraction using liquid carbon dioxide or methods such as room temperature immersion extraction without heating, may be used.

상기 미모사의 에탄올추출액은 계속해서 헥산분획물, 에틸아세테이트분획물, 부탄올분획물 및 물분획물로 더 분획될 수 있다.The mimosa ethanol extract may be further fractionated into hexane fraction, ethyl acetate fraction, butanol fraction and water fraction.

상기 헥산분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액을 물에 현탁시킨 후, 동량의 n-헥산을 첨가하고, 진탕한 후, 방치하여 헥산으로 이루어지는 상층과 그 아래의 수층으로 분리되면 상층만을 분리해내는 분액과정을 3회 반복하고, 이 분획물들을 취합한 후, 상기 분획물들 총량의 1/2 내지 1/4의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 헥산분획물을 제조할 수 있다.The hexane fraction is a liquid separation process of suspending the ethanol extract of mimosa in water, adding the same amount of n-hexane, shaking, and then leaving the upper layer of hexane to separate the upper layer of the hexane extract. Repeating three times, and after collecting the fractions, the hexane fraction of mimosa of the present invention can be prepared by concentrating to a volume of 1/2 to 1/4 of the total amount of the fractions.

상기 에틸아세테이트분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액으로부터 상기한 바와 같이 헥산분획물을 수득한 후, 잔류하는 수층들을 사용하여 헥산 대신 에틸아세테이트를 이용하여 상기와 같이 동량의 에틸아세테이트를 첨가하고, 진탕한 후, 방치하여 에틸아세테이트로 이루어지는 상층과 그 아래의 수층으로 분리되면 상층만을 분리해내는 분액과정을 3회 반복하고, 이 분획물들을 취합한 후, 상기 분획물들 총량의 1/2 내지 1/4의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 에틸아세테이트분획물을 제조할 수 있다.The ethyl acetate fraction was obtained from the ethanol extract of mimosa as described above, and then obtained with hexane fraction, and then the same amount of ethyl acetate was added using acetonitrile instead of hexane using the remaining aqueous layers, followed by shaking. When the mixture is separated into an upper layer composed of ethyl acetate and an aqueous layer below, the separation process of separating only the upper layer is repeated three times, and after collecting the fractions, the volume of 1/2 to 1/4 of the total amount of the fractions The ethyl acetate fraction of mimosa of the present invention can be prepared by concentrating as much as possible.

상기 부탄올분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액으로부터 상기한 바와 같이 에틸아세테이트분획물을 수득한 후, 잔류하는 수층들을 사용하여 에틸아세테이트 대신 부탄올을 이용하여 상기와 같이 동량의 부탄올을 첨가하고, 진탕한 후, 방치하여 부탄올로 이루어지는 상층과 그 아래의 수층으로 분리되면 상층만을 분리해내는 분액과정을 3회 반복하고, 이 분획물들을 취합한 후, 상기 분획물들 총량의 1/2 내지 1/4의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 부탄올분획물을 제조할 수 있다.The butanol fraction is obtained from the ethanol extract of mimosa as described above, and then ethyl acetate fraction is added, using butanol instead of ethyl acetate using the remaining aqueous layers, the same amount of butanol is added as above, followed by shaking. When separated into the upper layer consisting of butanol and the water layer below it is repeated three times the separation process of separating only the upper layer, and after collecting the fractions, concentrated to a volume of 1/2 to 1/4 of the total amount of the fractions The butanol fraction of mimosa according to the present invention can be prepared.

상기 물분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액으로부터 상기한 바와 같이 부탄올분획물을 수득한 후, 잔류하는 수층들을 취합한 후, 상기 수층들 총량의 1/2 내지 1/4의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 물분획 물을 제조할 수 있다.The water fraction is obtained by obtaining the butanol fraction as described above from the ethanol extract of mimosa, collecting the remaining aqueous layers, and concentrating to a volume of 1/2 to 1/4 of the total amount of the aqueous layers. The water fraction of mimosa according to the invention can be prepared.

상기한 바와 같은 본 발명에 따른 미모사의 각 분획물들의 제조는 상기 기재된 구체예들에 제한되는 것은 아니며, 사용되는 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올의 농도 및 양, 진탕 및 분액의 반복 횟수 및 농축의 정도 등은 모두 적의 변경될 수 있음은 당업자에게는 용이하게 이해될 수 있는 것이다.Preparation of each fraction of mimosa according to the present invention as described above is not limited to the embodiments described above, the concentration and amount of hexane, ethyl acetate, butanol used, the number of times of shaking and separation and the degree of concentration, etc. It can be easily understood by those skilled in the art that both can be changed.

상기 미모사의 추출물의 유용성을 확인하기 위하여 (1) 줄기세포 인자에 의한 비만세포의 유주운동에 대한 미모사의 추출물의 효과, (2) 미모사 추출물의 세포에 대한 독성 효과, (3) EoL-1 세포(human eosinophilic leukemic cell)에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인인 MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1) 및 IL-6(인터루킨-6)에 대한 미모사 추출물의 억제 효과 및 (4) 천식 질환 유발 마우스에 대한 미모사 추출물의 효과들을 확인하고, 이들로부터 아토피 및/또는 아스마의 개선 또는 치료에 효과적으로 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.In order to confirm the usefulness of the extract of the mimosa (1) the effect of the extract of mimosa on the migrating movement of mast cells by stem cell factor, (2) the toxic effect on the cells of mimosa extract, (3) EoL-1 cells Inhibitory Effect of Mimosa Extracts on Inflammatory Cytokines and Chemokines MCP-1 and IL-6 (Interleukin-6) in Human Eosinophilic Leukemic Cells and (4) on Asthma-Induced Mice The effects of mimosa extract were confirmed, and from these, it could be confirmed that it can be effectively used for the improvement or treatment of atopy and / or asma.

또한 본 발명은 미모사의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부질환 및 아스마 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. The present invention also provides a pharmaceutical composition for improving or treating skin diseases and asma including the extract of mimosa as an active ingredient.

상기 약학적 조성물은 약학적으로 사용가능한 담체 또는 분산제, 현탁화제, 또는 안정화제 등을 더 포함할 수 있으며, 화장품, 목욕용품, 비누, 의약품 연고류, 동물 의약품 또는 팩 제품의 원료로 사용할 수 있다.The pharmaceutical composition may further include a pharmaceutically usable carrier or dispersant, suspending agent, stabilizer, and the like, and may be used as a raw material for cosmetics, bath products, soaps, pharmaceutical ointments, animal medicines, or pack products.

상기 약학적 조성물은 임상 투여시에 비경구 투여가 가능하며, 일반적인 의약품제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 용액제, 현탁제, 스프레이제, 패취제, 패드제, 크림제, 연고제, 겔제, 정제 또는 환제로 제조될 수 있다.The pharmaceutical composition may be parenterally administered during clinical administration, and may be used in the form of a general pharmaceutical formulation. That is, it may be prepared as a solution, suspension, spray, patch, pad, cream, ointment, gel, tablet or pill.

용액제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 용매, 가용화제 및 유화제, 예를 들면 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디메틸포름아미드, 오일, 특히 면실유, 낙화생유, 동백유, 알로에베라, 글리세린, 옥배유, 올리브유, 피마자유, 아몬드유 및 참깨유, 글리세롤, 글리세롤포름알코올, 테트라히드로푸르푸릴알코올, 폴리에틸렌글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 또는 이들 물질의 혼합물을 포함할 수 있으며, 보존제로서 메틸- 또는 프로필-p-히드록시벤조에이트 또는 솔브산 등을 포함할 수 있다. Solutions include, in addition to the active compounds, conventional excipients, for example solvents, solubilizers and emulsifiers, for example water, ethanol, isopropanol, ethylcarbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-butyl Lenglycol, dimethylformamide, oils, in particular cottonseed oil, peanut oil, camellia oil, aloe vera, glycerin, jade oil, olive oil, castor oil, almond oil and sesame oil, glycerol, glycerol form alcohol, tetrahydrofurfuryl alcohol, polyethylene glycol and Fatty acid esters of sorbitan, or mixtures of these materials, and may include methyl- or propyl-p-hydroxybenzoate, sorbic acid, and the like as preservatives.

현탁제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 액상 희석제(예: 물, 에탄올 및 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜) 및 현탁제(예: 에톡실화 이소스테아릴알코올, 폴리옥시에틸렌소르비톨, 소르비탄에스테르, 셀룰로스유도체 및 수소화 식용유지), 미세결정성셀룰로오스, 알루미늄메타히드록시드, 벤토나이트, 한천 및 트라가칸트, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 또는 이들 물질의 혼합물을 함유할 수 있다. Suspending agents, in addition to active compounds, include conventional excipients, for example liquid diluents such as water, ethanol and propylene glycol, polyethylene glycol, and suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol, sorbitan esters, Cellulose derivatives and hydrogenated edible oils), microcrystalline cellulose, aluminum methoxide, bentonite, agar and tragacanth, injectable esters such as ethyl oleate or mixtures of these materials.

연고제, 크림제 및 겔제는 유효 화합물 이외에 통상의 부형제, 예를 들면 동물성 및 식물성 지방, 왁스 파라핀, 전분, 타르가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 규산, 활석 및 산화 아연 또는 이들 물질의 혼합물을 함유할 수 있다. Ointments, creams and gels may be used in addition to the active compounds, as usual excipients, for example animal and vegetable fats, wax paraffins, starches, targacanths, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonite, silicic acid, talc and zinc oxide or these substances It may contain a mixture of.

또한, 투여방법은 일반적으로 환부에 도포하는 방법이 사용될 수 있으며, 제형에 따라 바람직한 투여방법을 선택할 수 있다. 본 발명의 조성물의 일일 투여량 은 투여대상, 투여방법, 증상에 따라 결정될 수 있다. 투여회수는 1일 2회 이상이 바람직하나, 증상 정도에 따라 투여 회수 또한 조절될 수 있다. 즉, 상기 투여방법, 투여량 및 투여회수들은 특히 치료할 객체의 체질 특이성 및 체중, 질병의 종류 및 심도, 제형의 성질, 의약품 투여의 성질, 및 투여기간 또는 간격을 고려해서 변화시킬 수 있다.In addition, the method of administration may be generally applied to the affected area, it is possible to select the preferred method of administration depending on the formulation. Daily dosage of the composition of the present invention may be determined depending on the administration target, administration method, symptoms. The number of administration is preferably two or more times a day, but the number of administration may also be adjusted according to the degree of symptoms. That is, the method of administration, dosage and frequency of administration may be changed in particular taking into account the constitution specificity and weight of the subject to be treated, the type and depth of the disease, the nature of the formulation, the nature of the drug administration, and the duration or interval of administration.

아토피를 효과적으로 치료하기 위해서는 적합한 외용 제형을 선택하는 것이 중요하다. 아토피를 치료하기 위해 미모사 추출물을 적당히 희석하여 피부에 직접 도포할 수도 있으며, 본 발명에서는 상기 아토피 치료용 조성물이 환부에 효과적으로 적용될 수 있는 연고제를 제공한다. 본 발명의 연고제는 상기 기재된 아토피 치료용 약학적 조성물을 무기물질과 배합한 다음, 이를 지용성 기제로 코팅하여 제조한다. 상기 무기물질은 항균성, 소염효과, 표피재생 효과 등이 우수한 소재를 사용하는 것이 바람직하고, 이들의 구체적인 예로는 산화아연, 탄산아연, 산화철 등이 있다. In order to effectively treat atopy, it is important to select a suitable external formulation. In order to treat atopy, mimosa extract may be appropriately diluted and applied directly to the skin, and the present invention provides an ointment which can be effectively applied to the affected area for treating the atopy. The ointment of the present invention is prepared by combining the pharmaceutical composition for treating atopy described above with an inorganic substance and then coating it with a fat-soluble base. The inorganic material is preferably used a material having excellent antibacterial, anti-inflammatory effect, epidermal regeneration effect, and specific examples thereof include zinc oxide, zinc carbonate, iron oxide.

또한, 수용성 물질인 본 발명의 아토피 치료용 조성물을 안전하게 함침할 수 있는 세라믹 담체를 추가로 사용하는 것이 바람직하다. 상기 세라믹 담체로는 제올라이트, 활석, 석고, 모려분 및 이들의 혼합물이 바람직하게 사용된다. 이러한 세라믹 담체는 수용성 성분의 함침성이 우수하여 피부에 수용성 성분의 공급을 원활히 할 수 있다.In addition, it is preferable to further use a ceramic carrier capable of safely impregnating the composition for treating atopy of the present invention, which is a water-soluble substance. As the ceramic carrier, zeolite, talc, gypsum, seed powder and mixtures thereof are preferably used. Such a ceramic carrier is excellent in the impregnation of the water-soluble component can facilitate the supply of the water-soluble component to the skin.

상기 피부질환에는 아토피 피부염, 여드름, 일반 피부염, 무좀으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다.The skin disease may be selected from the group consisting of atopic dermatitis, acne, general dermatitis, athlete's foot.

따라서, 본 발명에 의하면 아토피나 아스마와 같은 알러지성 질환에 대한 경감 및/또는 치료효과를 갖는 미모사의 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 알러지 및 아스마 치료용 약학적 조성물을 제공하는 효과가 있다.Therefore, according to the present invention, there is an effect of providing an extract of mimosa having alleviation and / or treatment effect for allergic diseases such as atopy or asma, and a pharmaceutical composition for treating allergy and asma including the same as an active ingredient.

이하에서 본 발명의 바람직한 실시예 및 비교예들이 기술되어질 것이다.Hereinafter, preferred embodiments and comparative examples of the present invention will be described.

이하의 실시예들은 본 발명을 예증하기 위한 것으로서 본 발명의 범위를 국한시키는 것으로 이해되어져서는 안될 것이다.The following examples are intended to illustrate the invention and should not be understood as limiting the scope of the invention.

실시예 1 내지 5Examples 1-5

건조된 미모사 전초를 사용하여 미모사의 에탄올추출액(실시예 1) 및 각 분획물(실시예 2 내지 5)들을 준비하였다.The mimosa ethanol extract (Example 1) and each fraction (Examples 2 to 5) were prepared using the dried mimosa outpost.

건조된 미모사 전초(잎, 줄기 및 뿌리 전체를 포함함)의 분말 100g에 대하여 1,000㎖의 범위의 양의 에탄올(80% 농도)에 투입하고, 실온에서 24시간 방치하는 에탄올 침지추출을 3회 반복하여 침지추출액들을 취합한 후, 여과하여 불순물을 제거하고, 침지추출액 총량의 1/3의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 에탄올추출액(실시예 1)을 제조하였다.100 g of dried mimosa starch (including the entire leaf, stem and root) was added to ethanol (80% concentration) in an amount in the range of 1,000 ml, and ethanol immersion extraction, which was left at room temperature for 24 hours, was repeated three times. The immersion extracts were collected, filtered to remove impurities, and concentrated to a volume of 1/3 of the total amount of the immersion extract to prepare an ethanol extract of mimosa (Example 1) according to the present invention.

상기 미모사의 에탄올추출액은 계속해서 헥산분획물, 에틸아세테이트분획물, 부탄올분획물 및 물분획물로 더 분획시켰다.The ethanol extract of Mimosa was further fractionated into hexane fraction, ethyl acetate fraction, butanol fraction and water fraction.

상기 헥산분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액을 물에 현탁시킨 후, 동량의 n-헥산을 첨가하고, 진탕한 후, 방치하여 헥산으로 이루어지는 상층과 그 아래의 수층으로 분리되면 상층만을 분리해내는 분액과정을 3회 반복하고, 이 분획물들을 취합한 후, 상기 분획물들 총량의 1/3의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 헥산분획물(실시예 2)을 제조할 수 있다.The hexane fraction is a liquid separation process of suspending the ethanol extract of mimosa in water, adding the same amount of n-hexane, shaking, and then leaving the upper layer of hexane to separate the upper layer of the hexane extract. Repeated three times, and after collecting the fractions, the hexane fraction of mimosa of the present invention (Example 2) can be prepared by concentrating to a volume of 1/3 of the total amount of the fractions.

상기 에틸아세테이트분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액으로부터 상기한 바와 같이 헥산분획물을 수득한 후, 잔류하는 수층들을 사용하여 헥산 대신 에틸아세테이트를 이용하여 상기와 같이 동량의 에틸아세테이트를 첨가하고, 진탕한 후, 방치하여 에틸아세테이트로 이루어지는 상층과 그 아래의 수층으로 분리되면 상층만을 분리해내는 분액과정을 3회 반복하고, 이 분획물들을 취합한 후, 상기 분획물들 총량의 1/3의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 에틸아세테이트분획물(실시예 3)을 제조할 수 있다.The ethyl acetate fraction was obtained from the ethanol extract of mimosa as described above, and then obtained with hexane fraction, and then the same amount of ethyl acetate was added using acetonitrile instead of hexane using the remaining aqueous layers, followed by shaking. When the mixture is separated into an upper layer composed of ethyl acetate and an aqueous layer below, the separation process of separating only the upper layer is repeated three times, and the fractions are collected and concentrated to a volume of 1/3 of the total amount of the fractions. By this, ethyl acetate fraction of Mimosa according to the present invention (Example 3) can be prepared.

상기 부탄올분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액으로부터 상기한 바와 같이 에틸아세테이트분획물을 수득한 후, 잔류하는 수층들을 사용하여 에틸아세테이트 대신 부탄올을 이용하여 상기와 같이 동량의 부탄올을 첨가하고, 진탕한 후, 방치하여 부탄올로 이루어지는 상층과 그 아래의 수층으로 분리되면 상층만을 분리해내는 분액과정을 3회 반복하고, 이 분획물들을 취합한 후, 상기 분획물들 총량의 1/3의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 부탄올분획물(실시예 4)을 제조할 수 있다.The butanol fraction is obtained from the ethanol extract of mimosa as described above, and then ethyl acetate fraction is added, using butanol instead of ethyl acetate using the remaining aqueous layers, the same amount of butanol is added as above, followed by shaking. When separated into the upper layer consisting of butanol and the water layer below it is repeated three times the separation process of separating only the upper layer, and after collecting the fractions, by concentrating to a volume of 1/3 of the total amount of the fractions Butanol fraction of mimosa according to the invention (Example 4) can be prepared.

상기 물분획물은 상기 미모사의 에탄올추출액으로부터 상기한 바와 같이 부탄올분획물을 수득한 후, 잔류하는 수층들을 취합한 후, 상기 수층들 총량의 1/3의 부피가 되도록 농축하는 것에 의하여 본 발명에 따른 미모사의 물분획물(실시예 5) 을 제조할 수 있다.The water fraction is obtained from the ethanol extract of mimosa as described above, butanol fractions are collected, the remaining aqueous layers are collected, and then concentrated to a volume equal to 1/3 of the total amount of the aqueous layers. The water fraction (Example 5) of can be manufactured.

실험예 1Experimental Example 1

미모사 추출물의 비만세포의 이동에 대한 억제효과Inhibitory Effect of Mimosa Extracts on Mast Cell Migration

상기 실시예들을 사람의 비만세포주(HMC-1 세포) 5*106 세포/㎖에 각각 10㎍/㎖을 처리하여 24시간 동안 처리하였을 때 100ng/㎖의 줄기세포인자에 대한 이동 세포수를 측정하였다. 무처리 상태의 대조군을 100%로 하였을 때, 추출물을 처리한 비만세포주의 이동율을 비교하여 도 3에 나타내었다.When the above examples were treated for 24 hours by treating 10 μg / ml with 5 * 10 6 cells / ml of human mast cell line (HMC-1 cells), the number of mobile cells for the stem cell factor of 100 ng / ml was measured. It was. When the control group of the untreated state was set to 100%, it was shown in Figure 3 comparing the migration rate of the treated mast cells.

도 3에 나타난 바와 같이, 미모사 추출물들에 의해 비만세포의 유주운동이 감소됨을 확인할 수 있었다.As shown in Figure 3, mimosa extracts can be confirmed that the mesokinetic movement of mast cells.

천식을 유발시키는 원인세포 중의 하나인 비만세포에 대한 실험 결과, 미모사의 추출물이 비만세포의 이동을 억제하는 효과가 있었으며, 이를 통하여 알러지성 질환에 대한 치료효과의 가능성이 있음을 확인할 수 있었다.As a result of experiments on mast cells, one of the causative agents causing asthma, the extract of mimosa had the effect of inhibiting the migration of mast cells, and it was confirmed that there is a possibility of therapeutic effect against allergic diseases.

실험예 2Experimental Example 2

미모사 추출물들의 세포 독성 여부Cytotoxicity of Mimosa Extracts

미모사 추출물들의 세포 독성 여부를 확인하기 위하여, EoL-1 세포(human eosinophilic leukemic cell) 5*105 세포/㎖에 상기 실시예 1 내지 5들을 10㎍/㎖을 처리한 후, 24시간 후에 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) 분석을 실시하였으며, 그 결과를 도 4에 나타내었다.In order to confirm the cytotoxicity of mimosa extracts, 5 * 10 5 cells / ml of EoL-1 cells (human eosinophilic leukemic cells) were treated with 10 μg / ml of Examples 1 to 5, and after 24 hours, MTT ( 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) analysis was performed, and the results are shown in FIG. 4.

도 4에 나타난 바와 같이, 미모사 추출물 처리 시, 무처리군인 대조군에 비 해 세포 생존율이 감소하지 않았으므로, 미모사 추출물이 상기 농도에서 세포에 대한 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다.As shown in Figure 4, when the mimosa extract treatment, cell viability was not reduced compared to the control group, the mimosa extract did not show the toxicity to the cells at the concentration.

실험예 3Experimental Example 3

EoL-1 세포에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인에 대한 미모사 추출물들의 억제 효과Inhibitory Effects of Mimosa Extracts on Inflammatory Cytokines and Chemokines in EoL-1 Cells

사람의 호산구는 비만세포와 마찬가지로 아스마(천식)와 같은 급만성 염증반응에서 다양한 사이토카인 및 케모카인을 생산하여 질병을 악화시킨다. 사람의 호산구인 EoL-1 세포를 이용한 in vitro(생체 외) 실험에서 확인하였다.Human eosinophils, like mast cells, produce a variety of cytokines and chemokines in acute inflammatory reactions such as asma (asthma), exacerbating the disease. In vitro experiments using human Eosinophil EoL-1 cells were performed.

EoL-1 세포(human eosinophilic leukemic cell) 1*106 세포/㎖에 상기 실시예 1 내지 5들을 10㎍/㎖을 1시간 동안 전처리한 후에 집먼지진드기(mite) 1㎍/㎖을 처리한 24시간 후에 ELISA를 이용하여 상층액에서 MCP-1과 IL-6의 양을 측정하였으며, 그 결과를 도 5 및 도 6에 나타내었다.24 hours of treatment with house dust mites (1 μg / ml) after pretreatment of 10 μg / ml of Examples 1 to 5 for 1 hour to 1 * 10 6 cells / ml of EoL-1 cells (human eosinophilic leukemic cells) Afterwards, the amount of MCP-1 and IL-6 was measured in the supernatant using ELISA, and the results are shown in FIGS. 5 and 6.

도 5 및 도 6에 나타난 바와 같이, 응애에 의해 증가한 각각의 MCP-15 and 6, each MCP-1 increased by mites

(도 5 ; 단위 pg/㎖) 및 IL-6(도 6 ; 단위 pg/㎖)가 미모사 추출물에 의해 억제됨을 확인할 수 있었다.(FIG. 5; unit pg / mL) and IL-6 (FIG. 6; unit pg / mL) were confirmed to be inhibited by mimosa extract.

MCP-1과 IL-6 같은 사이토카인은 다양한 세포에서 분비되어 염증세포의 이동을 유도하고, 활성에 관여하여 염증 반응의 조절에 중요한 역할을 한다. MCP-1은 단핵세포(monocyte), 섬유아세포(fibroblast), 내피세포(endothelial cell) 등에서 생산된다. 또한 아스마, 류마티스성 관절염, 동맥경화증 등 다양한 염증질환에서 는 염증부위로 많은 수의 단핵세포, T 세포를 불러들여 염증 반응을 악화시킨다. IL-6는 면역반응에서 활성화된 T 세포와 마크로파지(macrophage)에 의해 생산되고 증가된 IL-6는 염증 반응을 유도한다.Cytokines, such as MCP-1 and IL-6, are secreted from various cells to induce the migration of inflammatory cells and play an important role in the regulation of inflammatory responses by being involved in activity. MCP-1 is produced in monocytes, fibroblasts, endothelial cells, and the like. In addition, in various inflammatory diseases such as asma, rheumatoid arthritis, and atherosclerosis, a large number of mononuclear cells and T cells are brought into the inflammatory site to worsen the inflammatory response. IL-6 is produced by T cells and macrophage activated in the immune response and increased IL-6 induces an inflammatory response.

따라서 본 발명에 따른 미모사 추출물들은 염증반응에 관여하는 사이토카인 및 케모카인의 분비를 억제함을 확인할 수 있었으며, 이는 알러지성 질환에 대한 치료에 효과가 있음을 나타낸다.Therefore, mimosa extracts according to the present invention could be confirmed to inhibit the secretion of cytokines and chemokines involved in the inflammatory response, indicating that it is effective in the treatment for allergic diseases.

실험예 4Experimental Example 4

난알부민(Ovalbumin)에 의해 유도된 천식 유발 마우스에서의 미모사 추출물의 항알러지 효과Anti-allergic Effect of Mimosa Extracts in Asthma-induced Mice Induced by Ovalbumin

천식 유발 마우스를 사용하여 생체내(in vivo) 실험에서 미모사 추출물들의 항알러지 효과를 관찰하였다.Asthma-induced mice were used to observe the anti-allergic effect of mimosa extracts in in vivo experiments.

천식 질환을 유발하여 미모사 추출물들의 효과를 확인하기 위한 동물 실험으로서, 천식 질환 유발 마우스 10개체에게 난알부민을 1마리 당 20㎍을 2주 간격으로 복강 내 주입을 2번 실시하였고, 2회차 복강 내 주입 1주 후에 5% 난알부민 용액을 1주 동안 매일 1시간씩 흡입시켰다.As an animal experiment to confirm the effects of mimosa extracts by inducing asthma disease, 10 mice with asthma disease-induced intraperitoneal injection of 20 μg per egg albumin at 2 week intervals were performed twice. After 1 week of infusion, 5% egg albumin solution was inhaled for 1 hour daily for 1 week.

실험 개시 3주 후 이하의 검사들을 수행하였다.Three weeks after the start of the experiment, the following tests were performed.

대조군으로서 정상군인 천식 비유발 마우스군(N)은 천식 유발을 위한 난알부민의 처리를 하지 않았으며, 미모사 추출물의 투여도 하지 않았다.As a control group, the asthmatic non-induced mouse group (N) was not treated with egg albumin to induce asthma and did not receive mimosa extract.

대조군으로서의 천식 유발 - 미모사 추출물 미처리군(C)은 상기와 같이 천식 유발은 시켰으나, 미모사 추출물을 포함한 어떠한 약물처리도 수행하지 않았다.Asthma-induced as a control group-Mimosa extract Untreated group (C) induced asthma as described above, but did not perform any drug treatment including mimosa extract.

시험군으로서의 천식 유발 마우스군은 다시 미모사 추출물 투여군들과 덱사메타손 경구투여군(Dex) 1㎎과 덱사메타손 복강투여군(Dex ip) 50㎍을 투여한 군으로 구분하였다.Asthma-induced mice were further divided into mimosa extract group, dexamethasone oral group (Dex) 1 mg, and dexamethasone intraperitoneal group (Dex ip).

미모사 추출물 투여군들은 매일 미모사 추출물 1㎎을 투여한 군(Mp 1), 매일 미모사 추출물 2.5㎎을 투여한 군(Mp 2.5) 및 매일 미모사 추출물 5㎎을 투여한 군(Mp 5)들로 세분되었다.The mimosa extract-administered groups were subdivided into a group administered with 1 mg daily mimosa extract (Mp 1), a group administered 2.5 mg daily mimosa extract (Mp 2.5) and a group administered 5 mg daily mimosa extract (Mp 5).

백혈구 및 호산구에 대한 영향Effects on white blood cells and eosinophils

도 7에는 천식 유발 마우스의 폐세척액(BALF)에 존재하는 백혈구 수를 측정한 결과를 나타내었다. 도 7에 나타난 바와 같이, 정상군에 비해 천식 유발 군에서 백혈구의 수가 10배 정도 증가하였으나, 미모사 추출물 처리군들에서 현저히 감소함을 나타냄을 확인할 수 있었다.Figure 7 shows the results of measuring the number of white blood cells present in the lung washing solution (BALF) of asthma-induced mice. As shown in FIG. 7, the number of leukocytes increased by 10 times in the asthma-induced group compared to the normal group, but it was confirmed that the mimosa extract treated group was significantly reduced.

도 8에는 백혈구 중 천식에 주요하게 작용하는 세포인 호산구에 대한 측정 결과를 나타내었다. 도 8에 나타난 바와 같이, 천식 유발군에서 증가한 호산구가 미모사 추출물에 의해 크게 감소함을 확인할 수 있었다.Figure 8 shows the measurement results for eosinophils, the cells that mainly act on asthma in the white blood cells. As shown in Figure 8, the eosinophils increased in the asthma-induced group was confirmed to be greatly reduced by mimosa extract.

폐조직에 대한 영향Impact on lung tissue

천식 유발 마우스에서 기관(trachea)에 가까운 폐 조직을 적출한 후, 고정하여 파라핀 조직 블록으로 제작하였다. 그 후, 마이크로톰(microtome)을 이용하여 조직 절편을 만든 다음, H&E 염색(hematoxylin & eosin stain)을 실시하여 현미경으로 관찰하였으며, 그 결과를 도 9에 나타내었다. 도 9에 나타난 바와 같이, 정상군에 비해 천식 유발군에서 기관지에 침윤된 세포의 수가 증가하고, 폐포가 좁아 져 있는 반면, 미모사 추출물 투여군들에서는 세포의 수가 감소하고 폐포의 형태가 정상과 유사하게 관찰됨을 확인할 수 있었다.Lung tissues close to trachea were extracted from asthma-induced mice and fixed to prepare paraffin tissue blocks. Thereafter, tissue sections were prepared using a microtome, and then subjected to H & E staining (hematoxylin & eosin stain), and observed under a microscope. The results are shown in FIG. 9. As shown in FIG. 9, the number of cells infiltrated into the bronchus increased and the alveoli were narrowed in the asthma-induced group compared to the normal group, whereas in the mimosa extract-administered groups, the number of cells decreased and the alveolar morphology was similar to normal. Observation was possible.

상기 H&E 염색에서와 동일하게 조직 절편으로 과요오드산-시프 염색(periodic acid - schiff stain)을 실시하여 현미경으로 관찰하였으며, 그 결과를 도 10에 나타내었다. 도 10에 나타난 바와 같이, 정상군에 비해 천식 유발군에서 기관지에 점액의 분비가 많이 증가한 것을 관찰할 수 있었으며, 미모사 추출물 투여군은 천식 유발군에 비해 미모사 추출물의 농도에 의존적으로 점액의 분비 및 세포의 수가 감소함을 확인할 수 있었다.Periodic acid-schiff staining was performed on the tissue sections in the same manner as in the H & E staining and observed under a microscope. The results are shown in FIG. 10. As shown in FIG. 10, it was observed that the secretion of mucus increased in the bronchus in the asthma-induced group compared to the normal group, and the mimosa extract-administered group was dependent on the concentration of the mimosa extract in comparison with the asthma-induced group. It can be seen that the number of decreases.

IL-5에 대한 영향Impact on IL-5

천식 유발 마우스의 폐세척액에서 사이토카인인 IL-5(인터루킨-5)의 양을 ELISA로 측정하였으며, 그 결과를 도 11에 나타내었다. 도 11에 나타난 바와 같이, 정상군에 비해 천식 유발군에서 증가한 인터루킨-5가 미모사 추출물 투여군에서는 그 발현양이 감소하여 미모사 추출물에 의한 인터루킨-5 발현 억제 효과를 확인할 수 있었다.The amount of cytokine IL-5 (interleukin-5) in the lung wash solution of asthma-induced mice was measured by ELISA, and the results are shown in FIG. 11. As shown in FIG. 11, the expression level of interleukin-5 increased in the asthma-induced group compared to the normal group was decreased in the mimosa extract-administered group, thereby confirming the inhibitory effect of interleukin-5 expression by the mimosa extract.

면역글로블린E에 대한 영향Impact on immunoglobulin E

천식 유발 마우스의 폐세척액에서 총 면역글로불린E(도 11) 및 알부민 특이적 면역글로불린E 항체(도 12)를 ELISA 방법을 사용하여 측정하였으며, 그 결과를 도 12 및 도 13에 나타내었다. 천식 유발군에서는 정상군에 비해 증가하였고, 미모사 추출물에 의해 총 면역글로불린E의 양이 감소(도 12)하였으며, 알부민 특이적 면역글로불린E의 양이 감소(도 13) 함을 확인할 수 있었다. 특히, 알부민 특이적 면역글로불린E에 대한 역제효과가 크게 나타났다.Total immunoglobulin E (FIG. 11) and albumin specific immunoglobulin E antibodies (FIG. 12) in the lung wash solution of asthma-induced mice were measured using the ELISA method, and the results are shown in FIGS. 12 and 13. Asthma-induced group was increased compared to the normal group, the amount of total immunoglobulin E by the mimosa extract was reduced (Fig. 12), it was confirmed that the amount of albumin-specific immunoglobulin E (Fig. 13). In particular, the adverse effects on albumin-specific immunoglobulin E were large.

혈청 면역글로불린E 수준에 대한 영향Effect on Serum Immunoglobulin E Levels

천식 유발 마우스의 혈청에서 총 면역글로불린E(도 14) 및 알부민 특이적 면역글로불린E(도 15) 항체를 ELISA 방법을 사용하여 측정하였으며, 그 결과를 도 14 및 도 15에 나타내었다. 천식 유발군에서는 정상군에 비해 증가하였고, 미모사 추출물에 의해 총 면역글로불린E의 양이 감소(도 14)하였으며, 알부민 특이적 면역글로불린E의 양이 감소(도 15) 함을 확인할 수 있었다. 특히, 알부민 특이적 면역글로불린E에 대한 역제효과가 크게 나타났다.Total immunoglobulin E (FIG. 14) and albumin specific immunoglobulin E (FIG. 15) antibodies in the serum of asthma-induced mice were measured using the ELISA method, and the results are shown in FIGS. 14 and 15. Asthma-induced group was increased compared to the normal group, the total amount of immunoglobulin E by the mimosa extract was reduced (Fig. 14), it was confirmed that the amount of albumin-specific immunoglobulin E (Fig. 15). In particular, the adverse effects on albumin-specific immunoglobulin E were large.

GOT 및 GPT 수준에 대한 영향Impact on GOT and GPT Levels

천식 유발 마우스를 이용한 실험에서 미모사 추출물이 마우스에게 독성이 있는 지의 여부를 확인하기 위하여 간독성 검사를 수행하였다. 간 독성은 대표적으로 GOT, GPT의 증가 수치를 측정하여 판단하였으며, 그 결과를 도 16 및 도 17에 나타내었다. 그 결과, 정상군, 천식 유발 마우스군, 미모사 추출물 투여군, 덱사메타손 투여군에 모두에서 GOT(도 16) 및 GPT(도 17)가 증가하지 않았음을 확인할 수 있었다. 이는 미모사 추출물이 마우스 내에서 독성을 가지고 있지 않음을 나타낸다.In experiments using asthma-induced mice, hepatotoxicity tests were performed to determine whether mimosa extracts were toxic to mice. Hepatotoxicity was typically determined by measuring increased levels of GOT and GPT, and the results are shown in FIGS. 16 and 17. As a result, it was confirmed that the GOT (FIG. 16) and GPT (FIG. 17) did not increase in the normal group, the asthma-induced mouse group, the mimosa extract administration group, and the dexamethasone administration group. This indicates that mimosa extract is not toxic in mice.

상기한 실시예들을 종합한 결과, 미모사의 추출물이 줄기세포 인자에 의한 비만세포(Human Mast Cell ; HMC-1)의 유주운동에 대한 억제효과, EoL-1 세포에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인인 MCP-1, 인터루킨-6의 생성 억제효과들을 확인하고, 세포독성에 대하여 실험하여 무독성 또는 저독성의 약학적 조성물의 제조가 가능한 지의 여부를 확인하였으며, 상기 미모사의 추출물을 천식 질환 유발 마우스에 추출하여 그 효과들을 확인함으로써 상기 미모사의 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물이 아토피 질환 및 아스마(천식) 질환 등에 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써 무독성 또는 저독성의 약학적 조성물의 제조가 가능하며, 상기 미모사 추출물을 유효성분으로 하는 약학적 조성물이 아토피 및 천식 등의 질환에 유용하게 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다.As a result of the synthesis of the above embodiments, the mimosa extract inhibits the stem cell factor-induced motility of the mast cells (HMC-1), inflammatory cytokines and chemokine MCPs in EoL-1 cells. -1, confirmed the inhibitory effects of the production of interleukin-6, and tested for cytotoxicity to determine whether it is possible to prepare a non-toxic or low-toxic pharmaceutical composition, the extract of the mimosa extract asthma disease-inducing mice By confirming the effects that the pharmaceutical composition comprising the extract of the mimosa as an active ingredient can be usefully used for atopic diseases and asma (asthma) diseases, etc., it is possible to prepare a non-toxic or low-toxic pharmaceutical composition, the mimosa Pharmaceutical compositions using the extract as an active ingredient may be useful for diseases such as atopy and asthma. The confirmed.

본 발명은 아토피 및 천식 등의 질환의 치료에 유용한 약제학적 조성물을 제공하며, 그에 따라 제약산업 등에 이용될 수 있다.The present invention provides a pharmaceutical composition useful for the treatment of diseases such as atopy and asthma, and thus can be used in the pharmaceutical industry and the like.

도 1은 아토피 피부염 및 아스마의 조직병변을 일으키는 과정을 모식한 도면이다.1 is a view schematically illustrating a process for causing atopic dermatitis and asma histological lesions.

도 2는 아토피 피부염 및 아스마를 일으키는 사이토카인과 케모카인의 상호작용을 모식한 도면이다.2 is a diagram schematically illustrating the interaction between cytokines and chemokines that cause atopic dermatitis and asma.

도 3은 미모사 추출물의 비만세포의 이동에 대한 억제효과를 나타내는 그래프이다.Figure 3 is a graph showing the inhibitory effect on the migration of mast cells of mimosa extract.

도 4는 미모사 추출물들의 세포 독성 여부를 나타내는 그래프이다.Figure 4 is a graph showing the cytotoxicity of mimosa extracts.

도 5 및 도 6들은 EoL-1 세포에서의 염증성 사이토카인 및 케모카인에 대한 미모사 추출물들의 억제 효과를 나타내는 그래프이다.5 and 6 are graphs showing the inhibitory effect of mimosa extracts on inflammatory cytokines and chemokines in EoL-1 cells.

도 7 내지 도 17들은 난알부민(Ovalbumin)에 의해 유도된 천식 유발 마우스에서의 미모사 추출물의 항알러지 효과에 대한 것으로서, 도 7 및 도 8들은 백혈구 및 호산구에 대한 영향을 나타내는 그래프이고, 도 9 및 도 10들은 폐조직에 대한 영향들을 나타내는 사진들이고, 도 11은 IL-5에 대한 영향들을 나타내는 그래프이고, 도 12 및 도 13들은 면역글로블린E에 대한 영향들을 나타내는 그래프들이고, 도 14 및 도 15들은 혈청 면역글로블린E에 대한 영향들을 나타내는 그래프들이고, 그리고 도 16 및 도 17들은 간에서의 GOT 및 GPT 수준에 대한 영향들을 나타내는 그래프들이다.7 to 17 show the anti-allergic effect of mimosa extract in asthma-induced mice induced by Ovalbumin, and FIGS. 7 and 8 are graphs showing the effects on leukocytes and eosinophils. 10 are photographs showing the effects on lung tissue, FIG. 11 is a graph showing the effects on IL-5, FIGS. 12 and 13 are graphs showing the effects on immunoglobulin E, and FIGS. 14 and 15 are Graphs showing effects on serum immunoglobulin E, and FIGS. 16 and 17 show effects on GOT and GPT levels in the liver. Graphs.

Claims (4)

에탄올추출물, 상기 에탄올추출물의 헥산분획물, 에탄올추출물의 에틸아세테이트분획물, 에탄올추출물의 부탄올분획물 및 에탄올추출물의 물분획물들로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 아토피 피부염 및 아스마 개선 또는 치료용의 미모사의 추출물.An ethanol extract, hexane fraction of the ethanol extract, ethyl acetate fraction of ethanol extract, butanol fraction of ethanol extract and water fraction of ethanol extract, extracts of atopic dermatitis and mimosa for asma improvement or treatment. 삭제delete 에탄올추출물, 상기 에탄올추출물의 헥산분획물, 에탄올추출물의 에틸아세테이트분획물, 에탄올추출물의 부탄올분획물 및 에탄올추출물의 물분획물들로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 미모사의 추출물을 유효성분으로 그리고 약제학적으로 허용가능한 담체들을 포함하는 것을 특징으로 하는 아토피 피부염 및 아스마 개선 또는 치료용 약학적 조성물.Extracts of mimosa selected from the group consisting of ethanol extract, hexane fraction of the ethanol extract, ethyl acetate fraction of ethanol extract, butanol fraction of ethanol extract, and water fraction of ethanol extract as active ingredients and pharmaceutically acceptable carriers Atopic dermatitis and asma improvement or treatment pharmaceutical composition comprising a. 삭제delete
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