KR100908412B1 - Acinetobacter calcoaceticus strains and microbial agent for the treatment of soil having the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 아시네토박터 칼코아세티쿠스(Acinetobacter calcoaceticus) 균주에 대한 것으로, 특히 불용성 인산염을 가용화하는 균주 및 이를 포함하는 토양 처리용 미생물 제제에 대한 것이며, 더욱 상세하게는 토양에 과잉 축적된 불용성 인산염을 효과적으로 분해하거나 처리할 수 있는 균주의 분리와 동정, 이것의 염류분해효과 및 작물 생육촉진 효과에 대한 것이다. The present invention relates to strains of Acinetobacter calcoaceticus , in particular to strains solubilizing insoluble phosphates and microbial preparations for soil treatment comprising the same, and more particularly, insoluble phosphates that have been accumulated in the soil in excess. It is about the isolation and identification of strains that can effectively decompose or treat, its hydrolysis effect and crop growth promoting effect.
토양 중에 처리한 인산은 산성토양에서는 철 및 알루미늄 이온과, 알칼리성 토양에서는 칼슘이온과 쉽게 결합하여 불용화 됨으로써 토양 중 식물이 이용할 수 없는 불용성 인산의 양만 증가시키는 결과를 가져다준다. 실제로 인산은 토양중 0.05%(w/w)를 차지하고 있으나, 식물 또는 미생물이 이용할 수 있는 인산양은 그 중에서도 0.01%에 불과하다. 난용성 인산염을 식물이나 미생물이 이용하기 쉬운 H2PO4-나 HPO4 2-의 이온형태로 전환시켜주는 과정을 '가용화'라 하며, 토양 속에는 이러한 가용화 반응을 일으키는 미생물이 많이 존재한다고 보고되어 있다. Phosphoric acid treated in soil is easily insoluble by incorporating iron and aluminum ions in acidic soils and calcium ions in alkaline soils, resulting in an increase in the amount of insoluble phosphoric acid that is not available to plants in the soil. Phosphoric acid actually accounts for 0.05% (w / w) of the soil, but only 0.01% of the phosphate available to plants or microorganisms. Solubilization is the process of converting poorly soluble phosphates into H 2 PO 4 -or HPO 4 2 -ions, which are easily used by plants and microorganisms. have.
이미 보고 되어진 인산가용화균으로는 바실러스 메가테리움(Bacillus megaterium), 바실러스 폴리믹솔(B. polymyxol), 슈도모나스 스트리아타(Pseudomonas striata), 슈도모나스 속(Pseudomonas sp.)(P118/89) 등의 세균이 알려져 있으며, 페니실리움 심플리시마움(Penicillium simplicisimaum), 페니실리움 아우란티오그리세움(P. aurantiogriseum), 페니실리움 빌라지(P. bilaji), 아스퍼질러스 아와모리(Aspergillus awamori), 아스퍼질러스 아쿨레아투스(A. aculeatus), 아스퍼질러스 나이거(A. niger) 등의 곰팡이도 있다.Phosphate solubilizing bacteria that have already been reported include bacteria such as Bacillus megaterium , B. polymyxol , Pseudomonas striata , and Pseudomonas sp. (P118 / 89). Penicillium simplicisimaum , Penicillium aurantiogriseum , P. bilaji , Aspergillus awamori , Aspergillus There are also fungi such as A. aculeatus and A. niger .
이러한 인산 가용화균을 이용한 환경친화형 생물비료(biofertilizers)의 개발노력은 전세계적으로 부단히 이루어져 왔다. 이미 1950년대에 러시아와 동유럽에서 불용성 인산을 가용화시킬수 있는 미생물을 분리하여 토양에 처리한 결과 작물의 인산흡수를 증대시켜 평균 10%의 수량증가를 보았다는 보고가 있으며, 1980년대에는 페니실리움 빌라지(Penicillium bilaji) 등의 사상균이 인산의 흡수를 증대시키는 것으로 밝혀지기도 하였다.Efforts to develop environmentally friendly biofertilizers using these phosphate solubilizing bacteria have been made worldwide. In the 1950s, microorganisms capable of solubilizing insoluble phosphate in Russia and Eastern Europe were isolated and treated in soil, increasing the phosphate uptake of crops and increasing the average yield by 10%. In the 1980s, penicillium villas Filamentous fungi, such as Penicillium bilaji , have been found to increase the absorption of phosphoric acid.
그러나 국내에서의 미생물을 이용한 생물비료의 개발은 균주선발 및 배양특성 조사 에만 접근한 수준이며, 유전학적인 접근은 아직 미흡한 실정이다. 더욱이 최근에는 환경보전을 위한 갖가지 규제강화로 화학비료에 대한 제약이 심화될 것으로 판단되기 때문에, 난용성 인산염을 효율적으로 분해하여 작물이 필요로 하는 인산질 비료성분을 충분히 공급해줄 수 있는 미생물 제제의 개발은 그 무엇보다도 시급한 과제라 할 것이다. 특히, 이러한 미생물 제제가 식물생육을 촉진하는 기능을 가지고 있을 경우에는 염류집적현상의 해소 및 식물생육 촉진이 가능한 장점이 있으므로, 난용성 인산염을 효율적으로 분해하면서도 식물생육을 촉진할 수 있는 기능의 미생물처리제를 개발하는 것이 가장 중요하다.However, the development of biological fertilizers using microorganisms in Korea has approached only strain selection and culture characteristics investigation, and genetic approach is still insufficient. In addition, since the restriction on chemical fertilizers will be intensified in recent years due to various regulations for environmental preservation, the development of microbial preparations that can sufficiently dissolve poorly soluble phosphates to supply the phosphate fertilizer components required by crops. Is an urgent task above all. In particular, when such a microbial agent has a function of promoting plant growth, there is an advantage of eliminating salt accumulation and promoting plant growth, and thus, microorganisms having a function of promoting dissolution of poorly soluble phosphate and promoting plant growth. Developing a treatment is the most important.
이에, 본 발명자들은 국내 토착미생물을 이용하여 토양에 집적된 염류를 생물학적인 방법으로 분해하는 방법을 연구 개발하던 중, 인산염 가용화능력이 탁월한 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주를 분리하였고, 이 균주를 이용하여 토양염류분해 미생물제제로서의 개발 가능성을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다. Accordingly, the present inventors isolated the Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain having excellent phosphate solubilizing ability while researching and developing a method of decomposing salts accumulated in the soil by a biological method using indigenous microorganisms in Korea. The present invention was completed by confirming the development potential as a soil hydrolysis microbial agent using this strain.
따라서, 본 발명은 인산염을 가용화하는 능력을 가지는 신규한 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주를 제공하는 것이 목적이다. It is therefore an object of the present invention to provide a novel Acinetobacter calcoaceticus BYS-2 strain having the ability to solubilize phosphate.
또한, 본 발명은 상기 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주를 이용하여, 인산염 가용화 능력과 식물생육 촉진 능력을 가지는 토양 처리용 미생물 제제를 제공하기 위한 것이다. In addition, the present invention is to provide a microbial preparation for soil treatment having a phosphate solubilizing ability and plant growth promoting ability using the Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain.
상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명은 인산 가용화능을 갖는 아시네토박터 칼코아세티쿠스(Acinetobacter calcoaceticus) 균주이다. 종래에 아시네토박터 칼코아세티쿠스 균주가 인산 가용화능을 갖는다는 것은 알려지지 않았으며, 본 발명자들은 상기 균주가 인산 가용화능을 갖는다는 것을 처음으로 확인하여 본 발명을 완성하였다. The present invention for achieving the above object is an Acinetobacter calcoaceticus strain having a phosphate solubilizing ability. It is not known that the Acinetobacter calcoaceticus strain has a phosphate solubilizing ability in the past, and the present inventors completed the present invention for the first time confirming that the strain has a phosphate solubilizing ability.
구체적으로, 본 발명자들은 국내 토착미생물을 이용하여 토양에 집적된 염류를 생물학적인 방법으로 분해하는 방법을 연구 개발하던 중, 인산염 가용화능력이 탁월한 아시네토박터 칼코아세티쿠스 균주를 분리하였고, 이를 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주로 명명하였으며, 이를 2008년 12월 11일자로 국립농업과학원 농 업유전자원센터에 기탁하여 수탁번호 KACC 91429P를 부여받았다. 이에 따라, 본 발명에 따른 상기 균주는 수탁번호 KACC 91429P 인 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주인 것이 바람직하다. Specifically, the inventors of the present invention, while researching and developing a method of decomposing salts accumulated in the soil by a biological method using indigenous microorganisms in Korea, isolates the Acinetobacter calcoaceticus strain excellent in phosphate solubilizing ability, Tobacter Calcoaceticus BYS-2 strain was named and was deposited on December 11, 2008 at the National Institute of Agricultural Science, Agricultural Genetic Resource Center, and received accession number KACC 91429P. Accordingly, the strain according to the present invention is preferably an Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain having accession number KACC 91429P.
그리고, 본 발명에 따른 상기 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주는 토양시료의 현탁액을 트리칼슘포스페이트가 포함된 고형배지에 도말한 후, 배양하여 얻은 것을 특징으로 한다. 여기서, 토양시료라 함은 일반적인 토양에서 얻을 수 있는 보통의 흙을 포함한다. 본 발명에 따라 인산 가용화능을 갖는 균주를 분리하고자, 본 발명자들은 불용성 인산염이 포함된 고형배지를 이용하였고, 그 중에서도 트리칼슘포스페이트가 포함된 고형배지를 이용함으로써 인산 가용화능을 가지는 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주를 얻을 수 있었다. In addition, the Acinetobacter calcoaceticus BYS-2 strain according to the present invention is characterized in that obtained by culturing after a suspension of soil samples in a solid medium containing tricalcium phosphate. Here, the soil sample includes ordinary soil that can be obtained from general soil. In order to isolate a strain having a phosphate solubilizing ability according to the present invention, the present inventors used a solid medium containing insoluble phosphate, and among them, an acetobacter knife having a phosphate solubilizing ability by using a solid medium containing tricalcium phosphate. Coaceticus BYS-2 strain was obtained.
본 발명자들은 이러한 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주가 인산 가용화능을 가질 뿐만 아니라, 식물의 생육촉진 능력을 더 가진다는 것도 확인하였다. The inventors also confirmed that such Acinetobacter calcoaceticus BYS-2 strain not only has solubilizing ability of phosphate, but also has further growth promoting ability of plants.
한편, 본 발명의 다른 실시형태는, 상기한 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 토양 처리용 미생물 제제이다. 본 발명자들은 이러한 토양 처리용 미생물 제제가 토양의 유기물 함량과 유효인산 함량을 증가시킨다는 것을 확인하였으며, 상추의 생육도 촉진시킨다는 사실을 확인하였다. On the other hand, another embodiment of the present invention is a microbial agent for soil treatment, comprising the above-described acinetobacter calcoaceticus BYS-2 strain as an active ingredient. The present inventors confirmed that the microbial preparation for soil treatment increased the organic matter content and the effective phosphoric acid content of the soil, and confirmed that it also promoted the growth of lettuce.
이러한 본 발명에 따른 상기 미생물 제제는, 상기 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주를 액체배지에서 배양함으로써 제조되는 것이 바람직하고, 특별히 균수가 105~108 CFU/ml가 되도록 증류수에 희석된 액상형을 가지는 것이 더욱 바람직하다. The microbial preparation according to the present invention is preferably prepared by culturing the Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain in a liquid medium, and is specifically diluted in distilled water so that the bacteria number is 10 5 to 10 8 CFU / ml. It is more preferable to have a liquid form.
기타 실시예들의 구체적인 사항들은 상세한 설명 및 도면들에 포함되어 있다. Specific details of other embodiments are included in the detailed description and the drawings.
상기한 본 발명에 따른 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주는 우수한 인산염을 가용화하는 능력을 가지고, 이를 포함하는 본 발명에 따른 토양 처리용 미생물 제제는 토양에 집적된 염류를 효과적으로 분해함으로써 토양개량 및 작물 생산성과 수량 증가 효과를 제공할 수 있다. Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain according to the present invention has the ability to solubilize excellent phosphate, the microbial agent for soil treatment according to the present invention comprising the same by effectively decomposing the salts accumulated in the soil It can provide improvements and increases in crop productivity and yield.
이하에서는 본 발명의 바람직한 하나의 실시형태를 첨부된 도면을 참조하여 상세하게 설명하기로 한다. 본 발명은 하기의 실시예에 의하여 보다 더 잘 이해 될 수 있으며, 하기의 실시예는 본 발명의 예시 목적을 위한 것이며, 첨부된 특허청구범위에 의하여 한정되는 보호범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.Hereinafter, one preferred embodiment of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. The invention may be better understood by the following examples, which are intended for purposes of illustration of the invention and are not intended to limit the scope of protection defined by the appended claims.
실시예 1: 인산염 가용화 균주의 탐색 및 분리Example 1 Screening and Isolation of Phosphate Solubilizing Strains
먼저, 인산 가용화 능력이 있는 균을 분리하기 위해서 전국각지(전라북도 부안군 하서면, 전라북도 부안군 행안면, 전라북도 남원시 산동면, 전라북도 전주시 완산구, 경상남도 거창군 북상면, 경상남도 진주시 수곡면, 경상북도 울진군 울진읍, 경상북도 울진군 후포면, 충남 논산시 양촌면)로부터 많은 토양시료를 수집하였다.First, across the country in order to remove the bacteria that phosphate solubilizing capacity (North Jeolla Province Buan haseomyeon, North Jeolla Province Buan haenganmyeon, North Jeolla Province Namwon sandongmyeon, North Jeolla Province Jeonju Wansan-gu, Gyeongsangnam-do Geochang buksangmyeon, Gyeongsangnam-do Jinju sugokmyeon, Gyeongsangbuk-do Uljin-gun uljineup, Gyeongsangbuk-do Uljin-gun hupomyeon, Chungnam Nonsan yangchonmyeon ) Collected many soil samples.
그리고, 상기와 같이 수집한 토양시료 1g을 멸균증류수에 현탁한 후, 트리칼슘포스페이트의 최종농도가 0.5% 되도록 조제한 고형배지에, 평판희석법으로 도말하여, 접종한 다음, 30℃ 항온기에서 2~3일간 배양하였다. 그 중에서 생육이 빠르고 투명환이 큰 균주(전라북도 부안군 행안면 역리 미륵석불입상이 있는 야산의 산흙으로부터 분리된 균주)를 본 발명에 따라 인산 가용화능이 있는 BYS-2 균주로 선발하였다(도 1 참조).Then, 1 g of the soil sample collected as described above was suspended in sterile distilled water, and then plated on a solid medium prepared so that the final concentration of tricalcium phosphate was 0.5% by plate dilution method, and then inoculated. Incubated daily. Among them, a fast growth and a large transparent ring (strain isolated from the mountain soil of Yasan with Bilseok-myeon, Byeon-myeon, Haan-myeon, Buan-gun, Jeollabuk-do) was selected as BYS-2 strain with phosphate solubilizing ability according to the present invention (see FIG. 1).
실험예 1: 균주의 동정Experimental Example 1 Identification of Strains
상기 실시예 1에 따라 선발된 BYS-2 균주의 생리적, 생화학적인 검사를 수행하였다(BERGEY's Manual of Systemic Bacteriology). 그 결과, 뉴트리언트 아가 배지상에서 우유빛의 콜로니를 가지며 형태학적 특성으로는 호기성 간균이었다. 다른 생리생화학적 특성은 하기 표 1에 요약하였다.The physiological and biochemical tests of the BYS-2 strain selected according to Example 1 were performed (BERGEY's Manual of Systemic Bacteriology). As a result, it was milky colonies on nutrient agar medium and aerobic bacillus in morphological characteristics. Other physiological and biochemical properties are summarized in Table 1 below.
[표 1: 분리균주의 생리생화학적 특성]Table 1: Physiological and Biochemical Characteristics of Isolated Strains
그리고, 미생물 동정 시스템(MIDI)의 표준실험법에 의하여 지방산을 메틸에스테르화하고 기체크로마토그라프로 분석한 다음, 지방산의 분포양상을 분석하였다. 그 결과 하기 표 2에 나타난 바와 같이, 아시네토박터 칼코아세티쿠스(Acinetobacter calcoaceticus)에 대하여 0.174, 아시네토박터 바우만니(Acinetobacter baumannii)에는 0.170의 근연성을 나타내는 것으로 확인되어, 이 균주는 아시네토박터속(Acinetobacter sp.) 균주인 것을 알 수 있다. In addition, the fatty acid was methyl esterified and analyzed by gas chromatograph by the standard experimental method of the microorganism identification system (MIDI), and then the distribution pattern of the fatty acid was analyzed. As a result, as shown in Table 2 below, it was confirmed that Acinetobacter calcoaceticus showed an abundance of 0.170 for Acinetobacter calcoaceticus and 0.170 for Acinetobacter baumannii . It can be seen that the genus Acinetobacter sp.
[표 2: 분리균주의 지방산 조성 및 근연성]Table 2: Fatty Acid Composition and Intimacy of Isolated Strains
또한, 더욱 정확한 균주의 동정을 위하여 16S rDNA 서열에 의한 균주의 계통학적 분류를 위하여 BYS-2 균주를 대상으로 뉴트리언트 액체배지에서 72시간동안 진탕배양한 후 이들 균체로부터 DNA를 추출하였으며, 이를 PCR (primers: 27F, 5'-GAGTTTGATCCTGGCTCAG-3' 및 1492R, 5'-AGAAAGGAGGTGATCCAGCC-3'/ 30 cycles: 95℃ 2 min, 94℃ 30 sec, 55℃ 30 sec, 72℃ 42 min, 72℃ 5 min, then 16℃ 8hr)로 증폭시켜 정제하고, Genetic Analyzer 310A (Applied Biosystems)을 사용하여 염기서열을 분석하였다. In addition, DNA was extracted from these cells after shaking for 72 hours in a nutrient liquid medium for BYS-2 strains for systematic classification of strains by 16S rDNA sequence. (primers: 27F, 5'-GAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 'and 1492R, 5'-AGAAAGGAGGTGATCCAGCC-3' / 30 cycles: 95 °
그 결과 상기 BYS-2 균주의 16S rDNA 서열에 의한 염기서열은 도 2에 나타난 바와 같으며, 16S rDNA 서열에 의한 유효세균과 그 관련세균의 분류학적 위치를 나타내 는 계통수(philogenetic tree)는 도 3에 나타난 바와 같다. As a result, the base sequence by 16S rDNA sequence of the BYS-2 strain is shown in Figure 2, the phylogenetic tree showing the taxonomic location of the effective bacteria and its related bacteria by the 16S rDNA sequence is 3 As shown in
계통학적 분류방법에 따르면 Acinetobacter속은 현재 17종(2008년 6월 기준)이 존재하며, 이 중 Acinetobacter calcoaceticus 와 높은 유사도를 보였다. 16S rDNA 염기서열 약 837bp가 분석되었는데 보고된 Acinetobacter calcoaceticus DSM 30006 균주와 97.6%의 유사도를 보였다. 또한, 837bp의 염기서열을 사용한 계통수 분석에서도 Acinetobacter calcoaceticus 와 동일한 가지를 형성하는 것으로 나타났다. 통상적으로 16S rRNA 유전자의 염기서열 97%를 기준으로 종을 판단하는 추세에 따르면 상기 BYS-2 균주는 Acinetobacter calcoaceticus 로 동정하는 것이 바람직하다. 또한, Acinetobacter calcoaceticus 는 토양이나 하수와 같은 자연환경 중에서 쉽게 분리되며, oxidase-negative, catalase-positive의 구간균으로 포도당으로부터 산을 형성한다. Citrate를 이용하지만 nitrate는 환원하지 못하며, gelatin, blood등도 분해하지 못한다. 상기 BYS-2 균주는 분석된 837bp의 염기서열의 일차적인 분석과 2차 구조를 고려한 계통수 분석에서 모두 Acinetobacter calcoaceticus 와 같은 가지를 형성하므로 최종적으로 Acinetobacter calcoaceticus 로 동정하는 것이 바람직하다. According to the systematic classification method, there are currently 17 species of genus Acinetobacter (as of June 2008), which showed high similarity with Acinetobacter calcoaceticus . Approximately 837 bp of 16S rDNA sequence was analyzed and showed 97.6% similarity to the reported Acinetobacter calcoaceticus DSM 30006 strain. In addition, phylogenetic tree analysis using 837 bp sequence showed the same branches as Acinetobacter calcoaceticus . In general, according to a trend of determining species based on 97% of nucleotide sequences of 16S rRNA gene, the BYS-2 strain is preferably identified as Acinetobacter calcoaceticus . In addition, Acinetobacter calcoaceticus is easily separated from the natural environment such as soil and sewage, and forms acid from glucose as a bacterium of oxidase-negative and catalase-positive. Citrate is used but nitrate cannot be reduced and gelatin and blood cannot be degraded. The BYS-2 strain forms the same branch as Acinetobacter calcoaceticus in both the primary analysis of the analyzed nucleotide sequence of 837 bp and the phylogenetic tree in consideration of the secondary structure. Therefore, it is preferable to finally identify Acinetobacter calcoaceticus .
실시예 2: 액상형 미생물 제제의 제조Example 2: Preparation of Liquid Microbial Formulations
상기 실시예 2에 따라 분리동정된 BYS-2 균주의 배양은 뉴트리언트 액체배지를 기본으로 사용하였다. BYS-2 균주를 뉴트리언트 액체배지에서 1~2일간 배양한 후 액체배지 100ml를 함유하는 250ml 삼각플라스크에 접종하여 48시간 종균배양을 하였다. 본 배양을 위하여 액체배지 1.5L를 함유하는 3L 삼각플라스크에 상기에서 얻은 종균 배양액을 접종하여 배양하였다. 배양조건은 30℃에서 150rpm으로 48시간 동안 진탕 배양하였다. 배양된 균은 원심분리기를 이용하여 배양액을 제거한 후 균체를 회수하였다. 회수된 균체는 미생물수가 108~1010 CFU/ml가 되도록 멸균증류수로 현탁하여 4℃에서 보관하며 이를 미생물제제원액으로 사용하였다. 이 미생물제제원액을 500ml에 균수가 105~108 CFU/ml가 되도록 희석하고 여기에 영양제, 미량요소, 그리고 기타 첨가제를 혼합하여 미생물 제제를 제조하였다.The culture of BYS-2 strain isolated and identified according to Example 2 was used as a nutritic liquid medium. BYS-2 strains were cultured in a nutrient liquid medium for 1 to 2 days, and then seeded in a 250ml Erlenmeyer flask containing 100ml of liquid medium and seeded for 48 hours. For the incubation, the seed culture was obtained by inoculating the 3 L Erlenmeyer flask containing 1.5 L of the liquid medium and cultured. Culture conditions were shaken for 48 hours at 30 ℃ 150rpm. The cultured cells were recovered after removing the culture solution using a centrifuge. The recovered cells were suspended in sterile distilled water so that the number of microorganisms was 10 8 ~ 10 10 CFU / ml and stored at 4 ℃ and used as a microbial preparation. The microbial preparation was diluted to 500 ml with 10 5 to 10 8 CFU / ml, and microbial preparations were prepared by mixing nutrients, trace elements, and other additives.
실험예 2: 미생물 제제의 활성시험Experimental Example 2: Activity Test of Microbial Agents
상기 실시예 2에서 얻은 미생물 제제를 1,000배 희석하여, 경상남도 진주시에 소재한 시설하우스 토양 200평에 3회 관주 처리한 후, 그 결과를 관찰하였다. 즉, 본 발명에 따른 미생물 제제를 처리한 처리구 3개(처리구 1~3)와, 이것을 처리하지 않은 대조구 3개(대조구 1~3)로 구분하여 실험하였다. After diluting the microbial preparation obtained in Example 2 1,000 times, irrigation three times in 200 pyeong soil of the facility house located in Jinju-si, Gyeongsangnam-do, the results were observed. That is, the experiment was divided into three treatment groups (treatment 1 to 3) treated with the microbial preparation according to the present invention and three control groups (control 1 to 3) not treated this.
그 결과는 하기 표 3에 나타난 바와 같다. 즉, 본 발명에 따른 미생물 제제를 처리한 처리구는 대조구와 비교하여, 전체적으로 pH가 거의 일정하게 유지되었고, EC 는 약간 감소하는 경향이 있었다. 또한, 유기물함량은 처리전에 비하여 약 180% 이상 증가하였으며, 유효인산은 280% 이상 증가하였고, 칼륨, 칼슘, 마그네슘의 함량도 증가하였다.The results are as shown in Table 3 below. That is, the treatment group treated with the microbial preparation according to the present invention maintained the pH almost constant as a whole compared to the control, and the EC tended to decrease slightly. In addition, the organic matter content was increased by more than about 180% compared to before treatment, the effective phosphoric acid was increased by more than 280%, the content of potassium, calcium, magnesium also increased.
[표 3: 미생물 제제 처리에 따른 토양분석]Table 3: Soil Analysis by Microbial Preparation
한편, 본 발명에 따른 상기 미생물 제제가 작물의 생육에 미치는 영향을 조사하기 위하여, pot상의 간척지토양에 상추를 이식하고 그 생육상황을 확인하였다. 그 결과 도 4에 나타난 바와 같이 무처리구(도 4의 왼쪽)에서는 상추의 생육이 이 루어지지 않고 고사하였으나, 본 발명에 따른 미생물 제제를 처리한 처리구(도 4의 오른쪽)는 미생물 제제의 처리로 정상적인 생육이 이루어짐을 확인할 수 있었다.On the other hand, in order to investigate the effect of the microbial agent according to the present invention on the growth of crops, lettuce was transplanted to the reclaimed soil on the pot and confirmed the growth situation. As a result, as shown in Figure 4 in the untreated (left side of Figure 4) was not grown without the growth of lettuce, but treated with a microbial preparation according to the present invention (right of Figure 4) is a normal treatment of the microbial preparation Growth could be confirmed.
한편, 상기에서는 본 발명을 특정의 바람직한 실시예에 관련하여 도시하고 설명하였지만, 이하의 특허청구범위에 의해 마련되는 본 발명의 기술적 특징이나 분야를 이탈하지 않는 한도 내에서 본 발명이 다양하게 개조 및 변화될 수 있다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명백한 것이다. On the other hand, while the present invention has been shown and described with respect to certain preferred embodiments, the invention is variously modified and modified without departing from the technical features or fields of the invention provided by the claims below It will be apparent to those skilled in the art that such changes can be made.
본 발명은 인산염 가용화 능력을 가지는 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주와, 염류집적토양의 복원에 효과적인 미생물제제를 제공할 수 있다. The present invention can provide an acetobacter calcoaceticus BYS-2 strain having a phosphate solubilizing ability, and a microbial agent effective for the restoration of salt accumulated soil.
도 1은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따라 트리칼슘포스페이트 아가 배지에 형성된 아시네토박터 칼코아세티쿠스(Acinetobacter calcoaceticus) BYS-2 균주를 설명하기 위한 사진이고,1 is a photograph illustrating an Acinetobacter calcoaceticus BYS-2 strain formed in tricalcium phosphate agar medium according to a preferred embodiment of the present invention.
도 2는 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주의 부분 DNA 서열을 설명하기 위한 염기서열도이고, Figure 2 is a nucleotide sequence diagram for explaining the partial DNA sequence of the Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain according to an embodiment of the present invention,
도 3은 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주의 16S rDNA 서열에 의한 분류학적 위치를 설명하기 위한 계통도이고, Figure 3 is a schematic diagram illustrating the taxonomic location by the 16S rDNA sequence of the Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain according to an embodiment of the present invention,
도 4는 본 발명의 바람직한 일 실시예에 따른 아시네토박터 칼코아세티쿠스 BYS-2 균주의 상추 생육 촉진 효과를 설명하기 위한 사진이다. Figure 4 is a photograph for explaining the effect of promoting lettuce growth of Acinetobacter Calcoaceticus BYS-2 strain according to an embodiment of the present invention.
Claims (7)
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103060241A (en) * | 2013-01-17 | 2013-04-24 | 山东省林业科学研究院 | Acinetobacter calcoaceticus for promoting rhizosphere growth of walnuts and application thereof |
| CN106591205A (en) * | 2017-02-21 | 2017-04-26 | 南京农业大学 | Acinetobacter bacteria NJAU-3 having functions of phosphate solubilizing and growth promoting, and applications thereof |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5256544A (en) | 1992-01-27 | 1993-10-26 | Eg&G Idaho, Inc. | Microbial solubilization of phosphate |
| US5912398A (en) * | 1995-06-15 | 1999-06-15 | Lockheed Idaho Technologies Company | Biomediated continuous release phosphate fertilizer |
| KR20080054047A (en) * | 2006-12-12 | 2008-06-17 | (주)친농바이오 | Phosphate solubilizing bacteria acinetobacter calcoaceticus cn7 of bioremediation for the recovery of salt injury soil |
-
2009
- 2009-01-07 KR KR1020090001318A patent/KR100908412B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5256544A (en) | 1992-01-27 | 1993-10-26 | Eg&G Idaho, Inc. | Microbial solubilization of phosphate |
| US5912398A (en) * | 1995-06-15 | 1999-06-15 | Lockheed Idaho Technologies Company | Biomediated continuous release phosphate fertilizer |
| KR20080054047A (en) * | 2006-12-12 | 2008-06-17 | (주)친농바이오 | Phosphate solubilizing bacteria acinetobacter calcoaceticus cn7 of bioremediation for the recovery of salt injury soil |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 논문1 : Biotechnol Lett |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103060241A (en) * | 2013-01-17 | 2013-04-24 | 山东省林业科学研究院 | Acinetobacter calcoaceticus for promoting rhizosphere growth of walnuts and application thereof |
| CN103060241B (en) * | 2013-01-17 | 2013-12-04 | 山东省林业科学研究院 | Acinetobacter calcoaceticus for promoting rhizosphere growth of walnuts and application thereof |
| CN106591205A (en) * | 2017-02-21 | 2017-04-26 | 南京农业大学 | Acinetobacter bacteria NJAU-3 having functions of phosphate solubilizing and growth promoting, and applications thereof |
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