KR100489667B1

KR100489667B1 - 활성제전달용화합물및조성물

Info

Publication number: KR100489667B1
Application number: KR1019970706816A
Authority: KR
Inventors: 안드레아 레온-배이; 콕-칸 호; 도날드 제이. 사루비; 샘 제이. 밀스타인; 제프리 브루스 프레스
Original assignee: 에미스페어 테크놀로지스, 인코포레이티드
Priority date: 1995-03-31
Filing date: 1996-04-01
Publication date: 2006-01-12

Abstract

활성제의 전달에 유용한 변형 아미노산을 제공한다. 이 활성제로는 rhGH와 같은 펩티드가 될 수 있다. 경구 투여법, 설하 투여법 및 비내 투여법과 같은 투여방법을 개시하고 이 변형 아미노산 화합물을 제조하는 방법을 개시하였다.

Description

활성제 전달용 화합물 및 조성물{COMPOUNDS AND COMPOSITIONS FOR DELIVERING ACTIVE AGENTS}

본 출원은 1995년 3월 31일에 출원한 미국특허출원 제 08/4l4,654 호와 1995년 9월 1일에 출원한 미국특허출원 제 60/003,111 호의 일부 계속 출원이다.

본 발명은 활성제, 특히 생물학적 또는 화학적 활성제, 예컨대 생물학적 활성을 갖는 펩티드 등과 같은 활성제 전달용 화합물에 관한 것이다. 이 화합물들은 표적 부위에 전달 물질을 용이하게 전달하는 담체로서 이용된다. 담체들은 변형 아미노산이며, 동물 경구 투여용 생물학적 활성제와의 비공유결합성 혼합물을 형성하기에 아주 적합하다. 이와 같은 조성물의 제조 방법 및 투여 방법도 기술하였다.

활성제를 전달하기 위한 종래의 방법들은 대개 생물학적, 화학적 및 신체적 장애에 의해 심하게 제한을 받는다. 전형적으로, 이러한 장애들은 전달이 수행되는 환경이나 전달의 표적부 환경 또는 표적부 그 자체에 의한 것이다.

생물학적 또는 화학적 활성제가 특히 이러한 장애들에 의해 변형되기 쉽다.예를 들면, 약물학적 치료제의 동물 투여에 있어서, 신체적으로 장애가 발생한다. 신체적 장애의 예로서는, 표적부에 다다르기 전에 통과해야만 하는 피부 및 다양한 기관의 막조직을 들 수 있다. 화학적 장애들은 pH 변수, 지질 이중층 및 퇴화 효소가 포함되는데, 이에 한정되는 것은 아니다.

이와 같은 장애들은 특히 경구 전달용 시스템의 설계에 있어서 더욱 중요하다. 위장(GI: gastro-intestinal)계에서의 pH 변화, 강력한 소화 효소 및 위장 막 조직에서의 활성제의 흡수 가능성과 같은 생물학적, 화학적 및 신체 조직적 장애들이 없다면, 다수의 생물학적 또는 화학적 활성제의 경구 전달법은 동물 투여용 경로로 채택될 것이다. 전형적으로 경구 투여가 불가능한 다수의 제제에는 칼시토닌과 인슐린과 같은 생물학적 또는 화학적 활성 펩티드, 다당류와 특히, 이에 한정되는 것은 아니지만, 헤파린을 포함하는 무코다당류, 헤파로이드, 항생소 및 그 외의 유기체 물질들이 있다. 이와 같은 제제들은 산가수분해나 효소 등에 의해 위장계에서 쉽게 불활성화되거나 파괴된다.

경구 투여에 의해 변형되기 쉬운 의약 제제에 대한 초기 방법들은 장벽에 의한 흡수를 인위적으로 증가시키는 보조제(예컨대, 폴리옥시에틸렌 올레일 에테를 및 n-헥사데실폴리에틸렌 에테르와 같은 비이온성 계면 활성제 및 레조르시놀)와의 공동 투여 및, 효소 퇴화를 억제시키는 효소 억제제(예컨대, 췌장의 트립신 억제제, 디이소프로필플루오르포스페이트(DFF) 및 트라실올)와의 공동 투여를 기본으로 하였다.

리포좀도 인슐린과 헤파린의 전달 체계에 사용되었다. 예로서는, 미국 특허 제 4,239,754 호와, 페이틀(Patel) 등의 FEBS Letters, Vol. 62, pg. 60 (1976) 및 하시모토(Hashimoto) 등의 Endocrinology Japan, Vol 26, pg 337 (1979) 등이 참고가 될 수 있다.

하지만, (1) 이러한 시스템에서는 유독량의 보조제 또는 억제제가 필요하거나, (2) 적절한 저분자량의 전달 물질, 즉 활성제에는 사용이 불가능하든지, (3) 이러한 시스템의 안정성이 좋지 않아 저장 수명이 부적합하거나, (4) 이 시스템을 제조하는 것이 어렵든지, (5) 이 시스템으로 활성제(전달 물질)를 보호하는 것이 불가능하거나, (6) 이 시스템이 활성제를 좋지 않게 변형시킨든지, (7)이 시스템이 활성제의 흡수를 증진시키지 못하거나 불가능하게 하기 때문에 이와 같은 약물 전달 시스템을 광범위한 범주로 이용하는 것이 불가능하다.

좀더 최근에는, 혼합 아미노산(프로티노이드)의 인공 폴리머 마이크로스피어가 의약물을 전달하는 데 사용되어 왔다. 예를 들면, 약물 함유 프로티노이드 마이크로스피어 담체와 그의 제죄 방법 및 용도를 개시하고 있는 미국 특허 제 4,925,673 호를 들 수 있다. 이와 같은 프로티노이드 마이크로스피어는 다수의 활성제를 전달하는 데 유용하다.

하지만, 본 기술 분야에서는, 제조가 용이하며 광범위한 범주의 활성제에 사용이 가능한, 간단하고 저렴한 전달 시스템에 대한 필요성이 아직도 남아 있다.

발명의 요약

활성제의 전달에 유용한 조성물이 제공된다. 이러한 조성물들에는 활성제, 바람직하게는 생물학적 또는 화학적 활성제 한 가지 이상과 다음 화학식 I∼CXXI I I의 화합물 한 가지 이상 또는 그의 염이 포함된다.

[화학식 I]

[화학식 II]

[화학식 III]

[화학식 IV]

[화학식 V]

[화학식 VI]

[화학식 VII]

[화학식 VIII]

[화학식 IX]

[화학식 X]

[화학식 XI]

[화학식 XII]

[화학식 XIII]

[화학식 XIV]

[화학식 XV]

[화학식 XVI]

[화학식 XVII]

[화학식 XVIII]

[화학식 XIX]

[화학식 XX]

[화학식 XXI]

[화학식 XXII]

[화학식 XXIII]

[화학식 XXIV]

[화학식 XXV]

[화학식 XXVI]

[화학식 XXVII]

[화학식 XXVIII]

[화학식 XXIX]

[화학식 XXX]

[화학식 XXI]

[화학식 XXII]

[화학식 XXXIII]

[화학식 XXXIV]

[화학식 XXXV]

[화학식 XXXVI]

[화학식 A]

[화학식 B]

[화학식 C]

[화학식 D]

[화학식 E]

[화학식 F]

[화학식 C]

[화학식 CI]

[화학식 CII]

[화학식 CIII]

[화학식 CIV]

[화학식 CV]

[화학식 CVI]

[화학식 CVII]

[화학식 CVIII]

[화학식 CIX]

[화학식 CX]

[화학식 G]

[화학식 H]

방향족 고리 화합물의 오르쏘(ortho) 위치에 치환된 하이드록시기를 갖는 방향족 아민기 및 사슬내에 약 4∼20 개의 탄소 원자로 이루어진 친지질성 사슬을 갖는 유기산 화합물과 그의 염들이 활성제 전달용 담체로서 유용하다는 것을 알게되었다. 바람직한 유형으로는, 이 친지질성 사슬은 약 5∼20 개의 탄소 원자로 이루어질 수 있다.

상기한 바와 같은 담체 화합물과 활성제를 함유하는 조성물은 선택된 생물학적 시스템에 활성제를 전달하는 데 유효한 결과를 나타냈다. 이와 같은 조성물들은 바람직하게는 생물학적 또는 화학적 활성제인 활성제 한 가지 이상과 다음 화학식을 갖는 담체 화합물 또는 그의 염 한 가지 이상을 함유하는데,

식 중에서, Ar은 치환된 또는 비치환된 페닐기나 나프틸기이며,

R⁷은 C₄∼C₂₀의 알킬기, C₄∼C₂₀의 알켄닐기, 페닐기, 나프틸기, (C₁∼C₁₀ 알킬)페닐기, (C₂∼C₁₀ 알켄닐)페닐기, (C₁-C₁₀ 알킬)나프틸기, (C₂∼C₁₀ 알켄닐)나프틸기, 페닐(C₁∼C₁₀ 알킬기), 페닐(C₂∼C₁₀ 알켄닐기), 나프틸(C₁∼C₁₀ 알킬기) 및 나프틸 (C₂∼C₁₀ 알켄닐기)로 이루어진 군 중에서 선택된 것이고,

R⁸은 수소, C₁∼C₄의 알킬기, C₂∼C₄의 알켄닐기, 하이드록시기 및 C₁∼C₄의 알콕시기로 이루어진 군 중에서 선택된 것이며,

R⁷은 C₁∼C₄의 알킬기, C₂∼C₄의 알켄닐기, C₁∼C₄의 알콕시기, -OH, -SH 및 -CO₂R⁹(식 중, R⁹은 수소, C₁∼C₄의 알킬기 또는 C₂∼C₄의 알켄닐기임) 또는 그의 조합기에 의해 임의로 치환되며,

R⁷은 산소, 질소, 황 또는 그의 어떠한 배합물에 의해 임의로 치환되는데, 단, 이 화합물은 산 작용기의 알파 위치에 아미노기와 치환되지 않아야만 한다.

바람직한 R⁶기는 C₄∼C₂₀ 알킬기와 C₄∼C₂₀ 알켄닐기이며, 가장 바람직한 R⁶기는 C₅∼C₂₀ 알킬기 및 C₅∼C₂₀ 알켄닐기이다.

바람직한 담체 화합물은 다음과 같은 화학식을 갖는데,

식 중에서, R⁷은 상기한 바와 같다.

이와 같은 조성물을 포함하는 단위 투여 형태에 대해, 본 발명에서 추가로 고려되었다.

또한, 상기한 바와 같은 화합물 한 가지 이상과 활성제 한 가지 이상, 및 임의의 투여 담체를 혼합하는 것으로 이루어지는, 이러한 조성물의 제조 방법에 대한 고려도 하고 있다.

어떤 예에 있어서는, 투여하기 전에 이 화합물을 활성제와 흔합하거나 블렌딩함으로써 전달 시스템의 일부로서, 이와 같은 비독성 화합물들을 동물에게 경구투여한다.

다음 화학식 CXXIV을 갖는 화합물의 제조 방법이 추가로 제공되는데,

[화학식 CXXIV]

(식 중에서, Y는

또는 SO₂이며,

R¹은 C₃∼C₂₄의 알킬기, C₂∼C₂₀의 알켄닐기, C₂∼C₂₀의 알킨기, 시클로알킬기 또는 방향족 고리 화합물기이며,

R²는 수소, C₁∼C₄의 알킬기, C₂∼C₄의 알켄닐기이며,

R³는 C₁∼C₇의 알킬기, C₃∼C₁₀의 시클로알킬기, 아릴기, 티에닐기, 피롤로기 또는 피리딜기인데, R³는 C₁∼C₅의 알킬기, C₂∼C₄의 알켄닐기, F, Cl, OH, SO₂, COOH 또는 SO₃H 중의 한 가지 이상과 임의로 치환된 것임),

상기 제조 방법은,

(a) 염기의 존재 하에서 다음 화학식 CXXV을 갖는 화합물과,

[화학식 CXXV]

다음 화학식을 갖는 화합물,

(식 중, Y, R¹, R² 및 R³는 상기한 바와 같으며, X는 이탈기임)을 물에서 반응시키는 것으로 이루어진다.

도 1은 rhGH 조성물을 래트에게 피하 주사한 결과를 그래프로 도시한 것이다.

도 2는 rhGH를 래트에게 설하로(SL), 비내로(IN) 및 결장내로(IC) 투여한 결과를 그래프로 도시한 것이다.

도 3은 화학식 XXXI의 화합물을 담체로 헤파린 전달 과정을 결장내 투여하여 실시한 결과를 그래프로 도시한 것이다.

본 발명의 특정 조성물은 활성제와 변형 아미노산을 포함한다. 이와 같은 화합물들은 다양한 생물학적, 화학적 및 신체 조직적 난관을 거쳐 다양한 활성제를 전달하는 데 사용할 수도 있으며, 특히 환경에 의해 변형되기 쉬운 활성제를 전달하는 데 적합하다. 본 발명의 조성물은 조류와, 영장류와 특히 사람과 같은 포유류및 곤충류와 같은 그 어떠한 동물에게라도 이 생물학적 또는 화학적 활성제를 투여하거나 전달하는 데 특히 유용하다.

본 발명의 다른 장점들에는 저렴한 비용의 원료 물질을 이용하는 것과 제조가 용이하다는 것이 포함된다. 본 발명의 조성물과 배합 방법은 비용이 저렴하고, 실시가 용이하며, 상업적 제조를 위한 산업적 대량 생산이 가능하다.

재조합 인체 생장 호르몬(rhGH)와 같은 활성제를 상기 전달제, 특히 단백질 류와 함께 피하로, 설하로 및 비내로 투여한 결과, 활성제를 단독으로 투여하였을때보다 활성제의 생체 활성도가 증가했다. 래트에게 이 전달제와 연어의 칼시토닌을 함께 투여함으로써, 마찬가지 결과를 얻었다. 이러한 결과를 뒷받침하는 데이타는 실시예에 기재하였다.

활성제

본 발명에 사용하기에 적합한 활성제는 생물학적 또는 화학적 활성제, 이에 한정되는 것은 아니지만 향수를 포함하는 화학적 활성제, 및 예컨대 화장품과 같은 그 외의 활성제를 포함한다.

생물학적 또는 화학적 활성제에는 살충제, 의약 제제 및 치료제가 포함되는데, 이에 한정되는 것은 아니다. 예를 들면, 본 발명에 사용하기에 알맞은 생물학적 또는 화학적 활성제는, 아에 한정되는 것은 아니지만, 살충제, 특히 간단한 펩티드, 호르몬류, 특히 자체로서는 불가능하거나 투여량의 일부로서만이 위장 점막을 통과하는 호르몬 및/또는 위장계의 산과 효소에 의해 화학적 분열이 가능한 호르몬, 다당류, 특히 무코다당류 혼합물, 탄수화물, 지질 또는 그의 배합물을 포함한다. 추가적인 예로는, 인체 생장 호르몬류, 소 생장 호르몬, 생장 방출 호르몬, 인터페론, 인터로이킨-1, 인슐린, 헤파린, 특히 저분자량의 헤파린, 칼시토닌, 에리스로포이에틴, 심방성 나트륨 이뇨 인자(ANF), 항원, 모노클로날 항체, 성장 호르몬 분비 억제 호르몬, 부신 피질 자극 호르몬(ACTH), 고나도트로핀 방출 호르몬, 자궁 수축 호르몬, 바소프레신, 크로몰린 나트륨(나트륨 또는 이나트륨 크로모글리케이트: sodium or disodium chrmoglycate), 데스페리옥사민(DFO), 반코마이신, 이에 한정되는 것은 아니지만 항진균제를 포함하는 부갑상선 호르몬 항균제, 또는 그 외의 어떠한 배합물이 포함되는데, 이에 한정되는 것은 아니다.

면형 아미노산

변형 아미노산, 변형 폴리아미노산 및 변형 펩티드라 함은 포함되어 있는 유리 아민기 적어도 한 가지와 반응하는 아실화 또는 술폰화제로 유리 아민기 한가지 이상을 아실화 또는 술폰화 반응시킴으로써 변형(modified) 아미노산, 또는 한 가지 이상의 아미노산이 변형 폴리아미노산 및 펩티드를 포함하는 것을 의미한다.

변형된 유형의 아미노산, 폴리아미노산 및 펩티드는, 이에 한정되는 것이 아니지만, 예컨대 의약 및 치료제와 같은 생물학적 또는 화학적 활성제를 포함하는 활성제를 전달하는 데 사용할 수도 있다.

아미노산은 적어도 한 가지 이상의 유리 아민기를 갖는 어떠한 카르복실산이며, 천연 생성된 아미노산 및 합성 아미노산을 포함한다.

폴리아미노산은 결합이 가능한 다른 작용기, 예컨대 에스테르, 무수물 또는 무수물 고리 결합(anhydride linkage)에 의해 형성되는 결합으로 연결된 두 가지이상의 아미노산 또는 펩티드이다.

펩티드는 펩티드 결합에 의해 결합된 두 가지 이상의 아미노산이다. 펩티드는 두 가지 아미노산의 디펩티드로부터 수 백 가지 아미노산의 폴리펩티드까지 다양하게 될 수 있다. Chambers Biological Dictionary, 워커 피터 엠.비 (Peter M.B. Walker) 편저, 영국 캠브리지: 챔버스 캠브리지, 1989, 215 쪽을 참고하였다. 특히, di-펩티드, tri-펩티드, tetra-펩티드 및 penta-펩티드가 언급될 수 있다.

상기 화학식 I∼CXXIII의 화합물은 생물학적 또는 화학적 활성제의 경구 전달용 담체로서 이용할 수 있다는 것을 알았는데, 특히 상기 화학식 I∼XXXI의 화합물을 들 수 있다.

변형 아미노산은 전형적으로 아미노산이나 그의 에스테르를 변형시켜 제조하였다. 이와 같은 화합물 대부분은 다음과 같은 화학식을 갖는 제제로 아실화 또는 술폰화 반응시킴으로써 제조하는데,

식 중에서, R⁴는 최종 생성물에서 나타나는 변이 형태를 생성시키기에 알맞은 라디칼이며, Y는

또는 SO₂이고, X는 이탈기이다. 전형적인 이탈기에는 예컨대 염소, 브롬 및 요오드와 같은 할로겐 원소가 포함되는데, 이에 한정되는 것은 아니다. 추가적으로, 해당 무수물이 변형제가 된다.

본 발명의 화합물 대부분이 여기에 기재된 내용을 바탕으로 이 기술 분야에 서의 공지 기술 방법에 의해 아미노산으로부터 용이하게 제조될 수 있다. 예를 들면, 화학식 I∼VII의 화합물은 아미노부티르산으로부터 유도될 수 있으며, 화학식 VII∼X 및 XXXII∼XXXV의 화합물는 아미노카프로산으로부터 유도되고, 화학식 XI∼XXVI 및 XXXVI의 화합물은 아미노카프릴산으로부터 유도된다. 예를 들면, 상기 변형 아미노산 화합물들은 단일 아미노산에 존재하는 유리 아미노기 부분과 반응하여 아미드를 형성하는 적절한 변형제와 이 단일 아미노산을 반응시켜 제조할 수도 있다. 이 기술 분야에서 공지된 바와 같이, 바람직하지 못한 부반응을 방지하기 위해 보호기를 사용할 수도 있다.

금속 수산화물, 예컨대 수산화나트륨 또는 수산화칼륨의 알카리 수용액에 이 아미노산을 용해시키고, 약 5∼70 ℃, 바람직하게는 약 10∼40 ℃ 정도의 온도로 약 1∼4 시간 동안, 바람직하게는 2.5 시간 동안을 가열할 수 있다. 아미노산엔 함유된 NH₂기 당량 당 사용되는 알카리의 양은 일반적으로 NH₂기 당량 당약 1.25∼3 mmole, 바람직하게는 약 1.5∼2.25 mmole 정도이다. 이 용액의 pH는 일반적으로 약 8∼13, 바람직하게는 약 10∼12 정도이다.

그 후에, 바람직한 아미노기 변형제를 이 아미노산 용액을 교반시키면서 첨가한다. 이 혼합물의 온도는 일반적으로 약 1∼4 시간 동안 약 5∼70 ℃, 바람직하게는 약 10∼40 ℃ 정도의 온도로 유지한다. 아미노산의 양에 상대적인 아미노기 변형제의 사용량은 아미노산에서의 유리 NH₂기의 총몰수를 기준으로 한다. 일반적으로, 아미노기 변형제는 아미노산의 NH₂기의 총몰당량 당 약 0.5∼2.5 mole 당량, 바람직하게는 약 0.75∼1.25 mole 당량 정도의 양을 사용한다.

적절한 산, 예컨대 진한 염산을 사용하여 이 혼합물의 pH를 약 2∼3 정도가 될 때까지 조정함으로써 이 반응을 종결시킨다. 이 혼합물을 상부의 맑은 층과 백색 또는 회백색 침전물이 생성되도록 실온에서 정치시킴으로써 분리시킨다. 상부층을 폐기한 후, 여과법 또는 침전법에 의해 하부층으로부터 변형 아미노산을 모은다. 그 후에, 이 불순한 아미노산을 pH 약 9∼13, 바람직하게는 약 11∼13 정도에서 물에 용해시킨다. 불용성 물질들을 여과하여 제거하고 여과액을 진공으로 건조시킨다. 변형 아미노산의 수율은 일반적으로 약 30∼60%, 대개는 약 45%정도이다.

필요한 경우, 아미노산 에스테르, 예컨대 아미노산 화합물의 벤질 에스테르, 메틸 에스테르 및 에틸 에스테르 등을 본 발명의 변형 아미노산을 제조하는 데 사용할 수도 있다. 디메틸포름아미드(DMF), 피리딘 또는 테트라하이드로퓨란(THF)와 같은 유기 용매 중 알맞은 용매에 용해된 아미노산 에스테르와 적절한 아미노기 변형제를 약 5∼70 ℃, 바람직하게는 약 25 ℃ 정도의 온도에서 약 7∼24 시간 동안 반응시킨다. 아미노산 에스테르에 비례적으로 사용된 아미노기 변형제의 양은 아미노산의 경우에서 상기한 바와 같다. 이와 같은 반응은 염기, 예컨대 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민 등과 함께 반응시키거나 첨가하지 않고 반응시킬 수도 있다.

그 후에, 이 반응 용매를 감압 하에서 제거하고, 이 변형 아미노산 에스테르를 약 50∼80 ℃, 바람직하게는 약 70 ℃ 정도의 온도에서 이 에스테르기를 가수분해시켜 제거하고 유리 카르복시기를 갖는 변형 아미노산을 생성기키기에 충분한시간 동안 적절한 알카리 용액, 예컨대 1 N 수산화나트륨 용액으로 가수분해시킴으로써 에스테르 작용기를 제거한다. 그 후에, 이 가수분해 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 25% 염산 수용액 등으로 pH 약 2∼2.5 정도로 산성화시킨다. 용액으로부터 생성되는 변형 아미노산 침전물을 여과법이나 침전법과 같은 통상의 방법으로 회수한다. 전이 금속 촉매를 사용하여 유기 용매에서 수소화 반응시킴으로써 벤질 에스테르를 제거하였다.

변형 아미노산은 재결정법 또는 고체 컬럼 지지체 상의 분별 증류법으로 정제시킨다. 알맞은 재결정 용매계는 아세토니트릴, 메탄올과 테트라하이드로퓨란을 포함한다. 분별 증류법은 이동상으로서 메탄올/n-프로판을 혼합물을 사용하는 알루미나와 같은 적절한 고체 컬럼 지지체 상, 이동상으로서 트리플루오르아세트산/아세토니트릴 혼합물을 사용하는 역상 컬럼 지지체, 및 이동상으로서 물을 사용하는 이온 교환 수지 크로마토그래피로 실시할 수도 있다. 음이온 교환 크로마토그래피법을 실시할 경우, 바람직하게는 연속 0∼500 mM 염화나트륨 기울기 용리(gradient)를 이용한다.

다른 방법에 있어서, 다음 화학식 CXXIV을 갖는 변형 아미노산의 제조에 있어서,

화학식 CXXIV

(식 중에서, Y는

또는 SO₂이며,

R¹은 C₃∼C₂₄의 알킬기, C₂∼C₂₀의 알켄닐기, C₂-C₂₀의 알킨기, 시클로알킬기 또는 방향족 고리 화합물이고,

R²는 수소, C₁∼C₄의 알킬기 또는 C₂∼C₄의 알켄닐기이며,

R³는 C₁∼C₇의 알킬기, C₃∼C₁₀의 시클로알킬기, 아릴기, 티에틸기, 피롤로기 또는 피리딜기인데, R³는 C₁∼C₅의 알킬기, C₂∼C₄의 알켄닐기, F, Cl, OH, SO₂, COOH 또는 SO₃H 중 한 가지 이상과 임의로 치환된 것임),

(a) 다음 화학식 CXXV를 갖는 화합물과,

화학식 CXXV

다음 화학식을 갖는 화합물,

(식 중, Y, R¹, R² 및 R³는 상기한 바와 같고, X는 이탈기임)을 염기의 존재 하의 물에서 반응시킴으로써 제조할 수도 있다.

화학식 CXXV의 화합물은 예컨대, 올라(Olah) 등의 Synthesis, 537∼538(1979)에 개시된 방법에 의해 제조할 수 있다.

화학식 XXXI의 화합물은 다음 반응식 1에서와 같이, 10-운데칸-1-올 1로부터 3 단계 공정에 의해 전체 수율 31%로 제조하였다. 미쯔노부(Mitsunobu) 조건 하에서 프탈이미드와 알칸올 1과의 알킬화 반응 후에 히드라진과 반응시킴으로써 1-아미노운데-10-엔, 2를 66%의 수율로 생성시켰다. 아민을 0-아세틸살리실로일 클로라이드로 유도시키고, 생성된 알켄 화합물, 3을 과망간산칼륨을 사용하여 산화시켰다. 아세테이트 제거 반응 후에 산의 적가로 화학식 XXXI의 화합물을 제조하였는데, 수율은 상기 아민 화합물 2를 기준하여 47%이였다.

[반응식 1]

전달 시스템

본 발명의 조성물은 활성제 한 가지 이상을 포함할 수도 있다.

일 실시예에서, 화학식 I∼CXXIII의 화합물이나 이러한 화합물을 적어도 한가지 이상 포함하는 폴리아미노산 또는 펩티드를 전달 담체로서 직접 사용할 수도 있는데, 활성제와 한 가지 이상의 화합물, 폴리아미노산 또는 펜티드를 투여하기 직전에 혼합함으로써 사용할 수 있다.

다른 실시예에서는, 이 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드를 활성제를 함유하는 마이크로스피어를 제조하는 데 사용할 수도 있다. 이러한 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드들은 위장 점막의 통과가 그 자체로는 불가능하거나 투여 성분의 일부로서만이 가능하고, 또는 위장 경로의 산과 효소에 의한 화학적 분해 반응이 일어날 수 있는 임의의 생물학적 활성제, 예컨대 작은 펩티드 호르몬의 경구 투여에 특히 유용하다.

변형 아미노산, 폴리아미노산 또는 펩티드를 마이크로스피어로 전화시키고자 할 경우에서는, 이 변형 아미노산이 용해될 때까지, 이 혼합물을 임의로 약 20∼50 ℃, 바람직하게는 약 40 ℃ 정도의 온도로 가열한다. 이 최종 용액은 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드를 용액의 mL 당 약 1∼2000 mg 정도, 바람직하게는 mL 당 약 500 mg 정도로 함유한다. 이 최종 용액에서의 활성제의 농도는 다양하고, 치료에 필요한 투여량에 따라 조절된다. 경우에 따라, 정확한 농도를 측정할 수도 있는데, 예를 들면 역상 HPLC 분석법 등으로 측정할 수 있다.

화합물, 플리아미노산 또는 펩티드로 마이크로스피어를 제조할 경우, 다음과 같이 다르게 이용할 수 있는 제조 방법이 있다. 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드를 탈이온화수에 약 75∼200 mg/mL, 바람직하게는 약 100 mg/mL 정도의 농도로 약 25∼60 ℃, 바람직하게는 약 40 ℃의 온도에서 용해시킨다. 용액에 남아 있는 입자 물질들은 여과법과 같은 통상의 기술 방법으로 제거할 수도 있다.

그 후에, 약 40 ℃의 온도로 유지된 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드의 용액을, 산 농도가 약 0.05∼2 N, 바람직하게는 약 1.7 N 정도인 산 수용액(마찬가지로 약 40 ℃의)과 1 : 1로 혼합한다. 광학 현미경으로 관찰되는 것처럼 마이크로스피어 형성에 유효한 시간 동안, 생성된 혼합물을 약 40 ℃에서 추가 배양시킨다. 본 발명을 실시하는 데 있어서, 바람직한 첨가 순서는 이 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드 용액을 산 수용액에 첨가하는 것이다.

마이크로스피어 제조에 적합한 산에는 다음에 해당되지 않는 어떠한 산이라도 포함된다.

(a) 변형 아미노산, 폴리아미노산 또는 펩티드에 바람직하지 못한 효과를 미치는 것, 예컨대 화학 분해 반응을 시발시키거나 촉진시키는 것,

(b) 마이크로스피어 형성을 저해하는 것,

(c) 마이크로스피어의 활성제 전달 물질과의 결합을 저해하는 것, 및

(d) 이 활성제 전달 물질과 바람직하지 못한 상호 작용을 갖는 것.

이러한 점들을 고려하여 사용하기에 바람직한 산은 아세트산, 시트르산, 염산, 인산, 말산 및 말레산이 포함된다.

마이크로스피어 안정화 첨가물을 이 마이크로스피어을 제조하기 전에 산 수용액에 배합하거나, 화합물 또는 전달 용액에 배합할 수도 있다. 어떤 활성제에서는, 이러한 첨가물들이 존재하는 것이 용액에서의 마이크로스피어의 안정도 및/또는 분산도를 증가시킨다.

안정화 첨가제들은 약 0.1∼5%(W/V), 바람직하게는 약 0.5%(W/V)의 농도로 사용할 수 있다. 마이크로스피어 안정화 첨가물의 바람직한 예로서는, 아라비아 고무, 젤라틴, 메틸 셀룰로오스, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 카르복실산과 그의 염, 및 폴리리신이 포함되는데, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직한 안정화 첨가물은 아라비아 고무, 젤라틴 및 메틸 셀룰로오스이다.

상기한 바와 같은 조건 하에서, 이 화합물 분자, 폴리아미노산 또는 펩티드는 전달 물질이 이 담체 격자에 분산되는 고체 격자 유형이나 비어 있는 유형의 마이크로스피어, 또는 액체나 고체의 전달 물질을 캡슐화하는 캡슐 유형의 마이크로스피어를 형성한다. 이 화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드 마이크로스피어를 가용성 물질, 예컨대 상기 산 수용액에서의 의약 제제의 존재 하에서 형성시킬 경우, 이러한 물질은 이 마이크로스피어로 캡슐화될 것이다. 이 경우, 일반적으로는 경구투여에 의해 생체 활성도가 떨어지는 펩티드, 단백질 및 다당류와 같은 의약적 활성 물질 및 충진된 유기 분자들, 예컨대 항균제 등을 캡슐화할 수 있다. 이 마이크로스피어에 배합될 수도 있는 의약 제제의 양은 용액에서 제제의 농도 및 담체에 대한 전달 물질의 친화도를 포함하는 다수의 인자들에 좌우된다. 화합물, 폴리아미노산 떠는 펩티드 마이크로스피어는 이 활성제의 생리학적인 성질 및 생물학적 성질을 변화시키지 않는다. 또한, 캡슐화 공정도 이 활성제의 의약 성질을 변화시키지 않는다. 어떠한 의약 제제라도 이 마이크로스피어내에 배합될 수 있다. 이 시스템은 특히, 이렇게 하지 않으면 이 마이크로스피어가 그 표적 부위(즉, 이 마이크로스피어의 성분들이 방출되어야 할 부분)에 다다르기 전에 투여된 동물의 체내에서의 조건에 의해 파괴되거나 비활성화되는 화학적 또는 생물학적 활성제를 전달하는 데, 및 위장계에서의 흡수도가 좋지 않은 의약 제제를 전달하는 데 유리하다.이 표적 부위는 사용되는 약물에 따라 다양해질 수 있다.

마이크로스피어의 입자 크기는 위장계의 표적 부위에서의 활성제 방출을 결정하는 데 중요한 역할을 한다. 바람직한 마이크로스피어는 약 0.1∼10 미크론(0.1 미크론 포함) 정도, 바람직하게는 약 0.5∼5 미크론 정도의 직경을 갖는다 이 마이크로스피어는 위장계내의 표적 부위, 예컨대 위와 공장(jejunum) 사이에 이 활성제를 효과적으로 방출시키기에 충분하도록 작다. 작은 마이크로스피어는 또한, 적절한 담체 유상액(예컨대, 식염수 등장액)에 현탁액화시켜 순환계 주사, 근육 주사 또는 피하주사로 주사함으로써 비경구적으로 투여할 수도 있다. 물론, 선택된 투여방식이 투여되는 활성제의 필요성에 따라 다양해질 것이다. 거대 아미노산 마이크로스피어(>50 미크론)는 경구 전달 시스템으로서의 유효성이 떨어지는 경향이 있다.

화합물, 폴리아미노산 또는 펩티드가 활성제를 함유한 수용액 또는 물과 접하여 형성된 마이크로스피어의 크기는, 캡슐화하는 용액의 pH, 삼투 몰농도 또는 이온 세기, 용액에서의 이온 크기와 같은 물리적 또는 화학적 인자들을 조절하고 캡슐화 공정에서 사용되는 산을 선택하는 것에 의해 조정될 수 있다.

투여 혼합물은 투여하기 직전에, 담체 수용액과 활성 성분의 수용액을 혼합하여 제조할 수 있다. 또는, 이 담체와 생물학적 또는 화학적 활성 성분을 제조 공정 중에 혼합할 수도 있다. 이 용액들은 인산 완충염, 시트르산, 아세트산, 젤라틴 및 아라비아 고무 등의 첨가물을 임의로 함유할 수도 있다.

안정화 첨가물을 담체 용액에 배합할 수도 있다. 어떤 약물에 있어서는, 이러한 첨가물들을 함유함으로써 용액에서의 이 제제의 안정도 및 분산도를 증진시킨다.

안정화 첨가물은 약 0.1∼5%(W/V), 바람직하게는 약 0.5%(W/V) 정도 농도로 사용될 수도 있다. 마이크로스피어 안정화 첨가물의 바람직한 예로서는, 아라비아 고무, 젤라틴, 메틸 셀룰로오스, 폴리에틸렌 글리콜, 카르복실산과 그의 염, 및 폴리리신이 포함되는데, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직한 안정화 첨가물은 아라비아 고무, 젤라틴 및 메틸 셀룰로오스이다.

활성제의 양은 특정 활성제의 목적을 달성하기에 유효한 양이 된다. 조성물에서의 양은 전형적으로 의약적 또는 생물학적 유효량이다. 하지만, 이 조성물이 캡슐, 정제 또는 물약 등의 투여 단위 형태로 사용될 경우, 이 투여 단위 형태가 다양한 담체/생물학적 또는 화학적 활성제 조성물을 함유하거나 분화된 의약적 또는 생물학적 유효량을 함유할 수도 있기 때문에, 이 양이 의약적 또는 생물학적 유효량보다 작을 수 있다. 그 후에, 생물학적 또는 의약적 활성제의 의약적 또는 생물학적 또는 화학적 활성을 갖는 양을 함유하는 누적 단위들로, 이 총유효량을 투여할 수 있다.

사용되는 활성제, 특히 생물학적 또는 화학적 활성제의 총량은 이 기술 분야의 공지 기술에 의해 측정할 수 있다. 하지만, 의외로 일부 생물학적 또는 화락적 활성제에 있어서는, 지금 개시된 담체를 사용함으로써 전달이, 특히 경구 투여, 비내 투여, 설하 투여, 십이지장내 투여 또는 피하 투여 시스템에서의 전달이 매우 유효하게 된다는 것이 밝혀졌다. 따라서, 종래에 투여 단위 형태에서 상용되었던 양보다 훨씬 적은 양의 생물학적 또는 화학적 활성제를 투여 대상에게 투여함으로써도, 기존과 동일한 혈액 수준 및 치료 효과를 달성할 수 있다.

이 조성물에서의 담체의 양은 전달 유효량이며, 이 기술 분야에서 숙련가들에게 공지된 방법에 의해 어떠한 특정 담체 또는 생물학적 또는 화학적 활성제에 대해 이 양은 측정이 가능하다.

투여 단위 형태에는 이에 한정되는 것은 아니지만, 물, 1,2-프로판디올, 에탄올, 올리브 오일 또는 그의 배합물 어떠한 것을 포함하는 부형제, 희석제, 정제분해 물질, 윤활제, 가소제, 착색제 및 투여 담체가 또한 포함될 수도 있다.

본 발명의 조성물 또는 투여 단위 형태는 경구로 또는 십이지장내 주사로 투여하는 것이 바람직하다.

본 발명의 전달 조성물은 또한, 효소 억제제 한 가지 이상을 포함할 수도 있다. 이와 같은 효소 억제제는 악티노닌(actinonin) 또는 에피악티노닌(epiactinonin)과 같은 화합물들 및 그의 유도체를 포함하는데, 이에 한정되는 것은 아니다. 이 화합물들은 다음과 같은 구조식을 갖는다.

이 화합물들의 유도체는 미국 특허 제 5,206,384 호에 개시되어 있다. 악티노닌 유도체는 다음과 같은 구조식을 갖는데,

식 중에서, R⁵는 카르복스아미드기, 하이드록시아미노카르보닐기 및 알콕시카르보닐기 중에서 선택된 설폭시메틸기 또는 카르복시기 또는 치환된 카르복시기이고, R⁶는 하이드록시기, 알콕시기, 하이드록시아미노기 또는 설폭시아미노기이다. 그외의 효소 억제제는 아프로티닌(aprotinin: Trasylol) 및 보오만-버어크(Bowman-Birk) 억제제가 포함된다.

본 발명의 조성물 및 화합물은 생물학적 또는 화학적 활성제를 조류, 영장류와 특히 인간 등의 포유류, 및 곤충류와 같은 어떠한 동물들에게 투여하는 데 유용하다. 이 시스템은 특히, 이러한 방법 이외의 방법으로는 활성제가 표적 부위(즉, 전달 조성물의 활성제가 방출되어야 하는 부위)에 전달되기 전에 접하게 되며, 투여되는 동물의 체내에서의 조건들에 의해 파괴되거나 그 활성이 저하되는 화학적 또는 생물학적 활성제를 전달하는 데 유리한 것이다. 특히, 본 발명의 화합물 및 조성물들은 활성제, 특히 일반적으로 경구 투여가 불가능한 활성제를 경구 투여하는 데 유용하다.

다음의 실시예들은 본 발명을 한정시키지 않고 예시하는 것이다. 모든 부는 별도의 언급이 없으면 중량부를 일컫는 것이다.

실시예 1

화학식 XIX의 화합물은 다음과 같이 제조하였다.

3 L 용량의 3-가지 둥근 바닥 플라스크에 전두부에 기계적 교반 장치와 온도계를 장착하고, 이 플라스크를 얼음 배쓰(ice-bath)에서 냉각시켰다. 2 M 수산화나트륨 수용액(1.4 L)에서의 8-아미노카프릴산(100.0 g, 0.65 moles) 용액으로 둥근 바닥 플라스크를 채웠다. 이 용액의 온도는 약 5 ℃로 유지하고, 0-아세틸살리실로일 클로라이드(198.6 g, 0.76 moles, 1.2 equiv.)를 7 시간 동안에 걸쳐 조금씩 나누어 첨가하였다. 이 혼합물을 약 5 ℃에서 약 12 시간 동안 교반시켜 황색의 단일상 용액을 생성시켰다. 이 용액은 1 M 염산을 사용하여 pH 6.8로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 600 mL). 유기층을 모아서, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하여 감압 하에서 증발시켰다. 잔류물을 2 M 수산화나트륨 수용액 최소량에 다시 용해시켰을 때, 이 용액의 pH는 약 9.5~10 정도였다. 이 혼합물은 교반시키면서 1 M 염산을 사용하여 pH 6.2로 산성화시켜, 고체를 생성시켰다. 이 고체를 여과하여 물로 씻어주고, 55% 메탄올/물(v/v)로 재결정함으로써, 화학식 XVIII의 화합물을 회백색 고체로서 얻었다(99.7 g, 57%).

물성은 다음과 같다.

mp 116-117℃. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ: 12.70 (1H; br

s), 11.95 (1H, br s) 8.81 (1H,t), 1.82 (1H, m), 7.38 (1H, m),

6.84 (2H, m), 2.36 (2H, q), 2.18 (2H, t), 1.50 (4H, br m), 1.28

(6H, m), C₁₅H₂₁NO₄에 대한 계산값 : C, 64.50; H, 7.58;I N, 5.02.

측정값: C, 64.26; H, 7.81; N, 4.93.

화학식 I, II, III, IV, VI, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XX, XXI, XXIII,

XXVII, XXVIII, (XXXIII 및 XXXIV의 화합물(화합물 I, … , XXXIV)을 제조하는 데에도 마찬가지 방법을 사용하였다. 물성은 다음과 같다.

화합물 I:

¹H NMR (300MHz, D₂O): δ 1.5 (2H, m) 2.0

(2H, t) 2.3 (2H,t) 7.5 (2H, t) 7.6 (1H, m) 7.3

(2H, m)

화합물 II:

¹H NMR (300MHz, D₂O): δ 1.4 (8H, m) 1.7

(6H, m) 2.1 (2H,t) 1.25 (1H, m) 3.05 (2H, t)

화합물 III:

¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 0.7 (3H, m)

0.9 (2H, m) 1.1 (3H,q) 1.6 (5H, m) 1.75 (2H,

q) 2.1 (2H, t) 3.0 (2H, q) 7.9 (1H, m)

화합물 IV:

C₁₁H₁₃NO₄ 에 대한 계산값 : C, 59.9, H, 5.87,

N, 6.27 측정값: C, 58.89, H, 5.85, N, 6.07.

¹H NMR (300MHz, DHSO-d₆): δ 1.8 (2H, m)

2.3 (2H, t) 3.1 (2H,q) 6.9 (2H, t) 7.4 (1H, t)

7.8 (1H, d) 8.85 (1H, t) 12.0 (1H, s) 12.15

(1H, s)

화합물 VI:

¹H NMR (300MHz, D₂O): δ 0.8 (2H, m) 1.1

(4H, m) 1.4 (2H,q) 1.6 (7H, m) 2.15 (4H, m)

3.1 (2H, t)

화합물 IX:

₁H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 0.9 (q, 3H)

1.2 (m, 7H), 1.3 (q, 2H), 1.5 (q, 3H), 1.9 (d,

2H), 2.0 (d, 1H), 2.2 (t, 2H), 3.0 (q, 3H), 7.7

(s, 1H)

화합물 X:

¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 0.7 (d, 2H)

0.9 (dd, 1H), 1.2-1.3 (m, 7H), 1.5 (q, 3H),

1.6-1.8 (m, 5H), 2.15 (t, 2H), 3.0 (m, 3H),

7.5 (s, 1H), 12.0 (s, 1H)

화합물 XI:

C₁₅H₂₀NO₃Cl 에 대한 계산값 : C, 60.48, H,

6.78, N, 4.70 측정값: C, 60.4, H, 6.68, N,

4.53. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): 1.28

(m, 6H) 1.48 (m, 4H) 2.19 (t, 2H) 3.19 (qt,

2H),7.323-7.48 (m, 4H), 8.39 (t, 1H), 12.09

(s, 1H)

화합물 XII:

C₁₇H₂₂NO₃ 에 대한 계산값 : C, 66.42, H,

7.23, N, 4.56 측정값: C, 65.80, H, 7.17, N,

4.14. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.25

(m, 6H) 1.43-1.49 (m, 4H) 2.18 (t, 2H) 3.15

(qt, 2H), 6.72 (d, 1H), 7.21-7.26 (m, 2H),

7.39 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.65 (t, 1H), 8.21

(t, 1H)

화합물 XIII:

C₁₅H₁₉NO₃ 에 대한 계산값 : C, 60.18, H,

6,41, N, 4.67 측정값: C, 60.26, H, 6.53, N,

4.61. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.28

(m, 6H), 1.45-1.52 (m, 4H), 2.19 (t, 2H),

2.22 (qt, 2H), 7.13 (m, 2H), 7.43-7.53 (m,

1H), 8.67 (t, 1H) 12.03 (s, 1H)

화합물 XIV:

C₁₄H₂₀N₂O₃ 에 대한 계산값 : · 0.66 H₂O: C,

63.04, H, 7.91, N, 10.34 측정값: C, 63.21,

7.59, 10.53 ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ

1.22-12.8 (m, 6H), 1.48-1.50 (m, 4H), 2.18

(t, 2H), 3.24 (qt, 2H), 7.48 (m, 1H), 8.15 (d,

1H), 8.63-8.69 (m, 2H), 8.97 (d, 1H)

화합물 XX:

C₁₅H₂₀NO₃F 에 대한 계산값 : C, 60.09, H,

7.19, N, 4.98 측정값: C, 63.82, H, 7.23, N,

4.94. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.28

(m, 6H) 1.49 (m, 4H) 2.19 (t, 2H) 3.23 (qt,

2H), 7.24-7.30 (m, 2H), 7.49-7.60 (m, 2H), 11.99 (s, 1H)

화합물 XXI:

C₁₇H₂₃NO₄ 에 대한 계산값 : C, 66.85, H,

7.61, N, 4.58 측정값 : C, 66.81, R, 7.69, N,

4.37. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.26

(m, 6H) 1.42-1.50 (m, 4) 2.18 (t, 2H) 3.13

(qt, 2H), 6.63 (d, 1H). 6.80 (t, 1H), 6.86 (d,

1H), 7.15 (t, 1H), 1.39 (d, 1H), 7.60 (d,1H),

8.03 (t, 1H), 9,95 (s, 1H), 12.12 (s, 1H)

화합물 XXIII:

C₁₅H₂₇NO₃ 에 대한 계산값 : C, 66.86, H,

10.22, N, 5.19 측정값 : C, 66.92, H, 10.72,

N, 5.14. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ

1.56-1.34 (m, 13H) 1.46 (t, 2H) 1.60-1.68

(m, 5H), 2.04 (t, 1H), 2.17 (t, 2H), 2.97 (qt,

2H), 7.62 (t, 1H), 11.98 (s, 1H)

화합물 XXVII:

C₁₈H₂₇NO₄ 에 대한 계산값 : C, 67.25, H,

8.48, N, 4.36 측정값: C, 67.23, H, 8.57, N,

4.20. ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.22-

1.26 (m, 12) 1.45-1.51 (m, 4H) 2.16 (t,

2H) 3.25 (qt, 2H), 6.85 (t, 2H), 7.37 (t, 1H),

7.81 (d, 1H), 8.79 (t, 1H), 11.95 (s, 1H),

12.72 (s, 1H)

화합물 XXVIII:

¹IH NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.26

(8H, br m), 1.49 (4H, m), 2.17 (2H, t),

3.26 (2H, m), 6.86 (2H, m), 7.37 (1H,

m), 7.83 (1H, m), 8.80 (1H, t), 11.95

(1H, s), 12.73 (1H, s).

화합물 XXXIII:

¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 1.2 (a,

2H), 1.3 (q,2H), 1.3 (q, 2H), 1.5 (q,

2H), 2.2 (t, 2H), 3.0 (q, 2H),3.5 (s,

2H), 7.3 (m. 5H), 8.0 (s, 1H)

화합물 XXIV:

C₁₂H₁₇NO₄ 에 대한 계산값 : C, 62.23,

H, 6.83, N, 5.57 측정값: C, 61.93, H,

6.80, N, 5.56. ¹H NMR (300MHz,

DMSO-d₆): δ 1.24-1.34 (m, 2H), 1.49

1.57 (m, 4H) 2.19 (t. 2H) 3.26 (qt,

2H), 6.68 (t, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.83

(d, 1H) 8.81 (t, 1H), 12.08 (s, 1H),

12.72 (s, 1H)

실시예 1A

화학식 XIX의 화합물의 다른 합성 방법은 다음과 같다.

5 L 용량의 3-가지 둥근 바닥 플라스크에 가열 맨틀과 전두부의 기계적 교반 장치, 주입 깔때기(funnel) 및 온도계를 장착하였다. 반응은 아르곤 기체 하에서 실시하였다. 하이드록시아민-0-술폰산(196.7 g, 1.74 moles, 1.10 equiv.)과 포름산(1 L)을 둥근 바닥 플라스크에 첨가하고 교반시켜 백색 슬러리가 생성시켰다. 포름산(600 mL)에서의 시클로옥타논(200.0 g, 1.58 moles, 1.0 equiv ) 용액을 이 백색 슬러리에 주입 깔때기를 통해 적가하였다. 첨가 후에 이 주입 깔대기를 환류관으로 교체하고, 반응을 1 시간 동안 가열하여 환류시켜 갈색 용액을 생성시켰다. 이 용액을 실온으로 냉각시킨 후에, 암모늄 클로라이드 포화 수용액(1.5 L)와 물(1.5 L)의 혼합물에 쏟아 부었다. 이 수용성 혼합물을 클로로포름으로 추출하였다 (3 × 1200 mL). 클로로포름층을 모은 후에, 비이커로 옮겨 담고, 탄산수소나트륨 포화 수용액(2 L)를 천천히 첨가하였다. 그 후에, 클로로포름층을 분리시켜, 무수황산 나트륨으로 건조시키고, 감압 하에서 건조시켜 갈색 오일을 생성시켰다, 이 오일을 자기 교반기 장치 하에서의 500 mL 용량의 둥근 바닥 플라스크에 넣었다. 이 둥근 바닥 플라스크에 실리콘 오일 배쓰를 장치하고, 상부에 온도계가 장착되어 있는 짧은 증류관을 장착시켰다. 다지형 리시버(Cow-type receiver)를 250 mL 용량플라스크와 3 개와 연결시켰다. 2-아자시클로노나논(145 g, 65%, mp 64-69 ℃)를 진공 증류하여 얻었다(3.0∼3.4 mm Hg 압력 하에서 상부 온도계의 온도 80∼120 ℃로 분별 증류됨).

5 L 용량의 3-가지 둥근 바닥 플라스크에 가열 맨틀, 전두부 기계적 교반장치, 환류관 및 온도계를 장착하였다. 5 M 수산화나트륨 수용액(650 mL, 3.23 moles, 5.5 equiv.)에서의 2-아자시클로노나논(83 g, 0.59 moles, 1.0 equiv.) 현탁액을 이 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. 이 혼합물을 4 시간 동안가열 환류시켜(내부 온도 110 ℃), 투명한 황색 용액을 생성시켰다. 가열 맨틀과 환류관을 제거하였다. 이 용액을 실온으로 냉각시킨 후에, 물(650 mL)로 희석시키고 얼음 배쓰에서 추가로 냉각시켰다. 교반시켜 주면서, 0-아세틸살리실로일 클로라이드 미세 분말(114 7 g, 0.59 moles, 1.0 equiv.)을 조금씩 나누어서 첨가하고, 1 시간 동안 계속 냉각시켰다. 추가 30 분 이후에, 얼음 배쓰를 제거하고 대기 온도에서 21 시간 동안 교반을 계속하여 잘색빛을 띠는 황색 용액을 생성시켰다. 이 교반된 혼합물을 2 M 황산(약 850 mL)을 사용하여 pH 약 1 정도로 산성화시켜, 황색의 고체를 생성시켰다. 여과법에 의해 고체를 모아서, 따뜻한 메탄올(1.7 L)에 용해시켰다. 활성탄(약 5 g)을 이 메탄올에 첨가하고 용액을 10 분 동안 교반시켰다. 활성탄을 여과하여 제거하고, 챠콜 잔류물을 메탄올 300 mL로 씻어냈다. 여과액(즉, 메탄올 2 L)을 모은 것에 물(2 L)을 첨가하고, 4 ℃로 밤새 정치시켜 회백색 고체를 석출시켰다. 이 불순한 생성물을 여과하고 65%의 메탄올/물(v/v)로 재결정하여 화학식 XIX의 화합물(69.1 g, 42%)을 회백색의 고체로서 얻었다.

물성은 다음과 같다.

mp 116-117℃; HPLC, ¹H NMR and C₁₅H₂₁NO₄ 에 대한 계산값 :

C, 64.50; H, 7.58; N, 5.02. 측정값: C, 64.26; H,7.81; N,4.93.

실시예 2

화학식 XXXI의 화합물을 다음과 같이 제조하였다.

1-아미노운데-10-엔. 건조된 테트라하이드로퓨란(THF, 30 mL)에서의 10-운데센-1-올 (5.00 g, 29,36 mmol, 1 equiv.), 트리페닐포스핀(7.70 g, 29.36 mmol, 1 equiv.) 및 프탈리미드(4.32 g, 29.36 mmol, 1 equiv.)의 혼합물을 아르곤 기체하에서 격렬하게 교반시켰다. 디에틸 아조디카르복실레이트(DEAD, 5.11 g, 29.36 mmol, 1 equiv.)를 THF(12 mL)에 희석시켜 실린지로 적가하였다. 첨가한 후에, 반응을 실온에서 4 시간 동안 교반시켰다. 용매를 진공 하에서 증발시키고 에테르(30 mL)를 첨가하여, 여과하여 제거하는 하이드라진 디카르복실레이트와 트리페닐포스핀 옥사이드를 석출시켰다. 이 석출물을 에테르로 씻어주고(2 × 30 mL), 함께 모은 여과액을 증발시켜 황색 고체를 얻었다. 이 황색 고체는 따뜻한 헥산을 넣어(3 × 50 mL) 가루로 빻아 여과시켰다. 전체 헥산을 증발시켜 1-프탈리미딜운데-10-엔을 황색 왁스로 얻었다.

이 황색 왁스를 하이드라진 하이드레이트(1.47 g, 1 equiv., 29.36 mmol)의 에탄올 용액(38 mL)에 용해시켰다. 이 혼합물을 2 시간 동안 가열하여 환류시켰다. 이 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후에, 진한 염산(30 mL)를 첨가하고 고체를 소결된 글래스 필터를 통해 여과하였다. 잔류물을 물(50 mL)로 씻어준 후에 여과액에 첨가하고 증발시켜 황색 고체를 생성시켰다. 이 황색 고체를 1 M NaOH(100 mL)에 다시 용해시키고 에테르로 추출하였다(2 × 50 mL). 에테르를 건조시키고 증발시켜 황색오일을 생성시켰다. 이 오일을 쿠게르뢰르(Kugelrohr) 증류법(약 0.1 mmhg, 100 ℃)으로 정제하여 밝은 황색 오일의 1-아미노운데-10-엔(2)을 얻었다(3.29 g, 66%).

물성은 다음과 같다.

¹H NMR (300 mHz, DMSO-d₆); δ 1.23 (l4H, br m), 1.99

(2H, m), 2.48 (2H, m), 4.94 (2H, m), 5.77 (1H, m).

1-(0-아세틸살리실로일아미노)운데-10-엔. THF(30 mL) 용매와 0-아세틸살리실로일 클로라이드(3.82 g, 19.25 mmol, 1 equiv.)를 얼음 배쓰에서 냉각시켰다. 트리에틸아민(1.95 g, 19.25 mmol, 1 equiv.)을 실린지로 적가한 후에, 1-아미노운데-10-엔(3.26 g, 19.25 mmol, 1 equiv.)를 THF(10 mL)에 용해시켜 실린지로 적가하였다. 얼음 배쓰를 제거하고 반응을 실온에서 3 시간 30 분 동안 교반시켰다. 용매를 제거한 후에, 잔류물을 EtOAc(50 mL)에 용해시키고, 물(2 × 30 mL)로 씻어주었다. 유기층을 건조시키고 증발시켜, 무색 오일의 1-(0-아세틸살리실로일아미노)운데-10-엔을 6.59 g의 양으로 얻었다.

물성은 다음과 같다.

¹H NMR (300 mHz, DMSO-d₆: δ1.26 (12H, br s), 1.47 (2H,m),

1.99(2H,m), 2.19 (3H,s), 3.15 (2H, q), 4.95 (2H, m), 5.78 (1H, m),

7.15 (1H, m), 7.30 (1H, m), 7.50 (2H, m) 8.24 (1H, t).

화합물 XXXI

디클로로메탄(108 mL)에 용해시킨 1-(0-아세틸살리실로일아미노)운데-10-엔(6.59 g, 19.25 mmol, 1 equiv.)을 물(108 mL), 황산(9 M, 13 mL), 빙초산(2.16 mL) 및 메틸트리알킬(C₈∼C₁₀)암모늄 클로라이드(Adogen^® 464, Aldrich Chemical Co.에서 시판: 0.32 g)의 혼합물에 첨가하였다. 이 혼합물을 얼음 배쓰에서 격렬하게 교반시키고 과망간산칼륨(9.13 g, 57.75 mmol, 3 equiv.) 조금씩 나눠1 시간 30 분 동안 첨가하였다. 첨가 후에, 얼음 배쓰를 제거하고 생성된 자주빛용액을 실온에서 20 시간 동안 교반시켰다. 용액을 얼음 배쓰에서 냉각시키고 아황산나트륨(6.8 g)을 첨가하여 과량의 과망간산염을 제거하였다. 유기층을 분리시키고 물층을 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 50 mL). 혼합한 유기 층을 식염수(50 mL)로 씻어주고, 건조시켜 증발시켰다. 수산화나트륨(2 M, 50 mL)을 잔류물에 첨가하고 30 분 동안 교반시켰다. 이 용액을 물(50 mL)로 회석시키고 에테르(50 mL)로 씻어준 후에, 2 M 염산을 사용하여 pH 1로 산성화시켰다. 생성된 고체를 여과하여 모았다. 이 고체를 65% 메탄올/H₂O 용액으로 재결정하여 황갈색 고체로서 화학식 XXXI의 화합물을 얻었다(2,78 g, 아민을 기준으로 하여 47%의 수율).

물성은 다음과 같다.

¹H NMR (300 mHz, DMSO-d₈): δ1.24 (10H, br m), 1.51

(4H, m), 2.17 (2H, t), 3.27 (2H, m), 6.86 (2H, m), 7.37

(1H m), 7.82 (1H, m), 8.80 (1H, t), 11.95 (1H, s), 12.72

(1H, s).

실시예 3

화학식 LXXXVI의 화합물을 다음과 같이 제조하였다.

1 L 용량의 3-가지 둥근 바닥 플라스크에 자석 교반기 및 환류관을 장착하였다. 메틸렌 클로라이드(300 mL) 용매의 3-(4-아미노페닐)프로피온산(30 g, 0.182 moles) 용액을 플라스크 넣고 트리메틸실릴 클로라이드(46.2 mL, 0.364 moles)을 한 번에 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 1.5 시간 동안 환류시키고, 실온으로 냉각시킨 다음에, 얼음/물 배쓰에 담궜다. 트리에틸아민(76.2 mL, 0.546 moles)을 첨가하고, 2-메톡시신나모일 클로라이드(2-methoxycinnamoyl chloride: 35.8 g, 0.546 moles)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 온도를 상승시킨 후에, 48 시간 동안 교반시켰다. 용매를 회전식 증발(rotary evaporation)로 제거한 후에 포화 탄산수소나트륨 수용액과 에틸 아세테이트를 잔류물에 첨가하였다. 층분리 후에, 물층을 2 N 황산 수용액을 이용하여 pH 1.4 정도로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(2 × 400 mL). 이를 섞은 유기 추출액을 진공으로 농축시키고, 그 잔류물을 50%(v/v) 메탄올 수용액으로 재결정하여 황갈색 고체로서 생성물을 얻었다(48.57 g, 82%).

물성은 다음과 같다.

¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ 12.1 (1H, br), 7,8 (1H, dd), 7.6 (3H,

m), 7.4 (1H, m), 7.3 (2H, m), 7.1 (1H, d), 7.0 (1H, t), 6.9 (1H, d), 3.9

(3H, s), 2.8 (2H. t), 2.5 (4H, m).

C₁₉H₁₉NO₄ 에 대한 계산값 : C, 70.14; H, 5.88; N, 4.31. 측정값 : C,

69.76; H, 5.91; N, 4.21.

실시예 4

화학식 CXVII의 화합물을 다음과 같이 제조하였다.

3 L 용량의 3-가지 둥근 바닥 플라스크에 전두부의 기계적 교반 장치와 온도계를 장착하였다. 2 M 수산화나트륨 수용액(1.4 L)을 용매로 한 8-아미노카프릴산(10,0 g, 0.054 moles) 용액을 둥근 바닥 플라스크에 넣고, 0-니트로벤조일 클로라이드(12.0 g, 0.065 moles, 1.2 equiv.)을 조금씩 나누어서 7 시간에 걸쳐 첨가하였다. 이 혼합물을 25 ℃에서 12 시간 동안 교반시켜 단일상의 황색 용액을 얻었다. 이 용액을 1 M 염산을 사용하여 pH 2로 산성화시키고, 오일성의 잔류물을 분리시켜 정치시켰다. 물(300 mL)을 교반시키면서, 이 물에 이 오일을 첨가하여 용해시키고, 얼음/물 배쓰에서 냉각시켰다. 생성물이 백색 고체로서 석출되었다. 이 고체를 여과하고, 물(3 × 300 mL)로 씻어낸 후에, 55% 아세토니트릴/물(v/v)로 재결정하여 화합물 CXVII을 회백색 고체로서 얻었다(7.4 g, 47%, mp 89∼92 ℃).

물성은 다음과 같다.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ: 12.0 (1H, s), 8.65 (1H, t), 8.0 (1H,

dd), 7.8 (1H, m), 7.65 (1H, m), 7.5 (1H, m), 3.2 (2H, q), 2.2 (2H, t),

1.5 (4H, br m), 1.3 (6H, br m).

C₁₅H₂₀N₂O₅ 에 대한 계산값 : C, 58.41; H, 6.54; N, 9.09. 측정값 : C,

58.50; H, 6.71 ; N, 9.14.

그 외의 본 발명 화합물들은 실시예 1∼4에서 전술한 바와 같은 방법으로 용이하게 제조할 수 있었다.

실시예 5~15 - 래트에서의 재조합 생장 호르몬의 생체내 평가

다음 표 1에 나타낸 바와 같이 변형 아미노산과 재결합 인체 생장 호르몬(rhGH)을 인산염 완충 용액에서 pH 약 7∼8 정도로 혼합하여 투여 조성물들을 제조하였다.

이 투여 조성물은 설하로, 경구 위관 영양법, 십이지장내 투여법 또는 결장투여법으로 래트에게 투여하였다. Medix Biotech, Inc.제의 rhGH용 ELISA 분석을 이용함으로써 전달을 측정하였다. 결장내 투여의 경우, 샘플을 제조하여 단식을 시킨 래트에게 프로필렌 글리콜(0∼50%)와 rhGH 1 mg/kg을 함유하는 완충 용액에 담체 25 mg/kg으로 투여하였다.

결과들은 다음 표 1에 나타내었다.

비교예 5A

rhGH (6 mg/mL) 경구 위관 영양법으로 래트에게 투여하고, 실시예 5에서와 같은 방법으로 전달을 측정하였다.

결과는 다음 표 1에 나타내었다.

[표 1]

rhGH의 생체내 전달

실시예 16~27 - 래트에서의 재조합 생장 호르몬의 생체내 평가

투여 용액의 제조 방법

전달제를 증류수에 용해시켜 염산 수용액 또는 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH 7.2∼8.0으로 조정하였다. rhGH, D-마니톨 및 글리신을 혼합하여 rhGH 원액을 제조하고, 이 혼합물을 2% 글리세롤/물에 용해시켰다. 그 후에, 이 원액을 전달제 용액에 첨가하였다. 활성제에 대한 전달제의 비율 몇 가지가 연구되었다.

생체내 실험

체중 200∼250 g인 숫컷 스프라그-다울레이(Sprague-Dawley) 래트를 24 시간 동안 단식시킨 후에, 케타민(44 mg/kg)과 클로르프로마진(1.5 mg/kg)을 투여 15분 전에 투여하였다. 상기한 바와 같은 투여 용액 중의 한 가지를 피하 주사, 비내 점적법 또는 설하 점적법으로 래트에게 투여하였다. 혈액 샘플을 혈청 rhGH 농도 또는 혈청 칼슘 농도 측정용으로 꼬리 동맥에서 연속적으로 채혈하였다. 이 실험에서의 rhGH 투여량은 0.1 mg/kg이였다.

혈청 rhGH 농도는 rhGH 효소 면역 분석 테스트 키트(enzyme immunoassay test kit)로 측정하였다. 이 결과는 다음 표 2 및 도 1과 2에 나타내었다.

도 2에서, 원형은 화합물 CXXIII와 rhGH의 수용액을 SL(설하) 투여한 후의 반응을 나타낸 것이다. 사각형은 화합물 CXXIII와 rhGH의 수용액을 IN(비내) 투여 이후의 반응을 나타낸 것이다. 삼각형은 화합물 CXXIII와 rhGH의 수용액을 IC(결장내) 투여한 후의 반응을 나타낸 것이다. 화합물 CXXIII의 투여량은 25 mg/kg이고, rhGH의 투여량은 1 mg/kg이였다.

비교예 16A

rhGH(1 mg/kg)을 래트에게 경구 위관 영양법으로 투여하고, 전달은 상기 실시예 16에서와 같은 방법으로 측정하였다.

이 결과는 다음 표 2에 나타내었다.

[표 2]

피하 주사로 투여된 재조합 인체 생장 호르몬(rhGH) 생체 적합성의 전달제 증진

실시예 28~33 - 래트에서의 인테페론의 생체내 평가

변형 아미노산 화합물과 인테페론 a 2b를 다음 표 3에 나타낸 바와 같이 Trizma^® 염화수소산염 완충 용액(Tris-HCI)에서 약 7∼8 정도의 pH로 혼합함으로써, 투여 조성물을 제조하였다. 경우에 따라, 폴리에틸렌 글리콜(0∼25%)을 가용제로서 첨가하였다.

경구 위관 영양법, 십이지장내 투여법 또는 결장내 투여법으로 투여 조성물을 래트에게 투여하였다. Biosource, Inc. 제의 인체 인터페론 a 용 ELISA 분석을 이용함으로써, 전달을 측정하였다.

결장내 투여의 결과는 다음 표 3에 나타내었다.

비교예 28A

인터페론 a 2b(250 μ g/kg)을 래트에게 결장내로 투여하였으며, 전달은 상기 실시예 28에서와 같은 방법으로 측정하였다.

이 결과는 다음 표 3에 나타내었다.

[표 3]

결장내 투여에 의한 인터페론의 생체내 전달

실시예 34~37 - 래트에서의 연어 칼시토닌의 생체내 평가

변형 아미노산과 연어 칼시토닌을 다음 표 4에 나타낸 바와 같이 혼합함으로써 투여 조성물을 제조하였다. 담체 400 mg을 25% 프로필렌 글리콜 수용액 2.9 mL에 첨가하였다. 생성된 용액을 교반시키고, 수산화나트륨(1.0 N)을 사용하여 pH를 7.2로 조정하였다. 전체 부피가 2.0 mL가 되도록 물을 첨가하였다. 샘플은 최종 담체 농도가 200 mg/mL이였다. 칼시토닌(10 μ g)을 용액에 첨가하였다. 전체 칼시토닌 농도는 2.5 μ g/mL이였다.

각 샘플용으로, 단식을 시킨 래트 한 무리를 마취시켰다. 경구 위관 영양법, 결장내 점적법 또는 십이지장내 투여법으로 투여 조성물을 래트에게 투여하였다. 꼬리 동맥으로부터 혈액 샘플을 연속적으로 채혈하였다. 칼슘 키트(Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri, USA)로 테스트함으로써, 혈청 칼슘을 측정하였다.

이 결과를 다음 표 4에 나타내었다.

[표 4]

칼시토닌의 생체내 전달

실시예 38~43 - 래트에서의 연어 칼시토닌의 생체내 평가

투여 용액의 제조 방법

전달제를 증류수에 용해시키고, 염산 수용액 또는 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH 7.2∼8.0으로 조정하였다. sCT를 시트르산(0.085 N)에 용해시켜 sCT원액을 제조하였다. 그 후에, 이 원액을 전달제 용액에 첨가하였다. 활성제에 대한 전달제의 몇 가지 다양한 비율을 연구하였다.

생체내 실험

체중 200∼250 g인 숫컷 스프라그-다울레이 래트를 25 시간 동안 단식시킨 후에, 케타민(44 mg/kg)과 클로르프로마진(1.5 mg/kg)을 투여 15분 전에 투여하였다. 상기한 바와 같은 투여 용액 중의 한 가지를 피하 주사로 래트에게 투여하였다. 혈액 샘플을 혈청 칼슘 농도 측정용으로 꼬리 동맥에서 연속적으로 채혈하였다.

혈청 칼슘 농도는 UV/VIS 스펙트로미터(Perkin Elmer)을 사용하는 0-크레졸프탈레인 콤플렉존법(0-cresolphthalein complexone method: Sigma)으로 측정하였다. 이 결과는 다음 표 5에 나타내었다.

비교예 38A

연어 칼시토닌을 래트에게 경구 위관 영양법으로 투여하고, 전달은 상기 실시예 38에서와 같은 방법으로 측정하였다. 이 결과를 다음 표 5에 나타내었다.

[표 5]

피하 주사로 투여된 연어 칼시토닌(sCT, 0.2 μ g/kg으로 투여) 생체 적합성의 전달제 증진

실시예 44~50 - 래트에서의 헤파린의 생체내 평가

투여 조성물은 변형 아미노산과 헤파린을 다음 표 4에서와 같이 혼합하여 제조하였다. 시험관에서, 담체 900 mg을 프로필렌 글리콜 3 mL에 용해시키고 헤파린 나트륨 0,299 g을 물 3 mL에 용해시켰다. 이 용액들을 교반시키면서 혼합하였다. 용액이 얻어질 때까지 수산화나트륨(10 M)을 생성된 혼합물에 첨가하였다. 그후에, 진한 염산으로 pH를 7.4± 0.5로 조정하고, 최종 용액을 약 40 ℃에서 30 분 동안 소니케이트(sonicate)하였다.

단식을 시킨, 의식이 있는 래트 군에게 경구 위관 영양법으로 이 조성물을 투여하였다. 혈액 샘플은 케타민(44 mg/kg)을 투여하고 심장 천자로 채혈하였다. 헨리,제이.비.(Henry, J.B.) 등의 "실험실 방법에 의한 임상 진단 및 치료(Clinical Diagnosis and Mangenment by Laboratory Methods; Philadelphia, PA; WB Saunders (1979))"에 개시되어 방법에 따라 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT)을 이용하여 헤파린 활성을 측정하였다.

결과는 다음 표 6에 나타내었다.

비교예 44A

헤파린(100 mg/kg)을 래트에게 경구 위관 영양법으로 투여하고, 헤파린 활성은 상기 실시예 44에서와 같이 측정하였다.

결과는 다음 표 6에 나타내었다.

[표 6]

경구 투여에 의한 헤파린의 생체내 전달

실시예 51

상기 실시예 44에서와 같은 방법으로 실시하였는데, 헤파린을 저분자량의 헤파린으로 대체하고, 필요에 따라 용해시키기 위한 물과 프로필렌 글리콜의 양을 변화시켰다.

실시예 52~58 - 래트에서의 부갑상선 호르몬의 생체내 평가

투여 용액 제조 방법

전달제를 증류수 및/또는 프로필렌 글리콜에 용해시키고, 염산 수용액이나 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH 7.2∼8.0가 명확하게 되도록 조정한다. 물에 부갑상선 호르몬을 용해시켜 부갑상선 호르몬의 원액을제조하였다. 그 후에, 이 부갑상선 호르몬 용액을 전달제 용액에 첨가하였다. 활성제에 대한 전달제의 비율을 몇 가지로 다양하게 실험하였다.

생체내 실험

체중 200-250 g의 숫컷 스프라그-다울레이 래트를 24 시간 동안 단식시키고, 투여 15 분 전에 케타민(44 mg/kg)과 클로르프로마진(1.5 mg/kg)을 투여하였다. 이 래트에게 상기한 바와 같은 투여 용액 중의 한 가지를 경구 위관 영양법이나 결장내 점적법으로 투여하였다. 혈액 샘플은 부갑상선 호르몬 농도의 혈청 측정용으로 꼬리 동맥으로부터 연속적으로 채혈하였다. 혈청 부갑상선 호르몬 농도는 부갑상선 호르몬 방사 면역 분석 테스트 키트로 측정하였다.

생체내 경구 투여

부갑상선 호르몬(PTH)과 비-a -아미노산 전달제를 함유하는 용액의 경구 투여를 래트의 생체내에서 테스트하였다. 결과는 활성제만으로 마찬가지의 투여를 한 경우에 비래 부갑상선 호르몬의 경구 생체 적합성에서의 현저한 증가가 나타났다. 데이타는 다음 표 7에 나타내었다.

[표 7]

부갑상선 호르몬(PTH)의 경구 투여 생체 적합표의 전달제 증진

상기한 바와 같은 특허, 출원, 테스트 방법 및 공보 전문을 참고문헌으로 첨부하였다.

본 발명은 상기한 바와 같은 상세한 설명의 견지에서 이 기술 분야에서의 숙련가에게 다양한 변이를 가능하게 한다. 이와 같이 명확한 모든 다양성이 다음의 청구항에서 전체적으로 의도하는 범주내에 있다.

Claims

다음 화학식 CXXIV를 갖는 화합물의 제조 방법에 있어서,

화학식 CXXIV

(식 중에서, Y는 C=0 또는 SO₂이며,

R¹은 C₃-C₂₄의 알킬기, C₂-C₂₀의 알켄닐기, C₂-C₂₀의 알킨기, 시클로알킬기 또는 방향족 고리 화합물이고,

R²는 수소, C₁-C₄의 알킬기 또는 C₂-C₄의 알켄닐기이며,

R³는 C₁-C₇의 알킬기, C₃-C₁₀의 시클로알킬기, 아릴기, 티에틸기, 피롤로기 또는 피리딜기인데, R³는 C₁-C₅의 알킬기, C₂-C₄의 알켄닐기, F, Cl, OH, SO₂, COOH 또는 SO₃H 중 한 가지 이상과 임의로 치환된 것임),

(a) 다음 화학식 CXXV를 갖는 화합물과,

화학식 CXXV

다음 화학식을 갖는 화합물,

(식 중, Y, R¹, R² 및 R³는 상기한 바와 같고, X는 이탈기임)을 염기의 존재 하의 물에서 반응시키는 것으로 이루어진 제조 방법.
(A) 생물학적 활성제 한 가지 이상과,

(B) 다음 화학식을 갖는 담체 화합물 또는 그의 염 한 가지 이상으로 이루어진 의약 조성물.

2-HO-Ar-CONR⁸-R⁷-COOH

식 중에서, Ar은 치환된 또는 비치환된 페닐기나 나프틸기이며,

R⁷은 C₄-C₂₀의 알킬기, C₄-C₂₀의 알켄닐기, 페닐기, 나프틸기, (C₁-C₁₀ 알킬)페닐기, (C₂-C₁₀ 알켄닐)페닐기, (C₁-C₁₀ 알킬)나프틸기, (C₂-C₁₀ 알켄닐)나프틸기, 페닐(C₁-C₁₀ 알킬기), 페닐(C₂-C₁₀ 알켄닐기), 나프틸(C₁-C₁₀ 알킬기) 및 나프틸(C₂-C₁₀ 알켄닐기)로 이루어진 군 중에서 선택된 것이고,

R⁸은 수소, C₁-C₄의 알킬기, C₂-C₄의 알켄닐기, 하이드록시기 및 C₁-C₄의 알콕시기로 이루어진 군 중에서 선택된 것이며,

R⁷은 임의로 C₁-C₄의 알킬기, C₂-C₄의 알켄닐기, C₁-C₄의 알콕시기, -OH, -SH 및 -CO₂R⁹(식 중, R⁹은 수소, C₁-C₄의 알킬기 또는 C₂-C₄의 알켄닐기임) 또는 그의 조합기로 치환되며,

R⁹은 수소, C₁-C₄의 알킬기 또는 C₁-C₄의 알켄닐기이고,

R⁷은 임의로 산소, 질소, 황 또는 그의 어떠한 조합기로 치환되며,

단, 이 화합물은 산 작용기의 알파 위치에서 아미노기와 치환되지 않아야만 함.
제 2 항에 있어서, 상기 활성제가 펩티드인 조성물.
제 2 항에 있어서, 상기 활성제가 무코 다당류인 조성물.
제 2 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬, 소 생장 호르몬, 생장 호르몬 방출 호르몬, 인터페론, 인터로이킨-I, 인터로이킨-I I, 인슐린, 헤파린, 저분자량 헤파린, 칼시토닌, 에리스로포이에틴, 심방성 나트륨 이뇨 인자(ANF), 항원, 항진균제를 포함하지만 이에 한정되지는 않는 항미생물제, 모노클로날 항체, 소마토스타틴, 아드레노코르티코트로핀, 고나도트로핀 방출 호르몬, 옥시토신, 바소프레신, 크로몰린 나트륨, 반코마이신, 부갑상선 호르몬, 데스페리옥사민(DFO) 및 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택되는 것인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 헤파린인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 저분자량 혜파린인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 부갑상선 호르몬인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 칼시토닌인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 인슐린인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 인터페론인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 에리스로포이에틴인 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 활성제가 크로몰린 나트륨인 조성물.
(A) 제 2 항에 따른 조성물과,

(B) (a) 부형제,

(b) 회석제,

(c) 정제 분해 물질,

(d) 윤활제,

(e) 가소제,

(f) 착색제,

(g) 투여 담체, 또는

(h) 이들의 조합 중의 어떤 것을 포함하는 투여 단위체.
제 15 항에 있어서, 캡슐을 포함하는 것인 투여 단위체.
제 15 항에 있어서, 정제를 포함하는 것인 투여 단위체.
제 2 항에 있어서, 활성제를 필요로 하는 동물에게 경구로 투여되는 것인 조성물.
다음의 화학식을 갖는 화합물 또는 그 염.

화학식 XIX
(a) 활성제, 및

(b) 다음의 화학식을 갖는 화합물 또는 그 염을 포함하는 조성물.

화학식 XIX
제 20 항에 있어서, 상기 활성제가 펩티드인 조성물.
제 20 항에 있어서, 상기 활성제가 무코 다당류인 조성물.
제 20 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬, 소 생장 호르몬, 생장 호르몬 방출 호르몬, 인터페론, 인터로이킨-I, 인터로이킨-I I, 인슐린, 헤파린, 저분자량 헤파린, 칼시토닌, 에리스로포이에틴, 심방성 나트륨 이뇨 인자(ANF), 항원, 항진균제를 포함하지만 이에 한정되지는 않는 항미생물제, 모노클로날 항체, 소마토스타틴, 아드레노코르티코트로핀, 고나도트로핀 방출 호르몬, 옥시토신, 바소프레신, 크로몰린 나트륨, 반코마이신, 부갑상선 호르몬, 데스페리옥사민(DFO) 및 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택되는 것인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 헤파린인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 저분자량 헤파린인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 부갑상선 호르몬인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 칼시토닌인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 인슐린인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 인터페론인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 에리스로포이에틴인 조성물.
제 23 항에 있어서, 상기 활성제가 크로몰린 나트륨인 조성물.
(A) 제 20 항에 따른 조성물과,

(B) (a) 부형제,

(b) 회석제,

(c) 정제 분해 물질,

(d) 윤활제,

(e) 가소제,

(f) 착색제,

(g) 투여 담체, 또는

(h) 이들의 조합 중의 어떤 것을 포함하는 투여 단위체.
제 33 항에 있어서, 캡슐을 포함하는 것인 투여 단위체.
제 33 항에 있어서, 정제를 포함하는 것인 투여 단위체.
제 20 항에 있어서, 활성제를 필요로 하는 동물에게 경구로 투여되는 것인 조성물.
다음의 화학식을 갖는 화합물 또는 그 염.

화학식 XXXI
(a) 활성제, 및

(b) 다음의 화학식을 갖는 화합물 또는 그 염을 포함하는 조성물.

화학식 XXXI
제 38 항에 있어서, 상기 활성제가 펩티드인 조성물.
제 38 항에 있어서, 상기 활성제가 무코 다당류인 조성물.
제 38 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생쟁 호르몬, 소 생장 호르몬, 생장 호르몬 방출 호르몬, 인터페론, 인터로이킨-I, 인터로이킨-I I, 인슐린, 헤파린, 저분자량 헤파린, 칼시토닌, 에리스로포이에틴, 심방성 나트륨 이뇨 인자(ANF), 항원, 항진균제를 포함하지만 이에 한정되지는 않는 항미생물제, 모노클로날 항체, 소마토스타틴, 아드레노코르티코트로핀, 고나도트로핀 방출 호르몬, 옥시토신, 바소프레신, 크로몰린 나트륨, 반코마이신, 부갑상선 호르몬, 데스페리옥사민(DFO) 및 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택되는 것인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 헤파린인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 저분자량 헤파린인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 부갑상선 호르몬인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 칼시토닌인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 인슐린인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 인터페론인 조성물.
제 41 항에 있어서, 상기 활성제가 에리스로포이에틴인 조성물.
제 41항에 있어서, 상기 활성제가 크로몰린 아트륨인 조성물.
(A) 제 38 항에 따른 조성물과,

(B) (a) 부형제,

(b) 회석제,

(c) 정제 분해 물질,

(d) 윤활제,

(e) 가소제,

(f) 착색제,

(g) 투여 담체, 또는

(h) 이들의 조합 중의 어떤 것을 포함하는 투여 단위체.
제 51 항에 있어서, 캡슐을 포함하는 것인 투여 단위체.
제 51 항에 있어서, 정제를 포함하는 것인 투여 단위체.
제 38 항에 있어서, 활성제를 필요로 하는 동물에게 경구로 투여되는 것인 조성물.
(a) 활성제, 및

(b) 다음의 화학식을 갖는 화합물 또는 그 염을 포함하는 조성물.

화학식 LII
제 55 항에 있어서, 상기 활성제가 무코 다당류인 조성물.
제 55 항에 있어서, 상기 활성제가 펩티드인 조성물.
제 55 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬, 소 생장 호르몬, 생장 호르몬 방출 호르몬, 인터페론, 인터로이킨-I, 인터로이킨-I I, 인슐린, 헤파린, 저분자량 헤파린, 칼시토닌, 에리스로포이에틴, 심방성 나트륨 이뇨 인자(ANF), 항원, 항진균제를 포함하지만 이에 한정되지는 않는 항미생물제, 모노클로날 항체, 소마토스타틴, 아드레노코르티코트로핀, 고나도트로핀 방출 호르몬, 옥시토신, 바소프레신, 크로몰린 나트륨, 반코마이신, 부갑상선 호르몬, 데스페리옥사민(DFO) 및 이들의 조합으로 구성된 군에서 선택되는 것인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 헤파린인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 저분자량 헤파린인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 부갑상선 호르몬인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 칼시토닌인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 인체 생장 호르몬인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 인슐린인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 인터페론인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 에리스로포이에틴인 조성물.
제 58 항에 있어서, 상기 활성제가 크로몰린 나트륨인 조성물.
(A) 제 55 항에 따른 조성물과,

(B) (a) 부형제,

(b) 희석제,

(c) 정제 분해 물질,

(d) 윤활제,

(e) 가소제,

(f) 착색제,

(g) 투여 담체, 또는

(h) 이들의 조합 중의 어떤 것을 포함하는 투여 단위체.
제 68 항에 있어서, 캡슐을 포함하는 것인 투여 단위체.
제 68 항에 있어서, 정제를 포함하는 것인 투여 단위체.
제 55 항에 있어서, 활성제를 필요로 하는 동물에게 경구로 투여되는 것인 조성물.