JPS5948087A - 生物学的に生産される酸沈澱性高分子リグニン - Google Patents
生物学的に生産される酸沈澱性高分子リグニンInfo
- Publication number
- JPS5948087A JPS5948087A JP8104583A JP8104583A JPS5948087A JP S5948087 A JPS5948087 A JP S5948087A JP 8104583 A JP8104583 A JP 8104583A JP 8104583 A JP8104583 A JP 8104583A JP S5948087 A JPS5948087 A JP S5948087A
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- Japan
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- appl
- lignin
- streptomyces
- acid
- oxidation
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、天然リグニン及びリグノセルロースに対する
ストレプトミセス属の細菌及びその細微生物の代謝作用
によって生産される新規な重合体に関するものである。
ストレプトミセス属の細菌及びその細微生物の代謝作用
によって生産される新規な重合体に関するものである。
多くの原料から容易に得られる天然リグニンは水不溶性
であって比較的１吏用価値がない。ストレプトミセス属
を含め各種の黴及び細菌は、リグニン及びリグノセルロ
ースを工業的に有用な低分子量（単環）のフェノール化
合物まで分解することが知られている〔クロフォード、
「選択ストレプトミセス菌株にょろりグノセルロースの
分解」、アフライト・エンバイロン，°ンタル・マイク
ロバイオロジー、第３５巻（Ｎ［１６）、第１０４１頁
（１９７８年６月）；クロフォード等、「リグニンの微
生物的分解」、エンザイム・ミクロビアル・テクノロジ
ー、第２巻、第１１頁（１ｙ８０）：）。
であって比較的１吏用価値がない。ストレプトミセス属
を含め各種の黴及び細菌は、リグニン及びリグノセルロ
ースを工業的に有用な低分子量（単環）のフェノール化
合物まで分解することが知られている〔クロフォード、
「選択ストレプトミセス菌株にょろりグノセルロースの
分解」、アフライト・エンバイロン，°ンタル・マイク
ロバイオロジー、第３５巻（Ｎ［１６）、第１０４１頁
（１９７８年６月）；クロフォード等、「リグニンの微
生物的分解」、エンザイム・ミクロビアル・テクノロジ
ー、第２巻、第１１頁（１ｙ８０）：）。
さらに、不特定の残留重合体はフェノール基及びカルボ
キシル基の生成を含む一般的な化学的改変を受けること
も認められている〔クロフォード、「植物残渣から薬品
への生物変換：リグニンからの薬品の製造」、ビオソー
ス・ダイジェスト、第２巻、第５２頁（１９８０）〕。
キシル基の生成を含む一般的な化学的改変を受けること
も認められている〔クロフォード、「植物残渣から薬品
への生物変換：リグニンからの薬品の製造」、ビオソー
ス・ダイジェスト、第２巻、第５２頁（１９８０）〕。
しかしながら、この種の技術においては特定の改変重合
体は認められておらず、回収されておらず、また特性化
もされていない。
体は認められておらず、回収されておらず、また特性化
もされていない。
発明の概要
本発明は、新規な高分子分解リグニンからなっている。
この重合体は少なくとも１ ２０００ダルトンの分子量
を有し、水溶性であり、酸性ｐＨレベルで沈殿し、かつ
天然リグニンに比較して７エノール性ヒドロキシル基及
びカルボン酸基の個数において少なくとも３倍の増加を
特徴とすり。
を有し、水溶性であり、酸性ｐＨレベルで沈殿し、かつ
天然リグニンに比較して７エノール性ヒドロキシル基及
びカルボン酸基の個数において少なくとも３倍の増加を
特徴とすり。
本発明において使用される天然リグニンはたとえば修類
、植物又は樹木から得られろ任意の天然リグニンを意味
し、このリグニンはそれ自体で或いは他の物質、たとえ
ばリグノセルローズと組合せて使用することができる。
、植物又は樹木から得られろ任意の天然リグニンを意味
し、このリグニンはそれ自体で或いは他の物質、たとえ
ばリグノセルローズと組合せて使用することができる。
好ましくは、天然リグニンは草類のリグノセルロースで
ある。
ある。
ストレプトミセス（８ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ）
はリグニンを分解することが知られた菌株である。本発
明で好適に使用されるストレプトミセス属の３種の菌株
〔ストレプトミセス・ビリトスポラス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ ｖｉｒｉｄｏｓｐｏｒｕｓ ） Ｔ ７
Ａ 、ストレプトミセス・セトニイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ ５ｅｔｏｎｉｉ）７５Ｖｉ２及びストレプト
ミセス・バジウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔ）ａ
ｄｉｕｓ ） ２５２ ］はアイダホ地方の上糸から単
離され、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクショ
ン圧寄託されて、それぞれ寄託番号３９１１５．３９１
１６及び３９１１７を受けている。
はリグニンを分解することが知られた菌株である。本発
明で好適に使用されるストレプトミセス属の３種の菌株
〔ストレプトミセス・ビリトスポラス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ ｖｉｒｉｄｏｓｐｏｒｕｓ ） Ｔ ７
Ａ 、ストレプトミセス・セトニイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ ５ｅｔｏｎｉｉ）７５Ｖｉ２及びストレプト
ミセス・バジウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔ）ａ
ｄｉｕｓ ） ２５２ ］はアイダホ地方の上糸から単
離され、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクショ
ン圧寄託されて、それぞれ寄託番号３９１１５．３９１
１６及び３９１１７を受けている。
重合体は、天然リグニンをストレプトミセスと共に培地
中で培養し、培地を水性溶剤で抽出し、抽出物を酸性化
させそして生ずる沈殿を回収することによって與造され
る。
中で培養し、培地を水性溶剤で抽出し、抽出物を酸性化
させそして生ずる沈殿を回収することによって與造され
る。
高分子リグニンは、そのフェノール性ヒドロキシル含量
を増加させることによりその抗酸化能力まで酸化させる
ことによって、或いは抗酸化特性を抑制する置換基の個
数を減少させるべく還元することによって改変すること
ができる。好ましくは、除去又は変化される抗酸化抑制
性置換基はαカルボニル基又は芳香族カルボン酸基であ
り、酸化工程は塩基性条件下で行なわれるか、又はＡＰ
Ｐ Ｔ、をＦｅ５０４及びＨ２Ｏ２に露呈すること釦よ
って行なわれる。この工程は高分子リグニンを解重合す
ることができる。得られる生成物は、食品を保存する方
法として食品と混合することができる。
を増加させることによりその抗酸化能力まで酸化させる
ことによって、或いは抗酸化特性を抑制する置換基の個
数を減少させるべく還元することによって改変すること
ができる。好ましくは、除去又は変化される抗酸化抑制
性置換基はαカルボニル基又は芳香族カルボン酸基であ
り、酸化工程は塩基性条件下で行なわれるか、又はＡＰ
Ｐ Ｔ、をＦｅ５０４及びＨ２Ｏ２に露呈すること釦よ
って行なわれる。この工程は高分子リグニンを解重合す
ることができる。得られる生成物は、食品を保存する方
法として食品と混合することができる。
さらに詳細には、リグノセルロースを原料植物から溶剤
抽出し、風乾しそして滅菌する。無機の鉱物栄養源若し
くは塩をたとえば酵母若しくはその他周知の蒸留可溶成
分のような共基質と共に含んでなる水性培地を調製する
。この培地を滅菌し、かつストレプトミセスの胞子を接
種し、その後これをリグノセルロースと共にストレプ）
Ｓセスの代謝を可能にする条件下、たとえば２０℃〜５
０℃の温度、かつ６８〜７．５のｐＨＫて培養する。
抽出し、風乾しそして滅菌する。無機の鉱物栄養源若し
くは塩をたとえば酵母若しくはその他周知の蒸留可溶成
分のような共基質と共に含んでなる水性培地を調製する
。この培地を滅菌し、かつストレプトミセスの胞子を接
種し、その後これをリグノセルロースと共にストレプ）
Ｓセスの代謝を可能にする条件下、たとえば２０℃〜５
０℃の温度、かつ６８〜７．５のｐＨＫて培養する。
少なくとも４８時間でＡＰＰＬが生成し始め、７２時間
で著縫に蓄積し、８週間後においてもまだ測定しうる生
成が行いうる。培養は半固体（リグノセルロースの保水
能力、すなわちトウモロコシリグノセルロースについて
は６． Ｂ ｍｌ ／ ｇの保水能力の１．５倍に等し
い液体）培地において、或いは希釈培地において行なう
ことができ、ただしストレプトミセスの代謝を可能にす
るのに充分な栄養源が存在するものとする。
で著縫に蓄積し、８週間後においてもまだ測定しうる生
成が行いうる。培養は半固体（リグノセルロースの保水
能力、すなわちトウモロコシリグノセルロースについて
は６． Ｂ ｍｌ ／ ｇの保水能力の１．５倍に等し
い液体）培地において、或いは希釈培地において行なう
ことができ、ただしストレプトミセスの代謝を可能にす
るのに充分な栄養源が存在するものとする。
培盆後、脱イオン水（リグノセルロース１ｇ当りｒＹＪ
ｌｏｏｍｌ）を培養容器へ加え、そして混合物を１００
℃にて約１時間水蒸気処理する。使用する溶剤は、ＡＰ
ＰＬを溶解させうるｐＨレベル、たとえばｐｉ４６．５
〜塩基性範囲までとすべきである。残留固体を濾過し、
かつ除去する。ｒ液をｐＨ１〜２まで酸性化し、そして
生ずる沈殿を分離しかつ風乾−する。
ｌｏｏｍｌ）を培養容器へ加え、そして混合物を１００
℃にて約１時間水蒸気処理する。使用する溶剤は、ＡＰ
ＰＬを溶解させうるｐＨレベル、たとえばｐｉ４６．５
〜塩基性範囲までとすべきである。残留固体を濾過し、
かつ除去する。ｒ液をｐＨ１〜２まで酸性化し、そして
生ずる沈殿を分離しかつ風乾−する。
このように生成される酸沈膜性高分子リグニン（ＡＰＰ
Ｌ）の特性化は、ＡＰＰＬが天然リグニンから誘導され
ることを示すが、とのＡＰＰＬは顕著に改変される（た
とえば、リグニン自身の分解により或いはリグニン分解
生成物の重合により）。
Ｌ）の特性化は、ＡＰＰＬが天然リグニンから誘導され
ることを示すが、とのＡＰＰＬは顕著に改変される（た
とえば、リグニン自身の分解により或いはリグニン分解
生成物の重合により）。
ＡＰＰＬは天然リグニンよりも活性の大きい重合体であ
り、これは上記のフェノール性ヒドロキシル基及びカル
ボン酸基の増加により示される。より長い培養時間はフ
ェノール性ヒドロキシル基の相対的割合を増加させる。
り、これは上記のフェノール性ヒドロキシル基及びカル
ボン酸基の増加により示される。より長い培養時間はフ
ェノール性ヒドロキシル基の相対的割合を増加させる。
たとえば、最初に生成されるＡＰＰＬは約０７重量係の
フェノール性ヒドロキシル基を有しく天然リグニンの（
１２％に比較）、また、数週間後に収穫されるＡＰＰＬ
は１８チ若しくはそれ以上のこれらの基を有する。
フェノール性ヒドロキシル基を有しく天然リグニンの（
１２％に比較）、また、数週間後に収穫されるＡＰＰＬ
は１８チ若しくはそれ以上のこれらの基を有する。
典型的には、ＡＰＰＬは酸素を天然リグニンの３０〜３
２％に比較して少なくとも６５％（重量）を有する。Ａ
ＰＰＩ、のカルボン酸含量は、天然すゲニン中に存在す
る低レベルに比較して、顕著（少なくとも３倍）の増加
を示す。
２％に比較して少なくとも６５％（重量）を有する。Ａ
ＰＰＩ、のカルボン酸含量は、天然すゲニン中に存在す
る低レベルに比較して、顕著（少なくとも３倍）の増加
を示す。
Ａ Ｐ Ｐ Ｌ中のフェノール性ヒドロキシル基は容易
にエチル化され、かつたとえばカーク及びアドラーの過
マンガン酸法〔［根腐菌により分解されたリグニンスィ
ートガム中のメトキシ欠乏構造要素Ｊ 、Ａｃｔａ Ｃ
ｈｅｍ、 ５ｃａｎｄ１、第２４巻、第３３７９〜３３
９０頁（１９７０）〕を使用して、エーテル化１〜た酸
を生成する化学的酸化により単環フェノール化合物まで
変換させる。この種の酸化は、天然リグニンの場合より
もずっと多い個数（３倍）の単環フェノール化合物を生
成し、ｋＰＰＬは少なくとも２５％のこの種の化合物の
収率をもたらす。典型的には、Ａ Ｐ Ｐ Ｌの化学的
酸化によって生成される単環フェノール化合物の半分以
上は次の群の化合物である：ｐ−ヒドロキシ安息香酸；
４−ヒドロキシ−３−メトキシ安息香酸（バニリン酸）
及び４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ安息香酸（シ
リンガ酸）。
にエチル化され、かつたとえばカーク及びアドラーの過
マンガン酸法〔［根腐菌により分解されたリグニンスィ
ートガム中のメトキシ欠乏構造要素Ｊ 、Ａｃｔａ Ｃ
ｈｅｍ、 ５ｃａｎｄ１、第２４巻、第３３７９〜３３
９０頁（１９７０）〕を使用して、エーテル化１〜た酸
を生成する化学的酸化により単環フェノール化合物まで
変換させる。この種の酸化は、天然リグニンの場合より
もずっと多い個数（３倍）の単環フェノール化合物を生
成し、ｋＰＰＬは少なくとも２５％のこの種の化合物の
収率をもたらす。典型的には、Ａ Ｐ Ｐ Ｌの化学的
酸化によって生成される単環フェノール化合物の半分以
上は次の群の化合物である：ｐ−ヒドロキシ安息香酸；
４−ヒドロキシ−３−メトキシ安息香酸（バニリン酸）
及び４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ安息香酸（シ
リンガ酸）。
比較的多数（天然リグニンに比較して）の「遊離」（容
易にエチル化しうる）フェノール性ヒドロキシル基の存
在は、天然リグニンに対するストレプトミセスによる改
変がリグニンの表面サブ単位上で特に行なわれ易いこと
を示している。
易にエチル化しうる）フェノール性ヒドロキシル基の存
在は、天然リグニンに対するストレプトミセスによる改
変がリグニンの表面サブ単位上で特に行なわれ易いこと
を示している。
最後に、ＡＰＰＬは約５重量係のエステル化フェノール
化合物を生成しくその内少なくとも半分はｐ−フマル酸
及びフェルラ酸である）、これを緩和なアルカリ性加水
分解によって回収することができる。
化合物を生成しくその内少なくとも半分はｐ−フマル酸
及びフェルラ酸である）、これを緩和なアルカリ性加水
分解によって回収することができる。
以下、本発明によるＡＰ Ｐ Ｌの製造及び特性化に関
する特定例を示す。
する特定例を示す。
Ａ、ＡＰＰＬの製造
例１
ｔ［”Ｌ、り）ウモロコシリグノセルロースヲ２０メツ
シュ篩を通過するように磨砕し、次いで順次ニ熱水、ヘ
ンゼンーエタノール（１−１）、エタノール及び熱水で
抽出した。リグノセルロースを風乾した。
シュ篩を通過するように磨砕し、次いで順次ニ熱水、ヘ
ンゼンーエタノール（１−１）、エタノール及び熱水で
抽出した。リグノセルロースを風乾した。
乾燥）ウモロコシリグノセルロース５ｇを開放のｉＩｌ
試薬瓶（コーニングＮ１１１４６０ ） において１２
１°Ｃで１時間オートクレーブにかけ、次いで綿栓を施
こした瓶を用いてさらに１時間オートクレーブにかけた
。接種培地は、鉱物単位（脱イオン水ｉｌｐす１ｇのＫ
Ｈ２ＰＯ４，４ｇのＮａ ２ＨＰｏ ４．０、２ ｊｉ
のＮａｃｌ 、 ０．２９のＭｇ５０４−７Ｈ２０及び
００５ｇ０ＣＲＣＩ２ ） ５ ｔ Ｏｍｌよりなり、
ｐＨ７，２〜７．４とし、かつ０２％（Ｗ／ｖ）の酵母
抽出物（デフユ）を補充した。この培地をオートクレー
ブにより滅菌しく１２１℃にて１５分間）、冷却し、ス
トレプトミセス・ピリトスポラスＴ７Ａからの胞子を接
種し、そして旋回式振とう器の上に３７℃で２４時間装
いた。次いで、活発に増殖する菌体を含むこの接種物を
リグノセルロースを含有する瓶中へ無菌的に注ぎ入れた
。次いで、瓶をその側部で転動させた。培養容器をベン
チ上で転動させて、リグノセルロースを瓶の壁部に均一
に展延させた。次いで、容器を３７℃にて６週間培養し
た。
試薬瓶（コーニングＮ１１１４６０ ） において１２
１°Ｃで１時間オートクレーブにかけ、次いで綿栓を施
こした瓶を用いてさらに１時間オートクレーブにかけた
。接種培地は、鉱物単位（脱イオン水ｉｌｐす１ｇのＫ
Ｈ２ＰＯ４，４ｇのＮａ ２ＨＰｏ ４．０、２ ｊｉ
のＮａｃｌ 、 ０．２９のＭｇ５０４−７Ｈ２０及び
００５ｇ０ＣＲＣＩ２ ） ５ ｔ Ｏｍｌよりなり、
ｐＨ７，２〜７．４とし、かつ０２％（Ｗ／ｖ）の酵母
抽出物（デフユ）を補充した。この培地をオートクレー
ブにより滅菌しく１２１℃にて１５分間）、冷却し、ス
トレプトミセス・ピリトスポラスＴ７Ａからの胞子を接
種し、そして旋回式振とう器の上に３７℃で２４時間装
いた。次いで、活発に増殖する菌体を含むこの接種物を
リグノセルロースを含有する瓶中へ無菌的に注ぎ入れた
。次いで、瓶をその側部で転動させた。培養容器をベン
チ上で転動させて、リグノセルロースを瓶の壁部に均一
に展延させた。次いで、容器を３７℃にて６週間培養し
た。
滅菌培地を接種した比較をも同時に試験した。
６週間の培養後、培養容器へ５００Ｔｎｌ！の脱イオン
水を加えた（リグノセルロース１ｇ当り１００プ）。次
いで、これらの瓶を水蒸気発生装置中へ１００℃で１時
間入れた。その後、全ての残留固形物を予備秤量した１
紙上へ沢過した。この残留物＋１紙を集め、予備秤量し
たビーカーへ移した。
水を加えた（リグノセルロース１ｇ当り１００プ）。次
いで、これらの瓶を水蒸気発生装置中へ１００℃で１時
間入れた。その後、全ての残留固形物を予備秤量した１
紙上へ沢過した。この残留物＋１紙を集め、予備秤量し
たビーカーへ移した。
この残留物を風乾させそして分析した。
ｒ液を１２ＭのＨＣＩによりｐＨ１〜２まで酸性化させ
た。′酸沈殿性高分子リグニン（ＡＰＰＬ）を１晩沈降
させた。次いで、大部分の液体をデカント除去した。次
いで、ＡＰＰＬを２５０００Ｘｐでの遠心分離によって
回収した。次いで、これを予備秤量したビーカー中に入
れ、８０〜１００℃のオーブン中で風乾した。乾燥させ
かつ室温まで平衡化させた後、ビーカーを再秤量して回
収されたＡＰＰＬＯ量を確認した。残留する酸性化上澄
液をジエチルエーテルで２回及び酢酸エチルで２回抽出
した。これら抽出物をＮａ ＳＯ４で脱水し、次いで予
備秤量したビーカー中ヘデカントした。これらをフード
中で蒸発させた。蒸発の後、ビーカーを再秤量して、回
収された低分子量抽出物の収量を測定した。
た。′酸沈殿性高分子リグニン（ＡＰＰＬ）を１晩沈降
させた。次いで、大部分の液体をデカント除去した。次
いで、ＡＰＰＬを２５０００Ｘｐでの遠心分離によって
回収した。次いで、これを予備秤量したビーカー中に入
れ、８０〜１００℃のオーブン中で風乾した。乾燥させ
かつ室温まで平衡化させた後、ビーカーを再秤量して回
収されたＡＰＰＬＯ量を確認した。残留する酸性化上澄
液をジエチルエーテルで２回及び酢酸エチルで２回抽出
した。これら抽出物をＮａ ＳＯ４で脱水し、次いで予
備秤量したビーカー中ヘデカントした。これらをフード
中で蒸発させた。蒸発の後、ビーカーを再秤量して、回
収された低分子量抽出物の収量を測定した。
例２及び３
例１におけると同様な手順を、ストレグ１ミセス・バジ
ウス２５２（培養温度３７℃）及びストレプトミセス・
セトニイア５Ｖｉ ２（培養温度４５℃）について使用
した。
ウス２５２（培養温度３７℃）及びストレプトミセス・
セトニイア５Ｖｉ ２（培養温度４５℃）について使用
した。
Ｐ’ｌＪ ４
屹゛噸リグノセルロース５ｇをフラスコ中に入れ、オー
トクレーブによって滅菌した。各フラスコにストレプト
ミセス菌株の寒天スラントからの胞子を接種した。接種
のため胞子は無菌の０３％（Ｗ／ｖ ）酵母抽出液５０
． Ｏｍｌ中に＠濁させた。接種したリグノセルロース
を３５〜３７℃で７２〜９６時間静置することにより培
養した。その後、無菌液体培地を各フラスコに加えて最
終容量を１２５０ｍＡ’にした。液体培地は、０３〜０
．６％（Ｗ／Ｖ）の酵母抽出物を補充した無機塩溶液よ
り構成した。次いで、培養物を３７℃で２〜４週間撮と
うしながら培養した。次いで、生成物を上記と同様に収
橡した。
トクレーブによって滅菌した。各フラスコにストレプト
ミセス菌株の寒天スラントからの胞子を接種した。接種
のため胞子は無菌の０３％（Ｗ／ｖ ）酵母抽出液５０
． Ｏｍｌ中に＠濁させた。接種したリグノセルロース
を３５〜３７℃で７２〜９６時間静置することにより培
養した。その後、無菌液体培地を各フラスコに加えて最
終容量を１２５０ｍＡ’にした。液体培地は、０３〜０
．６％（Ｗ／Ｖ）の酵母抽出物を補充した無機塩溶液よ
り構成した。次いで、培養物を３７℃で２〜４週間撮と
うしながら培養した。次いで、生成物を上記と同様に収
橡した。
例５〜８
ストレブトミでス・ビリトスポラスＴ７Ａを、例４に記
載した手順を用いて、シバムギ（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎ
ｒｅｐｅｎｓ ）、アルファルファ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ
５ａｔｉｖａ ）、カエデ（Ａｃｅｒ ｐｌａｔａｎ
ｏｉ−ｄｅｓ ）及びスプルｘ （Ｐｉｃｅａ ｐｕｎ
ｇｅｎｓ ）から増殖させた。
載した手順を用いて、シバムギ（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎ
ｒｅｐｅｎｓ ）、アルファルファ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ
５ａｔｉｖａ ）、カエデ（Ａｃｅｒ ｐｌａｔａｎ
ｏｉ−ｄｅｓ ）及びスプルｘ （Ｐｉｃｅａ ｐｕｎ
ｇｅｎｓ ）から増殖させた。
ストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａを用いて各種
の天然リグニンから得られたＡＰＰＬの収率を下記第１
表に要約する。
の天然リグニンから得られたＡＰＰＬの収率を下記第１
表に要約する。
第１表、 液体培地中でストレプトミセス・ビリトスポ
ラス１゛７Ａを８７５時間培養した後の軟木、硬水、草
及びアルファルファのリグノセルロースから得られるＡ
ＰＰＬ収率。
ラス１゛７Ａを８７５時間培養した後の軟木、硬水、草
及びアルファルファのリグノセルロースから得られるＡ
ＰＰＬ収率。
トウモロコシ １６，３ ２
４．３シバムギ １７．７
２５．８スプルス ５８
６３カエデ ８，６
１０．２簀 トウモｏ ：ｙ シ（Ｚｅａ ｍ
ａｙｓ）； シバムギ（ＡｇｒＯｐＹ−ｒｎｎ ｒｅｐ
ｅｎｓ）； スプ／Ｌ／ス（Ｐｉｃｅａｐｕｎｇｅｎｓ
）；カエデ（Ａｃｅｒ ｐｌａｔａｎｏｉｄｅｓ）；ア
ルファルファ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ５ａｔｉｖａ ）。
４．３シバムギ １７．７
２５．８スプルス ５８
６３カエデ ８，６
１０．２簀 トウモｏ ：ｙ シ（Ｚｅａ ｍ
ａｙｓ）； シバムギ（ＡｇｒＯｐＹ−ｒｎｎ ｒｅｐ
ｅｎｓ）； スプ／Ｌ／ス（Ｐｉｃｅａｐｕｎｇｅｎｓ
）；カエデ（Ａｃｅｒ ｐｌａｔａｎｏｉｄｅｓ）；ア
ルファルファ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ５ａｔｉｖａ ）。
ソソ リグノセルロース０．５．９に基づき、クラソ
ンリクニン含Ｊｇ１２４．ｇ％（）ウモロコシ）、２５
、８ ％ （シバムギ）、３４，５チ（スプルス）、２
９５％（カエデ）及び２５． Ｏ％ Ｃアルファルファ
）。
ンリクニン含Ｊｇ１２４．ｇ％（）ウモロコシ）、２５
、８ ％ （シバムギ）、３４，５チ（スプルス）、２
９５％（カエデ）及び２５． Ｏ％ Ｃアルファルファ
）。
例９〜１２
例１につき上記した手順を、ストレプトミセス・ビリト
スポラス、ストレプトミセス・セトニイ又はストレプト
ミセス・バジウスとは明らかに異なるストレプトミセス
の２種の菌株（ストレプトミセス・菌株２２５及び菌株
５２３）を用いて行ない、トウモロコシの茎及び葉のリ
グノセルロースを分解した。さらに、この手順を２種の
白色腐敗菌〔コリオ／ｌ／、Ｘ・べ）ｖシカラー（Ｃａ
ｒｉｏｌｕｓ ｖｅｒ−ｓｉｃｏＪｏｒ ）及びファネ
ロカエテ・クリソスポリウム（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅ
ｔｅ ｃｈｙｒｓｏｓｐｏｒｉｕｍ））を用いて行ナイ
、トウモロコシの茎及び葉のリグノセルロースを分解し
た。これらの結果を下記第２表に要約する： １３、ＡＰＰＬの特性化 ＡＰＰＬの分子量は、透過クロマトグラフィーにより測
定した。トウモロコシリグノセルローズから生成したＡ
Ｐ Ｐ Ｉ、 １■を０１ＭのＬｉｃＩを含有する０
、 １ ＭのＮａＯＨ１，Ｏｍｌ中に溶解し、その分子
量・分布を次のクロマトグラフ条件を用いてセファデッ
クスＧ−５０カラムで測定した：カラム６７０Ｘ１５＋
ｏ＋、溶剤ｏ１ＭのＬ ｉ ＣＩ を含有する０１Ｍ
のＮａＯＨ、流速０．６４ ｍｌ／ ｍｉｎ、、空間容
積３Ｂｍ１１デキストランブルー２０００（シグマ・ケ
ミカル社、セントルイス、Ｍｏ）の排除により示される
。２ ｍｌのフラクションにつき２８０ ｎｍにおける
吸光度を測定することにより、ＡＰ ＰＩ。
スポラス、ストレプトミセス・セトニイ又はストレプト
ミセス・バジウスとは明らかに異なるストレプトミセス
の２種の菌株（ストレプトミセス・菌株２２５及び菌株
５２３）を用いて行ない、トウモロコシの茎及び葉のリ
グノセルロースを分解した。さらに、この手順を２種の
白色腐敗菌〔コリオ／ｌ／、Ｘ・べ）ｖシカラー（Ｃａ
ｒｉｏｌｕｓ ｖｅｒ−ｓｉｃｏＪｏｒ ）及びファネ
ロカエテ・クリソスポリウム（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅ
ｔｅ ｃｈｙｒｓｏｓｐｏｒｉｕｍ））を用いて行ナイ
、トウモロコシの茎及び葉のリグノセルロースを分解し
た。これらの結果を下記第２表に要約する： １３、ＡＰＰＬの特性化 ＡＰＰＬの分子量は、透過クロマトグラフィーにより測
定した。トウモロコシリグノセルローズから生成したＡ
Ｐ Ｐ Ｉ、 １■を０１ＭのＬｉｃＩを含有する０
、 １ ＭのＮａＯＨ１，Ｏｍｌ中に溶解し、その分子
量・分布を次のクロマトグラフ条件を用いてセファデッ
クスＧ−５０カラムで測定した：カラム６７０Ｘ１５＋
ｏ＋、溶剤ｏ１ＭのＬ ｉ ＣＩ を含有する０１Ｍ
のＮａＯＨ、流速０．６４ ｍｌ／ ｍｉｎ、、空間容
積３Ｂｍ１１デキストランブルー２０００（シグマ・ケ
ミカル社、セントルイス、Ｍｏ）の排除により示される
。２ ｍｌのフラクションにつき２８０ ｎｍにおける
吸光度を測定することにより、ＡＰ ＰＩ。
の溶出を監視した。ＡＰＰＬは、空間容積に対応する鋭
敏なピークとして溶出した（カラムから流出した）。セ
ファデックスＧ−５０による溶出は、少なくとも２００
００ダルトンの平均分子量を示し、これは種々異なる分
子量のポリエチレングリコールをカラムに通過させるこ
とにより実験的に決定した。たとえば木材リグニンから
生成されるような他のＡＰＰＬは、分子量がより低く、
たとえば約１２０００ダルトンである。
敏なピークとして溶出した（カラムから流出した）。セ
ファデックスＧ−５０による溶出は、少なくとも２００
００ダルトンの平均分子量を示し、これは種々異なる分
子量のポリエチレングリコールをカラムに通過させるこ
とにより実験的に決定した。たとえば木材リグニンから
生成されるような他のＡＰＰＬは、分子量がより低く、
たとえば約１２０００ダルトンである。
公知の分析技術は、ＡＰＰＬが天然リグニンから誘導さ
れるが、上記のように著しく改変されることを確認する
。
れるが、上記のように著しく改変されることを確認する
。
リグニン誘導化は、酸性ジオキサン中での化学的分解に
より、たとえば１−ヒドロキシ−３−〔４−ヒドロキシ
−３−メトキシフェニル〕−２−プロパノンのようなフ
ェニルプロパノイド並びにそのクマリル及びシリンギル
同族体を生成することにより確認される。他の分析技術
は、リグノセルロース基質のＣ１４標識及び生成するＣ
１４標識されたＡＰＰＬの分析を含む。
より、たとえば１−ヒドロキシ−３−〔４−ヒドロキシ
−３−メトキシフェニル〕−２−プロパノンのようなフ
ェニルプロパノイド並びにそのクマリル及びシリンギル
同族体を生成することにより確認される。他の分析技術
は、リグノセルロース基質のＣ１４標識及び生成するＣ
１４標識されたＡＰＰＬの分析を含む。
天然リグニンの改変は、たとえばエチル化の後の過マン
ガン酸酸化によりエトキシル化安息香酸を生成させ、こ
れを上記のカーク及びアドラーの方法によりトリメチル
シリル誘導体のガスクロマトグラフィーによって定量化
することにより確認される。過マンガン、酸酸化の結果
（初期調製物における汚染物質につき補正する）を下記
第２表に要約する。表中、比較ＡＰＰＬはストレプトミ
セス菌を用いることなく培養しかつ同一の収穫手順にか
けた比較からの酸沈膜性のものであり、Ｔ７Ａ−ＡＰＰ
Ｌはストレプトミセス・ピリトスポラスで変化させたト
ウモロコシリグニンを示し、トウモロコシＭＷＬ （粉
砕木材リグニン）は天然リグニンを示す。
ガン酸酸化によりエトキシル化安息香酸を生成させ、こ
れを上記のカーク及びアドラーの方法によりトリメチル
シリル誘導体のガスクロマトグラフィーによって定量化
することにより確認される。過マンガン、酸酸化の結果
（初期調製物における汚染物質につき補正する）を下記
第２表に要約する。表中、比較ＡＰＰＬはストレプトミ
セス菌を用いることなく培養しかつ同一の収穫手順にか
けた比較からの酸沈膜性のものであり、Ｔ７Ａ−ＡＰＰ
Ｌはストレプトミセス・ピリトスポラスで変化させたト
ウモロコシリグニンを示し、トウモロコシＭＷＬ （粉
砕木材リグニン）は天然リグニンを示す。
第２表、 比較からのトウモロコシＭＷＬ及びＡＰＰＬ
並びにストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａで分解
したトウモロコシリグノセルロースを過マンガン酸酸化
する際得られる「リグニン誘導された」生成物の収率 比較ｋＰＰＬ ’ ２．０ ３．６
３．４’ｌ’７Ａ−ＡＰＰＩ、 ９．６
６．７ ４．５トウモロコシＭＷＩ、
３．４ ６．４ ２．８矢 収率はエ
ステル化したフェノール化合物から誘導される各化合物
の量を引算した後に、酸化にかけたりゲニンのチとして
計算した。ＶＡはワニリン酸であり、Ｐ ＨＢはｐ−ヒ
ドロキシ安息香酸であり、ＳＡはシリンガ酸である。
並びにストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａで分解
したトウモロコシリグノセルロースを過マンガン酸酸化
する際得られる「リグニン誘導された」生成物の収率 比較ｋＰＰＬ ’ ２．０ ３．６
３．４’ｌ’７Ａ−ＡＰＰＩ、 ９．６
６．７ ４．５トウモロコシＭＷＩ、
３．４ ６．４ ２．８矢 収率はエ
ステル化したフェノール化合物から誘導される各化合物
の量を引算した後に、酸化にかけたりゲニンのチとして
計算した。ＶＡはワニリン酸であり、Ｐ ＨＢはｐ−ヒ
ドロキシ安息香酸であり、ＳＡはシリンガ酸である。
エステル化されたフェノール化合物は、緩和なアルカリ
性加水分解によりＡＰＰＬから選択的に開裂され、次い
でＴＭＳ−９導体のガスクロマトグラフィーにより定量
することができる。結果を第３表に示す。
性加水分解によりＡＰＰＬから選択的に開裂され、次い
でＴＭＳ−９導体のガスクロマトグラフィーにより定量
することができる。結果を第３表に示す。
第３表、 比較からのトウモロコシＭＷＩ、及びＡＰＰ
Ｌ並びにストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａで分
解されたトウモロコシリグノセルロースの緩和なアルカ
リ性加水分解の際、得られるエステル化フェノール化合
物の回収率。
Ｌ並びにストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａで分
解されたトウモロコシリグノセルロースの緩和なアルカ
リ性加水分解の際、得られるエステル化フェノール化合
物の回収率。
比較ＡＰＰＬ Ｏ，３１’ Ｎ、Ｄ、０．０８
Ｎ、Ｄ、 Ｎ、Ｄ、０．３９Ｔ７Ａ−ＡＰＰＬ ５
．１０ ０．７８ ０．０５ Ｎ、Ｄ、 ０．０５５
．９６トウモｏｒシＭＷＬ １，２０ １，０６
０．１３ Ｎ、Ｄ、０．０５ ２．４４薫 収率は、
アルカリ性加水分解にがゆたリグニンのチとして計算し
た（ＣＡはｐ−フマル酸であり、ＦＡは７エルラ酸であ
り、ＳＡはシリンガ酸であり、ＶＡはバニリン酸であり
、ＰＨ１３はｐ、−ヒドロキシ安息香酸である）。収率
は汚染物質につき補正しなかった。
Ｎ、Ｄ、 Ｎ、Ｄ、０．３９Ｔ７Ａ−ＡＰＰＬ ５
．１０ ０．７８ ０．０５ Ｎ、Ｄ、 ０．０５５
．９６トウモｏｒシＭＷＬ １，２０ １，０６
０．１３ Ｎ、Ｄ、０．０５ ２．４４薫 収率は、
アルカリ性加水分解にがゆたリグニンのチとして計算し
た（ＣＡはｐ−フマル酸であり、ＦＡは７エルラ酸であ
り、ＳＡはシリンガ酸であり、ＶＡはバニリン酸であり
、ＰＨ１３はｐ、−ヒドロキシ安息香酸である）。収率
は汚染物質につき補正しなかった。
天然リグニンの上記改変はＮＭＲスペクトロスコピーに
より確認され、これは比較物と比較してカルボキシル基
における分解ＡＰＰＩ、の明らかな増加を示す。ＮＭＲ
スペクトロスコピーを行なうため、ＡＰＰＬを先ず００
１ＭのＮａＱＨ中に溶解し、次いでｐＨ７，０に調整し
、凍結乾燥させた後、これをデユーテロ化溶Ａｌｌ中に
溶解させた（［）Ｍ、ＳＱ若しくはＤ２０）。
より確認され、これは比較物と比較してカルボキシル基
における分解ＡＰＰＩ、の明らかな増加を示す。ＮＭＲ
スペクトロスコピーを行なうため、ＡＰＰＬを先ず００
１ＭのＮａＱＨ中に溶解し、次いでｐＨ７，０に調整し
、凍結乾燥させた後、これをデユーテロ化溶Ａｌｌ中に
溶解させた（［）Ｍ、ＳＱ若しくはＤ２０）。
アラリン−エルラマンにより記載された［Ｓｖ。
Ｋｅｍ、 Ｔｉｄｓｋｒ 、第７０巻、第１４５〜１５
６貞（１９５Ｂ）］イオン化示差スペクトルにより他の
官能基分析を行なった。
６貞（１９５Ｂ）］イオン化示差スペクトルにより他の
官能基分析を行なった。
このスペクトルを用いてＡＰＰＬのフェノール性ヒドロ
キシル含量を測定した。この方法は、ベンジルカルボニ
ルに結合したフェノール性残基が３６４ｎｍの光を吸収
するという前提に基づいている。結合フェノールにつき
２．２×１０７７！１モルの分子吸光係数に基づき、ス
トレプトミセスで分解されたＡ Ｐ Ｐ Ｌの結合フェ
ノール性ヒドロキシル含量は０．７７４ Ｘ １０−２
ｇ／９ ＡＰＰＬ、すなわち約０．８％（ｗ／ｗ）であ
った。比較ＡＰＰＬに対する対応の数値は０．１７ Ｘ
１０”−２ｇ／１１ ＡＰＰＬ、すなわち約０２％（
ｗ／ｗ ）であった。これらの数値は、分解ＡＰＰＬが
そのフェノール性ヒドロキシル含量において比較に比べ
て約４倍増加したことを示す。
キシル含量を測定した。この方法は、ベンジルカルボニ
ルに結合したフェノール性残基が３６４ｎｍの光を吸収
するという前提に基づいている。結合フェノールにつき
２．２×１０７７！１モルの分子吸光係数に基づき、ス
トレプトミセスで分解されたＡ Ｐ Ｐ Ｌの結合フェ
ノール性ヒドロキシル含量は０．７７４ Ｘ １０−２
ｇ／９ ＡＰＰＬ、すなわち約０．８％（ｗ／ｗ）であ
った。比較ＡＰＰＬに対する対応の数値は０．１７ Ｘ
１０”−２ｇ／１１ ＡＰＰＬ、すなわち約０２％（
ｗ／ｗ ）であった。これらの数値は、分解ＡＰＰＬが
そのフェノール性ヒドロキシル含量において比較に比べ
て約４倍増加したことを示す。
ＡＰＰＬの重要な特徴は、中性及び塩基性の水性媒体中
におけるその溶解度並びに媒体を酸性化した際のその不
溶性である。０．０１５ＭのＮａＱＨ中に溶解させかつ
０．０１ ＮのＨＣＩで滴定したＡＰＰＩ、の６００
ｎｍにおける吸光度を追跡することＫより、リグニン誘
導が始まるｐＨを測定することができた。ストレプトミ
セス・ピリトスポラスで分解したｋＰＰＬＫつき、この
数値は約ｐＨ５，０であった。分解ＡＰＰＬは、比較及
び天然リグニンより高い金てのｐＨ値において溶液から
沈殿し始めた。他のＡＰＰＬはより低い酸性ｐＨレベル
、たとえば６０まで沈殿することができる。
におけるその溶解度並びに媒体を酸性化した際のその不
溶性である。０．０１５ＭのＮａＱＨ中に溶解させかつ
０．０１ ＮのＨＣＩで滴定したＡＰＰＩ、の６００
ｎｍにおける吸光度を追跡することＫより、リグニン誘
導が始まるｐＨを測定することができた。ストレプトミ
セス・ピリトスポラスで分解したｋＰＰＬＫつき、この
数値は約ｐＨ５，０であった。分解ＡＰＰＬは、比較及
び天然リグニンより高い金てのｐＨ値において溶液から
沈殿し始めた。他のＡＰＰＬはより低い酸性ｐＨレベル
、たとえば６０まで沈殿することができる。
最後に、天然リグニンに対するＡＰＰＬの元素分析を下
記に示す： 炭素 ６０−６５９６ ５２−５６％水
累 ６−７％ ６−８％酸素
３０−３２％ ３５−４０％ＡＰＰＬはポリ
ウレタン、接着剤、乳化剤に対する供給原料として並び
に種々の化学工程において極めて多くの用途を有する。
記に示す： 炭素 ６０−６５９６ ５２−５６％水
累 ６−７％ ６−８％酸素
３０−３２％ ３５−４０％ＡＰＰＬはポリ
ウレタン、接着剤、乳化剤に対する供給原料として並び
に種々の化学工程において極めて多くの用途を有する。
さらに、ＡＰＰＬは低分子量フェノール化合物の原料と
しても有用である。
しても有用である。
Ａ、 ｐ Ｐ Ｌはたとえば表面活性剤として有用であ
る。標準法〔フィジカル・ケミストリー、第３版、エフ
・ダニニル及ヒアール・ニー・アルパーティ、ジョン・
ウイリイー・アンド・サンズ社、ニューヨーク１９６６
〕を用いて、毛細管における水溶液の表面張力を減少さ
せるＡＰＰＬの能力につき測定を行ない、ここで表面張
力γ−’＆ｈｐｇｒである（ｒ＝毛細管半径、ｐ−液体
密度、ｈ＝毛細管中の液体の円筒高さ、ｇ＝重力の加速
度）。したがって、表面張力はダイン／ｌｙｎとして測
定される。
る。標準法〔フィジカル・ケミストリー、第３版、エフ
・ダニニル及ヒアール・ニー・アルパーティ、ジョン・
ウイリイー・アンド・サンズ社、ニューヨーク１９６６
〕を用いて、毛細管における水溶液の表面張力を減少さ
せるＡＰＰＬの能力につき測定を行ない、ここで表面張
力γ−’＆ｈｐｇｒである（ｒ＝毛細管半径、ｐ−液体
密度、ｈ＝毛細管中の液体の円筒高さ、ｇ＝重力の加速
度）。したがって、表面張力はダイン／ｌｙｎとして測
定される。
純水の表面張力（２５℃）は７１１ダイン／ｃｒｒＬで
あることが判明した。ＮａＱＩ４ の存在下における０
、 Ｏ１１７／ ｍｌのＡＰＰＬを含有する水の表面張
力は６１５ダイン／ｃｍであり、これは純水より約１４
％低い数値である。Ｃａ （ＯＨ）２の存在下における
０、（１１ｇ／ｍ／のＡＰＰＬを含有する水の表面張力
は５６．４ダイン／ｃＩｒＬであり、これは純水より２
１チ低い値である。
あることが判明した。ＮａＱＩ４ の存在下における０
、 Ｏ１１７／ ｍｌのＡＰＰＬを含有する水の表面張
力は６１５ダイン／ｃｍであり、これは純水より約１４
％低い数値である。Ｃａ （ＯＨ）２の存在下における
０、（１１ｇ／ｍ／のＡＰＰＬを含有する水の表面張力
は５６．４ダイン／ｃＩｒＬであり、これは純水より２
１チ低い値である。
Ｃ９規模拡大
上記のＡＰＰＬＰＰ法は、バッチ式発酵（３７±５℃に
て１〜２週間行なう）１回につき１００ｇまでのＡＰＰ
Ｌを生産するため次のように規模拡大することができる
。０．１ｇのＡＰＰＬ／１ｇのりグツセルローδという
推定収量については、１回の発酵はゆ規模の発酵用とし
て設計された２個の固相発酵装置を使用して１ｋｇの出
発物質を必要とする。容器は最小の攪拌（ローラの使用
）を一定のゲスチージョンのため装着したカーボイであ
る。培養は立入り型の３７℃培養器において行なう。発
酵装置の設計は、小規模（５ｇ）で使用された発酵と同
じものである。ストレプトミセスは廃棄リグノセルロー
ス上で増殖するので、深部培養発酵方式の必要はない。
て１〜２週間行なう）１回につき１００ｇまでのＡＰＰ
Ｌを生産するため次のように規模拡大することができる
。０．１ｇのＡＰＰＬ／１ｇのりグツセルローδという
推定収量については、１回の発酵はゆ規模の発酵用とし
て設計された２個の固相発酵装置を使用して１ｋｇの出
発物質を必要とする。容器は最小の攪拌（ローラの使用
）を一定のゲスチージョンのため装着したカーボイであ
る。培養は立入り型の３７℃培養器において行なう。発
酵装置の設計は、小規模（５ｇ）で使用された発酵と同
じものである。ストレプトミセスは廃棄リグノセルロー
ス上で増殖するので、深部培養発酵方式の必要はない。
リグノセルロースはトウモロコシの茎及び葉であり、生
物変換菌株はストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａ
である。
物変換菌株はストレプトミセス・ビリトスポラスＴ７Ａ
である。
１ｋｇ又はそれ以上の量までの培養系の規模拡大は、使
用する特定の円筒槽！容器に対し量適なリグノセルロー
ス＋液体媒地の重量を式：で計算して行ない、式中Ｗは
使用するリグノセルロースの重Ｎ： （ｇ）であり、ｄ
は容器の直径（儂）であり、ｈは容器の病さく ｃｍ
）であり、０．１ ａｍは内部表面につき所望される廃
棄リグノセルロースの最終厚さであり、Ｄはリグノセル
ロースの密度Ｃｍｉ／ｊｊ）である。必要とされる液体
媒地の容量（ｖ）は実験的に決定され式： ％式％（） により最適化され、式中Ｖはリグノセルロース１１当り
に活性菌を含有する液体接種物のｄ数であり、Ｄはリグ
ノセルロースの密度（Ａｌｌ／！りである。
用する特定の円筒槽！容器に対し量適なリグノセルロー
ス＋液体媒地の重量を式：で計算して行ない、式中Ｗは
使用するリグノセルロースの重Ｎ： （ｇ）であり、ｄ
は容器の直径（儂）であり、ｈは容器の病さく ｃｍ
）であり、０．１ ａｍは内部表面につき所望される廃
棄リグノセルロースの最終厚さであり、Ｄはリグノセル
ロースの密度Ｃｍｉ／ｊｊ）である。必要とされる液体
媒地の容量（ｖ）は実験的に決定され式： ％式％（） により最適化され、式中Ｖはリグノセルロース１１当り
に活性菌を含有する液体接種物のｄ数であり、Ｄはリグ
ノセルロースの密度（Ａｌｌ／！りである。
蒸留水（１０ｏ＋＋ｔｌ／ｙリグノセルロース）を所望
の培養時間の後に培養容器へ加え、そして容器を水蒸気
処理する（１０（１℃、１時間）。次いで、混合物を吸
引ｒ過する（ワットマン阻１）。不溶性残渣を風乾し、
秤量してリグノセルロースの重量損失を測定する。ＡＰ
ＰＬを１２ＭのＨＣＩによるＩ）Ｈく２までの酸性化に
より水性抽出物から回収する。得られる沈殿物を遠心分
離により集め、蒸留水で２回洗浄し、次いで風乾又は凍
結乾燥する。
の培養時間の後に培養容器へ加え、そして容器を水蒸気
処理する（１０（１℃、１時間）。次いで、混合物を吸
引ｒ過する（ワットマン阻１）。不溶性残渣を風乾し、
秤量してリグノセルロースの重量損失を測定する。ＡＰ
ＰＬを１２ＭのＨＣＩによるＩ）Ｈく２までの酸性化に
より水性抽出物から回収する。得られる沈殿物を遠心分
離により集め、蒸留水で２回洗浄し、次いで風乾又は凍
結乾燥する。
或いは、ＡＰ ＰＩ、は蒸留水に対する水性抽出物の透
析に続いて凍結乾燥することにより回収される。ＡＰＰ
Ｌのナトリウム塩は、ＡＰＰＬを０１ＮのＮａＯＨ中に
溶解し、この溶液を膜の外部の水のｐＨが７０〜７．５
に安定化するまで蒸留水に対し透析することによって調
製され。次いで、このＡＰ Ｉ） Ｔ、塩を集め、凍結
乾燥する。
析に続いて凍結乾燥することにより回収される。ＡＰＰ
Ｌのナトリウム塩は、ＡＰＰＬを０１ＮのＮａＯＨ中に
溶解し、この溶液を膜の外部の水のｐＨが７０〜７．５
に安定化するまで蒸留水に対し透析することによって調
製され。次いで、このＡＰ Ｉ） Ｔ、塩を集め、凍結
乾燥する。
Ｄ、抗酸化特性を高めるためのＡ ）） Ｐ Ｉ、の改
変１ 背景 芳香族メトキシル基と組合せたフェノール性ヒドロキシ
ル基の濃度が高いため、ＡＰＰＬは抗酸化剤として使用
することができる。芳香環におけるオルト位置及びパラ
位置にあるヒドロキシル基及びメトキシル基は、良好な
フェノール性抗酸化剤の特性を有する。この種の抗酸化
剤の例は５゜４、５− ）リヒドロキシの環置換パター
ンを有する没食子酸プロピル（ＰＧ）である。フェノー
ル性抗酸化剤におけるヒドロキシル基は電子供与体とし
て作用し、一般に自動酸化過程（すなわち周囲環境の結
果として自動的に起る酸化）を開始させる過酸化物を分
解することにより他の化合物を自動酸化から保護する。
変１ 背景 芳香族メトキシル基と組合せたフェノール性ヒドロキシ
ル基の濃度が高いため、ＡＰＰＬは抗酸化剤として使用
することができる。芳香環におけるオルト位置及びパラ
位置にあるヒドロキシル基及びメトキシル基は、良好な
フェノール性抗酸化剤の特性を有する。この種の抗酸化
剤の例は５゜４、５− ）リヒドロキシの環置換パター
ンを有する没食子酸プロピル（ＰＧ）である。フェノー
ル性抗酸化剤におけるヒドロキシル基は電子供与体とし
て作用し、一般に自動酸化過程（すなわち周囲環境の結
果として自動的に起る酸化）を開始させる過酸化物を分
解することにより他の化合物を自動酸化から保護する。
Ａ）’ＰＬは、ストレプトミセスにより触媒されるβ−
エーテル結合の開裂反応と環の脱メチル化との結果、フ
ェノール性ヒドロキシル基が特に豊富である。しかしな
がら、ＡＰＰＬはまだヒドロキシル基に対しオルト位萌
ｆ多数のメトキシル基を有する。この稀の構造はＡＰＰ
Ｌの抗酸化特性を促進する。ＡＰＰＬの抗酸化特性は、
これらを酸化して、たとえば側鎖を開裂させてヒドロキ
シル残基な遊離させることによりさらに改善される。
エーテル結合の開裂反応と環の脱メチル化との結果、フ
ェノール性ヒドロキシル基が特に豊富である。しかしな
がら、ＡＰＰＬはまだヒドロキシル基に対しオルト位萌
ｆ多数のメトキシル基を有する。この稀の構造はＡＰＰ
Ｌの抗酸化特性を促進する。ＡＰＰＬの抗酸化特性は、
これらを酸化して、たとえば側鎖を開裂させてヒドロキ
シル残基な遊離させることによりさらに改善される。
ＡＰＰＬ誘導体は抗酸化剤として特に魅力的である。何
故なら、それらはコスト上効果的に製造さね、かつリグ
ニン断片が発癌性でないことが示されているからである
。たとえば、従来の抗酸化剤におけるよりも高濃度のＡ
ＰＰＬＰＰ化剤が可能である。
故なら、それらはコスト上効果的に製造さね、かつリグ
ニン断片が発癌性でないことが示されているからである
。たとえば、従来の抗酸化剤におけるよりも高濃度のＡ
ＰＰＬＰＰ化剤が可能である。
しかしながら、たとえ成る化合物が良好な抗酸化剤の一
般的特性を示す官能基を有するとしても、この目的に対
するその有用性は他の化合物の自動酸化を促進する他の
官能基を有するならば制約されるであろう。特にリグニ
ン側鎖上に官能基を含む成る稲のストレプトミセス触媒
される酸化反応は、ヒドロキシル基含量を増大させる向
上効果を部分的に相殺する。特に、ストレプトミセスに
よりＡＰＰＬ中に導入された小数の芳香族カルボン酸基
１＆び＠数のα−カルボニル基は電子吸引基として作用
し、抗酸化剤としてのＡＰ ＰＩ、の効果を低下させろ
よう作用する。
般的特性を示す官能基を有するとしても、この目的に対
するその有用性は他の化合物の自動酸化を促進する他の
官能基を有するならば制約されるであろう。特にリグニ
ン側鎖上に官能基を含む成る稲のストレプトミセス触媒
される酸化反応は、ヒドロキシル基含量を増大させる向
上効果を部分的に相殺する。特に、ストレプトミセスに
よりＡＰＰＬ中に導入された小数の芳香族カルボン酸基
１＆び＠数のα−カルボニル基は電子吸引基として作用
し、抗酸化剤としてのＡＰ ＰＩ、の効果を低下させろ
よう作用する。
モデル化合物を使用して、本発明者等は特にα−カルボ
ニル基の抑制効果を確認した。アセトバニロン（５−メ
トキシ−４−ヒドロキシアセトフェノン）はＡＰＰＬＫ
見られると同様な４−ヒドロキシ−３−メトキシ置換パ
ターンを有する芳香族環を含有する。さらに、これはそ
の側鎖の炭素にα−カルボニル基を含有する。この化合
物は極めて貧弱な抗酸化剤である。しかしながら、α−
カルボニルを飽和まで還元して３−メトキシ−４−ヒド
ロキシエチルベンゼンを生成させると、還元した生成物
は不飽和リビドを自動酸化から保護−ｆる能力において
没食子酸プロピルと同等である。
ニル基の抑制効果を確認した。アセトバニロン（５−メ
トキシ−４−ヒドロキシアセトフェノン）はＡＰＰＬＫ
見られると同様な４−ヒドロキシ−３−メトキシ置換パ
ターンを有する芳香族環を含有する。さらに、これはそ
の側鎖の炭素にα−カルボニル基を含有する。この化合
物は極めて貧弱な抗酸化剤である。しかしながら、α−
カルボニルを飽和まで還元して３−メトキシ−４−ヒド
ロキシエチルベンゼンを生成させると、還元した生成物
は不飽和リビドを自動酸化から保護−ｆる能力において
没食子酸プロピルと同等である。
したがって、ウメルフーキシナー法の変法を用いて、本
発明者等は、Ａ Ｐ Ｐ Ｌ中に存在するα−カルボニ
ル基及びその他の抑制基を化学的に還元して、その抗酸
化！）う性を著しく向上させた。
発明者等は、Ａ Ｐ Ｐ Ｌ中に存在するα−カルボニ
ル基及びその他の抑制基を化学的に還元して、その抗酸
化！）う性を著しく向上させた。
ｌ〜たがって、ＡＰＰＬは、酸化及び還元法又はその組
合せＫより著しく改善された抗酸化特性を有する生成物
を生成させるために使用することができる。２つの好適
な方法は次の通りである：第１に、ＡＰＰＬを酸性の酸
化にかけ、次いで還元工程を行なう。第２１ｃ、ＡＰＰ
Ｌを塩基条件下で酸化工程にかける。
合せＫより著しく改善された抗酸化特性を有する生成物
を生成させるために使用することができる。２つの好適
な方法は次の通りである：第１に、ＡＰＰＬを酸性の酸
化にかけ、次いで還元工程を行なう。第２１ｃ、ＡＰＰ
Ｌを塩基条件下で酸化工程にかける。
上記したように、ＡＰＰＬにおける側鎖の酸化分解、環
のヒドロキシル化及び環の脱メチル化並びにそれに続く
生成物の還元は、ＡＰＰＬの抗酸化特性を向上させる。
のヒドロキシル化及び環の脱メチル化並びにそれに続く
生成物の還元は、ＡＰＰＬの抗酸化特性を向上させる。
或いは、Ａ Ｐ Ｐ Ｉ、を還元し次いで酸化すること
もできる。出発物質は上記のよりなＡＰＰＬであるが、
ただしこれはこれらの工程にかける前にＡＰＰＬを乾燥
することは必要でない。
もできる。出発物質は上記のよりなＡＰＰＬであるが、
ただしこれはこれらの工程にかける前にＡＰＰＬを乾燥
することは必要でない。
酸化は次の手順を用いて行なわれる。ＡＰＰＬの１１％
溶液（１００ｍｌ）をフェントン試薬（１０ｍＭの燐酸
緩衝液における２ｍＭのｌ！ ｅ Ｓ０４水溶液＋ＣＬ
２ｍＭのＥ Ｄ Ｔ Ａ ）にｙｓさせそしてＮ２によ
りパージする。この溶液を室温で攪拌しながら、２、
ｏ ｍｅの３０％ト（２０２を加える。ｔを拌を続け、
七１．て溶液を定期的にサンプリングする。各試料のＵ
Ｖ吸収スペクトル（３７５−２２５ｎｍ）を測定して酸
化変化を監視する。所要ならば、酸化されたＡＰＰＬを
希酸での沈殿により収穫する。得られる重合体生成物を
ヒドロキシル化にかけてさら圧フェノール性ヒドロキン
ル基を生成させる。
溶液（１００ｍｌ）をフェントン試薬（１０ｍＭの燐酸
緩衝液における２ｍＭのｌ！ ｅ Ｓ０４水溶液＋ＣＬ
２ｍＭのＥ Ｄ Ｔ Ａ ）にｙｓさせそしてＮ２によ
りパージする。この溶液を室温で攪拌しながら、２、
ｏ ｍｅの３０％ト（２０２を加える。ｔを拌を続け、
七１．て溶液を定期的にサンプリングする。各試料のＵ
Ｖ吸収スペクトル（３７５−２２５ｎｍ）を測定して酸
化変化を監視する。所要ならば、酸化されたＡＰＰＬを
希酸での沈殿により収穫する。得られる重合体生成物を
ヒドロキシル化にかけてさら圧フェノール性ヒドロキン
ル基を生成させる。
還元は、たとえば標準接触水素化又は硼７に素化ナトリ
ウム還元のような種々の方法で行なうことができる。こ
れらの方法は抑制性側鎖＃換基を除去するだけでなく、
同時にたとえばα−カルボニル基のような抑制性側鎖を
ヒドロキシル基に変換することによりＡ Ｐ’Ｐ ：［
、のヒドロキシル含ψを増加させる。
ウム還元のような種々の方法で行なうことができる。こ
れらの方法は抑制性側鎖＃換基を除去するだけでなく、
同時にたとえばα−カルボニル基のような抑制性側鎖を
ヒドロキシル基に変換することによりＡ Ｐ’Ｐ ：［
、のヒドロキシル含ψを増加させる。
たとえばきントン（１９４／））、ジャーナル・アメリ
カン・ケミカル・ソサイエテイーＪＦ１８巻、ｖ、２４
８７−２４８８頁に報告された方法に従がう苛酷なオル
７−キシナー産元のように、ＡＰＰＩ、を隋元してカル
ボニル側鎖を全て飽和まで還元するには、他の多くの方
法がある。同様Ｋ、種々の酸分解及び酸化方法が利用で
き、かつ酸化及び還元の順序を逆転することもできる。
カン・ケミカル・ソサイエテイーＪＦ１８巻、ｖ、２４
８７−２４８８頁に報告された方法に従がう苛酷なオル
７−キシナー産元のように、ＡＰＰＩ、を隋元してカル
ボニル側鎖を全て飽和まで還元するには、他の多くの方
法がある。同様Ｋ、種々の酸分解及び酸化方法が利用で
き、かつ酸化及び還元の順序を逆転することもできる。
さらに、酸化生成物を、還元を行なう前に酸（ＨＣＩ
）で分解することもできる。
）で分解することもできる。
五 塩基性酸化
上記の酸化／還元法の代案として、ＡＰＰＬを塩基性条
件下で酸化にかけて重合体結合を開裂させ、かつ改変リ
グニン重合体と低分子［１１１−２個）構・造とを生成
させることもできる。この種の酸化及び分解は、オーガ
スチン（１９６９）、オーガニック・シンセシス、第１
巻、第２章、１−酸化、技術及び用途、第２２４頁（メ
ルセル・デツカ−社、ニューヨーク・ニューヨーク）に
記載すれたようなバイエル／ビリガー転位を用いて達成
することができる。
件下で酸化にかけて重合体結合を開裂させ、かつ改変リ
グニン重合体と低分子［１１１−２個）構・造とを生成
させることもできる。この種の酸化及び分解は、オーガ
スチン（１９６９）、オーガニック・シンセシス、第１
巻、第２章、１−酸化、技術及び用途、第２２４頁（メ
ルセル・デツカ−社、ニューヨーク・ニューヨーク）に
記載すれたようなバイエル／ビリガー転位を用いて達成
することができる。
次いで、得られる改変Ａ Ｐ Ｐ ：［、を懸濁物から
回収し、これを乾燥して最終生成物を得る。さらに、塩
基性酸化法はエーテル抽出しうる低分子量の化合物をも
生成する。
回収し、これを乾燥して最終生成物を得る。さらに、塩
基性酸化法はエーテル抽出しうる低分子量の化合物をも
生成する。
Ｅ、抗酸化特性の測定に対する重量増加法コール等、（
１９８２）、ジ−ソーナル・アグリカルチャー・７ツド
・ケミストリー、第５０巻、第７１９−７２４頁により
報告された重量増加法を使用して、ＡＰＰＬの抗酸化特
性を測定する。
１９８２）、ジ−ソーナル・アグリカルチャー・７ツド
・ケミストリー、第５０巻、第７１９−７２４頁により
報告された重量増加法を使用して、ＡＰＰＬの抗酸化特
性を測定する。
全てのガラス器具を８ＮのｌＮ０Ｓで洗浄し、次いで脱
イオン水で数回洗浄し、そして最債に幹のないオープン
中で乾燥する。標準の不飽和リピド（サフラワ種子油、
■型、シグマ・ケミカル社、カルサムス・チントリウス
（Ｃａｒｔｈａｎｕ＋ｓ ｔｉｎｔｏｒｉ−ｎｓ）の種
子から得られる）を、使用前に空気を大気パージし、か
りＮ２で置換された中性クロマトグラフ用のアルミナの
カラムに通過させてｆｆ製する。
イオン水で数回洗浄し、そして最債に幹のないオープン
中で乾燥する。標準の不飽和リピド（サフラワ種子油、
■型、シグマ・ケミカル社、カルサムス・チントリウス
（Ｃａｒｔｈａｎｕ＋ｓ ｔｉｎｔｏｒｉ−ｎｓ）の種
子から得られる）を、使用前に空気を大気パージし、か
りＮ２で置換された中性クロマトグラフ用のアルミナの
カラムに通過させてｆｆ製する。
１ ｏ、 ｏ ｍｔの容量フラスコへ１０〃νの標準抗
酸化剤又は問題とする抗酸化剤を加える。次いで、フラ
スコをＮ２で７ラツシユさせ、次いで精製されたサフラ
ワ油で所定容端まで満たす。フラスコの内容、物を１分
間若しくはそれ以上にわたり敞しく混合する。次いで、
１〜２ｇのサフラワ油−抗酸化剤混合物を、予備乾燥さ
せた５０ｍ１のビーカー中へ移す（６反復）。各ビーカ
ーの初期重量を測定しく（１１■精度まで）、次いでビ
ーカーを６０℃の挨のない培養器中に設置する。これら
ビーカーを毎日取出し、デシケータ中で１〜２時間室温
にて平衝化させ、そして再秤量する。
酸化剤又は問題とする抗酸化剤を加える。次いで、フラ
スコをＮ２で７ラツシユさせ、次いで精製されたサフラ
ワ油で所定容端まで満たす。フラスコの内容、物を１分
間若しくはそれ以上にわたり敞しく混合する。次いで、
１〜２ｇのサフラワ油−抗酸化剤混合物を、予備乾燥さ
せた５０ｍ１のビーカー中へ移す（６反復）。各ビーカ
ーの初期重量を測定しく（１１■精度まで）、次いでビ
ーカーを６０℃の挨のない培養器中に設置する。これら
ビーカーを毎日取出し、デシケータ中で１〜２時間室温
にて平衝化させ、そして再秤量する。
６０℃の温度は、自然の速度に比べてリビドの自動酸化
速度を著しく加速する。これは、１回の試験を２週間以
内で完結することを可能圧する。
速度を著しく加速する。これは、１回の試験を２週間以
内で完結することを可能圧する。
リビドの酸化は、０□吸収により相当の重量増加をもた
らす〔スコツト（１９６５）、大気酸化及び抗酸化剤、
エルセビール出版社、ニューヨーク・ニューヨーク〕。
らす〔スコツト（１９６５）、大気酸化及び抗酸化剤、
エルセビール出版社、ニューヨーク・ニューヨーク〕。
反応が始まった後、重量増加は２４時間以内に２０ダ／
試料１ｏｄに達する。抗酸化剤の性質は、これが標準リ
ピドを２０ｍｙ／ｍｌの重量増加から保護する日数によ
って測定する。
試料１ｏｄに達する。抗酸化剤の性質は、これが標準リ
ピドを２０ｍｙ／ｍｌの重量増加から保護する日数によ
って測定する。
抗酸化剤が良好な程、重量増加が抑制される期間は長く
なる。その他の抗酸化剤分析は、リビドによる０２吸収
の直接的測定及び（又は）リピド中の過酸化物蓄積を′
含む。
なる。その他の抗酸化剤分析は、リビドによる０２吸収
の直接的測定及び（又は）リピド中の過酸化物蓄積を′
含む。
重量増加分析を用いた結果を第３表に示す。未仰護のリ
ビドは２日間で自動酸化するのに対し、ｎＨＡ、ＢＨＴ
及びＰＧはリビドを８〜１４日間保ｌ蓮する。実際−ヒ
、天然リグニンは自動酸化過程を加速する。来改変ＡＰ
ＰＬはリピドに対し小さい（’Ｙ護効早しか持たないが
、これは還元されると１ｉ、′Ｉ著な保護を寿える（五
５日間）。先ずＡＰ ＰＩ。
ビドは２日間で自動酸化するのに対し、ｎＨＡ、ＢＨＴ
及びＰＧはリビドを８〜１４日間保ｌ蓮する。実際−ヒ
、天然リグニンは自動酸化過程を加速する。来改変ＡＰ
ＰＬはリピドに対し小さい（’Ｙ護効早しか持たないが
、これは還元されると１ｉ、′Ｉ著な保護を寿える（五
５日間）。先ずＡＰ ＰＩ。
を１元する前に酸（Ｈ（？Ｉ ）で分解させることによ
り、その抗酸化能力を増大させる（４日間の保護まで）
。賢兄する前にＡ Ｐ Ｐ Ｌを酸化させることにより
（１Ｍｒ〜化物により）、保護特性を５日間まで増大さ
せ、これ（ま１３ ＨＡの保４能力に近いものである。
り、その抗酸化能力を増大させる（４日間の保護まで）
。賢兄する前にＡ Ｐ Ｐ Ｌを酸化させることにより
（１Ｍｒ〜化物により）、保護特性を５日間まで増大さ
せ、これ（ま１３ ＨＡの保４能力に近いものである。
最後に、塩基性条件下で酸化することにより、エーテル
抽出しうるフラクションを生成させ、これは４〜４．５
日間の保護を与え、さらに高分子７ラクシヨンを生成さ
せ、これは５〜５．５日間の保護を与える。
抽出しうるフラクションを生成させ、これは４〜４．５
日間の保護を与え、さらに高分子７ラクシヨンを生成さ
せ、これは５〜５．５日間の保護を与える。
飢３表
最終濃度のサフラワ油 保−日数に添加す
るもの なし ２ ′ＢＨＡ
８ＢＨＩ’
１２ＰＧ
１４天然リグ
ニン １．５Ａ Ｐ Ｐ Ｌ
２ 〜２．５還元Ａ Ｐ
Ｐ Ｌ ５．５酸分ＭＡ
ＰＰＬ ２陵分解、次いで還元Ａ
Ｐ Ｐ Ｊ、 ４酸化、次いで還元Ａ
Ｐ Ｐ Ｊ、 ５塩基性酸化
３〜３．５エーテル抽出物
４〜４５これらの結果は、ＡＰＰＬが特に改変され
た場合、たとえば食品（特［ＩＪピド含量を有する食品
）、燃料油、プラスチック、ゴムタイヤなどの抗酸化剤
として有用である生成物をもたらすことを示している。
るもの なし ２ ′ＢＨＡ
８ＢＨＩ’
１２ＰＧ
１４天然リグ
ニン １．５Ａ Ｐ Ｐ Ｌ
２ 〜２．５還元Ａ Ｐ
Ｐ Ｌ ５．５酸分ＭＡ
ＰＰＬ ２陵分解、次いで還元Ａ
Ｐ Ｐ Ｊ、 ４酸化、次いで還元Ａ
Ｐ Ｐ Ｊ、 ５塩基性酸化
３〜３．５エーテル抽出物
４〜４５これらの結果は、ＡＰＰＬが特に改変され
た場合、たとえば食品（特［ＩＪピド含量を有する食品
）、燃料油、プラスチック、ゴムタイヤなどの抗酸化剤
として有用である生成物をもたらすことを示している。
この種のＡＰＰＬ生成物の非発癌性は、現在の抗酸化剤
について使用されるよりも相当に高い濃度の使用を可能
にする。改変ＡＰＰＬの濃度は、リピドの０．１重ｔ％
というＦＤＡ上限に規制される現在使用されている他の
抗酸化剤の濃度に相当する抗酸化能力を与えるレベルに
て使用することができる。
について使用されるよりも相当に高い濃度の使用を可能
にする。改変ＡＰＰＬの濃度は、リピドの０．１重ｔ％
というＦＤＡ上限に規制される現在使用されている他の
抗酸化剤の濃度に相当する抗酸化能力を与えるレベルに
て使用することができる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｉｌ＋ リグニンを分解することが知られた微生物に
よる天然リグニンの分解によって生成されるものと実質
的に同一の水溶性かつ酸沈殿性の高分子分解リグニン（
ＡＰＰＬ）において、前記ＡＰＰＬは少なくとも１２０
００ダルトンの分子量を有し、かつ全重量のチとして前
記天然リグニン中に存在するフェノール性ヒドロキシル
基とカルボン酸基との個数の少なくとも６倍を含み、前
記ＡＰＰＬは前記天然リグニンから精製されることを特
徴とする水溶性かつ酸沈殿性の高分子分解リグニン（Ａ
ＰＰＬ）。 （２） 少なくとも０，７重量％のフェノール性ヒド
ロキシル基を含む特許請求の範囲第１項記載のＡＰＰＬ
０ （３）少なくとも６５重量％の酸素を含む特許請求の範
囲第１項記載のＡＰＰＬ。 （４１ＡＰＰＬが、天然リグニン中に存在する遊離（エ
チル化しうる）ヒドロキシル基の個数の少なくとも３倍
を含む特許請求の範囲第１項記載のＡＰＰＬ０ ＋５）ＡＰＰＬが、化学的酸化に際し、天然リグニンの
化学的酸化により生ずる単環フェノール化合物の個数の
少なくとも３倍を生成する特許請求の範囲第１項記載の
Ａ Ｐ ｐ Ｌｏ （６１ＡＰＰＬの化学的酸化が、ＡＰＰＬの少なくとも
２５重ｆ％の量の単環フェノール化合物を生成する特許
請求の範囲第１項記載のＡＰＰＬ。 （７）単環化合物の少なくとも半分がｐ−ヒドロキシ安
息香酸、４−ヒドロキシ−３−メトキシ安息香酸及び４
−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシ安息香酸よりなる群
から選択される特許請求の範囲第６項記載のＡＰＰ’Ｌ
。 （８１天然リグニンが草類のリグニンである特許請求の
範囲第１項記載のＡＰＰＬ０ （９） リグニンを分解することが知られたストレプ
トミセス属の細菌と共に天然リグニンを培地中で培養し
、この培養した培地を水性溶剤で抽出し、この抽出物を
酸性化させ、生じた沈殿物を回収することを特徴とする
天然リグニンを特許請求の範囲第１項記載のＡＰＰＬに
変換する方法。 ａＯ） ストレプトミセス属の細菌をストレプトミセ
ス・ピリトスポラス、ストレプトミセス・セトニイ及び
ストレプトミセス・バジウスよりなる群から選択する特
許請求の範囲第９項記載の方法。 旧） ストレプトミセス属の細菌がＡｉ”ＣＣＮｎ３９
１１５．３９１１６及び！＋９１１７の特性を有する細
菌系統よりなる群から選択される菌株である特許請求の
範囲第１０項記載の方法。 （１２１微生物がストレプトミセス属の菌種である特許
請求の範囲第１項記載のＡＰＰＬｏ （１３１ストレプトミセス属の菌種がストレプトミセス
・ビリトスポラス、ストレプトミセス・セトニイ及びス
トレプトミセス・バジウスよりなる群から選択される特
許請求の範囲第１１項記載のＡＰＰＬ０ ０４）ストレプトミセス属の菌種がＡＴＣＣＮＣＬ３９
１１５．３９１１６及び３９１１７の特性を有する細菌
系統よりなる群から選択される特許請求の範囲第１３項
記載のＡＰＰＬｏ （＋５１ 高分子リグニンを供給し、この高分子リグ
ニンを酸化してこの高分子リグニンのフェノール性ヒド
ロキシル含量を増加させることを特徴とする、リグニン
の抗酸化能力を高めるための高分子リグニンの改変方法
。 Ｑ６１ 高分子リグニンが特許請求の範囲第１項記載
のＡＰＰＬである特許請求の範囲第１５項記載の方法。 ａｎ 改変方法が、さらに高分子リグニンを還元して
カルボニル基及び芳香族カルボン酸基よりなる群から選
択される抗酸化抑制性置換基を減少させることをさらに
含む特許請求の範囲第１５項記載の方法。 θ印 酸化を塩基性条件下で行なう特許請求の範囲第１
５項記載の方法。 ０９ １Ｊゲニンの解重合を含む特許請求の範囲第１８
項記載の方法。 （２０酸化工程が、高分子リグニンをＦｅＳＯ４及び１
（２０２の作用にかけることからなる特許請求の範囲第
１５項記載の方法。 （２１） 酸化されたＡＰＰＬを食品へ添加すること
からなる食品の保存方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37695182A | 1982-05-11 | 1982-05-11 | |
| US376951 | 1982-05-11 | ||
| US493024 | 1983-05-09 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5948087A true JPS5948087A (ja) | 1984-03-19 |
Family
ID=23487167
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8104583A Pending JPS5948087A (ja) | 1982-05-11 | 1983-05-11 | 生物学的に生産される酸沈澱性高分子リグニン |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5948087A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015520121A (ja) * | 2012-03-30 | 2015-07-16 | エルデーイノバショーン アンパルトセルスカブＲＤＩｎｎｏｖａｔｉｏｎ ＡｐＳ | ベンゼンポリカルボン酸化合物及びその薬剤としての使用 |
-
1983
- 1983-05-11 JP JP8104583A patent/JPS5948087A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015520121A (ja) * | 2012-03-30 | 2015-07-16 | エルデーイノバショーン アンパルトセルスカブＲＤＩｎｎｏｖａｔｉｏｎ ＡｐＳ | ベンゼンポリカルボン酸化合物及びその薬剤としての使用 |
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