KR100874875B1 - Techniques for embryo loading in indefendence section of same straw and for multiple embryos transfer - Google Patents

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김소섭
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주식회사 엠트렌
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Abstract

Provided is a method of loading embryos in the sections of the straw for transfer by creating a plurality of independent embryo-loading sections in a straw for transfer. In a method of loading embryos of animals except the human being into a straw for transfer, the method is characterized in that a plurality of embryo-loading sections are created by performing an embryo non-loading section-creating process comprising: a step of carrying out two times or more an embryo loading section-creating process including an air suction step, an embryo suction step, and an air suction step; and a step of sucking an implantation enhancement substance between respective embryo loading section-creating processes.

Description

이식용 스트로 내 단위 구획별 수정란 봉입방법과 이식방법{Techniques for embryo loading in indefendence section of same straw and for multiple embryos transfer} Techniques for embryo loading in indefendence section of same straw and for multiple embryos transfer

본 발명은 1개의 이식용 스트로(straw)내에 수정란을 봉입할 때 수정란이 각각의 독립된 다른 구획 내에 독립되어 유지될 수 있도록 구획을 설정하여 수정란을 봉입하는 방법에 관한 것이다. The present invention relates to a method of encapsulating a fertilized egg by setting the compartments so that when the fertilized egg is enclosed in one implantable straw, the fertilized egg can be maintained independently in each other separate compartment.

또한 본 발명은 이식용 스트로(straw)와 주입구간 동기화를 위한 식별표시를 한 이식기구에 위의 수정란을 장착한 후, 독립된 구획내의 수정란을 각각 단위구획별로 수정란을 이식하는 방법에 관한 것이다. In addition, the present invention relates to a method for implanting the fertilized egg for each unit compartment of the fertilized egg in an independent compartment after mounting the above fertilized egg in the implantation apparatus marked with an identification mark for synchronization between the implant straw (straw) and the injection section.

수정란의 이식 기술은 특히 축산업 분야에서 각광받고 있다. 축산업 중에서도 특히 우수한 형질을 갖는 소를 생산하기 위해, 이미 축산 선진국에서는 수정란 이식 기술이 산업화되어 있다. 수정란 이식 기술은 생산성 향상과 경쟁력 있는 우량핵군 조성을 위하여 무엇보다도 가장 기본적으로 해결해야 할 중요한 과제이다.Embryo transplantation technology is in the limelight, particularly in the livestock industry. In order to produce cows with particularly good traits in the livestock industry, fertilized egg transplantation technology has already been industrialized in livestock developed countries. Embryo transplantation technology is the most important task to be solved above all for the improvement of productivity and the formation of a competitive nuclear group.

현재에는 국내에서도 축산을 연구하는 대부분의 실험실이 다수의 난자를 대량으로 생산할 수 있게 되었고, 1980년대 초부터 여러 대학 및 연구소에서 수정란 이식에 관한 많은 연구가 수행되어 왔지만, 현재까지도 수정란 이식에 의한 임신율은 인공 수정에 비하여 낮으며, 특히 체외수정기법으로 생산된 수정란은 체내에서 수정된 수정란에 비하여 더욱 낮은 실정이다.Currently, most laboratories studying livestock have been able to produce large numbers of eggs in Korea, and since the early 1980s, many universities and research institutes have carried out fertilized egg transplants. Is lower than artificial fertilization, and in particular, fertilized eggs produced by in vitro fertilization techniques are lower than fertilized eggs in vitro.

가축 특히 소(牛)의 개량을 위해서는 먼저 암컷보다는 수컷이 생리적 번식능력에 의해 보다 많은 자손을 볼 수 있다. 자연상태에서 암컷은 일생동안 6∼10 두의 자손을 생산할 수밖에 없지만, 수컷의 경우, 상대 암컷의 수에 따라 수백의 자손을 볼 수 있다.In order to improve livestock, especially cattle, males can see more offspring by physiological reproduction than females. In nature, females have no choice but to produce six to ten offspring during their lifetime, but males can see hundreds of offspring, depending on the number of their counterparts.

수소의 자연종부(교미)시 1회분의 정액을 채집, 희석처리하면 인공수정시의 정액 1회분을 저장한 스트로 100∼300개를 만들 수 있고, 이 스트로를 동결처리하여 저장시켰다가 필요시 인공수정을 하게 된다. 인공수정은 수컷과 암컷을 직접 교미시키는 대신에 스트로에 동결 저장되었던 정액을 해동처리하여 주입기를 사용, 암소의 자궁에 주입시켜, 수정되도록 하는 것으로서, 현재 일반 축산농가에서 보편적으로 실시되고 있는 중이다. 이러한 인공수정에서 한발 더 나아가, 우량형질의 암컷의 유전능력을 최단시간내에 인위적으로 높이기 위한 적극적 기술로서 수정란 이식이 실시되고 있다.Collecting and diluting one dose of semen at the time of natural breeding of hydrogen can produce 100-300 straws that store one dose of semen during artificial insemination. It will be modified. Artificial insemination, instead of directly mating males and females, thaws the frozen semen stored in the straw and uses it as an injector to inject it into a cow's womb to be fertilized and is currently being practiced in general livestock farms. In addition to such insemination, fertilized egg transplantation has been carried out as an active technique for artificially increasing the genetic ability of high-quality females in the shortest time.

상기 수정란 이식은, 소의 경우 자연상태에서는 비임신을 기준으로 21일에 1개의 난자가 배란하게 되지만, 젖소의 경우, 우유의 분비량이 특별히 많거나, 한우 의 경우, 육질이나 육량 등이 우수한 암컷을 선발, 한 번에 다수의 난자가 배란되게 하는 호르몬 주사를 실시하여 과배란을 유도하고, 배란된 난자를 이용해 필요한 시기에 인공수정 혹은 자연종부를 통해 암컷의 생식기 내에서 난자와 정자가 만나 수정이 이루어진 다수의 수정란이 되게 한다. 그 다음, 소정 기간(6∼9일) 이후 착상 등 임신을 위해 생식기관인 난관에서 자궁으로 내려오는 수정란들을 기구 등을 이용, 채집하여 현미경하에서 상태를 검사한 후, 다른 암소의 자궁에 옮겨 이식하는 것이다. 이때, 여분의 수정란은 동결처리 보관하여 필요시에 이식한다. 또는, 상기와 같이 우수한 유전형질을 가진 암소의 생체 난소 및 도축될 때의 도축우 난소로부터 여러개의 난자를 채취하여 체외성숙 체외수정 체외배양의 과정(6∼9일)을 거쳐 다수의 체외수정란을 생산하여 착상 등 임신을 위해 현미경하에서 상태를 검사한 후, 다른 암소의 자궁에 옮겨 이식하는 것이다. 이때, 여분의 수정란은 동결처리 보관하여 필요시에 이식한다.The fertilized egg transplant, in the case of cows in the natural state, one egg will be ovulated on the 21st day of non-pregnancy, but in the case of cows cows, the amount of milk is particularly high, or in the case of Hanwoo, females with excellent meat quality and meat Selection and hormonal injection to induce a large number of ovulation at a time to induce hyperovulation, and using the ovulation egg to fertilize the egg and sperm in the female genitalia through artificial insemination or natural seed when necessary Allow multiple fertilized eggs. Then, after a predetermined period (6 to 9 days), fertilized eggs descending from the fallopian tube, which is a reproductive organ, to the uterus for pregnancy, such as implantation, are collected using an instrument, and examined under a microscope, and then transferred to another cow's womb. will be. At this time, the extra fertilized egg is stored frozen and transplanted when necessary. Alternatively, a large number of in vitro fertilized eggs are collected through in vitro fertilization in vitro fertilization and in vitro fertilization (6-9 days) by collecting several eggs from living ovaries and slaughtered ovaries of cows with excellent genetic traits as described above. It is produced and examined under a microscope for pregnancy, such as implantation, and then transferred to another cow's womb. At this time, the extra fertilized egg is stored frozen and transplanted when necessary.

일반적으로 소의 정상적인 자궁은 자궁중격을 경계로 양측으로 나누어진 양분자궁이며, 각 자궁강내 소만부에는 각 열당 15개 내외의 자궁소구가 4열로 배열되어 있고, 이 모체측 자궁소구에 태아측 융모막이 부착하는 궁부성 태반을 형성하며, 일측의 자궁강내에 1마리의 태아가 착상되어 생존하는 번식학적 생리기능을 가진다.Normally, a normal uterus of a cow is a bilateral uterine uterus divided into two sides of the uterine septum, and each of the intrauterine vesicles has about 15 uterine globules arranged in four rows. It forms the attached placental placenta, and one fetus is implanted in the uterine cavity on one side and has a viable reproductive physiological function.

보통 소는 자연상태에서도 쌍자를 생산해 낼 수 있으나 그 비율은 5% 미만이 고 특히, 쌍자생산에 대한 반복력은 아주 낮아 계속적으로 쌍자를 생산하기가 어려워서, 자연적으로 쌍자생산을 기대하는 것이 큰 의미가 없다. 따라서, 효율적으로 쌍자를 생산하기 위해서는 인위적인 번식조절이 필요하다. Normally cows can produce twins even in the natural state, but the ratio is less than 5%, and in particular, the repeatability for twin production is very low, so it is difficult to continuously produce twins. There is no. Therefore, in order to efficiently produce a pair, artificial breeding control is required.

현재까지 쌍자를 생산하는 실용화된 기술로는 2가지로 나눌 수 있는데, 하나는 수정란을 2~3개 이식하는 방법과 또 하나는 자연종부나 인공수정후 수정란을 1~2개 추가이식하는 방법이 있다. 즉, 인공수정 후 7일경에, 배란된 반대측(황체비존재측) 자궁에 수정란을 이식하는 방법과, 한쪽 자궁강내에 2개 이상의 수정란을 이식하는 방법이 있다. To date, there are two practical techniques for producing pairs, one for transplanting 2-3 eggs and one for transplanting 1-2 additional eggs after natural edema or artificial insemination. have. That is, about seven days after artificial insemination, there are a method of implanting a fertilized egg into the ovulated opposite (non-luteal side) uterus and a method of transplanting two or more fertilized eggs into one uterine cavity.

이와 같은 기술은 후대축간에 친형매관계가 성립하지 못하는 문제점이 있거나, 한쪽 자궁강내에 복수의 태아가 착상되는 경우에 한쪽 자궁강내에서 복수의 태아간에 물리적 영양적 제한으로 인하여 태아 간에 심한 경쟁 문제가 발생하고, 발생기간중에 강한 스트레스로 인하여 태아의 생존과 성장에 심대한 악영향을 미치게 되므로, 임신율의 저하, 높은 유산율, 난산율, 기형율, 위약 송아지를 생산하게 될 가능성이 있다. 뿐만 아니라, 쌍자 분만시 태위, 태향, 태세에도 악영향을 미쳐 난산과 사고의 중요한 원인이 되고, 신생축의 건강상태와 생존율에도 나쁜 영향을 미친다. 또한, 소의 양측 자궁강내에 1개씩의 수정란을 주입하려면 각 자궁강당 1개의 이식용 스트로우(straw)를 사용하여 도합 2회의 이식과정을 시행하여야 하며, 이는 자궁내 오염도가 증가할 뿐만 아니라 시술의 번거로움이 발생하므로, 대부분의 쌍자 수정란 이식의 경우 동일한 구획내에 복수의 수정란을 봉입하여 한쪽 자궁 강내에만 2~3개의 수정란을 이식하여 왔다.Such a technique has a problem that a sibling relationship cannot be established between the posterior axis, or when a plurality of fetuses are implanted in one uterine cavity, severe competition problems between fetuses occur due to physical and nutritional limitations between the plurality of fetuses in one uterine cavity. In addition, the strong stress during the developmental period has a significant adverse effect on the survival and growth of the fetus, it is possible to produce a low pregnancy rate, high abortion rate, fertility rate, malformation rate, placebo calf. In addition, it also adversely affects the position, orientation and posture at birth, which is an important cause of difficulty and accidents, and adversely affects the health and survival rate of new livestock. In addition, injecting one fertilized egg into both uterine cavities of a cow requires a total of two transplant procedures using one transplanting straw per uterine cavity, which not only increases intrauterine contamination but also hassles. Therefore, in the case of most twin-transferred egg transplants, a plurality of fertilized eggs are enclosed in the same compartment, and two or three fertilized eggs have been transplanted only in one uterine cavity.

이에 본 발명자는 각각의 수정란을 각각의 설정된 구획으로 독립되게 1개의 이식용 스트로(straw)에 복수의 수정란을 봉입하여 1회의 시술과정에 의해 소의 양측 자궁강내에 각각 1개씩의 수정란을 이식함으로써, 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the present inventors enclosed a plurality of fertilized eggs in one transplant straw for each fertilized egg independently of each set compartment, and implanted one fertilized egg into each of the two uterine cavities by one procedure. The invention has been completed.

본 발명의 목적은 공기 흡입단계; 수정란 흡입단계 및 공기 흡입단계를 포함하는 수정란 봉입 구획 설정 과정을 2회 이상 수행함으로써 복수의 독립된 수정란 봉입 구획을 설정하는 것을 특징으로 하는 이식용 스트로(straw)내에 수정란을 봉입하는 방법을 제공하는 것이다. The object of the present invention is an air intake step; It is to provide a method for encapsulating a fertilized egg in a transplant straw, characterized in that for setting a plurality of independent fertilized egg enclosing compartments by performing two or more steps of setting a fertilized egg encapsulation compartment comprising a fertilized egg intake stage and an air intake stage. .

또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 스트로 또는 스트로를 포함하는 외피관을 보온 및 수평을 유지시켜 이동하고, 이식기에 수정란을 장착할 때 이식기구를 가온하는 방법을 제공하는 것이다. In addition, another object of the present invention is to provide a method of warming and horizontally moving the straw or the outer sheath including the straw, and heating the implantation device when mounting the fertilized egg in the implant.

또한, 본 발명은 이식용 스트로(straw)와 주입구간 동기화를 위한 식별표시를 한 이식기구에 위의 수정란을 장착한 후, 수기적 조작에 의하여 독립된 구획내의 수정란을 각각 단위구획별로 이식하는 방법을 제공하는 것이다. The present invention also provides a method for implanting the fertilized egg in an independent compartment by manual manipulation after mounting the above fertilized egg on an implantation apparatus marked with an implant straw and an identification mark for synchronizing the injection section. To provide.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 공기 흡입단계, 수정란 흡입단계 및 공기 흡입단계를 포함하는 수정란 봉입 구획 설정 과정을 2회 이상 수행함으로써 복수의 수정란 봉입 구획을 설정하는 것을 특징으로 하는 이식용 스트로(straw)내에 수정란을 독립적으로 봉입하는 방법을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention sets up a plurality of fertilized egg encapsulation compartment by performing the procedure of setting the fertilized egg encapsulation compartment comprising at least two times, including the air suction step, fertilized egg suction step and air suction step. Provided is a method for independently encapsulating a fertilized egg within a straw.

또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 1개의 스트로에 봉입된 수정란을 피스톤이 부착된 이식기를 사용하여 이식하되, 상기 수정란을 수정란 봉입 구획 단위별로 이식하는 것을 특징으로 하는 수정란 이식방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 이식기를 사용한 수정란의 이식전에, 상기 수정란이 봉입된 스트로우를 외피관 내에 포함시키고, 상기 외피관의 양 말단을 밀봉하여 이식용 스트로우를 보관 및 이동하는 과정을 더 포함할 수 있다. In addition, the present invention provides a fertilized egg transplant method characterized in that the implanted implanted in one straw by the method using a transplanter attached to the piston, the fertilized egg implanted by the fertilized egg encapsulation unit. In addition, the present invention may further include the step of including the straw containing the fertilized egg in the envelope before the implantation of the fertilized egg using the implanter, and storing and moving the transplant straw by sealing both ends of the envelope tube have.

이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명에서 사용된 용어 “산자"는 자궁 밖에서 생존할 수 있는 동물을 말한다. 바람직하게는, 1초, 1분, 한 시간, 하루, 한 주, 한 달, 6달 또는 일년 이상 생존할 수 있는 동물을 말한다. 상기 동물은 생존을 위해 자궁 내 환경을 필요로 하지 않는다.As used herein, the term “liver” refers to an animal that can survive outside the uterus. Preferably, it can survive for more than one second, one minute, one hour, one day, one week, one month, six months, or one year. The animal does not need an intrauterine environment to survive.

본 발명에서 사용된 용어 “이식용 스트로"는 수정란을 보존, 동결, 이동 및 이식하는데 사용되는 관모양의 기구를 말한다. 예를 들어, 0.25ml 스트로, 0.5 ml 스트로, GMP 스트로, OPS 스트로가 있다. As used herein, the term “graft straw” refers to a tubular apparatus used for preserving, freezing, moving, and transplanting fertilized eggs. For example, 0.25 ml straw, 0.5 ml straw, GMP straw, OPS straw. .

본 발명에서 사용된 용어“외피관"은 이식용 스트로를 방수, 오염방지, 기록 등을 위하여 이식용 스트로를 포함하여 보호할 수 있는 관상 기구를 말한다. 예를 들어, 폴리비닐관을 들 수 있다.As used herein, the term "envelope tube" refers to a tubular instrument capable of protecting the implantable straw, including the implantable straw, for waterproofing, contamination prevention, recording, etc. For example, polyvinyl tubes are mentioned.

본 발명에서 사용된 용어 “수정란"은 정자의 핵과 난자의 핵이 합쳐서 형성된 것을 의미한다.As used herein, the term "fertilized column" means that the nucleus of the sperm and the nucleus of the ovum is formed.

본 발명에서 사용된 용어 “수정란 이식"은 채란한 수정란 또는 체외에서 수정되어 생산된 수정란을 수정란의 발생일과 수란우의 발정경과일이 동기화된 동물 의 자궁강내에 이식하여 산자를 생산해 내는 기술을 의미한다. As used herein, the term "fertilized egg transplant" refers to a technique for producing a litter by transplanting a fertilized egg or fertilized egg produced in vitro and fertilized in the uterine cavity of an animal synchronized with the date of occurrence of the fertilized egg and the estrus of the egg.

본 발명에서 사용된 용어 “봉입"은 스트로 내에 수정란이 주입된 상태를 말한다. The term "encapsulation" as used herein refers to a state in which a fertilized egg is injected into a straw.

본 발명에서 사용된 용어 “수정란 봉입 구획"은 스트로 내에 단일 또는 복수의 수정란이 주입되어 형성된 층과 상기 수정란층의 전 후방의 공기 또는 충진물질층을 포함하는 것을 말한다.As used herein, the term “fertilized egg encapsulation compartment” refers to a layer formed by injecting a single or a plurality of fertilized eggs into a straw and an air or filler material layer before and after the fertilized egg layer.

하나의 양태로써, 본 발명은 공기 흡입단계, 수정란 흡입단계 및 공기 흡입단계를 포함하는 수정란 봉입 구획 설정 과정을 2회 이상 수행함으로써 복수의 독립된 수정란 봉입 구획을 설정하는 것을 특징으로 하는, 이식용 스트로(straw) 내에 인간을 제외한 동물의 수정란을 봉입하는 방법에 관한 것이다. In one aspect, the present invention is characterized in that a plurality of independent fertilized egg encapsulation compartments are set up by performing at least two times the process of setting the fertilized egg compartment containing the air intake step, fertilized egg intake step and air intake step, The present invention relates to a method of encapsulating fertilized eggs of animals other than humans in a straw.

본 발명의 수정란 봉입 구획은 1개의 이식용 스트로내에 독립된 단위구획별로 설정되고, 1단의 수정란 봉입 구획은 공기층과 수정란층과 공기층으로 구성된다. 기존에는 스트로 내에 수정란 봉입 구획이 단일하였음에 반해, 본 발명은 수정란 봉입 구획 설정 과정을 2회 이상 수행함으로써 1개의 스트로내에 복수의 독립된 수정란 봉입 구획이 설정되어 있다는 것을 특징으로 한다. The fertilized egg encapsulation compartment of the present invention is set for each unit compartment in one implantable straw, and the first stage fertilized egg encapsulation compartment is composed of an air layer, a fertilized egg layer and an air layer. In the past, the fertilized egg encapsulation compartment has been single in the straw, but the present invention is characterized in that a plurality of independent fertilized egg compartments are set in one straw by performing the procedure of setting the fertilized egg encapsulation compartment two or more times.

본 발명의 수정란 봉입 구획내 수정란의 개수는 단수 또는 복수일 수 있다. The number of fertilized eggs in the fertilized egg encapsulation compartment of the present invention may be singular or plural.

예를 들어, 상기 수정란 봉입 구획 설정 과정을 반복적으로 수행함에 있어 각 설정 과정 사이에 수정란 비봉입 구획을 설정하는 과정을 포함하여 수정란(들)을 봉입할 수 있다. For example, in repeatedly performing the fertilized egg encapsulation compartment setting process, the fertilized egg (s) may be enclosed, including a process of setting the fertilized egg non-encapsulated compartment therebetween.

순차적으로 수정란 봉입 구획- 수정란 비봉입 구획- 수정란 봉입 구획으로 3구획으로 설정될 수 있고, 상기 구획이 반복되어 설정될 수 있다. 이에, 상기 수정란 봉입 구획의 전.후방을 수정란 비봉입 구획으로 설정할 수도 있다. Sequentially, the fertilized egg encapsulation compartment—the fertilized egg non-encapsulation compartment—the fertilized egg encapsulation compartment may be set to three compartments, and the compartment may be repeatedly set. Thus, the front and rear of the fertilized egg encapsulation compartment may be set as a fertilized egg unsealed compartment.

수정란 비봉입 구획 내에는 수정란(들)이 각각의 다른 구획에 독립되어 유지될 수 있도록 경계를 형성하는 것이라면 어떤 물질을 충진하는 것도 허용된다. 바람직하게는 배양용메디아, 이식용메디아, 공기, 착상증진물질이나 이에 한정하지 않는다. The fertilized egg unsealed compartment may be filled with any material as long as it forms a boundary so that the fertilized egg (s) can be maintained independently of each other compartment. Preferably media for cultivation, media for transplantation, air, implantation promoting substances, but are not limited thereto.

상기 충진 물질은 자궁내 환경에 영향을 미치거나 개선하거나, 미생물을 억제하거나, 황체퇴행을 억제함으로써 태아가 자궁내에 착상하기 용이하도록 할 수 있다. The filling material can facilitate the implantation of the fetus in the uterus by affecting or improving the uterine environment, inhibiting microorganisms, or inhibiting luteal degeneration.

바람직하게는 착상증진물질에는 인터페론을 포함할 수 있다. 보다 바람직하게 상기 인터페론으로는 알파, 베타, 오메가, 감마, 타우를 포함할 수 있다. 바람직하게는 착상증진물질에는 성호르몬, 비스테로이드물질, 단백분해효소가 포함될 수 있다. Preferably, the implantation promoting material may include interferon. More preferably, the interferon may include alpha, beta, omega, gamma, tau. Preferably, the implantation promoting material may include sex hormones, nonsteroidal substances, proteases.

바람직하게는 상기 수정란 비봉입 구획 내 충진물질의 용해 또는 혼합용 기재로서는 수정란 배양용배지, 이식용배지, 수성 또는 유성기재를 활용하는 방법을 포함할 수 있다. 보다 바람직하게, 혼합용 유성기재로는 참기름 또는 홍화씨기름을 포함할 수 있다. Preferably, the substrate for dissolving or mixing the filler material in the fertilized egg-unsealed compartment may include a fertilized egg culture medium, a transplant medium, an aqueous or oily substrate. More preferably, the mixing oily base material may include sesame oil or safflower oil.

다른 양태로써, 본 발명은 상기 방법에 의해 1개의 스트로에 봉입된 수정란 을 피스톤이 부착된 이식기를 사용하여 이식하되, 상기 수정란을 독립된 수정란 봉입 구획 단위별로 이식하는 것을 특징으로 하는 인간을 제외한 동물의 수정란 이식방법에 관한 것이다. In another aspect, the present invention is to implant a fertilized egg encapsulated in one straw by the above method using an implanter attached to a piston, wherein the fertilized egg is implanted by an individual fertilized egg enclosing unit unit of the animal except human Fertilized egg transplant method.

또한 본 발명은, 바람직하게는 상기 이식기를 사용한 수정란 이식 전에, 상기 수정란이 봉입된 스트로우를 외피관 내에 포함시키고, 상기 외피관의 양 말단을 밀봉하여 이식용 스트로우를 보관 및 이동하는 과정을 더 포함할 수 있다. In another aspect, the present invention preferably further comprises the step of including the straw containing the fertilized egg in the outer sheath, and sealing both ends of the outer sheath to store and move the implantable straw prior to implantation of the fertilized egg using the implanter. can do.

본 발명에서 사용된 용어“외피관"이란 속이 비어있는 것으로 이식용 스트로를 담을 수 있는 것이라면 원통형의 것에 한정되지 않는다. 바람직하게는, 상기 외피관의 재질은 폴리비닐관일 수 있으나, 스트로를 보호할 수 있다면 이에 한정되지 않으며, 더욱 바람직하게는 두께 0.01-5.0mm, 직경 0.5cm-1.5cm, 길이 10cm-20cm인 것을 특징으로 하는 폴리비닐관일 수 있다.  As used herein, the term "envelope tube" is not limited to a cylindrical one as long as it can contain an implantable straw. Preferably, the material of the envelope tube may be a polyvinyl tube, but may protect the straw. If so, it is not limited thereto, and more preferably, it may be a polyvinyl tube characterized in that the thickness is 0.01-5.0mm, 0.5cm-1.5cm in diameter, 10cm-20cm in length.

또한, 상기 외피관의 양쪽 끝의 밀봉은 가열 봉인에 의할 수 있다. 바람직하게는 1단, 더욱 바람직하게는 2단으로 가열하여 봉인할 수 있으며 방수, 오염방지 및 기록의 목적을 달성할 수 있다. In addition, the sealing of both ends of the shell tube may be by heat sealing. Preferably it can be sealed by heating in one stage, more preferably in two stages, and can achieve the purpose of waterproofing, pollution prevention and recording.

또한 상기 스트로를 포함하는 외피관을 36.5.0-40.0℃를 유지하여 보관하고, 수평을 유지시켜 이동하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 37.5-39.5℃를 유지하도록 한다. In addition, the envelope containing the straw is 36.5.0-40.0 ℃ It is preferable to keep it, to keep it, and to move it horizontally, More preferably, it maintains 37.5-39.5 degreeC.

온도 유지를 위한 방법을 이하 구체적으로 기술한다. The method for maintaining the temperature is described in detail below.

예를 들어, 상기 스트로 또는 스트로를 포함하는 외피관을 내용량 0.5~3.0L, 38.0~41.0℃의 온수가 채워진 보온병에 넣은 후 보온병을 직육면체의 스치로폼 박 스내에 2중으로 포장할 수 있다. For example, the outer tube containing the straw or straw may be placed in a thermos filled with warm water of 0.5 to 3.0 L and 38.0 to 41.0 ° C., and the thermos may be double packed in a styrofoam box of a cuboid.

예를 들어, 보온병과 발포스티렌수지 박스(스티로폼 박스) 내 공간의 상하 또는 좌우에 1개 이상의 가온된 hot bag(물주머니)을 충진한다. 가온된 hot bag으로써는 0.5~2L 용량의 폴리머주머니 또는 물주머니를 사용할 수 있다. 또한, 발포스티렌 수지 덮개의 틈새를 방수용 테입으로 밀봉할 수 있다. 또한 일정 온도를 장시간(6~8시간) 유지하면서 수정란을 이동할 경우 수정란의 생존 가능성이 향상되어 결과적으로 임신율을 향상시킬 수 있다. 이동시 37.5-39.5℃를 유지하는 것이 바람직하다. For example, one or more warmed hot bags (water bags) are filled up or down or to the left and right of a space in a thermos and a foamed styrene resin box (styrofoam box). As a heated hot bag, a polymer bag or water bag of 0.5 ~ 2L capacity can be used. In addition, the gap of the foamed styrene resin cover can be sealed with a waterproof tape. In addition, if the fertilized egg is moved while maintaining a constant temperature for a long time (6-8 hours), the chance of survival of the fertilized egg is improved, and consequently, the pregnancy rate can be improved. It is desirable to maintain 37.5-39.5 ° C. during migration.

또한, 수정란의 유실 또는 구획부의 혼합 방지를 위하여 스트로 또는 스트로를 포함하는 외피관을 수평이 되게 유지하면서 이동하는 것이 바람직하다. 이는 봉입된 수정란의 자체무게에 의한 중력침하와 차량운반구의 진동에 의해 수정란이 스트로 내의 기층내로 유실됨에 따라 초래되는 치명적 손상을 억제하고, 자궁내로 정확히 이식될 수 있도록 하기 위함이다. In addition, in order to prevent loss of the fertilized egg or mixing of the compartment, it is preferable to move the straw or the outer shell including the straw while keeping the horizontal. This is to prevent the fatal damage caused by gravity subsidence due to the weight of the encapsulated egg itself and vibration of the vehicle transport sphere into the base layer in the straw, and to accurately implant into the uterus.

또한 본 발명의 수정란 이식방법에 있어서, 이식기에 수정란을 결합할 때 차량내 제상용 열풍을 이용하여 이식기구를 가온하여 수정란 이식의 경우에 최적의 온도를 유지할 수 있도록 하는 것이 바람직하다. 이식용 스트로를 이식기에 장착시 온도관리를 위한 방법은 이하와 같다. In addition, in the fertilized egg transplant method of the present invention, it is preferable to maintain the optimum temperature in the case of fertilized egg transplant by heating the transplantation apparatus using the defrost hot air in the vehicle when combining the fertilized egg into the implanter. The method for temperature management when the implantation straw is attached to the implanter is as follows.

예를 들어, 메탈시쓰를 분리한 이식기의 철심과 슬리브를 씌운 메탈시쓰를 차량의 전방유리 제상용 열풍을 이용하여 가열할 수 있다. 또는, 제상용 히터의 온 도조절 눈금을 23~40℃로 설정하고, 여기서 발생하는 열풍(열기)을 이용하여 메탈시쓰를 분리한 이식기의 철심과 슬리브를 씌운 메탈시쓰를 동시에 가열함으로써 이들 기구의 온도가 30.0~39.00℃로 유지되게 할 수 있다. 이는 수정란에 대한 저온충격을 최소화할 수 있고, 최종적으로 스트로를 결합하기 전에 촉감으로 기구의 온도를 조정할 수 있다. For example, the iron sheath of the implanter from which the metal sheath was separated and the metal sheath covered with the sleeve can be heated using the windshield defrosting hot wind of the vehicle. Alternatively, the temperature control scale of the defrosting heater is set to 23 to 40 ° C., and the iron core of the implanter from which the metal sheath is separated and the metal sheath with the sleeve are heated at the same time by using the hot air (heat) generated here. The temperature of the instrument can be maintained between 30.0 and 39.00 ° C. This can minimize the cold shock on the fertilized eggs and finally adjust the temperature of the instrument to the touch before binding the straw.

또한 본 발명에 있어서, 상기 수정란 봉입 구획 단위별 이식은 상기 피스톤 후반부에 수정란 봉입 구획을 독립 구획 단위별로 표시하고, 표시된 지점까지 피스톤을 단위별로 진입시킴으로써 수행됨을 특징으로 한다. 이때, 피스톤 후반부에 수정란 봉입 구획의 각 구간을 각 독립 구획 단위별로 표시하고, 그 표시를 기준으로 수기적으로 피스톤을 전진시킴으로써, 수정란 봉입 구획 1단위씩 주입시킬 수 있다. In addition, in the present invention, the implantation of the fertilized egg encapsulation unit by the unit is characterized in that the fertilized egg encapsulation compartment is displayed by the independent compartment unit in the latter part of the piston, and by entering the piston unit to the marked point. At this time, each section of the fertilized egg encapsulation section is displayed in each of the independent compartment units in the latter half of the piston, and the unit can be injected one by one by fertilizing the piston manually based on the indication.

또한 본 발명에 있어서, 상기 방법에 따른 수정란 이식시에 수정란 봉입 구획 전.후방의 수정란 비봉입 구획 내 충진물질을 함께 주입할 수 있다. 이로써 태아의 착상과 발생이 보다 용이하게 되며, 유산 및 분만사고가 줄어, 한우의 쌍자 생산을 획기적으로 개선시킬 수 있다. In addition, in the present invention, during the implantation of the fertilized egg according to the method it can be injected with the filling material in the fertilized egg non-sealed compartment before and after the fertilized egg-sealed compartment. This facilitates implantation and development of the fetus, less miscarriage and delivery accidents, and can dramatically improve the production of the twin of the cattle.

또한 본 발명의 상기 수정란 봉입 구획 단위별 이식은 피스톤 후반부에 수정란 봉입 구획 및 비봉입 구획을 단위별로 표시하고, 1단위의 수정란 봉입 구획 및 비봉입 구획의 일부 지점까지 피스톤을 수기적으로 진입시킴으로써 수행됨을 특징으로 한다. 비봉입 구획의 일부 지점까지 피스톤을 진입시킴으로써 수정란 봉입 구획 내의 수정란과 함께 비봉입 구획 내의 충진물질도 전부 또는 부분적으로 함께 주입될 수 있다. 상기 비봉입 구획의 일부 지점이란 바람직하게는 비봉입 구획의 1/2지점이나 비봉입 구획의 일부 지점이면 무관하고 이에 국한되지 않는다. In addition, the implantation of the fertilized egg encapsulation unit unit of the present invention is performed by marking the fertilized egg encapsulation compartment and the non-encapsulation compartment in units of the latter part of the piston, and manually entering the piston to a part of one unit of the fertilized egg encapsulation compartment and the non-encapsulation compartment. It is characterized by. By entering the piston to some point in the unsealed compartment, the filler material in the unsealed compartment may also be injected together in whole or in part together with the fertilized egg in the fertilized egg compartment. Part of the non-sealed compartment is preferably, but not limited to, one half of the non-sealed compartment or some point of the unsealed compartment.

예를 들어, 수정란 봉입 구획-수정란 비봉입 구획-수정란 봉입 구획으로 설정된 스트로내의 수정란 이식시, 피스톤 후반부에 이식용 스트로(straw)의 1/3(수정란 봉입 구획), 2/3 길이(수정란 비봉입 구획)에 해당하는 지점과 동일하게 수정란 주입 구획의 구간을 표시할 수 있다. 그 다음, 피스톤을 1/3(수정란 봉입 구획)지점 내지 1/2(수정란 봉입 구획 및 수정란 봉입 구획의 1/2)까지 밀어 1구획내의 수정란(들)을 이식 또는 주입할 수 있다. 그 다음, 다시 피스톤을 1/2(수정란 봉입 구획의 1/2)지점에서 끝(수정란 봉입 구획의 1/2 및 수정란 봉입 구획)까지 밀어 다른 독립된 수정란 봉입 구획 내의 수정란(들)을 이식 또는 주입할 수 있다.For example, when transplanting a fertilized egg into a straw set as a fertilized egg encapsulation compartment-a fertilized egg non-encapsulation compartment-a fertilized egg encapsulation compartment, 1/3 of the straw for implantation (fertilized egg enclosing compartment), 2/3 length (fertilized egg unsealing) The section of the fertilized egg injection section may be marked in the same manner as that corresponding to the mouth section). The piston can then be pushed from one-third (fertilized egg containment compartment) to one-half (half of the fertilized egg containment compartment and fertilized egg containment compartment) to implant or inject the fertilized egg (s) in one compartment. Then push or inject the piston from the half (half of the fertilized egg compartment) to the end (half of the fertilized egg compartment and the fertilized egg compartment) to implant or inject fertilized egg (s) in another independent fertilized egg compartment. can do.

또한 본 발명의 수정란 이식방법에 있어서, 상기 수정란은 포유동물의 수정란일 수 있다. 바람직하게는 상기 포유동물은 소인 것을 특징으로 한다. 본 발명에 있어서, 상기 독립된 수정란 봉입구획 내의 소의 수정란을 소의 양측 자궁강 내에 각각 독립된 구획단위별로 이식하는 것이 더욱 바람직하다. In the fertilized egg transplant method of the present invention, the fertilized egg may be a fertilized egg of a mammal. Preferably the mammal is characterized in that the cow. In the present invention, it is more preferable to implant the fertilized eggs of the cows in the independent fertilized egg encapsulation compartments into separate compartment units, respectively, in both uterine cavities of the cows.

상기 독립된 수정란 봉입구획 내 수정란을 소의 양측 자궁 내에 각각 단위별로 이식하는 방법은 소의 양측 자궁 중 어느 자궁에 먼저 이식하여도 무관하다. 바람직하게는 황체가 존재하는 방향의 자궁각과 관계없이 수기적으로 조작이 용이한 방향의 자궁각을 우선적으로 선택하여 최대한 깊이, 무자극적으로 이식할 수 있 다. 또는, 황체가 존재하는 방향의 자궁각을 우선적으로 선택하여 최대한 깊이, 무자극적으로 이식할 수도 있다.  The method of implanting the fertilized egg in the independent fertilized egg encapsulation compartment into the uterus on both sides of each cow may be transplanted to either uterus on both sides of the bovine first. Preferably, irrespective of the uterine angle in the direction in which the corpus luteum is present, the uterine angle in an easily manipulated direction may be preferentially selected and implanted as deeply and irritably as possible. Alternatively, the uterine angle in the direction of the corpus luteum may be preferentially selected and implanted as deeply and irritably as possible.

예를 들어, 수정란 봉입 구획-수정란 비봉입 구획-수정란 봉입 구획으로 설정된 스트로내의 수정란(들) 이식시에, 1단의 수정란 봉입 구획 내의 수정란(들)을 한쪽 자궁 내에 먼저 이식하고 이어서 반대측 자궁내에 나머지 수정란 봉입 구획 내의 수정란(들)을 이식할 수 있다.For example, upon implantation of a fertilized egg (s) in a straw set as a fertilized egg inclusion compartment-fertilized egg unsealed compartment-fertilized egg inclusion compartment, the fertilized egg (s) in one stage of fertilized egg inclusion compartment are first implanted into one uterus and then into the opposite uterus The fertilized egg (s) in the remaining fertilized egg containment compartment can be implanted.

이로써 1개의 이식용 스토로에 복수의 수정란을 봉입하여 1회의 시술과정에 의해 소의 양측 자궁강내에 단위별 독립된 수정란 봉입 구획 내 수정란(들)을 각각 이식할 수 있고, 소의 쌍자 생산을 획기적으로 개선시킬 수 있다. In this way, a plurality of fertilized eggs are encapsulated in a single transplant storo, and each fertilized egg (s) in a single fertilized egg encapsulation compartment can be implanted into each uterine cavity of the bovine by one procedure. Can be.

본 발명에 따라, 수정란이식과 동시에 착상증진물질을 자궁내로 주입하면, 보다 착상이 용이하게 됨으로써 임신율과 쌍자생산율이 향상될 뿐만 아니라, 유산.기형.난산.사고.위약 산자의 발생율이 현저히 감소한다. 뿐만 아니라, 소의 양측자궁강내에 각각 1개씩 수정란을 이식할 수 있고, 1두의 수란우를 이용하여 2두의 건강한 송아지를 효율적으로 생산할 수 있으므로 우량형질의 한우를 대량으로 증식하여 농가 소득증대 및 한우산업의 경쟁력 향상에 기여할 수 있다.According to the present invention, implantation of implantation promoter into the uterus at the same time as fertilization of the fertilized egg, the implantation is easier to improve not only the pregnancy rate and the twin production rate, but also significantly reduce the incidence of miscarriage, malformation, ovulation, accident, placebo acid. . In addition, one fertilized egg can be transplanted into the uterine cavity of each cow, and two healthy calf can be efficiently produced by using one poultry cow, so it can multiply a large amount of superior quality Korean beef and increase farm income. Can contribute to improving the competitiveness of

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.

단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are merely to illustrate the invention, but the content of the present invention is not limited by the following examples.

< 실시예1> 이식용 스트로(straw)내 독립된 구획에 수정란의 봉입과 착상증진물질을 충진 <Example 1> filling the sealed and implantation of a fertilized egg in promoting substances within separate compartments for transplantation straw (straw)

도축되는 한우 중 도축우 개체별로 혈통과 이력을 유지할 수 있도록 난소와 난자를 채취처리하여, 38.5℃, 95% 습도, 5%의 CO2(혼합개스) 배양기내에서, 도축우 개체별로 체외성숙 체외수정 체외배양 후, 형태학적 유전학적으로 우수한 수정란만을 선별한 후 이하의 과정을 거친다. In order to maintain the lineage and history of each slaughtered cattle, the ovaries and eggs are collected and treated in 38.5 ° C, 95% humidity, and 5% CO 2 (mixed gas) incubator. After fertilization in vitro, only morphologically and genetically superior fertilized eggs are selected and then subjected to the following procedure.

① 구획별 수정란 봉입법과 착상증진물질 충진법(도1)① Insertion of fertilized eggs by compartment and filling method of implantation promoting substance (Fig. 1)

0.25ml 이식용 스트로(straw)에 복수의 수정란을 봉입할 때 육안적 기준 또는 척도에 의해 전방부, 중앙부, 후방부로 대분하여, 이식용 스트로(straw)에 표시하여 설정하거나 또는 사상적으로 설정한다. 스트로내의 중앙부는 전방부와 후방부로 독립되는 구획으로써 수정란이 봉입되지 않는 비봉입 구획에 해당되며, 전방부와 후방부는 각각 1개(또는 2개)의 수정란이 봉입되는 구획으로 독립된다.When a plurality of fertilized eggs are encapsulated in a 0.25 ml transplant straw, they are largely divided into front, center, and rear portions by visual standards or measures, and are marked or set on a transplant straw. The central part of the straw is a compartment that is independent of the anterior part and the posterior part, and corresponds to an unsealed compartment in which the fertilized egg is not enclosed, and the anterior part and the rear part are each divided into a compartment in which one (or two) fertilized eggs are enclosed.

0.25ml 이식용 스트로(straw)내에 소량의 공기 또는 충진물질을 먼저 흡인한 후 이식용 media와 함께 선별된 수정란을 하단부에서 1/3지점까지 흡인하고 두 번째 공기 또는 충진물질을 흡인하면 이식시 스트로(straw) 후방부 수정란 봉입 구획 이 형성된다. After aspirating a small amount of air or filler material into the 0.25ml transplant straw, aspirate the fertilized eggs selected together with the transplant media from the lower part to 1/3 point and suck the second air or filler material. A posterior fertilized egg enclosing compartment is formed.

이어서 별도로 준비된 착상증진물질 등(또는 이식용 media)을 상단부 2/3지점까지 흡인한 후 2/3지점에 세 번째 공기 또는 충진물질을 흡인하면, 전후방부 구획으로써의 경계층이 되는 스트로(straw) 중앙부로서, 착상증진물질 등이 충진된 비봉입 구획이 형성된다. Subsequently, a separately prepared implantation promoting material or the like (or transplantation media) is sucked to the upper 2/3 point and the third air or the filling material is sucked at the 2/3 point, and a straw is used as a boundary layer for the front and rear compartments. As a central portion, an unsealed compartment filled with an implantation promoting material or the like is formed.

2/3지점에서 세번째 공기 또는 충진물질을 만든 뒤 이식용 media와 수정란을 함께 이식용 스트로(straw) 발단부의 2cm정도까지 흡인한 후, 마지막 공기 또는 충진물질을 다시 흡인하고 충진용 파우더로 막으면 이식시의 스트로(straw) 전방부 수정란 봉입 구획이 형성된다.After making the third air or filling material at 2/3 point, aspirate the transplanting media and the fertilized egg together to about 2cm of the end of the transplanting straw, and then aspirate the last air or filling material again and block it with the filling powder. At the time of implantation, the straw anterior fertilized egg inclusion compartment is formed.

이로써 착상증진물질과 수정란이 이식용 스트로내에서 직접적으로 접촉되지 않으면서 이식용 스트로의 구획이 확실하게 각기 다른 구획에 독립되어 존재하게 되며, 이식기 피스톤의 구획동기화를 위한 지표가 된다.This ensures that the compartments of the implantable straw are independently present in different compartments without direct contact between the implant promotion material and the fertilized egg within the implantable straw, and are an indicator for the compartment synchronization of the implant piston.

② 방수 스트로(straw) 봉인기술(도2)② Waterproof straw sealing technology (Fig. 2)

두께 0.1mm, 직경 0.5cm 내외, 길이 10cm 내외의 폴리비닐관의 한 쪽 끝에 가열봉인기를 이용하여 2단으로 봉인한다. 한쪽 끝이 가열봉인된 폴리비닐관내에 위에서 수정란이 봉입된 0.25ml 이식용 스트로(straw)를 넣는다. 보호용 방수 폴리비닐관의 다른 쪽 끝에 가열봉인기를 이용하여 2단으로 봉인한다. 방수 폴리비닐관 표면에 수정란의 혈통, 이력, 수량 등의 정보를 불수용성 물질로 기록한다.One end of the polyvinyl tube having a thickness of about 0.1 mm and a diameter of about 0.5 cm and a length of about 10 cm is sealed in two stages using a heat sealer. Into a polyvinyl tube heated at one end, a 0.25 ml implantable straw containing the fertilized egg is placed above. The other end of the protective waterproof polyvinyl tube is sealed in two stages using a heat sealer. On the surface of the waterproof polyvinyl tube, information such as the lineage, history, and quantity of fertilized eggs is recorded as an insoluble substance.

< 실시예2> 수정란의 유실방지와 온도유지 <Example 2> maintaining the temperature avoid loss of embryos

38.5℃의 물이 담긴 보온병에 내에서 여러 개의 폴리비닐관이 부유하여 분산되거나 마개에 끼이지 않도록, 봉인된 폴리비닐관 상단에 알미늄박지를 씌운 후 이를 준비된 보온병내에 넣는다.Put aluminum foil on the top of sealed polyvinyl tube and place it in the prepared thermos so that several polyvinyl tubes do not float or get stuck in a thermos in 38.5 ℃ water.

폴리비닐관 또는 이식용 스트로(straw)가 보온병내에서 세워진 상태로 이송되면 수정란이 유실될 수 있으므로, 수평을 유지할 수 있도록 보온병 뚜껑을 닫은 후, 보온병을 즉시 옆으로 눕혀서, 두께 약 3cm, 약 10L 용량의 스티로폼 박스에 담는다. If the polyvinyl tube or transplant straw is transported in a thermos, the fertilized egg may be lost. Close the thermos lid to keep it horizontal and immediately lay the thermos on its side, about 3cm thick and about 10L capacity. In a styrofoam box.

39℃로 가온된 1000~1,500ml 용량의 hot bag 2~3개를 스티로폼 박스내의 보온병 상하 또는 좌우에 충진하여, 스티로폼 박스 표면에 “반드시 수평을 유지할 것”이라는 경고문을 붙인 후 시술할 장소로 수평을 유지한 채 이송한다.Fill two or three hot bags with a capacity of 1000 ~ 1,500ml heated to 39 ℃ on the top, bottom, left and right sides of the thermos in the styrofoam box, and attach a warning message to the surface of the styrofoam box. Transfer while keeping.

< 실시예3> 스트로를 이식기에 장착시 온도관리 방법 < Example 3 > Temperature control method when the straw is attached to the implanter

① 메탈시쓰를 분리한 이식기의 철심과 슬리브를 씌운 메탈시쓰를 차량의 전방 제상용 열풍을 이용하여 가열한다. ① Heat the metal sheath with the iron core and the sleeve of the implanter from which the metal sheath was separated using the front defrost hot air of the vehicle.

② 제상용 히터의 온도설정은 25~30℃를 설정하며 최종적으로 스트로를 결합하기전에 촉감으로 온도를 조정한다. ② Set temperature of defrost heater to 25 ~ 30 ℃ and adjust temperature by touch before finally combine straw.

수정란 이송시 수평 유지 방법에 따른 수정란 유실율(%)Fertilized egg loss rate according to the method of leveling during fertilized egg transfer (%) 구 분division 이송거리Travel distance 100km 이하100km or less 100~200km100-200 km 200km 이상More than 200km 종래방법(세워서 이송)Conventional method (standing and conveying) 4/20(20%)4/20 (20%) 7/20(35%)7/20 (35%) 10/20(50%)10/20 (50%) 본 발명방법(눕혀서 이송)Method of the Invention 0/20(0%)0/20 (0%) 0/20(0%)0/20 (0%) 0/20(0%)0/20 (0%)

< 실시예4> 소의 양측자궁강내에 수정란과 착상증진물질을 동시에 이식 또는 주입 <Example 4> bovine both sides at the same time implanted or injected into a fertilized egg in the uterine cavity as implantation promoting substances

① 이식기 내심 피스톤에 주입구간 동기화 표시① Synchronization mark of injection section on the piston inside the implanter

이식기의 내심 피스톤의 후방부에 불용성 물질(예, 매니큐어)을 이용하여 0.25ml 이식용 스트로(straw)의 1/3, 1/2, 2/3 길이에 해당하는 지점과 동일하게 수정란 주입 구획의 구간을 표시한다.Using the insoluble material (e.g. nail polish) at the rear of the inner core piston of the implanter, the same amount of 1/3, 1/2 and 2/3 of the 0.25 ml implant straw Mark the section.

수정란 이식기의 내심 피스톤 후방부에 표시된 1/3, 1/2, 2/3 지점까지 피스톤을 조작하면, 0.25ml 이식용 스트로(straw)와 거의 동일한 구획(길이)에 존재하는 수정란과 착상증진물질(또는 이식용 media)이 이식 또는 주입될 수 있다.When operating the piston to the 1/3, 1/2 and 2/3 points marked on the back of the inner core piston of the fertilized egg implanter, the fertilized egg and implantation material are present in the same compartment (length) as the 0.25 ml implant straw. (Or implantable media) may be implanted or infused.

일반적으로 이식기의 내심 피스톤의 1/2 표시 지점까지 전진 조작하면 전방부 구획에 봉입된 1개의 수정란과 동시에 중앙부의 착상증진물질의 1/2량이 한쪽 자궁강내에 우선적으로 이식 또는 주입된다.In general, when the manipulator advances to the half mark of the inner piston of the implanter, one half of the implantation material in the center is preferentially implanted or injected into one uterine cavity at the same time as one fertilized egg enclosed in the anterior compartment.

② 수란우의 양측 자궁강에 각각의 수정란을 수기적으로 조작하여 이식한다.(도4) 수란우의 자궁과 황체를 검사하여 선발된 수란우에 경막외마취와 소독을 실시한다. 시술자는 이송된 수정란을 이식기에 장착하여 수란우의 자궁경관을 통과시킨 후, 수란우의 좌측(우측)의 자궁강내 선단 방향으로 약 3분의 2지점까지 주의 깊게 이식기의 선단을 진입시킨다.② Manually fertilize each fertilized egg into both uterine cavity of the fertilized cow and transplant it. (Fig. 4) Inspect the uterus and corpus luteum of the fertilized cow and perform epidural anesthesia and disinfection. The operator installs the transferred fertilized egg into the implanter and passes the cervical canal of the oviparous cow, and then carefully enters the distal end of the implant to about two-thirds in the direction of the intrauterine distal end of the oviparous cow (right).

수정란을 이식할 지점을 결정하고, 이식기의 후면 피스톤의 약 2분의 1을 전진시킴으로써 이식용 스트로의 전방부에 봉입된 1개의 수정란이 한쪽의 자궁강내에 우선적으로 이식되고 중앙부 비봉입 구획부에 충진된 착상증진물질의 약 1/2량이 주입된다.By deciding where to implant the fertilized egg and advancing about one-half of the rear piston of the implanter, one fertilized egg enclosed in the anterior part of the implant straw is preferentially implanted into one uterine cavity and filled into the central unsealed compartment. About 1/2 of the implantation promoting material is injected.

이식기를 조심스럽게 자궁중격 후방부까지 후퇴시켰다가 이식하지 않은 반대측 자궁강내 선단 방향으로 약 3분의 2지점까지 주의 깊게 이식기의 선단을 진입시킨다. Carefully retract the implant to the posterior part of the uterine septum and carefully enter the tip of the implant to about two-thirds of the endometrial distal end.

수정란을 이식할 지점을 결정하고, 이식기의 후면 피스톤의 나머지 부분을 전진시킴으로써, 자궁강내로 중앙부 비봉입 구획부에 충진된 착상증진물질의 약 1/2량이 먼저 주입되고, 동시에 후방부 봉입 구획내의 1개의 수정란이 최종적으로 자궁강내로 이식된다.By deciding where to implant the fertilized egg and advancing the remainder of the posterior piston of the implanter, approximately half the amount of implantation promoter filled in the central unsealed compartment into the uterine cavity is first injected and at the same time 1 The fertilized egg is finally implanted into the uterine cavity.

③ 본 발명의 방법에 따라 수란우의 양측 자궁강에 각각의 수정란을 이식하여 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다.(표2)③ According to the method of the present invention, each fertilized egg was implanted into the uterine cavity of the fertilized cow, and the following results were obtained (Table 2).

수정란 이식후 임신, 유산, 쌍태분만, 기형, 난산, 위약송아지 발생율Incidence of pregnancy, miscarriage, twin births, malformations, oviparous, placebo calf after fertilized egg transplant 구분division 임신율 (%)Pregnancy Rate (%) 유산발생율 (%)Abortion Rate (%) 쌍태분만율 (%)Twin Birth Rate (%) 기형발생율 (%)Malformation rate (%) 난산발생율 (%)Occurrence rate (%) 위약송아지 (%)Placebo Calf (%) 종래방법1Conventional Method 1 98/245 (40.0%)98/245 (40.0%) 9/98 (9.2%)9/98 (9.2%) 36/89 (40.4%)36/89 (40.4%) 4/125 (3.2%)4/125 (3.2%) 7/89 (7.9%)7/89 (7.9%) 12/121 (9.9%)12/121 (9.9%) 종래방법2Conventional Method 2 333/792 (42.0%)333/792 (42.0%) 57/333 (17.0%)57/333 (17.0%) 109/276 (39.1%)109/276 (39.1%) 20/385 (5.2%)20/385 (5.2%) 54/276 (19.6%)54/276 (19.6%) 54/365 (14.8%)54/365 (14.8%) 본 발명방법1 Inventive Method 1 392/712 (55.1%)392/712 (55.1%) 40/392두 (10.2%)40/392 heads (10.2%) 193/372 (51.9%)193/372 (51.9%) 11/565두 (1.9%)11/565 heads (1.9%) 32/372두 (8.6%)32/372 (8.6%) 30/554 (5.4%)30/554 (5.4%) 본 발명방법2Inventive Method 2 119/216두 (55.1%)119/216 heads (55.1%) 10/119두 (8.4%)10/119 head (8.4%) 67/109 A (61.5%)67/109 A (61.5%) 시험중Under test 시험중Under test 시험중Under test

*종래방법 1 : 인공수정후 7일경에 황체비존재측 자궁강에 2~3개의 수정란 이식* Primary Method 1: Implantation of 2-3 fertilized eggs into the uterine cavity without luteal mass 7 days after artificial insemination

*종래방법 2 : 한쪽 자궁강에만 2~3개의 수정란 이식* Conventional Method 2: Transplantation of 2-3 fertilized eggs into one uterine cavity

*본 발명의 방법1 : 비봉입 구획내 이식용메디아 충진후 양측 자궁강에 1개씩의 수정란 이식* Method 1 of the present invention: One fertilized egg implanted in both uterine cavities after medicament filling

*본 발명의 방법2 : 비봉입 구획내 착상증진물질 충진후 양측 자궁강에 1개씩의 수정란 이식* Method 2 of the present invention: One fertilized egg implanted into both uterine cavities after filling with implantation enhancer in unsealed compartment

*쌍태분만율 : 총 분만모축에 대한 총 쌍태분만모축의 백분율* Twin birth rate: the percentage of total twin births in relation to the total birth axis

*기형발생율 : 총 분만자축에 대한 총 기형자축의 백분율. 신체기형 또는 뇌신경계기형* Malformation rate: The percentage of total malformed axes relative to the total delivery axes. Somatoform or Cranial Malformations

*위약송아지 : 총 자축에 대한 분만후 포유거부 및 기립곤란자축의 백분율(기형자축제외) * Placebolic calves: Percentage of rejected and standing upset postpartum axes after total delivery (excluding malformed fetus)

A : 쌍태임신율 : 총 임신우에 대한 총 쌍태임신우. 초음파진단 A : Pregnancy rate: Total pregnancies for gestational age. Ultrasound Diagnosis

본 발명의 수정란 봉입방법에 의해 수정란을 이식용 스트로 내에 봉입하고, 이를 이용하여 수정란을 이식하는 경우, 수정란이식과 동시에 착상증진물질을 자궁내로 주입하여 보다 착상이 용이하게 됨으로써 임신율과 쌍자생산율이 향상될 뿐만 아니라, 유산.기형.난산.사고.위약 산자의 발생율이 현저히 감소시킬 수 있다. When the fertilized egg is encapsulated in a straw for implantation by the method of encapsulating the fertilized egg of the present invention, and when the fertilized egg is implanted using the fertilized egg, the implantation enhancer is injected into the uterus at the same time as the fertilized egg transplantation to facilitate the implantation, thereby improving the pregnancy rate and the twin production rate In addition, the incidence of miscarriage, malformations, nan acids, accidents, and placebo living can be significantly reduced.

특히 본 발명의 수정란 이식방법에 의하여 소의 양측자궁강내에 각각 1개씩 수정란을 이식할 수 있는 방법을 제공함으로써, 1두의 수란우를 이용하여 2두의 건강한 송아지를 효율적으로 생산할 수 있으므로 우량형질의 한우를 대량으로 증식하여 농가 소득증대 및 한우산업의 경쟁력 향상에 기여할 수 있다.In particular, by providing a method for implanting one fertilized egg into each of the two uterine cavity of the bovine by the method of transplanting the fertilized egg of the present invention, it is possible to efficiently produce two healthy calf by using one poultry cow, so that the quality of Korean beef It can grow in large quantities, contributing to raising farm incomes and improving the competitiveness of the Korean beef industry.

도1은 수정란의 이식용 스트로 독립 구획 봉입 방법을 나타낸 것이다. Figure 1 shows a method of implanting straw independent compartments for implantation of fertilized eggs.

도2는 방수 폴리비닐관내 봉인 방법을 나타낸 것이다. 2 shows a method for sealing in a waterproof polyvinyl tube.

도3은 보온병내 보온수의 계절별 시간경과에 따른 온도변화를 나타낸 것이다. Figure 3 shows the temperature change of the thermal water in the thermos according to the seasonal time.

도4는 보온병내 온도 변화에 따른 임신율을 나타낸 것이다. Figure 4 shows the pregnancy rate according to the temperature change in the thermos.

도5는 이식기 피스톤에 주입 구획 동기화 구간을 표시한 것이다. 5 shows the injection section synchronization section on the implanter piston.

도6은 수기적 조작 기술에 의해 수란우의 양측 자궁강에 각각의 수정란을 이식하는 방법을 나타낸 것이다. Fig. 6 shows a method of implanting each fertilized egg into both uterine cavities of a fertilized cow by a manual manipulation technique.

Claims (13)

이식용 스트로(straw) 내에 인간을 제외한 동물의 수정란을 봉입하는 방법에 있어서, In the method of encapsulating a fertilized egg of an animal other than a human in a transplant straw, 공기 흡입단계, 수정란 흡입단계 및 공기 흡입단계를 포함하는 수정란 봉입 구획 설정 과정을 2회 이상 수행하고, 각 수정란 봉입 구획 설정 과정 사이에 착상증진물질을 흡인하는 단계를 포함하는 수정란 비봉입 구획 설정 과정을 수행함으로써 복수의 수정란 봉입 구획을 설정하는 것을 특징으로 하는 이식용 스트로 내에 수정란을 독립적으로 봉입하는 방법.A fertilized egg-unsealed compartment setting process comprising: performing a fertilized egg-sealed compartment setting process including an air suctioning step, a fertilized egg-sucking step, and an air suctioning step twice or more, and sucking an implantation promoting material between each fertilizing egg-sealing compartment setting process; A method of independently encapsulating a fertilized egg in a transplant straw, characterized in that to establish a plurality of fertilized egg enclosing compartments. 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 각각의 수정란 봉입 구획 내에 1개 이상의 수정란을 봉입함을 특징으로 하는 방법. The method of claim 1, wherein at least one fertilized egg is enclosed within each fertilized egg encapsulation compartment. 제1항에 있어서, 상기 착상증진물질은 인터페론, 성호르몬, 비스테로이드 물질 또는 단백분해효소 중 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법. The method of claim 1, wherein the implantation promoting material is any one or more selected from interferon, sex hormones, nonsteroidal substances or protease. 제1항, 제4항 및 제5항 중 어느 한 항에 따른 방법으로 이식용 스트로 내 봉입된 수정란을 피스톤이 부착된 이식기를 사용하여, 봉입 구획 단위별로 이식하는 것을 특징으로 하는 인간을 제외한 동물의 수정란 이식방법.Animals other than humans, characterized in that the implanted egg in the implantation straw by the method according to any one of claims 1, 4 and 5 to be implanted by the unit of the enclosing compartment, using a implanter with a piston. Embryo transplantation method. 제6항에 있어서, 상기 이식기를 사용한 수정란 이식 전에, 상기 수정란이 봉입된 스트로우를 외피관 내에 포함시키고, 상기 외피관의 양 말단을 밀봉하여 이식용 스트로우를 보관 및 이동하는 과정을 더 포함하는 방법. 7. The method of claim 6, further comprising the step of including the fertilized egg-filled straw in the outer sheath and sealing both ends of the outer sheath to store and move the implantable straw prior to implantation of the fertilized egg using the implanter. . 제7항에 있어서, 상기 외피관은 두께 0.01-0.2mm, 직경 0.5cm-1cm, 길이 10cm -20cm인 것을 특징으로 하는 폴리비닐관인 것을 특징으로 하고, 상기 이식용 스트로우가 포함된 외피관은 36.5-40.0℃로 보관하며, 상기 외피관은 수평을 유지하며 이동하는 것을 특징으로 하는 방법.According to claim 7, wherein the envelope is a polyvinyl tube, characterized in that the thickness of 0.01-0.2mm, 0.5cm-1cm in diameter, 10cm-20cm in length, the envelope containing the implantable straw is 36.5 Stored at -40.0 ° C, the envelope being moved horizontally. 제6항에 있어서, 상기 수정란 이식은 수정란 봉입 구획 전.후방의 수정란 비봉입구획 내 물질을 함께 주입 또는 이식하는 것을 특징으로 하는 방법. The method of claim 6, wherein the fertilized egg implantation is characterized in that the implanted or implanted material in the fertilized non-encapsulated compartment before and after the fertilized egg encapsulation compartment. 제6항에 있어서, 상기 수정란 봉입 구획 단위별 이식 또는 주입은 상기 피스톤 후반부에 수정란 봉입 구획 및 비봉입 구획을 단위별로 표시하고, 1 단위의 수 정란 봉입 구획을 포함하여 비봉입 구획 내의 일부 지점까지 피스톤을 진입시킴으로써 수행됨을 특징으로 하는 수정란 이식방법. The method of claim 6, wherein the implantation or implantation of the fertilized egg encapsulation unit is performed by displaying the fertilized egg encapsulation compartment and the non-encapsulation compartment on a periphery side of the piston, and including one unit of fertilized egg encapsulation compartment to a point within the non-encapsulation compartment. Embryo implantation method, characterized in that performed by entering the piston. 제6항에 있어서, 상기 동물은 포유동물인 것을 특징으로 하는 방법. 7. The method of claim 6, wherein said animal is a mammal. 제11항에 있어서, 상기 포유동물은 소인 것을 특징으로 하는 방법. 12. The method of claim 11, wherein the mammal is a cow. 제12항에 있어서, 상기 독립된 수정란 봉입 구획 내 수정란을 소의 양측 자궁강 내에 각각 독립된 구획 단위별로 이식하는 방법.13. The method of claim 12, wherein the fertilized egg in the independent fertilized egg encapsulation compartment is implanted in separate compartment units in each of the bovine uterine cavity.
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