本発明の新規特色は、添付の特許請求の範囲に詳細に示されている。本発明の特色および利点のより深い理解は、本発明の原理が利用されている説明的な実施形態を示す次の詳細な説明、および添付の図面を参照することにより得られるであろう。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
凝固したコロイドを含むチーズ組成物であって、
前記凝固したコロイドが、ミセル形態で会合したαカゼインタンパク質およびκカゼインタンパク質を含み、
前記α（アルファ）カゼインタンパク質および前記κ（カッパー）カゼインタンパク質のうち少なくとも一方が、組換えにより産生され、
前記チーズ組成物が、β（ベータ）カゼインタンパク質を含有しない、チーズ組成物。
（項目２）
組換えにより産生されたカゼインが、細菌宿主細胞から産生される、項目１に記載のチーズ組成物。
（項目３）
前記αおよびκカゼインタンパク質が両方共に、組換えにより産生される、項目１または項目２に記載のチーズ組成物。
（項目４）
前記組換えにより産生されたαおよびκカゼインタンパク質が、１つまたは複数の細菌宿主細胞から産生される、項目３に記載のチーズ組成物。
（項目５）
前記αカゼインタンパク質が、ネイティブαカゼインと比較して、翻訳後修飾が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目１～４のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目６）
前記αカゼインタンパク質が、ネイティブαカゼインと比較して、リン酸化が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目５に記載のチーズ組成物。
（項目７）
前記κカゼインタンパク質が、ネイティブκカゼインと比較して、翻訳後修飾が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目１～６のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目８）
前記κカゼインタンパク質が、ネイティブκカゼインと比較して、グリコシル化が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目７に記載のチーズ組成物。
（項目９）
前記κカゼインタンパク質が、ネイティブκカゼインと比較して、リン酸化が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目７または項目８に記載のチーズ組成物。
（項目１０）
前記細菌宿主細胞が、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｉ ｓｐ．、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓおよびＢａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｈｏｓｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｍｅｇｍａｔｉｓ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓおよびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ ｓｐ．、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ ｓｐ．６８０３およびＥ．ｃｏｌｉからなる群から選択される、項目２または項目４に記載のチーズ組成物。
（項目１１）
前記細菌宿主細胞が、組換えにより産生されたカゼインタンパク質を分泌する、項目１０に記載のチーズ組成物。
（項目１２）
前記細菌宿主細胞が、前記組換えカゼインタンパク質を細胞内に保持する、項目１０に記載のチーズ組成物。
（項目１３）
前記細菌宿主細胞における組換えにより産生されたタンパク質の産生が、誘導性プロモーターによって調節される、項目１０または項目１１に記載のチーズ組成物。
（項目１４）
前記細菌宿主細胞における組換えにより産生されたタンパク質の産生が、構成的プロモーターによって調節される、項目１０または項目１１に記載のチーズ組成物。
（項目１５）
αカゼインタンパク質のκカゼインタンパク質に対する比が、１：１～約１５：１である、項目１～１４のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目１６）
αカゼインタンパク質のκカゼインタンパク質に対する比が、約１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１または１５：１である、項目１５に記載のチーズ組成物。
（項目１７）
前記αカゼインタンパク質が、αＳ１またはαＳ２である、項目１～１５のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目１８）
前記αカゼインタンパク質が、配列番号１～２６のうち１種または少なくとも８０％配列相同性を有するそのバリアントを含むアミノ酸配列を有する、項目１～１６のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目１９）
前記κカゼインタンパク質が、配列番号２７～４０のうち１種または少なくとも８０％配列相同性を有するそのバリアントを含むアミノ酸配列を有する、項目１～１６のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２０）
約１５０ｎｍ～約５００ｎｍの間または約１００ｎｍ～約５００ｎｍの間のサイズの前記ミセル形態の集団を含む、項目１～１９のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２１）
前記集団の前記ミセル形態の一部が、１００ｎｍ未満または約１０ｎｍ～１００ｎｍの間のサイズである、項目２０に記載のチーズ組成物。
（項目２２）
カルシウム塩、クエン酸塩およびリン酸塩からなる群から選択される少なくとも１種の塩をさらに含む、項目１～２１のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２３）
前記チーズが、いかなる追加的な乳製品由来のタンパク質も欠いている、項目１～２２のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２４）
前記チーズが、いかなる動物由来の乳製品タンパク質も欠いている、項目１～２３のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２５）
前記チーズが、約０％～約５０％の間の脂肪含量を有し、前記脂肪が、植物ベースの供給源に由来する、項目１～２４のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２６）
前記チーズが、約０％～約１０％の間の糖含量を有し、前記糖が、植物ベースの供給源に由来する、項目１～２５のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２７）
前記チーズが、加熱されると、溶けることおよび褐変することが可能になる、項目１～２６のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２８）
前記チーズが、パスタ・フィラータ様チーズ、パニール、クリームチーズおよびカッテージチーズからなる群から選択される、項目１～２７のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目２９）
前記チーズが、チェダー、スイス、ブリー、カマンベール、フェタ、ハルーミ、ゴーダ、エダム、チェダー、マンチェゴ、スイス、コルビー、ミュンスター、ブルーチーズまたはパルメザンからなる群から選択される熟成したまたは成熟したチーズである、項目１～２７のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目３０）
前記チーズが、モッツァレラである、項目２７に記載の組成物。
（項目３１）
前記チーズの水分保持が、４０～６５％である、項目１～３０のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目３２）
前記チーズのテクスチャーが、動物由来の乳製品のチーズに匹敵する、項目１～３０のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目３３）
前記チーズの硬度が、動物由来の乳製品のチーズに匹敵する、項目１～３０のいずれかに記載のチーズ組成物。
（項目３４）
食用組成物を産生するための方法であって、
組換えαカゼインタンパク質および組換えκカゼインタンパク質が液体コロイドにおいてミセル形態を形成する条件下で、前記αカゼインタンパク質、前記κカゼインタンパク質および少なくとも１種の塩を組み合わせるステップであって、前記ミセル形態が、βカゼインタンパク質を含まない、ステップと、
前記液体コロイドを第１の条件に供して、凝固物を形成するステップと
を含む方法。
（項目３５）
前記第１の条件が、酸の添加または微生物による前記液体コロイドの酸性化である、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記凝固物を熱水処置に供し、必要に応じて伸展して、フィラータ型チーズを形成するステップをさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目３７）
前記凝固物をレンネット処理剤に供して、レンネット処理されたカードを形成するステップをさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目３８）
前記レンネット処理剤が、微小生物に由来するキモシン酵素である、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
前記レンネット処理されたカードを熟成および成熟させて、チーズ様組成物を形成するステップをさらに含む、項目３７または項目３８に記載の方法。
（項目４０）
前記レンネット処理されたカードを熱水処置に供し、必要に応じて伸展して、フィラータ型チーズを形成するステップをさらに含む、項目３７または項目３８に記載の方法。
（項目４１）
前記食用組成物が、βカゼインタンパク質を含まない、項目３４～４０のいずれかに記載の方法。
（項目４２）
前記食用組成物が、いかなる追加的な乳製品由来のタンパク質も含まない、項目３４～４１のいずれかに記載の方法。
（項目４３）
前記食用組成物が、いかなる動物由来の乳製品タンパク質も含まない、項目３４～４１のいずれかに記載の方法。
（項目４４）
前記組換えにより産生されたαおよびκカゼインタンパク質が、１つまたは複数の細菌宿主細胞から産生される、項目３４～４３のいずれかに記載の方法。
（項目４５）
前記αカゼインタンパク質が、ネイティブαカゼインと比較して、リン酸化が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目３４～４４のいずれかに記載の方法。
（項目４６）
前記κカゼインタンパク質が、ネイティブκカゼインと比較して、グリコシル化が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目３４～４５のいずれかに記載の方法。
（項目４７）
前記κカゼインタンパク質が、ネイティブκカゼインと比較して、リン酸化が完全にないかまたは実質的に低減されている、項目３４～４６のいずれかに記載の方法。
（項目４８）
前記細菌宿主細胞が、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｉ ｓｐ．、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓおよびＢａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｈｏｓｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｍｅｇｍａｔｉｓ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓおよびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ ｓｐ．、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ ｓｐ．６８０３およびＥ．ｃｏｌｉからなる群から選択される、項目４４～４７のいずれかに記載の方法。
（項目４９）
１つまたは複数の細菌宿主細胞が、組換えにより産生されたαカゼインタンパク質およびκカゼインタンパク質を分泌する、項目４４～４８のいずれかに記載の方法。
（項目５０）
１つまたは複数の細菌宿主細胞が、組換えにより産生されたαカゼインタンパク質およびκカゼインタンパク質を細胞内に保持する、項目４４～４８のいずれかに記載の方法。
（項目５１）
αカゼインタンパク質およびκカゼインタンパク質の一方または両方の産生が、誘導性プロモーターによって調節される、項目４４～５０のいずれかに記載の方法。
（項目５２）
αカゼインタンパク質およびκカゼインタンパク質の一方または両方の産生が、構成的プロモーターによって調節される、項目４４～５０のいずれかに記載の方法。
（項目５３）
前記ミセル形態におけるαカゼインタンパク質のκカゼインタンパク質に対する比が、約１：１～約１５：１の間である、項目３４～５２のいずれかに記載の方法。
（項目５４）
前記ミセル形態におけるαカゼインタンパク質のκカゼインタンパク質に対する比が、約１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１、１４：１または１５：１である、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記αカゼインタンパク質が、αｓ１またはαｓ２である、項目３４～５４のいずれかに記載の方法。
（項目５６）
前記αカゼインタンパク質が、配列番号１～２６または少なくとも８０％配列相同性を有するそれらのバリアントから選択されるアミノ酸配列を含む、項目３４～５５のいずれかに記載の方法。
（項目５７）
前記κカゼインタンパク質が、配列番号２７～４０または少なくとも８０％配列相同性を有するそれらのバリアントから選択されるアミノ酸配列を含む、項目３４～５５のいずれかに記載の方法。
（項目５８）
前記液体コロイドが、約１５０ｎｍ～約５００ｎｍの間または約１００ｎｍ～約５００ｎｍの間のサイズの前記ミセル形態の集団を含む、項目３４～５７のいずれかに記載の方法。
（項目５９）
前記集団の前記ミセル形態の一部が、１００ｎｍ未満または約１０ｎｍ～１００ｎｍの間のサイズである、項目３４～５８のいずれかに記載の方法。
（項目６０）
前記塩が、カルシウム塩である、項目３４～５９のいずれかに記載の方法。
（項目６１）
前記液体コロイドを形成するステップが、リン酸塩および／またはクエン酸塩の添加をさらに含む、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
項目３４または項目４１～６１に記載の方法のいずれかによって形成された凝固した組成物。
（項目６３）
項目３３または項目３７～６２に記載の方法のいずれかによって形成されたレンネット処理されたカード組成物。
（項目６４）
項目３４～６３に記載の方法のいずれかによって形成されたチーズ様組成物。
（項目６５）
前記αカゼインタンパク質が、ウシ、ヒト、ヒツジ、ヤギ、バッファロー、バイソン、ウマまたはラクダαカゼインタンパク質のアミノ酸配列を含む、項目１～３３のいずれかに記載のチーズ様組成物、または項目３４～６４のいずれかに記載の方法によって形成されたチーズ様組成物。
（項目６６）
前記κカゼインタンパク質が、ウシ、ヒト、ヒツジ、ヤギ、バッファロー、バイソン、ウマまたはラクダκカゼインタンパク質のアミノ酸配列を含む、項目１～３３のいずれかに記載のチーズ組成物、または項目３４～６４のいずれかに記載の方法によって形成されたチーズ組成物。
（項目６７）
前記レンネット処理凝固時間が、１分～６時間である、項目３４に記載の方法。
（項目６８）
ミセル形態を含む液体コロイドであって、前記ミセル形態が、組換えαカゼインタンパク質、組換えκカゼインタンパク質および少なくとも１種の塩を含み、前記αカゼインタンパク質、前記κカゼインタンパク質またはこれらの組合せが、翻訳後修飾を完全に欠いている、またはこれが実質的に低下されている、液体コロイド。
（項目６９）
（ａ）前記αカゼインタンパク質が、動物由来のαカゼインと比較して、リン酸化を完全に欠いているもしくはそれが実質的に低下されている、または（ｂ）前記κカゼインタンパク質が、動物由来のκカゼインと比較して、グリコシル化を完全に欠いているもしくはそれが実質的に低下されている、または（ｃ）前記κカゼインタンパク質が、動物由来のκカゼインと比較して、リン酸化を完全に欠いているもしくはそれが実質的に低下されている、または（ａ）、（ｂ）および（ｃ）のいずれかの組合せである、項目６８に記載の液体コロイド。
（項目７０）
前記ミセル形態が、βカゼインタンパク質を含まない、項目６８または項目６９に記載の液体コロイド。
（項目７１）
項目６８～７０のいずれかに記載の液体コロイドから形成されたヨーグルト組成物。
（項目７２）
前記液体コロイドを加熱し、次いで冷却するステップと、微生物により前記液体コロイドを酸性化するステップとをさらに含む、項目３４または３５に記載の方法。
（項目７３）
前記微生物が、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、乳酸桿菌またはビフィズス菌のうち１種または複数を含む、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記αカゼインタンパク質が、ウシ、ヒト、ヒツジ、ヤギ、バッファロー、バイソン、ウマまたはラクダαカゼインタンパク質のアミノ酸配列を含む、項目７０に記載のヨーグルト組成物、または項目７２～７３のいずれかに記載の方法によって形成されたヨーグルト組成物。
（項目７５）
前記κカゼインタンパク質が、ウシ、ヒト、ヒツジ、ヤギ、バッファロー、バイソン、ウマまたはラクダκカゼインタンパク質のアミノ酸配列を含む、項目７０に記載のヨーグルト組成物、または項目７２～７３のいずれかに記載の方法によって形成されたヨーグルト組成物。
The novel features of the invention are pointed out with particularity in the appended claims. A better understanding of the features and advantages of the present invention may be obtained by referring to the following detailed description and accompanying drawings, which illustrate illustrative embodiments in which the principles of the invention are employed.
Embodiments of the present invention provide, for example, the following items.
(Item 1)
A cheese composition comprising a coagulated colloid,
said coagulated colloid comprises alpha and kappa casein proteins associated in a micellar form;
at least one of the α (alpha) casein protein and the κ (kappa) casein protein is recombinantly produced;
A cheese composition, wherein the cheese composition does not contain β (beta) casein protein.
(Item 2)
2. The cheese composition of item 1, wherein the recombinantly produced casein is produced from a bacterial host cell.
(Item 3)
3. The cheese composition of item 1 or item 2, wherein both the alpha and kappa casein proteins are recombinantly produced.
(Item 4)
4. The cheese composition of item 3, wherein said recombinantly produced alpha and kappa casein proteins are produced from one or more bacterial host cells.
(Item 5)
5. The cheese composition of any of items 1-4, wherein said alpha-casein protein has no or substantially reduced post-translational modifications compared to native alpha-casein.
(Item 6)
6. The cheese composition of item 5, wherein said alpha casein protein has no or substantially reduced phosphorylation compared to native alpha casein.
(Item 7)
7. The cheese composition of any of items 1-6, wherein said kappa casein protein has no or substantially reduced post-translational modifications compared to native kappa casein.
(Item 8)
8. The cheese composition of item 7, wherein said kappa casein protein is completely free or substantially reduced in glycosylation compared to native kappa casein.
(Item 9)
9. The cheese composition of item 7 or item 8, wherein the kappa casein protein has no or substantially reduced phosphorylation compared to native kappa casein.
(Item 10)
The bacterial host cell is Lactococci sp. , Lactococcus lactis, Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis and Bacillus megaterium, Brevibacillus choshinensis, Mycobacterium smegmatis , Rhodococcus erythropolis and Corynebacterium glutamicum, Lactobacilli sp. , Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Synechocystis sp. 6803 and E. 5. The cheese composition of item 2 or item 4, wherein the cheese composition is selected from the group consisting of E. coli.
(Item 11)
11. The cheese composition of item 10, wherein said bacterial host cell secretes recombinantly produced casein protein.
(Item 12)
11. The cheese composition of item 10, wherein said bacterial host cells intracellularly retain said recombinant casein protein.
(Item 13)
12. The cheese composition of item 10 or item 11, wherein production of the recombinantly produced protein in said bacterial host cell is regulated by an inducible promoter.
(Item 14)
12. The cheese composition of item 10 or item 11, wherein production of the recombinantly produced protein in said bacterial host cell is regulated by a constitutive promoter.
(Item 15)
15. The cheese composition of any of items 1-14, wherein the ratio of alpha casein protein to kappa casein protein is from 1:1 to about 15:1.
(Item 16)
a ratio of alpha casein protein to kappa casein protein of about 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1; 16. The cheese composition of item 15, wherein the cheese composition is 1, 11:1, 12:1, 13:1, 14:1 or 15:1.
(Item 17)
16. The cheese composition according to any one of items 1 to 15, wherein the α-casein protein is αS1 or αS2.
(Item 18)
17. The cheese composition of any of items 1-16, wherein said alpha casein protein has an amino acid sequence comprising one of SEQ ID NOs: 1-26 or a variant thereof with at least 80% sequence homology.
(Item 19)
17. The cheese composition of any of items 1-16, wherein the kappa casein protein has an amino acid sequence comprising one of SEQ ID NOs: 27-40 or a variant thereof with at least 80% sequence homology.
(Item 20)
20. The cheese composition of any of items 1-19, comprising a population of said micellar forms of size between about 150 nm and about 500 nm, or between about 100 nm and about 500 nm.
(Item 21)
21. The cheese composition of item 20, wherein a portion of said micellar forms of said population are less than or between about 10 nm and 100 nm in size.
(Item 22)
22. The cheese composition according to any one of items 1-21, further comprising at least one salt selected from the group consisting of calcium salts, citrates and phosphates.
(Item 23)
23. The cheese composition of any of items 1-22, wherein said cheese lacks any additional dairy-derived protein.
(Item 24)
24. The cheese composition of any of items 1-23, wherein said cheese lacks any animal-derived dairy protein.
(Item 25)
25. The cheese composition of any of items 1-24, wherein said cheese has a fat content of between about 0% and about 50%, said fat being derived from a plant-based source.
(Item 26)
26. The cheese composition of any of items 1-25, wherein said cheese has a sugar content of between about 0% and about 10%, said sugars being derived from a plant-based source.
(Item 27)
27. The cheese composition of any of items 1-26, wherein the cheese is allowed to melt and brown when heated.
(Item 28)
28. The cheese composition of any of items 1-27, wherein said cheese is selected from the group consisting of pasta filata-like cheese, paneer, cream cheese and cottage cheese.
(Item 29)
said cheese is a aged or mature cheese selected from the group consisting of cheddar, swiss, brie, camembert, feta, halloumi, gouda, edam, cheddar, manchego, swiss, colby, münster, blue cheese or parmesan , The cheese composition according to any one of items 1 to 27.
(Item 30)
28. The composition of item 27, wherein the cheese is mozzarella.
(Item 31)
31. The cheese composition according to any one of items 1 to 30, wherein the cheese has a water retention of 40 to 65%.
(Item 32)
31. The cheese composition of any of items 1-30, wherein the texture of said cheese is comparable to dairy cheeses of animal origin.
(Item 33)
31. The cheese composition of any of items 1-30, wherein the hardness of said cheese is comparable to dairy cheeses of animal origin.
(Item 34)
A method for producing an edible composition comprising:
combining said alpha casein protein, said kappa casein protein and at least one salt under conditions in which said recombinant alpha casein protein and said recombinant kappa casein protein form a micelle form in a liquid colloid, said micelle form , free of beta-casein protein; and
subjecting the liquid colloid to a first condition to form a clot;
method including.
(Item 35)
35. The method of item 34, wherein said first condition is the addition of acid or acidification of said liquid colloid by microorganisms.
(Item 36)
35. The method of item 34, further comprising subjecting the coagulum to a hydrothermal treatment and stretching, if necessary, to form a filata-type cheese.
(Item 37)
35. The method of item 34, further comprising subjecting the coagulum to a rennetting agent to form a rennetted curd.
(Item 38)
38. The method of item 37, wherein the rennet treatment agent is a chymosin enzyme derived from microorganisms.
(Item 39)
39. The method of item 37 or item 38, further comprising ripening and ripening the rennet-treated curd to form a cheese-like composition.
(Item 40)
39. The method of item 37 or item 38, further comprising subjecting the rennet-treated curd to a hydrothermal treatment and stretching, if necessary, to form a filata-type cheese.
(Item 41)
41. The method of any of items 34-40, wherein the edible composition is free of beta-casein protein.
(Item 42)
42. The method of any of items 34-41, wherein the edible composition does not contain any additional dairy-derived protein.
(Item 43)
42. The method of any of items 34-41, wherein the edible composition does not contain any animal-derived dairy protein.
(Item 44)
44. The method of any of items 34-43, wherein said recombinantly produced alpha and kappa casein proteins are produced from one or more bacterial host cells.
(Item 45)
45. The method of any of items 34-44, wherein said alpha-casein protein has no or substantially reduced phosphorylation compared to native alpha-casein.
(Item 46)
46. The method of any of items 34-45, wherein said kappa casein protein is completely free or substantially reduced in glycosylation compared to native kappa casein.
(Item 47)
47. The method of any of items 34-46, wherein the kappa casein protein has no or substantially reduced phosphorylation compared to native kappa casein.
(Item 48)
The bacterial host cell is Lactococci sp. , Lactococcus lactis, Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis and Bacillus megaterium, Brevibacillus choshinensis, Mycobacterium smegmatis , Rhodococcus erythropolis and Corynebacterium glutamicum, Lactobacilli sp. , Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Synechocystis sp. 6803 and E. 48. The method of any of items 44-47, wherein the method is selected from the group consisting of E. coli.
(Item 49)
49. The method of any of items 44-48, wherein the one or more bacterial host cells secrete recombinantly produced alpha and kappa casein proteins.
(Item 50)
49. The method of any of items 44-48, wherein the one or more bacterial host cells intracellularly retain the recombinantly produced alpha and kappa casein proteins.
(Item 51)
51. The method of any of items 44-50, wherein the production of one or both of the alpha and kappa casein proteins is regulated by an inducible promoter.
(Item 52)
51. The method of any of items 44-50, wherein the production of one or both of the alpha and kappa casein proteins is regulated by a constitutive promoter.
(Item 53)
53. The method of any of items 34-52, wherein the ratio of alpha casein protein to kappa casein protein in said micellar form is between about 1:1 and about 15:1.
(Item 54)
wherein the ratio of alpha casein protein to kappa casein protein in said micellar form is about 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9: 54. The method of item 53, wherein the ratio is 1, 10:1, 11:1, 12:1, 13:1, 14:1 or 15:1.
(Item 55)
55. The method of any of items 34-54, wherein the α-casein protein is αs1 or αs2.
(Item 56)
56. The method of any of items 34-55, wherein said alpha casein protein comprises an amino acid sequence selected from SEQ ID NOS: 1-26 or variants thereof having at least 80% sequence homology.
(Item 57)
56. The method of any of items 34-55, wherein said kappa casein protein comprises an amino acid sequence selected from SEQ ID NOS: 27-40 or variants thereof having at least 80% sequence homology.
(Item 58)
58. The method of any of items 34-57, wherein said liquid colloid comprises a population of said micellar forms of size between about 150 nm and about 500 nm, or between about 100 nm and about 500 nm.
(Item 59)
59. The method of any of items 34-58, wherein a portion of said micellar morphology of said population is less than or between about 10 nm and 100 nm in size.
(Item 60)
60. The method of any of items 34-59, wherein the salt is a calcium salt.
(Item 61)
61. The method of item 60, wherein forming the liquid colloid further comprises adding phosphate and/or citrate.
(Item 62)
A solidified composition formed by any of the methods of items 34 or 41-61.
(Item 63)
A rennet treated curd composition formed by any of the methods of items 33 or 37-62.
(Item 64)
A cheese-like composition formed by any of the methods of items 34-63.
(Item 65)
The cheese-like composition of any of items 1-33, or items 34-64, wherein said alpha casein protein comprises the amino acid sequence of bovine, human, ovine, goat, buffalo, bison, horse or camel alpha casein protein. A cheese-like composition formed by the method of any of .
(Item 66)
65. The cheese composition of any of items 1-33, or the cheese composition of items 34-64, wherein said kappa casein protein comprises the amino acid sequence of a bovine, human, ovine, goat, buffalo, bison, horse or camel kappa casein protein. A cheese composition formed by any of the methods described.
(Item 67)
35. The method of item 34, wherein the rennet treatment setting time is from 1 minute to 6 hours.
(Item 68)
1. A liquid colloid comprising a micellar form, said micelle form comprising recombinant alpha casein protein, recombinant kappa casein protein and at least one salt, said alpha casein protein, said kappa casein protein or a combination thereof comprising: A liquid colloid that completely lacks or has substantially reduced post-translational modifications.
(Item 69)
(a) the alpha-casein protein is completely devoid of or substantially reduced in phosphorylation compared to animal-derived alpha-casein, or (b) the kappa-casein protein is animal-derived or (c) said kappa-casein protein exhibits phosphorylation as compared to animal-derived kappa-casein 69. The liquid colloid of item 68, which is completely absent or substantially reduced, or any combination of (a), (b) and (c).
(Item 70)
70. The liquid colloid of item 68 or item 69, wherein said micellar form is free of beta-casein protein.
(Item 71)
A yogurt composition formed from the liquid colloid of any of items 68-70.
(Item 72)
36. A method according to item 34 or 35, further comprising heating and then cooling said liquid colloid and acidifying said liquid colloid with microorganisms.
(Item 73)
The microorganism is Lactobacillus delbrueckii subsp. 73. The method of item 72, comprising one or more of bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus or Bifidobacterium.
(Item 74)
74. The yogurt composition of item 70, or any of items 72-73, wherein said alpha casein protein comprises the amino acid sequence of bovine, human, ovine, goat, buffalo, bison, horse or camel alpha casein protein. A yogurt composition formed by the method.
(Item 75)
74. The yogurt composition of item 70, or any of items 72-73, wherein said kappa casein protein comprises the amino acid sequence of bovine, human, ovine, goat, buffalo, bison, horse or camelid kappa casein protein. A yogurt composition formed by the method.