KR100296250B1 - Composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure containing jujube extract and tangerine pericarp extract - Google Patents

Composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure containing jujube extract and tangerine pericarp extract Download PDF

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Abstract

PURPOSE: A composition containing a jujube extract and a tangerine pericarp extract containing naringin and hesperidin is provided which has an effect on prevention of adult diseases and cancer such as liver diseases, hypertension, arteriosclerosis, hyperlipidemia or the like when administered to animals. CONSTITUTION: This composition comprises a jujube extract and hesperidin, hesperetin, naringin, naringenin or a mixture thereof as flavonoid originated from a tangerine pericarp extract in a weight ratio of 1:0.001 to 1:0.1. For an example, 5kg jujube is extracted with 15L water at 100deg.C for 2hr two times, followed by filtering. The filtrate is then concentrated under reduced pressure to produce 2kg extract. And 500g tangerine is extracted with 5L ethanol at 60deg.C for 5 hr to produce 190g extract. The jujube extract and tangerine pericarp extract can be orally or parenterally administered at a dose of 0.1 to 5g, preferably 0.5 to 1g and 0.1 to 10g, preferably 0.5 to 2g/kg.weight.day respectively.

Description

대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물을 포함하는 지질대사 개선 및 혈압강하용 조성물Lipid metabolism improving and blood pressure lowering composition comprising jujube extract and citrus peel extract

본 발명은 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물을 포함하는 지질대사 개선 및 혈압강하용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure, which includes jujube extract and citrus peel extract.

대추는 생약제로서 예로부터 정신안정, 스트레스 해소, 불면증 치료, 간장해독작용 촉진 및 건위제로서 이용되어 왔으며(송효정, 산야초치료법, 228, (1994)),이에는 혈압강하 및 콜레스테롤 강하 활성성분 콜레스테롤 에스테르 전이 단백질 (cholesterol ester transfer protein, CETP) 저해제가 포함되어 있다는 사실이 본 발명자들에 의해 밝혀진 바 있다(한국특허출원 제 97-59425 호 및 제 97-59426 호). 또한, 감귤류 과피 추출물 및 그로부터 분리된 헤스페리딘 또는 나린진은 동맥경화 예방효과가 탁월하다는 사실도 역시 본 발명자들에 의해 밝혀졌다(한국특허출원 제 97-55578 호, 제 97-55579 호 및 제 97-55580 호).Jujube has been used as a herbal medicine for mental stability, stress relief, treatment of insomnia, promotion of liver detoxification, and health sensitization (Song Hyo-jeong, Sanyacho, 228, (1994)). It has been found by the inventors that the protein (cholesterol ester transfer protein (CETP)) inhibitors are included (Korean Patent Application Nos. 97-59425 and 97-59426). In addition, it has also been found by the present inventors that the citrus peel extract and the hesperidin or naringin isolated therefrom are excellent in preventing atherosclerosis (Korean Patent Application Nos. 97-55578, 97-55579 and 97-55580). number).

감귤류 과피는 각종 약리활성작용, 예를 들어, 심장순환기 질환과 관련된 지질대사 개선 효과, 항암 및 항바이러스 작용 등을 가진 것으로 알려져 있다. 예를 들어, 헤스페리딘 또는 헤스페리딘에서 배당체를 제거하여 얻는 헤스페레틴은 모세혈관 강화, 투과성(Permeability)감소, 혈압 강하, 혈중 콜레스테롤 강하, 항혈소판 응집(Antiplatelet aggregation), 항염증 및 항바이러스 작용을 한다고 알려져 있고(Meyer, O. C.,Angiology, 45,579-584(1994); Struckmann J. R., et al.,Angiol., 45,419-428(1994); Matsubara, Y., et al.,Japan Organic Synthesis Chem. Association Journal., 52,318-327(1994. Mar.);galati E. M., et al.,Farmaco., 51(3),219-221(1996, Mar.); Monforte MT., et al.,Farmaco., 50(9),595-599(1995, Sep.); JP 95-86929; JP 95-86930; Chung, M. I., et al.,Chin. Pharm. J.(Taipei)., 46,429-437(1994, Nov.);galati, E. M., et al.,Farmaco., 40(11),709-712(1994, Nov.); and Emim J. A., et al.,J. Pharm. Pharmacol., 46(2),118-122(1994)), 각종 바이오플라보노이드는 항산화, 혈압강하, 항암 및 항바이러스 작용을 한다고 알려져 있으며(Saija, A., et al.,Free Radical Biol. Med., 19,481-486(1995); Matsubara, Y., et al., 상기 문헌;galati E. M., et al., 상기 문헌; Felicia V., et al.,Nutr. Cancer, 26,167-181(1996); EP 0352147 A2(1990.1.24); and Kaul, T. N., et al.,J. Med. Virol., 15,71-79(1985)), 나린진 또는 나린진에서 배당체를 제거하여 얻는 나린제닌은 콜레스테롤 강하, 항암 항위궤양(알콜로부터 보호) 작용을 한다고 알려져 있다(Monforte MT., et al., 상기 문헌; JP 95-86929; JP 95-86930; Felicia V., et al., 상기 문헌; EP 0352417 A2(1990.1.24); and Martin M. J., et al.,Pharmacol., 49,144-150(1994)).Citrus peels are known to have various pharmacological activities, for example, lipid metabolism improving effects associated with cardiovascular disease, anticancer and antiviral effects. For example, hesperetin, obtained by removing glycosides from hesperidin or hesperidin, is said to have capillary potentiation, decreased permeability, lowered blood pressure, lowered blood cholesterol, antiplatelet aggregation, anti-inflammatory and antiviral activity. Meyer, OC, Angiology, 45, 579-584 (1994); Struckmann JR, et al., Angiol., 45, 419-428 (1994); Matsubara, Y., et al., Japan Organic Synthesis Chem Association Journal., 52, 318-327 (1994. Mar.); galati EM, et al., Farmaco., 51 (3), 219-221 (1996, Mar.); Monforte MT., Et al., Farmaco., 50 (9), 595-599 (1995, Sep.); JP 95-86929; JP 95-86930; Chung, MI, et al., Chin. Pharm. J. (Taipei)., 46, 429 -437 (1994, Nov.); galati, EM, et al., Farmaco., 40 (11), 709-712 (1994, Nov.); and Emim JA, et al., J. Pharm.Pharmacol ., 46 (2), 118-122 (1994)), various bioflavonoids are known to have antioxidant, hypotensive, anticancer and antiviral effects (Saija, A., et al., Free Radical Biol. Med., 19, 481-486 (1995); Matsubara, Y., et al., Supra; galati EM, et al., Supra; Felicia V., et al., Nutr. Cancer, 26, 167-181 (1996); EP 0352147 A2 (1990.1.24); and Kaul, TN, et al., J. Med. Virol., 15, 71-79 (1985)), glycosides in naringin or naringin Naringenin obtained by removal is known to act as a cholesterol lowering, anti-cancer anti-ulcer (protect from alcohol) (Monforte MT., Et al., Supra; JP 95-86929; JP 95-86930; Felicia V., et al., Supra; EP 0352417 A2 (1990.1.24); and Martin MJ, et al., Pharmacol., 49, 144-150 (1994)).

또한, 감귤의 과피와 씨 속에는 리모노이드계 물질이 존재하는데 이들이 항암활성을 갖고 있다는 사실도 밝혀져 있다(Lam, L. K. T., et al., Inhibition of chemically induced carcinogenesis by citrus limonoids. InFood Phytochemicals for Cancer Prevention, Vol. I,ACS Symposium series No. 546, Huang, M, T., O. Osawa, C. T. Ho, R. Rosen(ed). 1993).In addition, there are limonoid-based substances in the skin and seeds of tangerines, which have been shown to have anticancer activity (Lam, LKT, et al., Inhibition of chemically induced carcinogenesis by citrus limonoids.In Food Phytochemicals for Cancer Prevention, Vol. I, ACS Symposium series No. 546, Huang, M, T., O. Osawa, CT Ho, R. Rosen (ed). 1993).

이에 본 발명자들은 지질대사 개선 및 혈압강하에 효과가 있는 성분을 개발하기 위해 계속 연구를 진행하던 중, 감귤류의 과피 성분과 대추 추출물을 혼합한 조성물을 동물에게 투여할 경우, 지질대사 개선 및 혈압강하 등의 효과를 얻을 수 있다는 사실을 발견하여 본 발명을 완성하였다.Therefore, the present inventors continue to research the development of ingredients that are effective in improving lipid metabolism and lowering blood pressure, when administering a composition of citrus peel and jujube extract to animals, improving lipid metabolism and lowering blood pressure The present invention has been completed by discovering the effect of the present invention.

본 발명의 목적은 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물을 포함하는 지질대사 개선 및 혈압강하를 위한 의약품 및 식품 조성물을 제공하는 것이다.An object of the present invention to provide a pharmaceutical and food composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure, including jujube extract and citrus peel extract.

본 발명에서는 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물이 1 : 1 내지 100 : 1의 중량비율로 혼합된, 지질대사 개선 및 혈압강하용 조성물이 제공된다.In the present invention, jujube extract and citrus rind extract are mixed in a weight ratio of 1: 1 to 100: 1, there is provided a composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure.

본 발명에서는 또한 대추 추출물 및 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진, 나린제닌 또는 이들의 혼합물이 1 : 0.001 내지 1 : 0.1의 중량비율로 혼합된, 지질대사 개선 및 혈압강하용 조성물이 제공된다.The present invention also provides a composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure, in which the jujube extract and hesperidin, hesperetin, naringin, naringenin or a mixture thereof are mixed in a weight ratio of 1: 0.001 to 1: 0.1.

아울러, 본 발명에서는 활성성분으로서 유효량의 상기 조성물들을 각각 함유하는 지질대사 개선 및 혈압강하용 약학 및 식품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a pharmaceutical and food composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure, each containing an effective amount of the composition as an active ingredient.

본 발명에서 대추로부터 활성 성분을 추출하는 방법은 다음과 같다. 즉, 대추를 물로 깨끗이 씻은 후, 대추 1 kg 당 2 내지 5ℓ의 70 내지 95%의 에탄올 또는 물을 가하고, 에탄올의 경우에는 50℃~60℃에서 1 내지 24 시간, 물의 경우에는 70 내지 121℃에서 30분 내지 12 시간 가열하여 활성물질을 추출할 수 있다. 일반적으로, 물 또는 에탄올을 이용하여 대추를 추출할 경우, 반응 시간, 반응 온도, 알콜 농도, 대추의 성숙도 등에 따라 추출물의 조성이 변할 수 있다. 특히, 본 발명에서 사용되는 대추는 상기 약학 및 식품 조성물의 냄새 및 맛을 더욱 좋게 하는 역할을 한다.Method for extracting the active ingredient from the jujube in the present invention is as follows. That is, after washing the jujube with water, add 2 to 5 L of 70 to 95% ethanol or water per 1 kg of jujube, and for ethanol for 1 to 24 hours at 50 ℃ to 60 ℃, 70 to 121 ℃ for water The active substance can be extracted by heating for 30 minutes to 12 hours. In general, when extracting the jujube using water or ethanol, the composition of the extract may vary depending on the reaction time, reaction temperature, alcohol concentration, jujube maturity. In particular, the jujube used in the present invention serves to improve the smell and taste of the pharmaceutical and food composition.

본 발명에서 감귤류란 하귤, 당유자, 오렌지, 레몬, 감귤, 자몽 또는 유자 등을 말한다. 본 발명에 사용한 감귤류 과피를 얻기 위해서는 우선, 농약 처리를 하지 않고 감귤류를 생산하거나 인체에 무해한 저공해 농약, 또는 생물학적 방제제를 이용하여 감귤류를 생산해야 한다.Citrus fruits in the present invention refers to a mandarin orange, sugar citron, orange, lemon, citrus, grapefruit or citron. In order to obtain citrus peels used in the present invention, citrus fruits must first be produced without pesticide treatment or by using low pollution pesticides or biological control agents that are harmless to humans.

본 발명에서는 감귤규 과피 추출물을 제조하기 위하여 다음과 같은 방법들을 사용한다. 즉, 감귤류의 과피를 건조한 후, 건조 과피 1 kg당 20 내지 95% 에탄올 3 내지 30ℓ를 가하고, 25 내지 80℃에서 1 내지 12 시간 동안 추출한 후, 이 추출물을 여과한 다음, 여액을 진공농축함으로써 추출물을 얻을 수 있다.In the present invention, the following methods are used to prepare the citrus peel extract. That is, after drying the citrus peel, 3 to 30 l of 20 to 95% ethanol per kg of dried peel is added, extracted at 25 to 80 ° C. for 1 to 12 hours, the extract is filtered, and the filtrate is concentrated in vacuo. Extracts can be obtained.

다른 한편으로는, 감귤류의 과피를 건조한 후, 건조 과피 1 kg당 0.1 내지 2% Ca(OH)2또는 NaOH 5 내지 30ℓ를 가하고, 25 내지 60℃에서 1 내지 5 시간 동안 추출한 후, 이 추출물을 여과한 다음, 여액에 1N HCL 용액을 가하여 혼합액의 PH를 4.0 내지 7.0으로 조절하고, 냉장실에서 10 내지 48 시간 방치하여 생성된 침전물을 회수한 후 건조하는 방법에 의해 추출물을 제조할 수도 있다.On the other hand, after drying the citrus peel, 0.1 to 2% Ca (OH) 2 or 5 to 30 L of NaOH per 1 kg of dried peel is added and extracted at 25 to 60 ° C. for 1 to 5 hours, and then the extract is extracted. After the filtration, 1N HCL solution was added to the filtrate to adjust the pH of the mixed solution to 4.0 to 7.0, and the resultant precipitate was recovered by leaving it in the refrigerating chamber for 10 to 48 hours to recover the precipitate, followed by drying.

상기와 같이 얻은 대추 추출물; 및 감귤류 과피 추출물, 또는 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진 또는 나린제닌의 혼합물은 쥐의 혈중 콜레스테롤 및 혈압을 강하시킨다. 현재까지 연구된 독성시험 결과, 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물은 각각 1,000 mg/kg의 용량으로 쥐에게 경구투여하였을 때 독성이 거의 없는 것으로 밝혀졌다. 또한, 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물은 간을 비롯한 장기의 기능에 어떠한 부작용도 나타내지 않는다.Jujube extract obtained as above; And citrus peel extracts, or mixtures of hesperidin, hesperetin, naringin or naringenin, lower blood cholesterol and blood pressure in rats. Toxicity studies studied so far showed that jujube extract and citrus rind extract had little toxicity when administered orally to rats at a dose of 1,000 mg / kg, respectively. In addition, jujube extract and citrus rind extract do not show any side effects on the function of organs, including liver.

본 발명의 방법에 따라 대추 및 감귤류 과피로부터 얻어진 추출물의 혼합물은 흰쥐에게 0.05 내지 5g/kg의 양으로 투여할 때 지질 대사 개선 효과 및 혈압강하 작용을 나타낸다.The mixture of extracts obtained from jujube and citrus peels according to the method of the present invention shows an effect of improving lipid metabolism and lowering blood pressure when administered to rats in an amount of 0.05 to 5 g / kg.

또한 본 발명의 방법에 따라 대추 및 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진, 나린제닌 또는 이들의 혼합물의 혼합물은 흰쥐에게 0.01 내지 1g/kg의 양으로 투여할 때 지질 대사 개선 효과 및 혈압강하 작용을 나타낸다.In addition, according to the method of the present invention, jujube and hesperidin, hesperetin, naringin, naringenin or a mixture of mixtures thereof show a lipid metabolism improving effect and a blood pressure lowering effect when administered to rats in an amount of 0.01 to 1 g / kg.

지질 대사 개선 및 혈압을 강하시키기 위하여, 본 발명의 조성물을 유효성분으로서 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 지질대사 개선 및 혈압 강하용 약학 조성물을 제조할 수 있다. 감귤류 과피로부터 분리된 플라보노이드인 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진 또는 나린제닌을 감귤류 과피 추출물 대신에 사용할 경우에는 대추 추출물과 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진, 나린제닌 또는 이들의 혼합물을 혼합하여 사용할 수 있다. 이 약학 조성물은 통상적으로 사용되는 부형제, 붕해제, 감미제, 활택제, 향미제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 통상적인 방법에 의해 정제, 캅셀제, 산제, 과립, 현탁제, 유화제, 시럽제, 액제 또는 비경구 투여용 제제와 같은 단위 투여형 또는 수회 투여형 약제학적 제제로 제형화될 수 있다.In order to improve lipid metabolism and lower blood pressure, the composition of the present invention may be mixed with a pharmaceutically acceptable carrier as an active ingredient to prepare a pharmaceutical composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure. When hesperidin, hesperetine, naringin or naringenin, which are flavonoids isolated from citrus peels, is used in place of citrus peel extracts, jujube extracts and hesperidin, hesperetin, naringin, naringenin or mixtures thereof may be used. The pharmaceutical composition may further include conventionally used excipients, disintegrants, sweeteners, lubricants, flavoring agents, etc., tablets, capsules, powders, granules, suspensions, emulsifiers, syrups, liquids by conventional methods Or in dosage unit forms or as multi-dose pharmaceutical preparations, such as preparations for parenteral administration.

본 발명의 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물, 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진 또는 나린제닌을 유효성분으로 함유하는 지질대사 개선 및 혈압 강하용 조성물은 목적하는 바에 따라 비경구 투여하거나 경구 투여할 수 있으며, 하루에 체중 1 kg당 대추 추출물 0.1g 내지 5g, 바람직하게는 0.5 내지 1g 및 감귤류 과피 추출물 0.1g 내지 10g, 바람직하게는 0.5 내지 2g 또는 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진 나린제닌 또는 이들의 혼합물은 1 mg 내지 2000 mg, 바람직하게는 2 mg 내지 20 mg의 양으로 투여되도록 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 특정 환자에 대한 투여용량 수준은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여 방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.Jujube extract and citrus peel extract, hesperidin, hesperetine, naringin or naringenin of the present invention, the composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure can be administered parenterally or orally, as desired. 0.1 g to 5 g, preferably 0.5 to 1 g and citrus peel extract 0.1 g to 10 g, preferably 0.5 to 2 g or hesperidin, hesperetin, naringin naringenin or mixtures thereof It may be administered in one to several times to be administered in an amount of from 2000 mg, preferably 2 mg to 20 mg. Dosage levels for a particular patient may vary depending on the patient's weight, age, sex, health condition, diet, time of administration, method of administration, rate of excretion, severity of the disease, and the like.

대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물이 혼합된 본 발명의 조성물은 또한 지질 대사 개선 및 혈압을 강하시키기 위한 목적으로 식품에 1 내지 100 중량%로 첨가될 수 있다.The composition of the present invention mixed with the jujube extract and the citrus peel extract may also be added to the food in an amount of 1 to 100% by weight for the purpose of improving lipid metabolism and lowering blood pressure.

또한, 대추 추출물 및 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진, 나린제닌 또는 이들의 혼합물이 혼합된 본 발명의 조성물은 지질 대사 개선 및 혈압을 강하시키기 위한 목적으로 식품에 1 내지 100 중량%로 첨가될 수 있다. 건강보조식품용 개발을 위하여 본 발명의 상기 혼합물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 육류, 음료수, 초코렛, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 알콜음료류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.In addition, the composition of the present invention mixed with jujube extract and hesperidin, hesperetin, naringin, naringenin or a mixture thereof may be added to the food in an amount of 1 to 100% by weight for the purpose of improving lipid metabolism and lowering blood pressure. . Foods to which the mixture of the present invention may be added for the development of dietary supplements include, for example, various foods, meats, beverages, chocolates, snacks, confectionery, pizzas, ramen noodles, other noodles, gums, ice creams, Alcoholic beverages, vitamin complexes, and health supplements.

이하 본 발명을 다음과 같은 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 다음의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이것들 만으로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the following Examples are only for illustrating the present invention, but the scope of the present invention is not limited to these.

[실시예 1 : 대추 추출물의 제조]Example 1 Preparation of Jujube Extract

(1) 에탄올 추출(1) ethanol extraction

대추 5 kg에 15ℓ의 95% 에탄올을 가하고 50~60℃의 수욕에서 3시간씩 2회 추출하였다. 추출된 에탄올 용액을 여과하고 여액을 감압 농축하여 에탄올 추출물 2kg을 얻었다.15 L of 95% ethanol was added to 5 kg of jujube and extracted twice in a water bath at 50-60 ° C for 3 hours. The extracted ethanol solution was filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain 2 kg of ethanol extract.

(2) 물 추출(2) water extraction

대추 5kg에 15ℓ의 물을 가하고 100℃에서 2시간 동안 끓인 후 여과하여 고형분을 제거하고, 여액을 감압농축하여 3kg의 대추 추출물을 얻었다.15 liters of water was added to 5 kg of jujube, and the mixture was boiled at 100 ° C. for 2 hours, filtered to remove solids, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain 3 kg of jujube extract.

[실시예 2 : 대추추출물의 투여가 쥐의 혈장 콜레스테롤 농도에 미치는 영향 및 혈중 총콜레스테롤의 변화]Example 2 Effect of Administration of Jujube Extract on Plasma Cholesterol Concentration in Rats and Changes in Total Cholesterol in Blood

(단계 1) 대추 추출물의 투여가 쥐의 혈장 콜레스테롤 농도에 미치는 영향(Step 1) Effect of Jujube Extract on Plasma Cholesterol in Rats

3주령의 스프라그 다울리(Sprague-Dawley) 흰쥐 30마리를 충북 음성군의 대한실험 동물센터로부터 구입하여 1주간 제일제당 실험동물 사료로 사육하고, 4주령(체중: 90~110g)이 되었을 때, 난괴법(randomized block design)에 의해 3 개의 그룹으로 나누었다. 세 그룹의 쥐들에게 각각 세가지의 서로 다른 고콜레스테롤식이, 즉, 정상식이(AIN-76 실험동물 식이)에 1% 콜레스테롤(대조군); 1% 콜레스테롤 및 1.2% 대추 에탄올 추출물(대추 에탄올 추출물 군); 그리고 1% 콜레스테롤 및 1.5% 대추 물 추출물(대추 물 추출물 군)이 각각 함유된 식이를 섭취시켰다. 세 그룹에게 섭취시킨 식이의 조성은 하기 표 1에 나타나 있다.30 Sprague-Dawley rats of 3 weeks of age were purchased from the Korean Experimental Animal Center in Eumseong, Chungbuk, Korea, and were bred for 1 week in experimental animal feed, and at 4 weeks of age (90-110 g), Divided into three groups by randomized block design. Three groups of rats each had three different high cholesterol diets, namely 1% cholesterol (control) in normal diet (AIN-76 experimental animal diet); 1% cholesterol and 1.2% jujube ethanol extract (jujube ethanol extract group); And the diet containing 1% cholesterol and 1.5% jujube water extract (jujube water extract group), respectively. The composition of the diets ingested in the three groups is shown in Table 1 below.

[표 1]TABLE 1

모든 식이들은 고콜레스테롤식이(1%, wt/wt)에 해당하고, 실험군 식이는 1.2 또는 1.5% 대추 추출물이 포함되었다. 흰쥐의 실험실 식이인 AIN-76 식이 조성 중 셀룰로즈, 미네랄 혼합물 및 비타민 혼합물 성분은 미국의 테크라드 프리미어사 (TEKLAD premier, Madison, Wisconsin)로부터 구입하였다.All diets corresponded to the high cholesterol diet (1%, wt / wt) and the experimental diet contained 1.2 or 1.5% jujube extracts. Cellulose, mineral mixtures and vitamin mixture components in the AIN-76 dietary composition of rats were purchased from TEKLAD premier, Madison, Wisconsin.

모든 식이군의 쥐들에게 6주동안 해당 식이를 물과 함께 자유로이 섭취하도록 하였으며, 식이섭취량을 매일 기록하고 7일마다 체중을 측정하였다. 동물사육이 종료된 후 사육일지의 자료 분석한 결과, 식이 섭취량과 체중증가에 있어서는 3개군간 유의적인 차이가 없었으며 정상적인 성장을 보였다.All dietary rats were given free diet with water for 6 weeks. The dietary intake was recorded daily and weighed every 7 days. After the animal breeding was completed, the data on the breeding journal showed that there was no significant difference between the three groups in terms of dietary intake and weight gain and showed normal growth.

(단계 2) 실험동물의 혈중 총콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 중성 지질 함량 측정(Step 2) Determination of total cholesterol, HDL-cholesterol and neutral lipid content in blood of experimental animals

대추 추출물의 투여가 흰쥐의 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 함량에 미치는 영향을 다음과 같이 조사하였다.The effect of jujube extract on the blood cholesterol and triglyceride content in rats was investigated as follows.

세 식이군의 쥐들로부터 혈액 시료를 채취하고, 이로부터 덱스트란-설페이트를 포함한 HDL-콜레스테롤 시약(Sigma Chemical Co. Cat. No. 352-3)을 이용하여 혈장 HDL 분획을 분리하였다. 총 콜레스테롤과 HDL-콜레스테롤 농도는 시그마사의 총 콜레스테롤 키트(Cat. No. 352-100)를 사용한 효소발색법(Allain et al.,Clin. Chem., 20,470-475(1974))에 의해 측정하였다. 중성 지질 농도는 시그마 진단 키트(Cat. No. 339-50)를 사용하여 측정하였다(Bucolo,g. and David, H., Clin. Chem., 19, 476-482(1973)). 그 결과는 하기 표 2에 나타나 있는데, 혈장 총 콜레스테롤 농도는 1.2% 대추 에탄올 추출물 투여군에서 대조군에 비해 28% 감소하였고, 1.5% 대추 물 추출물 투여군에서는 대조군에 비해 30% 감소하였다.Blood samples were taken from three dietary rats, and plasma HDL fractions were isolated from the HDL-cholesterol reagent (Sigma Chemical Co. Cat. No. 352-3) including dextran-sulfate. Total cholesterol and HDL-cholesterol concentrations were measured by enzymatic coloration using Sigma's Total Cholesterol Kit (Cat. No. 352-100) (Allain et al., Clin. Chem., 20, 470-475 (1974)). It was. Neutral lipid concentrations were measured using a Sigma diagnostic kit (Cat. No. 339-50) (Bucolo, g. And David, H., Clin. Chem., 19, 476-482 (1973)). The results are shown in Table 2 below, plasma total cholesterol concentration was reduced by 28% compared to the control group in the 1.2% jujube ethanol extract administration group, 30% compared to the control group in the 1.5% jujube water extract administration group.

[표 2]TABLE 2

[실시예 3 : 대추 추출물의 혈압조절 효과 확인][Example 3: Check the blood pressure control effect of jujube extract]

(단계 1) 대추로부터 혈압조절물질 추출(Step 1) Extraction of Blood Pressure Regulator from Jujube

대추 4kg을 4ℓ의 물에 넣어 불린 후, 6ℓ의 아세톤을 넣어 18시간 교반하였다. 여과지로 여과하여 고형분을 제거하고 액상을 감압농축한 다음 여기에 4ℓ의 헥산을 넣어서 물층과 헥산층을 분리하였다. 같은 방법으로 두 번 더 헥산층을 분리하여 헥산층에 포함된 지방산 계열물질을 제거하였다. 수거된 물층에 동량의 에틸 아세테이트를 첨가하여 물층과 에틸 아세테이트층으로 분리하고, 에틸 아세테이트층을 모은 후 감압하에 농축 건조하여 황갈색물질 7.3g을 얻었다. 이렇게 얻은 대치 추출물을 혈압조절 험에 사용하였다.4 kg of jujube was poured into 4 L of water, and 6 L of acetone was added thereto and stirred for 18 hours. After filtering by filter paper to remove solids, and concentrated the liquid phase under reduced pressure, 4 L of hexane was added thereto to separate the water layer and the hexane layer. In the same manner, the hexane layer was separated two more times to remove the fatty acid-based material contained in the hexane layer. Equal amount of ethyl acetate was added to the collected water layer, and the mixture was separated into a water layer and an ethyl acetate layer. The ethyl acetate layer was collected and concentrated to dryness under reduced pressure to obtain 7.3 g of a yellowish brown material. The replacement extract thus obtained was used for the blood pressure control test.

(단계 2) 대추 추출물의 혈압조절 효과 확인(Step 2) Check the blood pressure control effect of jujube extract

선천성고혈압쥐(SHR)를 일본 찰스리버(Charles River)사로부터 구입하였고, 웅성 스프라그 다울리(Sprague-Dawley) 흰쥐는 한국화학연구소 안전성센타에서 특정병원체부재(SPF) 상태로 사육한 4주령을 분양받아 일정한 온도(22℃)와 습도(55±5%)를 유지한 일반 사육실(12시간 명, 12시간 암 주기)에서 사료와 물을 자유롭게 섭취토록하여 사육한 후 각각 12주령 및 체중 350-450g 되었을 때 실험에 사용하였다.Congenital hypertensive rats (SHR) were purchased from Charles River, Japan. Male Sprague-Dawley rats were 4 weeks old at the Korea Institute of Chemistry and were raised in the absence of specific pathogens (SPF). 12 weeks of age and 350-weight weight, respectively, were fed to feed and water freely in a normal breeding room (12 hours, 12 hours cancer cycle) maintained at a constant temperature (22 ℃) and humidity (55 ± 5%). When 450g was used for the experiment.

스프라그 다울리 흰쥐의 우측 대퇴부 피하에 100mg 데옥시코르티코스테론 아세테이트 펠렛(deoxycorticosterone acetate pellet, Innovative Research of America, USA)을 이식시킨 후 오토클립(autoclip)으로 봉합하였다. 흰쥐에게 4주간 1% NaCl을 경구투여하여 DOCA/식염 고혈압쥐를 확립 한 후, 평균동맥압이 170mmHg이상으로 상승된 흰쥐를 혈압강하 작용 평가에 사용하였다.100 mg of deoxycorticosterone acetate pellet (Innovative Research of America, USA) was implanted into the right femoral subcutaneous of Sprague Dawley rats and sutured with autoclip. After oral administration of 1% NaCl to rats for 4 weeks to establish DOCA / saline hypertensive rats, rats whose mean arterial pressure was elevated to 170 mmHg or higher were used for the evaluation of hypotension.

스프라그 다울리 흰쥐(350-450g)를 에테르로 마취시키고 좌복부를 세로로 1cm가량 절개한 다음 복부 대동맥 가까이의 신동맥을 조심스럽게 분리하여 봉합사 (4/0 sterile surgical silk, Ethicon)로 신동맥을 완전히 결찰하고 바늘이 달린 봉합사로 근육층 및 피부를 봉합하였다. 결찰 6-8일 후 수축기 혈압이 180mmHg 이상인 동물을 신성 고혈압쥐(renal hypertensive rat. RHR) 모델로 실험에 사용하였다.Sprague-Dawley rats (350-450 g) were anesthetized with ether, incised about 1 cm in the left abdomen, and the renal artery near the abdominal aorta was carefully separated. The muscle layer and skin were sutured with a suture with a needle. After 6-8 days of ligation, animals with systolic blood pressure greater than 180 mmHg were used in the experiments as a model of renal hypertensive rat (RHR).

상기와 같이 준비된 DOCA/식염 고혈압쥐, SHR 및 RHR 흰쥐들에게 케타민 하이드로클로라이드(ketamine hydrochloride)를 125mg/kg의 양으로 복강내 투여하여 마취시킨 다음 폴리에틸렌 튜빙(polyethylene tubing) 50(PE50)을 PE10에 연결한 카테터(catheter)에 헤파린화된 식염수 용액을 채워서 대퇴 동맥에 캐뉼라를 삽입하였다. 카테터의 다른쪽 끝은 피하를 따라 목뒤로 뽑아낸 후 고정하였다.DOCA / saline hypertensive rats, SHR and RHR rats prepared as described above were anesthetized by intraperitoneal administration of ketamine hydrochloride in an amount of 125 mg / kg, followed by polyethylene tubing 50 (PE50) in PE10. The cannula was inserted into the femoral artery by filling the heparinized saline solution in the connected catheter. The other end of the catheter was pulled behind the neck subcutaneously and fixed.

흰쥐를 혈압측정용 우리에서 안정시킨 후 다음날 마취에서 깨어난 동물의 대퇴 동맥에 캐뉼라를 삽입하여 목 뒤에 고정한 카테터를 이소텍 압력 변환기(Isotec pressure transducer, Hugosachs,germany)에 연결하여 신호 처리기(Modular signal processing center, Modular, USA)를 이용하여 혈압 및 심박동수를 측정하였다. 약 1시간 동안 혈압이 안정된 것을 확인한 후 단계 1에서 제조된 대추 추출물을 용량별로 경구 투여한 후 일정시간 간격으로 투여후 24시간까지 혈압 및 심박동수를 측정하여 그 결과를 약물 투여 전의 혈압 및 심박동수에 대한 변화율로 나타내었다.After the rats were stabilized in the blood pressure measuring cage, a cannula was inserted into the femoral artery of the animal that awoke from the anesthesia the next day. blood pressure and heart rate were measured using a processing center (Modular, USA). After confirming that the blood pressure was stabilized for about 1 hour, orally administer the jujube extract prepared in step 1 by dose, and then measure blood pressure and heart rate until 24 hours after administration at regular intervals. It is expressed as the rate of change for.

그 결과는 표 3, 4 및 5에 나타낸 바와 같고, 대추 추출물은 0.3-1.0g/kg의 양으로 흰쥐에게 투여시 24시간 동안 지속적인 혈압강하작용을 보였다.The results are shown in Tables 3, 4 and 5, jujube extract showed a sustained blood pressure lowering effect for 24 hours when administered to rats in an amount of 0.3-1.0g / kg.

[표 3]TABLE 3

DOCA 흰쥐에서 혈압 및 심박동수에 대한 대추 추출물의 영향Effect of Jujube Extract on Blood Pressure and Heart Rate in DOCA Rats

[표 4]TABLE 4

SHR에서 혈압 및 심박동수에 대한 대추 추출물의 영향Effect of Jujube Extract on Blood Pressure and Heart Rate in SHR

[표 5]TABLE 5

RHR에서 혈압 및 심박동수에 대한 추출물의 영향Effect of Extracts on Blood Pressure and Heart Rate in RHR

[실시예 4 : 감귤류 과피 추출물로부터 바이오플라보노이드의 추출 및 정량,Example 4 Extraction and Quantification of Bioflavonoids from Citrus Peel Extracts,

및 감귤류 과피 추출물 제조]And Citrus Peel Extract Preparation]

(단계 1) 바이오플라보노이드의 추출 및 정량(Step 1) Extraction and Quantification of Bioflavonoids

한국 제주도에서 생산된 하귤, 당유자, 감귤(tangerine), 전남에서 생산된 유자 및 수입품인 오렌지, 자몽 및 레몬의 껍질을 실온에서 건조한 후 입경 100㎛-200㎛의 크기로 분말화하였다. 이 분말을 500mg씩 정밀하게 달아 메탄올 50㎖씩을 가하여 50℃에서 6시간 동안 수욕 추출한 다음 냉각 후 여과하고 다시 메탄올을 가하여 50㎖로 만든 용액을 검액으로 하였다. 필요한 경우에는 검량선의 작성에 사용한 범위내의 농도가 되도록 희석하여 사용하였다.The peels of oranges, grapefruits and lemons, which were produced in Jeju, South Korea, were imported from citrus fruits, tangerines, citrons and imported citrus fruits from Jeonnam, and then powdered to a particle size of 100 μm-200 μm. 50 mg of this powder was precisely weighed, and 50 ml of methanol was added thereto, followed by extraction with a water bath at 50 ° C. for 6 hours, followed by cooling, filtration, and methanol to add 50 ml of the solution as a sample solution. If necessary, the mixture was diluted to have a concentration within the range used for preparing the calibration curve.

상기와 같이 얻어진 과피 추출물의 성분을 조사하기 위하여 다음과 같은 조건으로 HPLC 분석을 실시하였다. 상기 검액 5.0 μ1를 37% 메탄올로 미리 평형화된 리크로소브(Lichrosorb) RP-8 컬럼(5 ㎛, 4 ×250 mm)이 장착된 HPLC에 주입하였다. 이 때 칼럼의 온도는 30℃로 조절하고, 37% 메탄올을 이동상으로 사용하여 1.0 ml/분의 유속으로 용출시켰다. 따로, 헤스페리딘과 나린진(Sigma Co.)표준품을 메탄올에 용해시켜 최종 농도가 각각 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 및 0.5 mg/ml 가 되도록 표준용액을 조제하여 동일한 조건에서 HPLC를 실시하였다. 용출물을 UV-VIS 분광광도계(spectrophotometer)를 사용하여 280 nm에서 검출하고, 검량선과 과피추출물의 HPLC 프로필(profile)의 면적을 비교 분석하여 함량을 계산한 결과, 과피추출 농축액중 헤스페리딘 및 나린진의 함량은 다음과 같았다.In order to investigate the components of the skin extract obtained as described above, HPLC analysis was performed under the following conditions. 5.0 μl of the sample solution was injected into an HPLC equipped with a Lichrosorb RP-8 column (5 μm, 4 × 250 mm) previously equilibrated with 37% methanol. The temperature of the column was adjusted to 30 ° C. and eluted at a flow rate of 1.0 ml / min using 37% methanol as the mobile phase. Separately, hesperidin and nargine (Sigma Co.) standards were dissolved in methanol, and standard solutions were prepared so that the final concentrations were 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 and 0.5 mg / ml, respectively, and HPLC was performed under the same conditions. The eluate was detected at 280 nm using a UV-VIS spectrophotometer, and the content was calculated by comparing the area of the HPLC profile of the extract with the calibration curve and the content of hesperidin and naringin in the extract extracted from the extract. The content was as follows.

[표 6]TABLE 6

각종 감귤류 과피중 헤스페리딘 및 나린진의 함량(%)Content of Hesperidin and Naringin in Various Citrus Peels

(단계 2) 감귤 과피 추출물의 제조(Step 2) Preparation of Citrus Peel Extract

(1) 에탄올을 이용한 방법(1) Method using ethanol

제주도산 감귤 껍질을 건조한 후 건조 감귤류 과피 500g에 30% 에탄올 용액 5ℓ를 가하고 60℃에서 5시간 동안 추출하였다. 이 추출물을 면직물(cotton cloth)을 이용하여 여과한 다음 여액을 진공농축하여 190g의 시럽상의 추출물을 얻었다. 상기 단계 1에서와 같은 방법으로 추출물중 헤스페리딘의 함량을 측정한 결과, 이 추출물 190g 속에는 헤스페리딘 5.1g이 들어 있었다. HPLC를 이용하여 추출물의 성분을 분석한 결과, 수분 65%, 당분 28%(과당 11%, 포도당 11%, 슈크로즈 6%), 헤스페리딘 2.7% 및 기타 회분 등의 미량성분으로 구성되어 있었다.After drying the citrus peel from Jeju Island, 5 l of 30% ethanol solution was added to 500 g of dried citrus peel and extracted at 60 ° C. for 5 hours. The extract was filtered using cotton cloth, and the filtrate was concentrated in vacuo to obtain 190 g of syrupy extract. As a result of measuring the content of hesperidin in the extract in the same manner as in step 1, hesperidin 5.1g was contained in 190g of the extract. As a result of analyzing the components of the extract using HPLC, it consisted of trace components such as water 65%, sugar 28% (11% fructose, glucose 11%, sucrose 6%), hesperidin 2.7% and other ash.

(2) Ca(OH)2를 이용한 방법(2) Method using Ca (OH) 2

제주도산 감귤 껍질을 건조한 후, 건조된 감귤류 과피 500g에 0.5% Ca(OH)2용액 5ℓ를 가하고 상온에서 저어주면서 1시간 동안 추출하였다. 이 추출물을 면직물로 여과한 후 여액에 1NHCL 용액을 가하여 혼합액의 pH가 4.0~4.5, 또는 6.80~7.0이 되게 한 후 5℃ 냉장실에서 24시간 방치하였다. 이때 생성된 침전물을 회수한 후 건조하여 각각 5g 및 10g의 건조된 분말을 얻었다. 침전된 분말을 단계 1에서와 같이 HPLC로 정량분석한 결과 헤스페리딘이 각각 3.2g 및 6.55g 포함되어 있어, 헤스페리딘의 순도는 각각 64% 및 65%였다.After the Jeju citrus peel was dried, 5 liters of 0.5% Ca (OH) 2 solution was added to 500 g of dried citrus peel and stirred for 1 hour while stirring at room temperature. The extract was filtered with cotton fabric and 1NHCL solution was added to the filtrate so that the pH of the mixed solution was 4.0-4.5, or 6.80-7.0, and left in a 5 ° C. cold room for 24 hours. At this time, the produced precipitate was recovered and dried to obtain dried powder of 5g and 10g, respectively. The precipitated powder was quantitatively analyzed by HPLC as in Step 1, containing 3.2 g and 6.55 g of hesperidin, respectively, and the purity of hesperidin was 64% and 65%, respectively.

(3) NaOH를 이용한 방법(3) Method using NaOH

제주도산 감귤 껍질을 건조한 후, 건조된 감귤류 과피 500g에 0.5% NaOH 5ℓ를 가하고 상온에서 저으면서 1시간 동안 추출한 다음 면직물로 여과하였다. 여액에 1 N HCL 용액을 첨가하여 혼합액의 pH가 4.0~4.5 또는 6.8~7.0이 되게 한 후 5℃ 냉장실에서 24시간 방치하였다. 이때 생성된 침전물을 회수한 후 건조하여 각각 44g 및 49g의 건조분말을 얻었다. 건조 분말로부터 HPLC에 의해 각각 13.6g, 9.8g의 헤스페리딘을 회수하였다(순도: 각각 31%, 20%)After drying the citrus peel from Jejudo, 5 l of 0.5% NaOH was added to 500 g of the dried citrus peel, and the mixture was extracted for 1 hour while stirring at room temperature, and then filtered through a cotton fabric. 1 N HCL solution was added to the filtrate so that the pH of the mixed solution was 4.0 to 4.5 or 6.8 to 7.0, and then left in a 5 ° C. refrigerator for 24 hours. At this time, the produced precipitate was recovered and dried to obtain 44 g and 49 g of dry powder, respectively. 13.6 g and 9.8 g of hesperidin, respectively, were recovered from the dry powder by HPLC (purity: 31% and 20%, respectively).

[실시예 5 : 실험동물의 식이 조성과 알콜에 의한 감귤 과피 추출물의 동물 투여 실험]Example 5 Animal Administration of Citrus Peel Extract by Dietary Composition and Alcohol of Experimental Animals

2 주령의 스프라그 다울리(Sprague-Dawley) 흰쥐 20마리를 충북 음성군의 대한실험 동물센터로부터 구입하여 1주간 제일제당 실험동물 사료로 사육하고, 4주령(체중: 90~110g)이 되었을 때, 난괴법(randomized block design)에 의해 두 개의 그룹으로 나누었다. 두 그룹의 쥐들에게 각각 세가지의 서로 다른 고콜레스테롤식이, 즉, 정상식이(AIN-76 실험동물 식이)에 1% 콜레스테롤(대조군); 1% 콜레스테롤과 0.1% 헤스페리딘에 상응하는 실시예 4의 단계 2(1)에서 제조된 감귤 과피 추출물이 각각 함유된 식이를 섭취시켰다. 두 그룹에게 섭취시킨 식이의 조성은 하기 표 7에 나타나 있다.Two 20-week-old Sprague-Dawley rats were purchased from the Korean Experimental Animal Center in Eumseong-gun, Chungbuk, and were bred for one week in experimental animal feed, and at 4 weeks of age (90-110 g), Divided into two groups by randomized block design. Two groups of rats each had three different high cholesterol diets, namely 1% cholesterol (control) in normal diet (AIN-76 experimental animal diet); A diet containing the tangerine rind extract prepared in step 2 (1) of Example 4 corresponding to 1% cholesterol and 0.1% hesperidine was taken. The composition of the diets ingested in both groups is shown in Table 7 below.

[표 7]TABLE 7

실험식이의 조성(%)Composition of Experimental Diet (%)

* 0.1% 헤스페리딘 상당량* 0.1% hesperidin equivalent

모든 식이들은 고콜레스테롤식이(1%, wt/wt)에 해당하고, 헤스페리딘 및 나린진은 미국의 시그마사(Sigma Chemical company, St. Louis, Mo)로부터 구입하였으며, 실험용 흰쥐의 실험실 식이인 AIN-76 식이 조성 중 셀룰로즈, 미네랄 혼합물 및 비타민 혼합물 성분은 미국의 테크라드 프리미어사(TEKLAD premier, Madison, Wisconsin)로부터 구입하였다.All diets correspond to a high cholesterol diet (1%, wt / wt). Hesperidin and naringin were purchased from Sigma Chemical company, St. Louis, Mo. AIN-76, a laboratory diet of experimental rats. Cellulose, mineral mixtures and vitamin mixture components in the dietary composition were purchased from TEKLAD premier, Madison, Wisconsin, USA.

모든 식이군의 쥐들에게 6주동안 해당 식이를 물과 함께 자유로이 섭취하도록 하였으며, 식이섭취량을 매일 기록하고 7일마다 체중을 측정하였다. 동물사육이 종료된 후 사육일지의 자료를 분석한 결과, 식이 섭취량과 체중증가에 있어서는 두개군간 유의적인 차이가 없었으며 정상적인 성장을 보였다.All dietary rats were given free diet with water for 6 weeks. The dietary intake was recorded daily and weighed every 7 days. After the animal breeding was finished, the data on the breeding journal showed that there was no significant difference between the two groups in terms of dietary intake and weight gain.

[실시예 6 : 실험동물의 혈중 총콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 중성 지질 함량측정]Example 6 Determination of Total Cholesterol, HDL-Cholesterol, and Neutral Lipid Content in Experimental Animals

감귤류 과피 추출물의 투여가 흰쥐의 혈중 콜레스테롤 및 중성지질 함량에 미치는 영향을 다음과 같이 조사하였다.The effects of citrus peel extract on blood cholesterol and triglyceride content in rats were investigated as follows.

두 식이군의 쥐들로부터 혈액 시료를 채취하고, 이로부터 덱스트란-설페이트를 포함한 HDL-콜레스테롤 시약(Sigma Chemical Co. Cat. No. 352-3)을 이용하여 혈장 HDL 분획을 분리하였다. 총 콜레스테롤과 HDL-콜레스테롤 농도는 시그마사의 총 콜레스테롤 키트(Cat. No. 352-100)를 사용한 효소발색법(Allain et al.,Clin. Chem., 20,470-475(1974))에 의해 측정하였다. 중성 지질 농도는 시그마 진단 키트(Cat. No. 339-50)를 사용하여 측정하였다(Bucolo,g. and David, H.,Clin. Chem., 19,476-482(1973)). 그 결과는 하기 표 8에 나타나 있는데, 혈장 총 콜레스테롤 농도는 감귤 과피 추출물 투여군에서 대조군에 비해 35% 감소하였다.Blood samples were taken from the rats of both diets, from which plasma HDL fractions were separated using HDL-cholesterol reagent (Sigma Chemical Co. Cat. No. 352-3) including dextran-sulfate. Total cholesterol and HDL-cholesterol concentrations were measured by enzymatic coloration using Sigma's Total Cholesterol Kit (Cat. No. 352-100) (Allain et al., Clin. Chem., 20, 470-475 (1974)). It was. Neutral lipid concentrations were measured using a Sigma diagnostic kit (Cat. No. 339-50) (Bucolo, g. And David, H., Clin. Chem., 19, 476-482 (1973)). The results are shown in Table 8 below, plasma total cholesterol concentration was reduced by 35% compared to the control group in the citrus peel extract administration group.

[표 8]TABLE 8

감귤 과피 추출물의 투여가 실험동물의 혈중 지질농도에 미치는 영향Effects of Citrus Peel Extracts on Blood Lipid Levels in Experimental Animals

[실시예 7 : 대추 및 감귤 과피 추출물의 경구독성실험]Example 7 Oral Toxicity Test of Jujube and Citrus Peel Extracts

7~8 주령의 특정 병원체 부재(specific pathogens free) ICR 우스로서 체중 25-29g의 암컷 12 마리와 체중 34-38g의 숫컷 12 마리를 온도 22 ±1℃, 습도 55 ±5%, 조명 12L/12D의 동물실내에서 사육하였다. 마우스는 실험에 사용되기 전 1주일 정도 순화시켰다. 실험동물용 사료((주)제일제당, 마우스 및 랫드용) 및 음수는 멸균한 후 공급하였으며 자유섭취시켰다.Specific pathogens free at 7-8 weeks of age, 12 females weighing 25-29 g and 12 males weighing 34-38 g were subjected to temperature 22 ± 1 ° C, humidity 55 ± 5%, and illumination 12L / 12D. Was bred in the animal room. Mice were allowed to acclimate for about a week before being used in the experiment. Feed for experimental animals (Jeil Jedang Co., Ltd., mice and rats) and drinking water were supplied after sterilization and free ingestion.

실시예 1의 (1)에서 얻는 대추 추출물과 실시예 4의 단계 2(1)에서 얻은 감귤 파괴 추출물을 0.5% 트윈 80을 용매로 하여 각각 100 mg/ml 농도로 조제한 후, 마우스 체중 20g 당 각 0.2 ml씩 경구투여하였다. 시료는 1회 경구 투여하였으며 투여 후 10일 동안 다음과 같이 부작용 또는 치사 여부를 관찰하였다. 즉, 투여당일은 투여 후 1시간, 4시간, 8시간, 12시간 뒤에 그리고 투여 익일부터 10일째까지는 매일 오전, 오후 1회 이상씩 일반증상의 변화 및 사망동물의 유무를 관찰하였다. 또한, 투여 10일째에 동물을 치사시켜 해부한 후 육안으로 내부 장기를 검사하였다. 투여당일부터 1일 간격으로 체중의 변화를 측정하여 대추 및 감귤 추출물에 의한 동물의 체중 감소 현상을 관찰하였다.The jujube extract obtained in Example 1 (1) and the tangerine destructive extract obtained in Step 2 (1) of Example 4 were each prepared at a concentration of 100 mg / ml using 0.5% Tween 80 as a solvent, and then, each 20 g of mouse body weight. 0.2 ml was administered orally. Samples were administered orally once and observed for side effects or lethality for 10 days after administration. That is, on the day of administration, changes in general symptoms and the presence or absence of dead animals were observed at least once in the morning, at least once every afternoon from 1 hour, 4 hours, 8 hours, 12 hours after the administration and from the next day until the 10th. In addition, the animals were killed and dissected at 10 days of administration, and the internal organs were visually examined. The change in body weight was measured every day from the day of administration to observe the weight loss phenomenon of the animal by jujube and citrus extract.

본 실험은 대추 및 감귤류 과피 추출물에 대하여 경구경로에서의 급성독성의 정도를 파악함으로써 일반약리 및 약효시험에서의 가용 약용량에 대한 정보를 제공하고 독성에 대한 기초 자료를 도출함을 목적으로 실시하여 아래와 같은 결과를 얻었다.The purpose of this study was to provide information on available doses in general pharmacology and drug efficacy tests and to derive basic data on toxicity by identifying the degree of acute toxicity in jujube and citrus peel extracts. The following results were obtained.

급성 경구독성의 경우는 감귤류 과피 추출물 1,000 mg/kg의 용량에서 10일동안 치사동물이 관찰되지 않았다. 10일 후 생존동물에 대한 부검을 실시한 바, 특별한 병변 육안 소견이 없었으며, 투여 익일부터 10일간 어떠한 체중의 감소없이 정상적인 체중의 증가가 관찰되었다.In the case of acute oral toxicity, no lethal animals were observed for 10 days at the dose of 1,000 mg / kg citrus peel extract. An autopsy of the surviving animals was performed 10 days later, and there were no gross lesions, and normal body weight gain was observed without any weight loss for 10 days from the day after the administration.

결론적으로 대추 및 감귤류 과피 추출물은 상기의 농도로 경구투여시 독성이 관찰되지 않았다.In conclusion, the jujube and citrus peel extracts were not toxic upon oral administration.

[실시예 8 : 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물을 함유하는 약학 조성물 제조]Example 8 Preparation of Pharmaceutical Composition Containing Jujube Extract and Citrus Peel Extract

상기 실시예들에서 제조된 대추 추출물 및 감귤 과피 추출물, 또는 나린진, 나린제닌, 헤스페리딘, 헤스페레틴 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 지질대사 개선 및 혈압 강하용 약학 조성물 제조하였다.Jujube extract and citrus rind extract, or naringin, naringenin, hesperidin, hesperetin, or a mixture thereof prepared in the above examples, a pharmaceutical composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure was prepared.

[실시예 9 : 대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물을 이용한 식품 조성물 제조]Example 9 Preparation of Food Composition Using Jujube Extract and Citrus Peel Extract

상기 실시예들에서 제조된 대추 추출물 및 감귤 과피 추출물, 또는 나린진, 나린제닌, 헤스페리딘, 헤스페레틴 또는 이들의 혼합물을 포함하는, 지질대사 개선 및 혈압 강하용 약학 조성물 제조하였다.Jujube extract and citrus rind extract, or naringin, naringenin, hesperidin, hesperetin, or a mixture thereof prepared in the above examples, a pharmaceutical composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure was prepared.

(1) 햄버거 제조시 사용되는 그라운드 비프(ground beef) 300g에 대추 추출물 50g 및 감귤 과피 추출물 10g을 첨가하여 제조하였다.(1) 300g of ground beef used in the production of hamburgers was prepared by adding 50g of jujube extract and 10g of citrus peel.

(2) 햄버거 제조시 사용되는 그라운드 비프 300g에 대추 추출물 50g 및 감귤 과피 추출물 5g을 첨가하여 제조하였다.(2) To 300 g of ground beef used in the production of hamburgers, 50 g of jujube extract and 5 g of citrus peel were prepared.

(3) 햄버거 제조시 사용되는 그라운드 비프 300g에 대추 추출물 50g 및 나린진 또는 나린제닌 300 mg을 첨가하여 제조하였다.(3) To 300 g of ground beef used in the manufacture of hamburgers, 50 g of jujube extract and 300 mg of naringin or naringenin were added.

(4) 햄버거 제조시 사용되는 그라운드 비프 300g,에 대추 추출물 50g 및 헤스페리딘 또는 헤스페레틴 300 mg을 첨가하여 제조하였다.(4) 300 g of ground beef used in the manufacture of hamburgers, 50 g of jujube extract and 300 mg of hesperidin or hesperetine were added.

(5) 햄버거 제조시 사용되는 그라운드 비프 300g에 대추 추출물 50g, 나린진 150 mg 및 헤스페리딘 150 mg을 첨가하여 제조하였다.(5) To 300 g of ground beef used in the manufacture of hamburgers, 50 g of jujube extract, 150 mg of naringin and 150 mg of hesperidin were added.

대추 추출물 및 나린진 및 헤스페리딘을 함유하는 감귤류 과피 추출물, 또는 을 포함하는 본 발명의 조성물은, 동물에 투여되었을 때 간 질환, 고혈압증, 동맥 경화증, 고지혈증 등의 성인병 및 암 예방 등의 효과를 나타낼 수 있다.The composition of the present invention comprising jujube extract and citrus peel extract containing naringin and hesperidin, or when administered to an animal, may exhibit effects such as liver disease, hypertension, atherosclerosis, hyperlipidemia and other diseases such as cancer and cancer. .

Claims (2)

대추 추출물 및 감귤류 과피 추출물을 1:1 내지 100:1의 중량비율로 포함하는 지질대사 개선 및 혈압강하용 식품 조성물.A food composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure, comprising a jujube extract and a citrus peel extract in a weight ratio of 1: 1 to 100: 1. 대추 추출물 및 감귤류 과피 유래 플라보노이드인 헤스페리딘, 헤스페레틴, 나린진, 나린제닌 또는 이들의 혼합물을 1:0.001 내지 1:0.1의 중량비율로 포함하는 지질대사 개선 및 혈압강하용 식품 조성물.Food composition for improving lipid metabolism and lowering blood pressure comprising jujube extract and citrus peel-derived flavonoids hesperidin, hesperetine, naringin, naringenin or a mixture thereof in a weight ratio of 1: 0.001 to 1: 0.1.
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