KR100581035B1 - Potassium analysis method using chromoionophore - Google Patents

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Abstract

본 발명은 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법에 관한 것으로, 보다 자세하게는 칼륨에 선택적으로 결합하는 이온인식 물질에 발색성 화합물을 결합하여 광의 흡광도를 측정함으로써 소량의 시료를 이용하여 칼륨에 대한 정량분석을 간단하게 실시하면서도 검출한계를 향상시킬 수 있는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a potassium analysis method using a chromophoric ion recognition material, and more particularly, quantitative analysis of potassium using a small amount of sample by measuring the absorbance of light by binding a chromophoric compound to an ion recognition material selectively binding to potassium The present invention relates to a method for improving the detection limit while simplifying the operation.

본 발명의 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법은 주입구에 칼륨 샘플 용액 및 칼륨에 선택적으로 결합하는 이온인식 물질 용액이 주입되는 단계; 상기 주입된 용액이 마이크로 비드 구조물을 통과하는 단계; 상기 마이크로 비드 구조물을 통과한 용액이 마이크로 채널로 유입되는 단계; 발광부에서 소정 파장의 광이 방출되는 단계; 상기 방출된 광이 마이크로 채널을 통과하는 단계; 및 상기 마이크로 채널을 통과한 광이 검출기로 입사되어 검출되는 단계로 이루어짐에 기술적 특징이 있다.Potassium analysis method using the chromogenic ion recognition material of the present invention comprises the steps of injecting a potassium sample solution and an ion recognition material solution to selectively bind to the potassium inlet; Passing the injected solution through a microbead structure; Introducing a solution passing through the microbead structure into a microchannel; Emitting light of a predetermined wavelength from the light emitting unit; Passing the emitted light through a microchannel; And a step in which light passing through the microchannel is incident to and detected by a detector.

따라서, 본 발명의 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법은 칼륨과 선택적으로 결합하는 이온인식 물질에 발색성 화합물을 결합하여 광의 흡광도를 측정함으로써 소량의 시료를 이용하여 칼륨에 대한 정량분석을 간단하게 실시하면서도 검출한계를 향상시킬 수 있는 효과가 있다. 즉, 본 발명의 측정부를 구성하는 마이크로 채널은 종래의 분석장치에서 사용되는 시료의 양에 비해 그 양을 획기적으로 줄일 수 있는 장점을 제공하며, 칼륨 이온과의 선택성이 우수한 이온인식 물질을 사용함으로써 검출한계를 ppb 이하 수준으로 낮출 수 있다.Therefore, the potassium analysis method using the chromophoric ion recognition material of the present invention simply performs a quantitative analysis of potassium using a small amount of sample by measuring the absorbance of light by binding the chromophoric compound to an ion recognition material that selectively binds to potassium. In addition, there is an effect that can improve the detection limit. That is, the microchannel constituting the measuring unit of the present invention provides an advantage that the amount of the sample can be significantly reduced compared to the amount of the sample used in the conventional analytical device, by using an ion recognition material having excellent selectivity with potassium ions Detection limits can be lowered to levels below ppb.

이온선택성, 리간드, 칼륨, 금속 착화합물Ion Selectivity, Ligands, Potassium, Metal Complexes

Description

발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법 {Potassium analysis method using chromoionophore} Potassium analysis method using chromogenic ion recognition material {Potassium analysis method using chromoionophore}             

도 1은 본 발명에 의한 칼륨 분석장치의 평면도.1 is a plan view of a potassium analysis device according to the present invention.

도 3은 본 발명에 의한 칼륨 분석장치의 측정부의 정면도.Figure 3 is a front view of the measuring unit of the potassium analysis device according to the present invention.

본 발명은 발색성 이온인식 물질(luminescent chromoionophore)을 이용한 칼륨(Potassium; K) 분석방법에 관한 것으로, 보다 자세하게는 칼륨에 선택적으로 결합하는 이온인식 물질에 발색성 화합물을 결합하여 광(光)의 흡광도(absorbance)를 측정함으로써 소량의 시료를 이용하여 칼륨에 대한 정량분석을 간단하게 실시하면서도 검출한계를 향상시킬 수 있는 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for analyzing potassium (Potassium; K) using a luminescent chromoionophore, and more particularly, to absorb light of light by combining a chromogenic compound with an ion recognition material that selectively binds to potassium. The present invention relates to a method for improving the detection limit while simplifying the quantitative analysis of potassium using a small amount of sample by measuring the absorbance.

칼륨 농도는 임상적으로 중요한 지표 중 하나이다. 우리 인체 내의 혈청에 존재하는 칼륨의 농도가 낮고 세포 내와 세포 외의 농도의 비(比)가 심하게 차이가 나면 인체의 신진대사에 막대한 지장을 준다고 알려져 있다. 병리학적인 예를 들어 보면 근육이나 적혈구 같은 조직 1 kg에는 약 3.3 g의 칼륨이 포함되어 있는데, 근육손상이나 용혈, 내출혈이 있는 경우 이들 세포들이 손상을 받게 되면 혈장으로 칼륨을 배출하여 고칼륨혈증(hyperkalemia)이 나타난다. 또한, 혈청 내 칼륨 농도가 증가되거나 감소되는 경우에는 신경-근 체계에 쇠약, 마비 등의 심각한 부작용을 일으킬 수 있으며, 심지어 심근에 심한 부정맥(arrhythmia) 등을 일으켜 사망할 수도 있기 때문에 혈청 내 칼륨 이온 농도를 정확히 측정하거나, 제거하는 것은 임상적으로 매우 중요하다.Potassium concentration is one of the clinically important indicators. It is known that the low concentration of potassium in the serum of our body and the severe difference between the intracellular and extracellular concentrations greatly affect the metabolism of the human body. Pathological example, 1 kg of tissues such as muscle or erythrocytes contains about 3.3 g of potassium.In case of muscle damage, hemolysis or internal bleeding, when these cells are damaged, they release potassium into the plasma to cause hyperkalemia ( hyperkalemia). Increased or decreased serum potassium levels can cause serious side effects such as weakness and paralysis in the nervous-muscular system, and even death due to severe arrhythmia in the myocardium. Accurately measuring or removing concentrations is of great clinical importance.

현재 임상 검사실에서 칼륨농도를 측정하기 위해 흔히 쓰이는 방법은 방출 광도측정법(emission photometry)과 이온특이성 전위차전극법(ion-specific potentiometric electrodes)이 있다. 칼륨농도를 측정하는 경우에는, 칼륨 결합제로 항생제인 발리노마이신(valinomycin)을 이용한 액체 이온교환성 막전극(liquid ion-exchange membrane electrode)을 칼륨선택전극으로 사용하는 것이 전위차 선택비(potentiometric selectivity ratio, K Pot K/Na) 2.5×10-4으로 칼륨이온에 대해 가장 선택적이라고 알려져 있다.Current methods commonly used to measure potassium levels in clinical laboratories include emission photometry and ion-specific potentiometric electrodes. In the case of measuring the potassium concentration, the use of liquid ion-exchange membrane electrode using the antibiotic valinomycin as the potassium binder as the potassium selection electrode is a potentiometric selectivity ratio. , K Pot K / Na ) 2.5 × 10 −4 , which is known to be the most selective for potassium ions.

그러나 일반적으로 막분리나 금속이온 추출실험은 대상 음이온이 유기상에서 불용성이기 때문에 실시하는 데 많은 어려움이 있다. 이는 막상에서 착물이 형성될 때 염화염(chloride), 질산염(nitrate), 황산염(sulfate)과 같은 굳은(hard) 음이온의 동반이동으로 착물이 유기상에서 침전될 가능성이 크고 실제로 의료현장이나 산업현장에서 대상 금속에 대한 음이온으로 염화염이나 질산염 이온들이 주종을 이 루고 있으므로 막전극법은 실제 임상에서 칼륨이온 결합제로 사용하는 데 제한이 있다. In general, however, membrane separation or metal ion extraction experiments have many difficulties in conducting the target anions because they are insoluble in the organic phase. This is due to the co-movement of hard anions such as chloride, nitrate, and sulfate when complexes are formed on the membrane, and the complexes are likely to precipitate in the organic phase and are actually used in medical or industrial fields. Since the chloride or nitrate ions are predominantly anions to the target metals, the membrane electrode method is limited in its use as a potassium ion binder in actual clinical practice.

상기의 방법 이외에도 불꽃방식-원자흡수분광법(flame-Atomic Absorption Spectorscopy; FAAS)이 이용된다. 원자분광법이란, 시료를 높은 온도에서 기화시켜 생성된 원자나 이온의 전자전이로 방출(emission), 흡수(absorption), 형광(fluorescence)하는 복사선의 세기를 측정하여 원소를 정량하는 방법이다. 이 방법을 사용하면 70여개의 원소를 ppm 에서 ppb 농도 범위까지 정량할 수 있다. 원자분광법이 일반적인 분광법과 구별되는 근본적인 특징은 시료를 원자화(atomization)시킨다는 점이다. 검출기(detector)로 흡광도를 측정하는 기본원리는 크게 세 가지로 나누어진다. 첫 번째로 원자흡수는 바닥 상태의 원자가 광원으로부터 쪼여주는 빛을 흡수해 들뜬 상태로 될 때, 흡수되는 빛의 양을 검출해 내는 것을 말한다. 두 번째로 원자 방출(atomic emission)은 불꽃의 높은 열에너지로 인해 들뜬 상태로 전이한 전자들이 방출하는 빛을 검출하는 것이다. 세 번째로 원자 형광(atomic fluorescence)은 원자들이 먼저 복사선을 흡수하여 들뜬 후 흡수한 빛과 다른 파장의 빛을 방출하는데 이를 검출해 내는 방법이다. 이러한 원자분광법 중에 미량 금속원소의 검출에 널리 사용되고 있는 FAAS법은, 시료를 에어로졸(aerosol) 형태로 분무해 불꽃에 통과시키면 증기형태로 원자화된 중성원자가 형성되고 상기 중성원자가 바닥 상태에서 들뜬 상태로 되기 위해 특정파장의 빛을 흡수하는데 이를 검출하여 정량분석을 행하는 방법이다.In addition to the above method, flame-Atomic Absorption Spectorscopy (FAAS) is used. Atomic spectroscopy is a method of quantifying an element by measuring the intensity of radiation emitted, absorbed, and fluorescence by electron transition of atoms or ions generated by vaporizing a sample at a high temperature. Using this method, 70 elements can be quantified in the ppm to ppb concentration range. A fundamental feature distinguishing atomic spectroscopy from general spectroscopy is that it atomizes the sample. There are three basic principles of measuring absorbance with a detector. Firstly, atomic absorption refers to detecting the amount of light absorbed when the ground atoms absorb light emitted from the light source and become excited. Second, atomic emission is the detection of light emitted by electrons that transition to an excited state due to the high thermal energy of the flame. Third, atomic fluorescence is a way to detect when atoms first absorb and radiate radiation and then emit light of a different wavelength from that absorbed. The FAAS method, which is widely used for the detection of trace metal elements in such atomic spectroscopy, sprays a sample in the form of an aerosol and passes it through a flame to form a neutral atom atomized in vapor form, and the neutral atom is excited in the ground state. To absorb the light of a specific wavelength, it is a method of quantitative analysis by detecting it.

그러나, 상기와 같은 종래의 분석방법은 다음과 같은 문제점이 있다. 시료의 전처리 과정이 매우 복잡하고, 특히 생체시료의 분석에는 매우 숙달된 분석기기의 운영이 필요하며 장비의 소모도 심하다. 또한 정량분석의 검출한계가 ppm 수준이며 시료의 필요량이 많고 장치의 유지비도 많이 요구된다. 특히 FAAS의 경우 장치 작동시 항시 폭발의 위험이 있다.However, the conventional analysis method as described above has the following problems. The pretreatment of the sample is very complex, especially the analysis of the biological sample requires the operation of a very skilled analyzer and the equipment is very expensive. In addition, the detection limit of the quantitative analysis is ppm level, a large amount of sample required and a high maintenance cost of the device. Especially in the case of FAAS, there is always a risk of explosion during operation.

따라서, 본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 칼륨과 선택적으로 결합하는 이온인식 물질에 발색성 화합물을 결합하여 광의 흡광도를 측정함으로써 소량의 시료를 이용하여 칼륨에 대한 정량분석을 간단하게 실시하면서도 검출한계를 향상시킬 수 있는 방법을 제공함에 본 발명의 목적이 있다.
Accordingly, the present invention is to solve the problems of the prior art as described above, quantitative analysis of potassium using a small amount of sample by measuring the absorbance of light by combining a chromogenic compound to an ion recognition material that selectively binds to potassium. It is an object of the present invention to provide a method which can improve the detection limit while being simple.

본 발명의 상기 목적은 주입구에 칼륨 샘플 용액 및 칼륨에 선택적으로 결합하는 발색성 이온인식 물질 용액이 주입되는 단계; 상기 주입된 용액이 마이크로 비드 구조물을 통과하는 단계; 상기 마이크로 비드 구조물을 통과한 용액이 마이크로 채널로 유입되는 단계; 발광부에서 소정 파장의 광이 방출되는 단계; 상기 방출된 광이 마이크로 채널을 통과하는 단계; 및 상기 마이크로 채널을 통과한 광이 검출기로 입사되어 검출되는 단계를 포함하여 이루어진 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법에 의해 달성된다.The object of the present invention is a step of injecting a potassium sample solution and a solution of the chromophoric ion recognition material to selectively bind to potassium in the inlet; Passing the injected solution through a microbead structure; Introducing a solution passing through the microbead structure into a microchannel; Emitting light of a predetermined wavelength from the light emitting unit; Passing the emitted light through a microchannel; And it is achieved by the potassium analysis method using a chromogenic ion recognition material comprising the step of detecting the light passing through the micro-channel incident to the detector.

먼저, 발색성 이온인식 물질에 대해 알아보면 다음과 같다. 대부분의 자연계에 존재하는 이온인식 물질(ionophore)이 항생물질로, 생체막을 통하여 양이온을 선택적으로 이동시킨다고 알려진 이래로 이온인식 물질을 이용한 금속이온의 분리기술이 많은 관심의 대상이 되어 왔으며, 이러한 이온인식 물질은 말단기에 의하여 유사동공 구조를 이루어 양이온에 대해 선택성을 나타내고 양이온과 착물을 이룰 때 전자 주게원자(electron donor-atom)와의 정전기적 인력에 의해 양이온을 안으로 감싼다고 알려져 있다. 이와같이, 이온인식 물질을 이용한 금속이온의 분리에 관한 연구가 유기화학의 한 부류로 자리를 잡으면서 최근에는 이에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. First, the chromogenic ion recognition material is as follows. Since ionophores, which are present in most of nature, are known to be antibiotics and selectively transfer cations through biofilms, separation of metal ions using ion recognition materials has been of great interest. The material is known to form quasi-pores by end groups, which are selective for cations and to enclose the cations by electrostatic attraction with electron donor-atoms when complexed with cations. As such, the research on the separation of metal ions using ion recognition materials has recently been actively conducted.

상기 이온인식 물질의 일례를 소개하면 다음과 같다. 하기의 화학식 1은 발색성 칼릭스[4]아렌 아자크라운 에테르(calix[4]arene azacrown ether) 화합물이다. 상기 화합물은 금속이온에 대한 선택성이 우수한 유기 리간드로서, 구조적인 견고성을 가진 칼릭스[4]아렌과 발색성 아자 크라운 에테르를 결합시킨 화합물이다. 상기 화합물이 금속이온에 대해 선택적 결합력이 우수한 이유는 금속이온과 킬레이트(chelate) 결합을 하는 유기 리간드의 내부가 동공(hole) 구조를 가지기 때문이며, 리간드의 산소이온이 전자 주게의 역할을 함으로써 금속 양이온과 정전기적 인력에 의한 결합을 하기 때문이다. An example of the ion recognition material is as follows. Formula 1 below is a chromogenic [4] arene azacrown ether compound. The compound is an organic ligand having excellent selectivity to metal ions, and is a compound in which calyx [4] arene and structurally colored aza crown ethers are bonded. The reason why the compound has an excellent selective binding ability to metal ions is that the organic ligand that chelates with the metal ion has a hole structure, and the oxygen ion of the ligand acts as an electron donor, thereby providing a metal cation. This is because they are bonded by electrostatic attraction.

Figure 112004001394746-pat00001
Figure 112004001394746-pat00001

상기의 일례에서 알 수 있듯이 이온인식 물질의 화합물은, 유기 리간드가 킬레이트 결합을 통해 금속 착화합물(metal complex)을 형성함으로써 금속 자체만 존재할 때는 나타나지 않는 흡광, 발광 또는 형광특성을 가지게 되어 분광분석에 의한 정량분석에 이용될 수 있다.As can be seen from the above example, the compound of the ion recognition material has an absorption, luminescence or fluorescence characteristic which does not appear when only the metal itself exists because the organic ligand forms a metal complex through chelate bonds. It can be used for quantitative analysis.

다음, 상술한 발색성 이온물질이 광흡수를 이용한 분광분석기(spectroscope)에 사용되는 원리를 살펴보면 다음과 같다. 금속이온과 착화합물(complex)을 이루는 리간드(ligand)의 대부분이 유기 화합물이며, 상기 유기 화합물은 자외선 및 가시광선의 흡수가 가능한 발색단(chromophore)을 가지고 있다. 즉, 상기 발색단은 불포화 결합을 포함하는 작용기(functional group)을 포함하고 있어 자외선-가시광선(UV-VIS) 영역의 파장을 흡수하여 전자전이(electron transition)가 일어난다. 보다 자세하게 금속 착화합물에서 발생하는 전자전이를 살펴보면 다음과 같이 세 가지로 분류된다. 첫째는 금속이온에서의 전자전이로서 상기 착화합물을 형성하는 금속이 전이금속일 경우 발생한다. 전이금속이란, 전자 배치에 있어 d 또는 f 오비탈(orbital; 전자궤도)을 완전히 채우지 않는 원소로서 비공유 전자쌍을 가지는 분자나 이온과 착물(착이온)을 만든다. 이 때 d 오비탈의 전자들은 결합에 참여하지 않고 이들의 이동으로 인해 가시영역의 광을 흡수하게 된다. 따라서 전이금속에서의 전자전이를 d-d 전이라고도 한다. 둘째는 전하이동전이(charge transfer transition) 이다. 이것은 유기 화합물의 광흡수와 구별되는 금속 착화합물에서의 광흡수에만 나타나는 특징으로서, 금속 착화합물내의 리간드로부터 금속으로 또는 금속으로부터 리간드로의 전하 이동을 말한다. 즉 전자주게(electro donor)와 전자받게(electron acceptor)가 존재하여 UV-VIS(자외선-가시광선) 영역의 광파장을 흡수하여 주게에서 받게로 전자가 전이되는 현상이다. 상기 전자전이는 완전히 허용된 전이이기 때문에 흡수강도가 커서 미량의 금속이온 분석에 유용하다. 세째는 리간드 내에서의 전자전이로서 리간드 자체가 발색단을 가지고 있는 경우이다. 발색단의 유기화합물은 UV-VIS 영역의 광파장을 흡수하는 원인이 되는 공유결합성 불포화기를 가지고 있는데, 상기 공유결합은 σ궤도의 전자에 의한 결합력이 강한 σ결합과, π궤도의 전자에 의한 결합력이 약한 π결합으로 이루어져 있다. 이 때 상기 결합력이 약한 π궤도의 전자가 UV-VIS 영역의 광파장을 흡수하여 전이가 되는 것이다. 본 발명에서는 이온인식 물질의 리간드 고리에 600 내지 700nm 파장영역의 발색성 색소(dye) 화합물을 결합시켜서 흡광도 측정에 이용하였다.Next, the principle of the above-described chromogenic ionic material used in a spectroscope using light absorption is as follows. Most of the ligands that form a complex with the metal ion are organic compounds, and the organic compounds have chromophores capable of absorbing ultraviolet rays and visible light. In other words, the chromophore includes a functional group including an unsaturated bond, so that the wavelength is absorbed in the ultraviolet-visible (UV-VIS) region to generate an electron transition. In more detail, electron transitions occurring in metal complexes are classified into three types as follows. First, electron transition in metal ions occurs when the metal forming the complex is a transition metal. The transition metal is an element that does not completely fill the d or f orbital in the electron arrangement and forms a complex (a complex ion) with a molecule or an ion having a lone pair of electrons. At this time, the electrons of the d orbitals do not participate in the binding and absorb their light in the visible region due to their movement. Therefore, electron transition in transition metal is also called d-d transition. Second is the charge transfer transition. This is a feature that appears only in light absorption in metal complexes that are distinct from the light absorption of organic compounds, and refers to charge transfer from ligand to metal or metal to ligand in the metal complex. That is, the electron donor and the electron acceptor exist to absorb the light wavelength in the UV-VIS (ultraviolet-visible light) region, whereby electrons are transferred from the donor to the receiver. Since the electron transition is a completely allowed transition, the absorption strength is large and is useful for analyzing trace metal ions. The third is an electron transition within a ligand, in which the ligand itself has a chromophore. The organic compound of the chromophore has a covalent unsaturated group which causes the absorption of the light wavelength in the UV-VIS region. The covalent bond has a strong binding force by the electrons of the σ orbit and the binding force by the electrons of the π orbit. It consists of weak π bonds. At this time, the electron of the π-orbit with weak binding force absorbs the light wavelength in the UV-VIS region and becomes a transition. In the present invention, a coloriable dye compound having a wavelength range of 600 to 700 nm is bound to a ligand ring of an ion recognition material and used for absorbance measurement.

본 발명의 상기 목적과 기술적 구성 및 그에 따른 작용효과에 관한 자세한 사항은 본 발명의 바람직한 실시예를 도시하고 있는 도면을 참조한 이하 상세한 설 명에 의해 보다 명확하게 이해될 것이다.Details of the above object and technical configuration and the effects thereof according to the present invention will be more clearly understood by the following detailed description with reference to the drawings showing preferred embodiments of the present invention.

먼저, 도 1은 본 발명에 의한 발색성 이온물질을 이용한 칼륨 분석장치의 평면도이다. 상기의 분석장치는 마이크로 칩(chip)형태의 구조물로서 소량의 시료만으로도 검출한계를 ppb 이하로 높일 수 있는 분석장치이다. 또한 고가의 무기분석 장비 없이 실시간으로 측정이 가능하다는 것을 특징으로 한다. 상기 분석장치의 구조와 분석방법에 대해 보다 자세하게 살펴보면 다음과 같다. 분석하고자 하는 칼륨이 함유된 샘플 용액과 이온인식 물질이 함유된 시약(reagent)을 주입관(20)을 통해 주입한다. 이 때 상기 이온인식 물질에는 600nm 파장범위의 발색성 색소 화합물이 결합되어 있다. 이후 상기 주입된 샘플 용액과 시약은 제 1 단면적의 마이크로 비드(bead) 구조물(21)을 통과하면서 완전하게 혼합된다. 상기 마이크로 비드 구조물은 그 단면이 원형인 원통형 비드가 빼곡히 밀집되어 있는 내부구조를 가짐으로써 공극의 표면적을 최소화하였으며, 상기 샘플 용액과 시약이 상기 비드 구조물을 통과하면서 칼륨 이온이 이온인식 물질과 결합하여 금속 착화합물이 형성된다. 이후 상기 금속 착화합물은 측정부(22)로 유입된다.First, Figure 1 is a plan view of a potassium analysis device using a chromogenic ionic material according to the present invention. The analytical device is a microchip structured structure that can increase the detection limit to less than or equal to ppb even with a small amount of sample. In addition, it can be measured in real time without expensive weapon analysis equipment. Looking at the structure and analysis method of the analysis device in more detail as follows. A sample solution containing potassium to be analyzed and a reagent containing an ion recognition material are injected through the injection tube 20. At this time, the chromophoric dye compound of 600 nm wavelength range is coupled to the ion recognition material. The injected sample solution and reagent are then completely mixed while passing through the microbead structure 21 of the first cross-sectional area. The microbead structure has an internal structure in which cylindrical beads having a circular cross section are densely packed, thereby minimizing the surface area of the voids. As the sample solution and the reagent pass through the bead structure, potassium ions are combined with the ion recognition material. Metal complexes are formed. Thereafter, the metal complex is introduced into the measuring unit 22.

도 2는 상기 칼륨 분석장치의 측정부의 정면도이다. 상기 마이크로 비드 구조물을 빠져나온 금속 착화합물은 상기 마이크로 비드 구조물의 제 1 단면적보다 작은 제 2 단면적의 마이크로 채널(31)로 유입되어 차광막(32)을 사이에 두고 이격되어 위치한 발광부(33)와 검출기(detector, 34) 그리고 마이크로 채널의 하부에 위치한 반사경(mirror, 35)으로 구성된 측정부에 도달한다. 상기 발광부는 블루(blue) LED(light emmiting diode)로 구성되어 소정 파장의 단색광을 방출하 고, 방출된 광은 상기 마이크로 채널을 통과하는 금속 착화합물에 의해 1차 흡수된다. 이후 반사경에 도달한 광은 다시 금속 착화합물을 통과하면서 2차 흡수가 이루어진다. 이후 검출기에 도달한 광의 세기와 파장을 이용하여 흡광도를 측정하게 된다. 이때 흡수되는 광의 양은 시료중의 흡광 화합물 농도와 광경로(light pass length)에 비례한다. 따라서 보다 정확한 정량분석을 위해서는 광경로를 증가시켜서 흡수되는 광의 양을 높여야 하며, 본 발명에서는 이를 위하여 반사경을 사용할 수 있다. 즉, 반사경에 도달하기 전의 1차 흡수와 반사경에서 반사된 후의 2차 흡수를 통해 흡수되는 광의 양을 증가시킨다. 또한 반사경에 입사되기 전,후의 광간섭을 막기 위해 발광부와 검출기 사이에 차광막을 설치하여 노이즈를 제거한다. 2 is a front view of the measuring unit of the potassium analyzer. The metal complex that exits the microbead structure flows into the microchannel 31 having a second cross-sectional area smaller than the first cross-sectional area of the microbead structure and is spaced apart from the light shielding layer 32 with a detector 33 and a detector. (detector, 34) and a measuring section consisting of a mirror (35) located below the microchannel. The light emitting unit is composed of a blue light emitting diode (LED) to emit monochromatic light of a predetermined wavelength, and the emitted light is primarily absorbed by the metal complex passing through the microchannel. After that, the light that reaches the reflector passes through the metal complex, and the second absorption occurs. The absorbance is then measured using the intensity and wavelength of the light reaching the detector. The amount of light absorbed at this time is proportional to the concentration of light absorbing compound in the sample and the light pass length. Therefore, for more accurate quantitative analysis, the amount of light absorbed by increasing the light path should be increased, and the reflector may be used in the present invention. That is, the amount of light absorbed through the primary absorption before reaching the reflector and the secondary absorption after being reflected by the reflector is increased. In addition, a light shielding film is disposed between the light emitting unit and the detector to remove the noise to prevent light interference before and after the incident to the reflector.

이후 검출기에 의해 측정된 흡광도를 이용해 정량분석을 행한다. 상기 정량분석은 Beer-Lambert 공식에 따라 시료의 농도가 계산되는데 그 방법은 다음과 같다. 흡광도(Absorbance; A)는 A=abC 로 표현된다. 여기서 a는 흡광계수, b는 광경로의 길이, C는 시료의 농도이다. 상기 ab를 k라 하면 농도를 이미 알고 있는 표준시료의 흡광도를 측정해서 물질상수 k를 구할 수 있다. 이후 알고자 하는 미지시료의 흡광도를 측정해 그 농도를 계산한다. 상술한 방식을 본 발명의 경우에 적용하면 다음과 같다. 먼저 정해진 농도의 리간드만을 주입하여 흡광도를 측정함으로써 바탕 흡광도 값을 얻는다. 이후 칼륨 이온을 리간드에 결합시켜 착화합물 용액의 흡광도를 측정하고 상기 바탕 흡광도 값을 빼서 착화합물만의 흡광도를 얻고, 이 값과 착화합물의 k로부터 상기 리간드에 결합된 칼륨 이온의 농도를 계산한다.Thereafter, quantitative analysis is performed using the absorbance measured by the detector. In the quantitative analysis, the concentration of the sample is calculated according to the Beer-Lambert formula, and the method is as follows. Absorbance (A) is expressed as A = abC. Where a is the extinction coefficient, b is the length of the optical path, and C is the concentration of the sample. If ab is k, the material constant k can be obtained by measuring the absorbance of a standard sample whose concentration is already known. The absorbance of the unknown sample is then measured and its concentration calculated. When the above-described method is applied to the case of the present invention is as follows. First, a background absorbance value is obtained by measuring the absorbance by injecting only a ligand of a predetermined concentration. Thereafter, the absorbance of the complex solution is measured by binding potassium ions to the ligand, and the absorbance of the complex is obtained by subtracting the background absorbance value, and the concentration of the potassium ion bound to the ligand is calculated from this value and k of the complex.

상세히 설명된 본 발명에 의하여 본 발명의 특징부를 포함하는 변화들 및 변 형들이 당해 기술 분야에서 숙련된 보통의 사람들에게 명백히 쉬워질 것임이 자명하다. 본 발명의 그러한 변형들의 범위는 본 발명의 특징부를 포함하는 당해 기술 분야에 숙련된 통상의 지식을 가진 자들의 범위 내에 있으며, 그러한 변형들은 본 발명의 청구항의 범위 내에 있는 것으로 간주된다.It is apparent that changes and modifications comprising the features of the present invention will be readily apparent to those skilled in the art by the present invention described in detail. It is intended that the scope of such modifications of the invention be within the scope of those of ordinary skill in the art including the features of the invention, and such modifications are considered to be within the scope of the claims of the invention.

따라서, 본 발명의 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법은 칼륨과 선택적으로 결합하는 이온인식 물질에 발색성 화합물을 결합하여 광의 흡광도를 측정함으로써 소량의 시료를 이용하여 칼륨에 대한 정량분석을 간단하게 실시하면서도 검출한계를 향상시킬 수 있는 효과가 있다.Therefore, the potassium analysis method using the chromogenic ion recognition material of the present invention simply quantitatively analyzes potassium using a small amount of sample by measuring the absorbance of light by binding the chromogenic compound to an ion recognition material that selectively binds to potassium. In addition, there is an effect that can improve the detection limit.

즉, 본 발명의 측정부를 구성하는 마이크로 채널은 종래의 분석장치에서 사용되는 시료의 양에 비해 그 양을 획기적으로 줄일 수 있는 장점을 제공하며, 칼륨 이온과의 선택성이 우수한 이온인식 물질을 사용함으로써 검출한계를 ppb 이하 수준으로 낮출 수 있다.That is, the microchannel constituting the measuring unit of the present invention provides an advantage that the amount of the sample can be significantly reduced compared to the amount of the sample used in the conventional analytical device, by using an ion recognition material having excellent selectivity with potassium ions Detection limits can be lowered to levels below ppb.

Claims (4)

발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법에 있어서,In the potassium analysis method using a chromogenic ion recognition material, 주입구에 칼륨 샘플 용액 및 칼륨에 선택적으로 결합하는 이온인식 물질 용액이 주입되는 단계; Injecting a potassium sample solution and an ion recognition material solution selectively binding to potassium into the inlet; 상기 주입된 용액이 마이크로 비드 구조물을 통과하는 단계; Passing the injected solution through a microbead structure; 상기 마이크로 비드 구조물을 통과한 용액이 마이크로 채널로 유입되는 단계; Introducing a solution passing through the microbead structure into a microchannel; 발광부에서 소정 파장의 광이 방출되는 단계; Emitting light of a predetermined wavelength from the light emitting unit; 상기 방출된 광이 마이크로 채널을 통과하는 단계; 및Passing the emitted light through a microchannel; And 상기 마이크로 채널을 통과한 광이 검출기로 입사되어 검출되는 단계Light passing through the microchannel is incident to a detector and detected 를 포함하고,Including, 상기 방출된 광이 마이크로 채널을 통과하는 단계는,The emitted light passes through the micro channel, 상기 방출된 광이 마이크로 채널을 통과하면서 1차 흡수되는 단계;The emitted light is first absorbed through the microchannel; 상기 1차 흡수된 광이 반사되는 단계;Reflecting the first absorbed light; 상기 반사된 광이 마이크로 채널을 다시 통과하면서 2차 흡수되는 단계The reflected light is absorbed secondarily through the microchannel again 를 포함하는 것을 특징으로 하는 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법.Potassium analysis method using a chromogenic ion recognition material, characterized in that it comprises a. 삭제delete 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 마이크로 비드 구조물을 통과하는 단계는 칼륨 이온이 발색성 이온인식 물질에 선택적으로 결합되는 단계임을 특징으로 하는 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법.Passing through the micro-bead structure is a potassium analysis method using a chromogenic ion recognition material, characterized in that the potassium ion is selectively bound to the chromogenic ion recognition material. 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 마이크로 비드 구조물은 그 단면이 원형인 원통형 비드가 빼곡히 밀집되어 있는 내부구조를 가짐을 특징으로 하는 발색성 이온인식 물질을 이용한 칼륨 분석방법.The micro-bead structure is a potassium analysis method using a chromophoric ion recognition material, characterized in that the cylindrical beads having a circular cross-section is densely packed.
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