JPS61117446A - 多数の小さなゲル状シリカ又はサンプルより荷電された微生物粒子を溶離、捕促するための装置 - Google Patents
多数の小さなゲル状シリカ又はサンプルより荷電された微生物粒子を溶離、捕促するための装置Info
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- JPS61117446A JPS61117446A JP60247858A JP24785885A JPS61117446A JP S61117446 A JPS61117446 A JP S61117446A JP 60247858 A JP60247858 A JP 60247858A JP 24785885 A JP24785885 A JP 24785885A JP S61117446 A JPS61117446 A JP S61117446A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
- G01N27/44739—Collecting the separated zones, e.g. blotting to a membrane or punching of gel spots
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明、は、主に電気泳動技術に関するもので、特に高
濃度のゲルシリカから微生物性物質の荷電粒子を、望ま
しくない流体をほとんど含まずに溶離、捕促するための
容器又は装置に関するものである。以下の説明において
、ゲルシリカニジ微生物性物質の荷電粒子を溶離、捕促
する方法を「電気溶離(electroelution
)Jと称す。
濃度のゲルシリカから微生物性物質の荷電粒子を、望ま
しくない流体をほとんど含まずに溶離、捕促するための
容器又は装置に関するものである。以下の説明において
、ゲルシリカニジ微生物性物質の荷電粒子を溶離、捕促
する方法を「電気溶離(electroelution
)Jと称す。
従来の技術
本発明は、ペック等によって1984年11月5日に出
願さn、出願人に譲渡さnたアメリカ特許出願第668
,571号、「予備電子溶離装置(Preparato
ry FJlectroelution Device
) Jの改良に関するものである。
願さn、出願人に譲渡さnたアメリカ特許出願第668
,571号、「予備電子溶離装置(Preparato
ry FJlectroelution Device
) Jの改良に関するものである。
DNA、RNA、炭水化物及びタンパク質を電気泳動ゲ
ルよシ分離することは、永年に亘る課題となっている。
ルよシ分離することは、永年に亘る課題となっている。
核酸をアクリルアミド及びアガロースゲルより回収する
いくつかの方法が知らnている。こ几らの方法は、(1
)拡散による溶離、(2)圧縮による抽出、(3)ゲル
分解及び電気溶離の方法を含んでいる。こわらの方法の
ほとんどは、その結果が良好でなく、程度が低く、最終
生成物の汚染がはげしく、更に、その操作が非常に煩わ
しいものとなっている。こ几らの方法のうち、最も優れ
た方法は、電気溶離法である。しかし乍ら、この電気溶
離法は、膜組織、チューブゲル及びこ几に関連する機器
が必要となるため、今日まで実施は困2[tなものとさ
nている。電気溶離法においては。
いくつかの方法が知らnている。こ几らの方法は、(1
)拡散による溶離、(2)圧縮による抽出、(3)ゲル
分解及び電気溶離の方法を含んでいる。こわらの方法の
ほとんどは、その結果が良好でなく、程度が低く、最終
生成物の汚染がはげしく、更に、その操作が非常に煩わ
しいものとなっている。こ几らの方法のうち、最も優れ
た方法は、電気溶離法である。しかし乍ら、この電気溶
離法は、膜組織、チューブゲル及びこ几に関連する機器
が必要となるため、今日まで実施は困2[tなものとさ
nている。電気溶離法においては。
透析チューブ又は透析膜を用いた場合、微生物は膜組織
に付着する。逆流によって、膜組織に付着した物質は、
一部膜組織より離脱するので、量の測定には適さないも
のとなっている。また、粒子の小さいものは、膜組織を
透過してしまう。また更に、チューブゲル及びそrしに
付随する機器は操作が煩わしいものとなってしまう。
に付着する。逆流によって、膜組織に付着した物質は、
一部膜組織より離脱するので、量の測定には適さないも
のとなっている。また、粒子の小さいものは、膜組織を
透過してしまう。また更に、チューブゲル及びそrしに
付随する機器は操作が煩わしいものとなってしまう。
発明の解決しようとする問題点
本発明は、従来の構成における問題点を解消して、電気
溶離を容易に行い得るように改良した装置を提供しよう
とするものである。更に、本発明のもう一つの目的は、
従来の膜構造の装置においては膜組織を透過してし1う
ために捕促不能となっていた小さな粒子をも回収、捕促
し得るようにした装置を提供することにある。
溶離を容易に行い得るように改良した装置を提供しよう
とするものである。更に、本発明のもう一つの目的は、
従来の膜構造の装置においては膜組織を透過してし1う
ために捕促不能となっていた小さな粒子をも回収、捕促
し得るようにした装置を提供することにある。
筐た更に、本発明のもう一つの目的は、同時に複数のサ
ンプルより微生物粒子を分離、捕促出来るようにサンプ
ルアレーを設けた装置を提供することにある。
ンプルより微生物粒子を分離、捕促出来るようにサンプ
ルアレーを設けた装置を提供することにある。
本発明の更にもう一つの目的は、取扱いが容易で、しか
も操作、清掃し易く、更にクリーンに保つことが容易な
新規な電気溶離容器の構造全提供することにある。
も操作、清掃し易く、更にクリーンに保つことが容易な
新規な電気溶離容器の構造全提供することにある。
問題を解決するための手段
上記の目的を達成するために、本発明による装置は、ブ
リッヂ要素にて分割さnた二つの液密室にて成り、前記
ブリッヂ要素がサンプルサポートを画成する複数の溝と
複数の孔にて形成さnておシ、前記のサンプルサポート
は各々前記の孔を有しておシ、6孔は一側に対応するサ
ンプルサポートに連通する第一のアウトレッドヲ有し、
他側に前記液密室の一つに連通ずる第二のアウトレット
を有する構成となっている。
リッヂ要素にて分割さnた二つの液密室にて成り、前記
ブリッヂ要素がサンプルサポートを画成する複数の溝と
複数の孔にて形成さnておシ、前記のサンプルサポート
は各々前記の孔を有しておシ、6孔は一側に対応するサ
ンプルサポートに連通する第一のアウトレッドヲ有し、
他側に前記液密室の一つに連通ずる第二のアウトレット
を有する構成となっている。
実施例
本発明の好適実施例による電気溶離装置について添付す
る図面を参照して説明すnば、電気溶離装置11は、ブ
リッヂ要素14にて分割さnた第−室12及び第二室を
有している。
る図面を参照して説明すnば、電気溶離装置11は、ブ
リッヂ要素14にて分割さnた第−室12及び第二室を
有している。
ブリッヂ要素14は、サンプルサポート又はすンプル容
器を画成する相互に離間した溝16−16を有するアレ
ーを有している。
器を画成する相互に離間した溝16−16を有するアレ
ーを有している。
6溝16には第一の切欠又は吐出路17が形成さしてお
り、この第一の切欠は第−室12に向かって延びている
。6溝16の反対側には、第二の切欠18が孔21のア
ウトレット19に向かって形成さnている〇 孔21は略V字状に形成さnておシ、そのアウトレット
22は第二室16に開口している。
り、この第一の切欠は第−室12に向かって延びている
。6溝16の反対側には、第二の切欠18が孔21のア
ウトレット19に向かって形成さnている〇 孔21は略V字状に形成さnておシ、そのアウトレット
22は第二室16に開口している。
各アウトレツ) 19−19は、同一平面上に配設され
ており、同様に同一平面上に開口するアウトレット22
−22よりも上方にオフセットした位置に配置さnる。
ており、同様に同一平面上に開口するアウトレット22
−22よりも上方にオフセットした位置に配置さnる。
孔21の折曲部又は最下部はアウトレット19゜200
下方に位置する。
下方に位置する。
参照符号26で示す6ウエイノくルプは、ノ(ル)。
ステムに形成した透孔20及び対向するブリッヂポート
24,26t−通して第一、第二室12.15全λ通す
る第一の位置と、・・・・ブステム27にて前記第一、
第二室12.13の連通を遮断する第二の位置と、ステ
ム孔28、アウトレット19及び孔61を介して、前記
の米国特許出願に開示系nているのと同じ要領で第一、
第二室12.13を大気に開放する第三の位置に動作す
る。
24,26t−通して第一、第二室12.15全λ通す
る第一の位置と、・・・・ブステム27にて前記第一、
第二室12.13の連通を遮断する第二の位置と、ステ
ム孔28、アウトレット19及び孔61を介して、前記
の米国特許出願に開示系nているのと同じ要領で第一、
第二室12.13を大気に開放する第三の位置に動作す
る。
ブリッヂ要素14には更にオーバーフローポート62が
設けらIしており、このオーバーフローポート32はバ
ルブ23をバイパスして、孔31t″介して大気に連通
している。
設けらIしており、このオーバーフローポート32はバ
ルブ23をバイパスして、孔31t″介して大気に連通
している。
U字状クリップ41−41にてロッド69に枢着さnた
カバー68には、口金42−42が取付けらnでおり、
電極36.37と嵌合する。
カバー68には、口金42−42が取付けらnでおり、
電極36.37と嵌合する。
カバー68とバルブステム25のヘッド46の連関及び
ステム25のストロークも前記の米国特許出願に開示し
たものと同じ要領となっている。
ステム25のストロークも前記の米国特許出願に開示し
たものと同じ要領となっている。
温度に影響さn易い物質が含まCている場合には、温度
制御を行うために、一方又は双方の室12.13に第1
図に破線で示すように冷却コイル44が設けらγしてい
る。
制御を行うために、一方又は双方の室12.13に第1
図に破線で示すように冷却コイル44が設けらγしてい
る。
カーベンターレベル(carpenter’s 1ev
el) 45はレベル調整螺子47−47を有しており
、第一、第二室12.13内の液面のレベルを調節する
。
el) 45はレベル調整螺子47−47を有しており
、第一、第二室12.13内の液面のレベルを調節する
。
上記のように構成した電気溶離装置の動作を以下に説明
する。
する。
バルブ23は、まず、第一の位置に位置さ7t。
第一、第二室12.13間が連通さn単位液面レベルに
調節4nる。次に、適当な緩衝液が一方の室12又は1
3に導入して、緩衝液がオーバーフローポート62を介
して大気にローバーフローする1で画室に充填する。こ
のようにして、緩衝液をオーバーフロー烙せることによ
って、緩衝液の液面レベルを適切にすることが出来る。
調節4nる。次に、適当な緩衝液が一方の室12又は1
3に導入して、緩衝液がオーバーフローポート62を介
して大気にローバーフローする1で画室に充填する。こ
のようにして、緩衝液をオーバーフロー烙せることによ
って、緩衝液の液面レベルを適切にすることが出来る。
しかる後、緩衝液の濃度よりも高い所定濃度の特定塩が
V字状の孔21−21にピペットにて投入さnる。この
ステップによって、比重の低い緩衝液は孔21−21よ
り排除−anる。次いで、サンプルがサンプルサポート
16−16のアレーに分配さrしる。
V字状の孔21−21にピペットにて投入さnる。この
ステップによって、比重の低い緩衝液は孔21−21よ
り排除−anる。次いで、サンプルがサンプルサポート
16−16のアレーに分配さrしる。
カバー68が閉じらrしると、バルブ23が第二の位置
に動作して、第一、第二室12.13間の連動で遮断す
る。
に動作して、第一、第二室12.13間の連動で遮断す
る。
この状態で、コネクタ33−34に電荷が与えらn、を
気溶離が開示さγし、適当な間隔をおいて連続的に行な
わnる。
気溶離が開示さγし、適当な間隔をおいて連続的に行な
わnる。
回収さrした粒子はV字状孔21−21中の塩の表面に
集中する。
集中する。
捕促作業が完了すると、電源が遮断さγL1バルブ26
は第三の位置に動作して、緩衝液はV字状孔21−21
とは分離さnた状態で大気中に放出さnる。
は第三の位置に動作して、緩衝液はV字状孔21−21
とは分離さnた状態で大気中に放出さnる。
しかる後、V字状孔21−21中の液はピペットにて取
出さ1次の処理に回さnる。
出さ1次の処理に回さnる。
前述したように、サンプルが熱に影響さn易い物質であ
る場合には、冷却コイルに冷却液を循環させて、所望の
温度に保つことが必要となる。
る場合には、冷却コイルに冷却液を循環させて、所望の
温度に保つことが必要となる。
効果
上記のように、本発明によnば、電気溶離を容易に且つ
効果的に行うことが出来るものとなる。
効果的に行うことが出来るものとなる。
ま/ζ、本発明によnば、複数のサンプルを、孔21−
21に投入して、同時に異なるサンプルについて電気溶
離を行うことが可能となる。
21に投入して、同時に異なるサンプルについて電気溶
離を行うことが可能となる。
なお、本発明は上記の実施例に限定さjLるものではな
く、特許請求の範囲に含″1nるいかなる実施例、変形
例をも包含するものである。
く、特許請求の範囲に含″1nるいかなる実施例、変形
例をも包含するものである。
箒1図は本発明の好適実施例による装置の全体を示す斜
視図、第2図は同平面図、第3図は同正面図、及び第4
図は同右側面図である。 11:電気溶離装置、12:第−室、13:第二室、1
4ニブリツヂ要素、19.22:アウトレット、21:
孔、23:バルブ、62ニオ−バーフローポート。 刷3 1壮 千 べ) 寸 トチカット 06877、 リッジフィールfル ロ
ード 197
視図、第2図は同平面図、第3図は同正面図、及び第4
図は同右側面図である。 11:電気溶離装置、12:第−室、13:第二室、1
4ニブリツヂ要素、19.22:アウトレット、21:
孔、23:バルブ、62ニオ−バーフローポート。 刷3 1壮 千 べ) 寸 トチカット 06877、 リッジフィールfル ロ
ード 197
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 (I)ブリッヂ要素にて分割された少なくとも二つの液
密室にて成り、前記ブリッヂ要素がサンプルサポートを
画成する複数の溝と複数の孔にて形成されており、前記
のサンプルサポートは各々前記の孔を有しており、各孔
は一側に対応するサンプルサポートに連通する第一のア
ウトレットを有し、他側に前記液密室の一つに連通する
第二のアウトレットとを有していることを特徴とする多
数の小さなゲル状シリカ又はサンプルより荷電された微
生物粒子を溶離、捕促するための装置。 (2)前記第一及び第二のアウトレットが相互にオフセ
ットしていることを特徴とする特許請求の範囲第1項に
記載した装置。 (3)前記複数の孔の各第一のアウトレットは同一平面
上に配設され、前記第二のアウトレットに対して縦方向
にオフセットしていることを特徴とする特許請求の範囲
第1項又は第2項に記載した装置。 (4)前記第一のアウトレットは前記第二のアウトレッ
トよりも上方に設けられていることを特徴とする特許請
求の範囲第3項に記載した装置。 (5)前記孔は前記第一及び第二のアウトレット間にお
いてV字状に形成されていることを特徴とする特許請求
の範囲第4項に記載した装置。 (6)前記の各孔は、全てのアウトレットと高さ方向に
オフセットした部分を有している特許請求の範囲第1項
乃至第5項のいずれかに記載した装置。 (7)前記各孔はV字状に形成されており、V字の底部
は全てのアウトレットよりも下方に位置していることを
特徴とする特許請求の範囲第1項乃至第6項のいずれか
に記載した装置。 (8)前記ブリッヂ要素にはバルブ手段が設けられてお
り、該バルブ手段は、前記の各液密室及び大気と選択的
に連通するポートを有している特許請求の範囲第1項乃
至第7項のいずれかに記載した装置。 (9)前記バルブ手段は、前記液密室間を連通するよう
にポートを配置する第一の位置と、前記液密室間の連通
を遮断する第二の位置と、前記液密室を大気に開放する
第三の位置に動作可能であることを特徴とする特許請求
の範囲第8項に記載した装置。 (10)前記ブリッヂ要素には、バルブ手段とは独立に
大気にバイパスされたオーバーフローポートが設けられ
ていることを特徴とする特許請求の範囲第8項又は第9
項に記載した装置。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/668,562 US4576702A (en) | 1984-11-05 | 1984-11-05 | Analytical electroelution device |
US668562 | 1996-06-20 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS61117446A true JPS61117446A (ja) | 1986-06-04 |
Family
ID=24682831
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP60247858A Pending JPS61117446A (ja) | 1984-11-05 | 1985-11-05 | 多数の小さなゲル状シリカ又はサンプルより荷電された微生物粒子を溶離、捕促するための装置 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4576702A (ja) |
JP (1) | JPS61117446A (ja) |
DE (1) | DE3539136A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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-
1984
- 1984-11-05 US US06/668,562 patent/US4576702A/en not_active Expired - Fee Related
-
1985
- 1985-11-05 JP JP60247858A patent/JPS61117446A/ja active Pending
- 1985-11-05 DE DE19853539136 patent/DE3539136A1/de not_active Withdrawn
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Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4576702A (en) | 1986-03-18 |
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