JPWO2020231992A5 - - Google Patents

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JPWO2020231992A5
JPWO2020231992A5 JP2021564504A JP2021564504A JPWO2020231992A5 JP WO2020231992 A5 JPWO2020231992 A5 JP WO2020231992A5 JP 2021564504 A JP2021564504 A JP 2021564504A JP 2021564504 A JP2021564504 A JP 2021564504A JP WO2020231992 A5 JPWO2020231992 A5 JP WO2020231992A5
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Description

本開示は以下の実施形態を含む。
実施形態１
試料中の薬物に対する抗薬物抗体を検出するための方法であって、
前記試料を酸性条件下で一定期間インキュベートして、酸性化試料を生成することと、
前記酸性化試料を、前記薬物の標的を含むｐＨ緩衝液と組み合わせて、標的：薬物複合体を生成し、ここで、前記薬物の前記標的は選別可能な標識で標識されていることと、
前記選別可能な標識を使用して前記試料から前記標的：薬物複合体を除去して、枯渇試料を生成することと、
前記枯渇試料を、抗標的遮断試薬またはその抗原結合断片およびビオチン化薬物とインキュベートして、アッセイ試料を生成することと、
前記アッセイ試料を、アビジンコーティングされた固体支持体上でインキュベートすることと、
任意で、前記アッセイ試料とのインキュベーション後に、前記固体支持体を洗浄することと、
前記薬物の標識された標的を前記固体支持体に添加することと、
任意で、前記固体支持体を洗浄して、未結合の標識された標的を除去することと、
前記固体支持体に結合した前記ビオチン化薬物に結合した標識された標的からの検出可能なシグナルを測定し、ここで、対照試料と比較した前記固体支持体からのシグナルの量の減少が、前記試料中の抗薬物抗体の存在を示すことと、
を含む、方法。
実施形態２
前記抗薬物抗体が、前記薬物に特異的に結合する中和抗体を含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態３
前記薬物が、抗体もしくはその抗原結合断片または融合タンパク質である、実施形態１または２に記載の方法。
実施形態４
前記抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’） ２ 断片、単一特異性Ｆ（ａｂ’） ２ 断片、二重特異性Ｆ（ａｂ’） ２ 、三重特異性Ｆ（ａｂ’） ２ 、一価抗体、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディ、二重特異性ダイアボディ、三重特異性ダイアボディ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ミニボディ、ＩｇＮＡＲ、ｖ－ＮＡＲ、ｈｃＩｇＧ、またはｖｈＨである、実施形態３に記載の方法。
実施形態５
前記酸性条件が、約２．０～約４．０のｐＨを含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態６
前記酸性条件が、１～３のｐＨを含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態７
前記選別可能な標識が、磁気標識を含む、実施形態１に記載の方法。
実施形態８
前記磁気標識が、常磁性標識または超常磁性標識である、実施形態７に記載の方法。
実施形態９
前記磁気標識が、金属粒子、金属マイクロ粒子、金属ナノ粒子、金属ビーズ、磁性ポリマー、均一ポリスチレン球状ビーズ、または超常磁性球状ポリマー粒子である、実施形態７または８に記載の方法。
実施形態１０
前記抗標的遮断試薬その抗原結合断片が、前記タンパク質薬物の前記標的に特異的に結合する、実施形態１に記載の方法。
実施形態１１
前記方法の薬物耐容性が、非枯渇試料と比較して枯渇試料中で少なくとも１０倍大きい、実施形態１に記載の方法。
実施形態１２
前記方法が、前記タンパク質薬物の投与の少なくとも２９日後に対象から採取した薬物含有試料中のＮＡｂを肯定的に同定する、実施形態１に記載の方法。
実施形態１３
前記試料が、前記インキュベーションまたは洗浄ステップ中に撹拌される、実施形態１に記載の方法。
実施形態１４
前記標識された標的が、フルオロフォア、化学発光プローブ、電気化学発光プローブ、量子ドット、希土類遷移金属、金金属粒子、銀金属粒子、またはそれらの組み合わせで標識されている、実施形態１に記載の方法。
実施形態１５
前記標識が、ルテニウムを含む、実施形態１４に記載の方法。
実施形態１６
試料中の薬物に対する抗薬物抗体を検出するための方法であって、
前記試料を酸性条件下で一定期間インキュベートして、タンパク質複合体の解離を促進し、それによって酸性化試料を生成することと、
前記酸性化試料を、前記薬物に特異的な標識された非遮断抗イディオタイプ抗体を含むｐＨ緩衝液と組み合わせて、非遮断抗イディオタイプ抗体：薬物複合体を生成し、ここで、前記標識された非遮断抗イディオタイプ抗体が選別可能な標識で標識されており、ｐＨが４．０～５．５に上昇することと、
前記選別可能な標識を使用して前記試料から前記非遮断抗イディオタイプ抗体：薬物複合体を除去して、枯渇試料を生成することと、
前記枯渇試料を、標識されたタンパク質薬物と約７．０のｐＨでインキュベートして、アッセイ試料を生成することと、
標的コーティングされた固体支持体上で前記アッセイ試料をインキュベートし、ここで、前記標識された薬物が、前記標的に特異的に結合することと、
任意で、前記アッセイ試料とのインキュベーション後に前記固体支持体を洗浄して、未結合の標識された薬物を除去することと、
前記標的コーティングされた固体支持体に結合した標識された薬物からの検出可能なシグナルを測定し、ここで、対照試料と比較したシグナルの量の減少が、前記試料中の抗薬物抗体の存在を示すことと、
を含む、方法。
実施形態１７
前記抗薬物抗体が、前記薬物に特異的に結合する中和抗体を含む、実施形態１６に記載の方法。
実施形態１８
前記薬物が、抗体もしくはその抗原結合断片または融合タンパク質である、実施形態１６または１７に記載の方法。
実施形態１９
前記抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’） ２ 断片、単一特異性Ｆ（ａｂ’） ２ 断片、二重特異性Ｆ（ａｂ’） ２ 、三重特異性Ｆ（ａｂ’） ２ 、一価抗体、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディ、二重特異性ダイアボディ、三重特異性ダイアボディ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ミニボディ、ＩｇＮＡＲ、ｖ－ＮＡＲ、ｈｃＩｇＧ、またはｖｈＨである、実施形態１８に記載の方法。
実施形態２０
前記酸性条件が、遊離標的干渉を最小限に抑えるために４．５～５．０のｐＨを含む、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２１
前記酸性条件が、２．０～４．０のｐＨを含む、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２２
前記選別可能な標識が、磁気標識を含む、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２３
前記磁気標識が、常磁性標識または超常磁性標識である、実施形態２２に記載の方法。
実施形態２４
前記磁気標識が、金属粒子、金属マイクロ粒子、金属ナノ粒子、金属ビーズ、磁性ポリマー、均一ポリスチレン球状ビーズ、または超磁性球状ポリマー粒子である、実施形態２２または２３に記載の方法。
実施形態２５
前記標識された薬物が、フルオロフォア、化学発光プローブ、電気化学発光プローブ、放射性同位体、量子ドット、希土類遷移金属、金粒子、銀粒子、またはそれらの組み合わせで標識されている、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２６
前記標識が、ルテニウムを含む、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２７
前記方法の薬物耐容性が、非枯渇試料と比較して枯渇試料中で少なくとも１０倍大きい、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２８
前記方法が、前記タンパク質薬物の投与の少なくとも２９日後に対象から採取した試料中のＮＡｂを肯定的に同定する、実施形態１６に記載の方法。
実施形態２９
前記試料が、前記インキュベーションまたは洗浄ステップ中に撹拌される、実施形態１６に記載の方法。
実施形態３０
リードタンパク質薬物を同定するための方法であって、
１つ以上の薬物候補を対象に投与することと、
前記対象から得られた試料上で、実施形態１または実施形態１６のいずれか一項に記載の方法を実施することと、
ＡＤＡをほとんどまたは全く生成しないタンパク質薬物候補を選択することと、
を含む、方法。
上記の明細書において、本発明がその特定の実施形態に関連して説明されており、多くの詳細が例示の目的のために提示されてきたが、本発明が、追加の実施形態を受け入れる余地があること、および本明細書に記載される詳細の一部が、本発明の基本原則から逸脱することなくかなり変動し得ることは、当業者には明らかであろう。
 The present disclosure includes the following embodiments.
Embodiment 1
A method for detecting anti-drug antibodies to a drug in a sample, comprising:
incubating the sample under acidic conditions for a period of time to produce an acidified sample;
combining the acidified sample with a pH buffer containing the drug target to form a target:drug complex, wherein the drug target is labeled with a selectable label;
removing the target:drug complex from the sample using the selectable label to produce a depleted sample;
incubating the depleted sample with an anti-target blocking reagent or antigen-binding fragment thereof and a biotinylated drug to generate an assay sample;
incubating the assay sample on an avidin-coated solid support;
optionally, washing the solid support after incubation with the assay sample;
adding a labeled target of the drug to the solid support;
optionally washing the solid support to remove unbound labeled target;
A detectable signal from a labeled target bound to said biotinylated drug bound to said solid support is measured, wherein a decrease in the amount of signal from said solid support compared to a control sample is equal to said indicating the presence of anti-drug antibodies in the sample;
A method, including
Embodiment 2
The method of embodiment 1, wherein said anti-drug antibody comprises a neutralizing antibody that specifically binds said drug.
Embodiment 3
3. The method of embodiment 1 or 2, wherein said drug is an antibody or antigen-binding fragment or fusion protein thereof.
Embodiment 4
said antibody is a monoclonal antibody, bispecific antibody, Fab fragment, F(ab') 2 fragment, monospecific F(ab') 2 fragment, bispecific F(ab') 2 , trispecific is F(ab') 2 , a monovalent antibody, scFv fragment, diabody, bispecific diabody, trispecific diabody, scFv-Fc, minibody, IgNAR, v-NAR, hcIgG, or vhH; 4. The method of embodiment 3.
Embodiment 5
2. The method of embodiment 1, wherein said acidic conditions comprise a pH of about 2.0 to about 4.0.
Embodiment 6
2. The method of embodiment 1, wherein said acidic conditions comprise a pH of 1-3.
Embodiment 7
2. The method of embodiment 1, wherein the selectable label comprises a magnetic label.
Embodiment 8
8. The method of embodiment 7, wherein the magnetic label is a paramagnetic label or a superparamagnetic label.
Embodiment 9
9. The method of embodiment 7 or 8, wherein the magnetic labels are metal particles, metal microparticles, metal nanoparticles, metal beads, magnetic polymers, homogeneous polystyrene spherical beads, or superparamagnetic spherical polymer particles.
Embodiment 10
The method of embodiment 1, wherein said anti-target blocking reagent antigen-binding fragment thereof specifically binds said target of said protein drug.
Embodiment 11
2. The method of embodiment 1, wherein drug tolerance of said method is at least 10-fold greater in depleted samples compared to non-depleted samples.
Embodiment 12
2. The method of embodiment 1, wherein said method positively identifies NAb in a drug-containing sample taken from a subject at least 29 days after administration of said protein drug.
Embodiment 13
2. The method of embodiment 1, wherein said sample is agitated during said incubation or washing step.
Embodiment 14
2. The method of embodiment 1, wherein the labeled target is labeled with a fluorophore, chemiluminescent probe, electrochemiluminescent probe, quantum dot, rare earth transition metal, gold metal particles, silver metal particles, or combinations thereof. Method.
Embodiment 15
15. The method of embodiment 14, wherein the label comprises ruthenium.
Embodiment 16
A method for detecting anti-drug antibodies to a drug in a sample, comprising:
incubating the sample under acidic conditions for a period of time to promote dissociation of protein complexes, thereby producing an acidified sample;
The acidified sample is combined with a pH buffer containing a labeled unblocked anti-idiotypic antibody specific for the drug to form an unblocked anti-idiotypic antibody:drug conjugate, wherein the labeled a non-blocking anti-idiotypic antibody labeled with a selectable label and increasing the pH to 4.0-5.5;
removing the unblocking anti-idiotypic antibody:drug conjugate from the sample using the selectable label to produce a depleted sample;
incubating the depleted sample with a labeled protein drug at a pH of about 7.0 to produce an assay sample;
incubating the assay sample on a target-coated solid support, wherein the labeled drug specifically binds to the target;
optionally washing the solid support after incubation with the assay sample to remove unbound labeled drug;
A detectable signal from a labeled drug bound to said target-coated solid support is measured, wherein a decrease in the amount of signal compared to a control sample indicates the presence of anti-drug antibody in said sample. indicating and
A method, including
Embodiment 17
17. The method of embodiment 16, wherein said anti-drug antibodies comprise neutralizing antibodies that specifically bind to said drug.
Embodiment 18
18. The method of embodiment 16 or 17, wherein said drug is an antibody or antigen-binding fragment thereof or fusion protein.
Embodiment 19
said antibody is a monoclonal antibody, bispecific antibody, Fab fragment, F(ab') 2 fragment, monospecific F(ab') 2 fragment, bispecific F(ab') 2 , trispecific is F(ab') 2 , a monovalent antibody, scFv fragment, diabody, bispecific diabody, trispecific diabody, scFv-Fc, minibody, IgNAR, v-NAR, hcIgG, or vhH; 19. The method of embodiment 18.
Embodiment 20
17. The method of embodiment 16, wherein said acidic conditions comprise a pH of 4.5-5.0 to minimize free target interference.
Embodiment 21
17. The method of embodiment 16, wherein said acidic conditions comprise a pH of 2.0-4.0.
Embodiment 22
17. The method of embodiment 16, wherein the selectable label comprises a magnetic label.
Embodiment 23
23. The method of embodiment 22, wherein the magnetic label is a paramagnetic label or a superparamagnetic label.
Embodiment 24
24. The method of embodiment 22 or 23, wherein the magnetic labels are metal particles, metal microparticles, metal nanoparticles, metal beads, magnetic polymers, homogeneous polystyrene spherical beads, or supermagnetic spherical polymer particles.
Embodiment 25
according to embodiment 16, wherein said labeled drug is labeled with a fluorophore, chemiluminescent probe, electrochemiluminescent probe, radioisotope, quantum dot, rare earth transition metal, gold particles, silver particles, or combinations thereof described method.
Embodiment 26
17. The method of embodiment 16, wherein the label comprises ruthenium.
Embodiment 27
17. The method of embodiment 16, wherein drug tolerance of said method is at least 10-fold greater in depleted samples compared to non-depleted samples.
Embodiment 28
17. The method of embodiment 16, wherein said method positively identifies NAb in a sample taken from a subject at least 29 days after administration of said protein drug.
Embodiment 29
17. The method of embodiment 16, wherein said sample is agitated during said incubation or washing step.
Embodiment 30
A method for identifying a lead protein drug comprising:
administering one or more drug candidates to the subject;
performing the method of any one of embodiments 1 or 16 on a sample obtained from the subject;
selecting protein drug candidates that produce little or no ADA;
A method, including
While the invention has been described in connection with specific embodiments thereof in the foregoing specification, and numerous details have been presented for purposes of illustration, the invention is susceptible to additional embodiments. and that some of the details described herein may vary considerably without departing from the underlying principles of the invention.

Claims (30)

試料中の薬物に対する抗薬物抗体を検出するための方法であって、
前記試料を酸性条件下で一定期間インキュベートして、酸性化試料を生成することと、
前記酸性化試料を、前記薬物の標的を含むｐＨ緩衝液と組み合わせて、標的：薬物複合体を生成し、ここで、前記薬物の前記標的は選別可能な標識で標識されていることと、
前記選別可能な標識を使用して前記試料から前記標的：薬物複合体を除去して、枯渇試料を生成することと、
前記枯渇試料を、抗標的遮断試薬またはその抗原結合断片およびビオチン化薬物とインキュベートして、アッセイ試料を生成することと、
前記アッセイ試料を、アビジンコーティングされた固体支持体上でインキュベートすることと、
任意で、前記アッセイ試料とのインキュベーション後に、前記固体支持体を洗浄することと、
前記薬物の標識された標的を前記固体支持体に添加することと、
任意で、前記固体支持体を洗浄して、未結合の標識された標的を除去することと、
前記固体支持体に結合した前記ビオチン化薬物に結合した標識された標的からの検出可能なシグナルを測定し、ここで、対照試料と比較した前記固体支持体からのシグナルの量の減少が、前記試料中の抗薬物抗体の存在を示すことと、
を含む、方法。 A method for detecting anti-drug antibodies to a drug in a sample, comprising:
incubating the sample under acidic conditions for a period of time to produce an acidified sample;
combining the acidified sample with a pH buffer containing the drug target to form a target:drug complex, wherein the drug target is labeled with a selectable label;
removing the target:drug complex from the sample using the selectable label to produce a depleted sample;
incubating the depleted sample with an anti-target blocking reagent or antigen-binding fragment thereof and a biotinylated drug to generate an assay sample;
incubating the assay sample on an avidin-coated solid support;
optionally, washing the solid support after incubation with the assay sample;
adding a labeled target of the drug to the solid support;
optionally washing the solid support to remove unbound labeled target;
A detectable signal from a labeled target bound to said biotinylated drug bound to said solid support is measured, wherein a decrease in the amount of signal from said solid support compared to a control sample is equal to said indicating the presence of anti-drug antibodies in the sample;
A method, including 前記抗薬物抗体が、前記薬物に特異的に結合する中和抗体を含む、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein said anti-drug antibody comprises a neutralizing antibody that specifically binds said drug. 前記薬物が、抗体もしくはその抗原結合断片または融合タンパク質である、請求項１または２に記載の方法。 3. The method of claim 1 or 2, wherein the drug is an antibody or antigen-binding fragment or fusion protein thereof. 前記抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、単一特異性Ｆ（ａｂ’）２断片、二重特異性Ｆ（ａｂ’）２、三重特異性Ｆ（ａｂ’）２、一価抗体、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディ、二重特異性ダイアボディ、三重特異性ダイアボディ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ミニボディ、ＩｇＮＡＲ、ｖ－ＮＡＲ、ｈｃＩｇＧ、またはｖｈＨである、請求項３に記載の方法。 said antibody is a monoclonal antibody, bispecific antibody, Fab fragment, F(ab') 2 fragment, monospecific F(ab') 2 fragment, bispecific F(ab') 2 , trispecific is F(ab') 2 , a monovalent antibody, scFv fragment, diabody, bispecific diabody, trispecific diabody, scFv-Fc, minibody, IgNAR, v-NAR, hcIgG, or vhH; 4. The method of claim 3. 前記酸性条件が、約２．０～約４．０のｐＨを含む、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein said acidic conditions comprise a pH of about 2.0 to about 4.0. 前記酸性条件が、１～３のｐＨを含む、請求項１に記載の方法。 The method of claim 1, wherein said acidic conditions comprise a pH of 1-3. 前記選別可能な標識が、磁気標識を含む、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein the selectable label comprises a magnetic label. 前記磁気標識が、常磁性標識または超常磁性標識である、請求項７に記載の方法。 8. The method of claim 7, wherein the magnetic label is a paramagnetic label or a superparamagnetic label. 前記磁気標識が、金属粒子、金属マイクロ粒子、金属ナノ粒子、金属ビーズ、磁性ポリマー、均一ポリスチレン球状ビーズ、または超常磁性球状ポリマー粒子である、請求項７または８に記載の方法。 9. The method of claim 7 or 8, wherein the magnetic labels are metal particles, metal microparticles, metal nanoparticles, metal beads, magnetic polymers, homogeneous polystyrene spherical beads, or superparamagnetic spherical polymer particles. 前記抗標的遮断試薬またはその抗原結合断片が、前記タンパク質薬物の前記標的に特異的に結合する、請求項１に記載の方法。 2. The method of Claim 1, wherein said anti-target blocking reagent or antigen-binding fragment thereof specifically binds said target of said protein drug. 前記方法の薬物耐容性が、非枯渇試料と比較して枯渇試料中で少なくとも１０倍大きい、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein drug tolerance of said method is at least 10-fold greater in depleted samples compared to non-depleted samples. 前記方法が、前記タンパク質薬物の投与の少なくとも２９日後に対象から採取した薬物含有試料中のＮＡｂを肯定的に同定する、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein said method positively identifies NAb in a drug-containing sample taken from a subject at least 29 days after administration of said protein drug. 前記試料が、前記インキュベーションまたは洗浄ステップ中に撹拌される、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein said sample is agitated during said incubation or washing step. 前記標識された標的が、フルオロフォア、化学発光プローブ、電気化学発光プローブ、量子ドット、希土類遷移金属、金金属粒子、銀金属粒子、またはそれらの組み合わせで標識されている、請求項１に記載の方法。 2. The method of claim 1, wherein the labeled target is labeled with a fluorophore, chemiluminescent probe, electrochemiluminescent probe, quantum dot, rare earth transition metal, gold metal particles, silver metal particles, or combinations thereof. Method. 前記標識が、ルテニウムを含む、請求項１４に記載の方法。 15. The method of claim 14, wherein said label comprises ruthenium. 試料中の薬物に対する抗薬物抗体を検出するための方法であって、
前記試料を酸性条件下で一定期間インキュベートして、タンパク質複合体の解離を促進し、それによって酸性化試料を生成することと、
前記酸性化試料を、前記薬物に特異的な標識された非遮断抗イディオタイプ抗体を含むｐＨ緩衝液と組み合わせて、非遮断抗イディオタイプ抗体：薬物複合体を生成し、ここで、前記標識された非遮断抗イディオタイプ抗体が選別可能な標識で標識されており、ｐＨが４．０～５．５に上昇することと、
前記選別可能な標識を使用して前記試料から前記非遮断抗イディオタイプ抗体：薬物複合体を除去して、枯渇試料を生成することと、
前記枯渇試料を、標識されたタンパク質薬物と約７．０のｐＨでインキュベートして、アッセイ試料を生成することと、
標的コーティングされた固体支持体上で前記アッセイ試料をインキュベートし、ここで、前記標識された薬物が、前記標的に特異的に結合することと、
任意で、前記アッセイ試料とのインキュベーション後に前記固体支持体を洗浄して、未結合の標識された薬物を除去することと、
前記標的コーティングされた固体支持体に結合した標識された薬物からの検出可能なシグナルを測定し、ここで、対照試料と比較したシグナルの量の減少が、前記試料中の抗薬物抗体の存在を示すことと、
を含む、方法。 A method for detecting anti-drug antibodies to a drug in a sample, comprising:
incubating the sample under acidic conditions for a period of time to promote dissociation of protein complexes, thereby producing an acidified sample;
The acidified sample is combined with a pH buffer containing a labeled unblocked anti-idiotypic antibody specific for the drug to form an unblocked anti-idiotypic antibody:drug conjugate, wherein the labeled a non-blocking anti-idiotypic antibody labeled with a selectable label and increasing the pH to 4.0-5.5;
removing the unblocking anti-idiotypic antibody:drug conjugate from the sample using the selectable label to produce a depleted sample;
incubating the depleted sample with a labeled protein drug at a pH of about 7.0 to produce an assay sample;
incubating the assay sample on a target-coated solid support, wherein the labeled drug specifically binds to the target;
optionally washing the solid support after incubation with the assay sample to remove unbound labeled drug;
A detectable signal from a labeled drug bound to said target-coated solid support is measured, wherein a decrease in the amount of signal compared to a control sample indicates the presence of anti-drug antibody in said sample. indicating and
A method, including 前記抗薬物抗体が、前記薬物に特異的に結合する中和抗体を含む、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said anti-drug antibody comprises a neutralizing antibody that specifically binds said drug. 前記薬物が、抗体もしくはその抗原結合断片または融合タンパク質である、請求項１６または１７に記載の方法。 18. The method of claim 16 or 17, wherein said drug is an antibody or antigen-binding fragment or fusion protein thereof. 前記抗体が、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、単一特異性Ｆ（ａｂ’）２断片、二重特異性Ｆ（ａｂ’）２、三重特異性Ｆ（ａｂ’）２、一価抗体、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディ、二重特異性ダイアボディ、三重特異性ダイアボディ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ミニボディ、ＩｇＮＡＲ、ｖ－ＮＡＲ、ｈｃＩｇＧ、またはｖｈＨである、請求項１８に記載の方法。 said antibody is a monoclonal antibody, bispecific antibody, Fab fragment, F(ab') 2 fragment, monospecific F(ab') 2 fragment, bispecific F(ab') 2 , trispecific is F(ab') 2 , a monovalent antibody, scFv fragment, diabody, bispecific diabody, trispecific diabody, scFv-Fc, minibody, IgNAR, v-NAR, hcIgG, or vhH; 19. The method of claim 18. 前記酸性条件が、遊離標的干渉を最小限に抑えるために４．５～５．０のｐＨを含む、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said acidic conditions comprise a pH of 4.5-5.0 to minimize free target interference. 前記酸性条件が、２．０～４．０のｐＨを含む、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said acidic conditions comprise a pH of 2.0-4.0. 前記選別可能な標識が、磁気標識を含む、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said selectable label comprises a magnetic label. 前記磁気標識が、常磁性標識または超常磁性標識である、請求項２２に記載の方法。 23. The method of claim 22, wherein said magnetic label is a paramagnetic label or a superparamagnetic label. 前記磁気標識が、金属粒子、金属マイクロ粒子、金属ナノ粒子、金属ビーズ、磁性ポリマー、均一ポリスチレン球状ビーズ、または超磁性球状ポリマー粒子である、請求項２２または２３に記載の方法。 24. The method of claim 22 or 23, wherein the magnetic labels are metal particles, metal microparticles, metal nanoparticles, metal beads, magnetic polymers, homogeneous polystyrene spherical beads, or supermagnetic spherical polymer particles. 前記標識された薬物が、フルオロフォア、化学発光プローブ、電気化学発光プローブ、放射性同位体、量子ドット、希土類遷移金属、金粒子、銀粒子、またはそれらの組み合わせで標識されている、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said labeled drug is labeled with a fluorophore, chemiluminescent probe, electrochemiluminescent probe, radioisotope, quantum dot, rare earth transition metal, gold particles, silver particles, or combinations thereof. described method. 前記標識が、ルテニウムを含む、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said label comprises ruthenium. 前記方法の薬物耐容性が、非枯渇試料と比較して枯渇試料中で少なくとも１０倍大きい、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein drug tolerance of said method is at least 10-fold greater in depleted samples compared to non-depleted samples. 前記方法が、前記タンパク質薬物の投与の少なくとも２９日後に対象から採取した試料中のＮＡｂを肯定的に同定する、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said method positively identifies NAb in a sample taken from a subject at least 29 days after administration of said protein drug. 前記試料が、前記インキュベーションまたは洗浄ステップ中に撹拌される、請求項１６に記載の方法。 17. The method of claim 16, wherein said sample is agitated during said incubation or washing step. リードタンパク質薬物を同定するための方法であって、
１つ以上の薬物候補が投与された対象から得られた試料上で、請求項１または請求項１６のいずれか一項に記載の方法を実施することと、
ＡＤＡをほとんどまたは全く生成しないタンパク質薬物候補を選択することと、
を含む、方法。 A method for identifying a lead protein drug comprising :
performing the method of any one of claims 1 or 16 on a sample obtained from a subject to whom one or more drug candidates have been administered ;
selecting protein drug candidates that produce little or no ADA;
A method, including
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