KR100964536B1 - Daphnia toxicity test method and apparatus - Google Patents

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Abstract

본 발명은 물벼룩을 이용한 급성 독성 시험에 사용하는 독성시험장치 및 이를 이용한 독성시험방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 거치대 표면에 형성되어 있는 다수의 장착구에 장착되는 독성시험용기와, 그 독성시험용기가 잠기도록 하여 일정한 물의 온도를 유지토록 하는 항온수조와, 그 항온수조의 물의 순환과 온도를 제어하기 위한 제어부로 구성되는 독성시험장치 및 이를 이용하여 시험기간 동안 독성물질의 손실이 없고, 시험생물인 물벼룩의 생육환경을 일정하게 유지시킬 수 있는 독성시험방법에 관한 것이다.The present invention relates to a toxicity test apparatus used for acute toxicity test using water fleas and a toxicity test method using the same, and more particularly, a toxic test container mounted on a plurality of mounting holes formed on the surface of the holder, and its toxicity test. A toxic test device composed of a constant temperature water tank which keeps the container locked to maintain a constant water temperature, and a control unit for controlling the circulation and temperature of the water in the constant temperature water tank, and there is no loss of toxic substances during the test period. The present invention relates to a toxicity test method capable of maintaining a constant growth environment of water fleas.

물벼룩, 시험용기, 항온수조, 독성, 독성시험법 Water flea, test container, constant temperature water tank, toxicity, toxicity test

Description

물벼룩 독성 시험법을 위한 독성시험장치 및 이를 이용한 독성시험방법{DAPHNIA TOXICITY TEST METHOD AND APPARATUS}Toxicity test apparatus for daphnia toxicity test method and toxicity test method using the same {DAPHNIA TOXICITY TEST METHOD AND APPARATUS}

본 발명은 물벼룩 독성 시험법에 사용하는 시험장치 및 이를 이용한 시험방법에 관한 것이다.The present invention relates to a test apparatus used in the water flea toxicity test method and a test method using the same.

환경 또는 생태 독성을 측정하는 방법으로서, 측정 대상액을 투입하여 물벼룩이나 기타 수서 무척추동물의 사멸 여부를 관찰하는 방법이 가장 많이 쓰이고, 그 외에 이들의 섭생 또는 수영 활동과 같은 행동 양식에 영향을 미치는 정도를 측정하는 방법도 사용된다.As a method of measuring environmental or ecotoxicity, the most commonly used method is to monitor the killing of daphnia or other aquatic invertebrates by injecting the liquid to be measured, and in addition to affecting their behavior such as their regimen or swimming activity. A method of measuring the degree is also used.

독성 물질에는 유·무기물, 친·소수성 물질 등 매우 다양한 물질이 포함되며, 이 모든 물질에 민감한 대상 생물로 가장 대표적인 생물이 신경계를 가지고 있는 물벼룩이기 때문에 독성을 측정하는 지표 생물로 널리 사용되고 있다.Toxic substances include a wide variety of substances such as organic, inorganic, hydrophilic and hydrophobic substances, and they are widely used as indicator organisms for measuring toxicity because most representative organisms are water fleas with a nervous system.

현재 가장 널리 이용되고 있는 물벼룩을 이용한 급성 독성 시험법은 독성물질 또는 대상시료에 24 ~ 48시간 동안 물벼룩을 접촉시킨 후 사멸 여부를 종말 점으로 측정하는 방법으로서, 독성물질 또는 대상시료를 담은 시험용기로는 마개가 없는 둥근 통꼴의 유리그릇인 비커(beaker)가 주로 사용되고 있다. 시험에 사용되는 비커의 용량은 대상 독성물질의 농도와 사용될 물벼룩의 개체 수에 따라 결정되며, 상기 독성 시험은 20±1℃ 또는 25±1℃에서 이루어지고 있다.Acute toxicity test using water fleas is the most widely used method of measuring the end of death after contacting water fleas for 24 to 48 hours with a toxic substance or target sample, and a test container containing the toxic substance or target sample. As for the furnace, beakers, which are round, round glass bowls without a stopper, are mainly used. The dose of beaker used for the test is determined by the concentration of the target toxic substance and the number of daphnia to be used, the toxicity test is carried out at 20 ± 1 ℃ or 25 ± 1 ℃.

그러나 종래 시험법에서 주로 사용되는 시험용기인 비커의 단점은 다음과 같다.However, the disadvantages of the beaker which is a test container mainly used in the conventional test method are as follows.

첫째, 대상시료에 휘발성 물질이 포함될 경우에 상대적으로 장시간(24~48시간)의 시험기간을 요구하는 시험법의 특성상 그 물질이 쉽게 휘발 될 수 있고 부정확한 독성 값이 측정될 가능성이 크다. 특히, 대한민국등록특허 10-0526973에서 제시하고 있는 물벼룩을 이용한 신속 독성측정장치의 시험온도 범위인 35.5 ~ 38℃를 적용할 경우에는 휘발성 물질의 손실 가능성은 증대된다.First, when volatile substances are included in the sample, the nature of the test method requires a relatively long test period (24 to 48 hours), and the substance can easily be volatilized and inaccurate toxicity values are likely to be measured. In particular, when applying the test temperature range of 35.5 ~ 38 ℃ of the rapid toxicity measurement device using water fleas proposed in the Republic of Korea Patent Registration 10-0526973 increases the possibility of loss of volatiles.

둘째, 시험기간 동안 물벼룩 개체가 비커의 수면에 뜰 경우에는 독성물질과 접촉할 가능성 낮아지기 때문에 부정확한 독성 값이 측정될 가능성이 크다.Second, if daphnia individuals float on the surface of the beaker during the test period, it is less likely that they will come into contact with toxic substances, so inaccurate toxicity values are likely to be measured.

셋째, 시험온도는 18 ~ 22℃범위 내에서 실시되어야 하며 일정한 물벼룩의 생육환경을 유지시켜야 한다. 하지만 비커 안의 시험 개체는 온도변화와 외부환경변화에 취약하다.Third, the test temperature should be within the range of 18 ~ 22 ℃ and maintain the constant growth environment of water fleas. However, the test subject in the beaker is vulnerable to temperature changes and external environmental changes.

상기 문제를 해결하기 위한 본 발명의 목적으로 밀폐가 용이한 독성시험용기가 장착되는 독성시험 장치 및 이를 이용한 시험방법을 통해 독성 시험공간을 최소 화 하면서 독성 측정 전문가가 아니더라도 쉽게 사용 가능한 물벼룩 독성 시험법을 위한 독성시험장치 및 이를 이용한 독성시험방법을 제공하고자 한다.Water flea toxicity test method that can be easily used even if the expert is not toxic measurement while minimizing the toxic test space through the toxic test device equipped with an easily sealed toxic test container and the test method using the same for the purpose of the present invention for solving the above problems. To provide a toxicology test apparatus and a toxicity test method using the same.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 판형의 거치대 표면에 형성되어 있는 다수의 장착구에 독성시험용기가 장착되고, 그 독성시험용기가 잠기도록 하여 물의 온도를 일정하게 유지토록 하는 항온수조와, 그 항온수조의 물의 순환과 온도를 제어하기 위한 제어부의 결합으로 구성되는 물벼룩 독성 시험법을 위한 독성시험장치를 발명의 주요 기술적 구성으로 한다.In order to achieve the above object, the present invention is equipped with a toxic test vessel in a plurality of mounting holes formed on the surface of the plate holder, the toxic test vessel is locked so that the temperature of the water to maintain a constant temperature, The main technical configuration of the invention is a toxicity test apparatus for the water flea toxicity test method, which is composed of a combination of a control unit for controlling the water circulation and temperature of the constant temperature bath.

상기 독성시험장치는 물에 용해되어 있는 중금속, 유기 독성, 음이온 독성, 농약류 등의 독성물질이나 기타 유해물질의 독성도를 측정하기 위한 것이다. The toxicity test apparatus is for measuring the toxicity of toxic substances such as heavy metals, organic toxicity, anion toxicity, pesticides and other harmful substances dissolved in water.

상기 독성시험장치에 장착되는 독성시험용기는 용기부와 그 용기부의 일측에 형성되어 있는 스크류에 의해 밀폐 결합하는 덮개부로 구성되는 것으로, 그 용기부는 유기용매에 비활성인 붕규산 유리재질로 이루어진다.The toxic test container mounted on the toxic test device is composed of a container part and a cover part sealed by a screw formed on one side of the container part, and the container part is made of borosilicate glass material which is inert to an organic solvent.

그리고 그 붕규산 유리는 규산과 붕산을 주체로 하는 유리로서, 붕소를 첨가함으로써 팽창계수가 저하하여 화학적 내성, 특히 내산성 및 내후성이 증대되고, 내열충격성이 강한 특성을 갖는 재질로서, 선팽창계수가 55×10-7/℃ 이하인 것을 사용한다.The borosilicate glass is a glass mainly composed of silicic acid and boric acid. The addition of boron decreases the coefficient of expansion to increase chemical resistance, particularly acid resistance and weather resistance, and has a strong thermal shock resistance. 10-7 / degree C or less is used.

상기 덮개부는 폴리에틸렌(Polyethylene, PE)계 또는 폴리프로필렌(Polypropylene, PP)계 재질로 이루어지며, 그 덮개부의 내측면에는 독성시험용기 상부 공간(Headspace)의 공기를 제거하기 위해 원뿔기둥 형태의 폴리테트라플루오르에칠렌(PTFE, 일명 테프론(Teflon)) 필름 재질의 속마개가 형성된다.The cover part is made of polyethylene (PE) -based or polypropylene (PP) -based material, and the inner side of the cover part has a conical column-shaped polytetra to remove air from the headspace of the toxic test vessel. A fastener made of fluoroethylene (PTFE, also known as Teflon) film material is formed.

상기 덮개부의 폴리에틸렌(Polyethylene, PE)은 그 자체로서 유전특성, 절연저항 및 절연파괴강도 등의 전기적 특성 이외에 가공성 등에 있어서 다른 고분자 재료에 비해 극히 우수한 것으로, 밀도(density) 0.910g/㎤, 인장강도(tensile strength) 5.9Mpa, 연신율(Elongation) 90%, 열전도도(thermal conductivity) 8.0℃×10-10인 저밀도폴리에틸렌(LDPE)를 사용한다.Polyethylene (PE) of the cover part is extremely superior to other polymer materials in terms of workability in addition to electrical properties such as dielectric properties, insulation resistance and dielectric breakdown strength, and has a density of 0.910 g / cm 3 and tensile strength. Low density polyethylene (LDPE) with a strength of 5.9 Mpa, elongation of 90% and a thermal conductivity of 8.0 ° C. × 10 −10 is used.

상기 덮개부의 폴리프로필렌(Polypropylene, PP)은 준결정성 고분자로서 가볍고, 흡습성이 적으며 내약품성과 성형 가공성이 우수하여 다양한 분야의 용도에 널리사용되는 것으로, 유리전이온도(Tg, Glass transition temperature) -10℃, 녹는점(Melting temperature) 165℃, 연화점(Softening temperature) 150℃, 비중(Specific gravity) 0.91인 것을 사용한다.Polypropylene (Polypropylene, PP) of the cover part is a semi-crystalline polymer, light, less hygroscopic, excellent chemical resistance and molding processability, widely used in a variety of applications, glass transition temperature (Tg, Glass transition temperature)- 10 ° C., Melting temperature 165 ° C., Softening temperature 150 ° C., and Specific gravity 0.91 are used.

상기 폴리테트라플루오르에칠렌(poly(tetraflouroethylene))은 불소와 탄소의 강력한 화학적 결합으로 인해 매우 안정된 화합물을 형성해 화학적 비활성, 내열성, 비점착성 및 우수한 절연 안정성의 특징을 갖는 물질로서 본 발명에서는 0.01 ~ 0.5mm의 두께의 필름을 사용한다.The polytetrafluoroethylene (poly (tetraflouroethylene)) is a material having a characteristic of chemical inertness, heat resistance, non-tackiness and excellent insulation stability by forming a very stable compound due to the strong chemical bonding of fluorine and carbon, in the present invention 0.01 ~ 0.5mm The film of thickness is used.

상기 필름은 분말상의 PTFE수지를 110 ~ 130℃로 가열된 압연롤러에 고루펴 서 롤링(rolling)작업을 하여 예비필름을 제조한다. 상기 압연롤러의 온도가 110℃ 미만인 경우에는 균일한 필름의 제조가 어렵고, 130℃를 초과하게 되는 경우에는 필름의 제조가 용이하지 않을 수 있으므로, 상기 압연롤러의 온도는 110 ~ 130℃를 유지하는 것이 바람직하다.The film is rolled by rolling the powdery PTFE resin on a rolling roller heated to 110 ~ 130 ℃ to prepare a preliminary film. When the temperature of the rolling roller is less than 110 ° C, it is difficult to produce a uniform film, and when the temperature exceeds 130 ° C, the production of the film may not be easy, so the temperature of the rolling roller is maintained at 110 to 130 ° C. It is preferable.

이와 같이 예비필름이 제조된 후에는 그 예비필름을 350 ~ 400℃에서 1 ~ 2시간 동안 소결가공한다. 이때 온도가 350℃ 미만인 경우에는 소결가공온도로 부적합하고 400℃를 초과하게 되는 경우에는 필요 이상의 에너지가 소비됨으로 비효율적이다. 그리고 1시간 미만인 경우에는 소결이 충분히 이루어지지 않고, 2시간을 초과하게 되는 경우에는 소결이 충분히 이루어졌으므로 무의미하므로, 상기 온도 및 시간범위 내에서 소결가공이 이루어짐이 바람직하다. 소결가공이 끝난 필름은 대기 중에서 냉각하여 완성한다.After the preliminary film is prepared as described above, the preliminary film is sintered at 350 to 400 ° C. for 1 to 2 hours. At this time, if the temperature is less than 350 ℃ is not suitable for the sintering processing temperature, if it exceeds 400 ℃ it is inefficient because more energy is consumed than necessary. In the case of less than 1 hour, sintering is not sufficiently performed. If the sintering is more than 2 hours, the sintering is sufficiently performed. Therefore, the sintering process is preferably performed within the above temperature and time range. The finished film is sintered and cooled in air.

다음으로 독성시험장치의 이용과정을 살펴보면, 그 이용 과정은 독성시험을 위한 대상시료와 물벼룩 개체를 독성시험용기에 채워 장착구에 삽입하여 항온수조 물의 온도를 18 ~ 22℃로 24 ~ 72시간 동안 유지한 후 확대경을 이용하여 물벼룩의 사멸 여부를 관찰한다.Next, look at the process of using the toxic test device, the process of filling the target sample and water flea individuals for the toxic test in the toxic test container and inserting it in the fittings for 24 to 72 hours the temperature of the water bath at 18 ~ 22 ℃ After maintenance, use a magnifying glass to observe whether the fleas have died.

상기 항온수조 물의 온도는 온도에 민감한 물벼룩이 독성 이외의 환경적인 요인에 의해 사멸되어 정확한 독성시험이 이루어질 수 없는 문제가 있으므로 그 항온수조의 물은 18 ~ 22℃를 유지하는 것이 바람직하다.The temperature of the water bath is a temperature-sensitive water flea is killed by environmental factors other than toxicity, so there is a problem that accurate toxicity test can not be made, the water in the water bath is preferably maintained at 18 ~ 22 ℃.

그리고 상기 대상 시료의 혼합의 구체적인 예를 들면, 시료:희석수의 비율이 1:0, 1:1, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 등의 비율로 혼합한 후 대상 환경에 적응을 시킨다.For example, the sample: dilution water ratio of 1: 0, 1: 1, 1: 2, 1: 4, 1: 8, 1:16, etc. Adapt to the environment.

상기 관찰시간이 24시간 미만인 경우에는 물벼룩의 사멸 여부를 제대로 관찰하기 어렵고, 72시간을 초과하게 되는 경우에는 물벼룩이 독성물질에 의해 사멸여부를 관찰할 수 있는 충분한 시간을 초과하게 되어 무의미하므로, 상기 관찰시간은 24 ~ 72시간 동안 유지하는 것이 바람직하다.If the observation time is less than 24 hours, it is difficult to properly observe whether or not the water flea is killed, and if it exceeds 72 hours, it is meaningless because the water flea exceeds a sufficient time to observe whether the flea is killed by a toxic substance. Observation time is preferably maintained for 24 to 72 hours.

상기 물벼룩은 급성 독성 시험법의 대상이 되는 Daphnia magna, Moina macrocopa, Ceriodaphnia dubia 중 선택되는 어느 1종 이상의 물벼룩 또는 Rotifer인 수서무척추 동물 중에서 선택하여 사용하는 것을 특징으로 한다.The daphnia is characterized in that it is used to select from one or more daphnia magna, Moina macrocopa, Ceriodaphnia dubia that is the subject of the acute toxicity test or aquatic invertebrates of Rotifer.

독성 물질에는 유·무기물, 친·소수성 물질 등 매우 다양한 물질이 포함되며, 이러한 물질에 민감한 대상 생물로 가장 대표적인 생물은 물벼룩이며, 이러한 물벼룩을 독성을 측정하는 지표 생물로 널리 사용되고 있다. Toxic substances include a wide variety of substances such as organic, inorganic, hydrophilic and hydrophobic substances. The most representative organisms sensitive to these substances are daphnia, and these daphnia are widely used as indicator organisms for measuring toxicity.

물벼룩을 이용한 독성측정 방법은 연속적인 방법과 정적인 방법의 두 가지로 나눌 수 있으며, 정적인 방법의 경우에는 주로 물벼룩을 일정시간 독성물질에 접촉시킨 후, 그 사멸 여부를 측정하는 것이고, 연속적인 방법은 물벼룩의 운동특성을 관찰하여 측정하는 것이다. 그 연속적인 방법은 독성물질이 유입되면 물벼룩의 움직임이 더 빨라지거나 더 느려지는 원리를 이용하여 측정하는 것으로, 이와 같은 연속적인 시험법은 국외에서 사용되고 있다.Toxicity measurement using daphnia can be divided into two methods, continuous and static.In the static method, water flea is contacted with a toxic substance for a certain time and then measured for its death. The method is to observe and measure the kinetic properties of daphnia. The continuous method uses the principle that water fleas move faster or slower when toxic substances are introduced. Such continuous test methods are used abroad.

이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 따른 물벼룩 독성 시험법을 위한 시험장치는 물벼룩을 이용한 독성 검출을 민감하고 정확하게 측정할 수 있으며, 특히, 물벼룩을 이용한 신속 독성측정장치(대한민국등록특허 10-0526973)를 이용한 종래 독성시험을 더욱 원활히 수행할 수 있도록 한다.As described above, the test apparatus for the water flea toxicity test according to the present invention can measure the detection of toxicity using daphnia sensitively and accurately, in particular, a rapid toxicity measurement device using daphnia (Korea Patent 10-0526973) It should be possible to perform the conventional toxicity test more smoothly.

또한, 본 발명의 독성시험장치는 시험기간 동안 독성물질의 손실이 없을 뿐만 아니라, 다수의 대상시료 시험을 동시에 실시할 경우에도 시험 개체들의 생육 환경을 일정하게 유지시킬 수 있다.In addition, the toxicology test apparatus of the present invention can not only lose toxic substances during the test period, but also keep the growth environment of the test subjects constant even when a plurality of sample tests are performed simultaneously.

그리고 시험방법이 용이하고, 시험공간을 최소화할 수 있어 비용 절감의 효과가 있다.And the test method is easy, and the test space can be minimized, thereby reducing the cost.

상기 기술적 구성을 도면을 참고하여 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.Looking at the technical configuration in detail with reference to the drawings as follows.

도 1은 독성시험용기(2)가 장착된 독성시험장치(1)를 도시한 단면도로서, 거치대(4) 표면에 형성되어 있는 다수의 장착구(41)에 장착되는 독성시험용기(2)와, 그 독성시험용기(2)가 잠기도록 하여 일정한 물의 온도를 유지토록 하는 항온수조(3)와, 그 항온수조(3)의 물의 순환과 온도를 제어하기 위한 제어부(5)로 구성되는 독성시험장치를 보이고 있다.1 is a cross-sectional view showing a toxic test device (1) equipped with a toxic test container (2), the toxic test container (2) mounted on a plurality of mounting holes 41 formed on the surface of the holder (4) and , A toxicity test consisting of a constant temperature water tank (3) for locking the toxic test container (2) to maintain a constant water temperature, and a control unit (5) for controlling the circulation and temperature of the water in the constant temperature water tank (3). Showing the device.

상기 항온수조(3)는 물을 교체할 수 있도록 그 항온수조 일측벽 하단부에 유 출구가 형성되고, 물의 순환과 온도를 제어하기 위한 제어부(5)에는 가열 및 냉각장치가 설치되어 있어 항온수조(3) 내의 물의 온도를 증감할 수 있도록 한다.The constant temperature water tank (3) has an oil outlet formed at the lower end of one side wall of the constant temperature water tank so that water can be replaced, and the control unit (5) for controlling the circulation and temperature of the water is provided with a heating and cooling device. 3) Increase or decrease the temperature of the water inside.

도 2는 도 1의 독성시험장치의 평면을 도시한 평면도로서, 독성시험용기(2)를 거치하기 위한 거치대(4)와 시험용기 장착구(41)를 보이고 있다.FIG. 2 is a plan view showing the plane of the toxicity test apparatus of FIG. 1, and shows a holder 4 and a test container mounting hole 41 for mounting the toxicity test container 2.

도 3은 본 발명에 따른 물벼룩 독성 시험에 사용하는 독성시험용기(2)를 도시한 단면도이다. 용기부(21)와 덮개부(22)로 구성되는 독성시험용기(2)는 그 용기부(21)의 일측에 형성되어 있는 스크류(211)에 의해 덮개부(22)가 밀폐 결합하도록 구성한다.3 is a cross-sectional view showing a toxic test container (2) used in the water flea toxicity test according to the present invention. The toxicity test container 2 composed of the container part 21 and the cover part 22 is configured such that the cover part 22 is hermetically coupled by a screw 211 formed at one side of the container part 21. .

그리고, 상기 덮개부(22)는 용기부(21)와 결합시 그 독성시험용기(2)의 상부 공간(Headspace)의 공기를 제거하기 위해 둥근 원뿔기둥 형태의 속마개(221)가 형성된다. 그 속마개(221)는 독성시험용기(2)와의 공간에서 물벼룩 개체가 자유로이 활동할 수 있는 충분한 공간을 제공하며, 둥근 원뿔기둥은 독성시험용기(2) 상부 공간의 공기를 제거할 수 있을 만큼의 부피를 가진다. 그리고 상기 속마개(221)의 재질은 시료와 접촉할 경우를 대비하여 비활성의 데프론(Teflon) 필름을 사용한다.In addition, the cover part 22 is formed with an inner plug 221 having a rounded cone shape to remove air from the upper space of the toxicity test container 2 when combined with the container part 21. The stopper 221 provides a sufficient space for the water flea individual to freely act in the space with the toxic test container (2), and the round cone is large enough to remove air from the upper space of the toxic test container (2). Have volume. In addition, the material of the fastener 221 uses an inactive Teflon film in case of contact with the sample.

상기 필름의 제조에 대한 구체적인 예를 들면 다음과 같다.Specific examples for the production of the film are as follows.

실시 예 1Example 1

분말상의 PTFE수지 100g을 두 개의 스테인리스 스틸 재질의 압연롤러 표면에 고루 펴서 롤링작업을 하여 예비필름을 제조한다. 이때 압연롤러 표면 온도는 125 ℃를 유지한다. 롤링작업을 통해 제조된 예비필름은 다시 370℃에서 1시간 동안 소결가공하고, 소결이 완료되면 대기 중에서 냉각시킨다. 이때 제조된 막의 두께는 0.16mm이고, 그 밀도는 2.1927g/㎤이다.100 g of powdered PTFE resin is evenly rolled on two stainless steel rolling rollers to prepare a preliminary film. At this time, the rolling roller surface temperature is maintained at 125 ℃. The preliminary film produced through the rolling operation is sintered again at 370 ° C. for 1 hour, and when sintering is completed, it is cooled in the air. At this time, the film thickness was 0.16 mm, and the density was 2.1927 g / cm 3.

이하, 상기 독성시험장치(1)를 이용한 독성시험방법에 대해 살펴보면, 먼저 독성시험용기(2)의 용기부(21)에 일정량의 시료를 넣고 시험대상 개체를 주입한 후 대상시료로 병목이 잠길 만큼 가득 채운다. 이후, 용기부(21)를 덮개부(22)로 닫으며 원뿔 기둥 형태의 속마개(221)가 용기부(21) 내 소량의 대상시료를 넘치게 함으로서, 상부의 공간(Headspace)의 공기도 함께 제거하게 된다.Hereinafter, the toxicology test method using the toxicology test device (1), first put a certain amount of sample in the container portion 21 of the toxicity test container (2) and inject the subject to the test object and the bottleneck is locked with the target sample. Fill as much as Subsequently, the container 21 is closed by the cover 22 and the conical pillar-shaped plug 221 overflows a small amount of the target sample in the container 21, so that air in the upper space is also included. Will be removed.

따라서 시험기간 동안 시험용기 안에 Headspace가 존재하지 않음으로써, 대상시료의 휘발성 물질을 포함된 독성유발물질의 손실 없이 개체의 사멸 여부를 관찰할 수 있다.Therefore, no headspace is present in the test container during the test period, so that the death of the subject can be observed without loss of toxic substances, including volatile substances in the sample.

그리고, 상기 독성시험용기(2)를 항온수조(3)에 장착하기 위한 방법으로는, 그 독성시험장치(1)의 장착구(41)에 덮개부(22)로 밀폐된 독성시험용기(2)를 삽입한 후, 상기 덮개부(22)가 잠길 만큼 물을 채우고 항온수조의 물의 온도를 일정하게 유지하여 용기 내의 개체 생육환경을 일정하게 유지한다.In addition, as a method for mounting the toxic test container (2) in the constant temperature water tank (3), the toxic test container (2) sealed by the cover portion 22 in the mounting port 41 of the toxic test device (1) After inserting), the lid 22 is filled with water so as to be submerged, and the temperature of the water in the constant temperature water tank is kept constant to maintain the individual growth environment in the container.

상기 거치대(4)는 용기의 길이와 항온수조(3)의 수심을 고려하여 구성하고, 장착구(41)를 추가로 설치할 수 있게 함으로서 다수의 독성시험용기(2)의 시험조건을 동일하게 유지시킬 수 있다.The cradle (4) is configured in consideration of the length of the container and the depth of the constant temperature water tank (3), by maintaining the same test conditions of the plurality of toxic test containers (2) by allowing the installation of the additional mounting (41). You can.

도 1은 본 발명에 따른 물벼룩 독성 시험에 사용하는 독성시험장치를 도시한 단면도.1 is a cross-sectional view showing a toxicity test apparatus used in the water flea toxicity test according to the present invention.

도 2는 본 발명에 따른 물벼룩 독성 시험에 사용하는 독성시험장치를 도시한 평면도.Figure 2 is a plan view showing a toxicity test apparatus used in the water flea toxicity test according to the present invention.

도 3은 본 발명에 따른 물벼룩 독성 시험에 사용하는 독성시험용기를 도시한 단면도.Figure 3 is a cross-sectional view showing a toxic test container used for daphnia toxicity test according to the present invention.

* 도면의 주요 부호에 대한 설명 *DESCRIPTION OF THE RELATED ART [0002]

1 : 독성시험장치1: Toxicity Test Device

2 : 독성시험용기 21 : 용기부 22 : 덮개부2: toxic test container 21: container part 22: cover part

211: 스크류 221: 속마개211: screw 221: fastener

3 : 항온수조 4 : 거치대 41 : 장착구3: constant temperature water tank 4: holder 41: mounting holes

5 : 제어부5: control unit

Claims (7)

판형의 거치대(4) 표면에 형성되어 있는 다수의 장착구(41)에 독성시험용기(2)가 장착되고, 그 독성시험용기(2)가 잠기도록 하여 물의 온도를 일정하게 유지토록 하는 항온수조(3)와, 그 항온수조(3)의 물의 순환과 온도를 제어하기 위한 제어부(5)의 결합으로 구성된 것에 있어서,A toxic test vessel (2) is mounted on a plurality of mounting holes (41) formed on the surface of the plate holder (4), and the toxic test vessel (2) is locked so that the temperature of the water is kept constant. (3) and the combination of the control part 5 for controlling the circulation and the temperature of the water of the constant temperature water tank 3, 상기 독성시험용기(2)는 유기용매에 비활성인 붕규산 유리재질로 구성된 용기부(21)와,The toxic test container (2) is a container portion 21 consisting of borosilicate glass material inert to an organic solvent, 그 용기부(21)의 일측에 형성되어 있는 스크류(211)에 의해 밀폐 결합가능한, 폴리에틸렌(Polyethylene, PE) 또는 폴리프로필렌(Polypropylene, PP) 재질로서 그 내측면에 원뿔기둥 형태를 갖는 0.01 ~ 0.5mm 두께의 폴리테트라플루오르에칠렌(poly(tetraflouroethylene)) 필름으로 이루어진 속마개(221)가 형성되어 독성시험용기(2) 상부 공간(Headspace)의 공기를 제거할 수 있도록 구성된 덮개부(22)로 구성됨을 특징으로 하는 물벼룩 독성 시험법을 위한 독성시험장치.0.01 ~ 0.5 having a conical column shape on the inner side of polyethylene (PE) or polypropylene (PP) material, which can be hermetically coupled by a screw 211 formed on one side of the container portion 21. An inner plug 221 made of a polytetrafluoroethylene (mm) -thick poly (tetraflouroethylene) film is formed and includes a cover part 22 configured to remove air from the headspace of the test container 2. Toxicity test device for daphnia toxicity test method characterized in that. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 청구항 1의 시험장치를 이용하는 것으로,By using the test apparatus of claim 1, 독성시험을 위한 대상시료와 물벼룩 개체가 채워진 독성시험용기(2)를 장착구(41)에 삽입한 후 항온수조(3)의 물의 온도를 18 ~ 22℃로 24 ~ 72시간 동안 유지한 후 물벼룩 개체의 사멸여부를 확대경으로 관찰하는 것임을 특징으로 하는 독성시험방법.Insert the toxic test container (2) filled with the target sample and the water flea individual for the toxic test into the mounting hole (41), and then maintain the water temperature of the constant temperature water tank (3) at 18 ~ 22 ℃ for 24 to 72 hours Toxicity test method characterized in that the observation of the death of the subject with a magnifying glass. 삭제delete
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