JPS62269700A - Ａ型肝炎ウイルスのための検定 - Google Patents
Ａ型肝炎ウイルスのための検定Info
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- JPS62269700A JPS62269700A JP62103424A JP10342487A JPS62269700A JP S62269700 A JPS62269700 A JP S62269700A JP 62103424 A JP62103424 A JP 62103424A JP 10342487 A JP10342487 A JP 10342487A JP S62269700 A JPS62269700 A JP S62269700A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
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- C12Q1/70—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving virus or bacteriophage
- C12Q1/701—Specific hybridization probes
- C12Q1/706—Specific hybridization probes for hepatitis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
-
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
３、発明の詳細な説明
ウィルスの速読希釈液を用いて感受性組織培養に感染さ
せて細胞障害作用（ＣＰＥ ）の程度を測定することに
より、ウィルスの力価を測定できることは公知である。
せて細胞障害作用（ＣＰＥ ）の程度を測定することに
より、ウィルスの力価を測定できることは公知である。
しかしながら、この方法は可視的細胞障害作用を起こす
ことなく細胞に感染するＡ型肝炎ウィルス（ＨＡＶ）に
使用することはできない。マーカス（Ｍａｒｃｕｓ）及
びカーパー（Ｃａｒｖｅｒ）はジャーナル・オブ・ピロ
ロシイ（Ｊ、Ｖｉｒｏｌ、） １９６７年４月、３３４
〜３４３ページに風疹ウィルスに対する妨害現象を記述
している。細胞が風疹ウィルスに感染すると、風疹ウィ
ルスは細胞を以後のバンヤメラ（Ｂｕｎｙａｍｗｅｒａ
）ウィルス感染に対して無反応性にする。しかしながら
、第一のウィルスに感染した細胞と感染しない細胞の間
に細胞障害作用の差がないことの結果として第一のウィ
ルスに感染したすべての細胞が第二のウィルスの増殖を
妨げるのではないという妨害検定法に伴う困難さがある
。その上、妨害検定法は、問題となるウィルスに完全に
特異的ではなく、開発し実行することの困難な検定法で
ある。豚コレラウィルスの増強検定法はクマガイ （Ｋ
ｕｍａｇａｉ）外、ジャーナル・オブ・イムノロジー（
Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、） ８７巻、２４５ページ（１
９６１年）及びマツモト（ＭａＬｓｕｍｏｔｏ）外、ジ
ャーナル・オプ・イムノロジ−８７巻、２５７ページ（
１９６１年）に記述されている。
ことなく細胞に感染するＡ型肝炎ウィルス（ＨＡＶ）に
使用することはできない。マーカス（Ｍａｒｃｕｓ）及
びカーパー（Ｃａｒｖｅｒ）はジャーナル・オブ・ピロ
ロシイ（Ｊ、Ｖｉｒｏｌ、） １９６７年４月、３３４
〜３４３ページに風疹ウィルスに対する妨害現象を記述
している。細胞が風疹ウィルスに感染すると、風疹ウィ
ルスは細胞を以後のバンヤメラ（Ｂｕｎｙａｍｗｅｒａ
）ウィルス感染に対して無反応性にする。しかしながら
、第一のウィルスに感染した細胞と感染しない細胞の間
に細胞障害作用の差がないことの結果として第一のウィ
ルスに感染したすべての細胞が第二のウィルスの増殖を
妨げるのではないという妨害検定法に伴う困難さがある
。その上、妨害検定法は、問題となるウィルスに完全に
特異的ではなく、開発し実行することの困難な検定法で
ある。豚コレラウィルスの増強検定法はクマガイ （Ｋ
ｕｍａｇａｉ）外、ジャーナル・オブ・イムノロジー（
Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、） ８７巻、２４５ページ（１
９６１年）及びマツモト（ＭａＬｓｕｍｏｔｏ）外、ジ
ャーナル・オプ・イムノロジ−８７巻、２５７ページ（
１９６１年）に記述されている。
従って、本発明の目的は、可視的細胞障害作用を起こさ
ないＡ型肝炎ウィルスの改良された検定法を提供するこ
とである。他の目的は一つの温度範囲で妨害作用を起こ
し、他の温度範囲では増強作用を起こすＡ型肝炎ウィル
スの検定法を提供することである。本発明のこれら及び
他の目的は以下の記述で明らかにする。
ないＡ型肝炎ウィルスの改良された検定法を提供するこ
とである。他の目的は一つの温度範囲で妨害作用を起こ
し、他の温度範囲では増強作用を起こすＡ型肝炎ウィル
スの検定法を提供することである。本発明のこれら及び
他の目的は以下の記述で明らかにする。
Ａ型肝炎ウィルスの定量法は、約３０ないし約３７℃の
温度で細胞シートをＡ型肝炎ウィルスの一連の希釈物で
感染させ、次いで感染細胞シートにニュー゛カッスル病
ウィルス（ＮＯＶ）を添加し、感染細胞シートをＮＤＶ
の存在下、上昇した温度で細胞障害作用が表われるのに
十分な時間置くことからなり、この時間は典型的には少
な（とも約４日間好ましくは約５日間である。約３１な
いし約３３℃の保温温度において、ＣＰＥの不存在はＨ
ＡＶの存在を示し、ＣＰＨの存在はＨＡＶの不存在を示
す。約３４ないし約３６℃の保温温度においてＣＰＥの
不存在はＨＡＶの不存在を示し、ＣＰＥの存在はＨＡＶ
の存在を示す。
温度で細胞シートをＡ型肝炎ウィルスの一連の希釈物で
感染させ、次いで感染細胞シートにニュー゛カッスル病
ウィルス（ＮＯＶ）を添加し、感染細胞シートをＮＤＶ
の存在下、上昇した温度で細胞障害作用が表われるのに
十分な時間置くことからなり、この時間は典型的には少
な（とも約４日間好ましくは約５日間である。約３１な
いし約３３℃の保温温度において、ＣＰＥの不存在はＨ
ＡＶの存在を示し、ＣＰＨの存在はＨＡＶの不存在を示
す。約３４ないし約３６℃の保温温度においてＣＰＥの
不存在はＨＡＶの不存在を示し、ＣＰＥの存在はＨＡＶ
の存在を示す。
本発明の検定法は、ＭＲＣ−５又はＷｔ−３８細胞で形
成された細胞シートを含む多槽検定機中で適切に実行す
ることができる。ＨＡＶの一連の希釈物をＭＲＣ−５細
胞と共に検定板の槽に添加する。細胞とＨＡＶを約３１
ないし約３３℃又は約３４ないし約３６℃に保温する。
成された細胞シートを含む多槽検定機中で適切に実行す
ることができる。ＨＡＶの一連の希釈物をＭＲＣ−５細
胞と共に検定板の槽に添加する。細胞とＨＡＶを約３１
ないし約３３℃又は約３４ないし約３６℃に保温する。
接種後約２日目培地を置換する。選択された先行温度の
如何にかかわらず、ウィルスが細胞に感染するに十分な
時間平板を保温する。一般に、これに約４週間を必要と
する。一般に細胞シートへの感染に要する保温期間内に
少なくとも一回培地を更新することが必要である。保温
期間が完了すると、保温培地を吸引排出し、ＮＤＶを含
む新鮮培地を各種に添加する。次いで検定板をＣＰＥが
発現するのに十分な時間予め選択した温度に保温する。
如何にかかわらず、ウィルスが細胞に感染するに十分な
時間平板を保温する。一般に、これに約４週間を必要と
する。一般に細胞シートへの感染に要する保温期間内に
少なくとも一回培地を更新することが必要である。保温
期間が完了すると、保温培地を吸引排出し、ＮＤＶを含
む新鮮培地を各種に添加する。次いで検定板をＣＰＥが
発現するのに十分な時間予め選択した温度に保温する。
通常これには数日間、一般に少なく共４日間を要する。
次いで検定板のＣＰＥを読みとる。選択した温度が約３
１ないし約３３℃の場合、ＣＰＥの不存在はＨＡＶの存
在を示し、ＣＰＨの存在はＨＡ Ｖの不存在を示す。選
択した温度が約３４ないし約３６℃の場合ＣＰＥの不存
在はＨＡＶの不存在を示し、ＣＰＥの存在はＨＡＶの存
在を示す。小水庖性口内炎及びバンヤメラ（Ｂｕｎｙａ
ｍｗｅｒａ）ウィルスのような通常の妨害ウィルスは使
用できないことが判明した。温度が約３１ないし約３３
℃の場合選ばれる本発明の妨害検定法は、ＮＤＶの使用
を必要とする。
１ないし約３３℃の場合、ＣＰＥの不存在はＨＡＶの存
在を示し、ＣＰＨの存在はＨＡ Ｖの不存在を示す。選
択した温度が約３４ないし約３６℃の場合ＣＰＥの不存
在はＨＡＶの不存在を示し、ＣＰＥの存在はＨＡＶの存
在を示す。小水庖性口内炎及びバンヤメラ（Ｂｕｎｙａ
ｍｗｅｒａ）ウィルスのような通常の妨害ウィルスは使
用できないことが判明した。温度が約３１ないし約３３
℃の場合選ばれる本発明の妨害検定法は、ＮＤＶの使用
を必要とする。
次の実施例は本発明を例証するものであり、限定するも
のではない。
のではない。
裏血尉
１００μｌのウィルス懸濁液に１％Ｌ−グルタミン（２
，９２ｗ／ｍＪ）、１７２％牛脂児血清（Ｆｅ２）及び
、５０μｇ／ｍｌのネオマイシンを添加した９、９１１
ＩＮのウィリアムス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）培地Ｅ （Ｗ
ＭＥ）を添加することにより、ウィルスの最初の１７１
００希釈液を作る。この最初の１０４希釈液からｌｌｌ
１ｌのウィルス懸濁液を９ｍｇのＷＭＥに移植すること
により連！１０倍希釈液を作る。１０１〜１０−８の範
囲にわたる七つの１０倍希釈液を作る。ウィルスの１０
−２懸濁液の７５μｌを多槽検定板の列Ａの１２槽の各
々に添加する。ウィルス懸濁液の１０−３希釈液の７５
μｌを列Ｂの１２槽の各々に添加し、このようにして列
ＡからＧまでに１０−２〜１０−８のウィルスの希釈液
を満たす。コントロール列である列Ｈのすべての槽は７
５μｌの−ＭＥで満たす。アール（Ｅａｒｌｅ）のバラ
ンスド・ソルト・ソリューション （Ｂａｌａｎｃｅｄ
５ａｌｔ ５ｏｌｕｔｉｏｎ）、１０％ＦＣ３，１％
Ｌ−グルタミン（２９，２ｍｇ ／ ｍ １２ ）及び
５０μｇ／ｍｊ！のネオマイシンを添加したベーサル・
メディウム・イーグル（Ｂａ５ａｌ Ｍｅｄｉｕｓ＋Ｅ
ａｇｌｅ）中２００．ＯＯＯＭＲＣ−５細胞／ｌｌｌ１
の槽当り７５μｌを各種に添加する。次いで平板を加湿
５％ＣＯ２ふらん器に入れ、２日間３２又は３５℃に保
持する。次いで平板をふらん器から除き、培地を槽から
吸引除去し、Ｗ Ｍ Ｅを再度平板に添加し、ふらん器
に戻して予め選択した温度に２週間保持する。２週間の
保温期間の最後に、平板に上記のように再添加し、ふら
ん器に戻して第二の２週間の保温期間を与える。第二の
２週間の保温期間の後、平板はＨＡＶの存在を表わすた
めにＮＤＶを添加し得る状態になる。妨害法（選択温度
は３２℃）においては、ＮＯＶ、カリホルニア（Ｃａ
ｌ ｉｆ ｏｒｎ ｉａ）株の保存ウィルス懸濁液を融
解し、ＷＭＥで希釈して１０ ’ ＴＣＩＤｓ。７ｍｇ
の濃度にする。増強検定法（選択温度は３５℃）では、
ＮＤＶ、カリホルニア株の保存ウィルス懸濁液を融解し
、ＷＭＥで希釈して１０４ ＴＣＩＤ、。ｌｌｌ１ｌの
濃度にする。ＷＭＥを平板の槽から吸引除去し、上記ウ
ィルス懸濁液の１５０μｌを全平板の全槽に添加する。
，９２ｗ／ｍＪ）、１７２％牛脂児血清（Ｆｅ２）及び
、５０μｇ／ｍｌのネオマイシンを添加した９、９１１
ＩＮのウィリアムス（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）培地Ｅ （Ｗ
ＭＥ）を添加することにより、ウィルスの最初の１７１
００希釈液を作る。この最初の１０４希釈液からｌｌｌ
１ｌのウィルス懸濁液を９ｍｇのＷＭＥに移植すること
により連！１０倍希釈液を作る。１０１〜１０−８の範
囲にわたる七つの１０倍希釈液を作る。ウィルスの１０
−２懸濁液の７５μｌを多槽検定板の列Ａの１２槽の各
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μｌを列Ｂの１２槽の各々に添加し、このようにして列
ＡからＧまでに１０−２〜１０−８のウィルスの希釈液
を満たす。コントロール列である列Ｈのすべての槽は７
５μｌの−ＭＥで満たす。アール（Ｅａｒｌｅ）のバラ
ンスド・ソルト・ソリューション （Ｂａｌａｎｃｅｄ
５ａｌｔ ５ｏｌｕｔｉｏｎ）、１０％ＦＣ３，１％
Ｌ−グルタミン（２９，２ｍｇ ／ ｍ １２ ）及び
５０μｇ／ｍｊ！のネオマイシンを添加したベーサル・
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の槽当り７５μｌを各種に添加する。次いで平板を加湿
５％ＣＯ２ふらん器に入れ、２日間３２又は３５℃に保
持する。次いで平板をふらん器から除き、培地を槽から
吸引除去し、Ｗ Ｍ Ｅを再度平板に添加し、ふらん器
に戻して予め選択した温度に２週間保持する。２週間の
保温期間の最後に、平板に上記のように再添加し、ふら
ん器に戻して第二の２週間の保温期間を与える。第二の
２週間の保温期間の後、平板はＨＡＶの存在を表わすた
めにＮＤＶを添加し得る状態になる。妨害法（選択温度
は３２℃）においては、ＮＯＶ、カリホルニア（Ｃａ
ｌ ｉｆ ｏｒｎ ｉａ）株の保存ウィルス懸濁液を融
解し、ＷＭＥで希釈して１０ ’ ＴＣＩＤｓ。７ｍｇ
の濃度にする。増強検定法（選択温度は３５℃）では、
ＮＤＶ、カリホルニア株の保存ウィルス懸濁液を融解し
、ＷＭＥで希釈して１０４ ＴＣＩＤ、。ｌｌｌ１ｌの
濃度にする。ＷＭＥを平板の槽から吸引除去し、上記ウ
ィルス懸濁液の１５０μｌを全平板の全槽に添加する。
次いで平板を予め選択した温度に５日間保温する。この
保温期間後、平板は顕微鏡で読取る。３２℃の温度では
ＮＤＶ ＣＰＥが存在しない場合はＨＡＶは存在し、
逆にＮＤＶ ＣＰＥが存在する場合はＨＡＶは存在し
ない。又３５℃の温度ではＮＤＶＣＰＥが存在しない場
合はＨＡＶも存在せず、ＮＤＶ ＣＰＥが存在する場
合はＨＡＶも存在する。
保温期間後、平板は顕微鏡で読取る。３２℃の温度では
ＮＤＶ ＣＰＥが存在しない場合はＨＡＶは存在し、
逆にＮＤＶ ＣＰＥが存在する場合はＨＡＶは存在し
ない。又３５℃の温度ではＮＤＶＣＰＥが存在しない場
合はＨＡＶも存在せず、ＮＤＶ ＣＰＥが存在する場
合はＨＡＶも存在する。
次の読取り結果は、３２℃で得られたものであり、表中
−の表示はＨＡＶの存在（ＣＰＨの不存在により決定）
を示し、十の表示はＨＡＶの不存在（ＣＰ Ｅの存在に
より決定）を示す。
−の表示はＨＡＶの存在（ＣＰＨの不存在により決定）
を示し、十の表示はＨＡＶの不存在（ＣＰ Ｅの存在に
より決定）を示す。
１ １０・” ・・・・
３１０”’ ・・・・
４１０−’ −−＋ ’＋ ＋ ＋
−＋ −十 −４５ＩＱ−’ ＋
＋ ＋ ＋ ＋ −１−＋ ＋ ＋
＋ ↓ ＋６ １０−’ ＋ 十
漆 ＋ ＋＋＋＋ ＋ ふ
＋ 〒７ １０−Ｉ＋ ＋ ＋
＋ ＋ ＋ ＋ ふ
ふ ＋ ＋ ÷ ＋＄＝Ｑ＋＋＋＋＋
＋ ＋ ヰ ＋ ふ ＋ ＋＊ 対照列は細胞とＮＯ
Ｖを含みＨＡＶを含まない。
−＋ −十 −４５ＩＱ−’ ＋
＋ ＋ ＋ ＋ −１−＋ ＋ ＋
＋ ↓ ＋６ １０−’ ＋ 十
漆 ＋ ＋＋＋＋ ＋ ふ
＋ 〒７ １０−Ｉ＋ ＋ ＋
＋ ＋ ＋ ＋ ふ
ふ ＋ ＋ ÷ ＋＄＝Ｑ＋＋＋＋＋
＋ ＋ ヰ ＋ ふ ＋ ＋＊ 対照列は細胞とＮＯ
Ｖを含みＨＡＶを含まない。
次いでＨＡＶの力価はレイド（Ｒｅｉｄ）及び、ミュン
’） （Ｍｅｕｎｃｈ）の方法のような当該技術分野で
公知の方法を用いて計算する。
’） （Ｍｅｕｎｃｈ）の方法のような当該技術分野で
公知の方法を用いて計算する。
次の読取り結果は３５℃で得られ、表中−はＨＡＶの不
存在（ＣＰ Ｅの不存在により決定）、＋はＨＡＶの存
在（ＣＰＥの存在により決定）を示す。
存在（ＣＰ Ｅの不存在により決定）、＋はＨＡＶの存
在（ＣＰＥの存在により決定）を示す。
１ １０−’ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
＋ ＋ 十 士 ＋ ＋２ １０−’ ＋
＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
＋ ＋３ １ ０−’ 十 ＋
＋ ＋ ＋ ＋ ＋
＋ ＋ ＋ ＋＠ ＋ ４ １０弓 ＋ 十−＋−−＋−＋−＋
−５１０・’ ・・・・ ６１０・’ ・・・・ ７１０・” ・・・・ ８” Ｏ・・・・ ＊ 対照列は細胞とＮＯＶを含みＨＡＶを含まない。
＋ ＋ 十 士 ＋ ＋２ １０−’ ＋
＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
＋ ＋３ １ ０−’ 十 ＋
＋ ＋ ＋ ＋ ＋
＋ ＋ ＋ ＋＠ ＋ ４ １０弓 ＋ 十−＋−−＋−＋−＋
−５１０・’ ・・・・ ６１０・’ ・・・・ ７１０・” ・・・・ ８” Ｏ・・・・ ＊ 対照列は細胞とＮＯＶを含みＨＡＶを含まない。
ＨＡＶの力価はレイド及びミュンクの方法のような当該
技術分野で公知の方法を用いて計算する。
技術分野で公知の方法を用いて計算する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、多槽検定平板中の細胞シートにＡ型肝炎ウィルスの
存在を試験する試料の一連の希釈物を添加し、Ａ型肝炎
ウィルスが試料中に存在する場合は細胞シートに感染さ
せ、細胞シートにニューカッスル病ウィルスを添加し、
細胞シートをニューカッスル病ウィルスの存在下で約３
１ないし約３３℃又は約３４ないし約３６℃の温度で細
胞障害作用が発現するのに十分な時間保温し、約３１な
いし約３３℃の選択された温度の場合細胞障害作用の不
存在はＡ型肝炎ウィルスの存在を示し、又細胞障害作用
の存在はＡ型肝炎ウィルスの不存在を示し、並びに約３
４ないし約３６℃の選択された温度の場合細胞障害作用
の不存在はＡ型肝炎ウィルスの不存在を示し、又細胞障
害作用の存在はＡ型肝炎ウィルスの存在を示すことから
成るＡ型肝炎ウィルス検定法。 ２、細胞シートにＡ型肝炎ウィルスを感染させ発現する
ための時間は約４週間までである特許請求の範囲第１項
記載のＡ型肝炎ウィルス検定法。 ３、細胞障害作用が発現するのに十分な時間は少なくと
も約４日間である特許請求の範囲第１項記載のＡ型肝炎
ウィルス検定法。 ４、湿度範囲が約３１ないし約３３℃の場合ニューカッ
スル病ウィルスの量は約１０＾６ＴＣＩＤ＿５＿０／ｍ
ｌであり、湿度範囲が約３４ないし約３６℃の場合ニュ
ーカッスル病ウィルスの量は約１０＾４ＴＣＩＤ＿５＿
０／ｍｌである特許請求の範囲第１項記載のＡ型肝炎ウ
ィルス検定法。 ５、Ａ型肝炎ウィルスの力価は温度範囲が約３１ないし
約３３℃の場合細胞障害作用を生じないニューカッスル
病ウィルスの最低希釈を決定することにより測定し、温
度範囲が約３４ないし約３６℃の場合細胞障害作用を生
ずるニューカッスル病ウィルスの最低希釈を決定するこ
とにより測定する特許請求の範囲第１項記載のＡ型肝炎
ウィルス検定法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US857695 | 1986-04-29 | ||
| US06/857,695 US4861706A (en) | 1981-08-26 | 1986-04-29 | Assay for hepatitis a virus |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62269700A true JPS62269700A (ja) | 1987-11-24 |
Family
ID=25326543
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62103424A Pending JPS62269700A (ja) | 1986-04-29 | 1987-04-28 | Ａ型肝炎ウイルスのための検定 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4861706A (ja) |
| EP (1) | EP0244146A3 (ja) |
| JP (1) | JPS62269700A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5268292A (en) * | 1988-06-27 | 1993-12-07 | Robertson Betty H | Reproducible generation of high yields of hepatitis A virus by cell culture |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3651212A (en) * | 1966-12-20 | 1972-03-21 | Us Health Education & Welfare | Attenuated live rubella virus vaccine and method of production |
| US4329424A (en) * | 1975-09-04 | 1982-05-11 | Merck & Co., Inc. | Macroscopic method for determining cytopathic effects in viral assay |
-
1986
- 1986-04-29 US US06/857,695 patent/US4861706A/en not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-04-22 EP EP87303497A patent/EP0244146A3/en not_active Withdrawn
- 1987-04-28 JP JP62103424A patent/JPS62269700A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0244146A2 (en) | 1987-11-04 |
| EP0244146A3 (en) | 1988-12-21 |
| US4861706A (en) | 1989-08-29 |
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