KR100732910B1 - 식물 병원균 길항 균주 바실러스 섭틸리스 ｆｂｓ―2 및이를 이용한 식물 병원균 방제용 미생물 제제 - Google Patents

식물 병원균 길항 균주 바실러스 섭틸리스 ｆｂｓ―2 및이를 이용한 식물 병원균 방제용 미생물 제제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 주요 식물 병원균에 길항성을 갖는 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) FBS-2(기탁번호 KCTC 10911BP)에 관한 것으로서, 좀더 자세히는 본 발명 균주의 배양액을 주요 작물의 잎이나 재배 토양에 처리할 경우 딸기 흰가루병, 잿빛 곰팡이병 및 근부병을 유발하는 병원성균의 증식을 억제시키는 뛰어난 효과가 있다. 따라서 본 발명은 항균활성이 우수한 신규한 미생물 바실러스 섭틸리스 및 이를 이용한 생물학적 방제용 미생물 제제를 제공하는 것을 특징으로 한다.
바실러스 섭틸리스, 식물병해, 길항, 미생물제제

Description

식물 병원균 길항 균주 바실러스 섭틸리스 ＦＢＳ―2 및 이를 이용한 식물 병원균 방제용 미생물 제제{A novel Bacillus subtilis FBS-2 active against plant fungal pathogens and preparation of microbial pesticide}
도 1은 본 발명의 신균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2 의 16S rDNA 염기서열 중 466 bp를 분석한 그림이고,
도 2는 스패로세카 마쿨라(Sphaerotheca macular)에 대한 본 발명의 신균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2의 항균 활성을 나타낸 그림이고,
도 3은 보트리티스 시네리아(Botritis cineria)에 대한 본 발명의 신균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2의 항균 활성을 나타낸 그림이고,
도 4는 푸사리움 솔라니(Fusarium solani)에 대한 본 발명의 신균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2의 항균 활성을 나타낸 그림이다.
본 발명은 신규한 바실러스 섭틸리스 미생물 균주 및 이를 이용한 식물병 방 제용 미생물 제제에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 본 발명은 식물 병원균에 길항적인 바실러스 섭틸리스 미생물 균주를 토양으로부터 분리하여 이를 바실러스 섭틸리스 FBS-2로 명명하고 이를 대량 배양하여 제조한 배양액을 주요 작물의 병원성 진균에 처리함으로써 딸기 흰가루병, 잿빛 곰팡이병 및 근부병 등 다양한 식물병원 진균을 방제하는 생물학적 방제용 미생물 제제에 관한 것이다.
식물 병원 진균에 의한 작물의 병은 해충, 잡초와 더불어 작물의 안정적 생산에 매우 큰 제한 요인으로 작용하고 있다. 많은 식물 병원성 진균 중에서도 보트리티스 시네리아(Botrytis cineria), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani)와 같이 균핵을 형성하는 병균은 대부분이 토양 전염성으로 다양한 작물에 병을 유발함으로써 막대한 피해를 초래한다. 이러한 식물 병원성 진균들은 균핵 상태로 존재하여 고온 및 저온 등 열악한 환경에서도 생존이 가능함으로써 매년 이러한 균핵이 식물에 대한 1차 감염원이 되는 것으로 알려져 있다. 이러한 균핵은 병든 조직이나 토양 중에 있으면서 열악한 환경조건에서도 생존이 가능하고 포자나 균사형태보다 이웃 길항 미생물에 의한 분해 및 포자나 억제에도 강하기 때문에 효과적인 방제를 기대하기가 어려운 실정이다. 이러한 병원 진균의 방제를 위한 방법으로서는 재배환경을 개선해 주는 물리적 방법, 살균제를 이용한 화학적 방법 및 미생물을 이용한 미생물학적 방법 등이 있다. 그러나 물리적 방제만으로는 큰 효과를 기대할 수 없으며, 화학적 방제는 최근 약제 저항성 병원균의 출현으로 포장에서의 방제효과가 크게 저하되었을 뿐만 아니라, 화학농약의 다량 살포에 의한 심각한 환경오염으 로 이어지고 있다. 또한, 화학합성 농약에 의한 방제는 사람과 동물에 대한 독성 문제, 토양 및 작물체 내의 잔류 독성 문제, 포장 용기에 의한 환경오염 문제 등으로 인하여 점차 그 사용이 규제되고 있으며, 이미 선진 각국에서는 이들 화학합성 농약에 대한 구체적인 규제 강화 등으로 사용이 크게 제한되고 있다. 따라서 최근에는 이의 대체 방안으로 미생물학적 방제에 관한 연구가 최근 활발하게 진행되어 오고 있으며, 환경친화적 농업을 위한 효과적인 방제방법의 개발이 절실히 요구되고 있다.
환경적으로 안전하고 효과적인 방제 방법으로는 미생물 제제를 이용한 생물학적 방제가 중요한바, 1970년대 초반 이후로 국내외에서 이에 관한 연구가 여러 연구자에 의해 많이 수행되고 있다. 최근 세계적으로 10종 이상의 미생물 제제가 상품화되었고 환경적으로 안전한 지속농업을 지향하는 사회적 인식변화로 미생물 제제 개발에 대한 연구가 급격히 증가하고 있다. 현재 외국에서 개발되어 상품화된 대표적인 미생물 제제는 트리코데르마 하지아눔(Trichoderma harzianum)과 트리코데르마 폴리스포룸(T. polysporum)으로 만들어져 목재 부후균을 억제하는 BINAB T(1988, E.R. Butts International), 글리오클라디움 비렌스(Gliocladium virens)를 이용한 온실 화훼작물 유묘의 병 방제제인 GlioGard(1990, W. R. Grace Co.), 트리코데르마 하르지아눔을 이용한 Fstop(1991, Kodak), Trichodex(1997년, 이스라엘에서 개발)과 길항세균 바실러스 섭틸리스를 이용한 종자처리제인 KODIAK (1990, Gustafson), 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens)를 이용하여 목화의 리족토니아나 피티움(Pythium sp.) 모 잘록병을 방제하는 DAGGER(1990, Ecogen Inc.), 슈도모나스 세파시아(P. cepacia)를 이용한 여러 작물의 종자 처리제인 BLUE CIRCLE(1990, Stine Microbial Products), 그리고 길항방선균 스트렙토마이세스 그리세오비리디스(Streptomyces griseoviridis)를 이용한 푸사리움(Fusarium) 시들음병, 모 잘록병 방제제인 MYCOSTOP(1985, Kemira Oy Biocontrol of Finland)등이 있다. 국내에서는 1970년대 초반부터 인삼 뿌리 썩음병의 생물학적 방제연구를 시작으로 고추역병, 오이 딸기 시들음병, 참깨 모 잘록병과 잿빛 곰팡이병의 생물학적 방제에 관한 연구가 계속 수행되어 왔으나 결과는 미미한 실정이다. 이외에도 미생물 농약으로 특허된 살균제용 미생물로 세균류에는 바실러스 속(Bacillus sp. BS555, KCTC 8821P), 바실러스 폴리목사(Bacillus polymoxa B36, FERM BP-6068), 슈도모나스 오레오파시엔스(Pseudomonas aureofaciens B5, FERM BP-6067), 엔테로박터 클로아제(Enterobacter cloacae B51, FERM BP-6069) 및 항진균 물질을 분비하는 방선균인 스트렙토마이세스 속의 Bom1(제 KFCC 10992호), Bom2(제 KFCC 10993호) 등이 있다. 또한, 병원성 진균에 대한 길항능력을 갖는 미생물으로 바실러스 서브틸리스 바 아밀오리크파시엔스(Bacillus subtilis var. amyloliquefaciens KL114, KCTC 8913P), 바실러스 아밀로리쿼페이션스(Bacillus amyloliquefaciens KTGB0202 KCTC 10564BP), 알칼리진스 파에칼리스(Alcaligenes faecalis KL1179, KCTC 8914P), 슈도모나스 아에루기노사( Pseudomonas aeruginosa KL1121, KCTC 8915P), 슈도모나스 아우란티아카(Pseudomonas aurantiaca KL1326, KCTC 8916P), 바실러스 서브틸리스 및 슈도모나스 플루오레슨스 등이 있으며, 방선균 스트렙토마이세스 속에 대한 길항능력을 갖는 균으로는 슈도모나스 플루오레슨 스 바이오바 1(Biovar 1)이 있고, 곰팡이류는 트리코델마 하지아늄, 페니실리움 속(Penicillium sp.), 아스퍼질러스 속( Aspergillus sp.), 중복기생 곰팡이균인 아크레모니움 스트릭튬 BCP(Acremonium strictum, KCTC 0639BP) 등이 연구 중이다.
길항 미생물에 의한 생물학적 방제의 원리는 이들이 생산하는 항생물질에 의한 항생작용, 세포벽 분해효소에 의한 기생 또는 포식작용, 그리고 영양물 경쟁이나 거점(niche) 경쟁 등을 통한 병원균의 밀도 감소 또는 발병능력 감소 및 비병원성 균주 또는 약병원성 균주를 이용하는 교차보호(cross protection)와 기주 저항성 유도 등에 주된 작용기작을 두고 있다. 예를 들어, 트리코데르마 속과 글리오클라디움 속이 분비하는 항생물질 또는 휘발성 물질, 독소, 특수한 저해물질에 의한 진균병의 억제작용이 공지되어 있다. 한편, 기생 또는 포식작용에 의한 길항작용은 최근 들어 활발하게 연구되고 있는데 길항 세균들이 분비하는 진균의 세포벽 분해효소인 키티나제(chitinase), 글루카나제(glucanase), 셀룰라제(cellulase) 등에 의한 병원균의 용해작용이 주된 작용기작으로 알려져 있다.
본 발명은 식물병원 진균 스패로세카 마쿨라, 보트리티스 시네리아, 푸사리움 솔라니 등의 식물병원성진균에 대한 항균 활성을 가지는 새로운 균주 및 배양액을 제공함으로써 딸기흰곰팡이병, 잿빛곰팡이병 및 근부병 등의 방제에 이용하고, 향후 벼 도열병, 고추 역병균 및 오이 잿빛곰팡이병을 방제할 수 있는 생물학적, 친환경적 약제 또는 방제법이 제공될 수 있도록 하기 위한 것이다.
본 발명에서는 각종 작물의 병해를 유발하는 다양한 병원성 미생물들을 효과적으로 방제할 수 있도록 병원성 미생물들에 대하여 우수한 길항작용을 갖는 미생물을 전국 각지의 토양으로부터 탐색한 결과 신규한 바실러스 섭틸리스를 확보하고, 동정하고, 대량 배양하여 새로운 환경친화형 미생물제제를 제조함으로써 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명자들은 스패로세카 마쿨라(Sphaerotheca macular), 보트리티스 시네리아(Botritis cineria), 푸사리움 솔라니(Fusarium solani)에 강한 길항 효과를 나타내며, 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani), 클라도스포리움 풀붐(Cladosporium fulvum)에 길항력이 있는 미생물 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 균주를 토양으로부터 분리하는 단계; 상기 분리한 바실러스 섭틸리스 균주의 배양액을 한천 고체 배지에 처리한 후 곰팡이 병원균을 접종하여 항균 활성 정도를 측정함으로써 바실러스 섭틸리스 균주의 길항력을 검정하는 단계; 분리된 길항 미생물 바실러스 섭틸리스 균주의 동정 단계; 분리된 길항 미생물 바실러스 섭틸리스 균주의 대량 배양 단계를 거쳐 식물 병원균 길항 균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP)를 얻었다.
본 발명은 상기 식물 병원균 길항 균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP)에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 자연에서 분리된 식물 병해에 길항성을 지니는 상기 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP)를 배지에서 성장 발육시키고, 희석배율 100∼1,000배로 희석시켜 제조된 식물 병원균 방제용 미생물 제제에 관한 것이다.
뿐만 아니라, 본 발명은 상기 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP)의 세포, 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식물 병원균 방제용 미생물 제제에 관한 것이다.
나아가, 본 발명은 상기 진균을 배양하여 수득한 세포, 배양액 및 이들 혼합물을 통상의 부형제에 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 식물병원균 방제용 미생물 제제의 제조 방법에 관한 것이다.
이하, 본 발명의 구성을 하기 실시예에 의하여 좀더 자세하게 설명하고자 한다. 단, 아래의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예의 기재범위에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 균주의 분리 및 동정
1-1. 균주 분리
본 실시예에서는 스패로세카 마쿨라(Sphaerotheca macular) 및 보트리티스 시네리아(Botritis cineria)를 시험 균주로 하여 이에 길항력이 있는 미생물을 분리하기 위하여 전국 각지에서 토양 및 퇴비시료를 채취하였다. 채취한 시료 1g에 멸균수 10㎖를 혼합하여 30℃에서 30분간 진탕한 후, 토양 희석 한천평판법으로 104 배까지 희석하여 희석액 0.1㎖를 LB 배지(표 1의 조성)에 분주하여 배지 전면에 골고루 편 다음, 30℃ 항온기에서 3일간 배양 후 진균의 단일 콜로니(single colony)를 순수 분리하여 사면 배지에 옮겨 4℃에서 보관하였다. 각각의 진균은 스패로세카 마쿨라 및 보트리티스 시네리아를 시험균주로 하여 이에 공통적으로 강한 항균력을 나타내는 가장 우수한 하나의 균주를 선별하였다.
배지 성분 농도 (g/L)
효모추출물 5
트립톤 10
염화나트륨 10
1-2. 균주 동정
상기에서 선별한 균주에 대한 동정을 하기와 같이 실시하였다.
가. 형태적, 생리학적 특성
선별한 균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2를 영양 배지에 접종한 후 30℃에서 3일간 배양한 후 형태학적 및 생리학적 특성을 관찰한바, 단일 콜로니로 생성되며 콜로니의 표면은 매끈한 형태였으며 현미경으로 관찰한 결과, 간균의 모양을 하였다. 또한 바실러스 섭틸리스 FBS-2의 생리적인 특성을 조사한 결과, 운동성이 있는 그램 양성균이었다. 바실러스 섭틸리스 FBS-2의 자세한 특성은 표에 나타내었다.
본원 균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2 공시균주 바실러스 섭틸리스 KCTC 1021(ATCC 6033)
그램(Gram)/형태(Shape) ＋/R ＋/R
포자(Spores) ＋ ＋
운동성(Motility) ＋ D
호기조건에서의 성장(Growth in air) ＋ ＋
혐기조건에서의 성장 (Growth anaerobically) ＋ D
카탈라제(Catalase)활성 ＋ ＋
옥시다제(Oxidase)활성 ＋ d
포도당(Glucose(acid)) ＋ D
O/F/- O/F O/F/-
포자 형태(Spore shape) X X
포자 위치(Spore position) U U
45℃에서의 성장 ＋ ＋
65℃에서의 성장 － －
pH5.7에서의 성장 ＋ ＋
7% NaCl에서의 성장 ＋ ＋
구연산 이용(Utilization of citrate) ＋ ＋
포도당 브로쓰에서의 혐기적 성장 (Anaerobic growth in glucose broth) d －
탄수화물(Carbohydrates, acid from:)
포도당(Glucose) ＋ ＋
아라비노스(Arabinose) ＋ ＋
만니톨(Mannitol) ＋ ＋
자일로스(Xylose) ＋ ＋
VP test ＋ ＋
전분 가수분해(Starch hydrolysis) － －
질산 환원(Nitrate reduction) ＋ ＋
인돌(Indole) － －
젤라틴 가수분해(Gelatin hydrolysis) ＋ ＋
카제인 가수분해(Casein hydrolysis) ＋ ＋
우레아제(Urease) w d
LV － －
라이소자임 민감성 (Lysozyme sensitivity) r d
D-Different reactions in different species of the genus.
d-Different reactions in different strains.
O-Oxidation. F-Fermentation.
T-terminal spore.
X-spore oval. V-subterminal spore. U-central spore.
r-resistant. s-sensitive.
R-Rod-shaped(bacillus). w-Weak reaction.
나. 16S rDNA 염기서열 분석
선별한 균주의 계통분류학적인 위치를 확인하기 위하여 전체 16S rDNA 염기서열의 30% 이상의 염기서열에 해당되는 466bp의 염기서열을 분석하였다(도 1). 선별한 균주로부터 16S rDNA 분절을 프라이머(primer) 세트로 PCR하여 증폭시킨 후, 증폭산물을 정제하여 TOPO TA Cloning　키트(Invitrogen)에 삽입(ligation)하고, 이를 대장균에 형질전환하였다. 형질전환된 대장균으로부터 플라스미드(plasmid)를 추출한 후 자동염기서열 분석장치(Applied Biosystems model 373A automatic sequencer)와 키트(BigDye Terminator Cycle Sequencing kit, Perkin-Elmer Applied Biosystems)를 이용하여 염기서열을 분석하였다. 선별한 균주의 16S rDNA는 유전자은행의 블라스트 프로그램를 이용하여 상동성을 분석하였다. 그 결과 선별된 균주는 바실러스 섭틸리스와 100%의 상동성을 나타냄으로써, 본 발명의 균주는 바실러스 섭틸리스 균주인 것으로 최종 확인되었다. 따라서 이를 2006년 2월 23일자로 한국생명공학연구원 내 유전자원센타에 특허균주로 기탁하고 기탁번호 제 KCTC 10911BP를 부여받았다.
실시예 2: 각종 식물 병원균에 대한 길항력 및 항균범위 검정
식물 병원균으로는 식물에 막대한 피해를 야기하는 다양한 병원균인 딸기흰가루병균(Sphaerotheca macular), 잿빛 곰팡이병균(Botrytis cineria), 근부병균(Fusarium solani), 입고병·잘록병균(Pythium sp.), 고추역병균(Phytophtora capsici), 흑부병균(Alternaria citri), 흑성병균(Cladosporium fulvum), 도열병균(Pyricularia oryzae), 브라운패취(Rhizoctonia solani)의 9종의 시험균을 대상으로 바실러스 섭틸리스의 길항력을 검정하여 항균 범위를 조사하였다. 감자한천배지(PDA, Difco)를 살균한 후, 50℃의 배지에 각 병원균의 균사, 세포, 포자를 혼합 평판하고 배지가 완전히 굳은 다음 길항미생물을 배양한 배양액을 페이퍼디스크(직경 8mm)에 묻힌 후 병원균이 혼합된 페트리디쉬(petri-dish)에 올려놓고 각종 병원균의 생육이 잘 되는 28℃에서 3∼4일 배양하였다. 길항미생물이 각종 병원균에 미치는 영향을 저지원의 직경으로 조사하고, 이를 하기 표 3에 나타내었다. 표 3에서 볼 수 있는 바와 같이, 본 발명의 길항미생물 바실러스 섭틸리스 균주의 식물 병원균과의 길항효과에 대한 검정 결과, 본 발명의 상기 균주는 딸기흰가루병의 원인균인 스패로세카 마쿨라, 잿빛곰팡이병의 원인이 되는 보트리티스 시네리아 및 근부병 원인이 되는 푸사리움 솔라니에 대하여 강한 길항력을 나타내었으며, 흑성병의 원인이 되는 클라도스포리움 풀붐, 입고병과 잘록병의 원인균 피시움속, 고추역병병균인 파이토프소라 카프시시에 대하여서도 길항 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
검정시험균(곰팡이) 활성정도
보트리티스 시네리아(Botrytis cineria) +++
클라도스포리움 풀붐(Cladosporium fulvum) +
푸사리움 솔라니(Fusarium solani) +++
파이토프소라 카프시시(Phytopthora capsici) +
피시움 아파니더마툼(Pythium aphanidermatum) +
피시움 얼티뭄(Pythium ultimum) +
스패로세카 마쿨라(Sphaerotheca macular) +++
리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) -
피리쿨라리아 오리재(Pyricularia oryzae) -
+++ : 저지원(clear zone)의 크기 10 ~ 15 mm, ++ : 5 ~ 10 mm,
+ : 1 ~ 5 mm, - : 활성없음
우수한 길항성을 나타내는 스패로세카 마쿨라, 보트리티스 시네리아과 푸사리움 솔라니에 대하여 한천 확산법(agar diffusion method)을 이용하여 바실러스 섭틸리스의 활성을 재검증하였다. 도 2, 3 및 4는 각각 바실러스 섭틸리스의 스패로세카 마쿨라, 보트리티스 시네리아과 푸사리움 솔라니에 대한 활성을 나타낸 결과로서, 도 2, 3 및 4에서 보는 바와 같이 매우 우수한 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
실시예 3: 바실러스 섭틸리스의 배양 조건
길항 미생물 바실러스 섭틸리스 균주는 2.5ℓ 발효기를 사용하여 배양되었으며, 이때 사용한 배지는 표 1과 같은 조성으로 pH를 7.0으로 조절한 통상적인 액체배지를 제조하여 사용하였다. 종배양은 500㎖ 삼각플라스크에 표 1과 같은 조성으로 pH를 7.0로 조절하여 100ml의 액체 배지를 이용하여 배양하였다. 배양조건은 30℃ , 200rpm으로 24시간 진탕 배양한 후 바실러스 섭틸리스가 포함된 종배양액 5%(v/v)를 1.5ℓ 생산 배지를 함유한 2.5ℓ 발효기에 접종하고 30℃에서 250rpm, 1 vvm의 조건으로 72시간 동안 배양하였다.
실시예 4: 바실러스 섭틸리스 배양액의 희석 정도에 따른 항균활성의 변화
실시예 3의 조건으로 바실러스 섭틸리스를 배양하여 배양액을 일정한 비율로 희석한 후, 실시예 2와 같은 방법으로 배양액의 희석 정도에 따라 딸기흰가루병의 원인균인 스패로세카 마쿨라, 잿빛곰팡이병의 원인이 되는 보트리티스 시네리아 및 근부병 원인이 되는 푸사리움 솔라니에 대하여 항균활성을 측정하였다(표 4).
시험균 희석배수 스패로세카 마쿨라 보트리티스 시네리아 푸사리움 솔라니
원액 +++ +++ +++
2배 희석 +++ ++ +++
5배 희석 +++ + ++
10배 희석 ++ + ++
20배 희석 ++ - +
50배 희석 + - +
100배 희석 - - -
+++ : 저지원(clear zone)의 크기 10 ~ 15 mm, ++ : 5 ~ 10 mm,
+ : 1 ~ 5 mm, - : 활성없음
이상 실시예를 통하여 설명한 바와 같이, 토양에서 분리한 본 발명 길항 미생물 신균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2 KCTC 10911BP는 딸기 흰가루병의 원인이 되는 스패로세카 마쿨라, 잿빛곰팡이병의 원인이 되는 보트리티스 시네리아 및 근부병 원인이 되는 푸사리움 솔라니에 대해서 우수한 억제 효과가 있을 뿐만 아니라 있어 흑성병의 원인이 되 클라도스포리움 풀붐, 입고병과 잘록병의 원인균 피시움속, 및 고추역병병균인 파이토프소라 카프시시에도 활성을 보임에 따라 환경친화적인 무공해 생물농약으로 사용할 경우, 생태계 파괴 및 인축 독성 문제를 해소할 수 있으므로 농약산업 및 환경 산업에 매우 유용한 발명이다.
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Claims (4)

  1. 식물 병원균 길항 균주 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP).
  2. 자연에서 분리된 식물 병해에 길항성을 지니는 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP)를 배지에서 성장 발육시키고, 희석배율 0∼20배로 희석시켜 제조된 식물 병원균 방제용 미생물 제제.
  3. 제2항에 있어서, 상기 바실러스 섭틸리스 FBS-2(Bacillus subtilis FBS-2; 기탁번호 KCTC 10911BP)의 세포, 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식물 병원균 방제용 미생물 제제.
  4. 제2항에 있어서, 상기 미생물 제제를 적용할 수 있는 식물의 병원균은 딸기흰가루병의 원인균인 스패로세카 마쿨라, 잿빛곰팡이병의 원인이 되는 보트리티스 시네리아, 근부병 원인이 되는 푸사리움 솔라니, 흑성병의 원인이 되는 클라도스포리움 풀붐, 입고병과 잘록병의 원인균 피시움속, 고추역병 병균인 파이토프소라 카 프시시 중 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 식물 병원균 방제용 미생물 제제.
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