JPS63196585A - プリノン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ｌ且Δ列吐 本発明は、ブリノン誘導体、特に、ブリノン環の２−位
において置換フェニル基を有するブリノン誘導体に関す
る。本発明は、さらに、該化合物の製造方法、該製造に
おける中間体、該化合物の治療薬としての用途および該
化合物を含有する医薬組成物に関する。本発明の化合物
は、カルモジュリン鈍感サイクリックＧＭＰホスホジェ
ステラーゼの抑制剤であり、かかる抑制が有効であると
考えられる症状の治療に有用である。本発明の化合物は
、気管支拡張剤であり、しかるに、ぜん息および気管支
炎のごとき慢性の可逆性閉塞肺疾患の治療に有用である
。加えて、本発明の化合物は、抗−アレルギー活性を示
し、しかるに、アレルギーぜん息、アレルギー性鼻炎、
じんま疹および感応性腸症候群のごときアレルギー性疾
患の治療に有用である。さらには、本発明の化合物は、
血管拡張剤であり、しかるに、アンギナ、高血圧および
うっ血性心不全の治療に有用である。

発明の開示 本発明は、式（Ｉ）： ［式中、Ｒ１は炭素数１〜６のアルキルまたは炭素数２
〜６のアルケニル、およびＲ１は水素またはヒドロキシ
を意味するコ で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供
する。

好適には、Ｒ′は炭素数２〜５のアルキル、例えば、エ
チル、ｎ〜プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチ
ルまたはペンチルである。

好適には、Ｒ′は炭素数３〜５のアルケ、ニル、例えば
、アリル、ブテニルまたはペンテニルである。

好ましくは、Ｒ１はｎ−プロピルである。

好適には、Ｒ２は水素である。適当には、Ｒ″はヒドロ
キシである。

本発明の個々の化合物は、 ２−（２−プロポキシフェニル）−６−プリノン、２−
（２−エトキシフェニル）−６−プリノン、２−（２−
ブトキシフェニル）−６−プリノン、２−（２−イソブ
トキシフェニル）−６−プリノン、２−（２−プロポキ
シフェニル）プリン−６，８−ジオン、 ２−（２−メトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン
、 ２−（２−エトキシフェニル）プリン−６，８−ジ第２
−（２−ブトキンフェニル）プリン−６，８−ジオン、 ２−（２−イソブトキンフェニル）プリン−６，８−ジ
オン、および ２−（２−アリルオキシフェニル）プリン−６，８−ジ
オン およびその医薬上許容される塩である。

本発明は、あらゆる互変異性体形の式（１）の化合物を
包含する。例えば、Ｒ″がヒドロキシである式（１）の
化合物は、互変異性のケト形で存在しうる。

Ｒ″が水素である式（Ｉ）の化合物は、塩酸、臭化水素
酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、マレイン酸、乳酸
、アスコルビン酸、フマール酸、シュウ酸、メタンスル
ホン酸およびエタンスルホン酸のごとき酸と医薬上許容
される塩を形成しうる。

式（１）の化合物は、アルカリ金属、例えば、ナトリウ
ムおよびカリウムのごとき金属イオンと、またはアンモ
ニウムイオンと医薬上許容される塩を形成しうる。

式（１）の化合物またはその医薬上許容される塩を、ヒ
トおよび他の哺乳動物の治療に用いるには、該化合物を
、通常、標準的製剤方法に従って、医薬組成物として処
方する。

式（Ｉ）の化合物およびその医薬上許容される塩は、前
記疾患を治療するのための標準的方法、例えば、経口的
、非経口的、経皮的、直腸的、吸入またはバッカル投与
を介して投与することができる。

経口投与またはバッカル投与で活性である式（Ｈの化合
物およびその医薬上許容される塩は、液体、シロップ、
錠剤、カプセル剤およびロゼンジとして処方することが
できる。経口液体製剤は、一般に、例えば、エタノール
、グリセリンまたは水のような液体担体中の該化合物ま
たは塩の懸濁液または溶液、およびフレーバー剤まｎは
着色剤とからなる。組成物が錠剤形である場合、固体製
剤の調製に通常用いられるいずれの医薬担体も用いろこ
とができる。かかる担体の例には、ステアリン酸マグネ
シウム、澱粉、セルロース、ラクトースおよびサッカロ
ースを包含する。該組成物がカプセル剤形である場合、
通常のいずれのカプセル化ら適当であり、例えば、ハー
ドゼラチンカプセル殻において前記担体を用いることが
できる。

該組成物がソフトゼラヂン殻のカプセル剤形である場合
、分散液または懸濁液の調製に通常用いられるいずれの
医薬担体、例えば、水性ガム、セルロース、ケイ酸塩ま
たは油を用いてもよく、ソフトゼラチンカプセル殻中に
配合できる。

代表的な非経口組成物は、所望により、例えば、ポリエ
チレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、
落花生油またはゴマ油のような非経口的に許容される油
を含有してもよく、滅菌水性または非水性担体における
該化合物または塩の溶液または懸濁液からなる。

代表的な坐剤製剤は、この方法で投与した場合に活性で
ある式（Ｔ）の化合物またはその医薬上許容される塩と
、例えば、高分子グリコール、ゼラチン、カカオバター
または他の低融点植物性ワックスまたは脂肪のような結
合剤および／または潤滑剤とからなる。

代表的な経皮製剤は、例えば、クリーム、軟膏、ローシ
ョンまたはペーストのような通常の水性または非水性ビ
ヒクルからなるか、または薬剤を添加したプラスター、
パッチまたはｉ膜形である。

代表的な吸入用組成物は、ジクロロジフルオロメタンま
たはトリクロロフルオロメタンのような通常の噴射剤を
用いるエアロゾル形、または吸入用の粉末形において投
与できる液体、懸濁液またはエマルジョン形である。

好ましくは、該組成物は、患者自身が単一用量を服用で
きるような単位投与形、例えば、錠剤、カプセル剤また
は計量エアロゾルである。

経口投与用の各投与単位は、適当には、０．００１１／
ｋｇないし３ｍ９／ｋｇ、好ましくは、０．００５　Ｈ
／　ｋｇないし１．５尺９／ｋｇの式（１）の化合物ま
たは遊離塩基として算定したその医薬上許容される塩を
含有し、非経口投与用の各投与単位は、適当には、ｏ、
ｏｏｔ巧／ｋｇないし１ｍ９／ｋｇを含有する。

経口投与用の１日の投与量は、０　、００１　ｆｆ９．
／ｋｇないし１２ｘ９／ｋｇの式（１）の化合物または
遊離塩基として算定したその医薬上許容される塩が適当
である。非経口投与用の１日の投与量は、０．００１ｚ
ｇ／ｋＨないし４１９／ｋｇ、例えば、０．００５ｍ９
／ｋｇないしＩｘｇ／ｋｇの式（１）の化合物または遊
離塩基として算定したその医薬上許容される塩が適当で
ある。活性成分は、要すれば、例えば、１日に１ないし
８回、または注入によって投与することができる。本発
明の組成物は、気管支拡張剤であり、例えば、ぜん息お
よび気管支炎のごとき慢性の可逆性閉塞肺疾患において
有用である。本発明の組成物は、血管拡張活性を有して
おり、アンギナ、高血圧およびうっ血性心不全の治療に
おいて有用である。かかる症状は、経口的、局所的、直
腸的、非経口的投与または吸入法によって処理できろ。

吸入法による投与について、投与量はバルブで調節され
、要すれば、投与され、および大人の場合、０．１〜５
．０　ｍｇの範囲の式（１）の化合物またはその医薬上
許容される塩であることが都合よい。

本発明の化合物は、池の医薬活性化合物と共に、例えば
、組み合わせて、同時にまたは連続的に投与することが
できる。本発明の化合物および他の活性化合物または化
合物類は、適宜に医薬組成物に処方される。式（１）の
化合物と共に医薬組成物に含有させることのできる化合
物類の例は、例えば、イソプレナリン、イソエタリン、
サルブタモール、フェニレフリンおよびエフェドリンの
ごとき交感神経作用アミン類または、例えば、テオフィ
リンおよびアミノフィリンのごときキサンチン誘導体の
ような気管支拡張剤、例えば、ジナトリウムクロモグリ
セードのような抗アレルギー性剤、ヒスタミンＨ８−拮
抗剤、例えば、ヒドララジンのような血管拡張剤、例え
ば、カプトグリルのようなアンジオテンシン変換酵素抑
制剤、例えば、硝酸イソソルビド、トリ硝酸グリセリル
およびテトラ硝酸ペンタエリスリトールのような抗狭心
症剤、例えば、キニジン、プロカインアミドおよびリグ
ノカインのような抗不整脈剤、例えば、ベラパミルおよ
びニフェジピンのようなカルシウム拮抗剤、デアシトお
よび関連化合物、例えばベンドロフルアジド、クロロチ
アジド、クロロタリドン、ヒドロクロロチアジドのよう
な利尿剤、例えば、フルセミドおよびトリアムテレンの
ような他の利尿剤、および、例えば、ニトラゼパム、フ
ルラゼパムおよびジアゼパムのような鎮静剤である。

もう一つの態様において、本発明は、 （ａ）　Ｒ″が水素である化合物の場合、式（■）二〇 ［式中、Ｒ′は前記と同じコ で示される化合物を、ホルミル化剤と反応させるか、 （ｂ）　Ｒ”がヒドロキシである化合物の場合、面記の
式（ｎ）の化合物を、カルボニル化剤と反応させるか、 （ｃ）Ｒ”が水素である化合物の場合、式（■）：Ｒ ［式中、Ｒ１は前記と同じ］ で示される化合物を、４−アミノ−５−イミダゾールカ
ルボキシアミドと反応させるか、または（ｄ）Ｒ”が水
素である化合物の場合、式（■）：［式中、Ｒ′は前記
と同じ］ で示される化合物を環化し、その後所望により、医薬上
許容される塩を形成させることを特徴とする式（１）の
化合物またはその医薬上許容される塩の製造方法を提供
する。

式（ＩＩ）の化合物およびホルミル化剤の反応は、溶媒
なしでまたは炭素数１〜４のアルコール、ピリジンまた
はＮ−メチルピロリドンのごとき適当な溶媒の存在下、
室温または高温、例えば、５０〜２５０℃、好ましくは
、【００〜２００℃にて適宜行なわれる。ホルミル化剤
の例は、ギ酸、炭素数１〜４のアルキルホルメート、ホ
ルムアミド、炭素数１〜４のアルキルホルムアミド、ホ
ルムアミジン、炭素数１〜４のアルキルホルムアミジン
またはトリ（炭素数【〜４）アルキルオルトホルメート
を包含する。式（ＩＩ）の化合物は、酢酸ナトリウムの
存在下、酢酸ホルムアミジンと反応させることが好適で
ある。好ましくは、式（ＩＩ）の化合物を酸付加塩形、
例えば、硫酸塩形で用い、過剰のホルミル化剤、例えば
、ホルムアミドと反応させることである。

式（ｎ）の化合物およびカルボニル化剤の反応は、溶媒
なしでまたはハロゲン炭化水素、ピリジンまたはトルエ
ンのごとき適当な溶媒中、室温または高温、例えば、５
０〜２５０℃にて適宜行なわれる。適当なカルボニル化
剤は、尿素、ジ（炭素数１〜４）アルキルカルボネート
、炭素数１〜４のアルキルクロロホルメート、ホスゲン
、トリクロロメチルクロロホルメートまたはカルボニル
ジイミダゾールを包含する。

適当には、式（ＩＩＩ）の化合物を、４−アミノ−５−
イミダゾールカルボキシアミドの酸付加塩、例えば、そ
の塩酸塩と、溶媒なしでまたは炭素数１〜４のアルコー
ル、ピリジンまたはＮ−メチルピロリドンのごとき適当
な溶媒中、高温、例えば、５０〜２５０℃にて反応させ
る。

適当には、式（■）の化合物を、酸または塩基の存在下
、水性炭素数１〜４のアルコール、水、トルエン、ハロ
ゲン炭化水素またはアセトニトリルのごとき適当な溶媒
中、高温、例えば、５０〜１５０℃にて加熱することに
よって環化する。

式ＣｒＶ’）の化合物は、４−アミノ−５−イミダゾー
ルカルボキシアミドを式（■）： ［式中、ｔ、ｌはハロゲンおよびＲ１は面記と同じコで
示される化合物と反応させることによって製造できる。

適当には、ＬＬは塩素または臭素である。適当には、式
（Ｖ）の化合物を、室温または高温、例えば、５０−１
００℃にて、トルエン、アセトニトリルまたはハロゲン
化炭化水素、例えば、クロロホルムまたはジクロロメタ
ンのごとき適当な溶媒中、所望により、ピリジンまたは
トリエチルアミンのごとき塩基の存在下、４−アミノ−
５−イミダゾールカルボキシアミドと反応させ、式（Ｉ
Ｖ）の化合物を形成させ、系内にて環化し、Ｒ２が水素
である式（Ｉ）の化合物を形成させるか、または前記の
ように単離し、その後環化するかである。

式（Ｉｆ）および式（Ｉ［［）の化合物は知られており
、または常法において、英国特許第１３３８２３５号か
ら製造できろ。

Ｒ２が水素である式（１）の化合物の医薬上許容される
酸付加塩は、常法において、式（１）の化合物の対応す
る塩基から製造できる。例えば、該塩基を、炭素数１〜
４のアルカノール中で酸と反応させても、またはイオン
交換樹脂を用いてもよい。

式（Ｉ）の化合物の塩は、イオン交換樹脂を用いて相互
変換してもよい。しかるに、医薬上許容できない塩は、
医薬上許容される塩に変換できる場合に用いることがで
きる。

式（１）の化合物の医薬上許容される塩基付加塩は、標
準法、例えば、式（Ｄゐ化合物の溶液を塩基の溶液と反
応させることによって製造できる。

次に生物学試験方法、データーおよび実施例を供し、本
発明を説明する。

気管支拡張−ｉｎ　ｖｉｖ。

ダンキン・ハートレイ（Ｄｕｎｋｉｎ　Ｈａｒｔｌｅｙ
）系の雄のモルモット（５００〜６００ｇ）を、サガタ
ール（Ｓ　ａｇａｔａｌＸベンドパルビタール・ナトリ
ウム）６０ｇ９／ｋｇで麻酔した。古典的なコンテット
ーロスラー（Ｋｏｎｚｅｔｔ−Ｒｏｓｓｌｅｒ）法（ナ
ウニンーシュミデベルグス・アルヒーフ・フェアー・エ
クスベリメンテレ・パトロギー・ラット・ファルマコロ
ギー（Ｎａｕｎｙｎ−９ｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ　Ａ
ｒｃｈ、　ＥＸｐ、　Ｐａｔｈ。

Ｐ　ｈａｒｍａｋ、）、ｖｏｌ　　Ｉ　９５　ニア　１
〜７４（１９４０））の変法を用いることによりて、気
道抵抗を測定した。Ｕ４６６１９（９，１１−メタノエ
ポキシ−ＰＧＩ（、）を、２．５ナノモル／分の速度で
静脈内に注入し、この操作により、安定な気管支収縮状
態を得た（基礎となる気道抵抗から約１２０％増加）。

試験化合物を静脈内ポーラス注入により投与し、その後
の気管支収縮のピーク抑制を記録した。

Ｕ４６６１９誘発の気管支収縮を５０％減少さ仕るのに
必要な化合物の用量を、ＢＤ５０として示す。これらの
結果は、’ｉｎ　ｖｉｖｏにおける抗気管支収縮剤活性
を示す。

実施例の化合物　　　　Ｂ　Ｄ　ｓｏ（μｎｏｔ／　ｋ
ｇ）１　　　　　　　　　３．６ ２　　　　　　　　　６．５ ３　　　　　　　　　３．８ ４　　　　　　　　　５．３ ５　　　　　　　　　　　　　　１．０７　　　　　　
　　　　　　　　３．６８　　　　　　　　　　　　　
　１．５９　　　　　　　　　　　　　４．５ 直管拡張−ｉｎ　ｖｉｖ。

雄のウィスター・ラット（Ｗｉｓｔｅｒ　ｒａｔｓ）３
００　ｇを、ナトリウム・５−エチル−５−（！−メチ
ルプロピル）−２−チオパルピッレート／ナトリウム・
ベンドパルビトン混合物（各々、６２．５および２２　
、５　ｍ９／　ｋｇ）を腹腔内投与し、麻酔した。気管
にカニユーレを挿入し、ラットを°０．に富んだエアー
で自発呼吸させた（５　ｍ９１分）。頚動脈より血圧を
記録し、化合物の投与用に頚静脈にカニユーレを挿入し
た。電気毛布を用いて、動物の体温を３７°Ｃに保持し
た。腹部大動脈を、工大静脈から腎動脈の末端方向に分
離し、血液を潅流ポンプに供給するために中心方向に、
かつ定圧での後馬蹄側壁の潅流のためにに末端方向にカ
ニユーレを挿入した。潅流回路を、ｐＨを７．４に調整
した０、９％塩化ナトリウム溶液に溶解させた５％ウシ
血清アルブミンで充たした。最初、ポンプ速度を■０お
よび１５ｘ１２／分の間にセットし、後馬蹄側壁血流圧
を全身性循環圧と調和させた。セット後、該圧は、残り
の実験の間も不変のままであった。ポンプ速度（後馬蹄
側壁面流に等しい）を変化させて、馬蹄側壁の血管抵抗
におけろ変化を評価した。

すべての化合物を静脈内ポーラスとして投与し、用量一
応答曲線から後馬蹄側壁血流（Ｅ　Ｄ　ＨＱ　ｓｏ）に
おける５０％増加を得るに必要な用量を、μモル／ｋｇ
で測定した。以下の結果が得られた：実施例の化合物　
　　Ｅ　Ｄ　ＨＱ　１ｏｃｊｌ　ｍｏｌ／　ｋｇ）１　
　　　　　　　　　１０　、８ ５　　　　　　　　　３．７ 抗アレルギー活性−ｉｎ　ｖｉｖ。

雄のハートレイ系モルモット（体重２５０〜３００ｇ）
を、ヘルクスハイマー法の変法（ジャーナル・オブ・フ
ィジオロジイカル（Ｊ　、Ｐｈｙｓｉｏｌ、）、１１７
：２５１〜２５８．１９５２）に従って、オボアルブミ
ン（ＯＡ）に対して能動的に感作させた。

等張食塩水中に調製した５、０％ＯＡ溶液０　、７　ｘ
１２を、動物に筋肉内注射した。感作の４週間後、気管
を摘出し、ら旋形片に切り取った。各気管を半分に切断
し、１０ｍ１２水−ジャケット組織浴中に置き、絹縫合
を介して生物学組織クリップで、等緊張３２録用の応力
置換変換器に取り付けた。各々もう半分の気管を、対応
する薬剤処理組織に関する対照として供した。気管を、
以下の配合（ｍＭ）の修正クレブス−ヘンセライト溶液
浴に入れた：ＮａＣｆ２，１１８；　ＫＣＬ４．７；　
ＭｇＳＯ４，１，２；Ｃａ（Ｊ！ｔ、２．５；　ＮａＨ
ＣＯｘ、２５：　ＫＨｔＰＯ，。

１．２；およびグルコース１０°。生理的緩衝液を３７
℃に保持し、連続的に９５％ｏ、１５％ＣＯ。

で通気した。組織調製物を２ｇの受動的緊張下に置き、
６０分間平衡状態にし、その間、新鮮な緩衝液で１５分
毎に洗浄した。各組織は、予めｌμＭメクロフェナミン
酸（ｍｅｃｌｏｆｅｎａｎｉｃ　ａｃｉｄ）　ｌ　１ｔ
　Ｍで４５分間処理した。

組織は、ＯＡ添添加−３０分間、予め試験化合物（１０
０μＭ）またはビヒクル（０，４ｎＭ　Ｎａ０Ｈ）で処
理した。０Ａ（０，１Ｈｇ／ｉＱ）をすべての組織に加
えて、その収縮を１５分間モニターした。先の実験は、
このＯＡ濃度が最大の抗原誘発収縮を発現することを示
した。実験の柊わりに、最ら効果的な濃度（１０μＭ）
のカルバコールを各組織に加え、ＯＡＡ発応答をこの対
照収縮の％として表した。試験化合物は基底緊張（ｂａ
ｓａｌ　ｔｏｎｅ）を減少させるため、カルバコールに
対する絶対応答（すなわち、ｇ張力）は、試験化合物を
加えた後の緊張およびカルバコールの存在下で発生した
最大緊張の間の差異として算定されろ。試験化合物の効
果を評価するために、ＯＡ添加の２および１２分後に収
縮度を算定した。薬剤処理組織のＯＡＡ発収縮は、ビヒ
クル処理した対の対照の応答％として表した。

実施例１の化合物（１００μＭ）および実施例５（１０
０μＭ）両方の化合物を、ＯＡ投投与−投与した場合、
それらは有意に基底緊張を減少させた。

カルバコールに対する最大応答％として、実施例１の化
合物は１７±３％まで、実施例５の化合物は２４±７％
まで基底緊張を減少させた。ビヒクル処理対照組織への
ＯＡ投与により、３分以内に最大（カルバコールに対す
る最大応答の６７±２％：Ｎ＝４）に到達する収縮か発
現し、１５分間の観察期間にわたって持続した。ＯＡ添
加の２分後、実施例１の化合物（１００μＭ）で３０分
間処理した組織の応答は、対照の７８±１２％（Ｎ、Ｓ
、。

ｐ＞ｏ、ｏ５；Ｎ＝４）であり、実施例５の化合物（１
００μＭ）で処理した組織の収縮応答は、対照ｆ７）７
９＋３％（Ｐ＜０．０５：Ｎ＝４）であった。ＯＡ投与
の１２分後、収縮力は、実施例１の化合物または実施例
５の化合物で処理した組織において、各々、対照値の４
６±９％または６０±４％まで減退した（Ｐ＜０．０５
）。

結果は、４回の実験の平均±Ｓ、Ｅ、とじて示す。対照
および薬剤処理群の平均間の統計学的有意差は、対ステ
ニープント・ｔ・テストを用いて測定した。

これらの結果は、実施例１および５の化合物が、モルモ
ットから単離した気管の抗原誘発収縮を抑制することを
示す。

体重４００〜６００ｇの成長した雄の一アルビハハート
レイ系モルモットを、前記操作に従って、ＯＡに対して
能動的に感作させた。肺力学を測定するために、ポリエ
チレン製カテーテルを麻酔（ナトリウム・ベンドパルビ
タール、３５　ｙｇ／　ｋｇ、腹腔内）した動物の気管
中に挿入し、呼吸タコメーターに接続した差圧変換器を
組み合わせた熱呼吸タコメーターを介して、気流を測定
した。気流および経肺圧信号を、フローシグナルを積分
するオンーライン肺力学コンピューターに送り、１回の
呼吸量を得た。アムダーおよびミード（Ａｍｄｕｒおよ
びＭ　ｅａｄ）法（アメリカン・ジャーナル・オブ・フ
ィジオロジイ（Ａｍ、　Ｊ　、Ｐｈｙｓｉｏｌ、）、１
９２：３６４〜３６８．１９５　Ｂ）にしたがって、全
肺抵抗（Ｒし）および肺の動的コンプライアンス（ＣＤ
ＹＮ　）を等容点にて算定した。

１滴のボレエチレングリコール４００を加えた２　５　
ｍＭ　Ｎ　ａＨＣＯ３中、試験化合物を１１００ｎの濃
度まで溶解させた。動物の体重に基づき、適量ｒｒ＋　
−Ｉｔ　’ａ　ｌ、　Ｒ仝−ｈｌ−ｍＮ’ｋＬ　９　５
＋ｎｋＪ　　Ｎ＊ＴＪ（’、（’１−”；’　１ｉＱま
でとした。試験化合物の十二指腸内投与用に、腹部にお
いて小さな正中線切開を行い、十二指腸を露出し、プラ
スステック製デユープに取り付けたバタフライ針を挿入
した。すべての溶液は、同容量（１１１２）に調整し、
バタフライ針を介して投与し、ついで蒸留水０　、５　
ｘＱを投与した。ついで波計を除去し、腹部切開部をス
テープルで閉じ、熱損失を防いだ。

ＯＡエアロゾルを生成し、ｌ呼吸に付き約０゜３７５μ
Ｑ送達した。吸入の間、２０ｃ＋ａ水の最大胸膜圧が得
られるように、圧力、流速および感度をセットした。試
験化合物投与の１時間後、気管カニユーレを介して、モ
ルモットに０Ａ（０，５ｍｙ／ｘ１２）を５回吸入によ
り投与し、ＣＤＹＩＩおよびＲＬの変化を１０分間モニ
ターした。ＣＤＹＮおよび　ＲＬについての基線値は、
各々、０　、’４〜０　、６　ｘＱ／ｃｍ水および０．
１−０．２水／Ｉｔ（１７秒であった。

ビヒクル処理を行い、麻酔したモルモットへのＯＡ投与
は、５分間にわたってゆっくりと進行する気管支収縮を
発現させた。ＯＡ投与の５分後、Ｒ５は１６２±４０％
増加し、Ｃ０ＹＮは５１±２６％（Ｎ＝５）減少した。

肺機能に、Ｆ５けろこれらの変動は、観察期間の残りの
５分間にわたって安定していた。ＯＡ投与の６０分前に
、１００μモル／ｋｇの実施例１の化合物を十二指腸内
に投与ずろこと（Ｎ”４）は、抗原−誘発気管支収縮を
有意に減少させ、ＯＡ投与の５分後、ＣＤＹＮは基線か
ら変動仕ず（Ｐ＜０．０１　　ｖｓ、ビヒクル処理対照
）、ＲＬにおける増加は５１±２６％に制限された（Ｐ
＜ｏ、ｏｓ　　Ｖｓ、ビヒクル処理対照）。

結果は、４回の実験の平均±Ｓ、Ｅ、とじて表す。

対照および薬剤処理群の平均間の統計的有意差は、非対
ステニープント・ｔ・テストを用いて測定した。

ホスホジェステラーゼ（ＰＤＥ）の抑制屠殺場から８個
のブタの心臓／肺を集め、肺動脈または大動脈を切開し
、過剰脂肪を除去できるまで氷上にて保持した。組織１
２０ｇを切開した。

他に断らない限り、すべての操作は４℃にて行った。切
開後、動脈を液体窒素中にてフラッシュ冷凍し、必要ま
で一７０℃にて貯蔵した。均質化の際、組織を液体窒素
中にて冷却し、ハンマーでたたいて小片に粉砕した。つ
いで、組織を、１５ｍＭビス−トリス（Ｂ　ｌ５−ＴＲ
Ｉｓ）、Ｌａｇ／ｘ１２０イペブチン（Ｉｅｕｐｅｐｔ
　ｉｎ）およびアンチペイン（ａｎｔ　１ｐａｉｎ）、
２μｇ／ｍＱペプスクチンＡ（ｐｅｐｓＬａＬｉｎ　Ａ
）、５μＭベンズアミジン（ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ）
、２ｍＭＥＤＴＡ（エチレンジアミンテトラ酢酸）およ
び２ＩＩＩＭジチオトレイトール（ｄｉｔｈｉｏｔｈｒ
ｅｉｔｏｌ）、ＰＩ（６，５にて均質化した。均質化を
行う直前に、フェニルメタンスルホニルフルオリド（Ｐ
ＭＳＦｏ）を最終濃度５０μＭまで加えた。ついで、均
質物を３００００ｇにて２０分間遠心分離した。上澄液
を、まずグラスウールついで０．４５μｍフィルターを
介して濾過した。ついで、得られた′ａｍを、均質化緩
衝液で予め平衡にした６０ｘ１２ＤＥＡＥ−セファロー
ゼＣＬ−６Ｂ（ビーズサイズ４５〜１６５ミクロンのジ
エチルアミノエチル・セルロース）（ファーマシア）（
Ｐ　ｈａｒｍａｃｉａ）カラムに注いだ。該カラムを、
地響（ｌ／淫干妨１５ｎｔ１７ヤ沙浄１７、ＰＤＥ活性
を、１００ｍＭ酢酸ナトリウムを含有する均質化緩衝液
１５０１Ａ（ｉで溶出した。６つの２５ａＱフラクシヨ
ンを集めた。全体を通して流速はＢｏｘ（１／時間であ
った。

フラクション２および３をプールし、ビス−トリス、Ｍ
ｇ　ＣＱ、、ＣａＣＱｘを、各々、５０ｍ〜１．７ｍＭ
および５１ＩＩＭの最終濃度まで加えた。ＰＭＳＦ。

ロイペプチン、アンチペインおよびペプスタチンＡもま
た、これらの成分に関する前記濃度にて加えた。このプ
ールした試料のｐＨを６．９に修正した。

該試料を、３ｘ（１／時間の流量で直列にセットしたカ
ラムに注いだ。直列式の第１カラムは、５Ｎカルモジュ
リン−アガロース・カラム（シグマ）であり、第２は１
　、５　ｔｘＱシバクロン・ブルー・３ＧＡ−アガロー
ス・カラム（シグマ）である。両方のカラムとも、５０
ｍＭ　ビス−トリス、５ｍＭ　ＭｇＣＬ、５ｍＭベンズ
アミジン、２ＩＩＩＭ　ジチオトレイトール、ｐＨ６，
９で予め平衡にした。試料を注いだ後、カラムを平衡緩
衝液２０＋４で洗浄した。

ついでシバクロン・ブルー−アガロース・カラムを取り
外し、以下に示すような種々の緩衝液で洗浄した。（緩
衝液Ａは、５０ｍＭ　ビス−トリス１．５ｍＭベンズア
ミジン１．２ｍ〜１ジヂ第１・レイト　一ル　ｐｒ−ｔ
７．ｏである） ２０ｍＭ　緩衝液Ａ＋２Ｍ　ＮａＣＱ、５ｍＭ　＼４　
ｇ　Ｇ　（！ｔ２［１ｍＭ　４５街液Ａ＋２Ｍ　ＮａＣ
（１２０ｍＭ　緩衝液Ａ＋２Ｍ　ＮａＣＣ，ｌｏｍＭ　
ＥＤＴＡカラムに結合したＰＤＥ活性を、２ＭＮａＣ（
！、１０ｍＭＥＤＴＡおよび１０ｍＭ　ｃＧＭＰを含有
する緩衝液Ａの２．５村部で８°回溶出した。ＰＤＥ活
性を有することが認められたフラクションをプールし、
１５ｍＭ２−メルカプトメタノール、２ｍＭＥＤＴＡを
含有する緩衝液Ａ；グリセロール（５０：５０）に対し
て２時間透析することによって、原審量の約３分の１に
まで濃縮した。透析後、フラクションにおけるｃ　Ｇ　
Ｍ　Ｐの濃度は、透析緩衝液のＰＤ−１０・カラム（フ
ァーマシア）を用いる処理によって減少した。

得られたフラクションを、−２０℃にて貯蔵し、実験用
に５０倍に希釈し、化合物検定用のＰＤＥ、舌性源とし
て用いた・ ＰＤＥ活性特性 前記操作によって単離したＰＤＥ活性は、ｃＡＭＰの貧
加水分解速度を示すのみで、基質としてのｃＧＭＰに対
してかなりの選択性を示した。

この調製物のＰＤＥ活性は、インキュベーション中のＣ
ａ”　（１０ｍＭ）およびカルモジュリン（２５μｇ）
の存在によって増加しえず、ｃ　Ａ　Ｍ　Ｐの加水分解
は、ｌＯμＭｃＧＭＰをインキュベーションに加えるこ
とによって増大しなかった。この酵素の運動特性を以下
に要約する。

Ｋｍ　ｃＧＭＰ＝１．３ｐＭ Ｋｍ　ｃＡＭＰ　＞　１２０　μＭ ｌμＭ基質におけるｃ　Ｇ　Ｍ　Ｐ　／　ｃ　Ａ　Ｍ　
Ｐの加水分解比＝３０ ホスホジェステラーゼ検定 該検定は、デーヴイスおよびグリ−（Ｄａｖｉｓおよび
ＤａｌｙＸｌ　９７９）、ジャーナル・オブ・サイクリ
ック・ヌクレオチド・リサーチ（Ｊ、ＣｙｃｌｉｃＮｕ
ｃｌｅｏｔｉｄｅ　Ｒｅｓ、）、５．６５〜７４に記載
されているが、いくらかの変形を加えた。標孕反応混合
物は、１００μＱの最終容量中、 ５０μ〜ｆ　５’−ＧＭＰ　（４０００ｄｐｍ”Ｃ−Ｇ
ＭＰを含有）、 ｌμＮ・１３°、５°−ｃＧＭＰ（０，１μＣｉ　３Ｈ
−ｃＧＭＰを含有）、 １０μＭ酵素調製物、および ｌＯμＭ抑制剤希釈物 を含有し、５０ｍＭ　　トリス１５ｍＭ　ＭｇＣＱｔ　
、ｐ）（７，５で緩衝した。反応を酵素で開始させ、３
７℃にて５〜ｌＯ分間行った。反応は、沸騰水浴におい
てチューブを２分間入れておくことで終了させた。つい
で０　、１　ＭＮａＣ１２を含有するｐＨ８、５の０．
ＩＭ　ＨＥＰＥＳ（Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジ
ン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸）緩衝液５００μＭを
、各検定チューブに加え、内容物を、ＨＥＰＥＳ／Ｎａ
Ｃｅ１衝液１０ｘＱで予め平衡にしたアフィゲル・６Ｏ
Ｎ（バイオ−ラド）ボロネート・アフィニティー・クロ
マトグラフィー媒体（Ａ　ＩＴｉｇｅｌ　６０１　（Ｂ
　１ｏ−ｆｌａｄ）ｂｏｒｏｎａｔｅ　ａｌ’ｒｉｎｉ
ｔｙｃｈＬｏｍａｔｏｇｒａｐＨｙ　ｍｅｄｉａ）（１
、２ｘＱベッド体債）に注いだ。未反応’Ｉｆ−ｃＧＭ
ｒ’を、Ｉ−ＴＥＰＥＳ／ＮａＣｇ緩衝液１０ＸｌｒＬ
１２でカラムから洗浄した。ラベルを付した５−ＡＭＰ
を、０．２５Ｍ酢酸６ＭＱでシンチレーションバイアル
に溶出し、１０ｘＱインスタゲル（ｌ　ｎｓｔａｇｅｌ
）（パラカード）（Ｐ　ａｃｋａｒｄ）を用いてシンチ
レーション・カウンターにおいてカウントした。回収は
、”Ｃ−ＧＭＰの回収によって測定され、５０〜７５％
であった。検定は、繰り返して行い、値を、〈２％の空
試験値で修正した。

ＩＣ５゜値の算定 ＩＣ５゜値（活性の５０％抑制に要する抑制剤の濃度）
を、ＩμＭサイクリックＧＭＰおよび一連の抑制剤濃度
にて酵素をインキュベーションすることによって得た。

実施例の化合物　　　　ＩＣ５ｏ（μＭ）１　　　　　
　　　　　０．９６ ２　　　　　　　　　４．４９ ３５．０４ ４　　　　　　　　　　１．７４ ５　　　　　　　　　　１．２５ ７　　　　　　　　　５．２６ ８　　　　　　　　　６．７９ ９　　　　　　　　　３．６４ 実施例 つぎに実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが
、これらに限定されるものではない。

実施例１ ２−（２−プロポキシフェニル）−６−プリノン４．５
−ジアミノ−２−（２〜プロポキシフエニル）−ピリミ
ジン−６−オン硫酸塩１　、５　ｇ（遊離塩基のエタノ
ール溶液に濃硫酸を添加することによって調製）および
ホルムアミド１５村の撹拌した混合物を、油浴（温度１
９０〜２００℃）において、７０分間加熱する。冷却後
、混合物を濾過し、合した固体をエタノールで洗ｒＮＬ
、担製生成物１．１ｇを得る。融点２５４〜２５９°Ｃ
０該生成物をエタノールから再結晶し、表記化合物０．
７２ｇを得ろ。

融点２６３〜２６５℃。

実施例２ ２−（２−エトキシフェニル）−６−プリノン実施例１
と同様な方法において、４，５−ジアミノ−２−（２−
エトキシフェニル）ピリミジン−６−オン硫酸塩１．５
ｇを、ホルムアミド１５Ｊ１１２と反応させて、表記化
合物０．３６ｇを得る。融点２７６〜２７７℃（エタノ
ールから再結晶）。

実施例３ ２−（２−ブトキシフェニル）−６−プリノン実施例■
と同様な方法において、４．５−ジアミノ−２−（２−
ブトキシフェニル）ピリミジン−６−オン硫酸塩１．５
ｇを、ホルムアミド５ｉ（！と反応させて、表記化合物
０．６５ｇを得る。融点２４７〜２４８℃（エタノール
から再結晶）。

実施例４ ２−（２−イソブトキシフェニル）−６−プリノン実施
例１と同様な方法において、４．５−ジアミノ−２−（
２−イソブトキンフェニル）ピリミジン−６−オン硫酸
塩１．４ｇを、ホルムアミド５酎と反応させて、表記化
合物０．２４ｇを得る。融点２７２〜２７３℃（エタノ
ールから再結晶）。

実施例５ ２−（２−プロポキシフェニル）プリン−６，８−ジオ
ン ４．５−ジアミノ−２−（２−プロポキシフェニル）ピ
リミジン−６−オン１．３ｇおよび尿素１．５ｇの混合
物を、油浴（温度１９０℃）？ミおいて４５分間加熱す
る。得られた固体を熱水で温浸し、混合物を濾過し、固
体を水で洗浄してｍ製生成物１．３６ｇを得る。ジメチ
ルホルムアミドから再結晶し、表記化合物１．０１ｇを
得る。融点〉３５０℃。

δ（ＤＭＳＯ−（Ｉｓ）　　１．０１（ｔ、３Ｈ）；１
．８８（ｍ。

２Ｈ）；４．０９（ｔ、２Ｈ）ニア、１０，７．２１，
７．５２および７．７６（多重線、４Ｈ）；約１１．０
７．１１．５５および１１．９５（非常にブロードな単
一線、３Ｈ） 実施例６ ２−（２−メトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン 実施例５と同様な方法において、４．５−ジアミノ−２
−（２−メトキシフェニル）ピリミジン−６−オン０．
９３ｇを、尿素１．２０ｇと反応させて、表記化合物０
．２８ｇを得る。融点３２９〜３３０℃（ジメチルホル
ムアミドから２回再結晶）。

実施例７ ２−（２−エトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン 水５０ｉＱ中、４．５−ジアミノ−２−（２−エトキシ
フェニル）ピリミジン−６−オン硫酸塩２．Ｏｇの溶液
を、水酸化アンモニウムで中和し、クロロホルムで抽出
する。有機抽出物を、減圧下にて乾固するまで蒸発させ
、残りの遊離塩基を尿素１．７４ｇで実施例５と同様な
方法にて処理し、ジメチルポルムアミドから再結晶して
、表記化合物０．６６ｇを得る。融点３４９〜３５１’
Ｃ。

実施例８ ２−（２−ブトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン 実施例５と同様な方法にて、・１．５−ジアミノ−２ど
（２−ブトキシフェニル）ピリミジン−６−オン０゜９
６ｇを、尿素１．０５ｇと反応させ、表記化合物０．２
６ｇを得る。融点３２４〜３２６℃（ジメチルホルムア
ミドから再結晶）。

実施例９ ２−（２−イソブトキシフェニル）プリン−６，８−ジ
オン カルボニルジイミダゾール°１．０１ｇを、トルエン１
００１中の４．５−ジアミノ−２−（２−イソブトキシ
フェニル）ピリミジン−６−オン１．５０ｇに加え、得
られた混合物を１時間加熱還流し、褐色固体が得られ、
それを集める。該固体を水で洗浄し、ジメチルホルムア
ミドから再結晶して表記化合物０．２２ｇを得る。融点
〉３６０℃。

実施例１０ ２−（２−アリルオキシフェニル）プリン−６，８−ジ
オン ４．５−ジアミノ−２−（２−アリルオキシフノニル）
ピリミジン−６−オン硫酸塩０．８ｇを、窒素雰囲気下
、乾燥ピリジン８村中、カルボニルジイミダゾール０．
７２ｇの撹拌した溶液に加えろ。得られた溶液を、窒素
雰囲気下、室温にて３時間撹拌し、ついで溶液の容量を
減圧下で蒸発さ仕て減少させる。残りのシロップを、水
性アセトン（５０％）２０ｘＱで希釈し、得られた固体
を集め、水およびアセトンで洗浄し、乾燥して粗製生成
物０．４８ｇを得る。この物質を他の粗製試料０．１ｇ
（前記と同様な方法で調製）と−緒にし、熱水５Ｍ（２
を添加することによって酢酸約２５ｊＩＱから再結晶し
、酢酸、水およびエタノールで洗浄し、乾燥した後、表
記化合物０．４ｇを得る。融点３４０〜３４５℃（分解
）。

δ（ＤＭＳＯ−ｄａ）　　４．６８（ｍ、２Ｈ）；５．
２〜５゜４（＋ｎ、２Ｈ）；５．９　〜６．２（＋ａ、
１ｌ−（）；７．０　７　〜７゜２．７．４〜７．５５
．７．６〜７．７（ｍ’ｓ、４Ｈ）；１０．９．１１．
４５および１２．１（ブロードな単一線、３Ｈ） 実施例１１ ２−（２−プロポキシフェニル）−６−プリノン　ｌｌ
　。

５−ジアミノ−２−（２−プロポキシフェニル）ピリミ
ジン−６−オン０　、３　ｇ、ホルムアミジンアセテー
ト０．１８ｇおよび無水酢酸ナトリウム０．１ｇの混合
物を、油浴中、１５５〜１６５℃にて２．５時間加熱す
る。該混合物を溶融させ、ついで再度固体化させる。エ
タノール１＋Ｑを加え、表記化合物を濾過によって採集
する。０．３１ｇ、融点２５６〜２５８℃。

実施例１２ ２−（２−プロポキシフェニル）プリン−６，８−ジオ
ン 実施例９と同様な方法において、カルボニルジイミダゾ
ール４．９８ｇを、トルエン３５０好中、４．５−ジア
ミノ−２−（２−プロポキシフェニル）ピリミジン−６
−オン７．０Ｏｇと反応させ、表記化合物３．７６ｇを
得る。融点〉３４０℃（ジメチルホルムアミドから再結
晶）。

実施例１３ 経口投与用医薬組成物は、以下の配合によって調製する
： ％　＋ｖ／ｗ ２−（２−プロボキンフエ　　　０．５．　　３．り　
　　７．１４ニル）−６−プリノン 大豆油中、２％ｖ／ｗ　　　　９０．４５　　ｇ８．２
　８４．４１大豆レシチン 水素添加植物ショート　　　９．０５　８．８　　　Ｌ
４５ニングおよび密猟 ついで、製剤を個々のソフトゼラチンカプセルに充填す
る。

実施例１４ 非経口投与用医薬組成物は、実施例１の表記化合物０．
０２ｇを、加熱しながら、ポリエチレングリコール３０
０（２５，ｖ＋２）中に溶解させることによって調製す
る。ついでこの溶液を、注射用水（Ｐ　ｈ。

Ｅ　ｕｒ、）で１００ｘＱに希釈する。ついで該溶液を
、Ａ　　０．２２ミクロンの膜濾過を介する濾過によっ
て滅菌し、滅菌容器中に密閉する。

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ［式中、Ｒ＾１は炭素数１〜６のアルキルまたは炭素数
   ２〜６のアルケニル、およびＲ＾２は水素またはヒドロ
   キシを意味する］ で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
2. （２）Ｒ＾２が水素である前記第（１）項の化合物。
3. （３）Ｒ＾２がヒドロキシである前記第（１）項の化合
   物。
4. （４）Ｒ＾１が炭素数２〜５のアルキルである前記第（
   １）項〜第（３）項いずれか１つの化合物。
5. （５）Ｒ＾１が炭素数３〜５のアルケニルである前記第
   （１）項〜第（３）項いずれか１つの化合物。
6. （６）２−（２−プロポキシフェニル）−６−プリノン
   、 ２−（２−エトキシフェニル）−６−プリノン、２−（
   ２−ブトキシフェニル）−６−プリノン、２−（２−イ
   ソブトキシフェニル）−６−プリノン、２−（２−プロ
   ポキシフェニル）プリン−６，８−ジオン、 ２−（２−メトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン
   、 ２−（２−エトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン
   、 ２−（２−ブトキシフェニル）プリン−６，８−ジオン
   、 ２−（２−イソブトキシフェニル）プリン−６，８−ジ
   オン、または ２−（２−アリルオキシフェニル）プリン−６，８−ジ
   オンまたはその医薬上許容される塩である前記第（１）
   項の化合物。
7. （７）２−（２−プロポキシフェニル）−６−プリノン
   またはその医薬上許容される塩である前記第（６）項の
   化合物。
8. （８）２−（２−プロポキシフェニル）プリン−６，８
   −ジオンまたはその医薬上許容される塩である前記第（
   ６）項の化合物。
9. （９）医薬として用いる前記第（１）項〜第（８）項い
   ずれか１つの化合物。
10. （１０）気管支拡張剤として用いる前記第（１）項〜第
    （８）項いずれか１つの化合物。
11. （１１）血管拡張剤として用いる前記第（１）項〜第（
    ８）項いずれか１つの化合物。
12. （１２）前記第（１）項〜第（８）項いずれか１つの化
    合物および医薬上許容される担体からなることを特徴と
    する医薬組成物。
13. （１３）（ａ）Ｒ＾２が水素である化合物の場合、式（
    II）：▲数式、化学式、表等があります▼（II） ［式中、Ｒ＾１は前記第（１）項と同じ］ で示される化合物を、ホルミル化剤と反応させるか、 （ｂ）Ｒ＾２がヒドロキシである化合物の場合、前記式
    （II）の化合物を、カルボニル化剤と反応させるか、 （ｃ）Ｒ＾２が水素である化合物の場合、式（III）：
    ▲数式、化学式、表等があります▼（III） ［式中、Ｒ＾１は前記と同じ］ で示される化合物を、４−アミノ−５−イミダゾールカ
    ルボキシアミドと反応させるか、または（ｄ）Ｒ＾２が
    水素である場合、式（IV）：▲数式、化学式、表等があ
    ります▼（IV） ［式中、Ｒ＾１は前記と同じ］ で示される化合物を環化し、その後所望により、医薬上
    許容される塩を形成させることを特徴とする前記第（１
    ）項記載の式（ I ）の化合物またはその医薬上許容さ
    れる塩の製造方法。
14. （１４）式（IV）： ▲数式、化学式、表等があります▼（IV） ［式中、Ｒ＾１は炭素数１〜６のアルキルまたは炭素数
    ２〜６のアルケニルを意味する］ で示される化合物。