KR100300450B1 - 칼슘 수용체-활성 화합물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 일종 이상의 무기 이온 수용체의 활성을 조절할 수 있는 화학식 1, 2, 3의 화합물, 및 무기 이온 수용체 활성을 조절하여 질병 또는 질환을 치료하는 방법을 특징으로 한다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물은 칼슘 수용체 상의 세포외 Ca²⁺의 효과를 모방하거나 차단할 수 있다.

Description

칼슘 수용체-활성 화합물 {Calcium receptor-active compounds}

<기술 분야>

본 발명은 일종 이상의 무기 이온 수용체 활성을 조절할 수 있는 화합물의 고안, 개발, 조성 및 용도에 관한 것이다.

<종래 기술>

신체 중의 특정 세포는 화학적 신호에만 반응하는 것이 아니라 세포외 칼슘이온 (Ca²⁺)과 같은 이온에도 반응한다. 세포외 칼슘 Ca²⁺의 농도(본 명세서에서는'[Ca²⁺]'로 칭함) 변화는 이들 세포의 기능적 반응을 변화시킨다. 이러한 분화 세포중 하나는 상피소체 호르몬(PTH)을 분비하는 상피소체 세포이다. PTH는 혈액과 세포외 유체에서 Ca²⁺의 항상성을 조절하는 주요 내분비 인자이다.

PTH는 골 및 신장 세포에 작용함으로써 혈액중 Ca²⁺의 농도를 증가시킨다. 이어서, 이러한 [Ca²⁺]의 증가는 음성적 피드백 신호로서 작용하여 PTH 분비를 억제한다. [Ca²⁺]와 PTH 분비 사이의 상호 관계는 신체의 Ca²⁺항상성을 유지하는 필수적 메카니즘을 형성한다.

세포외 Ca²⁺는 상피소체 세포에 직접적으로 작용하여 PTH 분비를 조절한다. [Ca²⁺]의 변화를 감지하는 상피소체 세포 표면 단백질의 존재는 확인되었다(브라운(Brown) 등의 366 Nature 574, 1993 참조). 상피소체 세포에서, 이 단백질은 세포외 Ca²⁺에 대한 수용체('칼슘 수용체')로서 작용하며, [Ca²⁺]의 변화를 감지하여 기능적 세포 반응인 PTH 분비를 개시한다.

세포외 Ca²⁺는 네메드(Nemeth) 등의 문헌[11Cell Calcium319, 1990]에서 검토된 바와 같이 다른 세포 기능에 대해 영향을 미칠 수 있다. 부소포상 세포(C-세포) 및 상피소체 세포에서 세포외 Ca²⁺의 역할은 네메드 등의 문헌[11Cell Calcium323, 1990]에 논의되어 있다. 이들 세포는 유사한 Ca²⁺수용체를 발현시키는 것으로 나타났다[브라운 등의 366Nature574, 1993; 미탈(Mithal) 등의 9 Suppl. 1J. Bone and Mineral Res. s282, 1994; 로저스(Rogers) 등의 9 Suppl. 1J. Bone and Mineral Res. s409, 1994; 가레트(Garrett) 등의 9 Suppl. 1J. Boneand Mineral Res.s409, 1994]. 골 파골세포에 대한 세포외 Ca²⁺의 역할은 자이디(Zaidi)의 문헌 [10Bioscience Reports493, 1990]에 논의되어 있다. 각질 세포, 사구체 세포, 트로포블라스트, 췌장 베타 세포 및 지방 세포는 모두 이들 세포의 칼슘 수용체의 활성화에 마찬가지로 영향을 미치는 세포외 칼슘의 증가에 대해 반응한다.

시험관내에서 세포외 Ca²⁺를 모방하는 각종 화합물의 능력은 문헌[네메드 등, 'Calcium-Binding Proteins in Health and Disease' 중의 (스페르민 및 스페르미딘), 1987, Academic Press, Inc., pp. 33-35; 브라운 등, (예를 들면, 네오마이신) 128,Endocrinology3047, 1991; 쳰(Chen) 등, (딜티아젬 및 그의 유사체, TA-3090) 5J. Bone and Mineral Res.581, 1990; 및 자이디 등의 (베라파민) 167 Biochem. Biophys. Res. 807, 1990]에 논의되어 있다. 네메드 등의 제PCT/US93/01642호, 국제 공개 제WO 94/18959호 및 네메드 등의 제PCT/US92/07175호, 국제 공개 제WO 93/04373호는 무기 이온 수용체를 갖는 세포에 대한 무기 이온의 영향을 조절할 수 있는 각종의 화합물에 대해 개시하고 있다.

배경 기술로 제공된 참고 문헌은 선행 기술로 인정되지 않는다.

<발명의요약>

본 발명은 일종 이상의 무기 이온 수용체 활성을 조절할 수 있는 화합물 및 무기 이온 수용체 활성을 조절함으로써 질병 또는 질환을 치료하는 방법을 특징으로 한다. 바람직한 화합물은 세포면 칼슘 수용체에 대한 세포외 칼슘 효과를 모방하거나 차단할 수 있다.

무기 이온 수용체 활성을 조절하여 처리할 수 있는 질병 또는 질환은 (1) 비정상적 무기 이온 항상성, 바람직하게는 칼슘 항상성을 특징으로 하는 형태 (2) 세포외 또는 세포내 전달체의 생성이 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성에 의해 영향을 받을 수 있는 세포외 또는 세포내 전달체의 비정상적인 양을 특징으로 하는 형태, (3) 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성에 의해 자체적으로 향상될 수 있는 세포내 또는 세포외 전달체의 비정상적인 효과 (예컨대, 종류 및 정도에서 다른 효과)를 특징으로 하는 형태, 및 (4) 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성의 조절이 예컨대, 수용체 활성에 의해 자극되는 세포내 또는 세포외 전달체의 생성이 다른 전달체의 비정상적인 양을 보상하는 질병 또는 질환에서 유익한 효과를 나타내는 다른 질병 또는 질환 중 하나 이상을 포함한다. 무기 이온 수용체 활성을 조절하여 분비 및 (또는) 효과가 영향을 받는 세포외 전달체의 예는 무기 이온, 호르몬, 신경 전파자, 성장 인자, 및 케모킨이다. 세포내 전달체의 예는 cAMP, cGMP, IP₃, 및 디아실글리세롤을 포함한다.

즉, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 칼슘 수용체 활성을 조절하고, 일종 이상의 칼슘 수용체 활성을 조절하여 영향을 끼칠 수 있는 질병 또는 질환의 치료에 사용된다. 칼슘 수용체 단백질은 임의의 분화된 세포가 세포외 Ca²⁺농도 변화에 반응하도록 한다. 예컨대, 세포외 Ca²⁺은 상피소체 세포로부터 상피소체 호르몬이 분비되는 것을 억제하고, 파골세포에 의한 뼈 재흡수를 억제하고 C-세포로부터의 칼시토닌의 분비를 자극시킨다.

바람직한 일 태양에서, 상기 화합물은 비정상적인 뼈 및 무기 항상성, 더욱 바람직하게는 칼슘 항상성을 특징으로 하는 질병 또는 질환을 치료하기 위해 사용된다. 세포외 Ca²⁺은 철저한 항상성 조절하에 있고, 혈액 응괴, 신경 및 근육 흥분성과 같은 각종의 작용 및 적합한 골 생성을 조절한다. 비정상적인 칼슘 항상성은 (1) 혈청 칼슘의 비정상적인 증가 또는 감소, (2) 칼슘의 뇨 분비의 비정상적인 증가 또는 감소, (3) 예컨대, 골 무기 밀도 측정에 의해 평가되는 골 칼슘 농도의 비정상적인 증가 또는 감소, (4) 식이 칼슘의 비정상적인 흡수; (5) 상피소체 호르몬 및 칼신토닌과 같은 혈청 칼슘 농도에 영향을 주는 전달체의 생성 및 (또는) 방출의 비정상적인 증가 또는 감소, 및 (6) 혈청 칼슘 농도에 영향을 주는 전달체에 의해 유도되는 반응의 비정상적인 변화 중 일종 이상의 활성을 특징으로 한다. 이같은 다양한 측면에서 칼슘 항상성의 비정상적인 증가 또는 감소는 일반적인 개체군에서 나타나는 비정상적인 증가 또는 감소에 비례하고 일반적으로 질병 또는 질환에 관련된다.

비정상적인 칼슘 항상성을 특징으로 하는 질병 및 질환은 결손 칼슘 수용체 활성, 칼슘 수용체의 결손 수, 또는 칼슘 수용체에 의해 영향을 받는 결손 세포내 단백질과 같은 다양한 세포 결손에 기인할 수 있다. 예컨대, 상피소체 세포에서 칼슘 수용체는 시클릭 AMP 생성을 억제하는 G_i단백질에 결합된다. G_i단백질의 결손은 시클릭 AMP 생성을 억제하는 능력에 영향을 끼칠 수 있다.

즉, 본 발명의 제 1 측면은 하기 화학식 1의 무기 이온 수용체 조절 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염 및 착물을 특징으로 한다.

식 중,

Ar₁은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, N(CH₃)₂, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

Ar₂은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

q는 0, 1, 2 또는 3이고,

R은 H, 또는 저급 알킬이다.

본 발명의 화합물은 바람직한 입체화학을 갖는다. 화학식 1의 CH₃은 키랄 중심에 위치하고 α-(R)-메틸 구조를 제공한다. R이 CH₃일 때, 화학식 1의 R은 또한 (R)-메틸 구조를 제공하는 키랄 중심에 위치한다. 즉, R이 CH₃일 때, 화학식 1의 화합물은 (R,R) 입체화학을 갖는다.

무기 이온 수용체 활성은 무기 이온 수용체 활성의 결과로서 유도되는 작용이다. 이들 작용은 세포내 및 세포외 전달체로서 작용할 수 있는 분자의 제조를 포함한다.

무기 이온 수용체-조절 화합물은 이온모방형, 이온분해형, 칼슘모방형 및 칼슘분해형을 포함한다. 이온모방형은 무기 이온 수용체에 결합되고 무기 이온 수용체에서 무기 이온의 효과를 모방하는 (즉, 발현시키거나 또는 강화시키는) 화합물이다. 바람직하게는, 이같은 화합물은 일종 이상의 칼슘 수용체 활성에 영향을 미친다. 칼슘모방형은 일종 이상의 칼슘 수용체 활성을 유발시키고 칼슘 수용체에 결합된 이온모방형이다.

이온분해형은 무기 이온 수용체에 결합되고 무기 이온 수용체에서 무기 이온에 의해 유발된 일종 이상의 활성을 차단하는 (즉, 억제시키거나 감소시키는) 화합물이다. 바람직하게는, 화합물은 일종 이상의 칼슘 수용체 활성에 영향을 미친다. 칼슘분해형은 세포외 칼슘에 의해 발현되는 일종 이상의 칼슘 수용체 활성을 차단하고 칼슘 수용체에 결합된 이온 분해형이다.

이온모방형 및 이온분해형은 고유의 무기 이온 리간드 결합과 유사한 수용체 위치에서 결합될 수 있거나 다른 위치 (예: 알로스테르 위치)에서 결합될 수 있다. 예컨대, 칼슘 수용체에 결합된 NPS R-467은 칼슘 수용체 활성을 유도시키므로 NPS R-467은 칼슘모방형으로서 분류된다. 하지만, NPS R-467은 세포외 칼슘과 다른 위치 (즉, 알레스테르 위치)에서 칼슘 수용체에 결합된다.

화합물 유효성은 화합물에 대한 EC₅₀및 IC₅₀을 계산하여 측정될 수 있다. EC₅₀은 최대 모방 효과의 ½을 유발시키는 화합물의 농도이다. IC₅₀은 최대 차단 효과의 ½을 유발시키는 화합물의 농도이다. 칼슘 수용체에서 화합물에 대한 EC₅₀및 IC₅₀은 칼슘 수용체에서 일종 이상의 세포외 칼슘의 활성을 분석하여 측정될 수 있다. EC₅₀및 IC₅₀을 측정하는 분석의 예는 네메트 등의 제 PCT/US93/01642호, 국제 공개 번호 제 WO 94/18959호, 네메트 등의 제 PCT/US92/07175호, 국제 공개 번호 제 WO 93/04373호 (이들 공개 모두는 본 명세서에 참고 문헌으로 인용됨) 및 하기에 기재되어 있다. 상기 분석은 난모 세포 표현 분석 및 칼슘 수용체 활성에 기인하는 세포내 칼슘 이온 농도 ([Ca²⁺]_i)의 증가를 측정하는 것을 포함한다. 바람직하게는, 이같은 분석은 칼슘 수용체의 활성과 관련된 특정 호르몬의 방출 또는 억제를 측정한다.

무기 이온 수용체-조절 화합물은 바람직하게는 특정 세포의 무기 이온 수용체 활성을 선택적으로 표적화 한다. 예컨대, 칼슘 수용체 활성의 선택적 표적화는주어진 농도의 화합물에 대해 다른 세포형에서보다 특정 세포형에서 칼슘 수용체 활성에 대한 더 큰 효과를 나타내는 화합물에 의해 이루어진다. 바람직하게는, 특이적인 효과는 생체내 또는 실험실내에서 측정되는 것의 10 배 이상이다. 더욱 바람직하게는, 특이적인 효과는 생체내에서 측정되고 화합물 농도는 혈장 농도 또는 세포외 유체 농도에서 측정되고, 측정된 효과는 혈장 칼시토닌, 상피소체 호르몬, 또는 혈장 칼슘과 같은 세포외 전달체의 생성이다. 예컨대, 바람직한 구체예에서, 화합물은 칼시토닌 분비에 대한 PTH 분비를 선택적으로 표적화시킨다.

바람직하게는, 이같은 화합물은 하기의 분석물 중 하나를 사용하는 5μM 이하, 더욱 바람직하게는 1 μM, 100 nM, 10 nM 또는 1 nM 이하의 칼슘 수용체에 대한 EC₅₀또는 IC₅₀을 갖는 칼슘모방형 또는 칼슘분해형이다. 더욱 바람직하게는, 상기 분석은 인간 상피소체 칼슘 수용체를 나타내는 핵산에 의해 변형되고 푸라-2가 부가된 HEK 293 세포에서의 세포내 Ca²⁺를 측정한다. 보다 낮은 EC₅₀또는 IC₅₀은 이들이 생체내 또는 실험실내에서 사용되는 화합물의 더 낮은 농도를 허용하므로 유리하다. 낮은 EC₅₀또는 IC₅₀를 갖는 화합물의 발견으로 유사하거나 향상된 효능, 유효성 및 (또는) 선택성을 갖는 추가의 화합물의 합성 및 고안이 가능하다.

본 발명의 다른 측면은 하기 화학식 2의 무기 이온 수용체 조절 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염 및 착물을 특징으로 한다.

식 중,

Ar₃은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), N(CH₃)₂, 아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

Ar₄은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

R₈은 수소 또는 페닐이고,

R₉은 수소 또는 메틸이고,

R₁₀은 수소, 메틸, 또는 페닐이다.

본 발명의 다른 측면은 하기 화학식 3의 무기 이온 수용체 조절 화합물을 특징으로 한다.

식 중,

Ar₅은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시, -CH=CH-페닐로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

Ar₆은 아세틸, 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 카르보메톡시, OCH₂C(O)C₂H₅및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

R₁₁은 수소 또는 메틸이고,

R₁₂은 수소 또는 메틸이다.

본 발명의 다른 측면은 본 명세서에 기재된 무기 이온 수용체-조절 화합물 및 생리학적으로 허용가능한 담체로 이루어진 제약 조성물을 특징으로 한다. '약리학 조성물'은 포유류, 바람직하게는 인체에 투여하기에 적합한 형태의 조성물을 칭한다. 바람직하게는, 제약 조성물은 인체에 치료 효과를 나타내는 적합한 제약 형태에서 화합물을 조절하는 충분량의 칼슘 수용체를 포함한다.

투여에 적합한 형태에 관한 고려 사항은 본 분야에서 공지되어 있고 독성 효과, 용해도, 투여 경로, 및 활성의 유지를 포함한다. 예컨대, 혈액류로 주사된 약리학 조성물은 가용성이어야 한다.

제약 조성물은 또한 그의 제약상 허용가능한 염 (예: 산 부가염) 및 착물로서 제제될 수 있다. 상기 염의 제제는 생리학적 효과를 막지 않은채 물리적 특성을 변화시킴으로써 화합물의 약리학적 이용을 용이하게 할 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 본 명세서에 기재된 무기 이온 수용체 조절 화합물을 사용하는 무기 이온 수용체 활성을 조절하여 환자를 치료하는 방법을 특징으로 한다. 상기 방법은 무기 이온 수용체 조절 화합물 치료 유효량을 포함하는 제약 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 바람직한 일 태양에서, 질병 또는 질환은 칼슘 수용체 조절 화합물 치료 유효량을 환자에게 투여하여 칼슘 수용체 활성을 조절함으로써 치료된다.

무기 이온 수용체-조절 화합물 및 이들 화합물을 포함하는 조성물을 환자를 치료하기 위해 사용할 수 있다. '환자'는 무기 이온 수용체의 조절이 유익한 효과를 나타내는 포유류를 칭한다. 무기 이온 수용체의 조절을 포함하는 치료가 필요한 환자를 의학 전문인들에게 공지된 표준 기술을 사용하여 식별할 수 있다.

바람직하게는, 환자는 (1) 비정상적인 무기 이온 항상성, 더욱 바람직하게는 비정상적인 칼슘 항상성, (2) 전달체의 생성 또는 분비가 무기 이온 수용체 활성에 의해, 더욱 바람직하게는 칼슘 수용체 활성에 의해 영향을 받는 전달체의 비정상적인 농도, 및 (3) 기능이 무기 이온 수용체 활성, 더욱 바람직하게는 칼슘 수용체 활성에 의해 영향을 받는 전달체의 비정상적인 농도 및 활성 중 하나 이상을 특징으로 하는 질병 또는 질환을 갖는 사람이다.

비정상적인 칼슘 항상성을 특징으로 하는 질병은 상피소체기능항진증, 골다공증, 및 기타 골 및 미네랄 관련 질환 등 (예를 들면 [Harrison's Principles of Internal Medicine]과 같은 표준 의학 교재에 기재됨)을 포함된다. 칼슘 수용체에 대한 세포외 Ca²⁺의 효과를 한가지 이상 모방하거나 또는 차단하여 환자의 신체에서 단백질 또는 다른 화합물의 농도에 직간접적으로 영향을 미치는 칼슘 수용체 조절 화합물을 사용하여 이러한 질병을 치료한다.

'치료적 유효량'이란 환자의 질병 또는 질환의 한가지 이상의 징후를 어느 정도 완화시키거나 또는 질병 또는 질환과 관련이 있거나 또는 그 원인이 되는 한가지 이상의 생리학적 또는 생화학적 인자를 부분적으로 또는 완전히 정상으로 회복시키는 화합물의 양을 의미한다.

바람직한 태양에서, 상기 환자는 칼슘 수용체에 의해 조절되는 성분중 한가지 이상의 농도가 비정상적인 것을 특징으로 하는 질병 또는 질환을 갖고 있으며, 상기 화합물은 상피소체 세포, 골 파골세포, 사구체 신장 세포, 근심 세관 신장 세포, 원심 세관 신장 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 헌레계제(Henle's loop) 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 표피의 각질 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, 혈소판, 혈관 평활근 세포, 심실 세포, 가스트린 분비 세포, 글루카곤 분비 세포, 신장 맥관막 세포, 유방 세포, 베타 세포, 지방 세포, 면역 세포, GI관 세포, 피부 세포, 부신 세포, 하수체 세포, 시상 하부 세포 및 뇌궁하기관 세포로 이루어지는 군 중에서 선택되는 세포의 칼슘 수용체에 대해 활성이 있다.

더욱 바람직하게는, 상기 세포는 상피소체 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 신장에서의 헌레계제(Henle's loop) 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, GI관 세포, 하수체 세포, 시상 하부 세포 및 뇌궁하기관 세포로 이루어지는 군 중에서 선택된다.

바람직한 태양에서, 상기 화합물은 상피소체 세포 칼슘 수용체에 작용하는 칼슘 모방형이고 환자의 혈청에서 상피소체 호르몬의 농도를 저하시킨다. 더욱 바람직하게는, 이 농도는 혈장 Ca²⁺를 감소시키기에 충분한 정도로 저하된다. 가장 바람직하게는, 상피소체 호르몬 농도는 정상적인 개인에게 존재하는 농도로 저하된다.

다른 바람직한 태양에서, 상기 화합물은 상피소체 세포 칼슘 수용체에 작용하는 칼슘분해형이고 환자의 혈청에서 상피소체 호르몬의 농도를 증가시킨다. 더욱 바람직하게는, 이 농도는 환자의 골 미네랄 밀도를 증가시키기에 충분한 정도로 증가된다.

이같은 치료가 필요한 환자를 혈액 또는 뇨 분석과 같은 표준 의학 기술에 의해 판정할 수 있다. 예컨대, 단백질의 생성 또는 분비가 무기 이온 농도의 변화에 의해 초래되는 단백질의 결핍을 탐지하거나, 또는 무기 이온 항상성에 영향을 미치는 호르몬 또는 무기 이온의 비정상적인 농도를 탐지함으로써 판정할 수 있다.

적용에 각종의 예를 사용한다. 이들 예는 본 발명을 어떠한 방식으로도 제한하지 않는다.

본 발명의 다른 특징 및 잇점들은 하기의 도면, 발명의 상세한 설명, 실시예 및 청구의 범위로부터 명백해질 것이다.

본 발명은 일종 이상의 무기 이온 수용체 활성을 조절할 수 있는 화합물의 고안, 개발, 조성 및 용도에 관한 것이다.

도 1a 내지 1r는 다양한 화합물의 화학 구조를 도시한다.

도 2 내지 131은 본 명세서에 설명되는 대표적인 화합물의 물리적 데이타를 제공한다.

본 발명은 일종 이상의 무기 이온 수용체 활성을 조절할 수 있는 화합물을 특징으로 하고, 바람직하게는 화합물은 무기 이온 수용체를 갖는 세포에 대한 세포외 이온의 효과를 모방하거나 차단할 수 있고, 더욱 바람직하게는 세포외 이온은 Ca²⁺이고 그 효과는 칼슘 수용체를 갖는 세포에 대한 것이다. 칼슘 활성, 칼슘 수용체 및 (또는) 칼슘 수용체 조절 화합물은 [브라운 등, Nature 366: 574, 1993];네메트 등의 제 PCT/US93/01642호, 국제 공개 번호 제 WO 94/18953호; 네메트 등의 제 PCT/US92/07175호, 국제 공개 번호 제 WO 93/04373호; [쇼백 (Shoback) 및 첸 (Chen),J. Bone Mineral Res.9: 293 (1994)]; 및 [랙케 (Racke) 등,FEBS Lett. 333: 132, (1993)]에 공개되어 있다. 상기 공개는 청구된 발명에 대한 선행 기술로 인정되지 않는다.

I. 칼슘 수용체

칼슘 수용체는 다양한 세포종 상에 존재하고 다양한 세포 종에서 다양한 활성을 가질 수 있다. 칼슘에 반응하는 상피소체 세포, 골 파골세포, 사구체 신장 세포, 근심 세관 신장 세포, 원심 세관 신장 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 헌레계제 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 표피의 각질 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, 혈소판, 혈관 평활근 세포, 심실 세포, 가스트린 분비 세포, 글루카곤 분비 세포, 신장 맥관막 세포, 유방 세포, 베타 세포, 지방 세포, 면역 세포 및 GI관 세포, 피부 세포, 부신 세포, 하수체 세포, 시상 하부 세포 및 뇌궁하기관 세포의 약리학적 효과는 칼슘 수용체의 존재에 상응한다. 또한, 상피소체 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 신장에서의 헌레계제(Henle's loop) 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, GI관 세포, 하수체 세포, 시상 하부 세포 및 서브-포니칼 기관의 세포 상의 칼슘 수용체의 존재는 물리적 데이타에 의해 확인되었다.

이러한 다양한 세포종에 존재하는 칼슘 수용체는 서로 다를 수 있다. 또한, 상기 세포는 1종 이상의 칼슘 수용체를 가질 수 있다. 상이한 세포들의 칼슘 수용체 활성과 아미노산 서열을 비교해보면 다른 칼슘 수용체종이 존재한다는 것을 알 수 있다. 예를 들어, 칼슘 수용체는 각종의 2가 및 3가 양이온에 반응할 수 있다. 상피소체 칼슘 수용체는 칼슘 및 Gd³⁺에 반응하는 한편, 파골세포는 칼슘과 같은 2가 양이온에는 반응하나 Gd³⁺에는 반응하지 않는다. 따라서, 상피소체 칼슘 수용체는 파골세포 상의 칼슘 수용체와는 약리학적으로 상이하다.

한편, 상피소체 세포 및 C-세포에 존재하는 칼슘 수용체를 코딩하는 핵산 서열은 이들 수용체가 매우 유사한 아미노산 구조를 갖는다는 것을 나타낸다. 그럼에도 불구하고, 칼슘모방형 화합물은 차별적인 약리학을 나타내고 상피소체 세포 및 C-세포에서 활성을 다르게 조절한다. 따라서, 칼슘 수용체의 약리학적 특성은 칼슘 수용체가 유사하거나 동일한 구조를 갖는다 하더라도 이들 수용체가 발현되는 세포종 또는 기관에 따라 현저하게 변할 수 있다.

칼슘 수용체는 일반적으로 세포외 Ca²⁺에 대해 낮은 친화도를 갖는다(겉보기 K_d는 일반적으로 약 0.5 mM 이상임). 칼슘 수용체는 문헌[Cooper, Bloom 및 Roth, 'The Biochemical Basis of Neuropharmacology,' Ch. 4]에 정의되어 있는 바와 같은 유리되거나 결합된 효과기 메카니즘을 포함할 수 있고, 따라서 세포내 칼슘 수용체, 예컨대 칼모둘린 및 트로포닌과는 구별된다.

칼슘 수용체는 세포외 칼슘 농도의 변화에 반응한다. 이의 정확한 변화는 특정 수용체 및 이 수용체를 포함하는 세포주에 따라 좌우된다. 예를 들어,상피소체 세포에서 칼슘 수용체에 대한 칼슘의 시험관내 작용은 다음과 같은 것이 있다:

1. 내부 칼슘의 증가. 이 증가는 외부 칼슘의 유입 및(또는) 내부 칼슘의 동원에 기인한다. 내부 칼슘 증가의 특징으로는 다음과 같은 것들이 포함된다.

(a) 1 μM La³⁺또는 1 μM Gd³⁺의 억제에 대해 반응하지 않고 이오노마이신(세포외 Ca²⁺가 존재하지 않는 경우)으로 예비처리함으로써 없어지는 [Ca²⁺]_i의 급속하고(피이크화 시간: 5초 미만) 일시적인 증가.

(b) 이 증가는 디하이드로피리딘에 의해 억제되지 않음.

(c) 일시적 증가는 10 mM 불화나트륨으로 10분간 예비처리함으로써 없어짐.

(d) 일시적 증가는 포르볼 미리스테이트 아세테이트(PMA), 마제레인 또는 (-)인돌락탐 V와 같은 단백질 키나제 C(PKC) 활성화제로 예비처리함으로써 감소됨. 단백질 키나제 C 활성화제의 총괄적인 효과는 최대 반응에 영향을 주지 않으면서 칼슘에 대한 농도-반응 곡선을 우측으로 이동시키는 것이다.

(e) 페르투시쓰 독소로 처리(100 ng/ml로 4시간을 초과함)하는 것은 상기 증가에 영향을 미치지 않는다.

2. 이노시톨-1,4,5-트리포스페이트 또는 디아실글리세롤의 형성에 있어서의 급속한(30초 미만) 증가. 페르투시쓰 독소로 처리(100 ng/ml로 4시간을 초과함)하는 것은 이 증가에는 영향을 미치지 않는다.

3. 도파민- 및 이소프로테레놀로 자극된 시클릭 AMP 형성의 억제. 이 효과는 페르투시쓰 독소로 예비처리(100 ng/ml로 4시간을 초과함)함으로써 차단된다.

4. PTH 분비의 억제. 페르투시쓰 독소로 처리(100 ng/ml로 4시간을 초과함)하는 것은 PTH 분비의 억제에는 영향을 미치지 않는다.

업계에 공지되어 있는 기술을 사용하여, 상이한 세포의 다른 칼슘 수용체에 대한 칼슘의 효과를 쉽게 측정할 수 있다. 이러한 효과는 상피소체 세포에서 관찰된 내부 칼슘의 증가에 있어서 유사할 수 있다. 그러나, 이 효과는 예를 들어 상피소체 호르몬 이외의 호르몬 방출을 유발하거나 또는 억제하는 등의 다른 측면에서 볼 때에는 상이한 것으로 예상된다.

II. 무기 이온 수용체 조절 화합물

무기 이온 수용체 조절 화합물은 일종 이상의 무기 이온 수용체 활성을 조절한다. 바람직한 칼슘 수용체 조절 화합물은 칼슘모방형 및 칼슘분해형이다. 무기 이온 수용체 조절 화합물은 특정 활성을 갖는 것으로 나타나는 화합물 (즉, 납 화함물)을 따라 모형화되는 스크리닝 화합물에 의해 확인될 수 있다.

칼슘 수용체 활성을 측정하는 바람직한 방법은 [Ca²⁺]_i의 변화를 측정하는 것이다. [Ca²⁺]_i의 변화는 인체 상피소체 칼슘 수용체를 표현하는 핵산에 의해 변환되고 푸라-2가 부가된 HEK 293 세포를 사용하고, 칼슘 수용체에 대한 핵산 코딩이 주사된 크세노푸스 (Xenopus) 난모세포에 존재하는 Cl^-의 증가를 측정하는 것과 같은 다양한 기술을 사용하여 측정될 수 있다 (네메트 등의 제 PCT/US93/01642호, 국제 공개 번호 제 WO 94/18959호). 예컨대, 폴리 (A)⁺mRNA는 상피소체 세포, 골 파골세포, 사구체 신장 세포, 근심 세관 신장 세포, 원심 세관 신장 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 헌레계제(Henle's loop) 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 표피의 각질 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, 혈소판, 혈관 평활근 세포, 심실 세포, 가스트린 분비 세포, 글루카곤 분비 세포, 신장 맥관막 세포, 유방 세포, 베타 세포, 지방 세포, 면역 세포 및 GI관 세포 등과 같은 칼슘 수용체를 나타내는 세포로부터 수득될 수 있다. 바람직하게는, 핵산은 상피소체 세포, C-세포 또는 파골세포로부터의 것이다. 더욱 바람직하게는, 핵산은 칼슘 수용체를 코딩하고 플라스미드 또는 병원 매개체 상에 존재한다.

바람직한 태양에서, 칼슘 수용체 조절 화합물은 파골세포에 의해 생체내의 골 재흡수를 억제하고, 파골세포에 의해 시험관내의 골 재흡수를 억제하고, C-세포로부터 시험관내 또는 생체내 칼시토닌 분비를 자극하고, 시험관내 상피소체 세포로부터 상피소체 호르몬 분비를 억제하고 생체내 PTH 분비를 감소시키고, 생체내 칼시토닌 농도를 증가시키거나; 또는 시험관내 파골 세포 골 재흡수를 차단하고 생체내 골 재흡수를 억제하는 칼슘모방형이다 .

다른 바람직한 태양에서, 칼슘 수용체 조절 화합물은 시험관내 상피소체 세포로부터 상피소체 호르몬의 분비를 유발시키고, 생체내 상피소체 호르몬 농도를 증가시키는 칼슘 분해형이다.

바람직하게는, 상기 화합물은 무기 이온 수용체 활성, 더욱 바람직하게는 칼슘 수용체 활성, 특히 세포를 선택적으로 표적화시킨다. '선택적'이란 화합물이 화합물의 주어진 농도에 대해 다른 세포종에서보다 특정 세포종에서 무기 이온 수용체 활성에 대한 더 큰 효과를 나타내는 것을 의미한다. 바람직하게는, 차별적인 효과는 10 배 이상이다. 바람직하게는, 농도는 혈장 농도이고 측정된 효과는 혈장 칼시토닌, 상피소체 호르몬, 또는 혈장 칼슘과 같은 세포외 전달체의 생성이다. 예컨대, 바람직한 구체예에서, 화합물은 칼시토닌 분비에 대한 PTH 분비를 선택적으로 표적화시킨다.

다른 바람직한 태양에서, 이같은 화합물은 1회 이상 5μM 이하의 EC₅₀값 또는 IC₅₀값을 갖지만 상피소체 세포, 골 파골세포, 사구체 신장 세포, 근심 세관 신장 세포, 원심 세관 신장 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 헌레계제(Henle's loop) 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 표피의 각질 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, 혈소판, 혈관 평활근 세포, 심실 세포, 가스트린 분비 세포, 글루카곤 분비 세포, 신장 맥관막 세포, 유방 세포, 베타 세포, 지방 세포, 면역 세포 및 GI관 세포, 피부 세포, 부신 세포, 하수체 세포, 시상 하부 세포 및 뇌궁하기관 세포로 이루어지는 군 중에서 선택되는 모든 세포는 아니다. 더욱 바람직하게는, 상기 세포는 상피소체 세포, 중추 신경계 세포, 말초 신경계 세포, 신장에서의 헌레계제(Henle's loop) 및 (또는) 집합관의 두꺼운 상행각 세포, 갑상선의 부포상 세포(C-세포), 장 세포, GI관 세포, 하수체 세포, 시상하부 세포 및 서브-포니칼 세포로 이루어지는 군 중에서 선택된다. 상기 세포군 내의 세포내 칼슘 수용체의 존재는 원위치에서의 잡종화 및 항체 염색에 의해 확증되었다.

바람직하게는, 무기 이온 수용체 조절 화합물는 무기 이온 수용체를 갖는 세포에 대한 세포외 이온의 효과를 모방하거나 차단하여 이들 화합물은 치료 효과를 얻는다. 무기 이온 수용체 조절 화합물는 다양한 무기 이온 수용체 형태 (예컨대, 정상적인 무기 이온 수용체, 정상적 수의 무기 이온 수용체, 비정상적인 무기 이온 수용체, 및 비정상적인 수의 무기 이온 수용체)를 갖는 세포에 대해 동일하거나, 다른 효과를 가질 수 있다.

바람직하게는, 칼슘 수용체 조절 화합물는 칼슘 수용체를 갖는 세포에서 세포외 이온의 모든 효과를 모방하거나 또는 차단한다. 칼슘모방형은 세포외 Ca²⁺의 모든 생물학적 활성을 가질 필요는 없다. 유사하게, 칼슘분해형은 세포외 칼슘에 의해 유발되는 모든 활성을 차단할 필요는 없다. 또한, 상이한 칼슘모방형 및 상이한 칼슘분해형은 세포외 Ca²⁺가 그들이 작용을 발휘하기 위해 결합하는 칼슘 수용체상의 동일 부위에 결합할 필요는 없다.

무기 조절 화합물는 천연 리간드와 정확히 동일한 방식으로 또는 유사한 정도로 무기 수용체 활성을 유발시킬 필요는 없다. 예컨대, 칼슘모방형은 칼슘 수용체에서 작용하는 칼슘에 비해 다양한 결합 위치에 결합시키거나 다양한 친화도를 보유함으로써 다양한 정도로, 다양한 지속 기간 동안 칼슘 수용체 활성을 일으킬수 있다.

A. 칼슘모방형

1. 화학식 1의 화합물의 구조

칼슘 수용체 활성을 조절할 수 있는 화학식 1의 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

<화학식 1>

식 중,

Ar₁은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, N(CH₃)₂, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고, 바람직하게는 각 치환체는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시이다. 더욱 바람직하게는, Ar₁은 이소프로필, CH₃O, CH₃S, CF₃O, I, Cl, F, CF₃, 및CH₃, 더욱 바람직하게는 CF₃O, I, Cl, F 및 CF₃로 이루어진 군으로 부터 선택된 각각 독립적인 1 내지 5개의 치환체를 갖는 페닐 또는 나프틸이고,

Ar₂은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고, 바람직하게는 각 치환체는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시이다. 더욱 바람직하게는, Ar₂은 이소프로필, CH₃O, CH₃S, CF₃O, I, Cl, F, CF₃, 및 CH₃, 더욱 바람직하게는 CF₃O, I, Cl, F 및 CF₃로 이루어진 군으로부터 선택된 각각 독립적인 1 내지 5의 치환체를 갖는 페닐 또는 나프틸이고,

q는 0, 1, 2 또는 3이고,

R은 H, 또는 CH₃이다.

'저급 알킬'은 직쇄 또는 측쇄인 탄소수 1 내지 4, 바람직하게는 1 내지 3인 포화 탄화수소이다.

'저급 알콕시'는 'O-저급 알킬'이다. 'O'는 저급 알킬에 결합된 산소이다.

'저급 티오알킬'은 'S-저급 알킬'이다. 'S'는 저급 알킬에 결합된 황이다.

'저급 할로알킬'은 적어도 하나의 할로겐으로 치환된 저급 알킬이다. 바람직하게는, 저급 할로알킬의 말단 탄소만이 할로겐으로 치환되고 1 내지 3개의 할로겐이 존재한다. 더욱 바람직하게는, 저급 할로알킬은 1개의 탄소를 포함한다. 바람직하게는, 할로겐 치환체는 Cl 또는 F이다.

'저급 할로알콕시'는 'O'-저급 할로알킬이다. 'O'는 저급 할로알킬에 결합된 산소이다.

a. Ar ₁ 및 Ar ₂ 는 모두 임의 치환된 페닐이다.

바람직한 일 태양에서, Ar₁및 Ar₂모두는 임의로 치환된 페닐이고 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

R은 수소 또는 메틸이고,

m 및 n은 각각 독립적으로 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이고,

각 X는 각각 독립적으로 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세틸, N(CH₃)₂, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH),아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다. 바람직하게는 각 X는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적로 선택된다. 더욱 바람직하게는, 각 X는 이소프로필, CH₃O, CH₃S, CF₃O, I, Cl, F, CF₃, 및 CH₃, 더욱 바람직하게는 CF₃O, I, Cl, F 및 CF₃로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고,

각 Z는 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 바람직하게는 각 Z는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 더욱 바람직하게는, 각 Z는 이소프로필, CH₃O, CH₃S, CF₃O, I, Cl, F, CF₃, 및 CH₃로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.

더욱 바람직한 일 태양에서, 적어도 하나의 Z 치환체는 메타 위치에 있다.더욱 바람직하게는, 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

R은 수소 또는 메틸이고,

m은 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이고, 바람직하게는 1 또는 2이다.

각 X는 독립적으로 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, N(CH₃)₂, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고, 바람직하게는 각 치환체는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 더욱 바람직하게는, 이소프로필, CH₃O, CH₃S, CF₃O, I, Cl, F, CF₃, 및 CH₃로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.

더욱 바람직하게는, 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

R은 수소 또는 메틸이고,

R₁은 할로겐 또는 수소이고, 바람직하게는 R₁은 F 또는 수소이고,

R₂은 수소, 할로겐, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 또는 저급 할로알콕시, 바람직하게는 R₂은 수소, CF₃, CH₃, OCF₃, 또는 F이고,

R₃은 수소, 할로겐, 또는 알콕시, 바람직하게는 R₃은 Cl, F, 수소, 또는 메톡시, 더욱 바람직하게는 메톡시이다.

대안적인 더욱 바람직한 조합에서; R₁, R₂, 및 R₃중 적어도 두 개는 할로겐이고, 바람직하게는 F 및 R은 수소 또는 CH₃이고; R은 수소 또는 CH₃, R₂은 저급 할로알킬, 또는 저급 할로알콕시, 바람직하게는 OCF₃또는 CF₃이고, R₁및 R₃은 수소이고; 그리고 R은 CH₃이고, R₃은 할로겐, 바람직하게는 Cl이고, R₁은 할로겐 또는 수소, 바람직하게는 F 또는 수소이고, R₂은 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 또는 저급 할로알콕시, 바람직하게는 수소, CF₃, CH₃, OCF₃, 또는 F이다.

b. Ar ₂ 는 나프틸이고 q는 0이다.

바람직한 일 태양에서, Ar₂는 나프틸이고, q는 0이고, 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

Ar₁은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세틸, N(CH₃)₂, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고, 바람직하게는 각 치환체는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O, CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다. 더욱 바람직하게는, Ar₁은 이소프로필, CH₃O,CH₃S, CF₃O, I, Cl, F, CF₃, 및 CH₃로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환체를 갖는 나프틸 또는 페닐이다.

더욱 바람직하게는, Ar₁은 화합물이 하기 화학식을 갖는 임의 치환된 페닐이다.

식 중,

X_n은 상술한 바와 같은 (바람직한 치환체 및 치환체의 갯수는 상술한 바와같음) 임의 치환된 페닐에 대한 임의 치환체를 나타낸다.

더욱 바람직하게는, 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

R은 CH₃또는 수소이고,

R₄은 저급 알킬, 할로겐, 또는 알콕시, 바람직하게는 이소프로필, 염소 또는메톡시이고,

R₅은 수소, 저급 알킬, 또는 할로겐, 바람직하게는 메틸, CH₃, Br, 또는 Cl이다.

c. Ar ₂ 는 나프틸이고 q는 2이다.

바람직한 일 태양에서, Ar₁은 치환된 페닐이고 Ar₂은 나프틸이고, q는 2이고 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

R은 수소 또는 CH₃이고,

n은 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이고, 바람직하게는 1 또는 2이고,

각 X는 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세틸, N(CH₃)₂, 페닐, 페녹시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고, 바람직하게는 각 치환체는 CH₃, CH₃O, CH₃CH₂O, 메틸렌 디옥시, Br, Cl, F, I, CF₃, CHF₂, CH₂F, CH₂F, CF₃O, CF₃CH₂O,CH₃S, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, NO₂, CH₃CH₂, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 및 아세톡시, 더욱 바람직하게는 이소프로필, CH₃O, CH₃S, CF₃O, CF₃, I, Cl, F, 및 CH₃이다.

더욱 바람직하게는, 화합물은 하기 화학식을 갖는다.

식 중,

R₆은 수소, 저급 할로알킬, 또는 저급 할로알콕시, 바람직하게는 수소, OCF₃또는 CF₃이고,

R₇은 할로겐 또는 수소, 바람직하게는 염소 또는 수소이다.

다른 태양에서, R, R₆및 R₇은 상술한 바와 같고 (바람직한 치환체는 상술한 바와 같음), 단 R 및 R₆이 수소이고, R₇은 Cl이 아니고; R은 CH₃이고, R₆및 R₇은 상술한 바와 같다 (바람직한 치환체는 상술한 바와 같음).

2. 화학식 2의 화합물

화학식 2의 화합물은 하기와 같다.

<화학식 2>

식 중,

Ar₃은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), N(CH₃)₂, 아세틸, 에틸렌 디옥시, 바람직하게는 N(CH₃)₂, 저급 알콕시, 또는 저급 알킬로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

Ar₄은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN 및 아세톡시, 바람직하게는 저급 알콕시, 더욱 바람직하게는 메톡시로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

R₈은 수소 또는 페닐, 바람직하게는 수소이고,

R₉은 수소 또는 메틸이고,

R₁₀은 수소, 메틸, 또는 페닐, 더욱 바람직하게는 R₁₀이 메틸일 때, 이것이부착된 키랄 탄소는 (R) 입체 이성질체이다.

바람직하게는, 화학식 2의 α-메틸은 (R)-α-메틸이다.

3. 화학식 3의 화합물

화학식 3의 화합물은 하기와 같다.

<화학식 3>

식 중,

Ar₅은 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 아세톡시, 벤질, 벤질옥시, α,α-디메틸벤질, NO₂, CHO, CH₃CH(OH), 아세틸, 에틸렌 디옥시, -CH=CH-페닐, 바람직하게는 저급 알킬, 페녹시, -CH=CH-페닐, 디메틸벤질, 메톡시, 메틸렌, 또는 에틸렌으로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

Ar₆은 아세틸, 저급 알킬, 할로겐, 저급 알콕시, 저급 티오알킬, 메틸렌 디옥시, 저급 할로알킬, 저급 할로알콕시, OH, CH₂OH, CONH₂, CN, 카르보메톡시, OCH₂C(O)C₂H₅및 아세톡시, 바람직하게는 메톡시, 저급 알킬, 페닐, 할로겐, CF₃,CN, 카르보메톡시 또는 OCH₂C(O)C₂H₅로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 0 내지 5개의 치환체로 임의 치환된 나프틸 또는 페닐이고,

R₁₁은 수소 또는 메닐이고, 바람직하게는 R₁₁이 메틸일 때 이것이 부착된 탄소는 (R) 입체이성질체이고,

R₁₂은 수소 또는 메틸이고, 바람직하게는 R₁₂가 메틸일 때 이것이 부착된 탄소는 (R) 입체이성질체이다.

4. 칼슘모방형 활성

칼슘 수용체에서 Ca²⁺의 활성을 모방하는 화합물의 능력은 업계에 공지되어 있는 방법을 사용하여 측정할 수 있으며, 네메드 등의 제 PCT/US93/01642호, 국제 공개 제 WO/18959호에 개시되어 있다. 예를 들어 칼슘모방형은 시험관내에서 상피소체 세포에 대해 시험하였을 때 다음의 활성중 한가지 이상, 바람직하게는 다음의 활성을 모두 갖는다:

1. 상기 화합물은 1 μM La³⁺또는 1 μM Gd³⁺의 억제에 대해 반응하지 않는 세포내 칼슘 농도의 급속하고(피이크화 시간: 5초 미만) 일시적인 증가를 일으킨다. [Ca²⁺]_i의 증가는 세포외 Ca²⁺가 존재하지 않는 경우 이오노마이신(세포외 Ca²⁺가 존재하지 않는 경우)으로 예비처리함으로써 없어진다.

2. 상기 화합물은 세포외 Ca²⁺의 최대 이하의 농도에 의해 유발되는 [Ca²⁺]_i의 증가를 강화시킨다.

3. 세포외 Ca²⁺에 의해 유발되는 [Ca²⁺]_i의 증가는 디하이드로피리딘에 의해 억제되지 않는다.

4. 상기 화합물에 의해 유발되는 [Ca²⁺]_i의 일시적 증가는 10 mM 불화나트륨으로 10분간 예비처리함으로써 없어진다.

5. 상기 화합물에 의해 유발되는 [Ca²⁺]_i의 일시적 증가는 포르볼 미리스테이트 아세테이트(PMA), 마제레인 또는 (-)-인돌락탐 V와 같은 단백질 키나제 C(PKC)의 활성화제로 예비처리함으로써 감소된다. 단백질 키나제 C 활성화제의 총괄적 효과는 최대 반응에 영향을 주지 않으면서 상기 분자의 농도-반응 곡선을 우측으로 이동시키는 것이다.

6. 상기 화합물은 이노시톨-1,4,5-트리포스페이트 및(또는) 디아실글리세롤의 형성에 있어서의 급속한(30초 미만) 증가를 일으킨다.

7. 상기 화합물은 도파민- 또는 이소프로테레놀로 자극된 시클릭 AMP 형성을 억제한다.

8. 상기 화합물은 PTH 분비를 억제한다.

9. 페르투시쓰 독소로 예비처리 (100 ng/ml로 4시간을 초과함)하는 것은 시클릭 AMP 형성에 대한 분자의 억제 효과를 차단하나, [Ca²⁺]_i의 증가, 이노시톨-1,4,5-트리포스페이트 또는 디아실글리세롤의 형성에 대해서는 영향을 미치지 않으며, PTH 분비를 저하시키지 않는다.

10. 상기 화합물은 소 또는 인체 상피소체 세포로부터 취한 폴리(A)⁺가 풍부한 mRNA를 주입한 크세노푸스 난모세포에서 Cl^-흐름의 증가를 유발시키나, 물 또는 쥐의 뇌 또는 간 mRNA를 주입한 크세노푸스 난모세포에서는 효과가 없다.

11. 이와 유사하게, 상피소체 세포로부터 취한 클로닝된 칼슘 수용체를 사용하면, 상기 화합물은 수용세를 코딩하는 특정 cDNA 또는 mRNA를 주입한 크세노푸스 난모세포에서 반응을 일으킬 것이다.

이와 다른 칼슘 활성은 네메드 등의 제PCT/US93/01642호 및 국제 공개 제WO/18959호에 개시되어 있는 이용가능한 기술을 사용하여 측정할 수 있다. 다른 칼슘 반응성 세포, 바람직하게는 칼슘 수용체에서 Ca²⁺활성을 모방하는 분자의 대등적 정의는 본 명세서 및 네메드 등의 제PCT/US93/01642호 및 국제 공개 제WO/18959호에 제공되어 있는 실시예로부터 명백하다.

바람직하게는, 본 명세서에 개시되어 있는 생체분석에 의하거나 또는 네메드 등의 제PCT/US93/01642호 및 국제 공개 제WO/18959호에에 의하여 측정된 제제는 다음 활성들, 즉 30초 미만의 기간동안 내부 칼슘의 일시적 증가를 유발시키고(바람직하게는 내부 칼슘을 동원함으로써), 30초 이내에 [Ca²⁺]_i의 급속한 증가를 유발시키며, (30초 이상동안) [Ca²⁺]_i의 지속적인 증가를 유발시키고(바람직하게는 외부 칼슘을 유입함으로써), 바람직하게는 60초 미만이내에 이노시톨-1,4,5-트리포스페이트 또는 디아실글리세롤 농도의 증가를 유발시키며, 도파민- 또는 이소프로테레놀로 자극된 시클릭 AMP 형성을 억제시키는 활성 중 한가지 이상, 보다 바람직하게는 이들 활성을 모두 갖는다.

[Ca²⁺]_i의 일시적 증가는 바람직하게는 10 mM 불화나트륨으로 10분간 세포를 예비처리함으로써 없어지거나 또는 이러한 일시적 증가는 포르볼 미리스테이트 아세테이트(PMA), 마제레인 또는 (-)인돌락탐 V와 같은 단백질 키나제 C(PKC)의 활성화제로 세포를 간단하게 예비처리(10분 이하)함으로써 감소된다.

C. 칼슘분해형

외부 칼슘의 활성을 차단시키는 분자의 능력은 표준 기술을 사용하여 측정할 수 있으며, 네메드 등의 제PCT/US93/01642호 및 국제 공개 제WO/18959호에 개시되어 있다. 예를 들어 상기 화합물은 상피소체 세포에 대해 사용되었을 때 외부 칼슘의 효과를 차단시키며, 시험관내에서 상피소체 세포에 대해 시험되었을 때 다음의 활성중 한가지 이상, 바람직하게는 다음의 활성을 모두 갖는다:

1. 상기 화합물은 증가된 농도의 세포외 Ca²⁺의

(a) [Ca²⁺]_i를 증가시키고,

(b) 세포내 Ca²⁺를 동원하고,

(c) 이노시톨-1,4,5-트리포스페이트의 형성을 증가시키고,

(d) 도파민- 또는 이소프로테레놀로 자극된 시클릭 AMP 형성을 저하시키고,

(e) PTH 분비를 억제하는

능력을 부분적으로 또는 완전히 차단한다.

2. 상기 화합물은 세포외 Ca²⁺또는 칼슘모방형 화합물에 의해 유발된 소 또는 인체 상피소체 세포로부터 취한 폴리(A)⁺mRNA를 주입한 크세노푸스 난모세포에서 Cl^-흐름의 증가를 차단시키나, 물 또는 간 mRNA를 주입한 크세노푸스 난모세포에서는 효과가 없다.

3. 이와 유사하게, 상피소체 세포로부터 취한 클로닝된 칼슘 수용체를 사용하면, 상기 화합물은 세포외 Ca²⁺또는 칼슘모방형 화합물에 의해 유발된, 칼슘 수용체를 코딩하는 특정 cDNA, mRNA 또는 cRNA를 주입한 크세노푸스 난모세포에서의 반응을 차단시킬 것이다.

칼슘 반응성 세포, 바람직하게는 칼슘 수용체에서 Ca²⁺활성을 차단하는 분자의 대등적 정의는 본 명세서 및 네메드 등의 제PCT/US93/01642호 및 국제 공개 제WO/18959호에 제공되어 있는 실시예로부터 명백하다.

III. 질병 또는 질환의 치료

칼슘 수용체 활성을 조절함으로써 치료 가능한 질병 또는 질환은 본 분야에 공지되어 있다. 예컨대, 칼슘 수용체 활성을 조절하여 치료 가능한 질병 또는 질환은 칼슘 수용체 활성에 의해 조절되는 세포의 기능적 반응을 기준으로 식별될 수 있다. 칼슘 수용체에 의해 조절되는 세포의 기능적 반응은 본 분야에 공지되어 있고, 상피소체 세포, C-세포에 의한 칼시토닌 분비, 및 파골세포에 의한 골 재흡수를 포함한다.

상기의 기능적 반응은 다양한 질병 또는 질환과 관련된다. 예컨대, 상피소체기능항진증은 혈장의 PTH 농도를 증가시킨다. PTH 농도의 감소는 상피소체기능항진증을 치료하는 효과적인 수단을 제공한다. 유사하게, 칼시토닌의 혈장 농도의 증가는 골 재흡수의 억제와 연관된다. 골 재흡수를 억제시키는 것은 골다공증의 효과적인 치료법이다. 즉, 칼슘 수용체 활성의 조절을 상피소체기능항진증 및 골다공증과 같은질병을 치료하는데 사용할 수 있다.

무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성을 조절하는 상기 화합물을 사용하여 각종의 질병 또는 질환 상태의 환자에게 유익한 효과를 제공할 수 있다. 예컨대, 골다공증은 골 질량의 손실 및 증가되는 골 파손 위험을 특징으로 하는 연령과 관련된 질환이다. 상기 화합물을 사용하여 직접적으로 (예컨대, 파골세포 이온모방형 화합물) 또는 간접적으로 내생의 칼시토닌 농도 (예컨대, C-세포 칼슘모방형)을 증가시킴으로써 파골세포 골 재흡수를 차단할 수 있다. 대안적으로, 상피소체 세포 칼슘 수용체 상에 활성인 칼슘분해형은 상피소체 호르몬의 농도를 증가시켜 골 형성을 촉진시킨다. 상기 세가지 접근은 골다공증 환자에게 유익한 효과를 제공한다.

또한, PTH의 간헐적인 낮은 투약으로 인해 골 질량 및 적합한 골 재모형화에 대한 동화작용이 유발됨이 공지되어 있다. 즉, 화합물 및 상피소체 호르몬의 일시적인 증가를 유발하는 투약 섭생 (예컨대, 상피소체 세포 이온분해형의 간헐적인 투약)은 골다공증의 환자의 골 질량을 증가시킬 수 있다.

부가적인 질병 또는 질환은 질병 또는 질환과 관련된 부가적인 세포의 기능적 반응을 식별함으로써 식별될 수 있고, 칼슘 수용체 활성에 의해 조절된다. 다른 무기 이온 수용체를 조절하여 조절 가능한 질병 또는 질환은 유사한 방법으로 식별될 수 있다.

본 발명의 무기 이온 수용체 조절 화합물는 무기 이온 수용체에 작용하여 한가지 이상의 세포 효과를 일으킴으로써 긍극적으로는 치료 효과를 제공한다. 본 발명의 칼슘 수용체 조절 화합물는 무기 이온 수용체에 작용하여 한가지 이상의 세포 효과를 일으킴으로써 긍극적으로는 치료 효과를 제공한다. 다양한 질병은 칼슘 수용체를 갖는 세포를 표적화함으로써 본 발명에 의해 치료될 수 있다.

예를 들어, 일차 상피소체기능항진증(HPT)는 과칼슘혈증 및 순환 PTH의 농도 상승을 특징으로 한다. 주요 유형의 HPT와 관련이 있는 결함은 세포외 Ca²⁺에 의한 음성적 피드백 조절에 대한 상피소체 세포의 감도가 감소된다는 것이다. 따라서, 일차 HPT 환자로부터 취한 조직에서, 세포외 Ca²⁺에 대한 '기준점(set-point)'은HPT 분비를 억제하는데 정상이상의 높은 농도의 세포외 Ca²⁺가 필요하도록 우측으로 이동된다. 더우기, 일차 HPT에서, 훨씬 더 높은 농도의 세포외 Ca²⁺는 종종 PTH 분비를 부분적으로만 억제한다. 이차(요독증) HPT에서는, 비록 Ca²⁺가 PTH 분비를 억제하는 정도가 정상적이라 하더라도 세포외 Ca²⁺에 대한 기준점에서와 유사한 증가가 관찰된다. PTH 분비의 변화는 [Ca²⁺]_i변화와 대등하고, 세포외 Ca²⁺에 의해 유발되는 [Ca²⁺]_i증가에 대한 기준점은 우측으로 이동하며, 이 증가 크기는 감소된다.

2차 HPT의 환자는 신장 골이영양증을 가질수도 있다. 칼슘모방형은 이들 환자의 비정상적인 PTH 분비 및 골이영양증을 치료하는데 유익하다.

세포외 Ca²⁺의 작용을 모방하는 화합물은 일차 및 이차 HPT 모두의 장기 처리에 유익하다. 이들 화합물은 과칼슘혈증 징후만으로는 생길 수 없는 PTH 분비를 억제하는데 필요한 자극을 추가함으로써 과칼슘혈증 징후를 완화시키는 것을 돕는다. 세포외 Ca²⁺보다 더 큰 효율을 갖는 화합물은 상피소체 선종 조직에 의한 제일 HPT의 주 형태에 특히 문제가 있는 PTH 분비의 뚜렷한 비억제성 성분을 극복할 수 있다. 이와 달리 또는 이에 추가하여, 이 분자는 연장된 과칼슘혈증이 소 및 인체 선종 상피소체 조직에서 프리프레PTH mRNA의 농도를 억제시키는 것으로 나타난 바와 같이 PTH의 합성을 억제할 수 있다. 연장된 과칼슘혈증은 또한 칼슘모방형이 이차 HPT의 상피소체 세포의 이상 증식 특성을 제한하는데 효과적일 수 있는 것과 마찬가지로 시험관내에서 상피소체 세포의 증식을 또한 억제한다.

상피소체 세포 이외의 세포들은 세포외 Ca²⁺농도의 생리학적 변화에 직접적으로 반응할 수 있다. 예를 들어, 갑상성의 부포상 세포(C-세포)로부터의 칼시토닌 분비는 세포외 Ca²⁺의 농도 변화에 의해 조절된다.

단리된 파골세포는 세포내 Ca²⁺의 동원에 의해 부분적으로 생기는 [Ca²⁺]_i의 증가에 대응하는 세포외 Ca²⁺의 농도 증가에 반응한다. 파골세포에서 [Ca²⁺]_i의 증가는 골 흡수의 억제와 관련이 있다. 골 형성 파골세포로부터 알칼리성 포스파타제의 방출은 칼슘에 의해 직접적으로 자극을 받는다.

PTH 분비와 마찬가지로 신장의 사구체 세포로부터의 레닌 분비는 세포외 Ca²⁺의 농도 증가에 의해 억제된다. 세포외 Ca²⁺는 이들 세포에서 세포내 Ca²⁺의 동원을 일으킨다. 다른 신장 세포는, 상승된 Ca²⁺가 근심 세관 세포에 의해 1,25(OH)₂-비타민 D의 형성을 억제하고, 원심 세관 세포에서 칼슘 결합 단백질의 생성을 자극하며, Ca²⁺및 Mg²⁺의 세관 흡수 및 헨레계제의 두꺼운 골수 상행각(MTAL)에 대한 바소프레씬의 작용을 억제하며, 코르티칼 집합관 세포에서 바소프레씬의 작용을 저하시키고, 신장 사구체 혈관의 혈관 평활근 세포에 영향을 미치는 것과 같이 칼슘에 반응한다.

칼슘은 또한 장 귀블러 세포, 유방 세포 및 피부 세포의 분화를 촉진시키며, 심실로부터 심실 나트륨이뇨성 펩티드 분비를 억제하며, 혈소판에서 cAMP의 축적을 저하시키고, 가스트린 및 글루카곤 분비를 변화시키며, 혈관활성 인자의 세포 분비를 수정하기 위해 혈관 평활근 세포에 작용하고, 중추 신경계 및 말초 신경계의 세포에 영향을 미친다.

따라서, 세포내 신호로서의 Ca²⁺의 도처에서의 역할 이외에도 Ca²⁺는 특정 분화된 세포의 반응을 조절하기 위한 세포외 신호로서도 작용한다는 것을 제안하는 충분한 표시가 있다. 본 발명의 화합물은 이러한 세포에서 붕괴된 Ca²⁺반응과 관련이 있는 질병 또는 질환의 치료에 사용될 수 있다.

영향을 받은 세포를 기초로 하여 치료 또는 예방될 수 있는 특정 질병 및 질환에는 급발작, 발작, 두부 손상, 척수 손상과 같은 중추 신경계 질환, 심박동정지 또는 신생아 디스트레스(distress)와 같은 저산소증 유발 신경 세포 손상, 간질, 알쯔하이머병, 헌팅톤병 및 파킨슨씨병과 같은 신경퇴화 질환, 치매, 근육 긴장, 우울, 불안, 공포 질환, 강박반응 질환, 외상후 스트레스 질환, 정신분열증, 신경이완 악성 증후군, 및 투렛 증후군; 부적절한 ADH 분비 증후(SIAH), 경변증, 심장발작, 및 신증와 같은 신장에 의한 과도한 물 재흡수와 관련된 질환; 고혈압; 양이온 항생제(예를 들어 아미노글리코시드 항생제)로부터 신장 독성을 예방 및(또는)감소시키는 것; 설사 및 경련성 결장과 같은 소화관 능동성 질환; GI 궤양 질환; 유육종증과 같은 GI 흡수 질환; 및 자가면역 질환 및 기관 이식 거부 등이 포함된다.

본 발명의 칼슘 수용체 조절 화합물는 통상적으로 인간의 치료에 사용되나, 이들은 다른 영장류, 돼지, 소, 및 양계용 닭과 같은 가축, 스포츠용 동물 및 말, 개 및 고양이와 같은 애완 동물과 같은 다른 온혈 동물의 동일 또는 유사한 질병 또는 질환의 치료에도 사용할 수 있다.

IV. 투여

본 발명의 다양한 화합물은 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성을 조절함으로써 질병 또는 질환을 치료하기 위한 각종의 투여 형태로 조제될 수 있다. 본 발명의 화합물은 전신 및 국소 또는 국한된 투여를 포함하는 각종의 투여 형태로 제제될 수 있다. 화합물의 투여를 위한 기술 및 제제 방법은 일반적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Co., Easton, PA]에서 찾아볼 수 있다. 이온모방형 및 이온분해형은 네메드 등의 제PCT/US93/01642호, 국제 공개 제WO 94/18959호에 논의되어 있다.

적합한 투여 형태는 부분적으로는 용도 또는 예를 들어 경구용, 경피용 또는 주사용 등의 주입 경로에 의존한다. 이러한 형태는 표적 세포가 다중세포 숙주 또는 배양물에 존재하는가 여부와는 무관하게 제제가 표적 세포에 도달할 수 있게 해야만 한다. 예를 들어, 혈류 속으로 주사될 약리학적 제제 또는 조성물은 사용되는 농도에서 가용성이어야 한다. 다른 요인들은 업계에 공지되어 있으며, 제제 또는 조성물이 그 작용을 발휘하는 것을 방해하는 독성 및 형태와 같은 고려 사항을 포함한다.

화합물은 또한 그의 제약상 허용되는 염, 예컨대 산 부가염 및 그 복합체로 제제될 수 있다. 제약상 허용되는 염은 투여되는 농도에서 비독성인 염이다. 이러한 염의 제제는 이들이 생리학적 효과를 발휘하는 것을 방해하지 않고서 제제의 물리적 특성을 변화시킴으로써 약리학적 사용을 용이하게 할 수 있다. 물리적 특성에 있어서의 유용한 변경의 일례를 들면, 융점을 저하시켜 점막을 통한 투여를 용이하게 하고, 용해도를 증가시켜 고농도의 약물의 투여를 용이하게 하는 것이 있다.

제약상 허용되는 염은 술페이트, 하이드로클로라이드, 말레에이트, 포스페이트, 포스페이트, 술파메이트, 아세테이트, 시크레이트, 락테이트, 타르트레이트, 메탄술포네이트, 에탄술포네이트, 벤젠술포네이트, p-톨루엔술포네이트, 시클로헥실술파메이트 및 퀴네이트를 포함하는 것과 같은 산부가염을 포함한다 (본 명세서에서 참고 문헌으로 인용된 PCT/US92/03736 참조). 제약상 허용되는 염은 염산, 말레산, 황산, 인산, 술팜산, 아세트산, 시트르산, 락트산, 타르타르산, 말론산, 메탄수론산, 에탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 사이클로헥실술팜산, 및 킨산과 같은 산으로부터 수득 가능하다.

제약상 허용되는 염은 표준 기술에 의해 제조될 수 있다. 예컨대, 화합물의 유리 염기 형태는 적합한 산을 포함하는 수성 또는 수성-알코올 용액과 같은 적합한 용매에서 용해되고 이어서 용매를 증발시킴으로써 단리된다. 다른 실시예에서,염은 유기 용매에서 유리된 염기 및 산을 반응시켜 제조된다.

담체 및 부형제를 사용하여 화합물의 투여가 용이해진다. 담체 및 부형제의 예는 탄산 칼슘, 인산 칼슘, 락토스, 글루코스 또는 스크로스와 같은 각종의 당, 또는 녹말 종, 셀루로우스 유도체, 젤라틴, 식물성유, 폴리에틸렌 글리콜 및 생리학적으로 적합한 용매를 포함한다. 이들 조성물 또는 제약 조성물은 정맥내, 복강내, 피하내, 및 근육내, 경구, 국소, 점막 투과를 포함하는 다양한 경로에 의해 투여될 수 있다.

전신 투여를 위해서는, 경구로 투여하는 것이 바람직하다. 이와 달리 사용될 수 있는 주입법으로는, 예를 들면 근육내, 정맥내, 복강내 및 피하내 투여방법이 있다. 본 발명의 화합물을 주입하기 위해서는 액상 용액, 바람직하게는 행크액 또는 링거액과 같은 생리학상 병용가능한 완충제로 조제될 수 있다. 또한, 상기 화합물은 고상 형태로 조제되어 사용 직전에 재용해되거나 또는 현탁될 수 있다. 또한, 동결건조 형태로 생산될 수도 있다.

전신 투여는 또한 점막을 통하거나 또는 경피적 수단에 의할 수 있으며, 상기 화합물은 경구로 투여될 수 있다. 점막을 통하거나 또는 경피적 수단에 의한 투여를 위하여, 상기 제제에는 투과될 배리어에 대한 적절한 침투제를 사용할 수 있다. 이 침투제는 일반적으로 업계에 공지되어 있으며, 예를 들어 점막을 통한 투여를 위해서는 담즙산염 및 푸지딕산 유도체가 포함된다. 또한, 투과를 용이하게 하기 위하여 세정제를 사용할 수도 있다. 점막을 통한 투여는 예를 들면 비강 분무를 통하거나 또는 좌약을 사용하여 행할 수 있다. 경구 투여를 위해서, 상기화합물은 캡슐, 정제 및 강장제와 같은 통상적인 경구 투여 제형으로 조제된다.

국소 투여를 위해서, 본 발명의 분자는 당업계에 일반적으로 공지되어 있는 바와 같이 연고제(ointment or slave), 겔제 또는 크림제로 조제된다.

본 발명의 각종의 화합물의 투여량은 표준 방법에 의해 측정될 수 있다. 일반적으로, 치료적 유효량은 화합물 그의 EC₅₀또는 IC₅₀과 환자의 연령 및 몸체 크기, 및 환자의 관련 질병 또는 질환에 따라 약 1 nmol 내지 3 μmol, 바람직하게는 0.1 nmol 내지 1 μmol이다. 일반적으로 상기 양은 치료될 동물 1 kg 당 약 0.1 내지 50 mg, 바람직하게는 0.01 내지 20 mg이다.

<실시예>

하기 실시예는 본 발명의 다양한 측면 및 태양을 제공한다. 이들 실시예는 청구된 본 발명을 제한하지 않는다.

실시예 1: 인간 상피소체선 선종 종양으로부터의 인간 상피소체 칼슘 수용체의 클로닝

본 실시예는 혼성화 프로브(probe)로써 pBoPCaR1을 사용하여 인간 상피소체선 선종 종양으로부터 인간 상피소체 칼슘 수용체를 클로닝시키는 것을 설명한다 (네메트 등의 제 PCT/US93/01642호, 국제 공개 번호 제 WO 94/18959 호 참조). 프로브를 사용하여, 엄밀도가 감소된 상태에서 교차 혼성화에 의해 인간 상피소체선 칼슘 수용체를 코딩하여 핵산을 확인하였다.

전달체 RNA는, 제일 상피소체기능항진증으로 진단된 39세의 자성 코카서스인종으로부터 제거된 인간의 상피소체선 선종 종양으로부터 제조되었다. 혼성화 프로브로써 pBoPCaR1을 사용하여 상기 mRNA를 노던 블롯 (northern blot) 분석하여 약 5 Kb 및 약 4 Kb의 칼슘 수용체 전사를 확인하였다. cDNA 라이브러리 (library)를 mRNA로부터 구성하였다. 3 Kbp보다 큰 2중 나선 구조의 cDNA를 아가로오스 겔 상에서 크기-선정하고, 클로닝 벡터 람다 ZapII 으로 결찰시켰다. 5십만의 제1 재조합 파지를 혼성화 프로브인 pBoPCaR1의 5.2 Kbp cDNA 삽입물로 스크리닝하였다. pBoPCaR1 삽입물은, [³²P]-dCTP를 사용한 랜덤-프라임화 합성에 의해 특정 활성이 1 x 10⁹cpm/μg인 것으로 분류되었다.

라이브러리 스크리닝은 38 ℃에서 400 mM Na⁺, 50% 포름아미드의 혼성화 엄밀도로 행해졌다. 플라크(plaque) 이동 필터는 20 시간 동안 500,000 cpm/ml의 프로브 농도에서 혼성되었다. 혼성시킨 후, 필터를 1 시간 동안 40 ℃에서 1 x SCC로 세척하였다.

제1 스크린은 pBoPCaR1에의 혼성화에 의해 확인되는 약 250개의 양성 클론을 확인하였다. 이들 클론 중 7개를 제2 및 제3 스크린에 통과시켜 pBoPCaR1 프로브에 혼성화되는 단일 클론으로 단리시켰다. 7개의 클론을 제한 효소 매핑 (mapping) 및 서던 (Southern) 블롯 분석에 의해 분석하였다. 3개의 크론은 약 5 Kbp의 cDNA 삽입물을 포함하였고 5Kb mRNA에 상응하는 완전한 길이의 클론으로 나타났다. 2개의 클론은 약 4 Kbp의 cDNA 삽입물을 포함하였고 4Kb mRNA에 상응하는 완전한 길이의 클론으로 나타났다.

다른 크기의 두개의 삽입물의 제한 효소 매핑은 이들이 5' 말단에서 서열이 유사한 영역을 공유하지만 3' 말단 서열에서 분기되는 것을 보여준다. DNA 서열 분석은, 더 큰 삽입물에서 사용되는 폴리아데닐화 위치의 대안적 폴리아데닐화 상류부로부터 더 작은 삽입물이 기인할 수 있음을 나타낸다.

두가지 크기 종에 대한 대표적인 cDNA 삽입물은 플라스미드 벡터 pBluescript SK로 서브클론화되었다. 선형화 이후의 T7 RNA 폴리머라제를 사용한 시험관내 전사에 의해 cRNA 전사체가 제조된다. cRNA 전사체는 기능 분석을 위해 크세노푸스 난모세포로 주사되었다 (150 ng/μl RNA; 50 nl/난모세포). 2 내지 4일 동안 배양시킨 후, 기능성 칼슘 수용체의 존재에 대해 난모세포를 분석하였다. 두 개의 클론종은 기능성 칼슘 수용체를 유발시켰고, 이것은 적합한 칼슘 수용체 작용제의 부가시 존재하는 칼슘-활성화된 염화물의 여기에 의해 평가되었다. NPS R-467 및 NPS R-568을 포함하는 공지된 칼슘 수용체 작용제 (네메트 등의 제 PCT/US93/01642호, 국제 공개 번호 제 WO 94/18959호 참조)는 천연 상피소체 세포 수용체에 효과적인 것으로 공지된 것과 거의 동일한 농도에서 난모세포로 표현되는 수용체를 활성화시킨다. 즉, 두 개의 클론은 모두 기능성의 인간 상피소체 세포 칼슘 수용체를 코딩시킨다.

플라스미드는, 각 크기 종의 삽입물을 pBluescript로 서브클론화시켜 pHuCaR 5.2 및 pHuPCaR 4.0을 생산하여 제조되었다. 삽입물의 핵산 서열, 및 아미노산 서열을 SEQ. ID. Nos. 1 및 2에 나타낸다.

두 개의 cDNA 삽입물의 핵산 서열 간에 몇몇 차이점이 관찰되었다. 두 개의cDNA 삽입물의 서열 분석은 3' 비전환 영역에 있어서 다른 두 개 이상의 서열 변수의 존재를 나타내고 이것은 다른 폴리아데닐화로부터 기인할 수 있다. 또한, 서열 변수는 삽입물의 5' 말단에 존재한다. 이같은 상이한 서열은 비전환 영역에 해당하고 이것은 다른 전사 개시 및 (또는) 접합에 의해 나타날 수 있다.

서열이 변화된 3개의 부가적 위치는 cDNA 클론 pHuPCaR5.2 및 pHuPCaR4.0의 코딩 영역내에서 관찰되고 (SEQ. ID. NOS. 1 및 2 참조) 이들 cDNA 클론이 별개의 단백질을 코딩하는 것으로 나타났다. 인간 CaR 유전자의 서열 분석은, pHuPCaR4.0 cDNA 클론과 비교하여 cDNA 클론 pHuPCaR5.2 내의 DNA의 부가적인 30개의 염기쌍은 다른 mRNA 접합으로부터 기인함을 나타낸다. 다른 mRNA 접합에 의해, pHuPCaR4.0 cDNA에 의해 코딩된 폴리펩티드의 aa # 536 및 aa # 537 사이의 자리에서 pHuPCaR 5.2 cDNA에 의해 코딩되는 CaR 폴리펩티드내로 10개의 부가 아미노산이 삽입될 것으로 예상된다. 또한, pHuPCaR4.0은 aa # 925에서 글루타민 (Glu)을 그리고 위치 990 에서 글리신 (Gly)을 코딩시키는 한편, pHuPCaR5.2는 동일한 두 위치에서 arg (Arg)를 코딩시킨다. 인간 CaR 유전자는 각각 이들 위치에서 Glu 및 Arg를 코딩시킨다. 인간 DNA와 비교하여 pHuPCaR4.0 cDNA 간의 차이는 인간 개체군 내에서 진정한 서열 다형성을 나타내는 한편, pHuPCaR5.2에서의 단일 염기 변화는 클로닝 중에 나타나는 변형을 반영한다. 두 개의 cDNA는 기능성 칼슘 수용체를 코딩시키고, 이것은 Cl^-전기전도도에 의해 확인되는 바와 같이 10 mM 세포외칼슘에 반응하는 cDNA 클론으로부터 제조된 cRNA로 주사된 크세노푸스 난모세포의 성능에 의해 나타난다. 그러나, 이들 두 개의 동형의 수용체는 기능적으로 및 (또는) 제약적으로 구분될 수 있다.

실시예 2: 칼슘 수용체를 발현시키는 안정한 재조합 세포의 선택

2종의 인간 및 소 칼슘 수용체를 안정하게 발현시키는 클론 세포주를 단리시켰다. 칼슘 수용체 cDNA를 pMSG (파마시아 (Pharmacia) 제품) 및 Cep4B (인비트로겐 (Invitrogen) 제품)의 상품명으로 시판되는 두 개의 다른 발현 벡터로 서브클론화시켰다. 제1 벡터는 크산틴-구아닌 포스포리보실트랜스퍼라제 (gpt)에 대한 선택성 마커 유전자를 포함하여, 안정하게 감염된 세포는 아미노프테린 2 μg/ml 및 마이코페놀산 25 μg/ml를 첨가하여 부여된 푸린 생합성 경로의 차단을 극복할 수 있다. 제2 벡터는 200 μg/ml로 사용되는 항생 하이그로마이신에 대한 내성을 전달하는 유전자를 코딩한다. HuPCaR 5.2 및 HuPCaR 4.0 cDNAs (각각 SEQ.ID.Nos.1 및 2)를 Not I 및 Hind III 제한효소를 갖는 모 블루스크립트 플라스미드로부터 제거하고 이어서 Not I + Hind III 소화된 Cep4B로 직접 결찰시키거나 Sma I 소화된 pMSG로 끝이 무디게 결찰되기 전에 DNA 폴리머라제의 클레나우 (klenow) 분획으로 처리하였다.

HuPCaR 5.2 삽입물을 포함하는 pMSG 서브클론을 상술한 바와 같이 CHO 세포 내로 감염시켰다. 선택하여 특성화된 20개의 내성 클론을 얻었다. HuPCaR 5.2 삽입물을 포함하는 Cep4B 서브클론을 상술한 바와 같이 HEK 293 세포로 감염시켰다. 하이그로마이신으로 선택하여 안정한 클론의 풀을 얻었다. HuPCaR 4.0 수용체 동형을 발현하는 클론을 유사하게 제조하였다.

HuPCaR 5.2 삽입물을 포함하는 Cep4B로 감염된 하이그로마이신으로 선택된 HEK 293 세포의 풀로부터 수득되는 세포는 교원질로 코팅된 아크라 (Aklar) 스퀘어 상에 씌워지고, 12공 조직 배양판의 각 공으로 옮겨진다. 2 내지 6 일 후, 매질을 제거시키고 세포를 균형염액 및 1 μM 푸라 2-AM, 1 mM CaCl₂및 0.1% BSA 및 1 mM CaCl₂를 포함하는 완충액 1 ml로 세척하였다. 칼슘 수용체 작용제에 반응하는 형광성을, 37℃에서 각각 340 및 510 nm의 여기 및 방출 파장을 사용하여 분광형광계에서 측정하였다. 신호 검정을 위해, 이오노마이신 (40 μ)을 부가한 후 F_max을 측정하고, pH 10인 0.3 M EGTA, 2.5 M Tris-HCl을 부가하여 겉보기 F_min을 측정하였다. 칼슘 수용체 작용제인 Ca²⁺(10 mM), Mg²⁺(20 mM) 및 NPS R-467의 부가에 따른 [Ca²⁺]_i의 증가를 관찰하였다. 기능성 물질 K 수용체를 발현하는 조절 세포는 상기 칼슘모방형 화합물에 반응하지 않는다.

pHuPCaR4.0 서열로 감염된 HEK 293 세포의 부가적 클론 단리체를 수득하였다. 세포가 현탁 상태에서 시험되는 것을 제외하고는 상술한 바와 같이 세포모방형에 대한 반응을 시험하였다.

실시예 3: 푸라-2 부가된 상피소체 세포를 이용한 칼슘 수용체 활성의 측정

송아지 및 인간으로부터 상피소체 세포를 수득하는 방법 및 상피소체 세포를 사용하여 칼슘 수용체 활성을 측정하는 방법을 이하에 설명한다.

상피소체선을 지역 도살장에서 갓 잡은 생후 12 내지 15 주된 송아지로부터취하여 NaCl 126 mM, KCl 4 mM, MgCl₂1 mM, Na-HEPES 20 mM, pH 7.4, 글루코오스 5.6 mM, 및 CaCl₂가변량 (예컨대, 1.25 mM)을 포함하는 실험실적 빙냉 상피소체 세포 완충액 (PCB)으로 옮긴다. 인간 상피소체선을 제일 또는 요독증의 상피소체기능항진증 (요독증 HPT)에 대한 상피소체 조직을 외과적으로 제거한 환자로부터 취하고, 소 조직과 유사하게 처리하였다.

선에서 과량의 지방 및 결합 조직을 제거하고 미세한 가위를 사용하여 한 면당 약 2 내지 3 mm인 정육면체로 잘게 썰었다. 분리된 상피소체 세포를 콜라게나아제 소화에 의해 제조하고 이어서 퍼콜 (Percoll) 완충액 중에서 원심분리시켜 정제하였다. 수득된 상피소체 세포 제제는 상 대조 현미경 및 수단 블랙 비 (Sudan black B) 염색법에 의해 측정된 바와 같이 실질적으로 적혈 세포, 함지방세포, 및 모세 조직이 없다. 분리되고 정제된 상피소체 세포는 5 내지 20개의 세포를 포함하는 작은 군으로 존재하였다. 트리판 (trypan) 블루 또는 브롬화 에티듐을 배제시켜 나타나는 세포 생존능은 일정하게 95%였다.

세포가 이시점에서 실험실적 목적으로 사용된다해도, 생리학적 반응 (예컨대, PTH 분비 억제능 및 [Ca²⁺] 의존도)은 철야 세포 배양후 측정되어야 한다. 또한, 제1 배양은 세포가 동위원소 평형 근처의 동위 원소로 분류될 수 있는 이점을 갖고 바, 이것은 이노시톨 포스페이트 대사의 측정에 관한 연구에 필요하다.

퍼콜 (Percoll) 성분을 정제한 후, 50 μg/ml 스트렙토마이신, 100 U/ml 페니실린, 5 μg/ml 겐타마이신 및 ITS⁺로 채워진 햄 (Ham)의 F12 둘베코 (Dulbecco)의 개질된 이글 (Eagle)의 매질(GIBCO)의 1:1 혼합물에서 세포를 수회 세척하였다. ITS⁺는 인슐린, 트랜스페린, 세레늄 및 우 혈청 알부민 (BSA)-리놀렌산을 포함하는 선혼합액이다 (매사추세츠주 레드포드 소재의 콜레보러티브 리서치 (Collaborative Research) 제품). 이어서, 세포를 플라스틱 플라스크 (75 내지 150 cm²; 팔콘 (Falcon))로 옮기고, 5% CO₂의 습한 대기 중 37 ℃에서 철야 배양하였다. 혈청으로 인해 세포가 플라스틱에 부착되고, 증식되고, 탈분화되므로 철야 배양 중 혈청을 첨가하지 않는다. 가만히 따라내어 상기 조건에서 배양된 세포를 쉽게 제거하였고, 배양된 세포는 갓 제조된 세포와 유사한 생존능을 나타낸다.

정제된 상피소체 세포를 1 μM 푸라-2-아세톡시메틸에스테르를 포함하는 1.25 mM CaCl₂-2% BSA-PCB 중에 재현탁시키고 20분 동안 37 ℃에서 배양시켰다. 이어서, 세포를 펠렛화하고, 에스테르가 결핍된 것을 제외하고는 동일한 완충액에 재현탁시키고 37 ℃에서 15분간 더 배양시켰다. 이어서, 세포를 0.5 mM CaCl₂및 0.5% BSA를 포함하는 PCB로 2회 세척하고 실온 (약 20 ℃)으로 유지시켰다. 사용하기 직전에, 예열된 0.5 mM CaCl₂-PCB로 5배 희석시켜 농도 0.1%의 최종 BSF를 얻는다. 형광 기록을 위해 사용되는 큐벳 중의 세포 농도는 1 - 2 x 10⁶/ml였다.

지시제가 부가된 세포의 형광성을 각각 340 내지 510 nm의 여기 및 방출 파장을 이용하여 자동 온도 조절 큐벳 홀더 및 자기 교반기를 구비한 분광형광계 (펜실바니아주 필라델피아의 펜실바니아 대학, 바이오메디칼 인스투루먼트 그룹)로 37 ℃에서 측정하였다. 이같은 형광성은 시토졸성 Ca²⁺의 농도를 나타낸다. 형광 신호를 디기토닌 (50 μg/ml, 최종)을 사용하여 검정하여 최대 형광성 (F_max)을 얻고, EGTA (10 mM, pH 8.3, 최종)을 사용하여 최소 형광성 (F_min) 및 224 nM의 해리 상수를 얻었다. 염료 누출은 온도에 좌우되고 대부분은 큐벳에서 세포를 승온시킨 후 처음 2분 내에 누출된다. 이후에는 염료 누출은 극소량만 증가한다. 염료 누출에 대한 검정을 보정하기 위해, 세포를 큐벳에 위치시키고 37 ℃에서 2 내지 3분간 교반한다. 이어서, 세포 현탁액을 제거하고, 세포를 펠렛화시키고, 상청액을 깨끗한 큐벳으로 반송시킨다. 이어서, 상청액을 디기토닌 및 EGTA로 처리하여 염료 누출을 측정하였고, 이것은 전형적으로 총 Ca²⁺-의존성 형광 신호의 10 내지 15 %이다. 이 측정치를 겉보기 F_min값으로부터 공제하였다.

실시예 4: 푸라-2 부가된 HEK 293/pHuPCaR4.0 세포를 이용한 칼슘 수용체 활성의 측정

푸라-2 부가된 HEK 293/pHuPCaR4.0 세포를 사용하는 칼슘 수용체 활성을 분석하기 위해 사용되는 방법을 이하에 설명한다. pHuPCaR4.0으로 감염된 HEK 293 세포를 약 1시간 동안 실온에서 약 5 μM fluo-3/AM을 포함하는 20 mM HEPES로 완충된 둘베코의 개질된 이글의 매질에서 배양시켜 세포에 푸라-2를 부가시켰다. 이어서, 세포를 1 mM CaCl₂및 1 mM MgCl₂를 포함하는 20 mM HEPES로 완충된 행크 (Hank)의 균형 염액으로 휑군다. 이어서, 피시험 화합물을 세포에 첨가하고 형광성을 측정하였다 (각각 340 및 510 nm의 여기 및 방출 파장).

실시예 5: 화합물의 칼슘 수용체 활성 조절능의 측정

푸라-2 부가 세포 또는 푸라-2-부가 세포를 사용하여 부가된 상피소체 세포를 사용하여 핵산 코딩된 pHuPCaR_4.0으로 감염된 HEK 293 세포 중의 [Ca²⁺] 증가를 측정하여 다양한 화합물의 칼슘 수용체 활성 조절능을 분석하였다. 다양한 실험 결과를 표 1a, 1ba, 1bb, 1c 및 2에 요약한다. 표 1a, 1ba, 1bb 및 1c에 실시예 4에 기재된 바와 같이 분석된 칼슘 수용체 활성에 대한 다른 농도에서의 화합물의 효과를 요약한다 (즉, 푸라-2가 부가된 핵산 코딩된 pHuPCaR4.0을 코딩하는 핵산으로 감염된 HEK 293 세포를 사용함).

표 2에는 EC₅₀이 푸라-2가 부가된 HEK 293/pHuPCaR4.0 또는 상피소체 세포로 계산된 값인, 다른 시험 결과를 요약한다. 세포에는 푸라-2가 부가되고 실시예 2 (상피소체 세포에 대해) 또는 실시예 3 (HEK 293/pHuPCaR4.0세포에 대해)에 기재된 바와 같이 이 세포를 분석하였다.

인간 칼슘 수용체를 나타내는 HEK-293 세포중의 3.3 ng/mL에서 40 % 이상의 반응을 나타내는 칼슘모방형 화합물

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
참조 화합물
R-568		95	69	24
17P		101	86	54
17X		105	93	51
24X	126	109	124	109
24Y	119	120	127	102
17J	116	118	122	102
25A	122	120	114	92
17E	116	110	110	92
24Z	138	138	135	90
14S	116	106	105	88
25E	132	129	122	85
17G	125	128	119	77
14T	126	125	117	77
17H	126	124	111	74
14O	119	119	102	74
25I	119	113	114	74
12J	131	130	113	68

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
12I	115	111	93	68
25G	130	115	99	66
9R		108	101	64
12F	118	110	101	63
12O	110	117	94	62
23Z	129	126	100	61
17M		115	99	59
16V		114	102	58
25O	126	115	96	57
25J	119	123	105	56
16L	146	138	98	56
12N	115	106	102	55
16T		97	88	55
25U	107	107	95	55
17P		101	86	54
16Q		110	88	53
23E	137	113	102	53
17C	113	120	99	52
25L	97	97	85	52
8Z		101	97	52
17X		105	93	51
13R		132	98	51
17O		112	96	51
23Q	122	114	98	51
16X		111	96	51
24V	127	98	71	50
13O		115	94	50
17N		108	86	49
21V	122	116	99	48
24M	132	134	99	48
13U		108	79	47

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
24P	140	138	110	46
17Y	109	94	79	46
11X		100	76	45
25H	115	107	89	45
22J		99	71	45
9C		104	82	45
13S		102	87	45
10Q	103	100	84	44
13P		110	83	44
8K		98	81	44
13N		114	88	43
10N	106	97	77	43
12H	114	115	94	43
25P	90	81	75	41
18A		111	88	40
14L		109	78	40

인간 칼슘 수용체를 발현하는 HEK-293 세포 중의 33 ng/mL에서 40 % 이상의 반응을 나타내는 칼슘모방형 화합물

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
참조 화합물
R-568		95	69	24
17P		101	86	54
17X		105	93	51
12C	134	125	98	39
16I	121	117	96	36

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
17D		108	91	38
17F		111	90	28
24C	116	113	87	32
25K	124	107	86	35
13F	125	122	85	38
21F		109	85	36
21S	132	131	85	34
10F		96	84	27
14R	106	107	84	37
13G	111	128	82	29
14Z	118	103	82	20
16N	122	159	82	8
8U	123	129	82	11
23W	117	97	81	25
12G	139	139	81	35
15G		113	80	32
25M	118	100	79	25
13V		110	79	33
14P	112	103	78	30
6T	123	129	78	15
14Q		101	78	35
17L	111	104	78	31
24K		106	78	30
24U	106	106	78	25
25Q	116	95	77	20
8J		104	77	39
23H	121	114	77	28
21C=4U	134	114	76	17
25F	97	85	76	28
16R		100	76	25
17I	118	97	76	18

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
24J		103	75	31
21O		109	75	37
24G	109	94	75	22
15I	111	93	75	24
21D		104	75	17
20Y	117	95	74	24
10P		102	74	8
23M	113	97	74	26
14Y		109	73	17
17K	98	97	73	37
12E	117	121	73	23
17Z		99	73	37
16W		102	73	4
23K	106	107	72	24
25X	96	94	72	22
13W		109	71	12
23P	125	99	70	22
18B	111	96	69	26
21Y		100	68	36
17W		92	67	13
23A		103	67	24
23G	127	93	67	13
13M		92	66	15
21U	104	104	66	18
21R		100	66	15
10S/10T		86	65	13
17R		98	65	13
13X		102	65	13
4N		100	65	13
21E		94	64	4
15J	80	75	64	13

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
22Y		114	64	28
21G		88	63	18
24L		105	62	10
10V		99	62	8
10W/10X		98	61	9
17B		92	61	19
23Y	106	87	61	16
11Y		103	61	20

인간 칼슘 수용체를 발현하는 HEK-293 세포 중의 33 ng/mL에서 40 % 이상의 반응을 나타내는 칼슘모방형 화합물

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
참조 화합물
R568		95	69	24
17P		101	86	54
17X		105	93	51
18C	99	87	60	18
23T	102	74	60	31
4V		93	59
8G		84	59	6
23I		102	58	3
21M		102	58	17
24O	137	114	58	8
3U		89	57
9A		82	56	6
12M	98	86	56	11
12B	130	110	56	4

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
21P		92	56	13
8T		85	55	13
10L/10M		99	55	4
24I	109	84	55	11
14N		89	55	15
23R	104	86	54	13
23S		97	53	3
21T	133	112	53	3
10W/10X		81	53	4
13T		90	53	6
6R		94	52	7
20I		87	52	12
24A	122	85	52	9
12D	128	109	52	5
6X		84	52	10
18T	99	74	52	14
21X	119	101	51	2
23J	102	61	51	29
10Z		96	51	5
16Z		88	51	9
23N		96	50	2
16U		85	50	4
11D		96	50	4
23X		94	49	1
17A		88	49	7
20J		80	48	8
22X		86	48	10
23U		87	48	3
9Z		74	48	4
16J	92	76	47	31
25N	94	73	46	8
4P		81	46	8

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
23O	111	79	46	13
13Q		95	46	5
4G		83	46
12Y		80	46	10
12L		88	45	10
23F		82	45	5
11W		81	44	2
8H		88	44	7
25V	89	59	43	26
25W	95	69	42	8
10R		82	42	7
21N	124	98	42	4
8S		73	42	7
8X		75	40	19
13E	123	94	40	2

인간 칼슘 수용체를 발현하는 HEK-293 세포 중의 330 ng/mL에서 40 % 이상의 반응을 나타내는 칼슘모방형 화합물

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
참조 화합물
R568		95	69	24
17P		101	86	54
17X		105	93	51
7X		85
3H		84
3L		81	28
16O	129	81	21	2
8O/8Q	124	80	14	0

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
14A	98	78	10	7
23L	107	77	37	9
1T		76
7W		76
4H		77	37
8D		75
5M		73	21
4U		72
24E	94	71	35	6
16M	130	68	11	4
4M		68	34
2S		67	29
17V	91	66	27	-1
2X		66	15
23D	91	66	35	13
4P		65	32
5B/5C		65	20
3M		64	19
16K	78	62	36	8
5D		62	18
4D		61	13
24B	76	61	34	11
24H	81	60	32	13
5L		60	16
2Y		59	10
5G		58	16
3V		56	14
2Q		56	4
14B	75	55	11	4
13Z	93	54	22	5
8A		54
24D	87	53	34	39

화합물 코드	하기 4종의 농도(ng/mL)에서의 % 활성도
	3300	330	33	3.3
1D		53
13I	85	52	3	1
3B		52	15
8C		51
14H	112	49	5	5
7U		49
5E		48	7
13H	88	48	36	12
13Y	106	47	2	4
4J		47	8
14I	80	45	11	7
4B		45	8
3D		45	4
3R		45	2
3A		41	7
14J	55	41	6	5
4I		40	9

시험관내 상피소체 세포 칼슘 수용체에서 활성인 도 1의 아릴알킬아민 칼슘모방체(EC₅₀≤5 μM)

화합물 코드(도 1)	EC50(μM)	화합물 코드(도 1)	EC50(μM)
NPS R-467	2.0	11X	0.83
NPS R-568	0.60	11Y	2.8
3U	0.64	12L	1.7
3V	1.8	12U	1.2
4A	1.4	12V	0.42
4B	2.0	12W	3.2

4C	2.0	12Y	2.0
4D	4.4	12Z	0.11
4G	1.8	13Q	약 0.8
4H	≥3.0	13R	0.25
4J	2.2	13S	<0.13
4M	2.1	13U	0.19
4N	0.8	13X	<0.75
4P	1.6	14L	0.26
4R/6V	4.2	14Q	0.47
4S	3.3	14U	0.13
4T/4U	1.6	14V	1.7
4V	2.5	14Y	0.38
4W	2.3	15G	약 0.5
4Y	1.3	16Q	0.04
4Z/5A	4.4	16R	0.36
5B/5C	2.8	16T	0.04
5W/5Y	3.6	16V	<0.13
6E	2.7	16W	0.59
6F(R, R-)	0.83	16X	0.10
6R	3.4	17M	0.15
6T	2.9	17O	0.04
6X	2.5	17P	0.04
7W	3.2	17R	0.39
7X	1.1	17W	0.43
8D	2.5	17X	0.02
8J	0.78	20F	<1.0
8K	1.3	20I	1.0
8R	2.6	20J	3.0
8S	1.7	20R	2.4
8T	1.8	20S	4.2
8U	0.44	21D	3.0
8X	0.76	21F	0.38
8Z	0.40	21G	1.1
9C	0.60	21O	0.26
9D	1.4	21P	0.43
9R	0.25	21Q	1.4
9S	4.8	21R	0.37
10F	0.89	25C	2
11D	1.8	25D	0.019

실시예 6-17 : 화합물의 합성

제PCT/US93/01642호, 국제 공개 제WO 94/18959호에 개시되어 있는 바와 같은표준 기술을 사용하여 본 명세서에 개시되어 있는 화합물은 네메드 등을 합성할 수 있다. 본 명세서에 개시되어 있는 화합물의 대표적인 합성예는 하기와 같다.

화합물 9R, 14U 및 17P을 소듐 시아노보로하이드라이드 또는 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드의 존재하에서 시판되는 알데히드 또는 케톤을 1차 아민으로 환원성 아민화시켜 제조하였다. 화합물 11Y, 12H, 12K, 12M, 14S, 14T, 16L-O, 17E, 17G, 17J, 24X, 24Y, 25A, 25E-25K 및 25O를 유사한 방법으로 제조하였다.

상기 세 화합물 9R, 14U 및 16P의 합성을 위해서는, 소듐 시아노보로하이드라이드를 사용하는 것보다 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드를 사용하는 것이 더 큰 부분입체선택성을 갖는 바람직한 부분입체이성질체를 얻을 수 있는 것으로 밝혀졌다. 이들 과량의 혼합물을 통상의 상 HPLC를 사용하거나 또는 유기 용매로부터 재결정화시켜 단일 부분입체이성질체로 추가 정제하였다.

티탄 (IV) 이소프로폭사이드의 존재하에서 알데히드 또는 케톤으로 1차 아민을 축합시켜 화합물 8J, 8U, 11X, 17M 및 25Y를 제조하였다. 이어서, 소듐 시아노보로하이드라이드, 소듐 보로하이드라이드, 또는 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드를 작용시켜 동일계에서 생성된 중간체 이민을 환원시켰다. 탄소상의 팔라듐 디하이드록사이드를 사용하여 화합물 8U를 합성하기 위한 중간체 엔아민을 촉매적으로 환원시켰다.

아민과 니트릴의 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(DIBAL-H) 매개된 축합에 의해 화합물 12U, 12V 및 12Z를 제조하였다. 소듐 시아노보로하이드라이드 또는 소듐 보로하이드라이드를 작용시켜 동일계에서 생성된 중간체 이민을 환원시켰다.탄소상의 팔라듐 촉매를 사용하여 EtOH 중에서 촉매적 수소첨가반응시켜 중간체 알켄(화합물 12U 및 12V)을 환원시켰다. 대응하는 하이드로클로라이드염으로 전환된 화합물을, 에테르성 HCl로 유리 염기로 처리하여 백색 고체를 얻었다.

상기 합성에서 아민은 미합중국 위스콘신주 밀오키 소재의 알드리치 케미칼 캄파니사 또는 미합중국 뉴저지주 와렌 소재의 셀젠 코포레이션사로부터 구입하거나, 또는 표준 기술을 사용하여 합성하였다. 다른 시약은 모두 알드리치 케미칼사로부터 구입하였다.

실시예 6 : 화합물 25Y의 합성

N-(3-(2-페닐)프로필)-1-(1-나프틸)에틸아민

3-페닐-1-프로필아민 135 mg(1 mmol), 1'-아세토나프톤 170 mg(1 mmol) 및 티탄(IV) 이소프로폭사이드 355 mg(1.3 mmol)의 혼합물을 실온에서 1 시간동안 교반하였다. 반응물을 1 M 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 1 mL로 처리하고, 실온에서 16 시간동안 교반하였다. 반응물을 에테르로 희석하고, 물 0.1 mL로 처리하였다. 반응물을 원심분리하고, 에테르층을 제거하고, 밀크성 오일로 농축하였다. 0.1% 이소프로필아민을 함유하는 디클로로메탄 중의 10% 메탄올에 대한 디클로로메탄의 구배를 사용하여 HPLC(페노메넥스, 1.0 x 25 cm, 5 μM 실리카)로 상기 물질 소량 (10 mg)을 정제하였다. 이로부터 GC/El-MS (R_t= 10.48 분) m/z (rel. int.)에 의해 단일 성분으로서 생성물(유리 염기)을 얻었다. 289 (M⁺, 11), 274(63), 184(5), 162(5), 155(100), 141(18), 115(8), 91(45), 77(5).

실시예 7: 화합물 8J의 합성

N-(3-페닐프로필)-1-(3-티오메틸페닐)에틸아민 하이드로클로라이드

3'-아미노아세토페논 2.7 g(20 mmol)을 진한 HCl 4 mL, 얼음 4 g 및 물 8 mL에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각시키고, 6℃ 미만으로 유지시키면서 물 3 내지 5 mL에 용해시킨 아질산나트륨 1.45 g(21 mmol)을 5분에 걸쳐 첨가하였다. 소듐 티오메톡사이드 1.75 g(25 mmol)을 물 5 mL에 용해시키고, 0℃로 냉각하였다. 온도를 10℃ 미만으로 유지시키면서 이 용액에 디아조늄 염을 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응물을 추가로 1시간 동안 교반시키면서 온도를 상온으로 상승시켰다. 반응 혼합물을 에테르와 물 사이에 분배시켰다. 에테르층을 분리하고, 중탄산나트륨 및 염화나트륨으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 에테르를 증발시켜 3'-티오메틸아세토페논을 74%의 수율로 얻었다. 조생성물을 감압하에서 증류시켜 정제하였다.

3-페닐프로필아민 0.13 g(1 mmol), 3'-티오메틸아세토페논 0.17 g(1 mmol) 및 티탄(IV) 이소프로폭사이드 0.36 g(1.25 mmol)을 함께 혼합하고, 4시간동안 정치시켰다. 여기에 에탄올 1 mL 및 소듐 시아노보로하이드라이드 0.063 g(1 mmol)을 첨가하고, 반응물을 철야 교반하였다. 반응물을 에테르 4 mL 및 물 200 μL를 첨가하여 처리하였다. 반응물을 와동시키고, 이어서 원심분리기에서 회전시켜 고상물을 분리하였다. 침전물로부터 에테르층을 분리하고, 용매를 진공 중에서 제거하였다. 오일을 디클로로메탄에 재용해시키고, 3% 메탄올/디클로로메탄으로 용출된 실리카겔 상에서 예비 TLC에 의해 혼합물을 정제하여 순수 오일로서 표제 화합물을 얻었다: GC/EI-MS (R_t= 7.64 분) m/z (rel. int.) 285 (M⁺, 18), 270(90), 180(17), 151(100), 136(32), 104(17), 91(54), 77(13).

실시예 8: 화합물 8U의 합성

N-3-(2-메톡시페닐)-1-프로필-(R)-3-메톡시-α-메틸벤질아민 하이드로클로라이드

(R)-(+)-3-메톡시-α-메틸벤질아민 3.02 g(20 mmol), 2-메톡시신남알데히드 3.24 g(20 mmol) 및 티탄(IV) 이소프로폭사이드 8.53 g(30 mmol, 1.5 당량)의 혼합물을 실온에서 2 시간동안 교반하고, 1 M 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 20 mL로 처리하였다. 이 반응물을 철야(16시간동안) 교반하고, 디에틸에테르로 희석하고, 물 1.44 mL(80 mmol, 4 당량)로 처리하였다. 이를 1시간 동안 혼합한 후에, 반응 혼합물을 원심분리하고, 에테르층을 제거하고, 오일로 농축하였다. 이 물질을 빙초산에 용해시키고, 팔라듐 하이드록사이드와 함께 진탕하고, 실온에서 2 시간동안 60 p.s.i. 수소 하에서 수소첨가반응시켰다. 촉매를 여과시켜 제거하고, 생성된 용액을 농후한 오일로 농축하였다. 이 물질을 디클로로메탄에 용해시키고, 1N NaOH로 중화시켰다. 디클로로메탄 용액을 수성상으로부터 분리하고, 무수 탄산칼슘 상에서 건조시키고, 오일로 농축하였다. 이 물질을 에테르에 용해시키고, 디에틸에테르 중의 1 M HCl로 처리하였다. 생성된 침전물(백색 고체)을 수집하고, 디에틸에테르로 세척하고, 기류 건조시켰다. 이 물질(유리 염기)의 GC/El-MS (R_t=9.69 분)로부터 단일 성분이 나타났다: m/z (rel. int.) 299 (M⁺, 21), 284(100), 164(17), 150(8), 135(81), 121(40), 102(17), 91(43), 77(18).

실시예 9: 화합물 9R의 합성

(R)-N-(1-(2-나프틸)에틸)-(R)-1-(1-나프틸)에틸아민 하이드로클로라이드

(R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민 10.0 g(58 mmol), 2'-아세토나프톤 9.4 g(56 mmol), 티탄(IV) 이소프로폭사이드 20.7 g(73.0 mmol) 및 에탄올(무수) 100 mL의 혼합물을 3 시간동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 소듐 시아노보로하이드라이드(NaCNBH₃) 3.67 g(58.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물에 에테르 1 리터 및 물 10 mL를 첨가하고, 생성된 침전물을 원심분리에 의해 제거하였다. 상청액을 진공 하에서 증발시키고, 조 생성물을 고온 헥산으로부터 4회 재결정화시켜 순수한(순도 : 98+%) 부분입체이성질체 1.5 g을 얻었다. 유리 염기를 헥산에 용해시키고, 여과하고, 이어서 에테르성 HCl을 첨가하여 생성물을 백색 고체(1.1 g, 6% 수율)로서 침전시켰다. 융점: 200-240℃에서 연화됨(분해).

실시예 10: 화합물 11X의 합성

N-(4-이소프로필벤질)-(R)-1-(1-나프틸)에틸아민 하이드로클로라이드

(R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민 1.06 g(6.2 mmol), 4-이소프로필벤즈알데히드 0.92 g(6.2 mmol) 및 티탄(IV) 이소프로폭사이드 2.2 g(7.7 mmol)의 혼합물을 5분 동안 100℃로 가열한 후, 실온에서 4 시간동안 교반시켰다. 이어서, 소듐 시아노보로하이드라이드(NaCNBH₃) 0.39 g(6.2 mmol)을 첨가한 후, 에탄올 1 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간동안 교반하였다. 이 반응 혼합물에 에테르 100 mL 및 물 1 mL를 첨가하고, 생성된 침전물을 원심분리에 의해 제거하였다. 상청액을 진공 하에서 증발시키고, 조 생성물을 실리카겔 (50 mm x 30 cm 컬럼) 상에서 크로마토그래피(1% MeOH/CHCl₃로 용출)하였다. 이어서, 크로마토그래피한 물질을 헥산에 용해시키고, 에테르성 HCl을 첨가하여 생성물을 백색 고체(0.67 g, 35% 수율)로서 침전시켰다. 융점: 257-259℃

실시예 11: 화합물 12U의 합성

N-3-(2-메틸페닐)-1-프로필-(R)-3-메톡시-α-메틸벤질아민 하이드로클로라이드

디클로로메탄 10 mL 중의 2-메틸신나모니트릴 1.43 g(10 mmol)의 용액을 0℃로 냉각하고, 1 M 디이소부틸알루미늄 하이드라이드 (10 mL,디클로로메탄)으로 15분간 적가 처리하였다. 이 반응물을 0℃에서 15분간 교반시키고, 디클로로메탄 (10ml) 중의 (R)-(+)-3-메톡시-α-메틸벤질아민 1.51 g(10 mmol)의 1M 용액으로 15분간 적가 처리하였다. 이 반응물을 0℃에서 1시간동안 교반시키고, 소듐 시아노보로하이드라이드 1 g(16 mmol)을 함유하는 에탄올 100 mL의 용액에 부었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 48 시간동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 에테르로 희석하고, 1N NaOH로 중화시켰다. 에테르층을 제거하고, 무수 탄산칼륨 상에서 건조시키고, 오일로 농축하였다. 디클로로메탄 중의 5% 메탄올에 대한 디클로로메탄의구배를 사용하여 실리카를 통해 이 물질을 크로마토그래피하여 GC/El-MS (R_t= 10.06 분)한 결과가 다음과 같은 단일 성분인 불포화 중간체를 얻었다: m/z (rel. int.) 281 (M⁺, 17), 266(59), 176(19), 146(65), 135(73), 131(100), 91(21), 77(13).

실온에서 16시간 동안 탄소상의 팔라듐 촉매의 존재 하에서 에탄올 중의 불포화 중간체를 수소첨가반응시켰다 (1 atm H₂). 이 반응으로부터의 생성물을 디에틸에테르 중의 1 M HCl로 처리하여 하이드로클로라이드염으로 전환시켰다. 이 물질(유리 염기)의 GC/El-MS (R_t= 9.31 분)한 결과 단일 성분이 나타났다: m/z (rel. int.) 283 (M⁺, 21), 268(100), 164(12), 148(8), 135(85), 121(12), 105(49), 91(23), 77(21).

실시예 12: 화합물 12V의 합성

N-3-(3-메틸페닐)-1-프로필-(R)-3-메톡시-α-메틸벤질아민 하이드로클로라이드

2-메틸신나모니트릴을 사용한 것을 제외하고는 실시예 11의 과정을 따라 상기 화합물을 제조하였다. 불포화 중간체는 GC/El-MS (R_t= 10.21 분)한 결과 단일 성분이었다: m/z (rel. int.) 281 (M⁺, 57), 266(86), 146(98), 135(88), 131(100), 115(43), 102(26), 91(43), 77(18). 이 물질을 환원시키고, 실시예 11에 개시된 과정을 사용하여 하이드로클로라이드염을 형성시켜 생성물을 얻었다. 이 물질(유리 염기)을 GC/El-MS (R_t= 9.18 분)한 결과 단일 성분이 나타났다: m/z (rel. int.) 283 (M⁺, 19), 268(100), 164(11), 148(8), 135(76), 121(16), 105(45), 91(23), 77(21).

실시예 13: 화합물 12Z의 합성

N-3-(2-클로로페닐)-1-프로필-(R)-1-(1-나프틸)에틸아민 하이드로클로라이드

2-클로로하이드로신나모니트릴 및 (R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민을 10 mmol 양으로 사용한 것을 제외하고는 실시예 11의 과정을 따라 상기 화합물을 제조하였다. 이 물질을 디클로로메탄 중의 5% 메탄올에 대한 디클로로메탄의 구배를 사용하여 실리카를 통해 이 물질을 크로마토그래피하고, TLC 분석(디클로로메탄 중의 5% 메탄올)에 의해 단일 성분으로서 생성물을 얻었다. 이를 디에틸에테르 중의 1 M HCl로 처리하여 하이드로클로라이드염을 제조하였다.

실시예 14: 화합물 14U의 합성

(R)-N-(1-(4-메톡시페닐)에틸)-(R)-1-(1-나프틸)에틸아민 하이드로클로라이드

(R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민 1.1 g(6.2 mmol), 4'-메톡시아세토페논 0.93 g(6.2 mmol), 티탄(IV) 이소프로폭사이드 2.2 g(7.7 mmol) 및 에탄올(무수) 1 mL의 혼합물을 3시간 동안 60℃로 가열하였다. 이어서, 소듐 시아노보로하이드라이드(NaCNBH₃) 0.39 g(6.2 mmol)을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물에 에테르 200 mL 및 물 2 mL를첨가하고, 생성된 침전물을 원심분리에 의해 제거하였다. 상청액을 진공 하에서 증발시키고, 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피 (25 mm x 25 cm 컬럼) (1% MeOH/CHCl₃로 용출)하였다. 이 물질 소분획을 HPLC 크로마토그래피[셀렉토실, 5 μM 실리카겔; 25 cm x 10.0 mm(미합중국 캘리포니아주 토랜스 소재의 페노메넥스사 제품), 4 mL/분; UV det. 275 nM; 12% 에틸 아세테이트-88% 헥산 (용출 시간 12.0분)]하였다. 이어서, HPLC로 정제한 부분입체이성질체를 헥산에 용해시키고, 에테르성 HCl을 첨가하여 생성물을 백색 고체(20 mg)로서 침전시켰다. 융점: 209-210℃(분해).

실시예 15: 화합물 17M의 합성

N-(3-클로로-4-메톡시벤질)-(R)-1-(1-나프틸)에틸아민 하이드로클로라이드

(R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민 6.6 g(39 mmol), 3'-클로로-4'-메톡시벤즈알데히드 6.6 g(39 mmol), 티탄(IV) 이소프로폭시드 13.8 g(48.8 mmol) 및 에탄올(무수) 30 mL의 혼합물을 30분 동안 80℃로 가열한 후, 실온에서 3시간동안 교반하였다. 이어서, 소듐 시아노보로하이드라이드(NaCNBH₃) 2.45 g(39 mmol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 18시간동안 교반하였다. 이 반응 혼합물에 에테르 100 mL 및 물 2 mL를 첨가하고, 생성된 침전물을 원심분리에 의해 제거하였다. 상청액을 진공 하에서 증발시키고, 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피 (50 mm x 30 cm 컬럼)(CH₂Cl₂로 용출)하였다. 이어서, 크로마토그래피한 물질을 헥산 500 mL에 용해시키고, 여과된 Norit^R0.2 μM로 탈색시키고, 이어서 에테르성HCl을 첨가하여 생성물을 백색 고체(10.2 g, 56% 수율)로서 침전시켰다. 융점: 241-242℃(분해).

실시예 16: 화합물 17P의 합성

4-메톡시-3-메틸아세토페논 [17P 전구체]

4'-히드록시-3'-메틸아세토페논 5.0 g(33.3 mmol), 요오도메탄 5.7 g(40.0 mmol), K₂CO₃(입상, 무수) 23.0 g(167 mmol), 및 아세톤 250 mL의 혼합물을 3시간동안 환류시켰다. 이어서, 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과시켜 무기 염을 제거하고, 진공하에서 증발시켰다. 조 생성물을 에테르 100 mL에 용해시키고, 물(2 x 20 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 증발시켜 생성물 4.5 g (수율 82.4%)을 얻었다. 다음 반응에서 추가 정제없이 케톤을 사용하였다.

(R)-N-(1-(4-메톡시-3-메틸페닐)에틸)-(R)-1-(1-나프틸)에틸아민 하이드로클로라이드 [화합물 17P]

(R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민 4.24 g(24.8 mmol), 4'-메톡시-3'-메틸아세토페논 4.06 g(24.8 mmol), 티탄(IV) 이소프로폭사이드 8.8 g(30.9 mmol) 및 에탄올(무수) 1 mL의 혼합물을 2시간 동안 100℃로 가열하였다. 여기에 이소프로판올 45 mL를 첨가하고, 반응물을 얼음조에서 10℃로 냉각하였다. 이어서, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(NaHB(O₂CCH₃)₃) 10.5 g(49.5 mmol)을 15분에 걸쳐 수회로 나누어 첨가하였다. 이어서, 이 반응 혼합물을 18시간 동안 70℃로 가열하였다. 이 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에테르 400 mL에 부었다. 현탁액을 원심분리하고, 상청액을 수집하고, 펠렛을 에테르 400 mL로 세척하였다. 합해진 유기 세척액을 진공 하에서 증발시켰다. 잔류물을 에테르 400 mL에 용해시키고, 1 N NaOH (4 x 50 mL) 및 물(2 x 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과시키고, 진공하에서 증발시켰다. 축축한 잔류물에 무수 에탄올을 첨가하고, 이어서 회전 증발기를 사용하여 철저하게 증발시켜 오일을 얻었다. 이어서, 이 혼합물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피 (50 mm x 30 cm)(1% MeOH: 1% IPA:CHCl₃로 용출)하여 오일 4.8 g을 얻었다.

바람직한 부분입체이성질체를 HPLC 크로마토그래피[SUPELCOSIL^TMPLC-Si, 18 μM 실리카겔; 25 cm x 21.2 mm(미합중국 펜실바니아주 벨레폰테 소재의 수펠코사 제품), 7 mL/분; UV det. 275 nM; 20% 에틸 아세테이트-80% 헥산 (용출 시간 9.5 내지 11.0분)]에 의해 추가로 정제하였다. 이 혼합물(용출제 중의 100 mg/mL 용액)을 분사하여(800 μL 부분 표본) 바람직한 이성질체 65 mg을 얻었다. 다중 HPLC 주입물로부터 순수 물질 1.0 g을 얻었다. HPLC 크로마토그래피한 물질을 헥산 50 mL에 용해시키고, 에테르성 HCl로 하이드로클로라이드염을 침전시켰다. 이 염을 프릿팅된 유리 위에 수집하고, 헥산으로 세척하여 백색 고체(1.0 g)을 얻었다. 융점: 204-205℃.

실시예 17: 화합물 17X의 합성

3-클로로-4-메톡시벤즈알데히드

3-클로로-4-하이드록시벤즈알데히드 25 g(160 mmol), 요오도메탄 27.25 g(192 mmol), K₂CO₃(입상, 무수) 110.6 g(800 mmol), 및 아세톤 300 mL의 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 이어서, 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 디에틸 에테르 500 mL를 부가하고 혼합물을 여과지를 통해 여과시켜 무기 고체를 제거하였다. 여과액을 감압하에서 증발시키고 디에틸 에테르 800 mL에 용해시키고, 0.1 N NaOH (3 x 100 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 조생성물 24 g (수율 92%)를 얻었다. 상기 물질을 실리카겔 상에서 크로마토그래피(50 cm x 30 cm) (헥산-EtOAc, 5:1로 용출)에 의해 더 정제하여 백색 고체 15.02 g (수율 56 %)를 수득하였다. TLC (헥산-EtOAc, 5:1) R_f= 0.24 , GC R_t= 4.75분, MS (EI) m/z 170 (M⁺), 172 (M+2).

1-메틸-(3'-클로로-4-메톡시벤질)알코올

3-클로로-4-메톡시벤즈알데히드 13 g(76.5 mmol), 염화 메틸마그네슘 52 g(153 mmol) 및 THF 300 mL의 혼합물을 3시간동안 환류시켰다. 이어서, 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. NH₄Cl (표준용액, 6 mL)를 적가하고 이어서 디에틸 에테르 500 mL을 적가하고 혼합물을 여과지를 통해 여과시켜 무기 고체를 제거하였다. 여과물을 감압하에서 증발시키고 수득된 고체를 디에틸 에테르 300 mL에 용해시키고, 물 (4 x 25 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 진공하에서 증발시켜 조생성물 11.3 g (수율 80%)를 얻었다. 상기 물질을 실리카겔 상에서 크로마토그래피(50 cm x 30 cm) (CH₂Cl₂로 용출시킴)에 의해 더 정제하여 오일 11.3 g (63 %)를 수득하였다. TLC (CH₂Cl₂) R_f= 0.25 , GC R_t= 5.30분, MS (EI) m/z 186 (M⁺), 188 (M+2).

3'-클로로-4'-메톡시아세토페논

1-메틸-(3'-클로로-4'-메톡시벤질)알코올 7.6 g(41 mmol), 피리디늄 클로로크로메이트 (PCC) 13.16 g(61.5 mmol) 및 CH₂Cl₂300 mL의 혼합물을 실온에서 2시간동안 교반시켰다. 디에틸 에테르 1000 mL을 부가하고 혼합물을 실리카겔의 크로마토그래피 컬럼(50 cm x 30 cm) (디에틸에테르로 용출시킴)상에 위치시켜 조생성물 7.3 g, 97 %를 수득하였다. 상기 물질의 GC 분석으로 순도 99% 임을 확인하였고 더 정제시키지 않은채로 다음 반응에서 사용하였다. TLC (디에틸 에테르) R_f= 1.0, GC R_t= 5.3분, MS (EI) m/z 184 (M⁺), 184 (M+2).

(R,R)-N-(1-에틸-4'-메톡시-3'-클로로페닐)-1-(1-나프틸에틸)아민

3'-클로로-4'-메톡시아세토페논 5.3 g(29 mmol), (R)-(+)-1-(1-나프틸)에틸아민 4.98 g(29 mmol), 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 10.2 g(36 mmol) 및 이소프로파놀 20 mL의 혼합물을 3시간 동안 100 ℃로 가열시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (NaB(O₂CCH₃)₃) 12.29 g(58 mmol)을 10분 동안 수회로 나누어 부가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 가열 환류시키고 18 시간 동안 실온에서 교반시켰다. 이어서 혼합물을 디에틸 에테르 500 mL 에 쏟아 붓고, H₂O (2 mL)을 부가하고 현탁액을 원심분리시켜 티탄염의 미세한 침전물을 제거하였다. 상청액을 수집하고 펠렛을 에테르 500 mL로 세척하였다. 결합된 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공 증발시켜 조생성물 6.81 g (70%)을 수득하였다.

상기 물질을 실리카겔(50 m x 30 cm) 상에서 크로마토그래피시켜 (3% MeOH - 97% CH₂Cl₂로 용출시킴) 더 정제하여 오일 2.01 g을 수득하였다. 부분입체 이성질체를 재결정화시켜 더 정제하였다. 에테르성 HCl을 사용하여 유리 염기 1.98 g을 그의 HCl 염으로 전환시켰다. 상기 염을 고온의 이소프로파놀 65 mL에 용해시키고 용액을 여과지로 여과시켰다. 여과액을 감압 증발시키고 수득된 고체를 이소프로파놀 30 mL에 용해시켰다. 실온에서 18 시간 정치시킨 후, 결정성 고체를 수집하고, 냉 이소프로파놀 20 mL로 세척하고, 건조시켜 유리염으로부터 부분입체 이성질체적으로 순수한 하이드로클로라이드염 0.87 g (40%)를 수득하였다. 융점 236-237½℃ (분해), TLC (MeOH-CH₂Cl₂[99:1]) R_f= 0.25, GC R_t= 11.06분, FTIR (KBr 펠렛, cm^-1) 3433, 2950, 2931, 2853, 2803, 2659, 2608, 2497, 1604, 1595, 1504, 1461, 1444, 1268, 1260, 1067, 1021, 802, 781, 733; MS (EI) m/z 339 (M⁺), 341 (M+2).

실시예 18: 부가적인 합성 실험 기록

22Z 및 23A의 제조

디메틸포름아미드 100 ml 중의 수소화 나트륨의 교반액 (2.173 g, 오일 중의 60%, 54.325 mmol)을 트리에틸 포스포노아세테이트 (12.47 g, 55.65 mmol)를 적가하여 처리하였고 30 분 동안 실온에서 교반시켰다. 이후, 디메틸포름아미드 50 ml 중의 m-트리플루오로메톡시 벤즈알데히드 10.0 g(52.6 mmol)의 용액을 적가하고 용액을 30분 동안 실온에서 교반시키고 30분 동안 100 ℃에서 교반시켰다. 물을 첨가하여 반응물을 켄칭시키고 디에틸 에테르 500 mL를 사용하여 분리 깔대기로 옮기었다. 에테르 용액을 포화 염화 암모늄 (4 x 500 mL)으로 세척하고, 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고 농축시켜 에틸 m-트리플루오로메톡시신나메이트를 오일로서 수득하였다. m/z (rel. int.) 260 (M+, 19), 232 (16), 215 (100), 187 (21), 101 (28).

60 p.s.i. 수소하에서 수산화 팔라듐 촉매량 (10 중량%)를 사용하여 에탄올 100 ml 중의 에틸 에테르를 환원시켰다. 환원시킨 후 (2시간, 실온) 반응물을 여과시키고 농축시켜 에틸 m-트리플루오로메톡시하이드로신나메이트를 오일로서 수득하였다. m/z (rel. int.) 262 (M+, 16), 217 (7), 188 (100), 175 (28), 103 (31), 91 (18), 77 (23).

16시간 동안 실온에서 에탄올 - 10 M 수산화 나트륨 (1:1)의 용액에서 포화된 에틸 에스테르를 가수분해시켰다. 이후, 용액을 산성화시키고 생성물을 디에틸 에테르로 추출시켰다. 에테르 용액을 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시키고 농축시켜 고체로서 m-트리플루오로메톡시하이드로신남산을 수득하였다. m/z (rel. int.) 234 (M+, 46), 188 (100), 174 (65), 103 (27), 91 (12), 77 (17).

산을 과량의 염화 티오닐과 함께 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 과량의 염화 티오닐을 100 ℃에서 감압 증발시켜 m-트리플루오로메톡시하이드로신나밀 클로라이드를 오일로서 수득하였다. 생성물을 더 정제시키지 않은 채로 사용하였다.

테트라하이드로푸란 중의 m-트리플루오로메톡시하이드로신나밀 클로라이드 (9.8 g, 39 mmol) 용액을 -78 ℃로 냉각시키고 메틸 마그네슘 브로마이드 (39 mmol)의 용액 (테트라하이드로푸란 중의 3M) 13 mL로 적가하여 처리하였다. 반응물을 -78 ℃에서 4시간 동안, 실온에서 8 시간 동안 교반시키고 묽은 HCl로 켄칭시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 추출시켰다. 에테르를 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시키고, 여과시키고 오일로 농축시켰다. 아세톤에 대한 헥산의 구배를 사용하여 실리카를 통해 상기 물질을 크로마토그래피시켜 오일로서 4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부타논을 수득하였다. m/z (rel. int.) 232 (M+, 68), 217 (7), 189 (59), 175 (31), 103 (28), 43 (100).

4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부타논 2.32 g(10 mmol), (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민 1.51 g(10 mmol) 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 3.55 g(12.5 mmol)의 용액을 4시간 동안 실온에서 교반시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 10 mmol의 용액 (1M, 10 ml)으로 처리하고 실온에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응물을 디에틸 에테르 50 ml로 희석시키고 물 0.72 ml (40 mmol)로 처리하였다. 완전히 혼합시킨 후, 용액을 원심분리시키고 에테르 층을 가만히 따르고 오일성 고체로 농축시켰다. 고체를 디에틸에테르에 현탁시키고 0.45 μM CR PTFE 아크로디스크 (Acrodisc)로 여과시키고 투명한 오일로 농축시켰다. 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 2개의 부분입체 이성질체를 수득하였다. (S,R)-N-[4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 22Z [m/z (rel. int.) 367 (M+, 3), 352 (20), 232 (4), 178 (47), 135 (100), 105 (14), 91 (10), 77 (11)] 및 (R,R)-N-[4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 23A; m/z (rel. int.) 367 (M+, 3), 352 (19), 232 (7), 178 (43), 135 (100), 105 (19), 91 (10), 77 (11).

22X 및 22Y의 제조

유사한 방법으로, 4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부타논, (R)-1-(1-나프틸)에틸아민 등몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합시키고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 2개의 부분입체 이성질체를 수득하였다. (S,R)-N-[4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부틸]-1-(1-나프틸)에틸아민, 22X; m/z (rel. int.) 387 (M+, 3), 372 (15), 198 (15), 176 (12), 155 (100), 128 (8), 115 (6), 109 (4), 103 (5), 77 (8) 및 (R,R)-N-[4-(3-트리플루오로메톡시페닐)-2-부틸]-1-(1-나프틸)에틸아민, 22Y; m/z (rel. int.) 387 (M+, 2), 372 (12), 198 (16), 176 (11), 155 (100), 128 (8),115 (6), 109 (4), 103 (5), 77 (8).

4T의 제조

유사한 방법으로, o-클로로벤즈알데히드로부터 제조된 4-(2-클로로페닐)-2-부타논, (R)-1(3-메톡시페닐)에틸아민 등몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합하고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 (R,R)-N-[4-(2-클로로페닐)-2-부틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 4T; m/z (rel. int.) 317 (M+, 3), 302 (16), 178 (62), 178 (62), 135 (100), 125 (15), 105 (10), 91 (6), 77 (8)]을 수득하였다.

21Y의 제조

유사한 방법으로, m-클로로벤즈알데히드로부터 제조된 4-(3-트리플루오로메틸페닐)-2-부타논, (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민 등몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합하고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 (R,R)-N-[4-(3-트리플루오로메틸페닐)-2-부틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 21Y [m/z (rel. int.) 351 (M+, 2), 336 (18), 216 (4), 202 (3), 178 (45), 135 (100), 105 (13), 91 (9), 77 (8)] 및 (S,R)-N-[4-(3-트리플루오로메틸페닐)-2-부틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 21X을 수득하였다.

25C 및 25D의 제조

유사한 방법으로, 4-(3-트리플루오로메틸페닐)-2-부타논, (R)-1(1-나프틸)에틸아민 등몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합하고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 (S,R)-N-[4-(3-트리플루오로메틸페닐)-2-부틸]-1-(1-나프틸)에틸아민, 25C [m/z (rel. int.) 371 (M+, 3), 356 (16), 198 (15), 155 (100), 129 (8), 115 (5), 109 (3), 77 (2)] 및 (R,R)-N-[4-(3-트리플루오로메틸페닐)-2-부틸]-1-(1-나프틸)에틸아민, 25D [m/z (rel. int.) 371 (M+, 3), 356 (16), 198 (15), 155 (100), 129 (8), 115 (5), 109 (3), 77 (2)]를 수득하였다.

21D의 제조

유사한 방법으로, 4-페닐-2-부타논 (알드리치 케미칼 코포레이션 제품), (R)-1(3-메톡시페닐)에틸아민 등몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합하고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 (R,R)-N-(4-페닐-2-부틸)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 21D [m/z (rel. int.) 283 (M+, 4), 268 (13), 178 (45), 135 (100), 105 (15), 91 (43), 77 (11)] 및 (S,R)-N-(4-페닐-2-부틸)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 21E를 수득하였다.

21F의 제조

유사한 방법으로, 4-페닐-2-부타논 (알드리치 케미칼 코포레이션 제품), (R)-1(1-나프틸)에틸아민 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합하고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리처리하고 클로로포름 중의 5% 메탄올을 사용한 반복적인 예비 박층 크로마토그래피로 (R,R)-N-(4-페닐-2-부틸)-1-(1-나프틸)에틸아민, 21F ;m/z (rel. int.) 303 (M+, 6), 288 (14), 198 (22), 155 (100), 129 (8), 115 (5), 91 (19), 77(4)를 수득하였다.

12Z의 제조

디클로로메탄 100 ml 중의 2-클로로하이드로신나모니트릴 (알드리치 케미칼 코포레이션) 1.66 g (10 mmol)의 교반 용액을 -78 ℃로 냉각시키고 수소화 디이소부틸알루미늄 1.42 g (10 mmol)으로 적가하여 처리하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반시키고, -78 ℃로 냉각시키고 디클로로메탄 25 ml 중의 1-(1-나프틸)에틸아민 1.71 g (10mmol)의 용액으로 처리하였다. 반응물을 얼음조로 옮기고 2시간 동안 교반시켰다. 이후, 반응물을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드의 교반 용액 (0.2 M의 50 ml, 10mmol)에 직접 부었다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시키고 과량의 소듐 보로하이드라이드를 10 % HCl을 부가하여 켄칭시켰다. 10N NaOH를 부가하여 용액을 염기성으로 만들고 디에틸 에테르 300 ml를 사용하여 세척하면서 분리 깔대기로 옮기었다. 수성상을 제거하고 잔류하는 유기층을 1N NaOH (3 x 100 ml)으로 세척하였다. 유기층을 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시키고 오일로 농축시켰다. 10% 메탄올-클로로포름에 대한 클로로포름의 구배를 이용하여 실리카겔을 통해 상기 물질을 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(2-클로로페닐)프로필]-1(1-나프틸)에틸아민, 21Z 2.34 g (72% 수율)를 투명한 오일로서 수득하였다. m/z (rel. int.) 323 (M+, 2), 308 (63), 288 (7), 196 (5), 184 (5), 155 (100), 125(24), 115 (8), 103 (4), 91(3), 77(7).

12B의 제조

유사한 방법으로, 4-페닐신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(4-메틸페닐)프로프-2-에닐]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 12B를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 281 (M+, 6), 266 (5), 176 (27), 146 (75), 135 (63), 131 (100), 115 (25), 105 (21), 91 (21), 77 (21)을 수득하였다.

12C의 제조

유사한 방법으로, 2-메틸신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(4-메틸페닐)프로프-2-에닐]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 12C를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 281 (M+, 4), 266 (15), 176 (18), 146 (62), 135 (58), 131 (100), 115 (23), 105 (19), 91 (38), 77 (17)을 수득하였다.

12D의 제조

유사한 방법으로, 2,4,6-트리메틸신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(2,4,6-트리메틸페닐)프로프-2-에닐]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 12D를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 309 (M+, 8), 294 (25), 174 (82), 159 (100), 135 (52), 129 (29), 105 (21), 91 (17), 77 (14)을 수득하였다.

12E의 제조

유사한 방법으로, 4-이소프로필신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(4-이소프로필페닐)프로프-2-에닐]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 12E를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 309 (M+, 9), 294 (7), 174 (98), 159 (22), 135 (80), 117 (100), 105 (35), 91 (37), 77 (19).

12F의 제조

유사한 방법으로, 2,4-디메틸신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(2,4-디메틸페닐)프로프-2-에닐]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 12F를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 295 (M+, 8), 294 (15), 174 (29), 160 (75), 145 (100), 135 (68), 117(21), 105 (30), 91 (26), 77 (19)을 수득하였다.

12G의 제조

유사한 방법으로, 3-메틸신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[3-(3-메틸페닐)프로프-2-에닐]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 12G를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 281 (M+, 5), 266 (9), 176 (24), 146 (71), 135 (62), 131 (100), 115 (23), 105 (19), 91 (41), 77 (18)을 수득하였다.

25E의 제조

유사한 방법으로, 신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-(3-페닐프로프-2-에닐)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 25E를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 267 (M+, 3), 252 (14), 176 (17), 135 (62), 117 (100), 105 (28), 91 (56), 77 (33)을 수득하였다.

25G의 제조

유사한 방법으로, α-메틸신나모니트릴을 디이소부틸 알루미늄 하이드라이드로 처리하고 중간체인 알루미늄-이민 착물을 (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민으로 처리하였다. 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드로 처리하였다. 마무리처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-(2-메틸-3-페닐프로프-2-에닐)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 25G를 투명한 무색의 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 281 (M+, 5), 266 (18), 190 (12), 146 (78), 135 (82), 131 (100), 115 (21), 105 (21), 91 (62), 77 (19)을 수득하였다.

6X의 제조

디메틸포름아미드 150 ml 중의 소듐 하이드라이드 1.8 g (75 mmol)의 교반액을 디메틸포름아미드 50 ml 중의 디에틸시아노메틸 포스포네이트 13.3 g (75 mmol) 용액으로 처리하였다. 반응물을 30분 동안 실온에서 교반시켰다. 이후, 반응물을 3-클로로벤즈알데히드 10.54 g (75 mmol)로 처리하고, 실온에서 1시간동안 60 ℃에서 30분 동안 교반시켰다. 이어서, 물 200 ml를 부가하여 반응물을 켄칭시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르 300 ml를 사용하여 분리 깔대기로 옮기고 수득된 유기층을 물 (5 x 300 ml) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 탄산 칼륨 상에서 건조시키고 농축시켜 고체상의 3-클로로신나모니트릴 11.06 g을 수득하였다. 고체를 테트라하이드로푸란 50 ml에 용해시키고 과량의 디보란으로 처리하고 실온에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 얼음/10% HCl 상에 부었다. 산성 수성상을 디에틸에테르 (2 x 200 ml)로 세척시켰다. 10 N NaOH를 부가하여 수성상을 염기성으로 만들고 디에틸 에테르 200 ml로 추출시켰다. 에테르 추출물을 무수 탄산 칼륨 상에서 건조시키고 농축시켜 오일상의 3-(3-클로로페닐)프로필아민 0.6 g (3.54 mmol)을 수득하였다. 3-(3-클로로페닐)프로필아민 0.6 g (3.54 mmol), 3'-메톡시아세토페논 0.53 g (3.54 mmol) 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25몰 당량 (1.26g,4.43 mmol)을 4시간 동안 실온에서 혼합하고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 반응물을 16시간 동안 실온에서 교반시키고, 디에틸 에테르 50 ml로 희석시키고 물 0.32 ml (17.7 mmol)로 처리하였다. 철저히 혼합시킨 후, 용액을 원심분리시키고 에테르층을 밀키성 고체로 농축시켰다. 상기 물질을 디에틸 에테르에 현탁시키고 0.45 μM CR PTFE 아크로디스크로 여과시켰다. 에테르 세척물을 오일로 농축시켰다. 3% 메탄올-디클로로메탄(0.1% 이소프로필아민 함유)를 사용하여 상기 물질을 크로마토그래피시켜 (실리카, 예비 박층 크로마토그래피) N-[3-(3-클로로페닐)프로필]-1(3-메톡시페닐)에틸아민, 6X을 수득하였다. m/z (rel. int.) 303 (M+, 3), 288 (40), 196 (3), 164 (8), 135 (100), 125 (46), 103 (26), 91 (29), 77 (29).

6V의 제조

상기 4-클로로벤즈알데히드와 유사한 방법으로 제조된 3-(4-클로로페닐)프로필아민, 3'-메톡시아세토페논 동몰량 및 티탄(IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4 시간 동안 실온에서 혼합시키고 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 N-[3-(4-클로로페닐)프로필]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 6V를 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 303 (M+, 8), 288 (91), 196 (4), 164 (10), 135 (100), 125 (61), 103 (21), 91 (21), 77 (18)을 수득하였다.

20A의 제조

유사한 방법으로, 1-(1-메톡시페닐)에틸아민, 4-t-부틸아세토페논 동몰량 및티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4시간 동안 실온에서 혼합시키고, 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노 보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 (R)-N-[1-(4-t-부틸페닐)에틸]-1-(1-나프틸)에틸아민, 20A를 오일로 수득하였다. m/z (rel. int.) 331 (M+, 12), 316 (29), 161 (70), 155 (100), 131 (14), 127 (13), 115 (10), 105 (6), 91 (10), 77 (7).

20H 및 25I의 제조

유사한 방법으로, (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 트랜스-4-페닐-3-부텐-2-온 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4시간 동안 실온에서 혼합시키고, 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 오일로서 (R,R)-N-(2-메틸-4-페닐부트-3-에닐)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 25 H; m/z (rel. int.) 283 (M+, 4), 268 (13), 178 (40), 135 (100), 105 (15), 91 (47), 77 (13) 및 오일로서 (S,R)-N-(2-메틸-4-페닐부트-3-에닐)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 25 I; m/z (rel. int.) 283 (M+, 4), 268 (13), 178 (40), 135 (100), 105 (15), 91 (47), 77 (13)을 수득하였다.

16L 및 16M의 제조

유사한 방법으로, (R)-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 3-메톡시아세토페논 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4시간 동안 실온에서 혼합시키고, 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 오일로서 (R,R)-N-[1-(4-메톡시페닐)에틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 16L; m/z (rel. int.) 284 (M-1, 1), 270 (85), 150 (83), 135 (100), 120 (12), 105 (28), 91 (25), 77 (23) 및 오일로서 (S,R)-N-[1-(4-메톡시페닐)에틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 16M; m/z (rel. int.) 284 (M-1, 1), 270 (53), 150 (98), 135 (100), 120 (11), 105 (33), 91 (25), 77 (23)을 수득하였다.

5B/5C의 제조

유사한 방법으로, 4-클로로아세토페논을 사용하여 3-메틸-3-(4-클로로페닐)신나모니트릴을 제조하였다. 니트릴을 촉매적으로 환원시켜 (수산화 팔라듐, 아세트산, 60 p.s.i 수소 2시간) 3-메틸-3-(4-클로로페닐)프로필아민을 제조하였다. 아민, 3'-메톡시아세토페논 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4시간 동안 실온에서 혼합시키고, 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 오일로서 N-(3- 메틸-3-(4-클로로페닐)프로필]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 5B/5C를 수득하였다. m/z (rel. int.) 317 (M+, 12), 302 (74), 210 (2), 182 (4), 164 (12), 135 (100), 121 (25), 103 (40), 91 (19), 77 (28).

4Z/5A의 제조

유사한 방법으로, 3-클로로아세토페논을 사용하여 3-메틸-3-(3-클로로페닐)신나모니트릴을 제조하였다. 니트릴을 촉매적으로 환원시켜 (수산화 팔라듐, 아세트산, 60 p.s.i 수소 2시간) 3-메틸-3-(3-클로로페닐)프로필아민을 제조하였다.아민, 3'-메톡시아세토페논 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4시간 동안 실온에서 혼합시키고, 중간체 이민을 에탄올성 소듐 보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 오일로서 N-[3-메틸-3-(3-클로로페닐)프로필]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 4Z/5A를 수득하였다. m/z (rel. int.) 283 (M+, 17), 268 (71), 164 (13), 135 (100), 121 (21), 105 (27), 91 (26), 77 (14).

4Y의 제조

유사한 방법으로, 2-클로로아세토페논을 사용하여 3-메틸-3-(2-클로로페닐)신나모니트릴을 제조하였다. 니트릴을 촉매적으로 환원시켜 (수산화 팔라듐, 아세트산, 60 p.s.i 수소 2시간) 3-메틸-3-(2-클로로페닐)프로필아민을 제조하였다. 아민, 3'-메톡시아세토페논 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량을 4시간 동안 실온에서 혼합시키고, 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 (1M의 5 ml, 5 mmol)로 처리하였다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 오일로서 N-[3-메틸-3-(2-클로로페닐)프로필]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 4Y를 수득하였다. m/z (rel. int.) 283 (M+, 17), 268 (71), 164 (13), 135 (100), 121 (21), 105 (27), 91 (26), 77 (14).

6T의 제조

디클로로메탄 중의 NPS R-568 30.3 g (100 mmol) 용액을 -78 ℃에서 보론트리브로마이드 50 g (200 mmol)을 적가하여 처리하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하고 얼음 상에 부었다. 하이드로브로마이드를 클로로포름을 사용하여수성상으로부터 추출하였다. 이어서, 가용성 클로로포름을 50% HCl(4 x 100 ml)로 세척하였다. 클로로포름 세척물을 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시키고 농축시켜 (R)-N-[3-(2-클로로페닐)프로필]-1-(3-하이드록시페닐)에틸아민 하이드로클로라이드를 고체로서 수득하였다. 디메틸포름아미드의 수소화 나트륨 0.48 g (20 mmol) 용액을 (R)-N-[3-(2-클로로페닐)프로필]-1-(3-하이드록시페닐)에틸아민 하이드로클로라이드 3.25 g (10 mmol)으로 처리하고 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반시켰다. 반응물을 요오도에탄 1.71 g (11 mmol)으로 처리하고 16 시간 동안 실온에서 교반시켰다. 마무리 처리하고 클로로포름 중의 3% 메탄올을 사용하여 실리카를 통해 크로마토그래피시켜 오일상의 (R)-N-[3-(2-클로로페닐)프로필]-1-(3-에톡시페닐)에틸아민, 6T을 수득하였다. m/z (rel. int.) 316 (M+, 1), 302 (100), 282 (11), 196 (5), 178 (7), 149 (74), 121 (34), 103 (25), 91 (28), 77 (29)을 수득하였다.

6R의 제조

NPS R-467을 사용하여 유사한 방법으로 오일상의 (R)-N-(3-페닐프로필)-1-(3-에톡시페닐)에틸아민, 6R을 제조하였다. m/z (rel. int.) 283 (M+, 10), 268 (74), 178 (11), 162 (8), 149 (100), 121 (30), 103 (16), 91 (86), 77 (29)을 수득하였다.

3U의 제조

3,3-디페닐프로필아민 2.11 g (10 mmol), 1'-아세토나프톤 1.70 g (10 mmol) 의 동물 혼합물 및 티탄(IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량 (3.55 g, 12.5 mmol)을4시간 동안 실온에서 교반시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 에탄올성 1M 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드 용액 12.5 ml (12.5 mmol)로 처리하고 16 시간 동안 실온에서 교반시켰다. 반응물을 디에틸 에테르 50 ml로 희석시키고 물 0.72 ml (40 mmol)로 처리하였다. 철저히 혼합시킨 후, 혼합물을 원심분리시키고 에테르 층을 가만히 따라내고 밀크성 오일로 농축시켰다. 오일을 디에틸 에테르 중에 현탁시키고 0.45 μM CR PTFF 아크로디스크를 통해 여과시켰다. 디에틸 에테르 여과액을 농축시켜 투명한 무색 오일상의 N-(3,3-디페닐프로필)-1-(1-나프틸)에틸아민, 3 U를 수득하였다. m/z (rel. int.) 365 (M+, 17), 350 (19), 181 (23), 155 (100), 141 (25), 115 (11), 91 (13), 77 (6)을 수득하였다.

6F의 제조

유사한 방법으로, 동몰량의 1-(3-메톡시페닐)에틸아민 (1. 51 g, 10 mmol), 2'-아세토나프톤 (1. 70 g, 10 mmol) 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 몰당량 (3.55 g, 12.5 mmol)을 상기와 같이 처리하였다. 마무리 처리하여 투명한 무색 오일로서 N-[1-(2-나프틸)에틸]-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 6F를 수득하였다. m/z (rel. int.) 305 (M+, 1), 290 (35), 170 (49), 155 (100), 135 (55), 115 (8), 105 (10), 91 (9), 77 (10).

4G의 제조

유사한 방법으로, (R)-1-페닐에틸아민, 1'-아세토나프톤 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합시키고 수득된 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 투명한 무색 오일로서 N-[1-(1-나프틸)에틸]-1-페닐에틸아민, 4G를 수득하였다. m/z (rel. int.) 275 (M+, 16), 260 (79), 155 (100), 127 (27), 105 (70), 77 (32).

4H의 제조

유사한 방법으로, (R)-1-페닐에틸아민, 2'-아세토나프톤 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합시키고 수득된 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 투명한 무색 오일로서 N-[1-(2-나프틸)에틸]-1-페닐에틸아민, 4H를 수득하였다. m/z (rel. int.) 275 (M+, 1), 260 (61), 155 (100), 120 (36), 105 (55), 77 (15).

6E의 제조

유사한 방법으로, 1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 1'-아세토나프톤 동몰량 및 티탄 (IV) 이소프로폭사이드 1.25 당량을 혼합시키고 수득된 중간체 이민을 에탄올성 소듐 시아노보로하이드라이드로 환원시켰다. 마무리 처리하고 크로마토그래피시켜 투명한 무색 오일로서 N-1-(1-나프틸)에틸-1-(3-메톡시페닐)에틸아민, 6E를 수득하였다. m/z (rel. int.) 305 (M+, 10), 290 (30), 170 (43), 155 (100), 135 (69), 115 (9), 105 (15), 91 (14), 77 (18).

실시예 19: 제약 제제

칼슘 모방체를 인간 환자에게 투여하기에 적합한 제약 제제로 제조하는 제법을 표 3에 나타낸다.

성분	mg/캡슐	g/5,000 캡슐의 대표적인 배치
NPS R-568	56.0	280.0
전젤라틴화된 녹말 NF	134.0	670.0
미정질 셀루로오스 NF	34.0	170.0
콜로이드성 이산화규소	1.0	5.0
총량	225 mg	1125g

NPS (R)-568 하이드로클로라이드 제제의 다른 예 및 투약 형태로는, 표준 기술을 사용하는 지지되거나 확장된 릴리스에 적합한 것을 들 수 있다.

또한, 표준 기술을 사용하여 적합하게 투약될 수 있다. 예컨대, 한 세트의 실험에서, NPS (R)-568 하이드로클로라이드의 경구형 복용량 10 내지 400 mg은 인간 피험자에 대한 약리학적 활성을 나타낸다. NPS (R)-568 하이드로클로라이드의 경구 투여후 NPS (R)-568의 주요 대사산물인 17Q의 O-글루코로나이드 콘주게이트가 현저한 양으로 관찰되었다. 즉, 17Q의 O-글루코로나이드 콘쥬게이트는 어느 정도의 유리한 효과를 나타낸다.

표준 기술을 사용하여 NPS (R)-568에 대한 다른 적합한 투약 범위를 측정할 수 있다.

본 명세서에서 기재한 다른 화합물에 대한 적합한 투약 범위, 제제, 및 투약 형태를, 적용시 제공되는 기술을 기준으로 본 분야의 숙련자에 의해 측정할 수도 있다.

다른 태양들이 하기 청구 범위에 포함된다. 따라서, 몇몇 태양을 제시하고 기재하였으나, 본 발명의 정신 및 범주를 벗어나지 않는 한 다양하게 변형될 수 있다.

본 발명은 일종 이상의 무기 이온 수용체 활성을 조절할 수 있는 화합물 및 무기 이온 수용체 활성을 조절함으로써 질병 또는 질환을 치료하는 방법을 특징으로 한다. 바람직한 화합물은 세포면 칼슘 수용체에 대한 세포외 칼슘 효과를 모방하거나 차단할 수 있다.

무기 이온 수용체 활성을 조절하여 처리할 수 있는 질병 또는 질환은 (1) 비정상적 무기 이온 항상성, 바람직하게는 칼슘 항상성을 특징으로 하는 형태 (2) 세포외 또는 세포내 전달체의 생성이 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성에 의해 영향을 받을 수 있는 세포외 또는 세포내 전달체의 비정상적인 양을 특징으로 하는 형태, (3) 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성에 의해 자체적으로 향상될 수 있는 세포내 또는 세포외 전달체의 비정상적인 효과 (예컨대, 종류 및 정도에서 다른 효과)를 특징으로 하는 형태, 및 (4) 무기 이온 수용체 활성, 바람직하게는 칼슘 수용체 활성의 조절이 예컨대, 수용체 활성에 의해 자극되는 세포내 또는 세포외 전달체의 생성이 다른 전달체의 비정상적인 양을 보상하는 질병 또는 질환에서 유익한 효과를 나타내는 다른 질병 또는 질환 중 하나 이상을 포함한다. 무기 이온 수용체 활성을 조절하여 분비 및 (또는) 효과가 영향을 받는 세포외 전달체의 예는 무기 이온, 호르몬, 신경 전파자, 성장 인자, 및 케모킨이다. 세포내 전달체의 예는 cAMP, cGMP, IP₃, 및 디아실글리세롤을 포함한다.

즉, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 칼슘 수용체 활성을 조절하고, 일종 이상의 칼슘 수용체 활성을 조절하여 영향을 끼칠 수 있는 질병 또는 질환의 치료에 사용된다. 칼슘 수용체 단백질은 임의의 분화된 세포가 세포외 Ca²⁺농도 변화에 반응하도록 한다. 예컨대, 세포외 Ca²⁺은 상피소체 세포로부터 상피소체 호르몬이 분비되는 것을 억제하고, 파골세포에 의한 뼈 재흡수를 억제하고 C-세포로부터의 칼시토닌의 분비를 자극시킨다.

바람직한 일 태양에서, 상기 화합물은 비정상적인 뼈 및 무기 항상성, 더욱 바람직하게는 칼슘 항상성을 특징으로 하는 질병 또는 질환을 치료하기 위해 사용된다.

Claims (12)

1. 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물.
2. 하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물.
3. 칼슘 수용체 활성을 조절하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 조성물.
4. 칼슘 이온의 농도에 의해 영향을 받는 비정상적인 농도의 칼슘 이온 또는 물질을 특징으로 하는 질병을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 조성물.
5. 1차 또는 2차 상피소체기능항진증을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
6. 파제트 병을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
7. 고칼슘혈 질환을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
8. 골다공증을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
9. 고혈압을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
10. 신성골이영양증을 치료하기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
11. 혈중 PHT 농도를 감소시키기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.
12. 혈중 Ca²⁺농도를 감소시키기 위한, 제1항 또는 제2항의 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용되는 염 또는 착물을 포함하는 제약 조성물.