JPWO2020190985A5 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2020190985A5 JPWO2020190985A5 JP2021555791A JP2021555791A JPWO2020190985A5 JP WO2020190985 A5 JPWO2020190985 A5 JP WO2020190985A5 JP 2021555791 A JP2021555791 A JP 2021555791A JP 2021555791 A JP2021555791 A JP 2021555791A JP WO2020190985 A5 JPWO2020190985 A5 JP WO2020190985A5
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- chromatography
- liquid
- interest
- recombinant protein
- item
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Description
界面活性剤は、親和性クロマトグラフィーの際の製品品質に有意な影響を与えなかった。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
少なくとも１つのエンベロープウイルスを含有することが知られているか又は含有することが疑われる液体中のエンベロープウイルスを不活化する方法であって、
少なくとも１つのエンベロープウイルスを含有することが知られているか又は含有することが疑われる液体を得ることと；
前記液体を表１の界面活性剤に、ウイルス不活性化を引き起こすのに十分な濃度及び時間で曝露することと、
を含む、方法。
(項目２)
前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有する、項目１に記載の方法。
(項目３)
前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、又はＣＡＳ８５６１８－２０－８から選択される、項目２に記載の方法。
(項目４)
前記液体が、前記界面活性剤に少なくとも３０秒～少なくとも６０分間又はそれ以上曝露される、項目１に記載の方法。
(項目５)
前記液体が、前記界面活性剤に少なくとも１０分間曝露される、項目４に記載の方法。
(項目６)
前記液体が、前記界面活性剤に少なくとも３０分間曝露される、項目４に記載の方法。
(項目７)
前記液体が、前記界面活性剤に少なくとも６０分間又はそれ以上曝露される、項目４に記載の方法。
(項目８)
前記界面活性剤の前記濃度が、その臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の少なくとも２．５倍～少なくとも１０倍又はそれ以上である、項目１に記載の方法。
(項目９)
前記界面活性剤の前記濃度が、そのＣＭＣの少なくとも５倍である、項目８に記載の方法。
(項目１０)
前記界面活性剤の前記濃度が、そのＣＭＣの少なくとも７．５倍である、項目８に記載の方法。
(項目１１)
前記界面活性剤の前記濃度が、そのＣＭＣの少なくとも１０倍である、項目８に記載の方法。
(項目１２)
前記液体の前記界面活性剤への曝露が、少なくとも５℃～２２℃の温度で行われる、項目１に記載の方法。
(項目１３)
前記液体の前記界面活性剤への曝露が、少なくとも５℃の温度で行われる、項目１２に記載の方法。
(項目１４)
前記液体の前記界面活性剤への曝露が、少なくとも１５℃の温度で行われる、項目１２に記載の方法。
(項目１５)
前記液体の前記界面活性剤への曝露が、少なくとも２０℃の温度で行われる、項目１２に記載の方法。
(項目１６)
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、項目１に記載の方法。
(項目１７)
不活性化が、ＴＣＩＤ
５０
アッセイを使用して測定される、項目１に記載の方法。
(項目１８)
前記液体が、目的の組換えタンパク質を含む、項目１に記載の方法。
(項目１９)
前記液体が、回収された宿主細胞培養液である、項目１に記載の方法。
(項目２０)
前記液体が、回収工程、濾過工程、又はクロマトグラフィー工程を含む単位操作からの流出液流、溶出液、プール、保存物、又は保持物由来である、項目１に記載の方法。
(項目２１)
前記液体が、深層濾過、精密濾過、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、マルチモーダルクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーから回収される溶出液である、項目２０に記載の方法。
(項目２２)
前記液体が、回収された細胞培養液、深層濾過からの溶出液、精密濾過からの溶出液、親和性クロマトグラフィーからの溶出液、イオン交換クロマトグラフィーからの溶出液、マルチモーダルクロマトグラフィーからの溶出液、疎水性相互作用クロマトグラフィーからの溶出液、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーからの溶出液を含有するプールである、項目２０に記載の方法。
(項目２３)
前記親和性クロマトグラフィーが、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＡ／Ｇ、又はプロテインＬクロマトグラフィーである、項目２２に記載の方法。
(項目２４)
目的の組換えタンパク質の精製中にエンベロープウイルスを不活性化するための方法であって、
少なくとも１つのウイルスを含有することが知られているか又は含有することが疑われる前記目的の組換えタンパク質を含む液体を得ることと；
前記液体を少なくとも１つの界面活性剤に、前記液体中のエンベロープウイルスの不活性化を引き起こすのに十分な濃度及び時間で曝露することであって、前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有することと；
前記ウイルス不活性化液体を少なくとも濾過工程又はクロマトグラフィー工程を含む少なくとも１つの単位操作に曝露することと、を含む、方法。
(項目２５)
前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、及びＣＡＳ８５６１８－２０－８から選択される、項目２４に記載の方法。
(項目２６)
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、項目２４に記載の方法。
(項目２７)
前記液体が、目的の組換えタンパク質を含む、項目２４に記載の方法。
(項目２８)
前記液体が、回収された宿主細胞培養液である、項目２４に記載の方法。
(項目２９)
前記液体が、回収工程、濾過工程、又はクロマトグラフィー工程を含む単位操作からの流出液流、溶出液、プール、保存物、又は保持物由来である、項目２４に記載の方法。
(項目３０)
前記液体が、深層濾過、精密濾過、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、マルチモーダルクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーから回収される溶出液である、項目２４に記載の方法。
(項目３１)
前記液体が、回収された細胞培養液、深層濾過からの溶出液、精密濾過からの溶出液、親和性クロマトグラフィーからの溶出液、イオン交換クロマトグラフィーからの溶出液、マルチモーダルクロマトグラフィーからの溶出液、疎水性相互作用クロマトグラフィーからの溶出液、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーからの溶出液を含有するプールである、項目２４に記載の方法。
(項目３２)
前記親和性クロマトグラフィーが、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＡ／Ｇ、又はプロテインＬクロマトグラフィーである、項目３１に記載の方法。
(項目３３)
前記クロマトグラフィーが、親和性クロマトグラフィー、プロテインＡクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、アニオン交換クロマトグラフィー、カチオン交換クロマトグラフィー；疎水性相互作用クロマトグラフィー；混合モーダル若しくはマルチモーダルクロマトグラフィー、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーから選択される、項目２４に記載の方法。
(項目３４)
前記液体が、回収された宿主細胞培養液であり、前記単位操作が、深層濾過を含む、項目２４に記載の方法。
(項目３５)
前記液体が、回収された宿主細胞培養液であり、前記単位操作が、精密濾過を含む、項目２４に記載の方法。
(項目３６)
前記液体が、回収された宿主細胞培養液であり、前記単位操作が、プロテインＡ親和性クロマトグラフィーを含む、項目２４に記載の方法。
(項目３７)
前記液体が、プロテインＡ溶出液であり、前記単位操作が、深層濾過を含む、項目２４に記載の方法。
(項目３８)
前記単位操作が、深層濾過を含む、項目２４に記載の方法。
(項目３９)
前記単位操作が、精密濾過を含む、項目２４に記載の方法。
(項目４０)
単離され、精製された目的の組換えタンパク質を製造するための方法であって、
組換えタンパク質を発現する宿主細胞を用いてバイオリアクター内で細胞培養を確立し、前記目的の組換えタンパク質を発現するように前記細胞を培養することと；
前記目的の組換えタンパク質を含有する細胞培養液を回収することと；
前記目的の組換えタンパク質を含有する前記回収された液体を、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有する界面活性剤に、エンベロープウイルスの不活性化を引き起こすのに十分な界面活性剤濃度及び時間で曝露することと；
少なくとも２つの更なる単位操作により、前記目的の組換えタンパク質を含有する前記ウイルス不活化液体を処理することと；
単離され、精製された目的の組換えタンパク質を得ることと、
を含む、方法。
(項目４１)
前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、及びＣＡＳ８５６１８－２０－８から選択される、項目４０に記載の方法。
(項目４２)
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、項目４０に記載の方法。
(項目４３)
項目４０に記載の、単離され、精製された目的の組換えタンパク質。
(項目４４)
項目４０に記載の、単離された目的のタンパク質を含む医薬組成物。
(項目４５)
単離され、精製された目的の組換えタンパク質を製造するための方法であって、
組換えタンパク質を発現する宿主細胞を用いてバイオリアクター内で細胞培養を確立し、前記目的の組換えタンパク質を発現するように前記細胞を培養することと；
前記目的の組換えタンパク質を含有する細胞培養液を回収することと；
少なくとも２つの単位操作により、前記目的の組換えタンパク質を含有する前記液体を処理することであって、少なくとも１つの単位操作中に、前記目的の組換えタンパク質を含有する前記液体を、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有する界面活性剤と、エンベロープウイルスの不活性化を引き起こすのに十分な界面活性剤濃度及び時間で組み合わせる工程が存在することと、
単離され、精製された目的の組換えタンパク質を得ることと、
を含む、方法。
(項目４６)
前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、及びＣＡＳ８５６１８－２０－８から選択される、項目４５に記載の方法。
(項目４７)
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、項目４５に記載の方法。
(項目４８)
少なくとも１つの単位操作が、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、アニオン交換クロマトグラフィー、カチオン交換クロマトグラフィー、マルチモーダルクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、及びヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーから選択される捕捉クロマトグラフィー工程を含む、項目４５に記載の方法。
(項目４９)
少なくとも１つの単位操作が、イオン交換クロマトグラフィー、アニオン交換クロマトグラフィー、カチオン交換クロマトグラフィー、マルチモーダルクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、及びヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーから選択されるポリッシュクロマトグラフィー工程を含む、項目４５に記載の方法。
(項目５０)
少なくとも１つの単位操作が、ウイルス濾過、深層濾過、及びＵＦ／ＤＦから選択される工程を含む、項目４５に記載の方法。
(項目５１)
前記ウイルス不活性化工程を含む前記単位操作が、親和性クロマトグラフィーを含む単位操作の前に行われる、項目４５に記載の方法。
(項目５２)
親和性クロマトグラフィーを含む単位操作が、前記ウイルス不活性化工程を含む前記単位操作の前に行われる、項目４５に記載の方法。
(項目５３)
前記ウイルス不活性化工程を含む前記単位操作が、深層濾過を含む単位操作の前に行われる、項目４５に記載の方法。
(項目５４)
項目４５に記載の、単離され、精製された目的の組換えタンパク質。
(項目５５)
項目４５に記載の、単離された目的のタンパク質を含む医薬組成物。
Surfactants did not significantly affect product quality during affinity chromatography.
The present invention provides, for example, the following items.
(Item 1)
1. A method of inactivating enveloped viruses in a fluid known or suspected to contain at least one enveloped virus, comprising:
obtaining a fluid known or suspected to contain at least one enveloped virus;
exposing the liquid to a surfactant of Table 1 at a concentration and for a time sufficient to cause viral inactivation;
A method, including
(Item 2)
The surfactant is CAS3055-99-0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57-9, CAS250692-65-0, CAS228579- 27-9, CAS349477-49-2, CAS70504-28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, CAS69227-93-6, CAS82494-09- 5, CAS 253678-67-0, CAS 106402-05-5, or CAS 93911-12-7.
(Item 3)
3. The method of item 2, wherein the surfactant is selected from CAS 3055-99-0, CAS 3055-98-9, CAS 9043-30-5, or CAS 85618-20-8.
(Item 4)
The method of item 1, wherein the liquid is exposed to the surfactant for at least 30 seconds to at least 60 minutes or longer.
(Item 5)
5. The method of item 4, wherein the liquid is exposed to the surfactant for at least 10 minutes.
(Item 6)
5. The method of item 4, wherein the liquid is exposed to the surfactant for at least 30 minutes.
(Item 7)
5. The method of item 4, wherein the liquid is exposed to the surfactant for at least 60 minutes or more.
(Item 8)
A method according to item 1, wherein said concentration of said surfactant is at least 2.5 times to at least 10 times or more its critical micelle concentration (CMC).
(Item 9)
9. The method of item 8, wherein said concentration of said surfactant is at least 5 times its CMC.
(Item 10)
9. The method of item 8, wherein said concentration of said surfactant is at least 7.5 times its CMC.
(Item 11)
9. The method of item 8, wherein said concentration of said surfactant is at least 10 times its CMC.
(Item 12)
A method according to item 1, wherein the exposure of said liquid to said surfactant is carried out at a temperature of at least 5°C to 22°C.
(Item 13)
13. The method of item 12, wherein the exposure of the liquid to the surfactant is performed at a temperature of at least 5[deg.]C.
(Item 14)
13. The method of item 12, wherein exposing the liquid to the surfactant is at a temperature of at least 15[deg.]C.
(Item 15)
13. The method of item 12, wherein exposing the liquid to the surfactant is at a temperature of at least 20<0>C.
(Item 16)
A method according to item 1, wherein said concentration is 5 times its CMC and said time is at least 10 minutes.
(Item 17)
The method of item 1 , wherein inactivation is measured using the TCID 50 assay.
(Item 18)
A method according to item 1, wherein said liquid comprises a recombinant protein of interest.
(Item 19)
The method of item 1, wherein the liquid is harvested host cell culture medium.
(Item 20)
The method of item 1, wherein the liquid is from an effluent stream, effluent, pool, storage, or retentate from a unit operation comprising recovery, filtration, or chromatography steps.
(Item 21)
21. According to item 20, wherein the liquid is an eluate recovered from depth filtration, microfiltration, affinity chromatography, ion exchange chromatography, multimodal chromatography, hydrophobic interaction chromatography, or hydroxyapatite chromatography. the method of.
(Item 22)
The liquid is recovered cell culture medium, eluate from depth filtration, eluate from microfiltration, eluate from affinity chromatography, eluate from ion exchange chromatography, eluate from multimodal chromatography. 21. A method according to item 20, which is a pool containing liquid, eluate from hydrophobic interaction chromatography, or eluate from hydroxyapatite chromatography.
(Item 23)
23. The method of item 22, wherein said affinity chromatography is Protein A, Protein G, Protein A/G, or Protein L chromatography.
(Item 24)
A method for inactivating an enveloped virus during purification of a recombinant protein of interest, comprising:
obtaining a fluid containing said recombinant protein of interest known or suspected to contain at least one virus;
exposing the liquid to at least one surfactant at a concentration and for a time sufficient to cause inactivation of enveloped viruses in the liquid, wherein the surfactant comprises CAS 3055-99-0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57-9, CAS250692-65-0, CAS228579-27-9, CAS349477-49-2, CAS70504- 28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, CAS253678-67-0, CAS106402-05- 5, or having a CAS registry number of CAS 93911-12-7;
and exposing said virus-inactivating liquid to at least one unit operation comprising at least a filtration step or a chromatography step.
(Item 25)
25. The method of item 24, wherein the surfactant is selected from CAS 3055-99-0, CAS 3055-98-9, CAS 9043-30-5, and CAS 85618-20-8.
(Item 26)
25. The method of item 24, wherein said concentration is 5 times its CMC and said time is at least 10 minutes.
(Item 27)
25. The method of item 24, wherein said liquid comprises a recombinant protein of interest.
(Item 28)
25. The method of item 24, wherein the liquid is harvested host cell culture medium.
(Item 29)
25. The method of item 24, wherein the liquid is from an effluent stream, effluent, pool, storage, or retentate from a unit operation comprising recovery, filtration, or chromatography steps.
(Item 30)
25. According to item 24, wherein the liquid is an eluate recovered from depth filtration, microfiltration, affinity chromatography, ion exchange chromatography, multimodal chromatography, hydrophobic interaction chromatography, or hydroxyapatite chromatography. the method of.
(Item 31)
The liquid is recovered cell culture medium, eluate from depth filtration, eluate from microfiltration, eluate from affinity chromatography, eluate from ion exchange chromatography, eluate from multimodal chromatography. 25. A method according to item 24, which is a pool containing liquid, eluate from hydrophobic interaction chromatography, or eluate from hydroxyapatite chromatography.
(Item 32)
32. The method of item 31, wherein said affinity chromatography is Protein A, Protein G, Protein A/G, or Protein L chromatography.
(Item 33)
wherein said chromatography is affinity chromatography, protein A chromatography, ion exchange chromatography, anion exchange chromatography, cation exchange chromatography; hydrophobic interaction chromatography; mixed modal or multimodal chromatography, or hydroxyapatite chromatography. 25. The method of item 24, selected from
(Item 34)
25. The method of item 24, wherein the liquid is harvested host cell culture medium and the unit operation comprises depth filtration.
(Item 35)
25. The method of item 24, wherein the liquid is harvested host cell culture medium and the unit operation comprises microfiltration.
(Item 36)
25. The method of item 24, wherein the liquid is harvested host cell culture medium and the unit operation comprises Protein A affinity chromatography.
(Item 37)
25. The method of item 24, wherein said liquid is protein A eluate and said unit operation comprises depth filtration.
(Item 38)
25. The method of item 24, wherein the unit operation comprises depth filtration.
(Item 39)
25. The method of item 24, wherein said unit operation comprises microfiltration.
(Item 40)
A method for producing an isolated and purified recombinant protein of interest, comprising:
establishing a cell culture in a bioreactor with host cells that express the recombinant protein, and culturing the cells to express the recombinant protein of interest;
recovering the cell culture containing the recombinant protein of interest;
CAS3055-99-0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57- 9, CAS250692-65-0, CAS228579-27-9, CAS349477-49-2, CAS70504-28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, Detergents with a CAS registry number of CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, CAS253678-67-0, CAS106402-05-5, or CAS93911-12-7 that cause inactivation of enveloped viruses. at a surfactant concentration and time sufficient for exposure to;
processing said virus-inactivating liquid containing said recombinant protein of interest with at least two additional unit operations;
obtaining an isolated and purified recombinant protein of interest;
A method, including
(Item 41)
41. The method of item 40, wherein said surfactant is selected from CAS 3055-99-0, CAS 3055-98-9, CAS 9043-30-5, and CAS 85618-20-8.
(Item 42)
41. The method of item 40, wherein said concentration is 5 times its CMC and said time is at least 10 minutes.
(Item 43)
Isolated and purified recombinant protein of interest according to item 40.
(Item 44)
41. A pharmaceutical composition comprising the isolated protein of interest according to item 40.
(Item 45)
A method for producing an isolated and purified recombinant protein of interest, comprising:
establishing a cell culture in a bioreactor with host cells that express the recombinant protein, and culturing the cells to express the recombinant protein of interest;
recovering the cell culture containing the recombinant protein of interest;
processing said liquid containing said recombinant protein of interest in at least two unit operations, wherein said liquid containing said recombinant protein of interest is treated with CAS 3055-99 during at least one unit operation. -0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57-9, CAS250692-65-0, CAS228579-27-9, CAS349477-49-2 , CAS70504-28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, CAS253678-67-0, CAS106402 -05-5, or a detergent having a CAS registry number of CAS 93911-12-7, and the presence of the step of combining the detergent at a concentration and for a time sufficient to cause inactivation of the enveloped virus;
obtaining an isolated and purified recombinant protein of interest;
A method, including
(Item 46)
46. The method of item 45, wherein the surfactant is selected from CAS 3055-99-0, CAS 3055-98-9, CAS 9043-30-5, and CAS 85618-20-8.
(Item 47)
46. The method of item 45, wherein said concentration is 5 times its CMC and said time is at least 10 minutes.
(Item 48)
Capture chromatography wherein at least one unit operation is selected from affinity chromatography, ion exchange chromatography, anion exchange chromatography, cation exchange chromatography, multimodal chromatography, hydrophobic interaction chromatography, and hydroxyapatite chromatography 46. A method according to item 45, comprising a lithography step.
(Item 49)
at least one unit operation comprises a polish chromatography step selected from ion exchange chromatography, anion exchange chromatography, cation exchange chromatography, multimodal chromatography, hydrophobic interaction chromatography, and hydroxyapatite chromatography; 46. The method of item 45.
(Item 50)
46. The method of item 45, wherein at least one unit operation comprises a step selected from virus filtration, depth filtration, and UF/DF.
(Item 51)
46. The method of item 45, wherein said unit operation comprising said virus inactivation step is performed before a unit operation comprising affinity chromatography.
(Item 52)
46. The method of item 45, wherein a unit operation comprising affinity chromatography is performed prior to said unit operation comprising said virus inactivation step.
(Item 53)
46. The method of item 45, wherein said unit operation comprising said virus inactivation step is performed before a unit operation comprising depth filtration.
(Item 54)
An isolated and purified recombinant protein of interest according to item 45.
(Item 55)
46. A pharmaceutical composition comprising the isolated protein of interest according to item 45.
Claims (15)
少なくとも１つのエンベロープウイルスを含有することが知られているか又は含有することが疑われる液体を得ることと；
前記液体を、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有する界面活性剤に、ウイルス不活性化を引き起こすのに十分な濃度及び時間で曝露することと、
を含み、
前記界面活性剤の前記濃度が、その臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）の少なくとも２．５倍～少なくとも１０倍又はそれ以上である、
方法。 1. A method of inactivating enveloped viruses in a fluid known or suspected to contain at least one enveloped virus, comprising:
obtaining a fluid known or suspected to contain at least one enveloped virus;
CAS3055-99-0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57-9, CAS250692-65-0, CAS228579-27- 9, CAS349477-49-2, CAS70504-28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, exposure to a detergent having a CAS registry number of CAS253678-67-0, CAS106402-05-5, or CAS93911-12-7 at a concentration and for a time sufficient to cause viral inactivation;
including
said concentration of said surfactant is at least 2.5 times to at least 10 times or more its critical micelle concentration (CMC);
Method.
（ｉ）深層濾過、精密濾過、親和性クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、マルチモーダルクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、もしくはヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーから回収される溶出液である、又は
（ｉｉ）回収された細胞培養液、深層濾過からの溶出液、精密濾過からの溶出液、親和性クロマトグラフィーからの溶出液、イオン交換クロマトグラフィーからの溶出液、マルチモーダルクロマトグラフィーからの溶出液、疎水性相互作用クロマトグラフィーからの溶出液、もしくはヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーからの溶出液を含有するプールであり、必要に応じて、前記親和性クロマトグラフィーが、プロテインＡ、プロテインＧ、プロテインＡ／Ｇ、もしくはプロテインＬクロマトグラフィーである、
請求項１に記載の方法。 Said liquid is from an effluent stream, effluent, pool, storage or retentate from a unit operation comprising recovery, filtration or chromatography steps , preferably said liquid is
(i) eluate recovered from depth filtration, microfiltration, affinity chromatography, ion exchange chromatography, multimodal chromatography, hydrophobic interaction chromatography, or hydroxyapatite chromatography, or
(ii) harvested cell culture fluid, eluate from depth filtration, eluate from microfiltration, eluate from affinity chromatography, eluate from ion exchange chromatography, eluate from multimodal chromatography; , eluate from hydrophobic interaction chromatography, or eluate from hydroxyapatite chromatography, optionally wherein said affinity chromatography is performed on protein A, protein G, protein A/G , or protein L chromatography,
The method of claim 1.
少なくとも１つのウイルスを含有することが知られているか又は含有することが疑われる前記目的の組換えタンパク質を含む液体を得ることと；
前記液体を少なくとも１つの界面活性剤に、前記液体中のエンベロープウイルスの不活性化を引き起こすのに十分な濃度及び時間で曝露することであって、前記界面活性剤が、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有することと；
前記ウイルス不活性化液体を少なくとも濾過工程又はクロマトグラフィー工程を含む少なくとも１つの単位操作に曝露することと、を含み、
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、
方法。 A method for inactivating an enveloped virus during purification of a recombinant protein of interest, comprising:
obtaining a fluid containing said recombinant protein of interest known or suspected to contain at least one virus;
exposing the liquid to at least one surfactant at a concentration and for a time sufficient to cause inactivation of enveloped viruses in the liquid, wherein the surfactant comprises CAS 3055-99-0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57-9, CAS250692-65-0, CAS228579-27-9, CAS349477-49-2, CAS70504- 28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, CAS253678-67-0, CAS106402-05- 5, or having a CAS registry number of CAS 93911-12-7;
exposing the virus-inactivating liquid to at least one unit operation comprising at least a filtration step or a chromatography step;
said concentration is 5 times its CMC and said time is at least 10 minutes;
Method.
（ｉｉ）前記液体が、回収された宿主細胞培養液であり、前記単位操作が、精密濾過を含む、
（ｉｉｉ）前記液体が、回収された宿主細胞培養液であり、前記単位操作が、プロテインＡ親和性クロマトグラフィーを含む、又は
（ｉｖ）前記液体が、プロテインＡ溶出液であり、前記単位操作が、深層濾過を含む、
請求項１０に記載の方法。 (i) said liquid is harvested host cell culture medium and said unit operation comprises depth filtration;
(ii) said liquid is harvested host cell culture medium and said unit operation comprises microfiltration;
(iii) said fluid is harvested host cell culture medium and said unit operation comprises Protein A affinity chromatography, or
(iv) said liquid is protein A eluate and said unit operation comprises depth filtration;
11. The method of claim 10 .
組換えタンパク質を発現する宿主細胞を用いてバイオリアクター内で細胞培養を確立し、前記目的の組換えタンパク質を発現するように前記細胞を培養することと；
前記目的の組換えタンパク質を含有する細胞培養液を回収することと；
前記目的の組換えタンパク質を含有する前記回収された液体を、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有する界面活性剤に、エンベロープウイルスの不活性化を引き起こすのに十分な界面活性剤濃度及び時間で曝露することと；
少なくとも２つの更なる単位操作により、前記目的の組換えタンパク質を含有する前記ウイルス不活化液体を処理することと；
単離され、精製された目的の組換えタンパク質を得ることと、
を含み、
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、方法。 A method for producing an isolated and purified recombinant protein of interest, comprising:
establishing a cell culture in a bioreactor with host cells that express the recombinant protein, and culturing the cells to express the recombinant protein of interest;
recovering the cell culture containing the recombinant protein of interest;
CAS3055-99-0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57- 9, CAS250692-65-0, CAS228579-27-9, CAS349477-49-2, CAS70504-28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, Detergents with a CAS registry number of CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, CAS253678-67-0, CAS106402-05-5, or CAS93911-12-7 that cause inactivation of enveloped viruses. at a surfactant concentration and time sufficient for exposure to;
processing said virus-inactivating liquid containing said recombinant protein of interest with at least two additional unit operations;
obtaining an isolated and purified recombinant protein of interest;
including
A method , wherein said concentration is five times its CMC and said time is at least 10 minutes .
組換えタンパク質を発現する宿主細胞を用いてバイオリアクター内で細胞培養を確立し、前記目的の組換えタンパク質を発現するように前記細胞を培養することと；
前記目的の組換えタンパク質を含有する細胞培養液を回収することと；
少なくとも２つの単位操作により、前記目的の組換えタンパク質を含有する前記液体を処理することであって、少なくとも１つの単位操作中に、前記目的の組換えタンパク質を含有する前記液体を、ＣＡＳ３０５５－９９－０、ＣＡＳ３０５５－９８－９、ＣＡＳ９０４３－３０－５、ＣＡＳ８５６１８－２０－８、ＣＡＳ１８１１３５－５８－０、ＣＡＳ１８１１３５－５７－９、ＣＡＳ２５０６９２－６５－０、ＣＡＳ２２８５７９－２７－９、ＣＡＳ３４９４７７－４９－２、ＣＡＳ７０５０４－２８－８、ＣＡＳ５９０８０－４５－４、ＣＡＳ６９９８４－７３－２、ＣＡＳ１４８６１６－９１－５、ＣＡＳ１４８５６５－５５－３、ＣＡＳ６９２２７－９３－６、ＣＡＳ８２４９４－０９－５、ＣＡＳ２５３６７８－６７－０、ＣＡＳ１０６４０２－０５－５、又はＣＡＳ９３９１１－１２－７のＣＡＳ登録番号を有する界面活性剤と、エンベロープウイルスの不活性化を引き起こすのに十分な界面活性剤濃度及び時間で組み合わせる工程が存在することと、
単離され、精製された目的の組換えタンパク質を得ることと、
を含み、
前記濃度がそのＣＭＣの５倍であり、前記時間が少なくとも１０分である、方法。 A method for producing an isolated and purified recombinant protein of interest, comprising:
establishing a cell culture in a bioreactor with host cells that express the recombinant protein, and culturing the cells to express the recombinant protein of interest;
recovering the cell culture containing the recombinant protein of interest;
processing said liquid containing said recombinant protein of interest in at least two unit operations, wherein said liquid containing said recombinant protein of interest is treated with CAS 3055-99 during at least one unit operation. -0, CAS3055-98-9, CAS9043-30-5, CAS85618-20-8, CAS181135-58-0, CAS181135-57-9, CAS250692-65-0, CAS228579-27-9, CAS349477-49-2 , CAS70504-28-8, CAS59080-45-4, CAS69984-73-2, CAS148616-91-5, CAS148565-55-3, CAS69227-93-6, CAS82494-09-5, CAS253678-67-0, CAS106402 -05-5, or a detergent having a CAS registry number of CAS 93911-12-7, and the presence of the step of combining the detergent at a concentration and for a time sufficient to cause inactivation of the enveloped virus;
obtaining an isolated and purified recombinant protein of interest;
including
A method , wherein said concentration is five times its CMC and said time is at least 10 minutes .
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201962820330P | 2019-03-19 | 2019-03-19 | |
| US62/820,330 | 2019-03-19 | ||
| PCT/US2020/023245 WO2020190985A1 (en) | 2019-03-19 | 2020-03-18 | Alternate detergents for viral inactivation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2022525361A JP2022525361A (en) | 2022-05-12 |
| JPWO2020190985A5 true JPWO2020190985A5 (en) | 2023-03-28 |
Family
ID=70293063
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021555791A Pending JP2022525361A (en) | 2019-03-19 | 2020-03-18 | Alternative surfactants for virus inactivation |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220106573A1 (en) |
| EP (1) | EP3941928A1 (en) |
| JP (1) | JP2022525361A (en) |
| KR (1) | KR20210142670A (en) |
| CN (1) | CN113412270A (en) |
| AR (1) | AR118457A1 (en) |
| AU (1) | AU2020240034A1 (en) |
| CA (1) | CA3133794A1 (en) |
| IL (1) | IL285222A (en) |
| MA (1) | MA55371A (en) |
| MX (1) | MX2021011352A (en) |
| SG (1) | SG11202109801YA (en) |
| TW (1) | TW202102518A (en) |
| WO (1) | WO2020190985A1 (en) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023115027A2 (en) * | 2021-12-16 | 2023-06-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Detergent for viral inactivation |
| WO2024054414A1 (en) | 2022-09-06 | 2024-03-14 | Amgen Inc. | Lean perfusion cell culture methods |
| WO2024059235A2 (en) | 2022-09-16 | 2024-03-21 | Amgen Inc. | A method for harvesting products from perfusion cultures |
| WO2024115344A1 (en) | 2022-11-29 | 2024-06-06 | Merck Patent Gmbh | Method for inactivating enveloped viruses |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6319494B1 (en) | 1990-12-14 | 2001-11-20 | Cell Genesys, Inc. | Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways |
| IL104570A0 (en) | 1992-03-18 | 1993-05-13 | Yeda Res & Dev | Chimeric genes and cells transformed therewith |
| US8609602B2 (en) * | 2010-07-14 | 2013-12-17 | Anatrace Products, Llc | Cleaning solution |
| KR101854310B1 (en) * | 2010-12-15 | 2018-05-04 | 박스알타 인코퍼레이티드 | Viral inactivation using improved solvent-detergent method |
| DK2879691T3 (en) * | 2012-08-06 | 2019-06-11 | Biogen Ma Inc | METHODS AND COMPOSITIONS FOR DISABLING CREATIVE WEAR |
| MX2016006167A (en) | 2013-11-15 | 2016-08-08 | Genentech Inc | Methods for viral inactivation using eco-friendly detergents. |
-
2020
- 2020-03-18 EP EP20719809.4A patent/EP3941928A1/en active Pending
- 2020-03-18 MX MX2021011352A patent/MX2021011352A/en unknown
- 2020-03-18 WO PCT/US2020/023245 patent/WO2020190985A1/en active Application Filing
- 2020-03-18 AU AU2020240034A patent/AU2020240034A1/en active Pending
- 2020-03-18 CN CN202080012904.XA patent/CN113412270A/en active Pending
- 2020-03-18 MA MA055371A patent/MA55371A/en unknown
- 2020-03-18 CA CA3133794A patent/CA3133794A1/en active Pending
- 2020-03-18 KR KR1020217033019A patent/KR20210142670A/en active Search and Examination
- 2020-03-18 US US17/432,156 patent/US20220106573A1/en active Pending
- 2020-03-18 SG SG11202109801Y patent/SG11202109801YA/en unknown
- 2020-03-18 JP JP2021555791A patent/JP2022525361A/en active Pending
- 2020-03-19 AR ARP200100788A patent/AR118457A1/en unknown
- 2020-03-19 TW TW109109156A patent/TW202102518A/en unknown
-
2021
- 2021-07-29 IL IL285222A patent/IL285222A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3094167B2 (en) | Purification method of immune serum globulin | |
| JP2022171925A (en) | Methods of purifying recombinant adamts13 and other proteins, and compositions thereof | |
| JP2019068846A (en) | Virus like particle purification | |
| RU2484135C2 (en) | Method of cleaning intended to produce cleaned virus of vesicular stomatitis from cellular culture | |
| EA001414B1 (en) | Method foe purifying viruses by chromatography | |
| JPS61275210A (en) | Treatment of biomedical product and pharmaceutical product adsorbed to solid phase by viral and pyrogenic inactivator | |
| US7851196B2 (en) | Methods for purifying adeno-associated virus particles | |
| US20070049732A1 (en) | Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
| NO874357L (en) | PURIFICATION OF PICHIA-PRODUCED LIPOFILE PROTEINS. | |
| US20070049734A1 (en) | Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
| JP7086601B2 (en) | A novel purification method for the isolation and commercial production of recombinant TNK-TPA (tenecteplase) | |
| US10626376B2 (en) | Method for isolating and purifying adeno-associated virus particles using salt | |
| JP5080713B2 (en) | Method for producing virus-removed plasma protein composition by porous membrane treatment, virus-removed plasma protein composition, and virus removal method | |
| CN113302197A (en) | Method for purifying antibody including process using activated carbon material | |
| JPWO2020190985A5 (en) | ||
| JP2007523883A5 (en) | ||
| EP0593339B1 (en) | Process preparation of hepatitis A antigen and vaccine | |
| UA44261C2 (en) | METHOD OF OBTAINING VITAMIN K-DEPENDENT PROTEINS USING MEMBRANE CHROMATOGRAPHY METHODS | |
| Gashti et al. | Purification of recombinant vesicular stomatitis virus-based HIV vaccine candidate | |
| KR20200077675A (en) | Method for purification of vaccine virus using affinity chromatography | |
| WO2023182428A1 (en) | Virus purification method | |
| JP4706093B2 (en) | Method for removing and purifying parvovirus | |
| JP2001519790A (en) | Methods for inactivating pathogens, particularly certain viruses, in biological material | |
| JP2002114799A (en) | Method for removing virus | |
| WO2023187691A1 (en) | Methods of purifying an enveloped virus |