KR100893725B1 - Microbial cultures containing the self aggregates and free living form of bacillus thuringiensis enb2 kctc 11394bp - Google Patents

Microbial cultures containing the self aggregates and free living form of bacillus thuringiensis enb2 kctc 11394bp

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KR100893725B1
KR100893725B1 KR1020080107717A KR20080107717A KR100893725B1 KR 100893725 B1 KR100893725 B1 KR 100893725B1 KR 1020080107717 A KR1020080107717 A KR 1020080107717A KR 20080107717 A KR20080107717 A KR 20080107717A KR 100893725 B1 KR100893725 B1 KR 100893725B1
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주식회사 이앤비
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Abstract

Provided is Bacillus thuringiensis EnB2(KCTC 11394BP) which can biodegrade with sewage and waste water and high-concentration organic waste water. Bacillus thuringiensis EnB2(KCTC 11394BP) strain has capability of improving formation of floc and precipitation of sludge. The Bacillus thuringiensis EnB2 strain has rDNA base sequence of SEQ ID NO:1. A microbial agent for treating sewage and waste water includes a culture fluid of the Bacillus thuringiensis EnB2. The microbial agent has an improved function of precipitation.

Description

바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP, 배양액 및 이를 포함하는 미생물 제제{Microbial cultures containing the self aggregates and free living form of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP}Microbial cultures containing the self aggregates and free living form of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP}

본 발명은 하폐수 처리에 유용한 신균주 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394BP, 배양액 및 이를 포함하는 하폐수처리에 효과적인 미생물 제제에 관한 것이다.The present invention relates to a new strain Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP, a culture medium and a microbial agent effective for treating sewage water, including the same.

현재 국내에서 운영되는 다양한 하폐수처리 시설에서는 원수 유입량과 부하농도의 급격한 변화로 인하여 폭기조 내 입체성과 압밀성이 우수한 정상형태의 플록을 유지하기 힘들다. At present, various sewage treatment facilities operating in Korea are difficult to maintain the normal type of flocs that have good stereoscopic and consolidation characteristics in the aeration tank due to the rapid change of raw water inflow and load concentration.

더욱이 정상적인 침강성을 유지할 수 없는 슬러지는 약한 부하변동에 쉽게 해체되어 방류수의 수질악화를 유발할 수 있다. 특히 슬러지의 침강성이 악화되었을 경우에는 침전조에서 고액분리가 어려워 SS(Suspended Solid)가 증가하게 되고 이로 인하여 방류수의 탁도가 증가하게 된다. Moreover, sludge that cannot maintain normal sedimentation can be easily dismantled by weak load fluctuations and can lead to poor water quality. In particular, when the sedimentation of sludge is deteriorated, it is difficult to separate solid-liquid in the sedimentation tank, thereby increasing the SS (Suspended Solid), thereby increasing the turbidity of the effluent.

또한 슬러지 월류에 의한 MLSS(Mixed Liquor Suspended Solid)의 감소로 정상적인 폐수처리시설 운영이 어렵게 된다. 이러한 경우 해당 처리시설의 정상적인 폐수처리 물량 중 일부만 처리가 가능하게 되고 극단적인 경우 공장의 가동 중단이라는 상황에 처해질 수도 있다. In addition, the reduction of mixed liquor suspended solids (MLSS) due to sludge overflow makes it difficult to operate a normal wastewater treatment plant. In this case, only a fraction of the normal wastewater treatment of the treatment plant can be treated, and in extreme cases, the plant may be shut down.

슬러지의 침강성이 악화되어 발생하는 하폐수처리시설의 팽화현상은 대부분 사상성미생물들에 의해 발생하지만 주그레아(Zooglea) 속 미생물들에 의해 발생할 수 있는 점액성 또는 비사상성벌킹은 그 원인을 파악하지 못한 채 처리시설을 어렵게 운영하고 있는 실정이다. 특히 비사상성팽화는 고농도 당류가 유입되는 처리시설에서 빈번하게 발생하고 있고 시군단위의 공공하수처리시설에도 다양하게 발생하고 있다. Swelling of sewage treatment facilities due to sludge settling deterioration is mostly caused by filamentous microorganisms, but mucus or non-cerebrolytic bulking, which can be caused by microorganisms in Zoglea, has not been identified. It is difficult to operate the treatment facility. In particular, non-cephaly swelling occurs frequently in treatment facilities where high concentrations of sugar are introduced, and variously occurs in municipal sewage treatment facilities.

이와 같이 악화된 슬러지 침강성을 회복하는 데는 수개월이 소요되고 있으며 마땅한 해결방안이 없는 것으로 알려져 있다. 다만 유기성 침강제를 사용하여 일시적으로 슬러지의 침강성을 회복할 수는 있지만 장기간의 침강제 사용은 오히려 슬러지의 생물학적 활성을 사라지게 하여 처리시설의 처리효율을 악화시키게 된다. It takes months to recover this deteriorated sludge settling and there is no known good solution. Organic sedimentation agents can be used to temporarily recover the sludge settling properties, but prolonged use of the sedimentation agents deteriorates the treatment efficiency of the treatment facility by eliminating the biological activity of the sludge.

다른 해결 방법으로는 흔히 타 처리시설의 슬러지를 시딩(seeding)하여 기존 침강성이 악화된 슬러지를 교체하는 방법이 이용되고 있지만, 이러한 방법은 시딩에 적합한 슬러지의 확보문제와 부적절한 시딩이 이루어진 경우 더 큰 문제를 발생시킬 가능성을 지니고 있다. Another solution is to seed the sludges of other treatment facilities and replace the sludges which have degraded the existing sedimentation. It has the potential to cause problems.

한편, 바실러스 슈린지엔시스는 그람양성균으로 포자를 형성할 때 BT 톡신(toxin)로 알려진 단백질성 살충제의 감마 엔도톡신(proteinaceous insecticidal δ-endotoxins)을 만들어 낸다. 이 BT 톡신은 현재 나방, 나비, 파리, 모기에 대한 미생물농약으로 개발되어 있으나 폐수처리에 이용하는 예는 없다.On the other hand, Bacillus Shuringiensis produces a proteinaceous insecticidal δ-endotoxins of proteinaceous insecticide known as BT toxin when spores are formed by gram-positive bacteria. The BT toxin is currently developed as a microbial pesticide for moths, butterflies, flies and mosquitoes, but there are no examples of wastewater treatment.

이에, 본 발명의 발명자들은 우리나라의 하폐수처리시설 중 플록의 침강성이 타 처리시설과 비교하여 장기간 지속되었던 한 생물학적 처리시설의 폭기조 내 플록에서 바실러스 슈린지엔시스 EnB2를 분리 및 동정하였으며, 특히 순수 분리한 신균주 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP가 단일 종으로서 용존산소와 pH의 조절에 따라 자체 플록형성이 촉진되는 것을 발견하였다. Therefore, the inventors of the present invention isolated and identified Bacillus shrinziensis EnB2 in flocs in the aeration tank of a biological treatment plant where floc sedimentation of the sewage treatment plant in Korea lasted longer than that of other treatment plants. The new strain Bacillus shrinziensis EnB2 KCTC 11394BP was found to promote its own floc formation as a single species under the control of dissolved oxygen and pH.

따라서, 본 발명은 슬러지 침강성 개선과 BOD, COD, 및 TN 등의 처리 효율이 높고, 플라스틱 가소제와 같은 일부 내분비계 장애물질(ECDs) 등 물에 대한 용해도가 낮은 유기성 물질을 포함하는 하폐수 및 고농도 유기성 폐수를 신속하게 생분해할 수 있는 신균주 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP를 제공하는데 그 목적이 있다.Accordingly, the present invention improves sludge sedimentation and treatment efficiency, such as BOD, COD, and TN, and sewage and high concentration organics containing organic substances having low solubility in water such as some endocrine barriers (ECDs) such as plastic plasticizers. The objective is to provide a new strain Bacillus shrinziensis EnB2 KCTC 11394BP that can rapidly biodegrade wastewater.

또한, 본 발명은 상기 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP 배양액 및 이를 포함하는 미생물 제제를 제공하는데 또 다른 목적이 있다.In addition, the present invention is another object to provide a Bacillus Shurinjiensis EnB2 KCTC 11394BP culture and a microbial preparation comprising the same.

상기한 과제를 해결하기 위한 일례로서 본 발명은, 플록 형성능 및 슬러지 침강성 개선능이 향상된 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394BP 균주를 특징으로 한다.As an example for solving the above problems, the present invention is characterized by the Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP strain with improved floc forming ability and sludge sedimentation improving ability.

상기한 과제를 해결하기 위한 다른 일례로서 본 발명은, 상기한 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394BP의 배양액을 포함한다.As another example for solving the above problems, the present invention includes the culture solution of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP.

상기한 과제를 해결하기 위한 또 다른 일례로서 본 발명은, 상기한 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394BP의 배양액을 포함하는 하폐수 처리용 미생물 제제를 포함한다.As another example for solving the above problems, the present invention includes a microbial agent for treating sewage water comprising a culture solution of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP.

이하 본 발명을 상세하게 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 신균주인 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP는 본 발명자들에 의해 최초로 분리 동정된 것으로서, 하폐수처리시설 중 슬러지의 침강성이 가장 우수한 현장의 슬러지에서 NA(Nutrient Agar), TSA(Tryptic Soy Agar), R2A 배지를 이용하여 단일균주를 분리하였으며, 분리한 단일 균주를 16S rDNA 서열 검색에 의한 분자 유전학적인 방법에 의해 분석하여 동정한 결과, 표준균주인 바실러스 슈린지엔시스 (Bacillus thuringiensis IAM 12077)와 16r DNA 서열이 99.9% 유사한 신균주임을 확인하였다[서열목록 1 및 도 3 참조]. Bacillus Shurinjiensis EnB2 KCTC 11394BP, a new strain of the present invention, was identified and separated for the first time by the present inventors, and NA (Nutrient Agar) and TSA (Tryptic Soy Agar) in the field sludge having the highest sedimentation property of the sludge among sewage wastewater treatment facilities. ), Single strain was isolated using R2A medium, and the isolated single strain was analyzed by molecular genetic method by 16S rDNA sequence retrieval. As a result, Bacillus thuringiensis IAM 12077 and the standard strain were identified. The 16r DNA sequence was confirmed to be 99.9% similar new strains (see SEQ ID NO: 1 and FIG. 3).

본 발명자들은 상기 순수 분리 동정된 신균주를 바실러스 슈린지엔시스 (Bacillus thuringiensis) EnB2 이라 명명하였으며, 2008년 9월 29일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터[Korean Collection of Type Culture(KCTC)]에 기탁하여 수탁번호 KCTC 11394BP를 부여 받았다[도 5 참조]. 이하, EnB2”는 상기한 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP를 의미한다.The present inventors named the purely isolated new strain Bacillus thuringiensis EnB2, deposited on September 29, 2008 in the Korea Collection of Type Culture (KCTC) Biotechnology Center Was given accession number KCTC 11394BP (see Fig. 5). Hereinafter, EnB2 ”refers to the Bacillus shringiensis EnB2 KCTC 11394BP.

상기 EnB2는 EnB2 배지(포도당 60g/L, 이스트 추출액 0.5g/L, 황산마그네슘 0.2g/L, 제 1인산칼륨 0.9g/L, 소금 0.1g/L, 숙신산나트륨 3g/L, 아세트산나트륨 3 g/L)로 용존산소 0.2ppm, pH 6.9를 유지하여 배양한다. 배양액 내 EnB2의 플록 형성을 촉진하기 위해서는 용존산소를 4ppm으로 증가시킴과 동시에 pH를 9.5로 유지하도록 한다.The EnB2 medium is EnB2 medium (glucose 60g / L, yeast extract 0.5g / L, magnesium sulfate 0.2g / L, potassium monophosphate 0.9g / L, salt 0.1g / L, sodium succinate 3g / L, sodium acetate 3g Incubate with 0.2 ppm dissolved oxygen and pH 6.9. In order to promote floc formation of EnB2 in the culture, the dissolved oxygen is increased to 4 ppm and the pH is maintained at 9.5.

저농도의 유입원수가 유입되는 하폐수처리시설의 경우 통상 MLSS (Mixed Liquor Suspended Solid) 의 유지가 어려운데, 그 이유는 슬러지 생성원이 되는 자유유영세균의 개체수가 증가하기 어려워 기존 플록들이 자산화되어 슬러지해체가 진행되기 때문이다. In case of sewage treatment facilities with low concentration of influent water, it is difficult to maintain MLSS (Mixed Liquor Suspended Solid), because it is difficult to increase the number of free swimming bacteria that are sludge generation sources, and the existing flocs are capitalized and sludge dismantling Because it is going.

본 발명의 EnB2는 유기물 부하량이 낮아 슬러지의 자산화와 해체가 빈번한 처리시설에 슬러지 유지를 위하여 투입되는 목적 미생물 제제로 사용할 수 있으며, 사상성벌킹이 발생한 다수의 하폐수처리시설에 투입할 경우 사상체에 EnB2가 부착되어 사상성미생물들이 플록 내부로 융합되도록 함으로써 압밀성 및 입체성이 우수한 플록화를 촉진하게 된다. EnB2 of the present invention can be used as a target microbial agent that is put in order to maintain the sludge in a treatment facility that is frequently sludge assetization and dismantling due to the organic load is low, EnB2 is added to the filamentous body when it is put into a number of wastewater treatment plants having filamentous bulking Attachment causes filamentous microorganisms to fuse into the floc, thereby promoting flocculation with good compaction and conformation.

상기 EnB2의 배양과정에서 형성된 자체플록은 독립적으로 안정적인 플록을 형성하거나 기존 사상성미생물과 융합하여 침강성이 우수한 플록을 형성한다. The self-floc formed during the culturing of EnB2 independently forms a stable floc or fuses with existing filamentous microorganisms to form floc with excellent sedimentation.

상기 EnB2의 배양액에는 일반 미생물 제제와 달리, 자유유영하는 형태의 EnB2와 함께 배양과정에서 pH와 용존산소의 조절을 통하여 형성된 EnB2의 플록을 포함하고 있다. 자유유영하는 형태의 EnB2는 폭기조 내로 투여되었을 때 신속하게 잔류하는 유기물을 제거하여 폭기조 내에 이미 존재하던 자유유영 미생물들의 플록 형성을 촉진하고, EnB2 배양액 내 플록은 압밀성과 입체성이 약한 슬러지에 부착되거나 독립적으로 폭기조 내에 침강성이 우수한 플록을 형성하게 된다. Unlike general microbial preparations, the culture medium of EnB2 includes a floc of EnB2 formed by adjusting pH and dissolved oxygen during incubation with EnB2 in a free-flowing form. Free-floating EnB2 promotes floc formation of free-living microorganisms that are already present in the aeration tank by quickly removing the organics remaining when administered into the aeration tank, and the floc in the EnB2 culture adheres to sludge that is weak in compactness and conformation Independently, flocs having good settling properties are formed in the aeration tank.

따라서, EnB2의 배양액에 포함된 두 가지 형태의 세균 배양물은 폭기조 내에 투입되어 플록의 입체화와 압밀화를 동시에 촉진하고 미분해 유기물들을 신속하게 제거하여 하폐수 처리시설의 정상화에 소요되는 기간을 크게 단축시킬 수 있으므로, 침강성 악화 현상이 발생된 하폐수 처리시설에 EnB2의 배양액을 투여시 침강성 악화의 문제를 간단하게 해결할 수 있다.Therefore, the two types of bacterial cultures contained in the EnB2 culture solution are introduced into the aeration tank to promote the solidification and consolidation of flocs at the same time and to quickly remove the undissolved organics, thereby greatly shortening the time required for normalization of the wastewater treatment facility. Therefore, the problem of sedimentation deterioration can be easily solved when the EnB2 culture solution is administered to the sewage treatment facility where sedimentation deterioration has occurred.

본 발명의 EnB2를 고농도로 배양하는 과정에서 용존산소와 pH 조절을 통하여 형성된 EnB2의 플록은 탁월한 MLSS (Mixed Liquor Suspended Solid) 생성 촉진능을 보이며, 슬러지의 입체성과 압밀성을 증가시킨다. 상기 EnB2의 배양과정에서 형성된 플록(self aggregates)은 기존의 자유유영 세균들로 구성된 일반미생물 제제와 달리, 이미 형성된 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 플록과 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 자유유영 세균들이 폭기조에 첨가되었을 때 기존 슬러지와 빠르게 결합하여 쉽게 MLSS의 유지가 가능하고, 슬러지의 침강성을 개선시킬 수 있다는 점이 타 미생물 제제와 구별된다. The floc of EnB2 formed by dissolving oxygen and pH in the process of culturing EnB2 at a high concentration shows excellent MLSS (Mixed Liquor Suspended Solid) production promoting ability, and increases the stericity and consolidation of the sludge. In contrast to conventional microbial preparations consisting of free-flowing bacteria, the flocs formed during the culturing of EnB2 have already been added to the aeration tank of floc and Bacillus-shringiensis EnB2 free-flowing bacteria. When it is combined with existing sludge quickly, MLSS can be easily maintained, and the sludge settling property can be improved.

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또한, 본 발명의 EnB2는 다양한 부유상 여재에 생물막 형성을 촉진하여 BOD, COD, TN의 제거효율을 크게 증가시키고 음료 환입폐수와 같은 고농도 유기성 폐수의 처리에도 큰 효과를 나타낸다. In addition, EnB2 of the present invention promotes biofilm formation in various suspended media media, greatly increasing the removal efficiency of BOD, COD, TN, and also has a great effect on the treatment of high concentration organic wastewater, such as beverage reclaimed wastewater.

상기한 바와 같이, 본 발명의 발명자에 의하여 최초로 공개되는 신균주인 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP는 용존산소와 pH조절로 배양액 내 자체플록의 형성을 촉진하거나 억제할 수 있으며, 이 플록들이 하폐수처리시설에 투입되었을 경우 자유유영 바실러스 슈린지엔시스 EnB2로만 구성된 배양액보다 슬러지의 침강성과 MLSS 생성을 더욱 빠르게 촉진하는 특성을 나타낸다. As described above, Bacillus shrinziensis EnB2 KCTC 11394BP, a new strain first disclosed by the inventor of the present invention, may promote or inhibit the formation of its own floc in a culture medium by adjusting dissolved oxygen and pH, and these flocs are treated in sewage water. When introduced into the facility, it exhibits properties that promote sludge settling and MLSS production faster than cultures consisting solely of free-flowing Bacillus Schrinziensis EnB2.

이러한 본 발명의 신균주 EnB2 에 의하면 고농도 유기물의 유입으로 슬러지가 해체된 처리시설, 저농도 유기물의 장기간 유입으로 인한 슬러지의 자산화가 발생한 처리시설의 생물학적 플록을 빠르게 증진시킬 수 있으며 저농도와 과부하로 인한 침강성의 악화를 빠르게 개선할 수 있다. 뿐만 아니라 처리시설 내 슬러지 교체도 EnB2의 투입으로 쉽게 진행할 수 있으므로, 폭기조에 잔류하는 유기물, 질소를 신속하게 제거하여 정상적인 처리시설 운영에 커다란 도움을 줄 수 있다. According to the new bacterium EnB2 of the present invention, the biological floc of the treatment facility in which sludge is dismantled due to the inflow of high concentration organic matter and the sludge assetization due to the long-term inflow of low concentration organic matter can be quickly promoted, and the sedimentability due to low concentration and overload Can quickly improve the deterioration. In addition, sludge replacement in the treatment plant can be easily carried out with the introduction of EnB2, which can greatly help the normal treatment plant operation by quickly removing organic matter and nitrogen remaining in the aeration tank.

또한, 본 발명의 신균주인 EnB2의 배양액에 포함된 플록 (self aggregates)과 자유유영 형태의 세균들은 하폐수 처리시설의 부하변동, 독성물질 유입, 슬러지해체, 사상성팽화 (filamentous bulking) 또는 주그레아(Zooglea spp.) 등에 의한 비사상성팽화 (nonfilamentous bulking)와 같은 문제점을 손쉽게 해결할 수 있는 효과를 기대할 수 있다. In addition, the flocks (self aggregates) and free-flowing bacteria contained in the culture of EnB2, a new strain of the present invention, may be subjected to load fluctuations, inflow of toxic substances, sludge disintegration, filamentous bulking, or jugrea ( Zooglea spp.), Such as nonfilamentous bulking can be expected to easily solve the problem.

또한, 본 발명의 신균주 EnB2는 다양한 부유상 여재에 생물막 형성을 촉진하여 하폐수처리시설의 생물학적 산소 요구량(Biological Oxygen Demand, BOD), 화학적 산소 요구량(Chemical Oxygen Demand, COD) 및 총질소(TN)의 처리효율을 크게 증가시키고 음료 환입폐수와 같은 고농도 유기성 폐수의 처리에도 큰 효과를 나타낸다. In addition, the new strain EnB2 of the present invention promotes biofilm formation in a variety of suspended bed media such as the biological oxygen demand (Biological Oxygen Demand, BOD), chemical oxygen demand (COD) and total nitrogen (TN) of the wastewater treatment plant. Significantly increase the treatment efficiency and have a great effect on the treatment of high concentration organic wastewater such as beverage reclaimed wastewater.

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이하, 본 발명을 실시예에 의거하여 구체적으로 설명하겠는바, 다음 실시예에 의하여 본 발명이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples, but the present invention is not limited by the following Examples.

실시예 1. EnB2의 분리, 동정 및 생육 특성Example 1 Isolation, Identification and Growth Characteristics of EnB2

(1) 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 분리(1) Isolation of Bacillus Shuringiensis EnB2

본 발명의 균주는 강원도 춘천시에 위치한 하수처리시설의 폭기조 내 슬러지 를 분리용 시료로 사용하였고 상기 하수처리시설은 타 처리시설과 달리 폭기조의 플록형태가 구형으로 압밀성이 우수한 플록상태가 수년간 지속적으로 유지되는 처리시설이었다. The strain of the present invention used sludge in the aeration tank of the sewage treatment plant located in Chuncheon, Gangwon-do, as a sample for separation, and the sewage treatment plant has a spherical floc shape that is excellent in consolidation for many years, unlike other treatment facilities. It was a maintained treatment facility.

채수한 시료를 원심분리 (2,000g)하여 슬러지를 회수하고 0.85% 생리적 식염수(saline) 용액을 첨가하여 호모게나이저로 1분간 균질화한 후 수직교반기에서 350rpm으로 혼합하였다. 그 다음 연속 희석하여 영양 배지(nutrient agar), TSA, R2A에 배지에 희석도말하고 세 배지에서 콜로니(colony) 수가 가장 많은 집락들을 회수하여 동일 배지에 계대배양하였다. 1차 선별된 균주를 동일 액체배지에 접종하고 150rpm, 25℃에서 5일간 배양하여 생장한 단일 균들이 플록(self aggregates)을 형성하는 균주를 2차로 선별하였다. 2차로 선별된 시료들 중 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 플록이 가장 이상적이었다. 상기 바실러스 슈린지엔시스 EnB2를 영양 배지(nutrient agar)에 배양하였을 때 나타나는 집락은 전형적인 바실러스속 미생물들의 집락과 비슷하였다. Sludge was collected by centrifugation (2,000 g), and homogenized with a homogenizer for 1 minute by adding 0.85% physiological saline solution, followed by mixing at 350 rpm in a vertical stirrer. Subsequently, serial dilutions were diluted in nutrient agar, TSA, and R2A to spread the medium, and colonies with the highest colony count were recovered from the three medium and subcultured on the same medium. The first selected strains were inoculated in the same liquid medium and incubated at 150 rpm for 25 days at 25 ° C. for the first time, strains which grew to form flocks (self aggregates) were secondarily selected. Among the second screened samples, the floc of Bacillus shringiensis EnB2 was the most ideal. The colonies that appeared when the Bacillus shringiensis EnB2 was incubated in nutrient agar were similar to the colonies of typical Bacillus microorganisms.

(2) 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 동정(2) Identification of Bacillus Shuringiensis EnB2

바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 분류학적 위치를 확인하고자 먼저 형태학적 특징 조사하기 위하여 그람 염색(gram staining)법을 수행하여 바실러스 슈린지엔스 EnB2이 그람양성균임을 확인하였다. 바실러스 슈린지엔시스 EnB2는 약 1.3㎛ 간균의 형태를 띄고 있었으며 [도 1의 A], 그람 양성 균주로 일반적인 바실러스속 세균들이 갖고 있는 특성과 유사하였으며 평판배지에서 무광택 흰색 콜로니를 형성하 였다[도 2의 A]. 플라스크 액체배양액시 플록을 형성하고 있음을 확인할 수 있으며[도 2의 B], 발효기를 이용하여 대량 배양시 다량의 플록이 형성되었음을 확인할 수 있다[도 2의 C], 도 2의 D에는 형성된 플록의 현미경 사진을 나타내었다.In order to confirm the taxonomic location of Bacillus shrinziensis EnB2, it was first confirmed that Bacillus shrinziens EnB2 was Gram-positive bacteria by performing gram staining to investigate morphological characteristics. Bacillus shrinziensis EnB2 had a form of about 1.3㎛ bacilli [Fig. 1A], a Gram-positive strain similar to the characteristics of common Bacillus bacteria, and formed a matt white colony on a plate medium [Fig. A]. It can be seen that the floc is formed in the flask liquid culture liquid [FIG. 2B], and it can be confirmed that a large amount of floc is formed during the mass culture using the fermenter [FIG. 2C] and the floc formed in FIG. 2D. A micrograph of the is shown.

실시예 2. 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 생화학적 특징 및 탄소원Example 2 Biochemical Characteristics and Carbon Sources of Bacillus Shuringiensis EnB2

다음 표 1에는 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 생화학적 특징을 정리하였으며, 표 2에는 이용가능한 탄소원을 정리하여 나타내었다.Table 1 summarizes the biochemical characteristics of Bacillus shringiensis EnB2, and Table 2 summarizes the available carbon sources.

[표 1]TABLE 1

바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 생화학적 특징Biochemical Characterization of Bacillus Shuringiensis EnB2 옥시다제Oxidase 양성positivity 아르기닌 데히드롤라제Arginine dehydrolase 양성positivity 카탈라제Catalase 양성positivity 베타갈락토시다제Beta galactosidase 양성positivity 질산 환원능Nitrate reducing ability 양성positivity 에스쿨린 가수분해능Esculin hydrolysis 양성positivity 인돌생성Indole generation 음성voice 우레아제Urease 음성voice 포도당에서 산생성능Acid production from glucose 양성positivity

[표 2]TABLE 2

바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 탄소원 이용Use of carbon source of Bacillus Schringensis EnB2 포도당glucose 양성positivity 피루브산Pyruvic acid 양성positivity 아라비노스Arabinos 양성positivity 초산페닐Phenyl acetate 음성voice 만니톨Mannitol 양성positivity 벤조산Benzoic acid 양성positivity N-아세틸글루코사민N-acetylglucosamine 양성positivity 글리세롤Glycerol 양성positivity 말토스Maltose 양성positivity 자일로스Xylose 양성positivity 글루콘산Gluconic Acid 양성positivity 프록토스Fructose 양성positivity 카르린산Carnic acid 양성positivity 슈크로스Sucrose 양성positivity 아디핀산Adipic acid 음성voice 덱스트린dextrin 양성positivity 말린산Malic acid 양성positivity 젤라틴gelatin 음성voice 구연산Citric acid 양성positivity 전분Starch 양성positivity

실시예 3. 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 염기서열 분석Example 3 Sequencing of Bacillus shringiensis EnB2

바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 염기서열 분석은 16s rDNA 염기서열 시퀀스 분석법으로 분석하였으며, 분석기관은 (주)마크로젠이다. 샘플의 상태는 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 집락이 있는 평판배지 상태로 의뢰하였으며, 의뢰 내역으로는 Extraction-gDNA, PCR Amplication에 의한 PCR product를 10번의 시퀀싱(sequencing) 반응을 통해 분석하였다.The sequencing of Bacillus shrinziensis EnB2 was analyzed by 16s rDNA sequence sequencing, and the analytical institution is Macrogen. The state of the sample was commissioned in a plate medium with Bacillus Shurinjiensis EnB2 colony, and as the request details, PCR products by Extraction-gDNA and PCR Amplication were analyzed through 10 sequencing reactions.

분석에 사용한 프라이머는 유니버셜 프라이머(universial primer)로 구분되는 시퀀스는 다음과 같다.The primers used in the analysis are divided into universal primers as follows.

27F : 5'-AgAgTTTgATCMTGGCTCAg-3'27F: 5'-AgAgTTTgATCMTGGCTCAg-3 '

1492R: 5'-TACggYTACCTTgTTACgACTT-3'1492R: 5'-TACggYTACCTTgTTACgACTT-3 '

바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 16s rDNA 염기서열 분석 결과를 첨부된 서열번호 1에 기재하였으며, 계통학적 결과는 쥬크-캔터(Jukes-Cantor) 모델을 적용한 네이버-조이닝(Neighbour-joining) 방법에 따라 계통수(phylogenetic tree) 결과를 도 3에 나타내었다. The 16s rDNA sequencing results of Bacillus shrinziensis EnB2 are described in the attached SEQ ID NO. 1, and the phylogenetic results are derived from the tree tree according to the neighbor-joining method to which the Juke-Cantor model is applied. (phylogenetic tree) results are shown in FIG. 3.

바실러스 슈린지엔시스 EnB2는 염기서열[서열목록 1]은 이지택손 서버(EzTaxon server, Chun, J., Lee, J.-H., Jung, Y., Kim, M., Kim, S., Kim, B. K. & Lim, Y. W. (2007). EzTaxon: a web-based tool for the identification of prokaryotes based on 16S ribosomal RNA gene sequences. Int J Syst Evol Microbiol 57, 2259-2261.)에서 상동성을 조사한 결과 잠정적으로 바실러스 슈린지엔시스 분류되었으며[도 4], 이에 본 발명의 발명자들은 분리 균주를 “바실러스 슈린지엔시스 (Bacillus thuringiensis)EnB2”로 명명하고, 2008년 9월 29일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터(KCTC)에 기탁하여 수탁번호 KCTC 11394BP를 부여 받았다. 수탁증은 도 5 에 첨부하였다.Bacillus Shurinjiensis EnB2 is the base sequence [SEQ ID NO: 1] is the easy-taxison server (EzTaxon server, Chun, J., Lee, J.-H., Jung, Y., Kim, M., Kim, S., Kim , BK & Lim, YW (2007) .EzTaxon: a web-based tool for the identification of prokaryotes based on 16S ribosomal RNA gene sequences.Int J Syst Evol Microbiol 57, 2259-2261.) Bacillus shrinjiensis was classified [Fig. 4], the inventors of the present invention named the isolate "Bacillus thuringiensis (EnB2)", September 29, 2008 Biotechnology Center of Korea Biotechnology Research Institute ( KCTC) was granted accession number KCTC 11394BP. A trust certificate was attached to FIG. 5.

실시예 4. 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 실험실 수준에서의 효능 테스트Example 4 Efficacy Test at the Laboratory Level of Bacillus Shuringiensis EnB2

(1) 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 배양액의 제조(1) Preparation of culture medium of Bacillus shringiensis EnB2

EnB2 배지(포도당 60 g/L, 이스트 추출액 0.5 g/L , 황산마그네슘 0.2 g/L, 제 1인산칼륨 0.9 g/L, 소금 0.1/L, 숙신산나트륨 3 g/L, 아세트산나트륨 3 g/L)를 이용하고 pH와 용존산소량(Dissolved Oxygen, DO)을 변화시키면서 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 플록형성 정도를 관찰하였다. 플록형성은 100 ml 매스실린더에서 배양액을 5분간 정치한 후 침강된 플록의 높이를 흡광도(Optical Density, OD)로 측정하였으며, 그 결과는 다음 도 6에 나타내었다. EnB2 medium (glucose 60 g / L, yeast extract 0.5 g / L, magnesium sulfate 0.2 g / L, potassium monophosphate 0.9 g / L, salt 0.1 / L, sodium succinate 3 g / L, sodium acetate 3 g / L Flock formation of Bacillus shrinziensis EnB2 was observed while changing pH and dissolved oxygen (DO). The floc formation was measured by absorbance (Optical Density, OD) the height of the settled floc after standing the culture solution for 5 minutes in a 100 ml mass cylinder, the results are shown in FIG.

도 6에 의하면, pH 9.5와 용존산소 4 ppm의 조건에서 EnB2 배양액 내 플록형성이 가장 촉진되는 것을 확인할 수 있다. According to FIG. 6, it can be seen that floculation in EnB2 culture is most promoted under the conditions of pH 9.5 and 4 ppm of dissolved oxygen.

(2) 바실러스 슈린지엔시스 EnB2를 이용한 비사상성팽화 슬러지의 침강성 개선을 위한 jar test(2) jar test for improvement of sedimentation properties of non-cephaly expanded sludge using Bacillus Schrinziensis EnB2

비사상성팽화 슬러지는 경기도 안성시에 위치한 한 음료폐수처리장에서 확보하였으면 jar test 장치는 상기 음료폐수처리장 폭기조의 옆에 설치하여 실험을 실시하였다. jar test 장치는 스테인레스 재질로 제작된 46리터 유효용량의 직사각형의 소형 폭기조 6기로 이루어졌으며 각 조마다 분당 공기공급력이 40리터 정도되는 브로와가 각각 1개씩 장착되었다. 실험당시 음료폐수처리장의 슬러지는 비사상성 팽화현상을 나타내고 있었으며 MLSS는 약 3,500 mg/l였으며 슬러지 침강성은 거의 없는 상태였다. 소형 실험용 폭기조로 폐수처리장 폭기조수를 유입시켰으며 처리장과 동일한 운영방식으로 운영하였다. 용존산소를 2 ~ 3ppm으로 유지하면서, 1일 슬러지 1리터씩 폐기하였고, 원수 35 ml/min/day로 조절하였으며, EnB2의 자유유형형태의 배양액과 플록형태의 배양액을 실험용 폭기조에 각각 투여하고 대조군으로 Bacillus subtilis를 사용하였다. 각각의 미생물 배양액 들의 첨가량을 동일하게 조절하기 위하여 배양액 500 ml씩을 원심분리하여 상등액을 제거하고 침전된 세균들의 중량(wet weight)을 측정하여 실험에 사용할 세균들의 균체들을 준비하였다. 이와 같은 방법으로 준비된 동일양의 세균들을 들을 일일 10 ml/day 5회 투여(217 ppm)하였고, 반송은 하지 않았다. If the non-flattening sludge was secured at a beverage wastewater treatment plant located in Anseong, Gyeonggi-do, the jar test device was installed next to the beverage wastewater treatment plant aeration tank and tested. The jar test device consisted of six rectangular small aeration tanks made of stainless steel with an effective capacity of 46 liters. Each tank was equipped with one brower with an air supply of 40 liters per minute. At the time of the experiment, the sludge of the beverage wastewater treatment plant exhibited non-flattening phenomena, and the MLSS was about 3,500 mg / l and the sludge sedimentation was little. A small experimental aeration tank was introduced into the wastewater treatment plant and operated in the same manner as the treatment plant. Dissolved oxygen was maintained at 2-3 ppm, 1 liter of sludge was discarded each day, raw water was adjusted to 35 ml / min / day, and free-type culture medium and floc-type culture medium were administered to the experimental aeration tank, respectively. Bacillus subtilis was used. In order to equally control the amount of each microbial culture, the supernatant was removed by centrifugation of 500 ml of the culture, and the weight of the precipitated bacteria was measured to prepare the cells of the bacteria to be used in the experiment. The same amount of bacteria prepared in this way were administered 10 ml / day 5 times a day (217 ppm), and was not returned.

상기 jar test 결과를 도 7에 나타내었으며, 도 7에 의하면 EnB2 배양액 중 자유유영형태도 슬러지 침강성에 대한 개선 효과가 우수하지만 플록형태의 배양액이 슬러지 침강성에 대하여 더욱 큰 개선효과가 있다는 결과를 확인할 수 있다.The jar test results are shown in FIG. 7, and according to FIG. 7, the free-streaming type in the EnB2 culture was also excellent in improving the sludge settling property, but the floc type culture medium had a greater improvement effect on the sludge settling property. have.

상기 jar test 실험과정에서 바실러스 슈린지엔시스 ENB2의 배양액의 투여에 의한 비사상성팽화 슬러지의 침강성 개선의 정도를 나타내는 슬러지의 변화를 현미경으로 관찰하였고, 그 결과를 도 8에 나타내었다.In the jar test experiment, the change of sludge indicating the degree of sedimentation improvement of non-flattening sludge by administration of the culture solution of Bacillus shrinziensis ENB2 was observed under a microscope, and the results are shown in FIG. 8.

실시예 5. EnB2의 고농도 유기성 폐수의 COD 제거Example 5 COD Removal of EnB2 Concentrated Organic Wastewater

음료 환입폐수에 EnB2 배양액 투여시 COD 제거율 및 SV30. EnB2 플록배양액를 1,000ppm씩 모든 시료에 투여하여 24시간 포기한 후 실험을 시작하였다. 환입폐 수에 EnB2 플록배양액을 1,000ppm/일 투여하면서 3일 동안 포기하고, 마지막 날 SV30 측정 후 24시간 방치한 다음 상등액을 취하여 COD를 분석하였으며, 그 결과는 다음 표 3에 나타내었다. COD removal rate and SV 30 . The experiment was started after abandoning the EnB2 floc culture solution in 1000 ppm each sample for 24 hours. Abandoned wastewater was administered for 3 days with 1,000 ppm / day of EnB2 floc culture, left for 24 hours after SV 30 measurement on the last day, and the supernatant was taken to analyze the COD. The results are shown in Table 3 below.

COD를 분석한 동일 시료를 15,000rpm에서 원심분리한 후 다시 COD를 측정하여 세균에 의한 본 실험에서 과폭은 소형공기공급장치의 최대세기를 뜻하고 내부순환은 소형수중펌프를 이용한 교반을 의미한다.After centrifuging the same sample analyzed at COD at 15,000rpm, COD was measured again. In this experiment by bacteria, overwidth means maximum strength of small air supply device and internal circulation means stirring using small underwater pump.

[표 3]TABLE 3

EnB2 투여량 (ppm/일)EnB2 Dose (ppm / day) COD(ppm)COD (ppm) COD 제거율 (%)COD removal rate (%) SV30(%)SV 30 (%) 처리전Before treatment 처리후After treatment 원심분리Centrifugation 24hr 경과24hr elapsed 48hr 경과48hr elapsed 72hr 경과72hr elapsed 시료 1Sample 1 1,0001,000 50,40050,400 9,5001) 9,500 1) 8,1008,100 8181 350350 380380 4305) 430 5) 시료 2Sample 2 00 50,40050,400 15,7002) 15,700 2) 15,10015,100 6969 250250 300300 300300 시료 3Sample 3 1,0001,000 50,40050,400 17,0003) 17,000 3) 16,40016,400 6666 200200 220220 260260 시료 4Sample 4 00 50,40050,400 21,0004) 21,000 4) 20,60020,600 5858 180180 200200 200200 시료 1: 과폭 EnB2 투여, 시료 2 : 과폭 EnB2 미투여, 시료 3 : 내부순환 EnB2 투여, 시료 4 : 내부순환 EnB2 미투여Sample 1: administration of excessive EnB2, sample 2: administration of excessive EnB2, sample 3: administration of internal circulation EnB2, sample 4: administration of internal circulation EnB2

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 72시간 경과한 시료에 의하면 EnB2 플록배양액을 음료 환입폐수에 투여하였을 경우 처리효율이 12% 향상되었고, 내부순환에서도 EnB2 플록배양액을 투여한 쪽이 처리효율이 더 높게 나타남을 확인할 수 있다.As shown in Table 3, according to the sample which passed 72 hours, the treatment efficiency was improved by 12% when the EnB2 floc culture solution was administered to the beverage returning wastewater. You can see that it appears.

실시예 6. 음료 폐수 처리시설에서의 30일간 EnB2 플록배양액을 투여하여 운영Example 6 Administration of EnB2 Flock Culture Solution for 30 Days at a Beverage Wastewater Treatment Facility

[표 4]TABLE 4

구분division 타사 미생물 활성제 투여Third Party Microbial Activation EnB2 플록 배양액 투여EnB2 floc culture 폐수처리량 (㎥)Wastewater Treatment Volume (㎥) 원수COD (mg/L)Raw water COD (mg / L) 처리수COD (mg/L)Treated water COD (mg / L) SV30 (%)SV 30 (%) 폐수처리량 (㎥)Wastewater Treatment Volume (㎥) 원수COD (mg/L)Raw water COD (mg / L) 처리수COD (mg/L)Treated water COD (mg / L) SV30 (%)SV 30 (%) 1차Primary 542542 770770 114114 6565 790790 974974 9292 5050 2차Secondary 558558 920920 123123 6565 900900 10511051 8282 4545 3차3rd 10441044 10001000 105105 7070 10201020 939939 7272 4545 4차4th 11611161 16701670 152152 7575 10201020 953953 8282 4545 5차5th 11901190 15021502 138138 8080 12351235 836836 8484 5050 6차6th 12651265 10931093 109109 8080 14551455 10841084 8787 5555 7차7th 12291229 10401040 8888 7070 10901090 953953 9494 5555 평균Average 1006.31006.3 1030.41030.4 111.9111.9 66.366.3 1028.71028.7 1025.81025.8 84.784.7 49.349.3

상기 표 4 에 나타낸 바와 같이, 타사 미생물활성제와 EnB2 플록배양액을 각각 30일간 투여하여 비교한 운영 효율. EnB2 플록배양액을 투여하였을 경우 타사 제품보다 폐수처리량과 원수 COD제거효율이 각각 2.23%, 24.31% 증가하였음을 확인할 수 있다.As shown in Table 4, compared with the administration of the third-party microbial activator and EnB2 floc culture solution for 30 days, respectively. In the case of administration of EnB2 floc culture, wastewater treatment and raw water COD removal efficiency increased 2.23% and 24.31%, respectively.

실시예 7. 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 배양액의 생물막 형성 촉진에 의한 LCD 패널 생산공장의 세척수 처리효율 증대Example 7 Enhancement of Washing Water Treatment Efficiency of LCD Panel Production Plant by Promoting Biofilm Formation of Bacillus Schrinziensis EnB2 Culture

[표 5]TABLE 5

EnB2 배양액 투여전Before administering EnB2 culture EnB2 배양액 투여후After administration of EnB2 culture BODBOD CODCOD TOCTOC TNTN BODBOD CODCOD TOCTOC TNTN 원수enemy 61.561.5 6262 35.435.4 17.2217.22 64.564.5 5757 20.620.6 14.8314.83 처리수Treated water 2424 3434 1212 12.612.6 1.81.8 6.86.8 3.63.6 5.2885.288

상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 배양액을 투입한 경우, LCD 패널 세척수의 BOD, COD, TOC(Total Organic Cabon) 및 TN 제거 효율이 향상됨을 확인할 수 있으며, 이는 스펀지 형태의 유동상 여재로 운영되는 LCD 패널 생산공장의 유동상 여재에 투여된 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 배양액이 여재 내부에 생물막을 형성하여 세척수의 BOD, COD, 및 TN의 제거율을 크게 증가시키는 것으로 보인다. EnB2 배양액 투여 후 유동상 여재 내부에 생물막이 다량 생성된 것을 확인 할 수 있다. As shown in Table 5, when the Bacillus Shurinjiensis EnB2 culture solution is added, it can be seen that the BOD, COD, TOC (Total Organic Cabon) and TN removal efficiency of the LCD panel wash water is improved, which is a sponge-type fluidized bed The Bacillus Shuringiensis EnB2 culture solution administered to the fluidized bed media of the LCD panel production plant operated by the media appears to increase the removal rate of BOD, COD, and TN in the wash water by forming a biofilm inside the media. After administration of EnB2 culture, it can be seen that a large amount of biofilm is formed inside the fluidized bed media.

한편, EnB2 배양액 투여 전(A)과 후(B)의 플록의 주사전자 현미경 사진은 도 8에 나타내었다.On the other hand, scanning electron micrographs of the flocs before (A) and after (B) administration of EnB2 culture are shown in FIG. 8.

도 1은 바실러스 슈린지앤시스 EnB2 (군청색)의 그람염색 사진, 적색 간균은 대조군인 대장균(A), 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 주사전자현미경 사진(B)을 나타낸다.Figure 1 is a Gram-stained photograph of Bacillus Shurinziensis EnB2 (navy blue), red bacillus shows a control E. coli (A), a scanning electron micrograph (B) of Bacillus Shurinjiensis EnB2.

도 2는 바실러스 슈린지엔시 EnB2의 무광택 집락 (A), 플라스크 액체배양액 시 플록형성 (B), 발효기를 이용한 대량배양에서 플록형성 (C), 플록의 현미경 사진 (D)을 나타낸다.FIG. 2 shows a matt colony of Bacillus shringiensi EnB2, floculation in a flask liquid culture (B), floculation (C) in a bulk culture with a fermenter, and micrograph (D) of the floc.

도 3은 바실러스(Bacillus) 속에 속하는 표준 균주들과 한국에서 분리된 바실러스 슈린지엔시스 (Bacillus thuringiensis) EnB2간의 계통발생학적 관계를 나타내는 계통수[16S rDNA 서열 (약 1,300 bp)을 이용하여 네이버-조이닝방법에 의해 작성. 숫자는 계통수 지지도 (50% 이상만 표기)]이다. 3 is Bacillus A phylogenetic tree showing a phylogenetic relationship between standard strains belonging to the genus and Bacillus thuringiensis EnB2 isolated from Korea was prepared by Naver-Joining method using a 16S rDNA sequence (about 1,300 bp). Numbers are tree tree support (more than 50%)].

도 4는 이지택손 서버(EzTaxon server)를 이용한 바실러스 슈린지엔시스 EnB2의 16s rDNA 서열의 상동성 분석 결과이다.4 is a result of homology analysis of the 16s rDNA sequence of Bacillus shringiensis EnB2 using EzTaxon server.

도 5는 본 발명의 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394BP의 미생물 수탁증이다.Figure 5 is a microbial entrustment of Bacillus shringiensis EnB2 KCTC 11394BP of the present invention.

도 6은 EnB2 배지를 이용한 바실러스 슈린지엔시스 EnB2 KCTC 11394 BP의 pH와 용존산소 변화에 따른 플록형성 변화를 나타낸 그래프이다.FIG. 6 is a graph showing the change in floc formation according to pH and dissolved oxygen change of Bacillus shringiensis EnB2 KCTC 11394 BP using EnB2 medium.

도 7는 EnB2 배양액 중 자유유영형태의 EnB2 세균의 슬러지 침강성에 대한 개선효과를 나타내고 있지만 플록형태의 EnB2 세균이 슬러지 침강성에 대하여 자유유영형태보다 더욱 큰 개선효과를 보여주는 그래프이다.7 is a graph showing the improvement effect on the sludge settling properties of free-flowing EnB2 bacteria in the EnB2 culture, but the floc type EnB2 bacteria than the free-streaming type for sludge settling.

도 8은 바실러스 슈린지엔시스 ENB2의 배양액의 투여에 의한 비사상성팽화 슬러지의 침강성 개선의 정도를 나타내는 사진이다.Fig. 8 is a photograph showing the degree of sedimentation improvement of non-flattening sludge by administration of a culture solution of Bacillus shringiensis ENB2.

도 9의 (A)는 EnB2 플록배양액 투여전의 주사전자 현미경 사진을 나타낸 것이고, (B)는 EnB2 플록배양액 투여후의 주사전자 현미경 사진을 나타낸 것이다.9 (A) shows the scanning electron micrograph before administration of EnB2 floc culture solution, and (B) shows the scanning electron micrograph after administration of EnB2 floc culture solution.

<110> EnB CO., LTD. <120> Microbial cultures containing the self aggregates and free living form of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 1139BP <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1482 <212> DNA <213> Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP <400> 1 ctcaggatga acgctggcgg cgtgcctaat acatgcaagt cgagcgaatg gattnagagc 60 ttgctctcat gaagttagcg gcggacgggt gagtaacacg tgggtaacct gcccataaga 120 ctgggataac tccgggaaac cggggctaat accggataac attttgaact gcatggttcg 180 aaattgaaag gcggcttcgg ctgtcactta tggatggacc cgcgtcgcat tagctagttg 240 gtgaggtaac ggctcaccaa ggcaacgatg cgtagccgac ctgagagggt gatcggccac 300 actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtagggaa tcttccgcaa 360 tggacgaaag tctgacggag caacgccgcg tgagtgatga aggctttcgg gtcgtaaaac 420 tctgttgtta gggaagaaca agtgctagtt gaataagctg gcaccttgac ggtacctaac 480 cagaaagcca cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg gcaagcgtta 540 tccggaatta ttgggcgtaa agcgcgcgca ggtggtttct taagtctgat gtgaaagccc 600 acggctcaac cgtggagggt cattggaaac tgggagactt gagtgcagaa gaggaaagtg 660 gaattccatg tgtagcggtg aaatgcgtag agatatggag gaacaccagt ggcgaaggcg 720 actttctggt ctgtaactga cactgaggcg cgaaagcgtg gggagcaaac aggattagat 780 accctggtag tccacgccgt aaacgatgag tgctaagtgt tagagggttt ccgcccttta 840 gtgctgaagt taacgcatta agcactccgc ctggggagta cggccgcaag gctgaaactc 900 aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc 960 gaagaacctt accaggtctt gacatcctct gaaaacccta gagatagggc ttctccttcg 1020 ggagcagagt gacaggtggt gcatggttgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta 1080 agtcccgcaa cgagcgcaac ccttgatctt agttgccatc attaagttgg gcactctaag 1140 gtgactgccg gtgacaaacc ggaggaaggt ggggatgacg tcaaatcatc atgcccctta 1200 tgacctgggc tacacacgtg ctacaatgga cggtacaaag agctgcaaga ccgcgaggtg 1260 gagctaatct cataaaaccg ttctcagttc ggattgtagg ctgcaactcg cctacatgaa 1320 gctggaatcg ctagtaatcg cggatcagca tgccgcggtg aatacgttcc cgggccttgt 1380 acacaccgcc cgtcacacca cgagagtttg taacacccga agtcggtggg gtaacctttt 1440 tggagccagc cgcctaaggt gggacagatg attggggtga at 1482 <110> EnB CO., LTD. <120> Microbial cultures containing the self aggregates and free living          form of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 1139BP <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1482 <212> DNA <213> Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP <400> 1 ctcaggatga acgctggcgg cgtgcctaat acatgcaagt cgagcgaatg gattnagagc 60 ttgctctcat gaagttagcg gcggacgggt gagtaacacg tgggtaacct gcccataaga 120 ctgggataac tccgggaaac cggggctaat accggataac attttgaact gcatggttcg 180 aaattgaaag gcggcttcgg ctgtcactta tggatggacc cgcgtcgcat tagctagttg 240 gtgaggtaac ggctcaccaa ggcaacgatg cgtagccgac ctgagagggt gatcggccac 300 actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtagggaa tcttccgcaa 360 tggacgaaag tctgacggag caacgccgcg tgagtgatga aggctttcgg gtcgtaaaac 420 tctgttgtta gggaagaaca agtgctagtt gaataagctg gcaccttgac ggtacctaac 480 cagaaagcca cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg gcaagcgtta 540 tccggaatta ttgggcgtaa agcgcgcgca ggtggtttct taagtctgat gtgaaagccc 600 acggctcaac cgtggagggt cattggaaac tgggagactt gagtgcagaa gaggaaagtg 660 gaattccatg tgtagcggtg aaatgcgtag agatatggag gaacaccagt ggcgaaggcg 720 actttctggt ctgtaactga cactgaggcg cgaaagcgtg gggagcaaac aggattagat 780 accctggtag tccacgccgt aaacgatgag tgctaagtgt tagagggttt ccgcccttta 840 gtgctgaagt taacgcatta agcactccgc ctggggagta cggccgcaag gctgaaactc 900 aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc 960 gaagaacctt accaggtctt gacatcctct gaaaacccta gagatagggc ttctccttcg 1020 ggagcagagt gacaggtggt gcatggttgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta 1080 agtcccgcaa cgagcgcaac ccttgatctt agttgccatc attaagttgg gcactctaag 1140 gtgactgccg gtgacaaacc ggaggaaggt ggggatgacg tcaaatcatc atgcccctta 1200 tgacctgggc tacacacgtg ctacaatgga cggtacaaag agctgcaaga ccgcgaggtg 1260 gagctaatct cataaaaccg ttctcagttc ggattgtagg ctgcaactcg cctacatgaa 1320 gctggaatcg ctagtaatcg cggatcagca tgccgcggtg aatacgttcc cgggccttgt 1380 acacaccgcc cgtcacacca cgagagtttg taacacccga agtcggtggg gtaacctttt 1440 tggagccagc cgcctaaggt gggacagatg attggggtga at 1482  

Claims (6)

플록 형성능 및 슬러지 침강성 개선능이 향상된 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394BP 균주.Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP strain with improved floc forming ability and sludge sedimentation ability. 청구항 1에서,In claim 1, 상기 균주는 서열번호 1의 rDNA 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394BP 균주.Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394BP strain, characterized in that the strain has the rDNA sequence of SEQ ID NO: 1. 청구항 1의 바실러스 슈린지엔시스(Bacillus thuringiensis) EnB2 KCTC 11394의 배양액.A culture of Bacillus thuringiensis EnB2 KCTC 11394 of claim 1. 청구항 3의 배양액을 포함하는 것을 특징으로 하는 하폐수 처리용 미생물 제제.Microbial agent for wastewater treatment, comprising the culture solution of claim 3. 삭제delete 청구항 4에 있어서, The method according to claim 4, 상기 미생물 제제는 침강성 개선능을 가지는 것을 특징으로 하는 미생물 제제.The microbial agent is characterized in that it has a sedimentation improving ability.
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