KR100953915B1 - A method for preparing a cheese having rich conjugated linoleic acid by controlling lactating time, feeding regimen and ripening - Google Patents

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Abstract

본 발명은 수유시기, 사료급여체계 및 숙성 조건의 조절을 통한 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 수유시기 및 사료급여체계 별로 반추동물에서 얻은 우유로 제조된 치즈의 숙성기간을 조절함으로써 공액리놀레인산이 다량으로 함유된 치즈를 생산하는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for preparing cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid by adjusting the feeding time, feed system and ripening conditions, and more specifically, prepared by milk obtained from ruminants for each feeding time and feed system It relates to a method for producing a cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid by controlling the maturation period of the prepared cheese.

본 발명에 따르면, 초봄에 건초 및 농후사료를 급여한 암소에서 얻은 우유로 제조한 치즈를 4개월 내지 7개월간 숙성시켜 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈를 제공하는 효과가 있다. According to the present invention, the cheese made from milk obtained from cows fed hay and rich feed in early spring is aged for 4 months to 7 months to provide a cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid.

공액리놀레인산, 치즈, 수유시기, 사료급여체계, 숙성, 목초, 우사 내 사육, 방목 Conjugated linoleic acid, cheese, feeding time, feed system, ripening, pasture, rearing, barn

Description

수유시기, 사료급여체계 및 숙성 조건의 조절을 통한 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈의 제조방법{A method for preparing a cheese having rich conjugated linoleic acid by controlling lactating time, feeding regimen and ripening}Process for preparing a cheese having rich conjugated linoleic acid by controlling lactating time, feeding regimen and ripening}

본 발명은 수유시기, 사료급여체계 및 숙성 조건의 조절을 통한 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 수유시기 및 사료급여체계 별로 반추동물에서 얻은 우유로 제조된 치즈의 숙성기간을 조절함으로써 공액리놀레인산이 다량으로 함유된 치즈를 생산하는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for preparing cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid by adjusting the feeding time, feed system and ripening conditions, and more specifically, prepared by milk obtained from ruminants for each feeding time and feed system It relates to a method for producing a cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid by controlling the maturation period of the prepared cheese.

공액리놀레인산(Conjugated linoleic acid, CLA)은 리놀레인산(cis -9, cis -12-octadecadienoic acid)의 위치적 및 기하학적 이성질체의 혼합물질로, 각각 7 및 9, 8 및 10, 9 및 11, 10 및 12 또는 11 및 13에서 공액 이중결합 배열을 갖는다. 공액리놀레인산은 암(Ha et al ., 1987, Carcinogenesis 8: 1881-1887; Ip et al., 1991, Cancer Res . 51: 6118-6124; Belury et al., 1996, Nutr . Cancer 26:149-157), 항동맥경화증(Lee et al. 1995, Atherosclerosis 108:19-25)을 포함 하여 퇴행성 질환에 대한 다양한 예방 역할을 나타내며, 면역 촉진에 대한 이화작용효과를 감소시키며(Cook et al ., 1993, Poult . Sci . 72: 1301-1305), 다양한 동물모델에서 지방에 대한 단백질 비율을 개선하였다. 또한, 공액리놀레인산의 일부 이성질체는 체지방감소 효과를 향상시키는 것과 연관되어 있다(Park et al ., 1999, Lipids 23: 685-689). 공액리놀레인산은 많은 식품에서 발견되지만, 주요 식이원은 반추동물의 조직과 우유이다(Chin et al ., 1994, J. Nutr. 124: 2344-2349). 반추동물의 조직이나 낙농제품에서 발견되는 공액리놀레인산 이성질체의 프로파일은 다양하지만, 총 공액리놀레인산의 90% 이상으로 cis-9, trans-11-이성질체가 우점형인것으로 알려져 있다. Conjugated linoleic acid (CLA) is a mixture of the positional and geometric isomers of linoleic acid ( cis - 9, cis - 12-octadecadienoic acid), respectively 7 and 9, 8 and 10, 9 and 11 , 10 and 12 or 11 and 13 conjugated double bond arrangement. Conjugated linoleic acid is a cancer (Ha et al ., 1987, Carcinogenesis 8: 1881-1887; Ip et al ., 1991, Cancer Res . 51: 6118-6124; Belury et al ., 1996, Nutr . Cancer 26: 149-157), and anti-arteriosclerosis (Lee et al . 1995, Atherosclerosis 108: 19-25), showing a variety of protective roles for degenerative diseases, reducing catabolic effects on immunostimulation (Cook et al ., 1993, Poult . Sci . 72: 1301-1305), improving the protein to fat ratio in various animal models. In addition, some isomers of conjugated linoleic acid are associated with improving body fat loss effects (Park et. al ., 1999, Lipids 23: 685-689). Conjugated linoleic acid is found in many foods, but the main dietary sources are ruminant tissue and milk (Chin et al ., 1994, J. Nutr . 124: 2344-2349). The profiles of conjugated linoleic acid isomers found in ruminant tissues and dairy products vary, but account for more than 90% of the total conjugated linoleic acid. The cis -9 and trans -11-isomers are known to be dominant.

또한, 동물 조직의 지방산 조성물들은 영양상태, 저장부(depot), 동물의 종 및 급여시간 등의 많은 요인들에 의해 영향을 받을 수 있다(Duckett et al., 2002, J. Anim . Sci. 80: 3353-3360; Aharoni et al., 1995, J. Anim . Sci . 73: 2712-2720). 유제품에서 공액리놀레인산의 주요 공급원은 반추동물에서 미생물에 의한 수소첨가반응(biohydrogenation) 동안 리놀레인산 및 레놀렌산(LNA)의 이성질화로부터 유래하여, 공급원 및 지질 기질의 농도, 목초 대 곡물의 비율(Gerson et al., 1985, J Agric . Sci. 105:27-30) 및 사료입자에 점착 여부(Harfoot et al., 1973, Biochem. J. 132:829-832) 등의 여러 식이요인들에 의해 영향을 받는다. n-6 및/또는 n-3 긴사슬 지방산을 포함하는 고지방 기질을 급여함과 동시에 사료급여체계를 조절하여 다양한 방식으로 암소의 우유에서 공액리놀레인산 농도를 높이고자 하는 시도가 있었다. 이는 부분적으로 소의 식이에 의해 영향을 받는 반추위 미생물 집 단과 관련되어 있을 수 있다. 게다가, 활성 공액리놀레인산 생산 반추위 미생물 집단인 부티리비브리오 피브리솔벤스(Butyrivibrio fibrisolvens) 는 암소에 저-불소화 사료(low-roughage diets)를 급여할 때 감소하였다(Lathm et al ., 1972, Appl . Microbiol. 24: 871-877). 더욱이, 무수한 자료들을 통해 다양한 식이 품목에서 공액리놀레인산의 함량은 생산 조건에 의해 영향을 받는다는 사실이 밝혀져 있다(Chin et al., 1994, J. Nutr . 124: 2344-2349; Kim et al., 2002, J. Food Sci. 67: 1731-1737). 폭기(aeration) (Ha et al ., 1989, Carcinogenesis 8: 1881-1887), 온도, 분쇄 pH, 첨가물 및 숙성 등의 치즈 가공 변수들이 공액리놀레인산 함량에 영향을 주는 것으로 밝혀졌다. 또한, 우유의 지방산 프로파일은 수유 계절과 어떤 종류의 식이 요인들에 의해 달라진다는 것이 밝혀져 있다(Dhiman et al ., 1996, J. Dairy Sci . 79(Suppl. 1): 137-143; Kelly et al., 1998, J. Dairy Sci. 81: 1630-1636; White et al. 2001, J Dairy Sci. 84: 2295-2301).In addition, fatty acid compositions of animal tissue may be affected by many factors, such as nutritional status, depot, species and feeding time of the animal (Duckett et al. al ., 2002, J. Anim . Sci . 80: 3353-3360; Aharoni et al ., 1995, J. Anim . Sci . 73: 2712-2720). The main source of conjugated linoleic acid in dairy products is derived from isomerization of linoleic acid and lenolenic acid (LNA) during microbial biohydrogenation in ruminants, resulting in concentrations of source and lipid substrates, grass to grain Gerson et al ., 1985, J Agric . Sci . 105: 27-30) and adherence to feed particles (Harfoot et. al ., 1973, Biochem. J. 132: 829-832). Attempts have been made to increase the conjugated linoleic acid concentrations in cow's milk in a variety of ways by feeding high fat substrates containing n-6 and / or n-3 long chain fatty acids and controlling the feed system. This may be related, in part, to ruminant microbial populations affected by the cattle's diet. Furthermore, Butyrivibrio , an active conjugated linoleic acid-producing rumen microbial group, fibrisolvens ) decreased when cows fed low-roughage diets (Lathm et al. al . , 1972, Appl . Microbiol . 24: 871-877). Moreover, numerous data have shown that the content of conjugated linoleic acid in various dietary items is influenced by production conditions (Chin et. al ., 1994, J. Nutr . 124: 2344-2349; Kim et al ., 2002, J. Food Sci . 67: 1731-1737). Aeration (Ha et al . , 1989, Carcinogenesis 8: 1881-1887), temperature, grinding pH, additives and ripening were found to affect the conjugated linoleic acid content. It has also been found that the fatty acid profile of milk depends on the feeding season and on some type of dietary factors (Dhiman et. al ., 1996, J. Dairy Sci . 79 (Suppl. 1): 137-143; Kelly et al ., 1998, J. Dairy Sci . 81: 1630-1636; White et al . 2001, J Dairy Sci . 84: 2295-2301).

어떤 종류의 유산균은 공액리놀레인산 생산 활성을 가지고 있는 것으로 알려져 있어(Kim and Liu, 2002, J. Food Sci. 67: 1731-1737), 치즈 숙성동안 공액리놀레인산 농도에 영향을 미칠 것으로 추정되었다. 우유에서 공액리놀레인산 함량에 대한 식이 효과를 나타내는 많은 연구들이 있지만, 다른 급여조건에서 생산된 치즈에서 공액리놀레인산 함량에 대한 직접적인 비교를 제안한 것은 없었다. Some types of lactic acid bacteria are known to have conjugated linoleic acid production activity (Kim and Liu, 2002, J. Food Sci . 67: 1731-1737), which was estimated to affect the conjugated linoleic acid concentration during cheese ripening. There are many studies showing dietary effects on the conjugated linoleic acid content in milk, but none suggests a direct comparison of the conjugated linoleic acid content in cheese produced under different feeding conditions.

따라서, 본 발명의 목적은 반추동물의 수유시기 및 사료급여체계, 치즈의 숙성조건을 조절하여 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈를 생산하고자 한다. Therefore, an object of the present invention is to produce a cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid by adjusting the feeding time of the ruminant, the feeding system, the maturing conditions of the cheese.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은In order to achieve the above object, the present invention

3월∼5월 동안 건초 및 농후사료를 급여한 소에서 우유를 얻는 단계; Obtaining milk from cows fed hay and rich feed during March to May;

상기 우유에 스타터 유산균 배양액 및 레닛을 첨가하여 우유를 응고시켜 치즈를 제조하는 단계; 및Preparing a cheese by coagulating milk by adding a starter lactic acid culture medium and rennet to the milk; And

상기 치즈를 4∼7개월 간 숙성하는 단계를 포함하는 공액리놀레인산이 함유된 치즈의 제조방법을 제공한다.It provides a method for producing a cheese containing conjugated linoleic acid comprising the step of aging the cheese for 4 to 7 months.

또한, 본 발명은 상기 방법에 따라 제조된 공액리놀레인산 함유 치즈를 제공한다.The present invention also provides a conjugated linoleic acid-containing cheese prepared according to the above method.

본 발명에 따르면, 초봄에 건초 및 농후사료를 급여한 암소에서 얻은 우유로 제조한 치즈를 4개월 내지 7개월 간 숙성시켜 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈를 제공하는 효과가 있다.According to the present invention, the cheese made from milk obtained from cows fed hay and rich feed in early spring is aged for 4 months to 7 months to provide a cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid.

이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.EMBODIMENT OF THE INVENTION Hereinafter, the structure of this invention is demonstrated concretely.

본 발명은The present invention

3월∼5월 동안 건초 및 농후사료를 급여한 소에서 우유를 얻는 단계; Obtaining milk from cows fed hay and rich feed during March to May;

상기 우유에 스타터 유산균 배양액 및 레닛을 첨가하여 우유를 응고시켜 치즈를 제조하는 단계; 및Preparing a cheese by coagulating milk by adding a starter lactic acid culture medium and rennet to the milk; And

상기 치즈를 4∼7개월간 숙성하는 단계를 포함하는 공액리놀레인산이 함유된 치즈의 제조방법에 관한 것이다.It relates to a method for producing a cheese containing conjugated linoleic acid comprising the step of aging the cheese for 4 to 7 months.

3월 내지 5월에 방목 사육하거나, 우사 내에서 사육한 소에서 얻은 우유로 제조한 치즈는 공액 리놀레인산 함량이 다른 계절에 비해 더 높다. 이는 사료에 기인한 것으로, 건초는 반추위 미생물에 의한 수소첨가반응 경로에서 공액 리놀레인산의 주요 전구물질인 리놀레인산의 농도가 높고, 건초에 함유된 리놀레인산이 반추위 미생물에 의한 수소첨가반응에 이용하기에 목초보다 쉽기 때문이다.Cheese made from cows grazing in March or May, or from cattle raised in barn, has a higher content of conjugated linoleic acid than in other seasons. This is due to feed, hay has a high concentration of linoleic acid, the main precursor of conjugated linoleic acid in the hydrogenation reaction by ruminant microorganisms, and linoleic acid contained in hay to the hydrogenation reaction by ruminant microorganisms. Because it is easier to use than grass.

또한, 본 발명은 건초 및 농후사료를 5:5∼8:2 의 비율로 혼합한 사료를 암소에 급여하는 것이 좋다. 바람직하게는, 반추위 미생물에 의해 리놀레인산이 공액 리놀레인산으로 전환시키기에 적당한 사료입자도를 갖기 위해 건초 및 농후사료의 혼합 비율이 7:3인 것이 좋다.In addition, the present invention is to feed cows a feed mixed with hay and rich feed at a ratio of 5: 5 to 8: 2. Preferably, the mixing ratio of hay and rich feed is 7: 3 in order to have a feed particle size suitable for converting linoleic acid to conjugated linoleic acid by the rumen microorganism.

본 발명에서 “농후사료(濃厚飼料)”는 부피가 작고 조섬유 함량은 낮으나 단백질, 가용무질소물 등의 함량이 높은 사료를 총칭하는 것으로, 통상적으로 옥수수·수수·밀·보리 등의 곡식류, 식물성 기름을 짜고 남은 깻묵류나 쌀겨·보릿겨·밀기울 등과 같은 강피류, 어분 또는 이들을 일정한 비율로 섞어 만든 배합사료 등이 이에 속한다. 본 발명에서는 하기 표 1에 농후사료의 성분을 기재하였으나 기술서 상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함을 당연한 것이다.In the present invention, "rich feed" refers to a feed which is small in volume and low in crude fiber but high in protein, soluble nitrogen, and the like, and is commonly used in grains, plants such as corn, sorghum, wheat, and barley. The oils and salted leftovers such as rice bran, rice bran, barley bran and wheat bran, fish meal, or a compound feed made of a mixture of them are included. In the present invention, the components of the thick feed are described in Table 1, but it is apparent to those skilled in the art that various modifications and modifications are possible within the scope of the technical document, and such modifications and modifications belong to the appended claims.

또한, 본 발명은 3월~5월 동안 얻은 우유에 스타터 유산균 배양액을 첨가하여 치즈를 제조함을 특징으로 한다. 상기 스타터 유산균은 CLA 생산능력이 있는 락토코커스속(Lactococcus sp.)에 속하는 균주라면 이에 특별히 제한하지는 않는다. 본 발명의 일 실시예에 따르면, 락토코커스 락티스 서브스페시즈 크레모리스(L. lactis ssp . cremoris) CCRC12586를 스타터 균주로 사용한다.In addition, the present invention is characterized by producing a cheese by adding the starter lactic acid culture medium to the milk obtained during March-May. The starter lactic acid bacteria is a strain belonging to the genus Lactococcus sp. With the ability to produce CLA is not particularly limited thereto. According to one embodiment of the present invention, Lactococcus lactis subspences Cremoris ( L. lactis) ssp . cremoris ) CCRC12586 is used as starter strain.

상기 스타터 유산균 배양액은 우유지방의 3~8 중량부로 첨가하는 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는 5 중량부가 좋다. 스타터 유산균 배양액의 함량이 3 중량부 이하인 경우, 발효가 제대로 일어나지 않으며, 8 중량부 이상이면, 과다한 발효로 인해 고품질의 치즈를 얻기 어렵다.The starter lactic acid bacteria culture medium is preferably added to 3 to 8 parts by weight of milk fat. More preferably 5 parts by weight is good. When the content of the starter lactic acid culture medium is 3 parts by weight or less, fermentation does not occur properly, and when 8 parts by weight or more, it is difficult to obtain a high quality cheese due to excessive fermentation.

또한, 본 발명의 치즈는 10∼20℃에서 숙성시키는 것을 특징으로 한다. 보다 바람직하게는, 미생물에 의한 수소첨가반응이 보다 활발하게 일어나도록 하기 위해 15℃에서 숙성시키는 것이 좋다.Moreover, the cheese of this invention is characterized by aging at 10-20 degreeC. More preferably, the hydrogenation reaction by the microorganism is preferably aged at 15 ° C. in order to occur more actively.

상기 치즈는 4개월 내지 7개월간 숙성시키는 것이 바람직하다. 이는 치즈의 숙성 동안 미생물상이 영향을 받기 때문인데, 우유에 포함된 유산균이 공액리놀레인산의 함량을 증가시킨다. 따라서, 4개월 내지 7개월 숙성시킨 치즈에는 숙성시키지 않은 치즈에 비해 다량의 공액리놀레인산이 포함되어 있으며, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 지방 1g당 공액리놀레인산 5.77∼10.34mg 을 포함하고 있다.The cheese is preferably aged for 4 months to 7 months. This is because the microbial phase is affected during the ripening of the cheese, lactic acid bacteria contained in the milk increases the content of conjugated linoleic acid. Therefore, the cheese aged 4 to 7 months contains a large amount of conjugated linoleic acid compared to unaged cheese, according to one embodiment of the present invention, 5.77 ~ 10.34 mg conjugated linoleic acid per 1 g of fat have.

본 발명의 방법에 따라 제조되는 공액리놀레인산은 c9, t11 및 t10, c12을 포함함을 특징으로 한다.The conjugated linoleic acid prepared according to the method of the present invention is characterized in that it comprises c9, t11 and t10, c12.

또한, 본 발명의 공액리놀레인산이 다량 함유된 치즈의 제조방법은 특별히 제한하지는 않으나, 스타터 균주로 락토코커스 락티스 서브스페시즈 크레모리스(L. lactis ssp . cremoris) CCRC12586균주를 사용하고, 균주 배양액을 30℃에서 우유지방의 3∼8 중량부로 우유에 첨가한 다음, 레닛을 이용하여 우유를 응고시키고, 응고된 우유는 큐브에서 3/8로 절단하여 섞은 후, 35∼40℃에서 20∼50분간 조리하고, 30∼50분간을 더 유지하고, 유장에서 커드를 분리해내면, 커드에서 덩어리가 형성된다. 상기 치즈 블록을 1kg당 평균 이틀 동안 고염수에 담지하고, 고염수 염 지가 끝나면, 10∼20℃의 통풍실에서 치즈를 숙성시킨다. In addition, the manufacturing method of the cheese containing a large amount of conjugated linoleic acid of the present invention is not particularly limited, but L. lactis as a starter strain Lactococcus lactis subspences Cremoris ( L. lactis) ssp . cremoris ) Using strain CCRC12586, strain culture was added to the milk at 30 ° C. with 3-8 parts by weight of milk fat, then the milk was coagulated using rennet, and the coagulated milk was cut into cubes by 3/8 and mixed. Thereafter, the mixture is cooked at 35 to 40 ° C. for 20 to 50 minutes, further maintained for 30 to 50 minutes, and the curd is separated from the whey to form a mass in the curd. The cheese block is immersed in high saline for two days per kg, and after the high saline is finished, the cheese is aged in a ventilated room at 10 to 20 ° C.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are only for illustrating the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following examples.

<실시예 1> 수유시기(계절적 변화)에 따른 공액리놀레인산 함량 조사<Example 1> Conjugated linoleic acid content according to the feeding time (seasonal change)

건초와 농후사료를 7:3의 비율로 혼합한 사료를 홀스타인 암소(Holstein cows, 650 kg)에 급여하면서 우사 내에서 사육하였다. 상기 우사는 치즈 생산 농장의 전형적인 특징들, 천연 목초, TMR 배합기(total mixed ration facility) 및 유사한 시기의 수유군을 선택하기에 충분한 암소의 수를 모두 갖추고 있다. Feed mixed with hay and rich feed at a ratio of 7: 3 was fed in the barn, fed to Holstein cows (650 kg). The barn has all the typical features of a cheese production farm, natural grasses, a total mixed ration facility and a sufficient number of cows to choose a feeding group at a similar time.

농후사료 조성표Rich feed composition table 성분 조성Ingredient composition g/kg DMg / kg DM 성분 조성Ingredient composition g/kg DMg / kg DM Corn grainCorn grain 630630 DM (Dry Matter)DM (Dry Matter) 605605 Alfalfa silageAlfalfa silage 135135 ADF (Acid Detergent Fiber)ADF (Acid Detergent Fiber) 124124 Alfalfa hayAlfalfa hay 93.093.0 NDF (Neutral Detergent Fiber)NDF (Neutral Detergent Fiber) 245245 Soybean mealSoybean meal 12.012.0 CP (Crude Protein)CP (Crude Protein) 175175 LimestoneLimestone 10.010.0 C16:0C16: 0 6.86.8 Calcium phosphateCalcium phosphate 5.05.0 C16:1C16: 1 0.040.04 Sodium bicarbonateSodium bicarbonate 5.05.0 C18:0C18: 0 1.51.5 Calcium sulfateCalcium sulfate 0.50.5 C18:1C18: 1 12.412.4 Magnesium oxideMagnesium oxide 35.035.0 C18:2C18: 2 25.025.0 Protein supplementc Protein supplement c 2.52.5 C18:3C18: 3 1.81.8 Mineral-vitamin supplementa Mineral-vitamin supplement a 60.060.0 기타Etc 0.40.4 aMineral-vitamin mix contained (mg/kg mix) Mn, 3500; Zn, 3000; Cu, 750; Fe 20; I, 85; Co, 15; 및 Se, 35; retinyl acetate (2,100,000 IU/kg), cholecalciferol (390,000 IU/kg), α-tocopheryl acetate (7500 IU/kg) a Mineral-vitamin mix contained (mg / kg mix) Mn, 3500; Zn, 3000; Cu, 750; Fe 20; I, 85; Co, 15; And Se, 35; retinyl acetate (2,100,000 IU / kg), cholecalciferol (390,000 IU / kg), α-tocopheryl acetate (7500 IU / kg)

도 1에 나타난 바와 같이, 매달 젖소에서 얻은 우유 지방의 공액리놀레인산 함량은 3.87∼7.10 mg CLA/g fat로 다양하였다. 4월 및 5월에 얻은 우유는 보통 겨울(12월∼3월)에 분비된 우유보다 공액리놀레인산 농도가 더 높았다. As shown in FIG. 1, the conjugated linoleic acid content of milk fat obtained from cows every month varied from 3.87 to 7.10 mg CLA / g fat. Milk obtained in April and May had a higher concentration of conjugated linoleic acid than milk produced in winter (December to March).

또한, 건초와 농후사료를 7:3으로 혼합한 사료를 급여하면서 우사 내에서 사육한 암소의 경우 1월에서 3월까지 얻은 우유 시료 간에는 큰 변화가 관찰되지 않았다. 공액리놀레인산 함량은 5월에 가장 높았고(7.10 mg/g fat), 1월에 가장 낮았다(3.87 mg/g fat). In addition, no significant change was observed between milk samples obtained from January to March for cows raised in barn fed a feed mixed with hay and thick feed 7: 3. The conjugated linoleic acid content was highest in May (7.10 mg / g fat) and lowest in January (3.87 mg / g fat).

<실시예 2> 사료급여체계 및 치즈 숙성에 따른 공액리놀레인산 함량 조사<Example 2> Conjugated linoleic acid content according to the feed system and cheese ripening

사료급여체계의 효과에 대한 실험은 실시예 1의 계절별 변화에 대한 실험기간 동안 별도로 진행하였다. The experiment on the effect of the feed system was conducted separately during the experiment on the seasonal change of Example 1.

이 실험을 위해 홀스타인 암소(Holstein cows, 650 kg)를 두 그룹으로 나누고(각각 12두), 각각 다른 종류의 사료를 급여하였다(방목 군(천연 목초) 및 우사 내 사육군(TMR: 표 1 참조).For this experiment, the Holstein cows (650 kg) were divided into two groups (12 heads each) and each fed different types of feed (grazing (natural grasses) and barn breeding groups (TMR: see Table 1). ).

상기 두 그룹으로부터 가공하지 않은 우유를 15일 간격으로 4번 수집하고, 치즈를 제조하였다. 15일마다 4개의 다른 치즈 블록을 제조하기 위해 표준 방법에 따라 2개의 다른 우유통을 사용하였다. Raw milk from the two groups was collected four times at 15 day intervals to make cheese. Two different milk jugs were used according to standard methods to make four different cheese blocks every 15 days.

간단히 말해, 스타터 균주로 락토코커스 락티스 서브스페시즈 크레모리스(L. lactis ssp . cremoris) CCRC12586를 사용하고, 상기 균주의 배양액을 30℃에서 우유지방의 5 중량부로 우유에 첨가하였다. 우유를 응고시키기 위해 레닛을 이용하고, 응고된 우유는 큐브에서 3/8로 절단하고 나서, 섞고, 37℃에서 30분 간 조리하고, 45분간을 더 유지하였다. 조리 후, 유장에서 커드(curd)를 분리해내고, 커드로부터 덩어리가 형성되었다. In short, Lactococcus lactis sub Spanish sheath Crescent Morris (L. lactis ssp. Cremoris) using CCRC12586, which was added to the culture solution of the strain at 30 ℃ 5 parts by weight of milk fat in milk as a starter strain. Rennet was used to coagulate the milk, and the coagulated milk was cut into cubes in 3/8, mixed, cooked at 37 ° C. for 30 minutes, and held for an additional 45 minutes. After cooking, the curd was separated from the whey and a lump formed from the curd.

다음으로, 상기에서 제조한 16개의 치즈 블록을 숙성 센터에서 숙성시켰다. 보통, 한 개의 치즈 블록은 1kg당 평균 이틀 동안 고염수에 담지하였다. 고염수 염지가 끝난 후, 15℃의 통풍실에서 치즈를 숙성시켰다. 16개의 치즈 블록은 4달 및 7달 동안 숙성시켜 시료로 사용하였다. Next, the sixteen cheese blocks prepared above were aged in a aging center. Usually, one cheese block was soaked in high saline for an average of two days per kg. After the high saline dyeing was finished, the cheese was aged in a ventilation chamber at 15 ° C. Sixteen cheese blocks were aged for 4 and 7 months and used as samples.

치즈에서 공액리놀레인산 함량 변화Changes in Conjugated Linoleic Acid Content in Cheese 수유일자Date of lactation 사료급여체계Feed benefit system 4달 숙성시킨 치즈4 months aged cheese 7달 숙성시킨 치즈7 months aged cheese 3월In March 방목grazing 6.966.96 10.3410.34 우사내 사육Barn breeding 7.837.83 9.839.83 4월 첫째 주First week of April 방목grazing 10.1210.12 9.779.77 우사내 사육Barn breeding 6.776.77 9.819.81 4월 셋째 주3rd week of April 방목grazing 8.098.09 8.538.53 우사내 사육Barn breeding 6.676.67 8.408.40 5월In May 방목grazing 9.129.12 8.478.47 우사내 사육Barn breeding 5.775.77 8.808.80 평균Average 방목grazing 8.578.57 9.289.28 우사내 사육Barn breeding 6.766.76 9.219.21

표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 치즈는 일반 치즈에 비해(2.9∼7.1mg CLA/g fat) 상대적으로 높은 농도의 공액리놀레인산을 포함하였다(5.8∼10.34mg CLA/g fat). As shown in Table 2, the cheese of the present invention contained relatively high concentrations of conjugated linoleic acid (5.8 to 10.34 mg CLA / g fat) compared to normal cheese (2.9 to 7.1 mg CLA / g fat).

방목한 암소의 경우, 우사 내에서 사육한 암소에서 얻은 치즈와 비교하여, 공액리놀레인산 농도는 4달 숙성한 것에서 더 높았으나, 7달 숙성한 치즈에서는 유의한 증가는 없었다. In the grazing cows, the conjugated linoleic acid concentration was higher at 4 months of aging compared to the cheeses from cows raised at barn, but there was no significant increase in cheeses aged at 7 months.

그러나, 우사 내에서 사육한 소의 우유로부터 얻은 치즈와는 달리, 방목한 소에서 얻은 7달 숙성한 치즈의 공액리놀레인산 농도는 4달 숙성한 치즈와 유의한 차이는 나타나지 않았다. However, unlike the cheese obtained from cow's milk raised in barn, the conjugated linoleic acid concentration of aged cheese obtained from grazing cows was not significantly different from that of aged 4 months.

3월과 5월 사이에 얻은 우유로 만든 치즈의 공액리놀레인산 함량을 수유시기와 비교했을 때, 시료 간에 차이가 발견되었다(도 1 참조). 즉, 비록 통계적으로 유의한 것은 아니지만, 3월과 4월 초에서 높았고, 4월말과 5월에서는 상대적으로 낮았다.When the conjugated linoleic acid content of the cheese made from milk obtained between March and May was compared with the feeding time, a difference was found between the samples (see FIG. 1). That is, although not statistically significant, it was high in March and early April, and relatively low in late April and May.

<실시예 3> 지방산 프로파일 조사Example 3 Investigation of Fatty Acid Profile

대조군 치즈(숙성시키지 않음, indoor)와 4달 및 7달 숙성시킨 치즈의 지방산 프로파일을 비교하였다. 치즈 시료는 유기용매 혼합액(클로로포름:메탄올 = 3:1; 볼텍스 믹서로 혼합함) 5mL로 두 번 추출하였다. 헵타데카노산(Heptadecanoic acid (C17:0; Sigma Chemical Co. St. Louis, MO, USA))을 내부 표준물질로 첨가하였다(recovery = 80%). 상부의 용매층을 수집하고, 소듐 설페이트로 탈수하고, 건조될 때까지 질소를 충진하였다. 지방산은 톨루엔 1mL로 녹이고, Kim and Liu 등(J. Food Sci. 67: 1731-1737, 2002)의 방법에 따라 메틸화시켰다. 지방 시료들은 -20℃에서 저장한 다음 GC로 분석하였다. 지방산 메틸 에스테르는 불꽃이온화검출기 및 HP3392 모델 적분기가 장착된 휴렛 팩커드 모델 HP5890 가스 크로마토그래프(산 페르난도, 캐나다) 를 이용하여 Supelcowax-10 fused silica capillary column (60m×0.32mm, 필름두께: 0.5㎛; Supelco., Inc, Bellefonte, PA)으로 분석하였다. 분석 조건은 다음과 같다:Fatty acid profiles of control cheeses (not mature, indoor) and cheeses aged 4 and 7 months were compared. Cheese samples were extracted twice with 5 mL of an organic solvent mixture (chloroform: methanol = 3: 1; mixed with a vortex mixer). Heptadecanoic acid (C17: 0; Sigma Chemical Co. St. Louis, Mo., USA) was added as an internal standard (recovery = 80%). The upper solvent layer was collected, dehydrated with sodium sulphate and filled with nitrogen until dry. The fatty acid was dissolved in 1 mL of toluene and methylated according to the method of Kim and Liu et al. ( J. Food Sci . 67: 1731-1737, 2002). Fat samples were stored at -20 ° C and analyzed by GC. Fatty acid methyl esters were prepared on a Supelcowax-10 fused silica capillary column (60 m × 0.32 mm, film thickness: 0.5 μm) using a Hewlett Packard model HP5890 gas chromatograph (San Fernando, Canada) equipped with a flame ionization detector and an HP3392 model integrator. , Inc, Bellefonte, PA). Analysis conditions are as follows:

2.4 mL/min 헬륨 방출; 유입기 온도 240℃; 검출온도 250℃; 칼럼 챔버 온도는 120℃(5분)에서 시작하고, 1분당 10℃씩 220℃까지 올리고, 30분간 유지함. 0.5∼5㎍의 지방산을 포함하는 시료(0.5∼2㎕)를 스필(split) 모드로 칼럼에 주입함. 2.4 mL / min helium release; Inlet temperature 240 ° C .; Detection temperature of 250 ° C .; Column chamber temperature starts at 120 ° C. (5 minutes), raises to 10 ° C. at 10 ° C. per minute and holds for 30 minutes. A sample containing 0.5-5 μg of fatty acid (0.5-2 μl) was injected into the column in the split mode.

지방산을 동정 및 정량하기 위해, Cis-9, trans-11 옥타데카디엔산(99% cis-9, trans-11 이성질체; Matreya, Inc. Pleasant Gap, PA) 및 알려진 표준 혼합 지방산(Sigma Chemical Co. St. Louis, MO)을 사용하였다. To identify and quantify fatty acids, Cis- 9, trans- 11 octadecadienoic acid (99% cis- 9, trans- 11 isomer; Matreya, Inc. Pleasant Gap, PA) and known standard mixed fatty acids (Sigma Chemical Co. St. Louis, Mo.).

도 2에 나타난 바와 같이, 리놀레인산(C18:3)의 평균 농도는 숙성시키지 않은 치즈와 비교하여 숙성된 것에서 더 높았고, 4달 및 7달 숙성시킨 치즈 간에는 차이가 없었다. 스테아르산(C18:0)은 숙성된 치즈에서 함량이 높았고, 숙성기간에 따라 약간의 차이를 보였다.As shown in FIG. 2, the average concentration of linoleic acid (C18: 3) was higher in the aged compared to unaged cheese, with no difference between cheeses aged 4 and 7 months. Stearic acid (C18: 0) was higher in aged cheese and showed a slight difference depending on the ripening period.

또한, 우사 내에서 사육한 군 및 방목 군 간의 숙성시킨 치즈 간에는 유의한 차이가 발견되지 않았다. 방목 군에서 얻은 치즈 시료는 우사 내에서 사육한 군에서 얻은 것보다 더 높은 농도의 스테아르산(C18:0) 을 포함하고 있다(미도시 됨). In addition, no significant difference was found between the aged cheeses in the barn and the grazing groups. Cheese samples from the grazing group contained higher concentrations of stearic acid (C18: 0) than those obtained from the group raised in barn (not shown).

도 1은 계절별로 얻은 우유의 공액리놀레인산 함량 변화를 나타낸 그래프이다.1 is a graph showing the change in conjugated linoleic acid content of milk obtained by season.

도 2는 우사 내 사육 암소의 우유로 제조한 치즈의 지방산 프로파일을 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the fatty acid profile of cheeses made from cows cows raised in barn.

Claims (6)

3월∼5월 동안 건초 및 농후사료를 5:5 ~ 8:2의 비율로 혼합하여 급여한 소에서 우유를 얻는 단계; Mixing milk and rich feed at a ratio of 5: 5 to 8: 2 during March to May to obtain milk from fed cows; 상기 우유에 스타터 유산균 배양액 및 레닛을 첨가하여 우유를 응고시켜 치즈를 제조하는 단계; 및Preparing a cheese by coagulating milk by adding a starter lactic acid culture medium and rennet to the milk; And 상기 치즈를 4∼7개월간 숙성하는 단계를 포함하는 공액리놀레인산이 함유된 치즈의 제조방법.Method for producing a cheese containing conjugated linoleic acid comprising the step of aging the cheese for 4 to 7 months. 삭제delete 제1항에 있어서,The method of claim 1, 스타터 유산균 배양액은 우유지방의 3∼8 중량부로 첨가하는 것을 특징으로 하는 공액리놀레인산이 함유된 치즈의 제조방법.A starter lactobacillus culture is a method for producing a conjugated linoleic acid-containing cheese, characterized in that the addition of 3 to 8 parts by weight of milk fat. 삭제delete 제1항에 있어서,The method of claim 1, 치즈 숙성은 10∼20℃에서 실시하는 것을 특징으로 하는 공액리놀레인산이 함유된 치즈의 제조방법.A method for producing cheese containing conjugated linoleic acid, wherein the cheese is aged at 10 to 20 ° C. 제1항의 방법에 따라 제조된 공액리놀레인산 함유 치즈.A conjugated linoleic acid-containing cheese prepared according to the method of claim 1.
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