JPWO2020230856A5 - - Google Patents
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Claims (35)
- 口腔内間葉組織由来の初期培養細胞が神経分化誘導培地中で培養されている細胞接着性細胞培養容器を準備する工程、および
前記細胞接着性細胞培養容器に接着していない細胞を前記細胞接着性細胞培養容器中から収集して細胞集団を得る工程を含んでなる、神経系細胞含有製剤の製造方法であって、
前記神経系細胞含有製剤が、前記細胞集団または当該細胞集団由来のスフェロイドもしくは神経系細胞を含んでなる、方法。 - 前記初期培養開始から神経系細胞含有製剤の取得までの期間が２～１０日である、請求項１に記載の方法。
- 前記細胞接着性細胞培養容器に接着していない細胞が、神経分化誘導培地中の遊離細胞であるか、または前記細胞接着性細胞培養容器に接着している細胞に対してさらに接着している細胞である、請求項１または２に記載の方法。
- 前記口腔内間葉組織が、歯肉組織、頬の粘膜下組織、頬脂肪体組織および歯髄組織からなる群から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記口腔内間葉組織がヒト組織である、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記初期培養細胞が、初代培養細胞または２～５代継代培養細胞である、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞接着性細胞培養容器に接着していない細胞の平均径が１２～１６μｍである、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記初期培養細胞が神経分化誘導培地中で培養される期間が０．５～１０日である、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記神経分化誘導培地含有容器の細胞接触表面が、軸索が伸張している神経系細胞に対して接着性である、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記遊離細胞の収集が、遠心分離、吸引、磁気ビーズ法またはＦＡＣＳ法により行われる、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞集団を培養してスフェロイドを形成させる工程をさらに含んでなる、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
- 前記スフェロイド形成工程における細胞集団の培養期間が０．５～２日である、請求項１１に記載の方法。
- 前記スフェロイド形成工程における細胞集団の培養に用いられる培養容器の細胞接触表面が、軸索が伸張している神経系細胞に対して非細胞接着性である、請求項１１または１２に記載の方法。
- 前記スフェロイド形成工程における細胞集団の培養が、浮遊培養、攪拌培養、旋回培養または振盪培養により行われる、請求項１１～１３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記スフェロイドを分散させ、培養する工程をさらに含んでなる、請求項１１～１４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記スフェロイドを分散して得られる細胞の培養期間が３時間～７日である、請求項１５に記載の方法。
- 前記神経系細胞含有製剤が神経幹細胞を含んでなる、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記神経系細胞含有製剤が再生医療用製剤である、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
- 前記神経系細胞含有製剤が自家移植用または他家移植用の製剤である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
- 前記神経系細胞含有製剤が、神経組織の損傷を修復するために用いられる、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法により得られる、神経系細胞含有製剤。
- 正常二倍体細胞の割合が８０％以上である、口腔内間葉組織細胞由来の神経系細胞集団。
- 前記正常二倍体細胞の割合が９０％以上である、請求項２２に記載の神経系細胞集団。
- 前記口腔内間葉組織細胞が、初代培養細胞または２～５代継代培養細胞である、請求項２２または２３に記載の神経系細胞集団。
- 前記口腔内間葉組織が、歯肉組織、頬の粘膜下組織、頬脂肪体組織および歯髄組織からなる群から選択される、請求項２２～２４のいずれか一項に記載の神経系細胞集団。
- 前記口腔内間葉組織がヒト組織である、請求項２２～２５のいずれか一項に記載の神経系細胞集団。
- 請求項１５に記載の方法により得られる、請求項２２～２６のいずれか一項に記載の神経系細胞集団。
- 請求項１～３のいずれか一項に記載の方法における前記細胞接着性細胞培養容器に接着していない細胞を原料とする、請求項２２～２７のいずれか一項に記載の神経系細胞集団。
- 前記細胞接着性細胞培養容器に接着していない細胞の平均径が１２～１６μｍである、請求項２８に記載の神経系細胞集団。
- 前記細胞接着性細胞培養容器に接着していない細胞における最長径と最短径の比が、１～１．５である、請求項２８または２９に記載の神経系細胞集団。
- 請求項２２～３０のいずれか一項に記載の神経系細胞集団を含有する、医薬製剤。
- 再生医療用製剤である、請求項３１に記載の医薬製剤。
- 自家移植用または他家移植用の製剤である、請求項３１または３２に記載の医薬製剤。
- 神経組織の損傷を修復するために用いられる、請求項３３に記載の医薬製剤。
- 急性期または亜急性期治療用の細胞含有製剤である、請求項３１～３４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
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