JPS61185184A - 新規ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ - Google Patents
新規ス−パ−オキシドジスムタ−ゼInfo
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- JPS61185184A JPS61185184A JP59274299A JP27429984A JPS61185184A JP S61185184 A JPS61185184 A JP S61185184A JP 59274299 A JP59274299 A JP 59274299A JP 27429984 A JP27429984 A JP 27429984A JP S61185184 A JPS61185184 A JP S61185184A
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- JP
- Japan
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- sod
- molecular weight
- superoxide dismutase
- gluconobacter
- preparation
- Prior art date
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、新規スーツ−オキシドジスムターゼ及びその
製造法に関する。
製造法に関する。
スーパーオキシドジスムターゼ（Ｓｕｐｅｒｏｘ ｉｄ
ｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ ： Ｓｏ←）は下記の反応２０
２ ＋２Ｈ−−→Ｈ２Ｏ２＋Ｑ□ によって、スーパーオキシドイオンの不均化を起こさせ
ることのできる酵素であることは公知である。また、牛
の赤血球から抽出されたＳＯＤ（Ｍａｒ−ｋｏｗｉｔｚ
、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｏｈｅｍ ２３４巻第４０頁、１９
５９年）は既知であり金属原子としてＣｕ、Ｚｎを含む
ことも公知である。
ｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ ： Ｓｏ←）は下記の反応２０
２ ＋２Ｈ−−→Ｈ２Ｏ２＋Ｑ□ によって、スーパーオキシドイオンの不均化を起こさせ
ることのできる酵素であることは公知である。また、牛
の赤血球から抽出されたＳＯＤ（Ｍａｒ−ｋｏｗｉｔｚ
、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｏｈｅｍ ２３４巻第４０頁、１９
５９年）は既知であり金属原子としてＣｕ、Ｚｎを含む
ことも公知である。
一般に酵素は、今日１で工業的に広く用いられてきたが
、酵素は一般的に熱い不安定なため、その使用も大きく
制限されている。
、酵素は一般的に熱い不安定なため、その使用も大きく
制限されている。
本発明は、グルコノバクタ−・セリナス（ＩＦ０３２６
８）より抽出精製により得られたＭｎ原子ゴ・もつ新し
いＳＯＤに関するものである。本発明の８０１）は、グ
ルコノバクタ−セリナスという常温付近で生育する菌株
より得られたＭｎ−８ＯＤでありながら、４熱性がきわ
めて高いことがわかった。それゆえ、本発明のＳ Ｏｌ
）は、工業的に幅広く使用しつるものである。
８）より抽出精製により得られたＭｎ原子ゴ・もつ新し
いＳＯＤに関するものである。本発明の８０１）は、グ
ルコノバクタ−セリナスという常温付近で生育する菌株
より得られたＭｎ−８ＯＤでありながら、４熱性がきわ
めて高いことがわかった。それゆえ、本発明のＳ Ｏｌ
）は、工業的に幅広く使用しつるものである。
以下に実施例により詳しく本発明の説明をする。
グルコノバクタ−・セリナス株からのＳＯＤは、「実施
例１」により精製することができる。
例１」により精製することができる。
「実施例１」
（Ｓ ＯＤの精製法）
グルコノバクタ−・セリナス（ＩＦ０３２６８）の細菌
をｔあたり、下記を数の下記成分を含む培地−上で培養
する。
をｔあたり、下記を数の下記成分を含む培地−上で培養
する。
酵母エキス粉末 ５２
グリセロール １０２
に２ＨＰＯ４１り
この培地を１１０℃において２０分間滅菌した。
これにあらかじめ同じ培地で予備培養しておいた細菌を
入れ好気的に２４時間培養した。
入れ好気的に２４時間培養した。
その後、遠心分離機により細菌を収集し、さらに帆８５
％（ｗ／ｗ ）食塩水により２回洗浄し、その細菌より
ＳＯＤを抽出した。
％（ｗ／ｗ ）食塩水により２回洗浄し、その細菌より
ＳＯＤを抽出した。
以下の操作はすべて４℃で行った。上記で洗浄した細菌
を０．１ＭＩＪン酸緩衝液（ｐＨ７，８＞に懸濁させた
ダイノミルを用いて細菌を破砕した。この溶液に硫酸ア
ンモニウムを４５％飽和になるまで加えた。生じた沈殿
物を遠心分離機を用いて除き、得られた溶液に硫酸アン
モニウムを１００％飽和になるまで加えた。沈殿物に殆
んどのＳＯＤが存在した。この沈殿物を少量の０．１Ｍ
ＩＪン酸緩衝液（ｐＨ７，８）に溶解し、約１０倍量の
０．１Ｍリン酸緩面久（ｐｌ＋ ７．８ ）に−夜透
析した。この間透析外液を１３度交換した。透析を行っ
た溶液に６０％飽和になる棟で硫酸アンモニウムを加え
、遠心分離により、沈殿物を除き、その上澄液を６０％
飽和硫酸アンモニウムを含む０．１Ｍリン酸緩衝液で平
衡化したＤＥＡＥ−トーヨー、ｏ−ル（ＤＥＴＥ−Ｔｏ
ｙ ｏｐｒａｒｌ）カラムに流し、ＳＯＤをカラムに
吸着させた。
を０．１ＭＩＪン酸緩衝液（ｐＨ７，８＞に懸濁させた
ダイノミルを用いて細菌を破砕した。この溶液に硫酸ア
ンモニウムを４５％飽和になるまで加えた。生じた沈殿
物を遠心分離機を用いて除き、得られた溶液に硫酸アン
モニウムを１００％飽和になるまで加えた。沈殿物に殆
んどのＳＯＤが存在した。この沈殿物を少量の０．１Ｍ
ＩＪン酸緩衝液（ｐＨ７，８）に溶解し、約１０倍量の
０．１Ｍリン酸緩面久（ｐｌ＋ ７．８ ）に−夜透
析した。この間透析外液を１３度交換した。透析を行っ
た溶液に６０％飽和になる棟で硫酸アンモニウムを加え
、遠心分離により、沈殿物を除き、その上澄液を６０％
飽和硫酸アンモニウムを含む０．１Ｍリン酸緩衝液で平
衡化したＤＥＡＥ−トーヨー、ｏ−ル（ＤＥＴＥ−Ｔｏ
ｙ ｏｐｒａｒｌ）カラムに流し、ＳＯＤをカラムに
吸着させた。
カラムを６０％飽和硫酸アンモニウムを含む０．１Ｍ
リン酸緩衝液で洗い、５０％飽和硫酸アンモニウムを・
含む、０．１Ｍリン酸緩衝液でＳＯＤを溶出させ、フラ
クションコレクターで分画分取した。
リン酸緩衝液で洗い、５０％飽和硫酸アンモニウムを・
含む、０．１Ｍリン酸緩衝液でＳＯＤを溶出させ、フラ
クションコレクターで分画分取した。
Ｓ（月）を含む分画成分を集め、この溶液に硫酸アンモ
ニウムを約１００％飽和になるまで加えＳＯＤを沈殿さ
せる。この溶液を一夜静置し、沈殿物を遠心・分離機に
より集めた。ＳＯＤは、この沈殿物に大多数存在した。
ニウムを約１００％飽和になるまで加えＳＯＤを沈殿さ
せる。この溶液を一夜静置し、沈殿物を遠心・分離機に
より集めた。ＳＯＤは、この沈殿物に大多数存在した。
この沈殿物に帆０１Ｍリン酸緩衝液を少量加え、沈殿物
を溶解させ、この溶液を０．０１〜１リン酸緩衝液に一
夜透析した。この間透析外液を３回交換した。
を溶解させ、この溶液を０．０１〜１リン酸緩衝液に一
夜透析した。この間透析外液を３回交換した。
この溶液を、０．０ｔＭリン酸カリウム緩衝液で平衡化
したＤＥＡＥ−）−ヨーノ？−ルカラムに流し、このカ
ラムに非吸着であるＳＯＤの分画成分を集めた。集めた
分画成分に１００％飽和になるまで硫酸アンモニウムを
加えＳＯＤを沈殿させた。この沈殿物を遠心分離により
集め、これを少量の０．０２Ｍ ＩＪン酸緩衝液に溶解
させ、０．０２ Ｍ リン酸緩衝液（ｐＨ７，２）に−
夜透析した。
したＤＥＡＥ−）−ヨーノ？−ルカラムに流し、このカ
ラムに非吸着であるＳＯＤの分画成分を集めた。集めた
分画成分に１００％飽和になるまで硫酸アンモニウムを
加えＳＯＤを沈殿させた。この沈殿物を遠心分離により
集め、これを少量の０．０２Ｍ ＩＪン酸緩衝液に溶解
させ、０．０２ Ｍ リン酸緩衝液（ｐＨ７，２）に−
夜透析した。
この溶液を帆０２ Ｍ ＩＪン酸緩衝液（ｐＨ７，２）
で平衡化したセファデックスＧ−１ＯＯカラムに流した
。この溶出液をフラクションコレクターで分画分取し、
８０Ｄ活性分画成分を得た。
で平衡化したセファデックスＧ−１ＯＯカラムに流した
。この溶出液をフラクションコレクターで分画分取し、
８０Ｄ活性分画成分を得た。
以上の操作によって得られたＳＯＤは、ポリアクリルア
ミドゲル電気泳動で単一のバンドを示し、また超遠心分
析によって均一性が認められた。
ミドゲル電気泳動で単一のバンドを示し、また超遠心分
析によって均一性が認められた。
分子量の測定は公知のカラムとしてＰｉ ｎｅｐａｋＳ
ＩＬ ＡＦ−１０２（日本分光膜）を用いる高速液体
クロマトグラフィーで行った。分子量が既知の下記のマ
ーカーを用いた。
ＩＬ ＡＦ−１０２（日本分光膜）を用いる高速液体
クロマトグラフィーで行った。分子量が既知の下記のマ
ーカーを用いた。
Ｍ「
ｇｌｕｊａｍａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ
２９０，０００１ａｃｌ：＋ｌｃ ｄｅｈｙｄｒ
ｏｇｅｎａｓｅ １４２，０００ｃｎ
ｏｌａｓｅ
６７．０００ａ＋Ｉｃｎｙｌ ｋｉｎａｓｅ
３２，０００ｃｙｔｏｃｈ
ｒｏｍｅ ｃ ’ １２，４
００分子量は約ｓ ｏ、ｏ ｏ ｏであった。
２９０，０００１ａｃｌ：＋ｌｃ ｄｅｈｙｄｒ
ｏｇｅｎａｓｅ １４２，０００ｃｎ
ｏｌａｓｅ
６７．０００ａ＋Ｉｃｎｙｌ ｋｉｎａｓｅ
３２，０００ｃｙｔｏｃｈ
ｒｏｍｅ ｃ ’ １２，４
００分子量は約ｓ ｏ、ｏ ｏ ｏであった。
酵素の蛋白構造のサブユニットを定めるため、ドデンル
硫酸ナトリウムを加えたポリアクリルアミドゲル電気泳
動を行った結果、分子量約２４，０００のサブユニット
の単一型を観察した。それゆえ、得られたＳＯＤの分子
量は約２４０００Ｘ２すなわち約４８、Ｆ） ００と推
定され高速液体クロマトグラフィーの結果と考え合わせ
、本酵素の分子量は、４８，０００士３０００と推定で
きる。また、本酵素は、サブユニットの分子量が約２４
，０００の二量体構造を持つと考えられる。本酵素溶液
の紫外可視スペクトルは図面に示す通りであった。
硫酸ナトリウムを加えたポリアクリルアミドゲル電気泳
動を行った結果、分子量約２４，０００のサブユニット
の単一型を観察した。それゆえ、得られたＳＯＤの分子
量は約２４０００Ｘ２すなわち約４８、Ｆ） ００と推
定され高速液体クロマトグラフィーの結果と考え合わせ
、本酵素の分子量は、４８，０００士３０００と推定で
きる。また、本酵素は、サブユニットの分子量が約２４
，０００の二量体構造を持つと考えられる。本酵素溶液
の紫外可視スペクトルは図面に示す通りであった。
原子吸光分析による金属分析の結果Ｍｎ、Ｃｕが検を含
む＼Ｉｎ−８ＯＤであると推定できる。
む＼Ｉｎ−８ＯＤであると推定できる。
ＳＯＤの活性測定は、Ａｇｒ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ
、 、 ３８ （２）４７１〜４７３（１９７４）に、
Ｋ、Ａｓａｄａらが記載したのと類似の方法で測定した
。
、 、 ３８ （２）４７１〜４７３（１９７４）に、
Ｋ、Ａｓａｄａらが記載したのと類似の方法で測定した
。
すなわち、光学セルｆｌＴｎｌ用）に５ＱｍＭ リン
酸カリウム（ｐＨ７，８） 、 ０．１ ｍＭ ＢＤ
ＴＡ 、 ０．１ｍＭキサンチン、１０μＭチトクロム
Ｃ（ウマ心臓由来）ＳＯＤを入れ、全容を帆９９−とす
る。
酸カリウム（ｐＨ７，８） 、 ０．１ ｍＭ ＢＤ
ＴＡ 、 ０．１ｍＭキサンチン、１０μＭチトクロム
Ｃ（ウマ心臓由来）ＳＯＤを入れ、全容を帆９９−とす
る。
これにキサンチン酸化酵素を、０．０１−加え、反応を
開始し、チトクロムＣ還元を５５０ ｎｍの吸光度増加
の初速度から求め、この呟をＶとする。
開始し、チトクロムＣ還元を５５０ ｎｍの吸光度増加
の初速度から求め、この呟をＶとする。
ＳＯＤを加えないときのチトクロムＣ還元速度をＶとす
ると、ＳＯＤの酵素員はＶ／ｖに比例する。この条件下
でチトクロムＣ還元を５０％阻害する（すなわちＶ／ｖ
＝ ２ ） ＳＯＤ酵素量を１酵素単位とした。
ると、ＳＯＤの酵素員はＶ／ｖに比例する。この条件下
でチトクロムＣ還元を５０％阻害する（すなわちＶ／ｖ
＝ ２ ） ＳＯＤ酵素量を１酵素単位とした。
本発明の酵素は、スーツに一オキシドイオンを不均化す
ることのできるものである。油脂などの酸化性成分を含
む製品が、光・熱・その他の原因により過酸化物を生成
せしめ、品質を著しく、変質、劣化させ、また、０２−
はこの過酸化物の生成に関与していることは公知である
。したがって本発明のＳＯＤを上記中に配合することに
より、０２−の不均化を起こさせ、製品の過酸化物によ
る変質・劣化等を防ぐことができる。
ることのできるものである。油脂などの酸化性成分を含
む製品が、光・熱・その他の原因により過酸化物を生成
せしめ、品質を著しく、変質、劣化させ、また、０２−
はこの過酸化物の生成に関与していることは公知である
。したがって本発明のＳＯＤを上記中に配合することに
より、０２−の不均化を起こさせ、製品の過酸化物によ
る変質・劣化等を防ぐことができる。
そこで本発明のＳＯＤの工業的な応用を「実施例２」に
より説明する。
より説明する。
「実施例２」
過酸化物生成の系として以下の様なモデルを設け、抗酸
化効果を調べた。
化効果を調べた。
０．０５ Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６，９） ２５
＋ｄポリエチレンノニルフエニルエーテル １
．２５９リノール酸 ０．２１
１上記組成の混合物を５０℃恒温器中に放置すると過酸
化物が生成する。
＋ｄポリエチレンノニルフエニルエーテル １
．２５９リノール酸 ０．２１
１上記組成の混合物を５０℃恒温器中に放置すると過酸
化物が生成する。
上記の系に本発明のＳＯＤをｏ、１ｍｙ／−になるよう
に加え５０℃の恒温器中に放置し、３日後の過酸化脂質
抑制効果を調べた。
に加え５０℃の恒温器中に放置し、３日後の過酸化脂質
抑制効果を調べた。
過酸化脂質量の測定は、溝山らのロダン鉄法（栄養と食
糧１９巻第３号、２１０頁１９６６年）を用いた。
糧１９巻第３号、２１０頁１９６６年）を用いた。
すなわち、試料溶液０．１−に７５％−エタノ−ｋ ４
．７ ｍｌ、３５％−ロダン化アンモニウム水溶液０．
１−１０．０２ Ｍ−塩化第一鉄のＩＮ−塩酸溶液０．
１−を加え、正確に３分経過後５００ ｎｍにおける吸
光度を測定した。
．７ ｍｌ、３５％−ロダン化アンモニウム水溶液０．
１−１０．０２ Ｍ−塩化第一鉄のＩＮ−塩酸溶液０．
１−を加え、正確に３分経過後５００ ｎｍにおける吸
光度を測定した。
参考例として、本発明のＳＯＤのかわりに牛血清アルブ
ミンを同量加えたもの、及び本発明ＳＯＤ、牛血清アル
ブミン両者とも加えないものを設は同様の試験を行った
。
ミンを同量加えたもの、及び本発明ＳＯＤ、牛血清アル
ブミン両者とも加えないものを設は同様の試験を行った
。
試験結果は、次表のとおりであった。
（注）直はすべて吸光度で示した。
Ｏ８目から３日後の吸光度の増加が過酸化脂質量の増加
を表わしている。また、過酸化脂質量と吸光度とは比例
する。
を表わしている。また、過酸化脂質量と吸光度とは比例
する。
このことと、上記試験結果より、本発明ＳＯＤの過酸化
防止効果のすぐれていることがわかった。
防止効果のすぐれていることがわかった。
きらに、本酵素の耐熱性を実施例３に示す。
「実施例３」
本発明ＳＯＤの耐熱性を示すため、グルコノバクタ−と
同じく常温付近で生゛育するセラチア・マルセツセノス
からのＳＯＤと熱安定性を比較した。
同じく常温付近で生゛育するセラチア・マルセツセノス
からのＳＯＤと熱安定性を比較した。
それぞれのＳＯＤは、０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７
，２）に溶かし、６０℃でそれぞれ５分間加温し、水中
で冷却して活性測定を行った。
，２）に溶かし、６０℃でそれぞれ５分間加温し、水中
で冷却して活性測定を行った。
それぞれ６０℃加温前にも活性測定を行い、６０℃ｖＯ
温による失活を観察した。結果を下記に示す。
温による失活を観察した。結果を下記に示す。
加温前 ６０℃加温後
本発明のＳ ＯＤ ２０．４ ｕ／ｍｔ２１
．７ ｕ ／ｍ！セラチアー ？ルセツセンスｓＯＤ
２０ ｕ／ｍｊ ７．５ｕ／ｍＡ
上記のように本発明ＳＯＤは、常温付近で生育する細菌
由来のＭｎ−８ＯＤに比べ、耐熱性がすぐれていること
がわかる。
．７ ｕ ／ｍ！セラチアー ？ルセツセンスｓＯＤ
２０ ｕ／ｍｊ ７．５ｕ／ｍＡ
上記のように本発明ＳＯＤは、常温付近で生育する細菌
由来のＭｎ−８ＯＤに比べ、耐熱性がすぐれていること
がわかる。
図面は実施例により得られた酵素溶液の視外可視スペク
トルである。 持許出頷人 ピアス林式会丑 手 続 補 正 書 昭和６０年１２月２日 昭和５９年特許願第２７４２９９号 ２発明の名称 新規スーパーオキシドジスムターゼ
及びその製造法 ３ 補正をする者 事件との関係 特許出願人 大阪府大阪市大淀区豊崎３丁目２１番３号４ 補正命令
の日付 自 発 ５ 補正の対象 願−−書 前記以外−の−発明者の欄
明細書 特許請求の範囲の欄 発明の詳細な説明の欄 ６ 補正の内容 １ψ１＋ （２、特許請求の範囲 別紙のとおり （３、発明の詳細な説明中２頁９行目「スーパーオキシ
ドジスムターゼ」とあるを「スーパーオキシドジスムタ
ーゼ」と補正する。 （４）３頁３行目「一般的に熱い不安定」とあるを「一
般的に熱≦不安定」と補正する。 （５）３頁９行目「グルコノバクタ−セリナスＪとある
を「グルコノバクタ一二セリナス」と補正する。 （６）４頁１４行目「させたダイノミル」とあるを「さ
せ、ダイノミル」と補正する。 （７）５頁６行目ｒＤＥＴＥ−Ｔｏ ｙ ｏＪとあるを
ｒＤＥＡＥ−Ｔｏ ｙ ｏＪと補正する。 （８）７頁１０行目ｒ２４０００Ｘ２Ｊとあるをｒ２４
．ｏｏＯＸ２Ｊと補正する。 （９）７頁１３行目ｒ±３０００Ｊとあるを「±３よ０
ＯＯＪと補正する。 （１０）７頁１５行目「紫外可視」とあるを「可視紫外
」と補正する。 （１１）９頁９行目ｒ （ｐＨ６，９）Ｊとあるをｒ
（ｐＨ６，９）Ｊと補正する。 （１２）９頁１０行目「ポリエチレンノニルフェニルエ
ーテル」とあるを「ポリオキシエチレンノニルフェニル
エーテル」と補正する。 （１３）１１１頁３行目示すため、グルコノバク」とあ
るを「示すため、 ５００１１支１１ニゲルコノ
バク」と補正す る。 （１４）１．１頁５行目ｒｓＯＤと熱安定性」とあるを
ｒｓＯＤｙ熱安定性」と補正する。 （１５）１１頁１８行目〜１９行目「視外可視スペクト
ル」とあるを「１１ヱ３スペクトとあるをｒ１１１邊ス
ペクトル」と補正別紙 ２、特許請求の範囲 ｌ 下記（１）〜（４）の特性を有するスーパーオキシ
ドジスムターゼ ■ 分子量が４８，０００±３，０００である。 ■ サブユニットの分子量が約２４，０００の二量体構
造をもつ。 ■ 活性に関係する金属としてＭｎを含有する。 ■ ２５０〜８００ｎｍＩ７）範囲の可視紫外スペクト
ルで４７０ｎｍ付近及び２８０ｎｍ付近に極大吸収値を
もつ。 ２ グルコノバクタ−属により産生される特許請求の範
囲ｗ４１項記藏のスーパーオキシドジスムターゼ。 ３ グルコノバクタ−属に属する菌種がグルコ・ノバク
ター・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂ−ａｃｔｅｒ Ｈ
ｅｒｉｎｕｓ ＩＦ０３２６８）である特許請求の範
囲第２項記載の製造法。 ４ 特許請求の範囲第１項、第２項、第３項を含む、又
は、特許請求の範囲第１項、第２項、第３項よりなるこ
とを特徴とする油脂類又は、その含有物の変質防止剤。 手続補正書 昭和６１年を月２−４日 特許庁長官 宇 賀 道 部 殿 、１．事件の表７ＦＸ 印５９時Ｈ膣２７４２９９号
３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 大阪府大阪市大淀区豊崎３丁目２１番３号
４、？！正命令の日付 昭和６１年２月１８日手続補
正書 昭和６０年１２月９日 特許庁長官 宇 賀 道 部 殿 １、ＩＳ件の表示 吻５９轡醪暉２７４２９９号３、補
正をする者 事件との菌糸 特許出願人 住所 大阪府大阪市大淀区Ｍ３丁目２１番３号４
、補正命令の日付 自発 ５、補 正 の 対 象 明細書の特許請求の範囲
の欄、発明の詳細な説明の欄、図面の簡単な説明の欄及
び図面。 グルコノバタター・セリナス由来のＳＯＤの可視紫外ス
ペクトル回吸 波長ｉｎｍ
トルである。 持許出頷人 ピアス林式会丑 手 続 補 正 書 昭和６０年１２月２日 昭和５９年特許願第２７４２９９号 ２発明の名称 新規スーパーオキシドジスムターゼ
及びその製造法 ３ 補正をする者 事件との関係 特許出願人 大阪府大阪市大淀区豊崎３丁目２１番３号４ 補正命令
の日付 自 発 ５ 補正の対象 願−−書 前記以外−の−発明者の欄
明細書 特許請求の範囲の欄 発明の詳細な説明の欄 ６ 補正の内容 １ψ１＋ （２、特許請求の範囲 別紙のとおり （３、発明の詳細な説明中２頁９行目「スーパーオキシ
ドジスムターゼ」とあるを「スーパーオキシドジスムタ
ーゼ」と補正する。 （４）３頁３行目「一般的に熱い不安定」とあるを「一
般的に熱≦不安定」と補正する。 （５）３頁９行目「グルコノバクタ−セリナスＪとある
を「グルコノバクタ一二セリナス」と補正する。 （６）４頁１４行目「させたダイノミル」とあるを「さ
せ、ダイノミル」と補正する。 （７）５頁６行目ｒＤＥＴＥ−Ｔｏ ｙ ｏＪとあるを
ｒＤＥＡＥ−Ｔｏ ｙ ｏＪと補正する。 （８）７頁１０行目ｒ２４０００Ｘ２Ｊとあるをｒ２４
．ｏｏＯＸ２Ｊと補正する。 （９）７頁１３行目ｒ±３０００Ｊとあるを「±３よ０
ＯＯＪと補正する。 （１０）７頁１５行目「紫外可視」とあるを「可視紫外
」と補正する。 （１１）９頁９行目ｒ （ｐＨ６，９）Ｊとあるをｒ
（ｐＨ６，９）Ｊと補正する。 （１２）９頁１０行目「ポリエチレンノニルフェニルエ
ーテル」とあるを「ポリオキシエチレンノニルフェニル
エーテル」と補正する。 （１３）１１１頁３行目示すため、グルコノバク」とあ
るを「示すため、 ５００１１支１１ニゲルコノ
バク」と補正す る。 （１４）１．１頁５行目ｒｓＯＤと熱安定性」とあるを
ｒｓＯＤｙ熱安定性」と補正する。 （１５）１１頁１８行目〜１９行目「視外可視スペクト
ル」とあるを「１１ヱ３スペクトとあるをｒ１１１邊ス
ペクトル」と補正別紙 ２、特許請求の範囲 ｌ 下記（１）〜（４）の特性を有するスーパーオキシ
ドジスムターゼ ■ 分子量が４８，０００±３，０００である。 ■ サブユニットの分子量が約２４，０００の二量体構
造をもつ。 ■ 活性に関係する金属としてＭｎを含有する。 ■ ２５０〜８００ｎｍＩ７）範囲の可視紫外スペクト
ルで４７０ｎｍ付近及び２８０ｎｍ付近に極大吸収値を
もつ。 ２ グルコノバクタ−属により産生される特許請求の範
囲ｗ４１項記藏のスーパーオキシドジスムターゼ。 ３ グルコノバクタ−属に属する菌種がグルコ・ノバク
ター・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂ−ａｃｔｅｒ Ｈ
ｅｒｉｎｕｓ ＩＦ０３２６８）である特許請求の範
囲第２項記載の製造法。 ４ 特許請求の範囲第１項、第２項、第３項を含む、又
は、特許請求の範囲第１項、第２項、第３項よりなるこ
とを特徴とする油脂類又は、その含有物の変質防止剤。 手続補正書 昭和６１年を月２−４日 特許庁長官 宇 賀 道 部 殿 、１．事件の表７ＦＸ 印５９時Ｈ膣２７４２９９号
３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 大阪府大阪市大淀区豊崎３丁目２１番３号
４、？！正命令の日付 昭和６１年２月１８日手続補
正書 昭和６０年１２月９日 特許庁長官 宇 賀 道 部 殿 １、ＩＳ件の表示 吻５９轡醪暉２７４２９９号３、補
正をする者 事件との菌糸 特許出願人 住所 大阪府大阪市大淀区Ｍ３丁目２１番３号４
、補正命令の日付 自発 ５、補 正 の 対 象 明細書の特許請求の範囲
の欄、発明の詳細な説明の欄、図面の簡単な説明の欄及
び図面。 グルコノバタター・セリナス由来のＳＯＤの可視紫外ス
ペクトル回吸 波長ｉｎｍ
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、下記（１）〜（４）の特性を有するスーパーオキシ
ドジスムターゼ （１）分子量が４８，０００±３，０００である。 （２）サブユニットの分子量が約２４，０００の二量体
構造をもつ。 （３）活性に関係する金属としてＭｎを含有する。 （４）２５０〜８００ｎｍの範囲の可視紫外スペクトル
で４７０ｎｍ付近及び２８０ｎｍ付近に極大吸収値をも
つ。 ２、グルコノバクター属により産生される特許請求の範
囲第１項記載のスーパーオキシドジスムターゼ ３、グルコノバクター属に属する菌種がグルコノバクタ
ー・セリナス（Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ Ｃｅｒｉ
−ｎｕｓ ＩＦ０３２６８）である特許請求の範囲第２
項記載の製造法。 ４、特許請求の範囲第１項、第２項、第３項を含む、又
は、特許請求の範囲第１項、第２項、第３項よりなるこ
とを特徴とする油脂類又は、その含有物の変質防止剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59274299A JPS61185184A (ja) | 1984-12-28 | 1984-12-28 | 新規ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59274299A JPS61185184A (ja) | 1984-12-28 | 1984-12-28 | 新規ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61185184A true JPS61185184A (ja) | 1986-08-18 |
| JPS6348514B2 JPS6348514B2 (ja) | 1988-09-29 |
Family
ID=17539708
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59274299A Granted JPS61185184A (ja) | 1984-12-28 | 1984-12-28 | 新規ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61185184A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104726422A (zh) * | 2015-02-10 | 2015-06-24 | 江南大学 | Stilbella thermophila生产耐热超氧化物歧化酶(SOD)的方法 |
| JP2018533981A (ja) * | 2016-02-23 | 2018-11-22 | 杭州睿道医薬科技有限公司 | 新規の組換え高安定性スーパーオキシドジスムターゼおよびその応用 |
-
1984
- 1984-12-28 JP JP59274299A patent/JPS61185184A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104726422A (zh) * | 2015-02-10 | 2015-06-24 | 江南大学 | Stilbella thermophila生产耐热超氧化物歧化酶(SOD)的方法 |
| JP2018533981A (ja) * | 2016-02-23 | 2018-11-22 | 杭州睿道医薬科技有限公司 | 新規の組換え高安定性スーパーオキシドジスムターゼおよびその応用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6348514B2 (ja) | 1988-09-29 |
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