JPWO2019026284A1 - Cell culture container, filter, filter cutout sheet, and filter manufacturing method - Google Patents
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Abstract
本実施形態に係る細胞培養容器１は、側面に開口部を有する第１の容器１０及び第２の容器２０と、第１の容器の開口部を覆うフィルター３０とを有し、フィルター３０は、端部に粘着層を有し、各容器の開口部は、フィルター３０を介して、対向させて連結される。フィルター３０の粘着層３２により、ピンセットが粘着層３２に接着し、フィルター３０を簡易に操作可能である。また、フィルター３０の孔径は、細胞は通さないが培養液は通すサイズであるため、各容器間で培養液の移動が可能である。The cell culture container 1 according to the present embodiment includes a first container 10 and a second container 20 each having an opening on a side surface, and a filter 30 that covers the opening of the first container. The container has an adhesive layer at the end, and the openings of the respective containers are connected so as to face each other via the filter 30. With the adhesive layer 32 of the filter 30, the tweezers are attached to the adhesive layer 32, and the filter 30 can be easily operated. Further, since the pore size of the filter 30 is such that cells cannot pass through but the culture solution passes through, the culture solution can move between the respective containers.
Description
本発明は、細胞培養容器、フィルター、フィルター切抜き用シート、及びフィルターの製造方法に関するものである。 TECHNICAL FIELD The present invention relates to a cell culture container, a filter, a filter cutout sheet, and a method for manufacturing a filter.
例えば、特許文献１には、対象物に貼着して通過する気体をろ過するためのフィルターであって、シート状の不織布と、前記不織布の一方面の少なくとも一部に粘着剤が塗布されてなる粘着層とを備え、前記粘着剤は、主剤と硬化剤とを含む２液混合型ポリウレタン系粘着剤であり、前記主剤は、分子量が１５０００〜２５０００のポリウレタンポリオールを含み、前記硬化剤は、前記主剤１００重量部に対して２．５〜４．５重量部含まれており、前記粘着層は、前記粘着剤塗布前の前記不織布の表面レベルから２０〜４０μｍ突出する、フィルターが開示されている。 For example, Patent Document 1 discloses a filter for adhering to an object and filtering gas passing therethrough, wherein a sheet-shaped nonwoven fabric and an adhesive is applied to at least a part of one surface of the nonwoven fabric. And a pressure-sensitive adhesive layer, wherein the pressure-sensitive adhesive is a two-component mixed polyurethane-based pressure-sensitive adhesive containing a main agent and a curing agent, the main agent contains a polyurethane polyol having a molecular weight of 15,000 to 25,000, and the curing agent is A filter is disclosed, which comprises 2.5 to 4.5 parts by weight with respect to 100 parts by weight of the main agent, and the adhesive layer projects from the surface level of the nonwoven fabric before application of the adhesive by 20 to 40 μm. There is.
また、特許文献２には、透明な熱可塑性プラスチック材料によって成形する第１、第２の容器を備えてなり、前記第１、第２の容器は、それぞれ横向きの開口を有する上部開放の有底容器であって、前記第１、第２の容器に形成する連結機構を介して前記各開口を対向させるようにして連結すると、前記各開口が水密に連通することを特徴とする培養容器が開示されている。 Further, Patent Document 2 includes first and second containers formed of a transparent thermoplastic material, and the first and second containers each have an upper opening and a bottom with a sideways opening. Disclosed is a culture container, characterized in that, when the openings are connected so as to face each other via a connection mechanism formed in the first and second containers, the openings are communicated in a watertight manner. Has been done.
例えば、細胞培養等に使用するフィルターは小さく、ピンセットにより傷つけることでフィルター機能の低下を招いたり、また、クリーンベンチ内で取り扱う際に、風に飛ばされたりする。そして、その薄さから強度が低く、折れ曲がることがあり、操作性が悪かった。本発明は、このような課題を解決するために、より操作性の高いフィルターを提供することを目的とする。 For example, a filter used for cell culture or the like is small, and it may be damaged by tweezers to deteriorate the filter function, or may be blown by the wind when handled in a clean bench. And because of its thinness, it has low strength, may be bent, and has poor operability. An object of the present invention is to provide a filter with higher operability in order to solve such a problem.
本発明に係る細胞培養容器は、側面に開口部を有する第１の容器及び第２の容器と、前記第１の容器の開口部を覆うフィルターと、を有し、前記フィルターは、端部に粘着層を有し、前記各開口部は、前記フィルターを介して、対向させて連結される。 A cell culture container according to the present invention has a first container and a second container having an opening on a side surface, and a filter covering the opening of the first container, and the filter has an end portion. An adhesive layer is provided, and the openings are connected to face each other through the filter.
本発明に係るフィルターは、シート状のフィルター本体と、前記フィルター本体の外縁部に設けられた粘着層とを有する。 The filter according to the present invention has a sheet-shaped filter body and an adhesive layer provided on an outer edge portion of the filter body.
好適には、前記フィルター本体は、直径が１ｍｍ以上１３ｍｍ以下である。 Suitably, the said filter main body is 1 mm or more and 13 mm or less in diameter.
好適には、前記粘着層は、前記フィルター本体の両面に形成される。 Preferably, the adhesive layer is formed on both sides of the filter body.
好適には、前記粘着層は、前記フィルターの片面に対して５％以上２０％以下の面積割合である。 Preferably, the adhesive layer has an area ratio of 5% or more and 20% or less with respect to one surface of the filter.
好適には、前記粘着層は、着色されている。 Suitably, the said adhesive layer is colored.
本発明に係るフィルター切抜き用シートは、切り出されるフィルター領域とそれ以外の領域とに跨って粘着シートを有する。 The filter cutout sheet according to the present invention has the pressure-sensitive adhesive sheet across the cutout filter region and the other region.
本発明に係るフィルターの製造方法は、フィルター切抜き用シートにおいて、フィルター領域とそれ以外の領域とに跨って粘着シートを貼るステップと、前記フィルター切抜き用シートからフィルター領域を切り出すステップと前記切り出すステップにおいて、切り出されたフィルターを前記粘着シートから剥がすステップと、前記剥がすステップにおいて、剥がされたフィルターの端部に粘着層を形成するステップとを有する。 The method for manufacturing a filter according to the present invention, in the filter cutting sheet, in the step of sticking a pressure-sensitive adhesive sheet across the filter region and other regions, in the step of cutting out the filter region from the filter cutting sheet and in the step of cutting out. The method includes a step of peeling the cut out filter from the pressure-sensitive adhesive sheet, and a step of forming a pressure-sensitive adhesive layer on an end portion of the peeled filter in the peeling step.
本発明によれば、フィルター本体の外縁部に設けられた粘着層により、粘着層を対象物に粘着させておくことにより、クリーンベンチ内でフィルターが飛ばされることを防ぎ、さらに、ピンセットで操作する際は、粘着層とピンセットを接触させるだけでフィルターを持ち上げることができるため、フィルターをピンセットで挟むことで傷つける虞がない。さらに、粘着層によりフィルター本体の外縁部が補強されることでフィルターが折れ曲がることを防ぐことができる。つまり、本発明によれば、より操作性の高いフィルターを提供することができる。 According to the present invention, the pressure-sensitive adhesive layer provided on the outer edge of the filter body prevents the filter from being blown in the clean bench by adhering the pressure-sensitive adhesive layer to the object, and is further operated with tweezers. At this time, the filter can be lifted just by bringing the adhesive layer and tweezers into contact with each other, so that there is no possibility of being damaged by sandwiching the filter with tweezers. Further, the adhesive layer reinforces the outer edge portion of the filter body, so that the filter can be prevented from bending. That is, according to the present invention, a filter with higher operability can be provided.
以下、本発明に係る実施形態の構成を、図面を参照して説明する。ただし、本発明の範囲は、図示例に限定されるものではない。
図１は、本実施例における細胞培養容器１の構成を説明する図である。
図１に例示するように、細胞培養容器１は、第１の容器１０、第２の容器２０、フィルター３０、及びＯリング４０により構成されている。
第１の容器１０は、側面に開口部１２を有する。具体的には、開口部１２は、第１の容器１０の側面の開口と、開口の周りに形成された、第２の容器２０に連結する連結部１２０を有する。また、開口部１２の開口は、フィルター３０により覆われている。
第２の容器２０も第１の容器１０と同様に、側面に開口部２２を有する。具体的には、開口部２２は、第２の容器２０の側面の開口と、開口の周りに形成された、第１の容器１０に連結する連結部２２０を有する。各開口部は、フィルター３０を介して、対向させて連結される。具体的には、連結部１２０は、連結部２２０に適合する形状であり、連結部１２０に連結部２２０が勘合し、第１の容器１０と第２の容器２０とは連結される。より具体的には、連結部１２０と連結部２２０とは、フィルター３０とＯリング４０とを挟持して連結する。Hereinafter, a configuration of an embodiment according to the present invention will be described with reference to the drawings. However, the scope of the present invention is not limited to the illustrated examples.
FIG. 1 is a diagram for explaining the configuration of the cell culture container 1 in this embodiment.
As illustrated in FIG. 1, the cell culture container 1 is composed of a first container 10, a second container 20, a filter 30, and an O-ring 40.
The first container 10 has an opening 12 on the side surface. Specifically, the opening 12 has an opening on the side surface of the first container 10 and a connecting portion 120 formed around the opening and connected to the second container 20. The opening of the opening 12 is covered with the filter 30.
Similarly to the first container 10, the second container 20 also has an opening 22 on its side surface. Specifically, the opening 22 has an opening on the side surface of the second container 20 and a connecting portion 220 formed around the opening and connected to the first container 10. The openings are connected so as to face each other via the filter 30. Specifically, the connecting portion 120 has a shape that fits the connecting portion 220, the connecting portion 220 fits into the connecting portion 120, and the first container 10 and the second container 20 are connected. More specifically, the connecting portion 120 and the connecting portion 220 sandwich and connect the filter 30 and the O-ring 40.
図２（ａ）は、細胞培養容器１のＡ−Ａ‘断面を例示する図であり、（ｂ）は、フィルター３０の装着例を説明する図である。
第１の容器１０及び第２の容器２０は、細胞を培養する容器であり、細胞及び培養液を収容する。具体的には、図２（ａ）に例示するように、第１の容器１０には細胞Ａ及びその培養液Ａが収容され、第２の容器２０には、細胞Ａとは異なる細胞Ｂ及びその培養液Ｂが収容される。細胞を個別に培養する際は、各開口部には専用の蓋がされ、単独で各容器を使用できる。第１の容器１０及び第２の容器２０を接続すると、各細胞Ａ及び細胞Ｂの分泌物質を含む各培養液は、フィルター３０を介して第１の容器１０と第２の容器２０との間を移動する。これにより、各細胞からの分泌物質の相互作用の観察が可能である。FIG. 2A is a diagram illustrating an AA′ cross section of the cell culture container 1, and FIG. 2B is a diagram illustrating an example of mounting the filter 30.
The first container 10 and the second container 20 are containers for culturing cells and contain cells and a culture solution. Specifically, as illustrated in FIG. 2A, the first container 10 contains cells A and the culture solution A thereof, and the second container 20 contains cells B and cells B different from the cells A. The culture solution B is stored. When culturing cells individually, each opening has a dedicated lid, and each container can be used independently. When the first container 10 and the second container 20 are connected, each culture solution containing the secreted substance of each cell A and cell B is passed between the first container 10 and the second container 20 via the filter 30. To move. This makes it possible to observe the interaction of secretory substances from each cell.
(フィルター)
図３は、（ａ）は、フィルター３０を例示する図であり、（ｂ）は、フィルター３０のＢ−Ｂ‘断面を説明する図である。
図３（ａ）に例示するように、フィルター３０は、直径１ｍｍ以上５０ｍｍ以下の円形であり、孔径が０．０１μｍ以上１ｍｍ以下である。より好ましくは、フィルター３０の直径は、１３ｍｍ以下である。フィルター３０の孔径は、一般的な細胞よりも小さいため、フィルター３０は、培養細胞を通過させない。一方、細胞から分泌されるエクソソームの大きさは３０〜１５０ｎｍであり、孔径よりも小さいため、フィルター３０を介して第１の容器１０と第２の容器２０とを移動可能である。フィルター３０は、薄いポリマーフィルムに細孔が分散したトラックエッチドメンブレンであり、素材は、ポリカーボネート製、厚み６〜５０μmである。なお、トラックエッチドメンブレンとは、ポリマー素材への強力な重イオンの照射することで形成された直線のトラックに、ケミカルエッチングにより細孔があけられたメンブレンをいう。(filter)
FIG. 3A is a diagram illustrating the filter 30, and FIG. 3B is a diagram illustrating a BB′ cross section of the filter 30.
As illustrated in FIG. 3A, the filter 30 has a circular shape with a diameter of 1 mm or more and 50 mm or less and a pore diameter of 0.01 μm or more and 1 mm or less. More preferably, the diameter of the filter 30 is 13 mm or less. Since the pore size of the filter 30 is smaller than that of general cells, the filter 30 does not allow cultured cells to pass through. On the other hand, the size of exosomes secreted from cells is 30 to 150 nm, which is smaller than the pore size, so that the first container 10 and the second container 20 can be moved through the filter 30. The filter 30 is a track-etched membrane in which pores are dispersed in a thin polymer film, and the material thereof is made of polycarbonate and has a thickness of 6 to 50 μm. The track-etched membrane is a membrane in which pores are formed by chemical etching in a straight track formed by irradiating a polymer material with strong heavy ions.
（粘着層）
フィルター３０は、図３（ｂ）に例示するように、シート状のフィルター本体３４と、フィルター本体３４の両面において、外縁部に設けられた粘着層３２とを有する。粘着層３２は、フィルター３０の片面に対して５％以上２０％以下の面積割合で設けられている。具体的には、粘着層３２は、第１の容器１０と第２の容器２０との間を移動する培養液に影響を及ぼさないよう、また、フィルターの機能を阻害しないよう、フィルター本体のうち、培養液が通過する部分を避けて、円周端部に設けられている。(Adhesive layer)
As illustrated in FIG. 3B, the filter 30 has a sheet-shaped filter body 34 and adhesive layers 32 provided on the outer edges of both sides of the filter body 34. The adhesive layer 32 is provided in an area ratio of 5% or more and 20% or less with respect to one surface of the filter 30. Specifically, the adhesive layer 32 is included in the filter main body so as not to affect the culture solution moving between the first container 10 and the second container 20 and not to hinder the function of the filter. It is provided at the circumferential end, avoiding the portion where the culture solution passes.
図２（ｂ）に例示するように、第１の容器１０と第２の容器２０とフィルター３０とＯリング４０とを結合させた場合、第１の容器１０と第２の容器２０とがＯリング４０を押さえつけ、Ｏリング４０が第１の容器１０と第２の容器２０とフィルター３０とに４方向に密着することで培養液の液漏れを防止している。つまり、フィルター３０は、第１の容器１０と、Ｏリング４０を介した第２の容器２０とに挟まれることで、開口部１２の開口を覆うように配置される。すなわち、培養液に影響を及ぼさないようにするためにも、粘着層３２は、連結部１２０とフィルター３０との接着範囲を超えないことが望ましい。 As illustrated in FIG. 2B, when the first container 10, the second container 20, the filter 30, and the O-ring 40 are combined, the first container 10 and the second container 20 are O. The ring 40 is pressed down and the O-ring 40 is brought into close contact with the first container 10, the second container 20, and the filter 30 in four directions to prevent the culture solution from leaking. That is, the filter 30 is arranged so as to cover the opening of the opening 12 by being sandwiched between the first container 10 and the second container 20 via the O-ring 40. That is, it is desirable that the adhesive layer 32 does not exceed the adhesion range between the connecting portion 120 and the filter 30 so as not to affect the culture solution.
フィルター３０の粘着層３２は、粘着剤により構成され、粘着剤の種類は、例えば、アクリル系粘着剤、シリコーン系粘着剤、またはゴム系粘着剤である。粘着層３２は、両面粘着テープを貼ることにより形成されてもよいし、粘着剤を塗布することにより形成されてもよい。 The adhesive layer 32 of the filter 30 is composed of an adhesive, and the type of the adhesive is, for example, an acrylic adhesive, a silicone adhesive, or a rubber adhesive. The adhesive layer 32 may be formed by applying a double-sided adhesive tape or may be formed by applying an adhesive.
フィルター３０が粘着層３２を有することにより、操作性の悪い小さなフィルターでも、ピンセット等を粘着層３２に接触させるだけで、粘着層３２とピンセットとが接着し、ピンセットでフィルター３０を簡単に持ち上げることができる。つまり、培養液を通すフィルター領域をピンセットが触れることがないため、フィルター領域が傷つかず、また、フィルター領域を通過する培養液にも影響を及ぼすことがない。 Since the filter 30 has the adhesive layer 32, even with a small filter having poor operability, the adhesive layer 32 and the tweezers are bonded to each other only by bringing the tweezers into contact with the adhesive layer 32, and the filter 30 can be easily lifted by the tweezers. You can That is, since the tweezers do not touch the filter area through which the culture solution passes, the filter area is not damaged and the culture solution passing through the filter area is not affected.
また、クリーンベンチ内では、空気が循環しているため、フィルター本体３４だけでは、飛ばされる虞があるが、粘着層３２をクリーンベンチ内の特定の場所に粘着させておくことでこれを防ぐことができる。 In addition, since air circulates in the clean bench, there is a risk that the filter body 34 may be blown away, but this can be prevented by adhering the adhesive layer 32 to a specific place in the clean bench. You can
そして、フィルター本体３４は、その薄さのため、フィルター本体３４の周縁部が反りやすいが、粘着層３２が周縁部を補強することで、フィルター本体３４の強度が増し、周縁部の反りを防ぐことも可能である。 Since the filter body 34 is thin, the peripheral portion of the filter body 34 is easily warped, but the adhesive layer 32 reinforces the peripheral portion to increase the strength of the filter body 34 and prevent the peripheral portion from warping. It is also possible.
フィルター３０を細胞培養容器１に装着後は、ピンセットと粘着層３２との分離が必要であるため、分離容易な程度の粘着力で十分であるが、粘着層３２は、細胞培養容器１に装着時、つまり、Ｏリング４０と、第１の容器１０とにより挟まれ、粘着層３２に圧力がかけられた場合は、圧力がかけられた部分の粘着力が増す。
さらに、粘着層３２は、着色されていてもよい。粘着層３２が着色されていることにより、粘着部分が判別できるため、ピンセットを接触させるべき位置が操作者にとって把握し易く、より操作性が増す。
また、粘着層３２は、フィルター３０の外周を一周するように設けられているが、これに限らず、ピンセットにより持ち上げられる程度の粘着範囲であれば、フィルター３０の外周において、点在してもよいし、フィルター３０の外周の一部分にのみ設けられていてもよい。After the filter 30 is attached to the cell culture container 1, it is necessary to separate the tweezers and the adhesive layer 32. Therefore, an adhesive force that is easy to separate is sufficient, but the adhesive layer 32 is attached to the cell culture container 1. When, that is, when the pressure is applied to the adhesive layer 32 by being sandwiched between the O-ring 40 and the first container 10, the adhesive force of the pressed portion increases.
Furthermore, the adhesive layer 32 may be colored. Since the adhesive layer 32 is colored, the adhesive portion can be identified, so that the operator can easily understand the position where the tweezers should be brought into contact, and the operability is further enhanced.
Further, although the adhesive layer 32 is provided so as to go around the outer periphery of the filter 30, the present invention is not limited to this, and the adhesive layer 32 may be scattered on the outer periphery of the filter 30 as long as it is an adhesive range that can be lifted by tweezers. Alternatively, it may be provided only on a part of the outer periphery of the filter 30.
図４は、フィルター切抜き用シート３からフィルター３０を切り出す場面を例示する図である。
フィルター３０は、フィルター切抜き用シートから作られているが、図４（ａ）に例示するように、フィルター切抜き用シートからフィルター３０をレーザーカッター等で切り出す際、フィルター３０が切り出され、脱落する虞がある。そこで、フィルター切抜き用シートに粘着シート５０を設け、切り出されたフィルター３０の脱落を防止する。具体的には、図４（ｂ）に例示するように、粘着シート５０は、フィルター切抜き用シートのうち、フィルター３０となる領域と、それ以外の領域とに跨るように貼り付けられている。粘着シート５０が貼られたフィルター切抜き用シート３からフィルター３０を切り出す際、粘着シート５０が貼られているため、フィルター３０の形にカットしても、フィルター３０がフィルター切抜き用シート３から脱落することはない。そして、使用の際には、フィルター３０を粘着シート５０から引剥がすことでフィルター切抜き用シート３から分離できる。粘着シート５０の粘着剤は、引き剥がしの際フィルター３０に残らないため、細胞培養容器１に装着してもコンタミネーションを起こさない。FIG. 4 is a diagram illustrating a scene in which the filter 30 is cut out from the filter cutting sheet 3.
The filter 30 is made of a filter cutting sheet, but as illustrated in FIG. 4A, when the filter 30 is cut from the filter cutting sheet with a laser cutter or the like, the filter 30 may be cut out and fall off. There is. Therefore, an adhesive sheet 50 is provided on the filter cutout sheet to prevent the cutout filter 30 from falling off. Specifically, as illustrated in FIG. 4B, the pressure-sensitive adhesive sheet 50 is attached so as to straddle the region serving as the filter 30 and the other region in the filter cutout sheet. When the filter 30 is cut out from the filter cutout sheet 3 to which the adhesive sheet 50 is attached, the adhesive sheet 50 is attached, so that even if the filter 30 is cut into the shape of the filter 30, the filter 30 falls off from the filter cutout sheet 3. There is no such thing. Then, at the time of use, the filter 30 can be separated from the filter cutting sheet 3 by peeling it off from the adhesive sheet 50. Since the adhesive of the adhesive sheet 50 does not remain on the filter 30 when peeled off, it does not cause contamination even when attached to the cell culture container 1.
図５は、フィルター３０の製造方法を説明するフローチャートである。
図５に例示するように、ステップ１００（Ｓ１００）において、フィルター切抜き用シート３のうち、フィルター領域とフィルター領域以外の領域とに跨って粘着テープ５０を貼る。
ステップ１０５（Ｓ１０５）において、フィルター切抜き用シート３からフィルター領域の型を抜く。
ステップ１１０（Ｓ１１０）において、フィルター本体３４を粘着テープ５０から引き剥がす。
ステップ１１５（Ｓ１１５）において、フィルター本体３４の両面に粘着剤を塗布し、粘着層３２を形成する。FIG. 5 is a flowchart illustrating a method of manufacturing the filter 30.
As illustrated in FIG. 5, in step 100 (S100), the adhesive tape 50 is attached across the filter cutout sheet 3 to the filter region and the region other than the filter region.
In step 105 (S105), the mold for the filter region is removed from the filter cutting sheet 3.
In step 110 (S110), the filter body 34 is peeled off from the adhesive tape 50.
In step 115 (S115), an adhesive is applied to both surfaces of the filter body 34 to form the adhesive layer 32.
図６は、細胞培養容器１の使用方法を説明するフローチャートである。
図６に例示するように、ステップ２００（Ｓ２００）において、第１の容器１０と第２の容器２０との開口をそれぞれ専用蓋で閉じ、各容器にて異なる細胞を独立して培養する。
ステップ２０５（Ｓ２０５）において、第１の容器１０と第２の容器２０とをＯリング４０とフィルター３０とを介して接続する。接続の際、フィルター３０の粘着層３２は、第１の容器１０、第２の容器２０、及びＯリング４０により圧着され、圧着された粘着層３２部分は、粘着力を増す。これにより、フィルター３０は、細胞培養容器１に固定される。
ステップ２１０（Ｓ２１０）において、細胞培養容器１を専用アダプタへ装着し、顕微鏡にセットする。細胞培養容器１の底板は、透明であるため顕微鏡観察が可能である。
ステップ２１５（Ｓ２１５）において、各容器について再度単体で使用したい場合は細胞培養容器１の使用方法（Ｓ２０）は、Ｓ２２０へ移行し（Ｓ２１５：Ｙｅｓ）、それ以外の場合は（Ｓ２１５：Ｎｏ）、終了する。
ステップ２２０（Ｓ２２０）において、第１の容器１０と第２の容器２０とを分離し、フィルター３０とＯリング４０とを外し、各開口に蓋をすることで再度単体使用可能である。FIG. 6 is a flowchart illustrating a method of using the cell culture container 1.
As illustrated in FIG. 6, in step 200 (S200), the openings of the first container 10 and the second container 20 are each closed with a dedicated lid, and different cells are independently cultured in each container.
In step 205 (S205), the first container 10 and the second container 20 are connected via the O-ring 40 and the filter 30. At the time of connection, the adhesive layer 32 of the filter 30 is pressure-bonded by the first container 10, the second container 20, and the O-ring 40, and the pressure-bonded adhesive layer 32 portion increases the adhesive force. As a result, the filter 30 is fixed to the cell culture container 1.
In step 210 (S210), the cell culture container 1 is attached to a dedicated adapter and set in a microscope. Since the bottom plate of the cell culture container 1 is transparent, it can be observed with a microscope.
In step 215 (S215), if it is desired to use each container again as a single unit, the method of using the cell culture container 1 (S20) shifts to S220 (S215: Yes), otherwise (S215: No), finish.
In step 220 (S220), the first container 10 and the second container 20 are separated, the filter 30 and the O-ring 40 are removed, and each opening is covered with a lid, so that it can be used again as a single unit.
以上説明したように、直径１３ｍｍの小さなフィルター３０でも、フィルター本体３４の周縁部に粘着層３２の枠が設けられているため、ピンセットと粘着層３２とが粘着することで、フィルター３０を簡易に操作することが可能になる。また、フィルター３０は、細胞培養容器１に装着されるが、フィルター３０の両面の粘着層３２が第１の容器１０と第２の容器２０とに粘着することで装着後のずれを防ぐことができる。 As described above, even in the small filter 30 having a diameter of 13 mm, since the frame of the adhesive layer 32 is provided on the peripheral portion of the filter body 34, the tweezers and the adhesive layer 32 adhere to each other, so that the filter 30 can be easily formed. It becomes possible to operate. Further, the filter 30 is mounted on the cell culture container 1, but the adhesive layers 32 on both sides of the filter 30 adhere to the first container 10 and the second container 20 to prevent the displacement after mounting. it can.
なお、上記実施形態では、粘着層３２は、フィルター３０の両面に形成されているが、一方の面にのみ形成されていてもよい。
また、上記実施形態のフィルター３０の製造方法において、フィルター本体３４をフィルター切抜き用シート３から分離した後に、粘着層３２を形成しているが、これに限定されるものではなく、例えば、フィルター切抜き用シート３のフィルター領域の端部に予め粘着剤を塗布し、粘着層３２を形成した後に、フィルター３０をフィルター切抜き用シート３から切り出してもよい。Although the adhesive layer 32 is formed on both surfaces of the filter 30 in the above embodiment, it may be formed on only one surface.
Further, in the method for manufacturing the filter 30 of the above-described embodiment, the adhesive layer 32 is formed after separating the filter body 34 from the filter cutting sheet 3, but the invention is not limited to this, and for example, the filter cutting The filter 30 may be cut out from the filter-cutting sheet 3 after the pressure-sensitive adhesive is applied in advance to the end of the filter region of the sheet 3 for use to form the adhesive layer 32.
上記実施形態では、細胞培養容器１にフィルター３０を装着しているが、これに限らず、例えば、図７（ａ）に例示するように、フィルターチップ、フィルターチューブにフィルター３０を装着してもよい。具体的には、フィルター３０の粘着層３２をフィルターチップ、又はフィルターチューブの内部の縁に粘着させて装着してもよい。従来では、フィルターが装着された状態でこれらの器具は提供されているが、フィルター３０を用いれば、自身で装着可能であるため、フィルターの交換が簡易にでき、また、フィルターが装着されて提供されていないような、少量多品種の器具にも対応可能である。 In the above embodiment, the filter 30 is attached to the cell culture container 1, but the present invention is not limited to this, and for example, even if the filter 30 is attached to a filter chip or a filter tube as illustrated in FIG. 7A. Good. Specifically, the adhesive layer 32 of the filter 30 may be attached by being adhered to the inner edge of the filter chip or the filter tube. Conventionally, these devices are provided with the filter attached, but if the filter 30 is used, the device can be attached by itself, so that the filter can be easily replaced and provided with the filter attached. It can also be used for small-quantity, multi-kind appliances that are not used.
また、図７（ｂ）は、既存のフィルターが埋め込まれたマルチウェルプレートの平面図とＣ−Ｃ‘断面図を例示する図であるが、これは、フィルターを埋め込んだ状態で容器の成型が行われるため、成型時にフィルターが撓んだり、しわが寄ったりする。しかし、成型された容器に後付けでフィルター３０を装着できるようにすれば、撓んだり、しわが寄ったフィルター３０のみを交換可能であり、さらに、粘着層３２により固定されるため、装着されたフィルター３０にしわが寄ったりすることもない。 In addition, FIG. 7B is a diagram illustrating a plan view and a CC′ cross-sectional view of a multiwell plate in which an existing filter is embedded. This shows that the container is molded with the filter embedded. As a result, the filter bends or wrinkles during molding. However, if the filter 30 can be attached to the molded container afterwards, only the bent or wrinkled filter 30 can be replaced, and the filter 30 is fixed by the adhesive layer 32, so that the filter 30 is attached. The filter 30 is not wrinkled.
さらに、上記実施形態では、第１の容器１０と第２の容器２０とはフィルター３０とＯリング４０とを挟持して連結していたが、これに限定されず、第１の容器１０と第２の容器２０とはフィルター３０のみを挟持して連結してもよい。この場合、粘着層３２がＯリング４０の代わりに培養液の液漏れを防止する。Ｏリング４０の代替としてフィルター３０を使用する場合において、フィルター３０の粘着層３２は、円周端部を一周するように粘着層３２が形成されていることが好ましい。 Furthermore, in the above-described embodiment, the first container 10 and the second container 20 are connected by sandwiching the filter 30 and the O-ring 40, but the present invention is not limited to this, and the first container 10 and the second container 20 are connected. Only the filter 30 may be sandwiched and connected to the second container 20. In this case, the adhesive layer 32 prevents leakage of the culture solution instead of the O-ring 40. When the filter 30 is used as a substitute for the O-ring 40, the adhesive layer 32 of the filter 30 is preferably formed such that the adhesive layer 32 surrounds the circumferential end portion.
図８（ａ）は、細胞培養容器１へのインサート７の装着例を表す図であり、（ｂ）は、インサート７の平面図及び正面図であり、（ｃ）は、インサート７へのフィルター３０の装着例を表す図である。
インサート７は、図８（ａ）に例示されるように、細胞培養容器１に装着される容器である。具体的には、インサート７は、第１の容器１０または第２の容器２０内に挿入されて第１の容器１０または第２の容器２０と一体となる。本例においては、第２の容器２０にインサート７が装着される場合について説明する。インサート７の深さは、第１の容器１０及び第２の容器２０の深さよりも浅く、インサート７を装着した際、第１の容器１０または第２の容器２０とインサート７との間には隙間が存在する。また、図８（ｂ）に例示するように、インサート７の底面は、開口７０と、開口の枠７２を有する。図８（ｃ）に例示するように、フィルター３０は、インサート７の開口７０を覆うように装着される。具体的には、フィルター３０の粘着層３２は、インサート７の開口の枠７２に粘着する。フィルター３０の粘着層３２の範囲は、インサート７の開口の枠７２の範囲内である。
インサート７にフィルター３０を装着することにより、インサート７内で培養される細胞と、インサート７の外、且つ第２の容器２０内で培養される細胞とにより分泌される物質の相互作用を観察できる。8A is a diagram showing an example of mounting the insert 7 in the cell culture container 1, FIG. 8B is a plan view and a front view of the insert 7, and FIG. 8C is a filter for the insert 7. It is a figure showing the mounting example of 30.
The insert 7 is a container attached to the cell culture container 1, as illustrated in FIG. Specifically, the insert 7 is inserted into the first container 10 or the second container 20 to be integrated with the first container 10 or the second container 20. In this example, a case where the insert 7 is mounted on the second container 20 will be described. The depth of the insert 7 is shallower than the depths of the first container 10 and the second container 20, and when the insert 7 is mounted, the depth between the first container 10 or the second container 20 and the insert 7 is small. There is a gap. Further, as illustrated in FIG. 8B, the bottom surface of the insert 7 has an opening 70 and a frame 72 of the opening. As illustrated in FIG. 8C, the filter 30 is mounted so as to cover the opening 70 of the insert 7. Specifically, the adhesive layer 32 of the filter 30 adheres to the frame 72 of the opening of the insert 7. The range of the adhesive layer 32 of the filter 30 is within the range of the frame 72 of the opening of the insert 7.
By attaching the filter 30 to the insert 7, it is possible to observe the interaction of substances secreted by the cells cultured in the insert 7 and the cells cultured outside the insert 7 and in the second container 20. ..
以上、本発明に係る実施形態について説明したが、これらに限定されるものではなく、発明の趣旨を逸脱しない範囲内において、種々の変更、追加等が可能である。 The embodiments according to the present invention have been described above, but the present invention is not limited to these, and various modifications and additions can be made without departing from the spirit of the invention.
１ 細胞培養容器
３ フィルター切抜き用シート
７ インサート
１０ 第１の容器
１２ 開口部
２０ 第２の容器
２２ 開口部
３０ フィルター
３２ 粘着層
３４ フィルター本体
４０ Ｏリング
５０ 粘着シート
７０ 開口
７２ 枠
１２０、２２０ 連結部1 Cell Culture Container 3 Sheet for Filter Cutout 7 Insert 10 First Container 12 Opening 20 Second Container 22 Opening 30 Filter 32 Adhesive Layer 34 Filter Main Body 40 O-ring 50 Adhesive Sheet 70 Opening 72 Frame 120, 220 Connection
Claims (8)
前記第１の容器の開口部を覆うフィルターと、
を有し、
前記フィルターは、端部に粘着層を有し、
前記各開口部は、前記フィルターを介して、対向させて連結される
細胞培養容器。A first container and a second container having an opening on a side surface;
A filter covering the opening of the first container,
Have
The filter has an adhesive layer at the end,
A cell culture container in which the openings are connected to face each other through the filter.
前記フィルター本体の外縁部に設けられた粘着層と
を有する
フィルター。Sheet-shaped filter body,
An adhesive layer provided on the outer edge of the filter body.
請求項２に記載のフィルター。The filter according to claim 2, wherein the filter body has a diameter of 1 mm or more and 13 mm or less.
請求項２に記載のフィルター。The filter according to claim 2, wherein the adhesive layers are formed on both surfaces of the filter body.
請求項２に記載のフィルター。The filter according to claim 2, wherein the adhesive layer has an area ratio of 5% or more and 20% or less with respect to one surface of the filter.
請求項２に記載のフィルター。The filter according to claim 2, wherein the adhesive layer is colored.
フィルター切抜き用シート。A filter cutting sheet having an adhesive sheet extending over the cut-out filter region and the other region.
前記フィルター切抜き用シートからフィルター領域を切り出すステップと、
前記切り出すステップにおいて、切り出されたフィルターを前記粘着シートから剥がすステップと、
前記剥がすステップにおいて、剥がされたフィルターの端部に粘着層を形成するステップと
を有するフィルターの製造方法。In the filter cutting sheet, a step of sticking the adhesive sheet across the filter region and the other region,
A step of cutting out a filter region from the filter cutting sheet,
In the cutting step, a step of peeling the cut filter from the pressure-sensitive adhesive sheet,
A step of forming an adhesive layer on an end portion of the peeled filter in the peeling step.
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